HPLC法测定精氨酸谷氨酸注射液的有关物
HPLC法测定布洛芬注射液中精氨酸的含量
HPLC法测定布洛芬注射液中精氨酸的含量刘瑞;刘福利;罗国平;李品颖;杨丽英【摘要】目的建立一种测定布洛芬注射液中精氨酸含量的HPLC法.方法采用因子设计优化色谱条件.采用Venusil XBP-CN(250 mm×4.6 mm,5 μm)氰基柱;流动相:磷酸盐溶液(磷酸调pH至3.3)-乙腈(30∶70);检测波长:199 nm;流速:1 mL·min-1;柱温:30 ℃;进样量:5 μL.结果精氨酸质量浓度在0.4～1.0 mg·mL-1范围内呈良好的线性关系(r=0.999 5),精密度、重复性和稳定性实验的RSD分别为0.28%,0.37%和0.46% (n=6),平均回收率为100.2%,RSD为0.55%.结论该方法准确,简单,快速,重复性好,可用于布洛芬注射液中精氨酸的含量测定.【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2013(028)004【总页数】5页(P361-365)【关键词】HPLC;布洛芬注射液;精氨酸;因子设计;氰基柱【作者】刘瑞;刘福利;罗国平;李品颖;杨丽英【作者单位】陕西省体育科学研究所,陕西体育医院,西安,710061;石家庄中硕药业集团有限公司,石家庄,050051;西安医学院药学院,西安,710021;石药集团中央药物研究院,石家庄,050035;石家庄中硕药业集团有限公司,石家庄,050051【正文语种】中文【中图分类】R927.2布洛芬注射液由美国食品药品监督管理局(FDA)2009年6月11日批准上市，规格为400 mg∶4 mL和800 mg∶8 mL，商品名为Caldolor，是首个被批准的治疗疼痛和发热的静脉注射制剂。
布洛芬是非甾体抗炎药的典型代表，为白色结晶性粉末，在水中几乎不溶。
为提高布洛芬在水中的溶解度，采用极性强、水溶性好的精氨酸与布洛芬成盐，进而提高布洛芬的水溶性。
目前，精氨酸的原料及相关制剂的含量测定方法主要以滴定、旋光或衍生化法为主[1-6]。
高效液相色谱法测定布洛芬注射液中精氨酸的含量
布洛芬 为 临床 常用 的非 甾体 消 炎镇 痛药 ， 具有 较 强 的 抗 炎、 抗风湿及解热镇痛作用 。为 了克 服 口服布 洛芬制 剂对 胃肠
１ ． ３ 色谱 条 件
色谱柱 ： 氨基 柱（ ４ ． ６ ｍ ｍ Ｘ ２ ５ ０ ａｍ， ｒ ５ ｔ ｘ ｍ） ， 流动相 ： 磷酸盐缓 冲液 （ ｐ Ｈ＝ ３ ． ５ ）一乙腈 （ ４ ５ ： ５ ５ ） ； 流速： １ ． ０ ｍ Ｌ ／ ｍｉ ｎ ， 检测 波长 ：
Ｒｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ Ｔ ｈ ｅ ｐ ｅ ａ Ｊ 【 ａ ｒ ｅ ａ ｏ ｆ ａ ｒ ｇ ｉ ｎ ｉ ｎ ｅ ｈ ａ ｄ ａ ｇ ｏ ｏ ｄ ｌ ｉ ｎ ｅ ａ ｒ ｉ ｔ ｙ ｉｔ ｗ ｈ ｉ ｔ ｓ ｃ ｏ ｎ ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｒ ａ ｎ ｇ ｅ ｏ ｆ ０ ． ０ ７ ４ ｍｇ ／ ｍＬ 一０． ３ ７ ｍｇ ／ ｍＬ， ｒ＝０ ． ９ ９ ９ ８ ． Ｔ ｈ ｅ ａ ｖ ｅ ｒ ａ ｇ ｅ ｒ ｅ ｃ ｏ ｖ ｅ ｒ ｙ Ｗａ ｓ １ ０ ０． １ ９ ％ ． Ｃｏ ｎ ｃ ｌ ｕ ｓ ｉ ｏ ｎ Ｔ ｈ ｅ ｐ ｒ ｏ ｐ ｏ ｓ ｅ ｄ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｉ ｓ ｓ ｅ ｎ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ ， ａ ｃ ｃ ｕ ｒ ａ ｔ ｅ ａ ｎ ｄ ｓ ｉ ｍｐ ｌ ｅ ， ａ ｎ ｄ ｃ ａ ｎ ｂ ｅ ｕ ｓ ｅ ｄ ａ ｓ ｈｅ ｔ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ
采 用高效 液相 色谱 法（ Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ） ， 色谱 柱为 Ｇ ｌ ｏ ｂ ．
ａ ｌ Ａ Ｐ Ｓ —Ｎ Ｈ ２ （ ４ ． ６ ｍ ｍ ×２ ５ ０ ａｍ， ｒ ５ １ ｘ ｍ） ， 流动 相 为 磷 酸 盐 缓 冲 液 （ ｐ Ｈ ：３ ． ５ ）一乙腈 （ ４ ５ ： ５ ５ ） ； 检测波长为 ２ ０ ５ ｎ ｍ。 精氨酸在 ０ ． ０ ７ ４ ａｇ ｒ ／ ｍ Ｌ一 ０ ． ３ ７ ｍ ｇ ／ ｍ Ｌ范围 内， 峰 面积 与浓度呈 良好的线性关 系， ｒ ＝ ０ ． ９ ９ ９ ８ ， 回收率为 １ １ ３ ０ ． １ ９ ％。
高效液相色谱法测定谷氨酰胺的含量
高效液相色谱法测定谷氨酰胺的含量摘要:建立高效液相色谱法测定谷氨酰胺含量的方法。
色谱柱为氨基柱,流动相为:0.05 mol/L的磷酸二氢钾(取磷酸二氢钾6.8 g,加水至1000 ml,用磷酸调节pH值为4.0)∶乙腈＝70∶30,检测波长为215 nm,结果表明该方法在所试验的浓度范围内具有良好的线性关系,r为0.999,精密度RSD等于0.37%,平均回收率为98.3%。
关键词:谷氨酰胺高效液相色谱法测定谷氨酰胺(Glutamin)亦被称作麸酰胺酸,为人体中含量最丰富的非必需氨基酸。
临床上主要用于改善胃溃疡和十二指肠溃疡的症状。
常见的分析方法有毛细管电泳法[1]。
本文建立了通过高效液相色谱法测定谷氨酰胺的方法,实验证明该方法操作简便、专一性及灵敏度高,结果准确可靠。
1 材料与方法1.1 仪器HLPC色谱仪型号:LC-20A,色谱仪编号:L20134506488AE,分析天平型号:AE100 分析天平编号:LS012,超声波型号:AS3120A,检测波长:λ＝215 nm。
1.2 色谱条件检测器型号:SPD-20A,检测器灵敏度:2.0AUFS柱温:35 ℃,进样体积:20 ul流速:1.0 ml/min,流动相:0.05 moL/L的磷酸二氢钾(取磷酸二氢钾6.8 g,加水至1000 ml,用磷酸调节PH值为4.0)∶乙腈＝70∶30,色谱柱:NH￠4.6×250 mm,色谱柱号:312316。
1.3 材料与试剂乙腈(色谱纯,康科德公司),磷酸二氢钾(AR级),磷酸(AR级),谷氨酰胺对照品(山东宝齡生物技术有限公司),高纯水。
1.4 样品制备标准溶液的制备:精密称取谷氨酰胺标准品250 mg于50 ml容量瓶中,用纯化水稀释并定容至刻度,摇匀,再精密吸取2 ml于10 ml容量瓶中,用流动相稀释定容至刻度,摇匀,备用。
其浓度为1 mg/ml。
样品溶液的制备:称取本品约250 mg,精密称定于50 ml容量瓶中,用纯化水稀释并定容至刻度,摇匀,再精密吸取2 ml于10 ml容量瓶中,用流动相稀释定容至刻度,摇匀,备用。
高效液相色谱法氨基酸标样的分析实验
一、目的要求1、熟悉高效液相色谱仪的结构、分离原理和操作程序。
2、掌握氨基酸标样的分析方法、原理。
二、实验原理氨基酸与PITC发生反应生成的衍生物，在254nm处有最大吸光值。
氨基酸衍生物进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积可进行定性和定量。
该方法是柱前衍生法中的一种。
PITC方法的反应方程式如下图所示：三、实验仪器和试剂1、仪器：高效液相色谱仪（带紫外检测系统和记录系统）。
2、材料：氨基酸标样3、试剂：衍生液：异硫氰酸苯酯：甲醇：三乙胺：水（V/V）=1：7：1：1正己烷、乙腈、乙酸、乙酸钠以上试剂中乙腈为色谱醇，水为二次蒸馏水，其它为分析醇。
四、实验步骤1、柱前衍生步骤：（1）将100ul衍生液加入100ul氨基酸标样或样品中，震荡使混合均匀，室温放置1小时。
（2）反应液中加入200ul正己烷，充分震荡后放置使分层。
（3）取下层溶液用一次性滤膜过滤器（0.45ul）过滤。
（4）取滤液5ul注入HPLC。
2、分离条件的设定（1）色谱柱：Shim-pack VP-ODS 4.6mm x 15cm保护柱：Shim-pack GVP-ODS4.6 mm x 1cm（2）流动相：A液：0.1M乙酸钠pH6.50（用乙酸调整，500ml乙酸钠中约加2滴乙酸）。
B液：乙腈/水=4/1（3）流量：1ml/min柱温：36℃检测波长：254nm（4）梯度洗脱程序：TIME(min) FUNC VALUE0．01 BCONC 103 BCONC 1021 BCONC 3921.01 BCONC 8025 BCONC 8025.01 BCONC 1035 STOP STOP3、数据采集打开real-time CS analysis软件采集数据并对数据进行分五、实验数据及处理结果六、实验讨论：1、本次实验的注意事项有哪些？结果：①、流动相必须用HPLC级的试剂，使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um 或更细的膜过滤)。
RP-HPLC 测定注射用盐酸头孢吡肟中精氨酸的含量
RP-HPLC 测定注射用盐酸头孢吡肟中精氨酸的含量
廖锐仑;闵翠娥;谭胜连
【期刊名称】《广东药学院学报》
【年(卷),期】2006(022)003
【摘要】目的建立高效液相色谱法测定注射用盐酸头孢吡肟中精氨酸的含量.方法采用Shim-pack CLC-ODS-C18 (6.0 mm×150 mm,5 μm) 柱,以乙腈-0.05 moL·L-1磷酸二氢氨(30∶70)为流动相,流速1.0 mL·min-1,柱温为35 ℃,检测波长206 nm.结果精氨酸在0.04～0.6 mg/mL范围与峰面积呈良好的线性关系
(r=0.9999),平均回收率为100.2%,RSD为0.52%(n=9).结论该方法准确、简便、快速、重现性好,是测定注射用盐酸头孢吡肟中精氨酸含量的好的质量控制方法.【总页数】3页(P284-286)
【作者】廖锐仑;闵翠娥;谭胜连
【作者单位】广州天心药业股份有限公司,广东,广州,510300;广州天心药业股份有限公司,广东,广州,510300;广州天心药业股份有限公司,广东,广州,510300
【正文语种】中文
【中图分类】R927
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1.高效液相色谱法测定注射用盐酸头孢吡肟中精氨酸含量 [J], 王启光
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王东凯;宋涛;杨秀丽;王海凤
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HPLC法测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅳ)中5-羟甲基糠醛的含量
HPLC法测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅳ)中5-羟甲基糠醛的含量张莉;黄哲甦【摘要】目的:建立HPLC法测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅳ)中5-羟甲基糠醛的含量.方法:采用Phenomenex PRODIGY ODS(3) C18 100A分析柱(250mm×4.6 mm,5μm),以磷酸盐缓冲液-甲醇(95∶5)为流动相,流速1.0ml/min,检测波长284 nm,柱温40℃.结果:本方法的线性范围为0.029 9～23.912μg/ml(r=0.999 6),平均回收率为99.10％,RSD为1.08％(n=9).结论:本方法简便,专属性强,结果准确可靠,适用于复方氨基酸注射液(18AA-Ⅳ)中5-羟甲基糠醛的含量测定.【期刊名称】《天津药学》【年(卷),期】2012(024)006【总页数】3页(P4-6)【关键词】复方氨基酸注射液(18AA-Ⅳ);HPLC法;5-羟甲基糠醛;含量【作者】张莉;黄哲甦【作者单位】天津市药品检验所,天津300070;天津市药品检验所,天津300070【正文语种】中文【中图分类】R927.2复方氨基酸注射液(18AA－Ⅳ)临床上主要用于改善外科手术前后病人的营养状态，适用于各种疾病引起的营养不良，同时作为节氮疗法补充营养。
复方氨基酸注射液(18AA－Ⅳ)质量标准现收载于国家药品标准新药转正标准第44册。
5－羟甲基糠醛(5－hydroxymethylfurfural)为该制剂中的原料组分葡萄糖在放置及加热灭菌过程中的分解产物。
由于5－羟甲基糠醛损害人体横纹肌和内脏，因此在含有葡萄糖成分的输液类制剂中应严格控制5－羟甲基糠醛的含量［1］。
原国家标准采用颜色反应(不产生樱桃红色)来控制样品中的5－羟甲基糠醛量，该法为定性反应，准确性差。
为进一步准确测定复方氨基酸注射液(18AA－Ⅳ)中5－羟甲基糠醛的含量，确保人民用药安全。
本文建立了高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液(18AA －Ⅳ)中5－羟甲基糠醛的含量，方法简便、准确、重复性好。
HPLC法测定甘氨酰-L-谷氨酰胺有关物质
HPLC法测定甘氨酰-L-谷氨酰胺有关物质
刘文萍
【期刊名称】《中国医药导报》
【年(卷),期】2008(5)11
【摘要】目的:建立测定甘氨酰-L-谷氨酰胺有关物质的高效液相色谱法.方法:采用ODS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以0.05 mol/L磷酸二氢钠缓冲溶液(用磷酸溶液调节pH至3.0)-甲醇(90:10)为流动相,流速1.0 ml/min,于225 nm波长处测定.结果:在本色谱条件下,2种有关物质均能得到较好的分离,且在测定范围内有较好的线性及精密度.结论:采用HPLC法测定甘氨酰-L-谷氨酰胺有关物质的方法简便、准确、灵敏度高,方法可靠,可用于甘氨酰-L-谷氨酰胺有关物质的测定.
【总页数】2页(P42-43)
【作者】刘文萍
【作者单位】郑州市儿童医院,河南郑州,450012
【正文语种】中文
【中图分类】R917
【相关文献】
1.L-丙氨酰-L-谷氨酰胺环合类有关物质的测定 [J], 吴强;刘伟;何广卫
2.N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺及有关物质的高效液相色谱分析 [J], 何盛江;宋力;张现涛;刘实
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氨甲苯酸注射液有关物质和含量测定hplc法的建立
文章标题：氨甲苯酸注射液的HPLC法测定及相关物质含量分析在医药领域中，药品的质量和有效性直接关系到患者的健康和生命。
氨甲苯酸注射液作为一种重要的药品，在临床上用于治疗一些疾病。
对氨甲苯酸注射液的质量进行分析和监控就显得尤为重要。
本文将重点介绍氨甲苯酸注射液相关物质和含量的HPLC法测定的建立及分析。
1. 氨甲苯酸注射液概述氨甲苯酸注射液是一种常用的止痛药物，主要用于缓解各种疼痛。
其主要成分为氨甲苯酸，以及一些相关的物质。
而这些相关物质的含量对于药品的质量和稳定性有着重要的影响。
2. HPLC法的建立HPLC（High Performance Liquid Chromatography）是一种高效液相色谱法，它具有分离效果好、灵敏度高、重现性好等特点，因此在药品分析领域得到广泛应用。
建立氨甲苯酸注射液相关物质和含量的HPLC法，可以准确、快速地分析出药品中各个成分的含量，保证药品的质量和安全性。
3. 相关物质和含量的分析通过HPLC法，可以对氨甲苯酸注射液中的各种物质进行分离和测定。
比如氨甲苯酸的含量、有机酸的含量、以及其他可能存在的杂质。
这些物质的含量分析可以帮助我们全面了解药品的成分和质量状况。
4. 个人观点和理解对于氨甲苯酸注射液相关物质和含量的HPLC法测定，我认为它可以为药品的质量控制提供一个科学、可靠的分析手段。
通过对药品中各种成分进行定量分析，可以及时发现问题并加以解决，确保患者用药的安全性和有效性。
总结回顾：本文对氨甲苯酸注射液的相关物质和含量的HPLC法进行了探讨。
HPLC法的建立和分析可以帮助我们全面了解药品的成分和质量状况，保障患者的用药安全。
在未来的药品质量控制和科研工作中，HPLC法将会继续发挥重要作用。
通过本文的了解，相信读者对于氨甲苯酸注射液相关物质和含量的HPLC法测定有了更深入的认识和理解。
在以后的工作和研究中，将更加重视药品质量的分析和控制，进一步推动医药行业的发展。
注射用盐酸头孢吡肟用高效液相色谱法测定精氨酸含量
注射用盐酸头孢吡肟用高效液相色谱法测定精氨酸含量作者：黄维来源：《中国科技博览》2015年第01期[摘要]盐酸头孢吡肟为第四代头孢菌素，它通过抑制细菌细胞壁的生物合成而达到杀菌作用，广泛应用于临床医学，本文通过采用高效液相色谱法测定其精氨酸含量，对试验过程中采用的检测方法进行详细阐述。
[关键词]盐酸头孢吡肟；高效液相色谱法；精氨酸含量；测定中图分类号：F4511 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2015）01-0316-01引言：头孢吡肟具有独特的抗菌、杀菌作用，临床上使用的注射用盐酸头孢吡肟是每克头孢吡肟加入725mg精氨酸制成，精氨酸对于伤口的恢复和愈合、促进细胞的生长，预防伤口的感染、提高系统免疫功能等方面都有很好的作用。
中国药典2010年版二部中，采用LabAlli-ance SSI2000和HP1100高效液相色谱仪对注射用盐酸头孢吡肟中精氨酸的含量进行测定，其结果准确可靠。
高效液相色谱法是色谱法的一个重要分支，它是将单一溶剂或混合溶剂、缓冲液等液体作为流动相，将其泵入色谱柱，柱内的固定相和流动相的成分被分离后，通过检测器进行检测，对样品进行分析。
一、试验前准备1、仪器与材料高效液相色谱仪（美国LabAlliance SSI2000）、Model201紫外检测器、电子天平。
精氨酸对照品（批号：140685-201104），头孢吡肟对照品（批号：030601），注射用盐酸头孢吡肟样品（批号：030601， 030602， 030603），甲醇为色谱纯，剩余试剂作为分析纯使用。
2、色谱条件Agilent Extend-C18柱（5μm，4.6×250mm）；流动相：含0.015mol·L-1辛烷磺酸钠的0.1mol·L-1的磷酸二氢钠（用氢氧化钠试液调节pH值至5.0）—甲醇（94∶6），流速：1.0mL·min-1，检测波长206nm，柱温40℃，进样体积10μL。
柱前在线衍生-HPLC内标法快速测定脑蛋白水解物注射液中的氨基酸
柱前在线衍生-HPLC内标法快速测定脑蛋白水解物注射液中的氨基酸冯辉;董祥君;吴焱;孙海侠【摘要】A HPLC for rapid determination of amino acids in cerebroprotein hydrolysate injection was developed. Norvaline was added to samples before preparation as internal standard. Then online derivatization with o-phthaldialdehyde(OPA) and 9-fluore-nylmethyl chloroformate( FMOC - Cl) was performed automatically by the autosampler, and analyzed on a C18 short column using gradient elution with diode array detector(for Iysine) and fluorescence detector(for other amino acids except lysine) combined detection. The analytical time was 14 min. The peak area of amino acids versus their concentration had a good linearity (correlation coefficients were 0.9987 -0.9999) in the range of 4.5 -900 μmol/L. Limits of detectio n (LOD) were in the range of0.032 -0.578 mg/L, limits of quantification (LOQ) were in the range of 0. 105 - 1.929 mg/L. The recoveries of standard spiking of 16 amino acids were in the range of 95.39% - 105.33%. The relative standard deviations(n =7) of intraday and interday were in the range of 1.95% -4.81% and 3. 14% -6.70% , respectively.%建立了利用高效液相色谱仪快速测定脑蛋白水解物注射液中氨基酸含量的方法.样品处理采用先提取后水解转化的方法,色谱分离使用反相C18分析柱二元高压梯度洗脱;使用二极管阵列检测器检测,波长为260 nm;分析时间为14 min.各氨基酸在4.5-900μmol/L范围内线性关系良好,相关系数为0.998 7-0.9999;检出限为0.032 -0.578 mg/L,定量限为0.105 -1.929 mg/L;16种氨基酸回收率为95.39% -105.33%,日内和日间分析的相对标准偏差(n=7)分别为1.95% -4.81%和3.14%-6.70%.【期刊名称】《化学分析计量》【年(卷),期】2011(020)005【总页数】5页(P29-33)【关键词】柱前在线衍生;高效液相色谱法;脑蛋白水解物注射液;氨基酸【作者】冯辉;董祥君;吴焱;孙海侠【作者单位】长春市产品质量监督检验院,长春,130012;山东科兴生物制品有限公司,济南,250200;长春市产品质量监督检验院,长春,130012;长春市产品质量监督检验院,长春,130012【正文语种】中文脑蛋白水解物注射液(cerebroprotein hydrolysate injection)是以健康猪脑(或牛脑)经酶水解制成的无菌制剂，主要成分是游离氨基酸和小分子多肽[1]。
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HPLC法测定精氨酸谷氨酸注射液的有关物作者：陆宏国，金霞，张正艮，徐玉凤
【摘要】目的建立HPLC法测定精氨酸谷氨酸注射液的有关物质。
方法采用NH2柱(4.6mm×250mm，5μm)，乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(10：90)为流动相，检测波长210nm，柱温为30℃。
结果精氨酸、谷氨酸与降解产物焦谷氨酸分离良好，其最低检测限分别为10.2ng、69.2ng和 4.1ng。
结论本法快速、准确，可用于精氨酸谷氨酸注射液的质量控制。
【关键词】 HPLC;精氨酸谷氨酸;注射液;有关物质;焦谷氨酸【Abstract】 Objective To study a new method for the determination of related substances of arginine glutamate Injection by HPLC.Methods Separation was carried out on a NH2 column using acetonitrile-0.05mol/L potassium dihydrogen phosphate (10:90) at detection wavelength 210 nm.Results Arginine and glutamate and pyroglutamic acid were separated completely.Their detection limit were 10.2ng, 69.2ng and 4.1ng.Conclusion This method is sensitive and accurate with good repeatability and suitable for the quality control of arginine glutamate Injection.
【Key words】 HPLC;arginine glutamate;Injection;related substances;pyroglutamic acid
精氨酸谷氨酸(arginine glutamate，以下简称Ⅰ)是由日本
味之素公司研究开发的降高血氨药物，临床主要用于治疗因急、慢性肝病如肝硬化、脂肪肝、肝炎所致的高血氨症，特别适用于因肝脏疾患引起的中枢神经系统症状的解除及肝昏迷的抢救。
本品临床应用多年，疗效确切，并早已收载于日本药典，其中有关物质采用TLC法检查，但TLC法检测灵敏度较差，不能有效检出Ⅰ的降解产物焦谷氨酸，参考文献[1，2]，笔者现改用HPLC法测定其有关物质。
1 仪器与试药
XS205电子天平(瑞士梅特勒);Agilent 1100高效液相色谱仪(美国安捷伦公司);ZORBAX NH2柱(4.6mm×250mm，5μm);精氨酸对照品(编号：140685-200802)，谷氨酸对照品(编号：140690-200401)，均为中国药品生物制品检定所提供;L-焦谷氨酸(分析纯，批号：F20090909，国药集团化学试剂有限公司提供);Ⅰ注射液(规格：200ml：20g，批号分别为: 071010、071011、071012，扬子江药业集团有限公司提供);配制流动相用乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余试剂为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件与系统适用性试验
以氨基键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(10：90)为流动相，检测波长为210nm，柱温为30℃，进样量为20μl。
分别取配制好的精氨酸溶液(浓度为1mg/ml)、谷氨酸溶液(浓度为1mg/ml)、焦谷氨酸溶液(浓度为0.1mg/ml)和混合溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图(见图1～4)，结果见表1，由图可知混
合溶液出峰顺序依次为精氨酸、谷氨酸和焦谷氨酸，各峰之间的分离度均符合规定。
图1 精氨酸峰图2 谷氨酸峰图3 焦谷氨酸峰图4 混合溶液各物质峰表1 系统适用性试验结果 2.2 溶液配制取样品溶液1ml置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液;精密量取供试品溶液1ml置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液;另精密称取焦谷氨酸适量，用流动相溶解并稀释制成每1ml中含0.02mg的溶液，摇匀，作为杂质对照品溶液。
2.3 检测限
在上述色谱条件下，以信噪比S/N=3计算，精氨酸、谷氨酸和焦谷氨酸的检测限分别为10.2、69.2和 4.1。
2.4 溶液的稳定性
取系统适用性试验项下配制的Ⅰ溶液，分别于0、2、4、6、8h取样检测，记录精氨酸、谷氨酸和焦谷氨酸的峰面积，计算得RSD 分别为0.24%、0.09%和1.09%，表明Ⅰ溶液在8h内稳定。
2.5 专属性试验
Ⅰ原料药经酸、碱、氧化、高温及光照破坏试验。
结果表明，经酸、碱、氧化、高温及光照破坏后产生的杂质峰能与主峰基线分离。
2.6 有关物质检查
分别取对照溶液、供试品溶液和焦谷氨酸杂质对照品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图至谷氨酸峰保留时间的2.5倍。
结果三批样品有关物质检测结果见表2。
表2 三批样品有关物质检查
结果
3 讨论
文献报道[3]，Ⅰ主要降解产物为焦谷氨酸，而焦谷氨酸为有害物质，故需进行控制。
因Ⅰ为氨基酸类衍生物，在紫外无吸收，只能采用末端吸收波长210nm进行检测，选用NH2柱比C18柱分离效果好。
因Ⅰ溶液注入液相色谱仪中有精氨酸和谷氨酸两峰，且各自响应值不同，无法采用主成分自身对照法计算有关物质，故只能采用杂质对照品法计算焦谷氨酸含量。
【参考文献】
1 莫靖欣，贺英菊.HPLC测定复方谷氨酰胺肠溶胶囊中的有关物质.华西药学杂志，2007，22(6)：696-696.
2 孙彥君，于恩中.RP-HPLC测定人参降糖胶囊中L-焦谷氨酸的含量.中成药，2006，28(9)：1399-1401.
3 丁启龙，刘国卿.焦谷氨酸药理学研究进展.中国药理学通报，1998，14(2)：481-483.。