西洋参中总皂苷的提取工艺研究

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西洋参药物制剂的研究进展

西洋参药物制剂的研究进展
文章 编 号 :02—2 0 (0 2 0 —0 2 —0 10 4 6 2 0 )6 0 4 2
西洋参为五加科人参属植物。别名 : 洋参、 花 旗 参 、 洋 人 参 。具 有 补 气 生 血 、 精 养 神 之 功 西 生 效, 为临床抗疲劳、 衰老、 抗 抗癌 的滋补佳品。现 代研究表 明: 其主要活性成分为皂苷类、 多糖类 、 氨基 酸 类 , 中枢 神 经 系统 、 种应 激 反 应 、 疫 对 各 免 系统 、 血管 系统 具 有 广 泛 药 理 作 用 。本 文将 近 心
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西 洋 参 药物 制 剂 的研 究进 展
王艳宏 , 志欣 , 杨 关枫 , 王锐 , 中 申 刘
( 黑龙江中医药大学药学 院, 黑龙江 哈尔滨 104) 500 摘 要: 就近年来我国在 西洋参 药物制剂的提取 工艺、 质量控制 、 定性等方 面的研 究现状作 稳 了简略的综述 , 并对其今后研 究的方向进行 了展望。 目前其现有剂型单一, 制备工艺的科技含
2 质 量控 制研 究
2 1 西洋参制剂中皂苷类成分的定性鉴别 与含 . 1 提 取 工艺 研 究 量测 定 西 洋参 药 物制 剂 的剂 型分 液 体 与 固体 两 种 。 定性 鉴 别主 要采 用 薄层 层 析 法。 以 03 .% 液体剂型主要 为 口服 液。如参律平 口服液 、 京宝 C CN 硅胶 G 15 M —a (0 ℃活 化 4mn 备 用 ) 0 i, 为薄层 口服液、 西洋参 口服液 、 洋参精 口服液、 西 西洋参 板 , 氯仿 一甲醇 一 (5 3 :o 下层 为展开剂 , 水 6 :5 l) 蜂王浆 口服 液、 洋参 保肺 口服 液、 洋参五加 口服 1%硫酸乙醇液为显 色液 , 0 对复方洋参胶囊 中皂 液、 西洋参杞枸 口服液等。其他液体制剂还有西 苷进行了定性鉴别【。此外 , 3 ] 西洋参 口服液 、 J洋 洋 参月 见 草 口服乳 、 洋参 二 醇组皂 苷 注射 液 、 西 洋 参五加 口服液[、 5 洋参保肺丸【、 ] 6 西洋参杞枸 口服 ] 参露、 花旗 酒 等 。 固体 剂 型主 要为 胶囊 剂 , 如参茸 液 【也 是采 用 这种 方 法对西 洋 参制 剂 中皂 苷 进 行 7 强 力 胶囊 、 蛇 瘫 速 康胶 囊 、 珠 洋 参 胶囊 、 七 定 性鉴 别 的 。 参 珍 三 洋参胶囊 、 补肾抗衰胶囊、 洋参胶囊 、 益智胶囊、 舒 含 量测 定 方法 主要 为 薄层 扫描 法 。如 复方 洋 心素胶囊 以及洋参利脑神胶囊等。其他固体制剂 参胶囊[、 3 京宝 口服液【、 ] 8 西洋参精 口服液【、 ] 9 西 ] 有丸剂 , 33脑再生丹、 如 0 雪莲通 脉丸、 洋参保肺 洋参 口服液【的含量测 定。该法简便快 速 , 品 4 样 丸; 冲剂 , 如洋参保肺 冲剂 、 石斛洋参冲剂 ; 片剂 , 用量少 , 测得结果准确 , 但要求薄层层 析板铺制均 如西 洋 参 含 片 、 蝥 抗 癌 片 、 方 洋参 片 ; 他 制 仙 复 其 匀 , 量 喷雾 显 色 , 色后 斑 点 颜 色 稳 定 , 背 景 定 显 无 剂, 如瘫速康脐疗袋 、 西洋参叶袋泡茶等。 干扰。此外 , 有 H L 还 P C法。如西 洋参茶 中人参 对于一些固体制剂 , 为保 留西洋参 的有效成 皂苷 №l R [ 、 与 e 复方 西洋参 胶囊 中人 参皂苷 1 分, 往往将 西洋参 以细粉方式投料 , 直接加到 片 Rbl 1 [ 西洋参 虫草 口服液 中人 参皂苷 R l 中 b【 l 剂、 胶囊 剂 、 剂等 剂 型 中。 丸 西洋参总皂苷 的含量 测定。色谱 柱分 别为 C 而液体制剂 , 需将西洋参中活性成 分最 大限 e— C 、 H pr iB S 流动相分别为乙腈 a s l 度提取 , 还要保证制剂外观澄清 , 提取工艺即成关 SpPk I N 、 ye s D ; 00 %磷酸 溶液 ( 8 8 ) 乙腈 一水 一异丙 醇 . 5 1 :2 、 键 。传统提取方法为水煎法 , 已不被当今生产所 8 : 1) 乙腈 一水 (0 7 ) 0 3 :0 。该 法简便快捷 , 接受 。为 避免 有 效 成 分 在 提 取 过程 中的 损失 , 西 (02 :5 、 重现性好 , 样品无需复杂的提取 、 分离 , 可直接进 洋参一般不 与其他群药共同提取 , 多采用单独提 还有采用 比色法 的。如 应用 大孔 取工艺 。以西洋参皂苷、 多糖类成分为指标 , 采用 样检测 。此外 , 排除糖类等水溶液杂质干扰 , 以分 正交设计法 , 对西洋参在 口服制剂 中的提取工艺 吸附树脂分离 , 光光度法测定了西洋参蜂王浆总皂苷【 、 l 铁皮枫 引 进行 优 化 选 择 , 果 表 明 : 西 洋参 以 7% 乙 醇 结 ① 0 1 引。洋 参胶 囊 ¨ 西 、 回流提取 3 , 次 每次 2 , h溶剂用量是药材量 l 0倍 斗 晶中西 洋参 总皂 苷 的含量 L 洋参 叶袋 泡 茶 [] 1 中人 参 总 皂 苷 的含 量 测 定 也 是 6 为提 取皂 苷 的最 佳条 件 ; 醇 提取 后 的药 渣 与处 ②

人参茎叶总皂苷提取,纯化工艺优化研究

人参茎叶总皂苷提取,纯化工艺优化研究

人参茎叶总皂苷提取,纯化工艺优化研究人参是一种珍贵的中药材,其主要有效成分之一为人参皂苷。

在人参中,人参皂苷主要存在于人参的茎叶部分。

人参茎叶总皂苷的提取和纯化工艺是非常重要的研究课题。

人参茎叶总皂苷的提取工艺主要包括以下几个步骤:粉碎、提取、浓缩和干燥。

而在提取和纯化的过程中,需要考虑多种因素,包括溶剂的选择、提取温度、提取时间、提取次数以及分离纯化技术等。

这些因素的选择将直接影响到人参茎叶总皂苷的提取率和纯度,因此对提取和纯化工艺的优化研究尤为重要。

粉碎是提取工艺的第一步。

一般来说,粉碎后的颗粒越小,人参茎叶总皂苷的提取率就越高。

选择合适的粉碎设备和粉碎时间非常重要。

为了保证提取物的质量,还需要注意粉碎温度和粉碎过程中的防潮处理。

提取是人参茎叶总皂苷提取工艺中最为关键的一步。

在进行提取前,需要选择合适的溶剂。

常用的溶剂有乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。

不同的溶剂对人参茎叶总皂苷的提取效果有所差异,因此需要进行实验比较,选择最适合的溶剂。

在提取过程中,提取温度和提取时间也是需要考虑的重要因素。

一般来说,较高的提取温度和较长的提取时间会提高人参茎叶总皂苷的提取率,但是过高的温度和过长的时间又会导致人参皂苷的降解,因此需要在提取过程中进行温度和时间的控制。

提取次数也会影响人参茎叶总皂苷的提取率。

通常情况下,多次提取可以提高提取率,但是次数过多又会增加生产成本。

需要在提取次数和提取率之间进行平衡。

是提取物的浓缩和干燥。

在这一步骤中,通常会使用浓缩设备将提取液浓缩,然后进行干燥得到人参茎叶总皂苷的粉末。

在这一步骤中,需要注意控制温度和湿度,以防止人参茎叶总皂苷的变性和降解。

总的来看,人参茎叶总皂苷的提取和纯化工艺是一个复杂的过程,涉及到多种因素的选择和控制。

在进行工艺优化研究时,需要综合考虑提取率、纯度、产率以及生产成本等因素,以找到最适合的提取工艺。

只有在提取工艺得到优化和改进后,才能更好地发挥人参茎叶总皂苷的药用价值。

提取人参皂苷并且检验以及在过程的一些注意事项

提取人参皂苷并且检验以及在过程的一些注意事项

1.人参皂苷提取人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根,是传统名贵中药,始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。

其栽培者称为“园参”,野生者称为“山参”。

人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能,用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。

人参皂甙和稀HCl在醇液中进行温和酸水解,可得到三种皂甙元,齐墩果酸、人参二醇和人参三醇。

而不能得到原人参二醇和原人参三醇,这是因为在酸水解过程中侧链的20-位碳原子上的羟基(-OH)与该链上的双键(C=C)易闭环,而形成带有三甲基四氢吡喃环的人参二醇和人参三醇。

水解后,除去醇、氯仿萃取物经硅胶柱层析分离即可得到三种单体皂甙元,经重结晶获得纯品,分别与已知皂甙的红外光谱相一致。

2.人参皂甙提取和甙元分离工艺流程①人参皂甙提取工艺:人参茎叶粗粉20g热水提取1小时,粗滤,(棉花)提取液药渣加0.6g是会乳沉淀,并调至PH9-10,放置10分钟,抽滤沉淀物滤液浓硫酸调PH7,放置10分钟。

中性提取液回收后,上大孔树脂柱,先用水洗至无色,再用70%氨性醇洗至绿色。

乙醇洗脱液回收乙醇人参总皂甙(黄白色)a)人参皂甙元的水解和甙元的分离流程人参总皂甙加含5%HCl的50%乙醇液,加热回流2小时沉淀水解液(酸性皂甙元部分)加水稀释,水浴蒸去醇,氯仿萃取3次(10,5,5ml)水层氯仿层干燥,无水NaSO4回收氯仿总皂甙元少量苯溶解,硅胶柱层析,用苯-乙酸乙脂(8:2)洗脱组分Ⅰ组分Ⅱ组分Ⅲ95%乙醇重95%乙醇重丙酮结晶结晶3次结晶3次2次齐墩果酸人参二醇人参三醇mp299-301℃mp245-250℃mp244-246℃1.操作方法人参总皂甙的提取:取人参茎叶粗粉20g,放入烧杯用热水(80℃-90℃)提取1小时,然后用棉花粗滤,在所得滤液中加入0.6g水石灰乳除杂并调PH9-10放置10分钟左右,过滤,再将滤液用浓硫酸(少量)调PH7,放置10分钟左右,回收提取液至少量(5-10ml),再上大孔树脂柱(注:此柱应提前洗好,清洗办法略)先用蒸馏水洗至无色,再用70%的乙醇洗至无色,分别用小瓶接收。

五加科人参属中药皂苷类化合物的分离提取及抗氧化活性研究

五加科人参属中药皂苷类化合物的分离提取及抗氧化活性研究

长春师范学院硕士学位论文五加科人参属中药皂苷类化合物的分离提取及抗氧化活性研究姓名:王晶申请学位级别:硕士专业:分析化学指导教师:刘春明2010-06-03摘要人参、西洋参和三七系五加科人参属药材中的三种重要代表,其主要有效成分均为达玛烷型人参皂苷。

大量研究结果表明:皂苷类化合物具有较强的生物活性,因此,对于人参皂苷的研究和开发具有重要的理论意义和实际应用价值。

(1)分别采用回流、超声和温浸提取法对人参、西洋参和三七中的皂苷类化合物进行了分离提取对比研究,并应用高效液相色谱法(HPLC)对皂苷类化合物进行定量分析,对比研究表明超声提取法快速、安全、简便、成本低且不破坏成分,在此基础上,采用超声提取法对三种药材中的皂苷类化合物进行大量的分离提取,总皂苷粗提物应用高速逆流色谱技术进行分离纯化研究。

(2)本文采用高速逆流色谱技术(HPCPC)和蒸发光检测器(ELSD)的联用技术对皂苷类化合物进行分离纯化,建立了HPCPC-ELSD法分离五加科人参属中药的皂苷类化合物的新方法。

采用乙酸乙酯-正丁醇-水(1:1:2,v/v/v) 为溶剂体系,经一次分离从三七总皂苷粗提物中分离纯化得到三七皂苷R1,人参皂苷Rg1、Re和Rb1;采用乙酸乙酯-正丁醇-水(1:1:2,v/v/v) 为溶剂体系,从西洋参总皂苷粗提物中分离得到了Re、Rb1和Rc;采用乙酸乙酯-正丁醇-水(0.8:1.2:2,v/v/v) 为溶剂体系,从人参总皂苷粗提物中分离得到了人参皂苷Rb1和Rb2两种单体皂苷。

应用HPLC-ELSD技术对分离得到的皂苷类化合物进行分析,通过与已知化合物的保留时间相对比,进行定性分析;根据其峰面积百分比,确定其纯度均在95%以上。

应用电喷雾串联质谱(ESI-MS n)进一步确定化合物的结构。

结果表明,应用HPCPC-ELSD从中草药粗提物中分离无紫外吸收或者紫外末端吸收的活性物质是一种高效可行的分离技术,HPLC-ELSD和MS n为皂苷类化合物纯度检验和鉴定分析提供了较好的分析方法。

西洋参中有效成分及其抗肿瘤关系的研究进展_王炜明

西洋参中有效成分及其抗肿瘤关系的研究进展_王炜明

学术探讨Academic study西洋参中有效成分及其抗肿瘤关系的研究进展王炜明1赵东娇21.吉林省蛟河市卫生防疫站,吉林蛟河132500;2.吉林省蛟河市中医院,吉林蛟河132500【摘要】西洋参中含有多种有效成分,其中最主要活性成分为皂苷类,目前已从西洋参皂苷类成分已分离鉴定出49种,其中达玛烷型皂苷32种(新近发现的人参皂苷F1),齐墩果酸型皂苷3种,奥克梯隆醇型皂苷2种,其它类皂苷成分12种(新近发现的人参皂苷Rg6和Rg8)。

西洋参除传统的生理活性外,多年来研究证明,西洋参中所含人参皂苷在抑制肿瘤细胞生长或转移、诱导肿瘤细胞凋亡和分化、逆转肿瘤多药耐药等生理活性方面具有很高价值和发展前景。

本文对西洋参中所含的有效成分及其在抗肿瘤的研究进展中做简要综述。

【关键词】西洋参;有效成分;抗肿瘤【中图分类号】R284【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2013)10-0043-02西洋参(Panax quinquefolium L.)为五加科人参属植物,其味苦,性凉,主入心、肺、肾经,又名美国人参、花旗参,西洋人参、洋参、广东人参等。

为综合利用西洋参资源,国内外学者从西洋参地上部分(茎、叶)提取出主要活性成份—西洋参茎叶皂苷(Panax quinquefolium sapo-nins from steams and leaves,PQS),并已证明其茎叶部总皂苷的含量明显高于根,而且茎叶部和根部总皂苷中单体皂苷的种类与含量也不相同[1]。

随着西洋参在国内外的研究越来越广泛,人们对西洋参中含有人参皂苷的结构修饰方法和生物活性作用的研究也越来越深入,尤其对人参皂苷在防治肿瘤的应用开发方面显示了良好前景。

本文现对西洋参中有效的成分以及其在抗肿瘤关系的研究进展中做简要综述。

1西洋参中有效成分的研究进展1.1皂苷类成分西洋参皂苷因其结构类型与人参皂苷基本一致,故以下文献中将其均称为人参皂苷。

人参皂苷的提取与分离 论文

人参皂苷的提取与分离 论文

人参皂苷的提取与分离学生姓名专业班级学院摘要首先认识人参和人参皂苷,了解人参皂苷的详细作用和功效,接着研究了人参茎叶总皂苷含量提取方法,用详细的工艺提取人参皂苷,并且用对显色反应和薄层层析对提取物进行鉴定,为以后的人参茎叶的开发利用奠定基础。

关键词:皂苷;人参茎叶;鉴定。

Abstract.The first ginseng and ginseng saponin, understanding the role and efficacy of ginseng saponin in detail, then study the effect of ginseng stem leaf total saponin extraction method, with the detailed process ofextraction of ginseng saponin, and used for color reaction and thin-layer chromatography to extract were identified, for the future of ginseng stem and leaf development lays a foundation.key words: saponin; ginseng stems and leaves; appraisal;目录摘要 (1)Abstract ................................................................................................ 错误!未定义书签。

1绪论 (3)1.1人参概述 .............................................................................. 错误!未定义书签。

HPLC法测定西洋参口服液中人参皂苷Re的含量

HPLC法测定西洋参口服液中人参皂苷Re的含量
表2线性试验结果
序号 浓度(pg/mL)
峰面积
1 11.7247 17698
2 23.4494 35156
3
35.1741 52557
4 58.6235 88126
5 93.7976 140968
6 117.2470 176590
回归方程为:A=1506.3C-176.15
R= 1.00000
结果表明,人参皂昔 Re 在 11.7247 M,g/mL - 117.2470 p. g/mL
III级电磁环境条件下,工作频带内信噪比或信干比完全基 本能够满足系统性能要求,装备基本能够完全发挥其作战效
能。以通信系统为例,通信距离满足指标要求,话音质量达到
3 ~ 4级,数传正确率达到80%o 结束语
随着高技术航电武器装备的发展和运用,当前和未来战场
的电磁环境正变得越来越复杂,对机载电子设备的威胁日益增
2.4线性关系考察 称取约15mg人参皂昔Re对照品,置50ml容量瓶,用甲醇 溶解并稀释至刻度,作为对照品溶液。然后精密量取对照品溶
液不同体积,置适当的容量瓶中,用甲醇稀释制成不同浓度的
对照品溶液,采用上述色谱条件,注入液相色谱仪,分别精密量
取IOjiL,并记录色谱图。纵坐标是峰面积(A)为,横坐标是浓度 (C),进行线性回归,并计算R,下表2为测定结果。
范围内线性关系很好。
2.5精密度试验 取IOjxL线性下浓度为58.6235 口g/mL的人参皂昔Re对 照品溶液注入液相色谱仪,重复进样6次测定,考察色谱图峰面
积,下表3为结果。Biblioteka 表3测定结果(精密度试验)
序号 峰面积
1 88131
2 88234
3 88267

HPLC-PAD法测定西洋参类保健食品中10种皂苷的含量

HPLC-PAD法测定西洋参类保健食品中10种皂苷的含量

HPLC-PAD法测定西洋参类保健食品中10种皂苷的含量吴晓云ꎬ刁飞燕ꎬ李秀慧ꎬ刘春霖ꎬ李启艳(山东省食品药品检验研究院ꎬ山东济南250101)摘要:目的㊀建立同时测定西洋参类保健食品中人参皂苷Rg1㊁Rg2㊁Rg3㊁Rb1㊁Rb2㊁Rb3㊁Rc㊁Rd㊁Re㊁Rf含量的高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-PAD)ꎮ方法㊀采用KromasilC18(4.6mmˑ250mmꎬ5μm)色谱柱ꎻ以乙腈(A)-水(B)为流动相进行梯度洗脱ꎻ流速1.0mL min-1ꎻ检测波长203nmꎻ柱温35ħꎮ结果㊀10种人参皂苷的浓度在其各自线性范围内ꎬ与峰面积呈良好的线性关系ꎬr值均ȡ0.99ꎮ该方法平均回收率为93.0%~101.8%ꎬRSD均小于4.0%(n=6)ꎮ结论㊀本法准确可靠㊁灵敏度高㊁重现性好ꎬ可作为西洋参类保健食品的质量控制方法ꎮ关键词:高效液相色谱-二极管阵列检测法ꎻ保健食品ꎻ西洋参ꎻ人参皂苷中图分类号:R927.2㊀文献标识码:A㊀文章编号:2095-5375(2020)06-0336-005doi:10.13506/j.cnki.jpr.2020.06.006Simultaneousdeterminationof10ginsenosidesinhealthfoodofPanaxQuinquefoliumbyHPLC-PADWUXiaoyunꎬDIAOFeiyanꎬLIXiuhuiꎬLIUChunlinꎬLIQiyan(ShandongInstituteforFoodandDrugControlꎬJinan250101ꎬChina)Abstract:Objective㊀ToestablishanHPLC-PADmethodforthedeterminationof10ginsenosides(ginsenosideRg1ꎬRg2ꎬRg3ꎬRb1ꎬRb2ꎬRb3ꎬRcꎬRdꎬReandRf)inhealthfoodofPanaxquinquefolium.Methods㊀TheanalysiswascarriedoutonananalyticalcolumnKromasilC18(4.6mmˑ250mmꎬ5μm)withgradientelutionbyacetonitrile(A)-water(B)ꎬatthedetectionwavelengthof203nmandaflowrateof1.0mL min-1.Thecolumntemperaturewas35ħ.Results㊀Allcali ̄brationcurvesshowedgoodlinearitywithintheirlinearranges(rȡ0.99).Theaveragerecoverieswerebetween93.0%~101.8%ꎬRSD<4.0%(n=6).Conclution㊀ThismethodwasaccurateꎬhighlysensitiveandreproducibleꎬandcanbeusedtocontrolthequalityofhealthfoodofPanaxQuinquefolium.Keywords:HPLC-PADꎻHealthfoodꎻPanaxQuinquefoliumꎻGinsenoside㊀㊀西洋参为五加科人参属植物ꎬ是名贵的中药材ꎬ人参皂苷是其主要活性成分ꎬ主要有人参皂苷Rg1㊁Rb1㊁Rb2㊁Rc㊁Rd和Re等ꎮ以西洋参为原料的保健食品具有缓解体力疲劳ꎬ增强免疫力㊁抗氧化和抗肿瘤等作用[1]ꎮ目前ꎬ西洋参类保健食品的剂型有硬胶囊㊁软胶囊㊁片剂和口服溶液等ꎬ主要以总皂苷作为标志性成分ꎬ总皂苷的测定主要采用香草醛-高氯酸或硫酸显色后用紫外分光光度法测定[2]ꎬ该方法存在专属性差ꎬ操作复杂和干扰因素多等缺点ꎮ为此ꎬ徐灿辉等[3]改进了西洋参类保健食品中人参皂苷测定方法ꎬ建立了西洋参类保健食品中7种参皂苷含量高效液相色谱(HPLC)测定的方法ꎮ此外ꎬ人参皂苷测定方法还有超高效液相色谱(UP ̄LC)[4]㊁高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS)[5-6]等ꎮ在众多资料中ꎬ主要研究西洋参根茎叶提取物中人参皂苷含量ꎬ但对西洋参类保健食品中10种人参皂苷含量测定的报道较少ꎮ本试验通过参考西洋参药材中皂苷测定的有关文献[7-9]ꎬ建立高效液相色谱法同时测定多种剂型西洋参类保健食品中10种人参皂苷ꎬ为质量标准的提升提供依据ꎮ1㊀试验部分1.1㊀仪器㊀液相色谱仪(Agilent1260高效液相色谱仪ꎬ美国安捷伦公司)ꎬ配二极管阵列检测器㊀作者简介:吴晓云ꎬ女ꎬ主管药师ꎬ研究方向:保健食品化妆品检验ꎬE-mail:wuxiaoyun823@126.com㊀通信作者:李启艳ꎬ女ꎬ博士研究生ꎬ副主任药师ꎬ研究方向:保健食品化妆品检验ꎬTel:0531-81216708ꎬE-mail:152****8118@163.com(PAD)ꎻ电子天平(MettlerToledoMSꎬ梅特勒-托利多)ꎻ数控超声波清洗器(KQ-500DE型ꎬ昆山市超声仪器有限公司)ꎻ恒温水浴锅(北京永光明)ꎮ1.2㊀试药与供试品㊀乙腈(色谱纯ꎬHoneywell)ꎻ甲醇(色谱纯ꎬHoneywell)ꎻ超纯水ꎻ正丁醇(分析纯ꎬ国药集团)ꎻ氨水(分析纯ꎬ国药集团)ꎮ标准品:人参皂苷Rb1㊁Rb2㊁Rb3㊁Rg1㊁Rg3㊁Rd㊁Re由中国食品药品检定研究院提供ꎬ含量分别为95.9%㊁93.8%㊁97.0%㊁96.3%㊁100%㊁94.4%㊁97.4%ꎬ人参皂苷Rg2㊁Rc㊁Rf由上海甄准生物科技有限公司提供ꎬ含量分别为98.02%㊁99.11%㊁99.62%ꎮ供试品均由市场购得ꎬ名称与剂型见表1ꎮ表1㊀12种供试品的名称和剂型名称剂型S01康富来牌西洋参口服液口服溶液S02金日牌西洋参口服液口服溶液S03新光牌西洋参口服液口服溶液S04日圣牌西洋参氨基酸口服液口服溶液S05无限能牌西洋参胶囊硬胶囊S06雪佳牌西洋参珍珠胶囊硬胶囊S07康富丽牌洋参淫羊藿软胶囊软胶囊S08福来了牌西洋参含片片剂S09喜之源牌西洋参含片片剂S10金日牌西洋参含片片剂S11康富来牌洋参含片片剂S12百合康牌螺旋藻洋参片片剂2 方法与结果2.1㊀色谱条件㊀色谱柱:KromasilC18(4.6mmˑ250mmꎬ5μm)ꎻ流动相:乙腈(A)-水(B)ꎬ梯度洗脱(0~40minꎬ17%Aң19%Aꎻ40~60minꎬ19%Aң29%Aꎻ60~75minꎬ29%Aꎻ75~100minꎬ29%Aң40%Aꎻ100~105minꎬ40%Aң17%A)ꎻ流速1.0mL min-1ꎻ检测波长203nmꎻ柱温35ħꎻ进样量:10μLꎮ2.2㊀对照品储备液及对照品混合工作液配制㊀分别精密称定人参皂苷Rg1㊁Rg2㊁Rg3㊁Rb1㊁Rb2㊁Rb3㊁Rc㊁Rd㊁Re㊁Rf对照品适量ꎬ置于25mL量瓶中ꎬ用甲醇溶解并定容ꎬ制成人参皂苷单体浓度分别为2.409㊁2.141㊁0.04712㊁1.947㊁1.758㊁2.138㊁2.250㊁2.062㊁2.077㊁2.008mg mL-1的对照品储备液ꎮ分别取10种人参皂苷对照品储备液适量ꎬ加甲醇稀释制成6个浓度的混合对照品工作液ꎮ2.3㊀供试品溶液的制备2.3.1㊀片剂㊁胶囊剂供试品溶液的制备㊀片剂㊁胶囊剂ꎬ取内容物研磨混匀后ꎬ片剂2gꎬ胶囊剂1gꎬ精密称定ꎬ置于100mL锥形瓶中ꎬ精密加水饱和正丁醇50mLꎬ密塞ꎬ放置过夜ꎬ超声处理(功率250Wꎬ频率50kHz)30minꎬ滤过ꎬ弃去初滤液ꎬ精密量取续滤液20mLꎬ用氨试液洗涤两次ꎬ每次20mLꎬ正丁醇提取液蒸干后ꎬ残渣加甲醇适量使溶解ꎬ作为供试品溶液ꎮ2.3.2㊀口服溶液供试品溶液的制备㊀口服溶液ꎬ精密量取8.0mL供试品至分液漏斗中ꎬ用水饱和正丁醇振摇提取3次ꎬ每次10mLꎬ合并正丁醇提取液ꎬ用氨试液洗涤2次ꎬ每次10mLꎬ正丁醇提取液蒸干后ꎬ残渣加甲醇适量使溶解ꎬ作为供试品溶液ꎮ2.4㊀线性关系考察㊀分别取6个浓度的混合对照品工作液ꎬ进样10μLꎬ记录峰面积ꎬ以对照品浓度X(μg mL-1)为横坐标ꎬ对照品的峰面积Y为纵坐标ꎬ绘制标准曲线ꎬ求得回归方程ꎮ得到10种人参皂苷在相应线性范围内均具有良好的线性ꎬ相关系数都在0.99以上ꎬ结果见表2ꎮ表2㊀标准曲线方程的结果成分标准曲线方程相关系数(r)线性范围/μg mL-1Rg1Rg2Rg3Rb1Rb2Rb3RcRdReRfY=1.770X+4.613Y=3.084X+2.021Y=2.381X-0.3584Y=2.377X+29.67Y=2.433X+1.319Y=2.520X+2.210Y=2.806X+3.629Y=2.303X-12.93Y=2.856X+6.063Y=3.982X+2.2570.99990.99990.99990.99980.99990.99990.99990.99980.99990.99994.818~240.94.282~214.11.178~47.123.894~194.73.516~175.84.276~213.84.500~225.04.124~206.24.154~207.74.016~200.82.5㊀试样重复性试验㊀准确量取6份口服溶液供试品(S01)8.0mL至分液漏斗中ꎬ以下按 2.3.2 项下方法操作ꎬ制备供试品溶液ꎮ准确称取6份胶囊剂供试品(S05)1gꎬ6份片剂供试品(S08)2gꎬ置于100mL锥形瓶中ꎬ以下按 2.3.1 项下方法操作ꎬ制备供试品溶液ꎮ分别取3种剂型供试品溶液10μL注入液相色谱仪ꎬ以保留时间定性ꎬ测定峰面积ꎬ计算供试品中10种人参皂苷的含量ꎮ3种剂型供试品中人参皂苷含量RSD(n=6)均小于3%ꎬ结果表明方法重复性良好ꎬ结果见表3ꎮ2.6㊀系统适应性考察㊀取10种人参皂苷混合对照品工作液10μL进样ꎬ计算10种人参皂苷的理论板数ꎮ得到人参皂苷Rg3㊁Rg1㊁Re㊁Rf㊁Rg2㊁Rb1㊁Rc㊁Rb2㊁Rb3㊁Rd的理论板数分别为103427㊁50732㊁104490㊁157284㊁120457㊁82876㊁253440㊁260991㊁410628㊁239554ꎬ分离度分别为5.4㊁1.6㊁32.6㊁15.1㊁2.2㊁4.0㊁4.8㊁1.6㊁8.0ꎮ对于供试品ꎬ虽然存在基质干扰影响分离度ꎬ但是3种剂型供试品中10种人参皂苷均能达到基线分离ꎬ分离度均能达到1.5以上ꎮ表3㊀重复性试验结果剂型口服溶液(S01)胶囊剂(S05)片剂(S08)含量平均值/mg mL-1RSD(%)含量平均值/mg g-1RSD(%)含量平均值/mg g-1RSD(%)Rg30.0202.60.9352.40.2112.3Rg10.0402.04.6731.90.1222.5Re0.0511.719.3252.10.2341.7Rf0.0212.9----Rg20.2960.62.6521.30.2171.4Rb10.4350.648.6260.70.4241.2Rc0.1591.011.8421.11.7461.7Rb20.1201.22.1611.61.4711.5Rb30.0542.63.6542.33.0302.5Rd0.4810.821.5001.30.8291.8㊀注: - 表示未检出或低于定量限2.7㊀精密度试验㊀取10种人参皂苷混合对照品工作液10μL连续进样5次ꎬ以测得的峰面积响应值作评价标准ꎬ得到10种人参皂苷的RSD(n=5)均小于3.0%ꎬ表明在本方法仪器条件下ꎬ仪器精密度良好ꎮ2.8㊀稳定性试验㊀分别取供试品S01㊁S05㊁S08ꎬ按 2.3 项下方法操作ꎬ得到供试品溶液ꎬ室温下放置24hꎬ分别在0㊁2㊁4㊁8㊁12㊁24h取10μL进样ꎬ得到10种人参皂苷峰面积RSD(n=6)都在3.0%以内ꎬ表明供试品溶液在24h内稳定ꎮ2.9㊀回收率试验㊀准确量取6份已知含量的供试品(S01)4.0mL至分液漏斗中ꎬ分别精密加入人参皂苷对照品储备液适量(对照品加入量与供试品中各人参皂苷含量之比为1ʒ1)ꎬ以下按 2.3.2 项下方法操作ꎬ即可得到加标溶液ꎮ准确称取已知含量的供试品(S05)0.5gꎬ供试品(S08)1gꎬ各6份ꎬ分别精密加入人参皂苷对照品储备液适量(对照品加入量与供试品中各人参皂苷含量之比为1ʒ1)ꎬ置于100mL锥形瓶中ꎬ以下按 2.3.1 项下方法操作ꎬ即可得到加标溶液ꎮ取10μL注入液相色谱仪ꎬ以保留时间定性ꎬ测定峰面积ꎬ得到10种人参皂苷的平均加样回收率(n=6)ꎬRSD均小于4.0%ꎬ结果见表4ꎮ表4㊀回收率结果剂型成分口服溶液(S01)胶囊剂(S05)片剂(S08)试样平均含量/mg平均回收率(%)RSD(%)试样平均含量/mg平均回收率(%)RSD(%)试样平均含量/mg平均回收率(%)RSD(%)Rg30.08096.32.10.46893.31.90.21197.92.5Rg10.16098.23.32.33799.12.80.12295.02.6Re0.20496.63.29.666100.33.10.234101.83.6Rf0.08498.81.0-101.21.5-101.33.4Rg21.18494.41.01.32793.71.70.217100.42.1Rb11.74096.41.524.32396.51.40.42595.52.4Rc0.63694.41.35.92398.22.51.75096.22.6Rb20.48096.02.31.08193.92.41.47497.52.8Rb30.21693.02.51.828100.12.63.036101.23.2Rd1.92493.31.510.75498.62.20.83194.02.4㊀注: - 表示未检出或低于定量限2.10㊀检出限与定量限㊀S/N=3时ꎬ得到检出限LODꎬ人参皂苷Rg1㊁Rg2㊁Rg3㊁Rb1㊁Rb2㊁Rb3㊁Rc㊁Rd㊁Re㊁Rf检出限分别为0.0024㊁0.0021㊁0.0029㊁0.0019㊁0.0018㊁0.0021㊁0.0022㊁0.0021㊁0.0021㊁0.0020μgꎻS/N=10时ꎬ得到定量限LOQꎬ定量限分别为0.0060㊁0.0054㊁0.0074㊁0.0050㊁0.0044㊁0.0053㊁0.0056㊁0.0052㊁0.0052㊁0.0050μgꎮ2.11㊀供试品的测定㊀取12批供试品ꎬ按照按 2.3 制备供试品溶液ꎬ每批平行处理2份ꎬ按上述色谱条件进行测定ꎬ将峰面积代入 2.4 线性回归方程计算含量ꎬ结果见图1~2及表5ꎮ表5㊀供试品中10种成分含量测定结果含量/mg mL-1或mg g-1编号S01S02S03S04S05S06S07S08S09S10S11S12Rg30.0200.0090.0100.0780.9350.1690.4940.2110.2120.2750.4170.489Rg10.0400.0710.015-4.6730.7671.7220.1220.2090.6740.8930.436Re0.0510.2400.066-19.3251.4184.1270.2340.7093.0853.8091.350Rf0.021--0.019-0.025----0.016-Rg20.2960.0620.147-2.6520.5451.0240.2170.1130.0840.2390.261Rb10.4350.6650.631-48.6261.3540.4070.4240.1026.7778.633-Rc0.1590.1200.083-11.8420.6560.6751.7460.6372.0662.7660.093Rb20.1200.0390.019-2.1610.3611.9871.4710.3820.3390.4870.536Rb30.0540.0950.023-3.6540.3696.7583.0301.5650.5900.8342.229Rd0.4810.2730.238-21.5001.4986.0160.8290.9763.2033.7523.154合计1.681.571.230.10115.377.1623.218.284.9117.0921.858.55㊀注: - 表示未检出或低于定量限㊀1.Rg3(20.0min)ꎻ2.Rg1(45.0min)ꎻ3.Re(45.8min)ꎻ4.Rf(65.9min)ꎻ5.Rg2(77.6min)ꎻ6.Rb1(80.0min)ꎻ7.Rc(83.6min)ꎻ8.Rb2(86.9min)ꎻ9.Rb3(87.8min)ꎻ10.Rd(93.0min)图1㊀10种人参皂苷对照品图谱㊀1.Rg3(20.0min)ꎻ2.Rg1(45.0min)ꎻ3.Re(45.8min)ꎻ4.Rf(65.9min)ꎻ5.Rg2(77.6min)ꎻ6.Rb1(80.0min)ꎻ7.Rc(83.6min)ꎻ8.Rb2(86.9min)ꎻ9.Rb3(87.8min)ꎻ10.Rd(93.0min)图2㊀供试品S01中10种人参皂苷图谱3 讨论3.1㊀前处理考察㊀由于保健食品剂型种类多ꎬ而每种剂型的基质比较复杂ꎬ导致10种人参皂苷更难同时分离ꎮ首先ꎬ通过比较3种不同的提取试剂ꎬ水饱和正丁醇㊁甲醇和乙醇ꎬ最终得到水饱和正丁醇提取效率最高ꎮ其次ꎬ选用水饱和正丁醇分别采用回流提取㊁液-液萃取㊁浸泡放置过夜超声提取和直接超声提取4种提取方式进行比较ꎬ结果表明:对于片剂和胶囊剂ꎬ浸泡过夜超声提取与回流提取得到皂苷含量最高ꎬ又因为前者操作简单ꎬ且提取的多糖等杂质较少ꎬ最终采用浸泡过夜超声提取ꎻ对于口服溶液ꎬ回流提取与液-液萃取都能得到较高总皂苷含量ꎬ优先选取重现性好且操作较简单的处理方法ꎬ因此采用水饱和正丁醇振摇多次萃取ꎮ3.2㊀流动相及梯度的选择㊀本文对甲醇-水ꎬ乙腈-水和乙腈-0.1%磷酸溶液3种不同流动相进行比较ꎬ结果表明ꎬ人参皂苷在低波长范围内检测时ꎬ乙腈比甲醇背景噪音低ꎬ可获得较好的分离效果ꎬ并且乙腈与水混合黏度小ꎬ可以有效降低系统压力ꎬ而加入磷酸对整体分离情况没有明显改善且磷酸盐对色谱柱损耗大ꎬ最终选择乙腈-水作为最佳流动相ꎮ10种人参皂苷中Rg1和ReꎬRb2和Rb3较难分离ꎮ人参皂苷Rg1和Re极性非常相似ꎬ较难分离ꎬ且供试品在人参皂苷Rg1和Re附近有杂质干扰ꎬ最终选择合适梯度ꎬ在45min左右达到基线分离ꎮRb2和Rb3是同分异构体ꎬ并且两者含量很低ꎬ容易包裹在杂质峰中ꎬ本试验在保证峰形和柱效的前提下完成了两种皂苷的基线分离ꎮ故最终采用梯度洗脱使每种皂苷达到较好分离效果ꎮ3.3㊀样品测定结果分析㊀由表5可见ꎬ12批供试品10种皂苷含量之和差异很大ꎬ含量最高的为硬胶囊ꎬ片剂和软胶囊次之ꎬ口服溶液最低ꎮ每批供试品中ꎬ单种人参皂苷占10种皂苷比例各不相同ꎬ经过分析发现ꎬRb1㊁Rc㊁Rd㊁Re4种所占比例最大ꎬ7批供试品含这4种皂苷比例为67.0%~88.5%ꎬ4批供试品的比例为39.0%~53.8%ꎬ1种供试品(S04)比例为0ꎮ对于供试品(S04)ꎬ根据«保健食品检验与评价技术规范»(2003年版)中规定的紫外分光光度法进行总皂苷检测ꎬ得到总皂苷含量为80mg 100mL-1ꎮ本文建立的HPLC-PAD法可对西洋参类保健食品中皂苷成分进行初步鉴定ꎬ最终用紫外分光光度法进行总皂苷检测ꎮ4 结论本文共收集口服溶液㊁片剂和胶囊剂12批西洋参类保健食品ꎬ通过测定其线性范围㊁系统适用性㊁重复性㊁精密度㊁稳定性㊁检出限㊁定量限和回收率试验ꎬ结果令人满意ꎮ试验表明ꎬ在本文供试品制备方法和色谱条件下ꎬ人参皂苷Rg3㊁Rg1㊁Re㊁Rf㊁Rg2㊁Rb1㊁Rc㊁Rb2㊁Rb3㊁Rd能够达到完全分离ꎬ所建立的方法操作简便ꎬ重复性好ꎬ可以用来对以西洋参为原料的保健食品进行质量控制ꎮ参考文献:[1]㊀尚金燕ꎬ李桂荣ꎬ邵明辉ꎬ等.西洋参的药理作用研究进展[J].人参研究ꎬ2016ꎬ28(6):49-51.[2]杜金凤ꎬ宋鉴达ꎬ朱传翔ꎬ等.比色法测定人参保健饮料中人参总皂苷含量[J].现代食品ꎬ2017ꎬ6(11):79-80. 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选文献 报道很 多 ,提取工 艺考察 多采用 水煎 ,温浸 法 ,乙醇 回流 提取法 ,西洋参 中活性 成分 以皂苷类为主 ,而皂苷类成分 均易溶于
法 ,超声法 ,而以乙醇回流提取法 的效率相对较高 ,但其他 因素结论 甲醇 、乙醇等溶剂 ,结合文献报道 ,从安全性 、经济性和生产 可行性
不一 致 ,如加醇量 ,加热 回流时间等 尚需进一步试验研究 。因此本文 角度考虑 ,选择乙醇作为提取溶剂 。结合文献综 述应用 70%乙醇作
我们 设计并开发 出一个适用 于大学实验 物理教育 的数据采集 physics exper iments on free,and damped harmonic oscillation 言编程作为开发语 言 ,在 Android智能手 J Phvs 81 f2013)。472—475.DOI:10.1l19/1.4793438.
2 方 法 和 结 果
色剂为空 白对 照。用紫外分光光度计在 540nm吸收波长 (转下页 )
自己的实验结果是否符合实验要求 。通过这些 信息 ,学生们可 以很 romeo,S. (2015):An embedded system course using JavaME and
容易地检查他们 的结果是好否符合要求 ,更加快速 的发现实验 中存 android.Comput.App1.Eng.Educ..23:294—303.doi:10.1002/cae.
西 洋 参 (Panaxquinquefolius L)的根 ,
原产 于北美 ,我国亦 有栽 培 ,西洋参性
凉 ,味甘苦 ,补肺 阴,清火 ,养 胃生津 ,
含 人 参 皂 苷 Rbl、 Rb2、Rc、Rd、Re、
Rgl、Ro以及 拟人 参 皂 苷 F11(PFI1)
等 ,另 外还含 精氨 酸 、天 冬氨 酸等 18
纯度 大 于 99%);西 洋参 药材 (购 自哈尔 滨瑞 祥 医药有 限 公司 , 配制 的 5%香草醛 一冰醋酸溶 液 0.2ml,高氯酸溶 液 0.8ml,在 60 ̄C 130326)甲醇为色谱纯 ,其余试剂 均为分析纯 ;水为二次蒸馏水 。 水浴上加热显色 15min,冷却 2min,加入冰醋酸 5ml,摇匀 ,以相 同显
科技 论坛
·139·
西洋参中总皂苷 的提取工艺研究
至冬啻 谢海龙 臭 雪 张 爽
(哈 尔滨商业大学药学院,黑龙江 哈 尔滨 150076)
摘 要:目的:优选西洋参中总皂苷的最佳醇提工艺。方法:采用紫外分光光度法,以人参总皂苷含量为指标,采用 (3 )正交试验设
计,考察提取溶媒体积,提取次数,提取溶媒用量对人参总皂苷提取率的影响,优选最佳提 ̄_r-E条件。结果:提取工艺条件:采用 8倍量
WIFI将 自己的实验结果上传到老师的服务器上面。
nle acoustic Doppler efect applied to the study of linear motions.
此应用程 序 已在 多个 Android系统 的设备 上进行过测试 ,如华 Europea n Jour na l of Physics,35 (2014),025006.DOI:10.1088/
用紫外分光光度法测定人参总皂苷的含量 ,以人参总皂苷含量 为指 为提取溶媒 。采用 4)正交设计 ,考察提取时间(A),提取 次数 (B),
标 ,优选西洋参 的最佳提取工艺 。
溶媒体积(c),三个 主要影响因素。每个 因素设定 3个水平 ,因素水
1 仪 器 、材 料 与 试 剂
平 安 排 见 表 1。
公 司 );KQ2200B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有 限公 司);人参 液合并 ,6O℃下 回收乙醇至干 ,用 甲醇定容 至 50ml的容量瓶 中 ,从 皂苷 Re对照品 (成都曼思特生物科技有 限公 司 ,MUST一14032301, 中精密移取 50 l ,置 于带 塞试管 中,低温挥去溶剂 ,在试 管中加新
为 P6,联想 ¥890,台 电 P76s平板 电脑等 ,在运行过程 中没有发现运 0143-0807,35,2,025006.
行 错 误 。
f4]Castro—Pa lacio J.C.,Velazquez—Abad L.,Gimenez M.H.,and
3 结 论
Monsoriu J. A.: Using a mobile phone acceleration sensor in
的 70%乙醇 ,回流提取 2次,每 次 3h,西洋参总皂苷含量为 5.23%。结论 :优选工 艺可较好的提取 西洋参 中的人参 总皂苷。
关键词 :西洋参 ;人参皂苷 ;提取
·
西 洋 参 (RadixPanacis Quinque- folii),别名洋参 花旗参 ,为五加科植物
表 1正交试验因素水单表
在 的问题 。如果实验结果正确 ,学生 可以通过点击 “连接”按钮 ,将 自 21599.
己的设备 连接 到 老师 的计算 机上 ;再通 过点 击 “上传 ”按钮 ,利用 『3]G6mez—Tejedor J.A.,Castro—Pa lacio J.C.,and Monsoriu J.A.:
种氨基酸 。研究表 明 ,西洋参 中主要成
分人参总皂苷具有镇痛 、抗氧化 、抗肿
瘤 、保护心脑血管 、保护神经细胞 、减缓 记忆 衰退 、调节血糖 调节免 疫功能等生物活性l1_]]。西洋参 中人参皂苷的提取工艺方法及条件筛
2.1正 交 设 计 查阅多篇关于西洋参 中人参皂苷提取文献 ,发 现多数为 回流
T6型紫 外可 见分光 光 度计 (北京 普 析通用 仪器 有 限责 任公 司 );R一3型旋 转蒸 发仪 (瑞士 Buchi公 司 );HH一2型 恒温水 浴锅
2.2供试品溶液制备 将西洋参粉碎过 40目筛 ,取 10.Og,按正交试验表进行试验 。药
(荣华仪器 制造有限公司 );MS105型 电子天 平(ME1TrLER TOLEDO 材用相应浓度及倍量 的乙醇 ,加热 回流提取 。提取液冷却后过滤 ,滤
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