肺靶向脂质体的研究
NGR多肽修饰的脂质体及其抗肿瘤研究进展
NGR多肽修饰的脂质体及其抗肿瘤研究进展作者：王咏，陈军，林爱华，方芸来源：《中国中药杂志》2013年第13期[摘要] NGR多肽是一种能与肿瘤新生血管内皮细胞上的CD13受体结合的靶向肽。
将NGR多肽与脂质体相连接，得到NGR多肽修饰的脂质体。
通过静脉注射该脂质体，NGR多肽能与肿瘤新生血管上的CD13受体结合，将脂质体定位于肿瘤组织，使得脂质体中的药物浓集于肿瘤部位，从而提高抗肿瘤效果。
该文从NGR多肽入手，对NGR多肽的定义、NGR多肽修饰的脂质体、NGR多肽修饰的脂质体抗肿瘤的优势和不足、NGR多肽修饰的脂质体的最新研究方向等进行了综述，并对NGR多肽修饰的脂质体未来的研究进行了展望。
[关键词] NGR多肽；NGR多肽修饰的脂质体；CD13受体；抗肿瘤脂质体是一种结构和组成类似于生物膜的超微型药物载体。
由于脂质体具有生物相容性、细胞亲和性、靶向性等性质，使其在抗肿瘤方面具有广泛的应用。
脂质体可以通过增强滞留效应（enhanced permeation and retention effect，EPR）被动进入肿瘤组织，相比于单纯的放化疗，具有一定的临床治疗优势[1-2]。
但由于血流速度较快，脂质体通过静注进入体内后并不能长时间停留在肿瘤部位，而在脂质体表面连接多肽制备成的靶向脂质体静脉注射后能立即到达靶部位，能较长时间停留在肿瘤部位，药物从脂质体中释放出来，能提高肿瘤治疗效果。
因此，抗肿瘤主动靶向脂质体已经成为研究热点之一。
主动靶向脂质体包括免疫脂质体、受体介导脂质体、糖基修饰脂质体等。
本文从NGR多肽入手，对NGR多肽的定义、NGR多肽修饰的脂质体、NGR多肽修饰的脂质体的抗肿瘤优势和不足、NGR多肽修饰的脂质体的最新研究方向4个方面对NGR修饰脂质体进行综述。
1 NGR血管靶向肽1.1 NGR多肽以及表达氨肽酶（CD13）NGR多肽即含天门冬酰胺酸-精氨酸-甘氨酸（asparagine-glycine-arginine）序列的多肽，1998年，Arap等[3]用噬菌体展示技术筛选到具有肿瘤新生血管靶向性的天门冬酰胺酰精氨酰甘氨酸短肽，它能特异性地与CD13的细胞结合。
含酸敏感化学键的pH敏感性脂质体在肿瘤治疗中研究进展
中国医药生物技术 2019 年 4 月第 14 卷第 2 期 Chin Med Biotechnol, April 2019, Vol. 14, No. 2
DOI: 10.3969/j.issn.1673-713X.2019.02.010
·综述·
含酸敏感化学键的 pH 敏感性脂质体
在肿瘤治疗中研究进展
另外，酸敏感化学键已被广泛用于制备具有酸敏感特性 的纳米药物递送系统。例如，Liu 等[12]综述了相关研究进展， 这种基于化学键断裂的药物释放，具有稳定性高，释放速度 快等优点，常见的可断裂结构见表 1。其中 pБайду номын сангаас 敏感性的 腙键、醚键和原酸酯结构在 pH 敏感性脂质体中的应用已
酸敏感键 腙键
化学结构
表 1 酸敏感化学键及其水解产物
水解产物
举例文献 [13]
亚胺键
[14]
肟键
[15] [16]
基金项目：国家自然科学基金面上项目（81671814）；国家自然科学基 金 青 年 基 金 （ 21506044 ）； 黑 龙 江 省 自 然 科 学 基 金 重 点 项 目 （ZD2016013）；黑龙江省自然科学基金青年基金（QC2015016） 作者单位：150076 黑龙江，哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究 中心（龚晨）；163319 黑龙江，哈尔滨医科大学大庆校区药学院（廉明 明、张大鹏、王娜、彭海生） 通信作者：彭海生，Email：fisher1688@ 收稿日期：2019-01-14
龚晨，廉明明，张大鹏，王娜，彭海生
化学药物治疗简称化疗，是癌症治疗的有效手段之一， 阿霉素（doxorubicin，DOX）、紫杉醇（paclitaxel，PTX） 等用于化疗的细胞毒性物质可显著改善癌症患者的生活质 量[1]。但多数成药的细胞毒性成分对肿瘤细胞选择性差，且 存在非靶向性的全身副作用。迄今为止，这些问题仍然是化 学治疗的主要瓶颈[2]。为了提高肿瘤细胞选择性，改善抗癌 疗效，多功能纳米系统研发受到了普遍关注[3]。常见的药物 递送系统包括：胶束[4]、脂质体[5]、金属纳米粒子[6]、二氧 化硅粒子等[7]。
药物制剂中脂质体的应用与优化
药物制剂中脂质体的应用与优化随着现代医学的不断发展，药物制剂技术也在不断创新与进步。
其中，脂质体作为一种常见的药物载体系统，被广泛应用于药物制剂中。
本文将详细探讨脂质体在药物制剂中的应用以及相关的优化方法。
一、脂质体的概述脂质体是由一层或多层脂质分子组成的微粒体系，通过调整脂质成分和制备工艺，可以改变其物理化学性质和药物释放特征。
脂质体具有良好的生物相容性和可调控性，可与多种药物相容，对水溶性、油溶性和具有生物活性的药物有较好的包封效果。
二、脂质体在药物制剂中的应用1. 脂质体在药物给药中的应用脂质体可以用于多种给药途径，包括口服、皮肤贴片、局部注射等。
在口服给药中，脂质体可以提高药物的生物利用度和稳定性，延长药物停留时间，减少药物代谢和排泄。
在皮肤贴片中，脂质体可增加药物在皮肤上的渗透性，提高局部疗效。
在局部注射中，脂质体可增强药物在组织中的分布和滞留，提高药物疗效。
2. 脂质体在靶向给药中的应用通过调整脂质体的表面性质和载药策略，可以实现对特定靶点的选择性输送药物。
例如，通过在脂质体表面修饰目标靶点的抗原或抗体，使脂质体能够与相应的细胞结合，实现药物的主动靶向输送。
脂质体还可以通过调整脂质体的大小和组成，利用细胞摄取机制实现被动靶向输送。
三、脂质体制剂的优化方法1. 脂质体组分的优化脂质体的组成是影响其性能的重要因素之一。
可以通过调整脂质体中的脂质种类、脂质浓度以及脂质与药物的比例来实现药物的延缓释放、降低药物毒性等效果。
2. 制备方法的优化脂质体的制备方法对脂质体的性质和稳定性有重要影响。
常用的脂质体制备方法包括薄膜法、乳化法、溶剂蒸发法等，通过选择和优化制备方法，可以获得高质量的脂质体制剂。
3. 脂质体的破坏与稳定性脂质体的稳定性是研究的重点之一。
制备中的温度、pH值、药物溶液浓度等条件都会影响脂质体的稳定性。
加入一些稳定剂和辅助药物，如防腐剂、抗氧化剂等，可以提高脂质体的稳定性。
四、脂质体制剂的应用前景随着对脂质体研究的不断深入，脂质体作为一种优秀的药物载体系统在医学领域得到了广泛应用。
脂质体的粒度及zeta电位表征研究
能 够“ 定位， ， 的给 药 载体
脂 质 体 由脂 质 双分 子层 构 成 ，
体的内含物传输至 目标细胞。
物 理表 征 作 用
Ｎ Ｔ Ａ） 运用 光 散 射：
纳米颗 粒 。 该 技术
是一种人工制备 的球形囊泡。 最初
微镜及视频成像圣 脂质体 的效 用与其物理特 性 据 不 同 的 样 本 类
提 高分 析
就 医药 配方 石 ｝ 身及局部给药 的脂质体对这一应 脂质体应用广泛 ， 其在制药领 用 的需 求 不 断上 升 。 由 于具 备 液 域 的应 用包 括 ： 保 护 治疗 药 剂不 受 用 何 种 载 体 、 何 种
体、 固体 、 半固体配方携载能力 ， 脂 胃肠环境影 响 ， 促进药物成分在 胃 可靠 的分析体 系｛ 质 体 已应 用 于针对 真菌感 染 、 甲 肠道内的传输 ， 定 向控释药物至特 数 据 。如果 用脂 屈
粒浓度。
数 据转 化 为粒度 大小 分布 隋况 。 采 用 激 光 多 普 勒 频 流 速 测 定 法测 量 ｚ ｅ ｔ ａ电位 时 ， 向分 子 溶 液或
ｚ ｅ ｔ ａ电位 测 量 的 应 用
２ 纳 米 颗 粒 跟 踪 分析 技 术 能 够 壹 过捕获视频片段 ， 同 时跟 踪 和
脂 质 体 与 细 胞 在 体 内发 生 交 微 粒 分散 液施 加 电场 ， 这 些 颗粒 便 互 作 用 的 部 位 在 很 大 程 度 上 由 脂 会 以一定的速率移动 ， 而该速率与
上 海 化 工
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脂质体作为疫苗免疫佐剂的应用研究进展
脂质体作为疫苗免疫佐剂的应用研究进展核心提示：2,李春玲1,王贵平1,侯加法2*（1.广东省农业科学院兽医研究所，广东广州510640；2.南京农业大学动物医学院，江苏南京210095）摘要：脂质体作为一种新型疫苗佐剂可同时增强机体的体液和2,李春玲1,王贵平1,侯加法2*（1.广东省农业科学院兽医研究所，广东广州510640；2.南京农业大学动物医学院，江苏南京210095）摘要：脂质体作为一种新型疫苗佐剂可同时增强机体的体液和细胞介导免疫应答，对疫苗有很强的增效作用。
通过分析脂质体的作用机理，概述脂质体作为疫苗免疫佐剂的一些优点以及目前在抗细菌、抗病毒、抗寄生虫以及抗肿瘤疫苗等方面的应用情况，列举出存在的问题并提出改进的方法，展现出脂质体未来良好的应用前景。
关键词：脂质体；疫苗；免疫佐剂佐剂（adjuvants）是先于抗原或与抗原同时应用时，能非特异性地改变或增强机体对抗原的特异性免疫应答，而本身并不引起机体产生免疫应答的物质[1]。
理想的佐剂应该有以下特征：能促进体液和细胞介导的免疫，也能作用于弱免疫性抗原，而且不引起有害的副作用；能以不同途径免疫，也能用于不同的抗原；能在免疫抑制个体中发挥作用，应用于食用动物不应有残留，能有效影响免疫反应质量（型的控制、局部免疫以及细胞类型的控制），稳定、价廉、易生产[2]。
自1965年由英国的Bangha首先发现磷脂在水中可以自发形成脂质体（lipses）以来，对其试验研究日渐广泛[3]。
1974年Allisn等首次报道脂质体的免疫佐剂效应，从而拉开了脂质体作为免疫增强剂的序幕[4]。
脂质体是由类脂质组成的人造细胞膜样小球体，主要由磷酸类脂、胆固醇、硬脂胺等组成的单层或多层双分子夹水结构，可包裹多种疫苗，并有效地引入细胞内。
在体内趋向沉积于肝、脾、淋巴结等状内皮巨噬系统内，延长在体内停留时间，减少疫苗用量、降低毒副作用，提高免疫功能。
它对多种抗原和抗体具有明显的佐剂及载体作用，是目前最有希望成为理想的疫苗佐剂物质之一[5]。
整合素为靶的紫杉醇脂质体的构建与体内外评价
整合素为靶的紫杉醇脂质体的构建与体内外评价实现抗癌肿瘤药物的主动靶向,一直是现代药剂学研究领域中的重要任务。
本文以抗肿瘤药物紫杉醇（paclitaxel,PTX）为模型药物,将薄膜分散法、微孔滤膜挤出技术和导向化合物组装技术相结合,制备了整合素配体修饰的长循环脂质体（sterically stabilizedliposome,SSL）,以期通过靶向肿瘤细胞和肿瘤新生血管中过度表达的整合素受体,增加药物向上述细胞的转运,达到特异性地治疗肿瘤的目的。
首先,通过计算机辅助分子模拟试验对三种小肽配体精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（arginine-glycine-aspartic acid,RGD）,甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸（glycine-arginine-glycine-aspartic acid-serine,GRGDS）和甘氨酸-半胱氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-半胱氨酸-丝氨酸（glycine-cystine-arginine-glycine-asparticacid-cystine-serine,GCRGDCS）和常见整合素受体αvβ3,α5β1及αvβ5的特异性结合方式进行分析比较,结果发现通过适当改变氨基酸序列可以有效改变含RGD序列配体与受体结合的能力。
将RGD、GRGDS和GCRGDCS等导向化合物采用活泼酯法与DSPE-PEG<sub>2000</sub>-NHS进行化学偶联,制备得到三种导向化合物(DSPE-PEG<sub>2000</sub>-RGD,DSPE-PEG<sub>2000</sub>-GRGDS,DSPE-PEG<s ub>2000</sub>-GCRGDCS),并采用MALDI-TOF质谱方法进行结构验证,通过荧光分光光度法计算出合成产物中DSPE-PEG<sub>2000</sub>-RGD,DSPE-PEG<sub>2000</sub>-GRGDS,DSPE-PEG<su b>2000</sub>-GCRGDCS的含量分别为46.99%,43.07%和31.57%。
脂质体的制备方法及研究进展_曹宁宁
第19卷第1期2003年3月天津理工学院学报JOURNAL OF TIANJIN INSTITUTE OF TECHNOLOGYVol.19N o.1M ar.2003文章编号:1004-2261(2003)01-0030-06脂质体的制备方法及研究进展*曹宁宁,羡菲,刘金鹏(天津理工学院生物与化学工程学院,天津300191)摘要:脂质体是磷脂自聚集而形成的双分子层结构,作为药物载体具有减少药物毒副作用及靶向作用的特点.主要介绍:脂质体3种制备方法物理分散法、两相分散法和表面活性剂增溶法的原理,制备出的脂质体的结构及包封性能和各自的优缺点;脂质体作为药物载体在抗癌、抗菌药物上的应用及其在药物载体方面应用的研究进展.关键词:脂质体;制备方法;药物载体中图分类号:R94文献标识码:APreparation methods of liposome and prospectsCAO Ning-ning,XIAN Fei,LIU Jin-Peng(Colleg e of Biotechnolog y and Chemical Eng.,T ianjin Institute of T echnolog y,T ianjin300191,China)Abstract:Liposomes made from phospholipid sel-f aggregat ion can deduce the drug toxit y and have the same target property as drug delivery system.T he form principles,propert ies,structure and advantages of main three methods are reviewed.T he application prospects of liposome as drug delivery system are mainly introduced.Keywords:liposome;preparation methods;drug delivery syst em自1965年由英国的Bang ham首先发现磷脂在水中可以自发形成脂质体(liposomes)以来[1],对其实验研究日渐广泛,已遍及生命科学及膜工程学等领域,并逐渐向临床应用发展.脂质体是由脂质双分子层组成,内部为水相的闭合囊泡.它的结构类似生物膜,又称人工生物膜,在水中平衡后具有亲水性和疏水性两性性质.脂质体具有以下特征[2~3]:1)脂质体是一种囊泡,2)脂质体的囊泡壁是两层磷脂分子构成,3)脂质体很小一般在1L m以下(1000L m= 1mm),4)磷脂在一定条件下才能形成脂质体,并非把磷脂放在水中就产生脂质体,磷脂在水中或甘油中搅拌只能形成乳化颗粒,5)脂质体包裹其他物质则形成不同内容物脂质体.脂质体的应用范围非常广泛,由于它的磷脂双分子膜与细胞膜结构类似,并且可以通过对其进行修饰,使其具有某些与生物体相似的性质,从而脂质体作为细胞模型,在生物体结构功能研究和模拟等方面具有重要意义[4~5].它的另一个重要的应用是作为药物载体[1].将药物包裹在脂质体的水相和膜相内,控制脂质体的靶向作用使其富集于病变部位将药物释放,从而可以减少所需药物的剂量,也大大避免了药物对人体正常部位的损害.近年来立体稳定脂质体[6]的研制大大提高了脂质体在体内的稳定性,使得脂质体作为药物载体在治疗癌症等疾病方面正在走向实用阶段[7~9].另外脂质体还在太阳能转换、超细微粒制备等方面得到了应用.1脂质体作为药物载体的应用1.1作为抗癌药物的载体由于脂质体对淋巴系统的定向性和对癌细胞的亲*收稿日期:2002-07-05基金项目:天津市高等学校科技发展基金资助项目(20010404)第一作者:曹宁宁(1972)),女,讲师,博士研究生和性,改变了药物在组织中的分布,使药物选择性的杀死癌细胞或抑制癌细胞的繁殖,从而提高疗效,减少剂量,降低毒性,减轻变态和免疫反应.研究表明[10]脂质体猪苓多糖能显著减少黑色素瘤肝转移癌生成作用而空白脂质体和游离态猪苓多糖则无明显作用.1.2作为抗菌,抗寄生虫的药物载体利用脂质体和生物细胞膜亲和力强的特点,将抗生素包裹在脂质体内可增强抗菌效用.如消炎痛制成脂质体后,其抑制角膜穿孔伤炎性反应的作用较混悬水剂明显增强[11].同时由于脂质体和脂复合物或脂分散体的粒子相对于游离的药物来说主要聚集于网状内皮系统,因此可以用来治疗利什曼病等网状内皮系统疾病.同时由于脂质体可以很大程度的降低肾脏的摄取,当二性霉素B制成脂质体后,能显著降低在治疗过程中对真菌感染患者引起的急性肾毒症[12].1.3作为抗病毒药物载体抗病毒药物制成脂质体可显著提高抗病毒疗效,降低了用量和毒副作用.无环鸟苷[13]是一种核苷类抗病毒剂,其水溶性差,将其制成脂质体混悬液后,大大提高其水溶度,降低了用量.2脂质体的制备方法脂质体的制备方法可分为三大类:物理分散法;两相分散法;表面活性剂增溶法.2.1物理分散法物理分散法的基本原理都是将类脂材料干燥成薄膜,然后加入水溶性介质分散,工艺也不复杂,但他们都有一共同的缺点)包封率都较低(微乳化法除外).下面简述一下这些方法.1)手摇法(也称薄膜法):手摇法是脂质体制备方法中最原始,但也是至今为止最基本和应用最广泛的方法[14].类脂材料溶解在有机溶剂中,然后在旋转蒸发器上,在真空下蒸除溶剂,加入缓冲液,再加入一些小玻璃球帮助分散,这样就形成了一个奶白色的分散液.这里应注意的一点是所用的烧瓶应尽量的大些,以便使类脂干燥后形成一层均匀的薄膜,并且使包封体积达到最大值.2)非手摇法:这是一个慢慢水合的方法以提高其包封率[15].在类脂膜形成后,首先将湿的氮气流通过薄膜15m in,然后再加水膨胀、水合,并慢慢搅拌形成脂质体.它的直径可达几百微米,但是只有在无离子和蛋白质时才可形成.3)超声波分散法[16]:水溶性药物溶于磷酸盐缓冲液,加入磷脂与胆固醇及脂溶性药物共溶于有机溶剂的溶液,搅拌蒸发除去有机溶剂,残留液经超声波处理,然后分离出脂质体.本法制备的大多为单室脂质体,如维生素E脂质体[17]、5-氟脲嘧啶脂质体等[18].4)法兰西加压法:这个方法是用非常高的压力将大的类脂球(M LV)通过一个膜.此法避免了像超声波所引起的降解和不均匀的问题[19].一般这种方法制备的脂质体的粒径在30nm~80nm.将M LV经过1400大气压的法兰西压力筒一次,约600Þ0左右的颗粒直径达25nm~50nm,而通过4次后,约940Þ0的脂质体直径到31.5nm~52.5nm.这个方法比超声波法形成的脂质体粒径稍大些,但与此相比,包封率上升,而渗透性有所下降.5)膜挤压法:降低脂质体的颗粒也可在低压下(小于7个大气压)通过一个滤膜[20].这个方法的优点是可选择膜的孔径,已决定颗粒的大小.而且在经过几次后也较均匀.6)微乳化法:梅赫(M ay hew)等报告了用一个高压均质器从浓的类脂悬浮液中制备小的M LV(也有称为SUV)的方法[21].这个装置可用空气泵或电力/水压增强泵产生非常高的液体压力(可到2100at).利用高压流经过精确规限的微细通道,流体立刻被加速到极高速度,并在特制的专利反应室内产生强大的剪切、冲击及空化作用,形成预期的精细密集及极为均一的脂质体.类脂材料可用MLV悬浮液也可用未水合的类脂浆加入到微乳化其中,经过几次循环,直到达到满意的尺寸为止.一般来说,循环一次后平均直径在100nm ~200nm,确切的方法分布取决于膜的成分及水和介质.这个方法有以下几个优点:重复性好,能大规模生产;微粒均匀稳定性好;包封率高能达到750Þ0.7)预脂质体法:这个方法是通过减少水的量来增加干燥类脂的表面积而发展起来的.将类脂干燥到一个多孔的支持体上(如粉状氯化钠、山梨醇或多糖等[22])然后搅拌下加入少量水以湿润被粉末包覆的干燥类脂.当支持体溶解后,就形成了一个M LV悬浮液.一般这个过程是一点点加水,待水蒸发后再加剩余的水.最后形成一个干燥的类脂.(预脂质体).2.2两相分散法这个方法的基本原理是将类脂剂溶解在有机溶剂中,然后这个油相与水相接触.同时将溶剂蒸发,以变成脂质体.又可分为3种类型:溶剂和水可互溶,(如乙醇注入法);溶剂和水不溶解,但水相过量,(如乙醚注#31#2003年3月曹宁宁,等:脂质体的制备方法及研究进展入法);溶剂和水不溶解,但溶剂过量,(如逆相蒸发法).1)乙醇注入法[23]:将磷脂与胆固醇等类脂质及脂溶性药物溶入乙醇,该溶液经注射器迅速注射到磷酸盐缓冲溶液(或含水溶性药物)中,形成脂质体.直径约25nm.其主要缺点是包封率低,且乙醇很难除去. 2)乙醚注入法[24]:将磷脂与胆固醇等类脂质及脂溶性药物溶入有机溶剂中(多用乙醚),该溶液经注射器缓缓注入加热至50e (并用磁力搅拌)的磷酸盐缓冲溶液(或含水溶性药物)中,不断搅拌至乙醚除尽为止,即得大的多孔脂质体.将其混悬液通过高压乳均机两次,所得成品大多为单室脂质体,少量为多室脂质体,粒径绝大多数在2um 以下.优点是方法较温和,包封率高且被氧化的可能性小,缺点是速度慢不适合大量制备.如头孢菌类脂质体[26]可用此法制得. 3)逆相蒸发法[27]:将磷脂等膜材溶于有机溶剂如氯仿、乙醚等,加入待包封药物的水溶液进行短时超声,直至形成稳定的W/O 型剂,然后减压蒸发除去有机溶剂,达到胶态后,滴加缓冲液,旋转帮助器壁上的凝胶脱落,然后,在减压下继续蒸发,制得水性混悬液,通过凝胶色谱法或超速离心法,除去未包封的药物,即得到大单层脂质体.此法适用于包裹水溶性药物、大分子生物活性物质如各种抗生素、胰岛素免疫球蛋白、碱性磷脂酶、核酸等.2.3 表面活性剂增溶法脂质薄膜、多层脂质体或单层脂质体与胆酸盐、脱氧胆酸盐等表面活性剂混合[27],通过离心法或凝胶过表1 脂质体的制备方法及参数Table 1 Preparation methods and parameters of liposome类别方法直径(L m)包裹体积(l/mol)包裹效率(0Þ0)M LV 手摇法0.4~3.5 3.55~15UVL逆相蒸发法0.2~1.011.735~65乙醚注入法0.1~0.423~3138~46膜挤压法0.2 1.3824.9洗涤剂除去法0.1 2.412.0钙离子熔化法0.2~1.07.010~15S UV超声波法0.025~0.050.8)乙醇注入法0.03~0.110.5 1.0法兰西挤压法0.03~0.08))高压乳化法-0.10.6970滤法或透析法除去表面活性剂,就可获得中等大小的单层脂质体此法适用于制备脂溶性蛋白类药物的脂质体,但这个方法并不作为脂质体的主要制备方法.它的优点是:方法温和,并不产生水解和氧化;表面活性剂/类脂比随意变化,以得到满意的尺寸. 它的缺点是:除去表面活性剂时需要渗析,这一过程需要几个甚至几十个小时.3 脂质体形成原理和脂质的组成3.1 脂质组成各种脂质和脂质混合物均可用于制备脂质体,而磷脂是最常用的[28].磷脂的主要成分是磷脂酰胆碱,磷脂酰乙醇胺,磷脂酰丝氨酸,磷脂酰甘油,磷脂酸等.其结构可简述为有一个离子型(至少是强极性链)的/极性头0和两条疏水性的高级脂肪烃长链(非极性尾部)组成,在某一特定浓度条件下,其极性头与极性头部分相结合,非极性尾部与非极性尾部相结合,而形成一个稳定的双分子层结构.构成脂质的另一类物质是胆固醇,它在膜中主要起着改变纯磷脂层性质的作用,它像/缓冲剂0一样起着调节膜结构/流动性0的作用.3.2 结合超声波分散法和离心法说明脂质体形成原理如图1所示,加入到磷脂和胆固醇的有机溶剂的水溶液在超声作用下分散为小水滴.磷脂、胆固醇吸附在水滴表面形成一层单分子膜,从而生成油包水(W/O)微乳液.将微乳液转移到缓冲水溶液上后,有机溶剂中多余的磷脂、胆固醇在与缓冲液的油水界面迅速生成一层单分子膜,在离心作用下,油相中的小水滴穿过油水界面的单分子膜并被其包围,在水相中形成脂质体.图1 脂质体的形成原理Fig.1 Formation principle of liposome#32#天 津 理 工 学 院 学 报 第19卷 第1期4脂质体作为药物载体的优点及对其表面修饰的目的脂质体作为一种内层含有水相的封闭的圆球型双层膜,用于药物释放系统,具有两个独特的优点:1)可以在其内水相包封水溶性药物,也可以在外层双层膜包封脂溶性药物;2)它和天然生物膜的生物相溶性比较好,在药物学应用中,安全性可靠.然而,脂质体不论其组成、尺寸大小和表面所带电荷如何,它都能够在静脉给药1h 后被网状内皮系统(RES)截留[29].因此,对脂质体进行表面修饰的主要目的是:(1)延长脂质体的半衰期和提高它在血液循环中的稳定性;(2)改变脂质体的生物学分布;(3)产生靶向效应;(4)使脂质体具有独特的性能,如使它具有对pH、温度和光等外界刺激产生敏感性.5种新型脂质体1)温度敏感脂质体:脂质膜在由/凝胶态0转到液晶结构时,其磷脂的脂酰链紊乱度及活动度增加,膜的流动性也增大,此时包封的药物的释放速率亦增大,此温度称为脂质体的相变温度.根据这一原理制备的脂质体成为温度敏感脂质体.2)pH敏感脂质体:根据肿瘤附近的pH值比周围正常组织低的事实,设计了pH敏感脂质体.其原理是pH低时可导致脂肪酸羧基的质子化而引起六方晶体(非相层结构)的形成.而它的形成则是膜融合的主要机制.如白喉霉素A pH敏感脂质体,DNA pH敏感脂质体.3)免疫脂质体:免疫脂质体是机体修饰的脂质体的简称.近年来,将癌细胞当作抗原细胞,使产生对抗这种癌细胞的单体,然后将这种抗体结合到脂质体上,从而使这种脂质体能够将药物定向输送到癌细胞,起到良好的疗效.4)掺入糖脂的脂质体:将糖脂链的一部分用棕榈酰或具有适当间隔基的胆淄醇基取代得到糖类衍生物,再与含药脂质体混合,在适当的条件下孵育,即得到掺入糖脂的脂质体.这种脂质体可改变其在组织内的分布,且稳定性好.5)前体脂质体:前体脂质体通常为干燥,具有良好流动性能的颗粒或粉末,贮存稳定,应用前与水水合可分散或溶解成等张的脂质体,这种脂质体解决了稳定性和高温灭菌等问题,为工业生产奠定了基础.6)聚合脂质体:聚合脂质体是构成脂质体的每个类脂分子通过共价键的形式连接起来的一种新型脂质体,通过共价键把脂质体的双分子膜与表面活性剂分子连接起来.可显著提高其稳定性,降低粒子的融合与聚集,使脂质体中药物渗漏显著降低,延长了有效期.7)磁性脂质体:磁性脂质体是在脂质体中掺入铁磁性物质制成.8)声振波敏感脂质体:将含有声振波敏感分子的脂质体药物给予患者,在其体外施声振波于所选择的靶位区域,使药物在脂质体内释放出,以增加组织细胞对药物的摄取,使靶位的药物浓度升高,从而降低全身毒性.9)光敏脂质体:光敏脂质体是将光敏物质的药物包裹在脂质体内,用来进行光学治疗,当在一定波长的光照射时,脂质体膜与囊泡物质间或脂质体之间发生融合作用而释放药物.无论是何种脂质体,都可分为3种类型:小单层状囊;大单层状囊和多层状囊.这3种类型的脂质体各有优缺点.各种类型脂质体的性能比较见表2.表2不同类型脂质体的性能比较结果Table2Performance of different type of liposome 脂质体种类优点缺点多层状囊的包封体积大,包封性能好,稳定相当好形状大小不均匀,难包封聚合物;很难有效地将包封物输送入皮肤细胞小单层状囊的形状大小均匀包封的有效体积较小,难包封聚合物,容易出现互溶现象.大单层状囊的能包封聚合物,包封的性能好,包封的体积大大小不均匀6脂质体研究展望研究证实,利用神经甘酯[30]或者聚乙二醇(PEG)衍生物对脂[31~34]质体进行表面修饰可以提高其稳定性.另外,Sunamoto等人[35~37]也利用多糖衍生物包覆脂质体,能够有效地延长脂质体的体内循环时间.除此之外,一系列的生物相容性合成高分子,无论是中性的或是荷电的,都已被用于提高脂质体的稳定性而得到较多的研究.近期的研究工作证实,高分子作为脂质体的包覆材料不仅只是扮演一个被动的保护角色,而且可能在实际上通过接受外来的刺激而参与控制药物的#33#2003年3月曹宁宁,等:脂质体的制备方法及研究进展释放过程.今后随着科学技术的发展和脂质体生产工艺研究的深入,相信会创造出更多更好的新型脂质体,使脂质体得到更广泛的应用.参考文献:[1]Bangham A D,Standish M M,Watkins J C.Diffussion ofunivalent inos across the lamella of swollen phospholipids [J].J.M ol.Biol.1965,13:238)252.[2]M artin C,Woodle,Danilo D L asic.Sterically stabilizedliposomes[J].Biochimica et Biophysica Acta,1992,1113:171)199.[3]王闻珠,邓英杰.脂质体肺部给药研究进展[J].沈阳药科大学学报,2000,17(3):226)229.[4]Lasic D D.L iposomes.From Physics to Application[M].Elvev ier:Amsterdam,1993.[5]Gregoriadis G.Liposome T echnology[M].Boca Rato n:CRC 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浅谈靶向脂质体在中药领域中的应用
域 的应 用。
关键词 ： 靶向脂质体 ； 中药
中图 分 类 号 ： ７４ 文 献 标 识码 ： 文 章 编 号 ： ０ Ｑ３ Ａ １ ２一Ｉ０ （ ＯＯ Ｏ ～ ０ ６－ １ ０ １８ ２ ｌ ） ｌ ００ ０
ห้องสมุดไป่ตู้
最大程度地发挥药物的疗效 ， 同时又能降低药 物的毒副作
用， 使它在到达 靶器官 之前 不易失活 ， 提高 它的生物 利用 度。但是在研究中发现， 仪一常春藤皂苷 的含量较低 ， 且不 易购买 ， 其他 的成分 又尚未 明确 ， 就要求 我们在研 究 中 这 药多成分靶 向脂质 体的时候 尽可能地 对其 成分做好基 础 研究 ， 便于 目后质量评价体系的建立。
但 大 多 处在 技 术 审评 和临 床 研 究 阶 段 ， 注 射 用 硫 酸 长 春 如
脂质体研究时 ， 质量控制成分 一般 选择含量最高 的活性单
体成分 。沈央 在三 七总皂苷脂 质体 药剂学 性质的考 察
中， 以人参皂苷 Ｒ 。 ｂ 作为 Ｐ Ｓ脂质体的质 量控制指标成 分 Ｎ
测定包封率 、 体外泄 露。固然 ， 择单一性 含量 最高 的活 选 性成 分进 行 质量控 制是合 理且 方便 易行 ， 但如 果能够将 Ｒ ｇ 作为第二指标加上是否会更好呢？双指标 对中药多成 分靶 向脂质体的质量控制 是否 具有新的意义？此外 ， 当中 药的活性成分不明确 的时候制备靶 向脂 质体 ， 其质 量又 该 选择怎样 的指标 进行控 制？我院对 黄褐毛 忍冬进行 了多 年、 大量的药理学研究 ， 证实黄褐毛 忍冬 总皂苷 （ 含 一常 春藤皂 苷等 ） 具有 很强 的保 肝作用 ， 能够增 加谷胱 甘肽的 含量 ， 增加肝脏抗坏血栓含量 ， 导肝金属疏蛋 白， 诱 降低肝 微粒体细胞色素 Ｐ一 ５ 口 。但 以 仅一常春藤皂苷 为例， ４ ０ ］