实验7-1 质膜透性的测定

实验7-1 质膜透性的测定

【实验目的】

1、掌握用电导率法测定植物质膜透性的原理及方法。

2、根据质膜透性大小判断植物遭受伤害的程度。

【实验原理】

植物细胞质膜具有独特的选择透性，正常情况下，植物细胞与外界环境之间的一切物质交换都必须经过质膜。测定质膜透性最常用的方法是测定细胞外液的电导率变化。当植物处于逆境（高温、低温、干旱、盐渍、病害等）下时，不良环境因素首先作用于质膜，使质膜受到损伤，膜透性增大。将受胁迫的植物组织浸入去离子水中，电解质外渗，水的电导率增大，因此可用电导仪通过测定细胞外液的电导率变化来测定质膜透性的变化。

【实验器材与试剂】

1、实验材料女贞、香樟等植物叶片

2、实验试剂去离子水

3、实验仪器电导仪、电子天平、打孔器、小烧杯、真空干燥器、真空泵、电炉、量筒、纱布等

【实验步骤】

1、选取叶龄相同的叶片，剪下包在湿纱布中。实验时将供试叶片用自来水冲洗干净后，再用去离子水冲洗2-3次，用干净纱布轻轻吸干叶片表面水分，用打孔器打取圆片（注意避开大叶脉）。将剪下的叶圆片混合均匀备用。

2、称取叶圆片3份，每份1g ，放入三个小烧杯中：一份放入-18℃左右的冰箱中作低温处理，一份放入40-50℃的恒温箱中作高温处理，另一份包在湿纱布中室温放置作为对照。分别处理30min。

3、在各烧杯中加入20ml去离子水，浸没叶圆片，然后放入真空干燥箱中，用真空泵抽气10min，抽出细胞间隙的空气，然后缓缓放入空气，水渗入细胞间隙，叶片变成半透明状下沉。

4、将抽过气的烧杯取出，室温放置1h，其间注意多次摇动。

5、用电导仪测定各组的初电导率（S1）。

6、将烧杯再放入100℃沸水浴中处理15min杀死植物组织。取出后冷却至室温，分别测定其终电导率（S2）。同时测定去离子水的电导率作为空白电导率（S0）。

7、根据公式计算相对电导率，以相对电导率的大小表示质膜透性变化的程度。

相对电导率（L）=（S1- S0）/（S2- S0）

由于室温对照也有少量电解质外渗，可通过计算伤害度来表示由于胁迫而产生的外渗。伤害度（%）=（Lt-Lck）/(1-Lck)×100

【注意事项】

1、整个过程中，叶片接触的用具必须绝对洁净，也不要用手直接接触叶片，以免污染。

2、使用电导仪每测完一个样液后，应用蒸馏水清洗电极，再用滤纸擦干，然后进行下一个

样液的测定。

【实验作业】

1、试比较不同处理的植物细胞透性的变化情况，记录结果，并加以解释。

2、在采用电导率法测定质膜透性过程中，哪些因素会影响测定结果？实验中应注意哪些问题？

3、质膜透性变化的大小与抗逆性的强弱有何关系？质膜透性变化的与胁迫程度有何关系？【参考文献】

1.侯福林主编.植物生理学实验教程.科学出版社,北京,2005.

2.张蜀秋主编. 植物生理学实验技术教程.科学出版社,北京,2011.