急性化脓性扁桃体炎卫分证外周血T_省略_Th2类细胞因子的表达及临床意义_刘旺华
酒精性肝硬化患者Th1-Th2型细胞因子的表达水平及临床意义 陈卫红
Th1Th2类细胞因子转换对小鼠心脏移植物存活的影响
。但也有学者对此提
４ － ７ ］ 。鉴 于 此， 笔者采用小鼠腹部异位心 出 异 议［
个／ ｍ Ｌ备 用 。 采 用 台 盼 蓝 溶 液 染 色 计 算 活 细 胞 百 分率。 １ ． ２ ． ３ 观察指标及方法 １ ． ２ ． ３ ． １ 移植心脏平均存活时间 设定 ２ ８ｄ为 观察终点。术后 每 日 触 诊 受 鼠 腹 部， 如供心不再 搏动或仅有细微颤动均视为排斥终点。 １ ． ２ ． ３ ． ２ 移植物标本收集及组织学检查 移植 后 第 ７天 分 别 从 ３组 中 随 机 挑 选 受 体 鼠 各 ５只 ， 断颈处死后取供心和脾组织， 锡箔纸包裹后冻存 于 液 氮 中 备 用 。 其 中 ２只 供 心 ， 于１ ０％ 甲 醛 溶 液 ４ｈ后 ， 石蜡包埋制成切片， 并采用伊红 内固定 ２ 苏木素染色于光学显微镜下观察。 １ ． ２ ． ３ ． ３ 检测各组受鼠供心和脾脏中 Ｔ ｈ １ ／ Ｔ ｈ ２ 类 细 胞 因 子 白 细 胞 介 素 ２（Ｉ Ｌ ２） ，γ 干扰素 Ｉ Ｆ Ｎ ） ， Ｉ Ｌ ４ ， Ｉ Ｌ １ ０的 ｍ Ｒ Ｎ Ａ表 达 水 平 ⑴ Ｒ Ｎ Ａ （ γ 提取。小 鼠 脾 和 心 脏 中 的 总 Ｒ Ｎ Ａ提 取 按 Ｔ ｒ ｉ ｚ ｏ ｌ Ｒ ｅ ａ ｇ ｅ ｎ ｔ 说 明 书 进 行。取 ５ ０ｍ ｇ组 织 ＋１ｍ ＬＴ ｒ ｉ ｚ ｏ ｌ 研磨， ５ ｍ ｉ ｎ后 加 入 ２ ０ ０μ Ｌ氯 仿 ， 剧烈振荡 Ｒ ｅ ａ ｇ ｅ ｎ ｔ １ ５ｓ ， 室 温 沉 淀 ３ｍ ｉ ｎ ， ４℃ １ ０３ ９ ７ｒ ／ ｍ ｉ ｎ离 心 １ ５ ｍ ｉ ｎ ， 取上清液并加 入 ５ ０ ０ Ｌ异 丙 醇 ， 颠 倒 混 匀， μ 室温 沉 淀 ２ ０ ｍ ｉ ｎ ， ４ ℃１ ０３ ９ ７ｒ ／ ｍ ｉ ｎ离 心 １ ０ ｍ ｉ ｎ ， 弃上 ５ ％ 乙 醇 洗 涤 １次 ， ４ ℃ ８２ ２ ０ｒ ／ ｍ ｉ ｎ 离心 清液后用 ７ ５ ｍ ｉ ｎ ， 弃上清液， 加入 ２ ０ Ｌ０ ． １ ％Ｄ Ｅ Ｐ Ｃ水 充 分 溶 μ 解 ，测 定 Ａ ２ ６ ０ ／ Ａ ２ ８ ０值 并 计 算 Ｒ Ｎ Ａ 浓 度。 Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ的 步 骤 。 将 ｍ Ｒ Ｎ Ａ逆 转 录 为 ｃ Ｄ Ｎ Ａ ： 将 ⑵Ｒ 配制 逆 转 录 反 应 体 系 在 ４ ２℃ 温 育 ６ ０ｍ ｉ ｎ ， 进行 ｃ Ｄ Ｎ Ａ合 成 ， 然后于 ９ ４℃ 作 用 １ ０ ｍ ｉ ｎ灭 活 逆 转 录 ｉ ｎ后 ，－２ ０℃ 保 存 。 Ｐ Ｃ Ｒ扩 酶， 迅 速 冰 浴 １～２ｍ 增： 采 用 －２ ０ ℃保存的 ｃ Ｄ Ｎ Ａ作 为 Ｐ Ｃ Ｒ的 模 板 ， 引 物序列和产物大小见表 １ 。ｃ Ｄ Ｎ Ａ ２μ Ｌ ， １ ０×缓 冲 液 ５μ Ｌ ， １ ０ｍ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌｄ Ｎ Ｔ Ｐ１μ Ｌ ， ２ ５ｍ ｍ ｏ ｌ ／ ＬＭ ｇ Ｃ ｌ ２ Ｌ ， 上下游引物各 １ Ｌ ， Ｔ ａ ｑ酶 １ ． ５ Ｌ（ Ｕ／ Ｌ ） 、 ４ μ μ μ μ 加去离子水 补 至 ５ ０μ Ｌ 。将反应管置于 Ｅ ｐ ｐ ｅ ｎ ｄ ｏ ｒ ｆ 热循环仪上， 按 表 ２条 件 进 行 Ｐ Ｃ Ｒ反 应 。 反 应 完 毕 将 产 物 置 于 ４℃ 冰 箱 保 存 。 采 用 ２％ 琼 脂 糖 凝 胶电泳： 取 １μ Ｌ６×Ｌ ｏ ａ ｄ ｉ ｎ ｇＢ ｕ ｆ ｆ ｅ ｒ ， １μ Ｌ荧 光 染 料 （ Ｓ Ｙ Ｂ Ｇ Ｒ Ｅ Ｅ Ｎ）和 ４μ ＬＰ Ｃ Ｒ产 物， 混 匀 后 上 样； 以 ５～ ７ Ｖ／ ｃ ｍ电 泳 ， 在凝胶成像系统上检测并照相。
Th1／Th2型细胞因子与创伤,烧伤
Th1／Th2型细胞因子与创伤,烧伤
于宝军
【期刊名称】《国外医学：创伤与外科基本问题分册》
【年(卷),期】1998(019)004
【摘要】创伤或烧伤后一系列细胞因子的变化是机体免疫功能失常的表现，细胞因子之间的调控对创伤后感染抵抗力的恢复起重要的作用。
【总页数】4页(P205-208)
【作者】于宝军
【作者单位】第二军医大学长海医院烧伤中心
【正文语种】中文
【中图分类】R640.2
【相关文献】
1.解毒中药复方对实验性2型糖尿病大鼠Th1/Th2型细胞因子调控作用的研究[J], 李卫青;陈世伟;杨小梅;廖文生;柯新桥;李常青
2.2型糖尿病伴抑郁症患者外周血Th1／Th2／Th17相关细胞因子水平变化 [J], 李培育;高宏伟;董天崴;毕胜
3.单纯疱疹病毒2型感染者血清Th1/Th2型细胞因子的检测 [J], 王雪楠;刘毅;张勤
4.Th1型细胞因子干扰素γ及Th2型细胞因子白细胞介素10水平在慢性心力衰竭患者接受己酮可可碱干预过程中的变化:随机对照 [J], 万建平;卢永昕;徐玉兰;刘向阳
5.胸部创伤患者早期血清调节性T淋巴细胞及Th1/Th2细胞因子变化与创伤后感染的关系 [J], 李莲英;刘凤娟;丁密;张彬彬;王啸林
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恶性肿瘤患者外周血调节性T细胞及Th1、Th2细胞的检测和临床意义
恶性肿瘤患者外周血调节性T细胞及Th1、Th2细胞的检测和临床意义张瑞萍;徐冰心;王社论;郑成中;董青;翟树森;周学慧;高云阁【摘要】目的:通过检测恶性肿瘤患者外周血中的淋巴细胞亚群、CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg细胞)以及Th1、Th2细胞的数量,了解恶性肿瘤患者的免疫状态.方法:采用流式细胞仪检测90例恶性肿瘤患者(肿瘤组)及60例健康体检者(对照组)外周血中的淋巴细胞亚群、Treg细胞和以及Th1和Th2细胞数量.结果:肿瘤组外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞和NK细胞的数量均显著低于对照组(P＜0.05),而Treg细胞显著高于对照组(P＜0.05).肿瘤组分泌IFN-γ的Th1细胞显著低于对照组(P＜0.05),而分泌IL-4的Th2细胞显著高于对照组(P＜0.05).结论:恶性肿瘤患者Treg细胞数量增多,Th1细胞数量减少,Th2细胞数量增加,这可能是其免疫功能处于抑制状态的重要原因.%Objective:To detect the levels of lymphocyte subsets、CD4+ CD25+ regulatory T cells(Treg cells), Thl and Th2 cells in peripheral blood of patients with malignant cancer, in order to study the immunologic function in those patients. Methods: The levels of lymphocyte subsets, Treg cells, Thl and Th2 cells in the peripheral blood of 90 cancer patients (cancer group) and 60 healthy volunteers(control group) were detected by flow cytometry. Results: Compared with the control group, the proportion of CD3+ T cells, CD4+ T cells and NK cells were significantly lower (P<0. 05), while Treg cells were significantly higher (P<0. 05) in the cancer group. The level of Thl cells which secrete IFN-γ were significantly lower in the cancer group than that in the control group (P<0. 05), while the level of Th2 cells which secrete IL-4 were significantlyhigher than that in the control group (P<0. 05). Conclusions: The immunologic function in patients with malignant cancer is suppressed. Elevated Treg cells and Thl/Th2 shift may play key roles in the suppression.【期刊名称】《中国临床医学》【年(卷),期】2012(019)006【总页数】3页(P602-604)【关键词】恶性肿瘤;淋巴细胞亚群;调节性T细胞;Th1细胞;Th2细胞【作者】张瑞萍;徐冰心;王社论;郑成中;董青;翟树森;周学慧;高云阁【作者单位】解放军第306医院肿瘤科,北京100101;解放军第306医院特种病科,北京 100101;解放军第306医院肿瘤科,北京 100101;解放军第306医院儿科,北京 100101;解放军第306医院肿瘤科,北京 100101;解放军第306医院肿瘤科,北京 100101;解放军第306医院肿瘤科,北京 100101;解放军第306医院肿瘤科,北京 100101【正文语种】中文【中图分类】R730.3肿瘤的发生、发展与机体的免疫状态密切相关。
变应性鼻炎外周血Th1、Th2及Th17细胞功能研究
华中科技大学硕士学位论文变应性鼻炎外周血Th1、Th2及Th17细胞功能研究姓名：***申请学位级别：硕士专业：耳鼻咽喉科学指导教师：***2010-05第一部分变应性鼻炎外周血Th17细胞功能研究研究生：鲁忠元导师：孔维佳教授华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉头颈外科武汉中文摘要目的：探讨常年变应性鼻炎患者外周血中Th17细胞的功能状况。
方法：选取尘螨过敏性常年性变应性鼻炎患者(AR)及健康对照者(HC)各10人。
从外周血分离单个核细胞(PBMCs)，分为离子霉素组（空白组），尘螨组， PMA组:离子霉素组加入离子霉素1ug/ml和莫能霉素2umol/l;尘螨组加入离子霉素1ug/ml和尘螨变应原nDer p1 1ug/ml及莫能霉素2umol /l;PMA组加入PMA 20ng/ml,离子霉素1ug/ml和莫能霉素2umol/l,在37°C，5%CO细胞培养箱培养6h。
用流式细胞技术检测Th17细胞占CD4+T2细胞百分比，分析常年变应性鼻炎患者外周血中Th17细胞的功能。
结果：HC空白组、尘螨组和PMA组Th17细胞百分比均低于对应的AR(p＜ 0.05)；经PMA刺激后，HC和ARTh17细胞百分比较空白组均增高(p＜ 0.05), AR增幅更大；经nDerp1刺激后，HCTh17百分比较空白组无明显改变，而ARTh17百分比较空白组显著降低 (p＜ 0.05)。
结论：提示Th17细胞可能参与变应性鼻炎的发病机制。
PMA刺激可以引起能分泌IL-17的CD4+T数量增加。
[关键词]：Th17细胞 ；佛波脂； 尘螨变应原；变应性鼻炎第二部分变应性鼻炎外周血记忆性Th1和Th2细胞功能研究研究生：鲁忠元导师：孔维佳教授华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉头颈外科武汉中文摘要目的：探讨常年变应性鼻炎患者外周血中记忆性Th1和Th2细胞的功能状况。
方法：选取尘螨过敏性常年性变应性鼻炎患者（AR）及健康对照者(HC)各10人。
支气管哮喘患者外周血 T 细胞亚群 Th1、Th2及其相关细胞因子水平变化及意义
支气管哮喘患者外周血 T 细胞亚群 Th1、Th2及其相关细胞因子水平变化及意义黄伟强;李惠;袁梅;陈小丹【摘要】目的：观察支气管哮喘患者外周血辅助性T细胞（ Th）亚群Th1、Th2及其相关细胞因子水平，探讨其在支气管哮喘发生、发展中的作用。
方法支气管哮喘患者（支气管哮喘组）80例，均处于急性发作期，治疗后均处于临床缓解期；健康体检者40例作为对照组。
检测两组外周血Th1、Th2、IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ；以支气管哮喘病情为因变量，以IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ为自变量，进行多因素Logistic回归分析。
结果与对照组比较，支气管哮喘组外周血Th1／Th2降低，血清IL-2、IFN-γ降低，血清IL-6、TNF-α升高，P均＜0．01；急性发作期患者较临床缓解期患者上述指标改变更为显著，P均＜0．01。
多因素Logistic回归分析结果显示，血清IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平均是影响支气管哮喘病情的危险因素（P均＜0．05）。
结论 Th1／Th2平衡失调及其介导的细胞因子IL-2、IFN-γ分泌减少，IL-6、TNF-α分泌增加，可能参与了支气管哮喘的发生、发展。
【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2015(000)020【总页数】2页(P40-41)【关键词】支气管哮喘;CD+4 辅助性T细胞;细胞因子;白细胞介素;肿瘤坏死因子α;γ干扰素【作者】黄伟强;李惠;袁梅;陈小丹【作者单位】深圳市坪山新区妇幼保健院，广东深圳518122;深圳市龙岗区人民医院;深圳市龙岗区人民医院;深圳市龙岗区人民医院【正文语种】中文【中图分类】R562.2研究证实，细胞因子IL-6、IL-10、TGF-β表达增加或异常表达与支气管哮喘发生发展关系密切［1～3］。
CD+4辅助性T细胞(Th)亚群包括Th1、Th2、Th3亚群，各亚群功能及分泌的主要细胞因子不同。
其中Th1亚群主要分泌IL-2、IFN-α、IFN-γ等，Th2亚群主要分泌IL-6、TNF-α等［4，5］。
银屑病患者外周血Thl／Th2细胞的检测及其意义
银 屑 病 患者 外 周 血 Ｔ ｈ ｌ ／ Ｔ ｈ ２细胞 的检 测 及 其意 义
韦千里 ，蒙雨明 ２ 肖 文
（ １ ．柳州市工人 医院皮肤性病科 ，广西 柳州 ５ ４ ５ ０ ０ ５ ；２ ． 柳州市工人医院检验科 ，广西 柳州 ５ ４ ５ ０ ０ ５ ）
［ 关 键 词】 银 屑病 ；ｒ ｒ ｜ ｌ １细胞 ；Ｔ ｈ ２细 胞
上 的药物只能对症治疗使银屑病患者近期 临床 治愈 。 远期 多数 患者会 复发 ， 可见研究银 屑病 的发 病机制 ， 寻找新 的有效 的治 疗靶点 ， 是临床工作者们迫切需要解决的难题 。近期 的研 究 认 为银 屑病发病 与机体 的 Ｔ细胞免疫功 能紊乱密切相 关＿ ５ Ｊ ． 因 此本 研究检测 了银屑病患者 外周血 中 Ｔ ｈ ｌ 和Ｔ ｈ ２ Ｔ淋 巴细胞
真菌学杂志 ，２ ０ １ １ ，６ （ ６ ） ：３ ２ ４ — ３ ２ ７ ．
［ ３ ］ Ｚ ｈ ａ ｎ ｇ Ｈ ，Ｒ ａ ｎ Ｙ ，Ｌ ｉ ｕ Ｙ ，ｅ ｔ ａ １ ．Ａ ｒ ｔ ｈ ｒ ｏ ｄ ｅ ｒ ｍ ａ ｖ ａ ｎ ｂ ｒ ｅ ｕ ｓ ｅ ｇ ｈ ｅ ｍｉ ｉ ｉ ｎ —
【 中图分类号１ Ｒ ７ ５ ８ ． ６ ３
［ 文献标识码】 Ｂ
［ 文章编号］ １ ０ ０ ０ — ４ ９ ６ ３ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ６ — ０ ３ ５ ０ — ０ ２
银屑病 （ ｐ ｓ ｏ ｒ ｉ ａ ｓ ｉ ｓ ） 是一种 常见的慢性炎症性 自身免 疫性皮 肤疾病 ， 表皮 角质形成 细胞 过度增殖 和大量炎性细胞浸润是 其
情况方面具有可比性 （ Ｐ＞０ ． ０ ５ ） 。所有受试者均签署知情 同意 书， 符合我院伦理委员会的规定。 １ ． １ ． ２ 主要试剂 和仪器 Ｃ Ｄ ４ 一 Ｆ Ｉ Ｔ Ｃ 、 干扰 素（ Ｉ Ｆ Ｎ ） 一 一 Ｐ Ｅ 、 白介
银屑病患者外周血Th17、Treg细胞检测及临床意义
银屑病患者外周血Th17、Treg细胞检测及临床意义DING Xiao-jie;WANG Ya-qin;LIU Yan【摘要】目的:探讨银屑病患者外周血Th17细胞、Treg细胞检测及临床意义.方法:选取门诊、住院患者及健康体检者共96例.其中,银屑病患者34例,一般慢性皮肤病患者30例,健康对照组32例.采用流式细胞术检测3组患者外周血Th17细胞、Treg细胞、Th17/Treg比值.结果:3组患者Th17细胞、Treg细胞、Th17/Treg比值,差异均有统计学意义(P<0.05).通过两组t检验结果分析发现,银屑病患者Th17细胞、Treg细胞、Th17/Treg比值高于慢性皮肤病患者组及健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05).银屑病组患者血清中IL-10及TGF-β水平较慢性皮肤病组及健康对照组患者均有下降(P<0.05).银屑病组患者血清中IL-17、IL-22水平较慢性皮肤病组及健康对照组患者均有升高(P<0.05).银屑病患者外周血Th17细胞、Treg细胞水平与IL-10、TGF-β水平呈负相关(P<0.05);银屑病患者外周血Th17细胞、Treg细胞水平与IL-17、IL-22呈正相关(P<0.05).结论:银屑病患者外周血中Th17、Treg细胞二者表达水平升高,Th17/Treg比值升高,提示Th17、Treg细胞两者可能参与银屑病的发病,而阻断两者的产生途径可能成为治疗银屑病的新方法.【期刊名称】《川北医学院学报》【年(卷),期】2019(034)003【总页数】3页(P341-343)【关键词】银屑病;Th17细胞;Treg细胞【作者】DING Xiao-jie;WANG Ya-qin;LIU Yan【作者单位】;;【正文语种】中文【中图分类】R758.63银屑病是一种具有特征性皮损的慢性复发性炎症性皮肤病，通常表现为红色丘疹或斑块，上覆厚层银白色鳞屑，刮除银白色鳞屑，可观察到蜡滴现象、薄膜现象、点状出血。
外周血Th2细胞升高是哮喘急性加重的敏感指标
•公众号文章精选•外周血Th2细胞升高是哮喘急性加重的敏感指标张雁林作者单位：100191北京，北京大学第三医院职业病科E-mail:zhangyanlin@根据全球哮喘倡议(global initiative for asthma，GINA)的定义，哮喘急性加重是指哮喘症状逐步加重或肺功能明显下降，是导致医疗费用增加的重要驱动因素。
减少哮喘加重的发生频率和严重程度，是哮喘治疗的主要目标之一，尤其是对于重症哮喘患者而言。
目前还缺乏可靠的与哮喘急性加重相对应的生物标志物，不能准确地对哮喘病情变化进行预测，也是哮喘急性加重经常发生的原因之一。
理想的生物标志物应该能够预测哮喘急性加重、提示治疗效果，并且可以在日常生活中能够很容易地获取标本并进行检测。
哮喘症状和生活质量评分、气道生理学和一些血液、痰和(或)尿液的生物标记物都曾经被采用过，但因缺乏预测价值或检测难度大而阻碍了临床推广［1］。
例如，诱导痰中的嗜酸性粒细胞计数增加可以预测哮喘的急性加重，对哮喘患者定期进行诱导痰检查，并采取相应早期干预，可以有效预防哮喘加重。
然而，诱导痰检查昂贵且耗时，只能在城市综合医院的专门实验室进行；而检测外周血的生物标记物则相对简便容易［2］。
2型炎症反应与哮喘的临床症状相关。
2型炎症的生物标志物在哮喘急性加重治疗期间和治疗后恢复期有不同的时相和程度变化，如外周血嗜酸性粒细胞、血清骨膜蛋白、血清总IgE和呼气一氧化氮(FeNO)水平［3］。
表达于2型T辅助细胞的趋化因子受体同源分子(chemoattractant receptor-homologous molecule expressed on T helper type2cells,CRTh2)是前列腺素D2(PGD2)的受体。
在人类，CD4+T细胞表达的CRTh2被认为是Th2细胞的标志，嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞以及天然2型淋巴细胞(innate lymphoid type2cells，ILC2)也可表达CRTh2。
Th22及其分泌的细胞因子在变应性鼻炎患者外周血中的表达
Th22及其分泌的细胞因子在变应性鼻炎患者外周血中的表达黎爽;陈慧;张慧云;何韶衡;陈冬(指导)【期刊名称】《中国免疫学杂志》【年(卷),期】2022(38)10【摘要】目的:检测变应性鼻炎(AR)患者外周血Th22及其分泌的细胞因子的表达情况并分析其相关机制。
方法:本研究共纳入30例AR患者和30例健康志愿者(HCs),ELISA检测AR患者及HCs外周静脉血中IL-22含量。
流式细胞术检测AR 患者及HCs外周血中Th22比例,将AR患者外周血中的PBMC平均分为3组,分别为空白对照组、同型对照组(加入PEMouse IgG2a,k)和实验刺激组(TNF-α处理组),并应用流式细胞术检测TNF-α对AR患者外周血中Th22的影响。
结果:与HCs相比,AR患者外周血中CD4^(+)T细胞、IL-22表达水平显著提高(P<0.05)且AR患者外周血中IL-22表达水平与CD4^(+)T细胞中Th22呈正相关(r=0.966,P<0.001);HCs外周血IL-22表达水平与CD4^(+)T细胞中Th22比例呈正相关(r=0.981,P<0.001);AR患者外周血实验刺激组CD4^(+)T细胞中Th22比例明显高于空白对照组(P<0.05)。
结论:AR患者外周血中IL-22表达水平升高,CD4^(+)T细胞中Th22比例提高,且Th22的比例与IL-22的表达水平呈正相关,AR患者外周血中,TNF-α可促进Th22的生成。
【总页数】5页(P1249-1253)【作者】黎爽;陈慧;张慧云;何韶衡;陈冬(指导)【作者单位】锦州医科大学附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科;沈阳医学院转化医学研究中心;锦州医科大学转化医学研究院【正文语种】中文【中图分类】R765.21【相关文献】1.T细胞亚群及相关细胞因子在变应性鼻炎患者外周血中的表达及意义2.Th17/Treg细胞及相关细胞因子在变应性鼻炎患者外周血中的表达3.变应性鼻炎患者外周血PBMCs中TIM-3的表达及其与Treg的关系4.变应性鼻炎患者外周血Treg细胞富集群中Tim-3表达上调5.变应性鼻炎患者外周血PBMC中miR-146a和STAT5b的表达及临床意义因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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第30卷第4期2012年4月中华中医药学刊CHINESEARCHIVESOFTRADITIONALCHINESEMEDICINEVol．30No．4Apr．2012
中华中医药学刊急性化脓性扁桃体炎卫分证外周血Th1、Th2类细胞因子的表达及临床意义刘旺华1，周小青1，刘建新1，谢静2，杨静宜2（1．湖南中医药大学，湖南长沙410007；2．湖南中医药大学附属第一医院，湖南长沙410007）摘要：目的：研究急性化脓性扁桃体炎患者卫分证外周血Th1/Th2漂移变化。方法：通过流式细胞检测技术，对急性化脓性扁桃体炎患者卫分证和正常人外周血Th1/Th2细胞进行检测，采用ELISA法测定血清细胞因子IL－4和IFN－γ水平，并比较IFN－γ/IL－4比值。结果：与正常对照组比较，急性化脓性扁桃体炎卫分证组Th1、IFN－γ、Th1/Th2、IFN－γ/IL－4比值显著升高，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论：急性化脓性扁桃体炎卫分证与Th1/Th2漂移存在相关性。关键词：扁桃体炎；T淋巴细胞亚群；Th1/Th2类细胞因子；流式细胞术中图分类号：R743文献标识码：A文章编号：1673－7717（2012）04－0818－03StudyonClinicalSignificanceofExpressionsofTh1/Th2CytokineinWei－phaseSyndromeofAcuteSuppurativeTonsillitisLIUWang-hua1，ZHOUXiao-qing1，LIUJian-xin2，XIEJing3，YANGJing-yi3（1．HunanUniversityofTraditionalChineseMedicine，Changsha410007，Hunan，China；2．TheFirstAffiliatedHospitalofHunanUniversityofTraditionalChineseMedicine，Changsha410007，Hunan，China）Abstract：Objectives：ToprobethedriftingofTh1/Th2inWei－phasesyndromeofAcuteSuppurativeTonsillitis．Methods：FlowcytometrywasusedtodectecttheTh1/Th2cellinperipheralbloodofthepatientsofWei－phasesyndromeandhealthypeople，theexpressionsofIL－4andIFN－γweredetectedbyELISA，andtheratioofIFN－γ/IL－4wasmeasured．Results：Comparedwithnormalgroup，thenumberofTh1andthecontainofIFN－γandtheratiosofTh1/Th2andIFN－γ/IL－4ofWei－phasesyndromegroupincreasedsignificantly（P＜0．05）．Conclusion：ThedriftingofTh1/Th2mayplayanimportantroleduringWei－phasesyndromestageinAcuteSuppurativeTonsillitis．Keywords：tonsillitis；Tlymphocytesubsets；Th1/Th2cytokine；flowcytometry收稿日期：2011－11－10基金项目：湖南省教育厅科研资助项目（08C621，10A093），湖南省高校创新平台开放基金资助项目（101C047）作者简介：刘旺华（1973－），男，湖南桃江人，副教授，博士研究生，研究方向：中医证候本质研究。通讯作者：周小青（1957－），男，湖南浏阳人，教授，博士研究生导师，博士，研究方向：中医诊断计量研究。正常情况下，Th1/Th2细胞因子相互介导，相互抑制，处于平衡状态，当二者之间的比例失衡时往往会引起多种疾病的发生。急性化脓性扁桃体炎是腭扁桃体的急性炎症，乙型溶血性链球菌为本病的主要致病菌，当人体抵抗力降低时，病原体大量繁殖，毒素破坏隐窝上皮，细菌侵入其实质而发生炎症，常伴有一定程度的咽黏膜及咽淋巴组织的急性炎症，多见于年长儿［1］，是一种常见的急性咽部疾病，具有反复发作、易引起局部及全身并发症等特点。若不及时治疗，可因高热而引起抽搐、呕吐及昏睡，也可引起咽旁脓肿等局部并发症及心肌炎、肾炎等全身并发症［2］。临床多种表现形式和转归主要取决于感染机体所产生的免疫的强度及活跃程度。免疫系统针对病原体引发免疫效应，免疫效应细胞的调节主要是通过T淋巴细胞亚群来实现的［3］。目前有关中医卫气营血辨证与Th1/Th2漂移之间内在关系的研究尚较少，为了探讨二者之间的联系，本文观察了急性化脓性扁桃体炎患者卫分证Th1/Th2漂移及其细胞因子IFN－γ、IL－4的表达，为揭示急性化脓性扁桃体炎不同阶段证候本质提供客观化依据。1资料与方法1．1一般资料选择我校附属一医院儿科门诊和住院患者，均符合急
乳蛾及急性扁桃体炎的诊断标准［4－5］：病程≤72h，体温≥
38℃，伴有咽痛；扁桃体肿大≥Ⅰ度，表面有脓点或脓性分
泌物，白细胞计数＞10．0×109/L。所有患者治疗前1个月未系统使用糖皮质激素、免疫抑制剂和抗生素，且无本病以外的免疫性疾病、系统性疾病和感染性疾病。根据病情进行中医卫气营血辨证，卫分证组30例，男818第30卷第4期2012年4月中华中医药学刊CHINESEARCHIVESOFTRADITIONALCHINESEMEDICINEVol．30No．4Apr．2012
中华中医药
学刊
18例，女12例，平均年龄（4．51±1．47）岁，体重（15．86±4．19）kg，扁桃体肿大Ⅰ度18例、Ⅱ度8例、Ⅲ度4例。另外以健康体检儿童30例作为对照组，男16例，女14例，平均年龄（4．46±1．64）岁，体重（15．28±4．83）kg，一般资料差异无显著性（P＞0．05），具有可比性。1．2仪器和试剂主要仪器：CO2培养箱为芬兰Thermo公司生产，EPICSXL型流式细胞仪由美国BeckmanCoulter公司生产。主要试剂：佛波醇乙脂（PMA）、离子霉素（Ionomycin）、布雷菲德菌素A（Brefeldin－A，BFA）、PBS缓冲液等均购自sigma公司，RPMI1640购自北京鼎国生物技术有限公司。荧光抗体CD4－Percp，干扰素－γ－TITC/白介素－4－PE，G2a－FITC/G1－PE，FACS通透液，标准微球Flow－Check，购自BD公司。IFN－γ、IL－4检测试剂盒由博士德生物技术有限公司提供。1．3检测方法1．3．1标本采集清晨空腹采集静脉血9mL，分成两份，一份6mL，分离血清后，置－20℃待测，用于ELISA检测；另一份3mL，肝素抗凝，用于上流式细胞仪。1．3．2IFN－γ、IL－4测定方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），测定前置室温或冷水中复融，4℃3000r/min，离心5min，取上清液测定。在492nm处测定吸光度（A值），所有A值都应减除空白值后再行计算，绘出标准曲线，根据样品A值求出标本中各因子浓度。严格按照试剂盒说明操作。1．3．3Th1和Th2细胞检测方法取抗凝血加入RP-MI－1640以1∶1稀释调节细胞浓度，加入刺激剂（含25ng/mLPMA+1离子霉素+10μg/mLBFA），37℃5%CO2培养箱培养4h。将细胞分为2份，分别为实验管与对照管，每管加100μL激活的全血，再加入表面染色剂CD4－Percp20μL，混匀，室温暗处孵育15min；加2mLFACS溶血素，室温暗处孵育10min，离心500g5min，弃上清；加500μLFACS通透液，室温暗处孵育10min，加PBS洗液2mL，离心500g5min，弃上清；实验管加双色标记干扰素－γ－FITC/白介素－4－PE，对照管加同型对照抗体G2a－FITC/GI－PE，混匀，室温暗处孵育30min，加PBS洗液2mL，离心500g5min，弃上清，加1mLPBS液后用流式细胞仪检测分析，用Flow－Check荧光微球进行光路与流路校正，荧光信号变异系数CV＜2%。建立方案，调节电压及颜色补偿，测定标本。最终以IFN－γ和IL－4的散点图表示Th1和Th2细胞，用EXPO32ADCAnalysis软件分析。1．4统计处理计量资料数据用均数±标准差（珋x±s）表示，用SPSS15．0统计软件统计。两组间比较方差齐时用成组t检验，方差不齐时，用t’检验。2研究结果2．1各组Th1、Th2细胞和Th1/Th2比值比较与正常对照组比较，急性化脓性扁桃体炎卫分证组Th1、Th1/Th2比值显著升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；见表1。表1各组Th1、Th2、Th1/Th2比较（珋x±s）组别例数Th1（%）Th2（%）Th1/Th2正常组309．38±5．702．45±1．194．07±2．02卫分证组3015．80±7．97*2．67±1．187．20±5．33*注：与正常组比较，*P＜0．05。2．2各组IFN－γ、IL－4水平和IFN－γ/IL－4比值比较
与正常对照组比较，急性化脓性扁桃体炎卫分证组IFN－γ水平、IFN－γ/IL－4比值显著升高，差异有统计学
意义（P＜0．05）。表2各组IFN－γ、IL－4、IFN－γ/IL－4比较（珋x±s）
组别例数IFN－γ（ng/L）IL－4（ng/L）IFN－γ/IL－4正常组3016．07±8．545．67±2．032．87±1．18卫分证组3025．70±11．96*6．04±2．014．56±2．26*注：与正常组比较，*P＜0．05。3讨论
急性化脓性扁桃体炎属祖国医学“急乳蛾”范畴。亦称“喉风”、“喉蛾”。中医认为，本病基本病机为热毒壅盛、化腐成脓，多因暴饮暴食，或过食辛热煎炸之品，形成脏腑蕴热，或外感风热之邪，郁而不解，化火成毒，蕴结喉核，导致经络阻塞，气血凝滞，血肉腐败所致。现代医学表明，急性化脓性扁桃体炎是腭扁桃体的急性炎症，乙型溶血性链球菌为本病的主要致病菌，当人体抵抗力降低时，病原体大量繁殖，毒素破坏隐窝上皮，细菌侵入其实质而发生炎症，常伴有一定程度的咽黏膜及咽淋巴组织的急性炎症，多见于年长儿［6］，是一种常见的急性咽部疾病，具
有反复发作、易引起局部及全身并发症等特点。若不及时治疗，可因高热而引起抽搐、呕吐及昏睡，也可引起咽旁脓肿等局部并发症及心肌炎、肾炎等全身并发症［7］。