分子荧光光谱实验报告

分子荧光光谱实验报告

一、实验目的：

1.掌握荧光光度法的基本原理及激发光谱、发射光谱的测定方法；学会运用分子荧光光谱法对物质进行定性分析。

2.了解荧光分光光度计的构造和各组成部分的作用。

3.了解影响荧光产生的几个主要因素。

二、实验内容：

测定荧光黄/水体系的激发光谱和发射光谱；

首先根据已知的激发波长（如果未知，则用紫外分光光度计进行测量，以最大吸收波长为激发波长）测定发射光谱，得到最大发射波长；然后根据最大发射波长测定激发光谱，得到最大激发波长；然后在根据最大激发波长测定测定发射光谱；

根据所得数据，用origin软件做出光谱图。

三、实验原理：

某些物质吸收光子后，外层电子从基态跃迁至激发态，然后经辐射跃迁的方式返回基态，发射出一定波长的光辐射，此即光致发光。光致发光现象分荧光、磷光两种，分别对应单重激发态、三重激发态的辐射跃迁过程。本实验为荧光光谱的测定。

激发光谱：在发射波长一定的条件下，被测物吸收的荧光强度随激发波长的变化图。

发射光谱：在激发波长一定的条件下，被测物发射的荧光强度随发射波长的变化图。

各种物质均有其特征的最大激发波长和最大发射波长，因此，根据最大激发波长和最大发射波长，可以对某种物质进行定性的测定。

四、荧光光谱仪的基本机构

五、实验结果与讨论：

吸收池

光源

检测器

单色器

信号显示系统

单色器

截去所有的激发光和散射光只允许荧光通过

激发光通过

450

500

550

600

650

700

050000

100000

150000

200000

S 1 / R 1 (C P S / M i c r o A m p s )

Wavelength (nm)

S1 / R1

固定激发波长473nm

荧光黄/水体系 第一次发射光谱

250

300

350

400

450

500

550

100000

200000

300000

400000

S 1 / R 1 (C P S / M i c r o A m p s )

Wavelength (nm)

S1 / R1

固定发射波长511nm

荧光黄/水体系 第一次激发光谱

500

550

600

650

700

100000

200000

300000

400000

S 1 / R 1 (C P S / M i c r o A m p s )

Wavelength (nm)

S1 / R1

固定激发波长489nm

荧光黄/水体系 第二次发射光谱