溶血性贫血的实验室检查-xsl

1 红细胞寿命缩短、破坏增加的检验 红细胞寿命缩短、 红细胞寿命测定； 红细胞寿命测定； 红细胞形态改变； 红细胞形态改变； 血浆LDH测定 血浆 测定
2 血红蛋白代谢的检验 血浆游离血红蛋白测定(<40mg/L)； ； 血浆游离血红蛋白测定
血管内溶血的指征
血清结合珠蛋白测定 (500-1500mg/L)； ；
溶血原因分析的有关检验
一、红细胞膜缺陷的检验 二、红细胞内酶缺陷的检验 三、珠蛋白合成异常的检验 四、自身免疫性溶血的检验 五、阵发性睡眠性血红蛋白尿症有关检测
一、红细胞膜缺陷的检测
（一）红细胞渗透脆性试验
（erythrocyte osmotic fragility test) 目的：了解红细胞的渗透脆性（即抵抗力） 目的：了解红细胞的渗透脆性（即抵抗力） 原理： 原理： 高渗溶液 等渗溶液 低渗溶液 低渗溶液
肝脏合成的α 糖蛋白， 肝脏合成的 2糖蛋白，运输游离血红蛋白
血浆高铁血红素白蛋白试验； 血浆高铁血红素白蛋白试验；
不敏感， 不敏感，见于严重血管内溶血
（二）显示红细胞代偿增生依据
外周血网织红增多； 外周血网织红增多；
外周血红细胞形态： 外周血红细胞形态：
大小不均，大红细胞、嗜多色细胞及有核红细胞， 大小不均，大红细胞、嗜多色细胞及有核红细胞， Howell-Jolly小体、Cabot环、点彩红细胞等 小体、 小体 环
增生性贫血骨髓象： 增生性贫血骨髓象：
增生明显活跃，红系显著增生，粒系相对减少， 增生明显活跃，红系显著增生，粒系相对减少，巨 核系一般正常
（二）显示红细胞代偿增生依据
外周血红细胞形态： 外周血红细胞形态：
大小不均，大红细胞、嗜多色细胞及有核红细胞， 大小不均，大红细胞、嗜多色细胞及有核红细胞， Howell-Jolly小体、Cabot环、点彩红细胞等 小体、 小体 环
加葡萄糖
0.3 （0.1—0.6） ） 3.0 （0.2—14） ） 2.0 （0.5—4.0） ） 15 （4—48） ）
加ATP
0.2 （0.1-0.8） ） 3.0 （1—6） ） 1.0 （0.4-2.0） ） 1.0 （0.2-2.0） ）
2.0 （0.2—4.0） ） 16.0 （6—30） ） 3.0 （1—6） ） 13.0 （8—44） ）
Howell-Jolly小体 小体
Cabot环 环
特 点
1.遗传性溶血性贫血常有贫血、黄疸、 1.遗传性溶血性贫血常有贫血、黄疸、脾肿大的家族史
2.某些溶贫呈一定的地域性分布 2.某些溶贫呈一定的地域性分布 3.化学因素所致常和患者所从事的职业有关 3.化学因素所致常和患者所从事的职业有关 4.多种药物都可致溶贫 4.多种药物都可致溶贫 5.长期反复贫血和黄疸见于遗传性溶贫， 5.长期反复贫血和黄疸见于遗传性溶贫，自身免疫性溶血 长期反复贫血和黄疸见于遗传性溶贫 性贫血亦常表现为时重时轻 6.恶性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病和SLE易并发AIHA， 6.恶性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病和SLE易并发AIHA， 恶性淋巴瘤 SLE易并发AIHA 人工心脏瓣膜置换术后常易致继发性红细胞破碎综合征
参考值：正常人红细胞孵育48h小时后 溶血度<3.5%； 小时后， 参考值：正常人红细胞孵育 小时后，溶血度 ；
加入葡萄糖或ATP后明显纠正，溶血度<1% 后明显纠正，溶血度 加入葡萄糖或 后明显纠正
自身溶血试验及纠正试验结果（溶血%） 自身溶血试验及纠正试验结果（溶血%
加等渗盐水
正常
遗传性球形红细胞增多症
溶血性贫血的 实验室检查
Laboratory diagnosis of hemolytic anemia
南方医科大学第一临床医学院 实验诊断学教研室 熊石龙 shilongxiong@
本章提纲
一、溶血性贫血定义和分类 二、溶血性贫血的确诊试验 三、溶血性贫血原因的实验室检查
非球形细胞性贫血 I型 型 II型 型
I型：G6PD缺乏症； II 型：丙酮酸激酶缺陷症 型 缺乏症； 缺乏症
二、红细胞酶缺陷的检测
葡萄糖6 葡萄糖6磷酸脱氢酶缺乏症
蚕豆病：患者多为儿童，在每年3 蚕豆病：患者多为儿童，在每年3-5月蚕豆成熟季节
发病。起病急，在食新鲜蚕豆几小时至几天突然发作。 发病。起病急，在食新鲜蚕豆几小时至几天突然发作。 表现为急性溶血伴有血红蛋白尿，治疗以输血、 表现为急性溶血伴有血红蛋白尿，治疗以输血、防治 急性肾功能衰竭及肾上腺皮质激素为主。 急性肾功能衰竭及肾上腺皮质红素 胆汁 肝脏 结合胆红素 粪胆原的肠肝循环 粪胆原 肠道 血液 肾脏
结合珠蛋白
清蛋白/血红素蛋白 清蛋白 血红素蛋白 高铁血红蛋白 含铁血黄素尿 Rous 实验 尿胆原
近曲小管上皮细胞 肾阈
血红蛋白尿
检 查
一．溶血性贫血的筛查检测
１．血浆游离血红蛋白测定 参考值 0-40 mg/L 意义： 意义：见于血管內溶血 ２．血清结合珠蛋白检测 参考值 0.5-1.5g/L 意义： 意义：见于血管內溶血及严重的血管外溶血
37 °C孵育 孵育50%溶血 4.65 -5.90 g/L NaCl溶液 孵育 溶血 溶液 临床意义： 临床意义： 用于轻型遗传性球形细胞增多症、 用于轻型遗传性球形细胞增多症、遗传性非球形细胞 溶贫的诊断和鉴别诊断
（三）自身溶血试验（及纠正试验） 自身溶血试验（及纠正试验）
（autohemolysis and correction test)
(一) 高铁血红蛋白还原试验 一
目的：该试验用来了解 活性， 目的：该试验用来了解G-6PD活性，是一种间接的方法。 活性 是一种间接的方法。 红细胞对Glu的代谢有 个途径 的代谢有2个途径 红细胞对 的代谢有 原理： 原理：
正常时亚铁Hb 经亚硝酸盐氧化成高铁 ， 当红细胞内 经亚硝酸盐氧化成高铁Hb， 当红细胞内G6正常时亚铁 PD含量正常时， Hb Fe+++ 可以还原为Fe++(红色 ； G6-PD 含量正常时， 可以还原为 红色)； 含量正常时 红色 缺乏时， 则不能还原为Fe++(褐色 ，通过颜色变化 褐色)， 缺乏时， Hb Fe+++ 则不能还原为 褐色 来间接测知G6-PD含量是否缺乏。 含量是否缺乏。 来间接测知 含量是否缺乏
溶血性贫血的分类
２．根据发生机制： 根据发生机制：
膜 代表疾病 遗传性球形红细胞增多症 遗传性椭圆形红细胞增多症 G6PD缺陷症 PK缺陷症 血红蛋白 珠蛋白生成障碍性贫血 异常血红蛋白病
红细胞 内在缺陷
酶
溶血性贫血的分类
免疫因素
AIHA自体免疫溶血性贫血 AIHA自体免疫溶血性贫血 CAS冷凝集综合症 CAS冷凝集综合症 PCH阵发性冷性血红蛋白尿 PCH阵发性冷性血红蛋白尿 药物诱发的免疫性溶贫 新生儿同种免疫性溶贫
３．血浆高铁血红素清蛋白检测 正常结果： 正常结果：阴性 意义： 意义：阳性见于严重血管內溶血 ４．含铁血黄素尿试验（Rous 含铁血黄素尿试验（
血红蛋白在肾小管上皮细胞代谢为 含铁血黄素， 含铁血黄素，脱落后铁染色法查出
试验） 试验）
正常结果： 正常结果：阴性 意义： 意义：阳性见于慢性血管内溶血 ５．红细胞寿命测定 正常红细胞半衰期为２５～３２天 正常红细胞半衰期为２５～３２天．溶血性 ２５ 贫血時常＜１５天 贫血時常＜１５天．
1、无氧糖酵解(90%) 、无氧糖酵解 2、戊糖旁路途径(5-10%) 、戊糖旁路途径
G6PD
G6P
G6-PA NADP NADPH
高铁Hb还原酶
还原型美兰 氧化型美兰 高铁Hb（ 高铁 （Fe3+）为褐色 ） 氧合HB（ 氧合 （Fe2+）红色 ）
结果： 正常还原率＞ 为异常， 结果：光电比色法 ，正常还原率＞75%，低于 ，低于75%为异常， 为异常
贫血
外周血中单位容积内红 细胞计数、 细胞计数、血红蛋白含量 或红细胞比容（ 或红细胞比容（Hct）低于 ） 正常下限。 正常下限。
症状: 症状 疲乏困倦； 疲乏困倦； 气促；心悸；食欲差， 气促；心悸；食欲差， 腹帐、便秘； 腹帐、便秘； 头晕、眼花，嗜睡， 头晕、眼花，嗜睡， 精力不集中
体征： 体征： 皮肤黏膜苍白； 皮肤黏膜苍白； 黄疸； 黄疸； 肝脾肿大
原理：先天性非球形细胞溶血性贫血病人红细胞内酶缺陷， 原理：先天性非球形细胞溶血性贫血病人红细胞内酶缺陷，
葡萄糖酵解障碍，生成ATP不足，不能维持钠泵，导致溶 不足， 葡萄糖酵解障碍，生成 不足 不能维持钠泵， 血增强。加入葡萄糖或 血增强。加入葡萄糖或ATP，观察溶血能否被纠正。 ，观察溶血能否被纠正。
溶贫的实验室诊断
1.确定是否为溶血性贫血 1.确定是否为溶血性贫血 2.确定主要的溶血部位是血管内还是血管外 2.确定主要的溶血部位是血管内还是血管外 3.查找溶血原因， 3.查找溶血原因，明确诊断 查找溶血原因
珠蛋白 血红素 铁 +卟啉 卟啉 单核巨噬系统 脾脏 血管外溶血 RBC 血管内溶血 血浆游离Hb 血浆游离 肾脏
贫
血
失血性贫血 缺铁性贫血 巨幼细胞性贫血 再生障碍性贫血
溶血性贫血
溶血性贫血的分类
１．根据红细胞破坏的场所： 根据红细胞破坏的场所： 血管内溶血：在血流中被破坏
获得性因素和酶缺陷 血管外溶血：在单核-巨噬系统中被破坏 在单核 巨噬系统中被破坏 膜缺陷、珠蛋白异常、 膜缺陷、珠蛋白异常、 脾功亢进 原位溶血： 在骨髓中被破坏 巨幼细胞贫血、 巨幼细胞贫血、急性白血病
NaCl
0.85%
0.8%
0.7%
0.6%
0.42%
0.35%
结果： 正常人开始溶血0.4２ 结果： 正常人开始溶血 ２～0.4６%，完全 ６ ， 溶血0.28～0.32% （患者与对照相差 患者与对照相差0.04%以 溶血 ～ 以 上即为阳性） 上即为阳性）。