CD2相关蛋白在足细胞分化中的作用
第五章免疫细胞
第四节 抗原提呈细胞
凡能加工、处理抗原，并将抗原信息 呈递给淋巴细胞的一类免疫细胞（APC）
专职 单核/巨噬细胞、树突
状细胞、B细胞
非专职 内皮细胞、上皮
细胞等
单核-巨噬细胞 B淋巴细胞
树突状细胞
(一)单 核 吞 噬 细 胞（MON和Mφ）
包括骨髓中的前单核细胞、外周血中的单 核细胞和组织内的巨噬细胞，具有重要的抗 感染、抗肿瘤和免疫调节的作用。 （一）表面标志：
二、免疫细胞的膜表面分子
免疫细胞膜表面存在着大量不同种类的 蛋白质分子。这些分子与免疫细胞的分化 成熟和免疫功能发挥密切相关。 免疫细胞的膜表面分子是区分和鉴别不 同免疫细胞及其亚群的重要标志。 分化抗原、粘附分子、膜受体。
第二节 T淋巴细胞
T淋巴细胞是来自胚肝或骨髓的始祖T 细胞，在胸腺内微环境作用下分化发育成 熟的淋巴细胞，又称胸腺依赖的淋巴细胞 简称T细胞。 介导细胞免疫应答，并在TD—Ag诱导 的体液免疫应答中起重要的辅助和调节作 用。
植物血凝素（PHA）受体
刀豆蛋白（ConA）受体
美洲商陆（PWM）受体
分化抗原（CD 抗原/分子）
CD3 CD4
生物学功能
与TCR相连，稳定TCR结构，传递细 胞活化信息
为MHCⅡ类分子的受体
CD8
CD28 CD2
为MHCⅠ类分子的受体
为B7分子的受体 即淋巴细胞相关抗原-2（LFA-2）， 为LFA-3的受体或绵羊红细胞 （SRBC）的受体
1、T细胞的表面标志
特有的细胞表面的膜分子， 包括抗原受体、分化抗原(CD)抗原、 MHC抗原、黏附分子等。 这些分子是T细胞识别抗原、与其他免 疫细胞相互作用以及接受信号刺激并产生 应答的物质基础，也是鉴别和分离T、B细 胞的重要依据。
【国家自然科学基金】_肌动蛋白细胞骨架_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140731
2010年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52
1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106
科研热词 推荐指数 细胞骨架 7 肌动蛋白 4 足细胞 2 蛋白质组学 2 分化 2 cd2相关蛋白 2 鼻咽肿瘤 1 黏附 1 骨髓间后干细胞 1 骨形念蛋白-7 1 钙调蛋白结合蛋白 1 钙调蛋白 1 转录因子 1 足细胞相关蛋白 1 足细胞:细胞骨架蛋白 1 超微结构 1 血管平滑肌细胞 1 血管内皮细胞黏附分子 1 血管内皮细胞 1 血管 1 蛋白质类 1 蛋白组学 1 蛋白相互作用 1 膜片钳技术 1 肿瘤转移 1 肿瘤细胞 1 肿瘤浸润 1 肿瘤侵袭 1 肌动蛋白细胞骨架 1 肌动蛋白类 1 细菌脂蛋白类 1 细胞极性 1 细胞松弛素b 1 细胞周期 1 纽蛋白 1 纤维母细胞生长因子 1 红斑狼疮,系统性 1 稀土 1 磷脂酶d 1 癌 1 病原微生物 1 电纺丝 1 生长 1 生物信息学 1 牵张激活钾离子通道(sakcs) 1 潜伏膜蛋白1 1 流场压力 1 日本血吸虫 1 成骨细胞 1 平滑肌22α 1 大鼠心房肌细胞 1 增殖 1
医学免疫学练习试卷9(题后含答案及解析)
医学免疫学练习试卷9(题后含答案及解析)题型有：1. A1型题1．如果Ig单体中一条重链是δ链，则另一条应为A．△链B．θ链C．Ⅱ链D．N链E．H链正确答案：C2．TCR基因表达的特点是A．体细胞突变频率高于BCRB．N区插入多于BCRC．具有同种型排斥现象D．可发生类别转换E．可分别表达膜型和分泌型分子正确答案：B3．CDR2是A．CD2的受体B．Ig可变区的一段氨基酸序列C．绵羊红细胞受体D．一种跨膜蛋白质E．一种黏附分子正确答案：B4．CD4分子结合A．MHC-Ⅰ类分子的IS样区B．MHC-Ⅱ类分子的IS样区C．MHC-Ⅰ类分子的肽结合区D．MHC-Ⅱ类分子的肽结合区E．TCR正确答案：B5．关于免疫耐受的描述，错误的是A．免疫耐受是机体对抗原刺激表现出的特异性”免疫不应答”现象B．T和B细胞都可发生免疫耐受C．免疫耐受是机体对任何抗原都不应答D．胚胎期接触抗原容易导致耐受E．中枢免疫耐受状态可持续终身正确答案：C6．各种单体抗体分子都有的特性是A．分子量在10万以下B．能结合补体C．能促进吞噬D．具有两个完全相同的抗原结合部位E．H链与L链借非共价键相联正确答案：D7．关于T细胞超抗原，错误的是A．只需极低浓度即可激活较大量某一亚型的T细胞B．无须经APC加工、提呈C．有严格的MHC限制性D．可分为内源性和外源性两类E．活化T细胞时与TCR分子结合正确答案：C8．免疫球蛋白的遗传差异表现在A．Fc段B．高变区C．同种型决定基D．同种异型决定基E．独特型决定基正确答案：D9．T细胞受体(TCR)A．在相同的部位结合抗原肽和超抗原B．由免疫球蛋白链组成C．在遇到抗原后大量表达D．与抗原肽的结合不足以活化T细胞E．两条链是相同的正确答案：D10．CD4+Th细胞在抗体生成起重要作用。
其作用机制是A．活化的Th细胞通过BCR与B细胞相互作用B．Th细胞与B细胞的相互作用不受MHC限制C．活化Th细胞表达CD40L，为B细胞活化提供协同刺激信号D．Th细胞分泌IL-1帮助募集更多的B细胞E．活化的Th细胞合成MHC-Ⅱ类分子将抗原提呈给B细胞正确答案：C11．在T细胞活化和产生细胞因子时，除了TCR的信号传导外还需要的协同刺激信号提供者是A．IL-2B．CD28C．FcγR-ⅠD．Fas/LE．MHC-Ⅱ类分子正确答案：B12．在CD4+T细胞介导的细胞免疫应答中A．APC提供加工成三维结构的抗原肽B．抗原肽与TCR结合，MHC-Ⅱ类分子与CD3结合，产生第一信号C．Ig△和lgE将第一信号传入细胞内D．APC表面的B7分子和CD58结合产生协同刺激信号E．IL-2促进T细胞活化、增殖、分化正确答案：E13．能产生B细胞活化所需第2信号的分子对是A．IL-2与IL-2RB．CD8与MHC-I类分子C．CD40与CD40LD．Fas与FasLE．BCR与B细胞表位正确答案：C14．不具有抗原呈提功能的是A．巨噬细胞B．并指状细胞C．郎格汉斯细胞D．B细胞E．辅助性T细胞正确答案：E15．在TD抗原诱导的体液免疫应答中A．需要APC提供IL-2B．APC将外来抗原加工成B细胞决定簇C．在抗原肽和MHC-Ⅱ类分子双信号作用下CD4+T细胞活化D．B细胞活化的双信号由BCR与抗原分子、B7与CD28分子产生E．浆细胞合成分泌特异性抗体正确答案：E16．执行适应性免疫应答的细胞是A．γδ细胞B．△E细胞C．B1细胞D．NK细胞E．吞噬细胞正确答案：B17．膜型IgM和血清IgMA．特异性不同B．Ig类别不同C．编码V区基因不同D．C末端不同E．轻链不同正确答案：D18．在一项科学研究中观察到，研究者所获得的某一群淋巴细胞表面不表达CD3、CD19、CD28、CD5，但表达CD16和CD56。
高中生物高考模块检测卷(一)
模块检测卷(一)(教师独具)(时间：75分钟分数：100分)一、选择题(每小题2分，共50分)1.(2021·陕西师大附中质检)下列有关生物体中元素和化合物的叙述，正确的是()A.性激素在核糖体上合成，经内质网加工再由高尔基体分泌B.血红蛋白含有Mg2＋且参与O2运输，叶绿素含有Fe2＋且吸收可见光C.血浆渗透压主要由无机盐维持，组织液渗透压主要由蛋白质维持D.控制细菌性状的基因位于拟核的DNA分子上和质粒上2.(2021·湘东六校联考)某同学在显微镜下观察到了一种结构简单、有细胞壁且寄生在动物细胞内的原核生物——衣原体。
下列有关衣原体的叙述，错误的是()A.置于蒸馏水中的衣原体不会因吸水过多而涨破B.衣原体细胞的物质运输效率比动物细胞的高C.衣原体利用宿主细胞内的核糖体合成蛋白质D.衣原体细胞中的基因能同时进行转录和翻译3.(2020·皖南八校联考)下列关于细胞和细胞结构的叙述，错误的是()A.功能不同的生物膜中，其蛋白质的种类和数量也是不同的B.能进行光合作用的细胞可以没有叶绿体C.被称为“软黄金”的黑枸杞，其果实呈深黑色，是由液泡中色素的种类和含量导致的D.植物细胞的细胞膜和细胞核膜具有选择透过性，而细胞壁和核孔具有全透性4.(2021·四川南充市联考)下列有关细胞中糖类和核酸的叙述，正确的是()A.所有活细胞都含有脱氧核糖核酸但并非都含有淀粉B.细胞中的某单糖可作为合成糖原和核酸的共同原料C.淀粉和核酸都是由许多单体连接而成的生物大分子D.多糖和核酸都因其单体排列顺序的不同而种类不同5.(2021·鄂东南省示范性高中联考)细胞代谢在日常生活和生产中应用广泛，下列方法合理的是()A.冬季蔬菜大棚可用蓝色薄膜提高农作物的光合速率B.夜间蔬菜大棚可适当提高温度，有利于提高产量C.土壤板结后松土最主要的目的是促进农作物根系吸收水分D.充入一定量的氮气可以延长水果蔬菜储藏的时间6.(2021·湖南益阳市质检)如图曲线表示的是温度和酶活性的关系，此曲线不能说明的是()A.在温度达到T b之前，酶的活性随温度的升高而增强，之后随温度的升高而降低B.当温度为T b时，酶的活性最高C.B点时酶的活性最高，B点后随着温度升高，酶的活性逐渐下降D.C点时酶的活性很低，降低温度，酶的活性可以上升7.(2021·山东青岛调研)下列有关细胞全能性的叙述，正确的是()A.不分裂的细胞一定不具有全能性B.细胞全能性的表现需经历细胞分化过程C.一般情况下，细胞分化程度越高，全能性越容易表现出来D.细胞分化过程中通过改变遗传物质形成各种各样的细胞8.(2021·东北育才中学模拟)下列有关细胞呼吸的叙述，正确的是()A.有氧条件下葡萄糖可进入线粒体被氧化分解B.可利用酵母菌在无氧条件下发酵产生酒精C.细胞呼吸可为蛋白质的合成直接提供能量D.破伤风芽孢杆菌在有氧条件下容易大量繁殖9.(2021·河南天一大联考模拟)为研究光合色素提取实验中二氧化硅颗粒大小(目值越大，表示颗粒越细)对叶绿素提取量的影响，某研究小组利用新鲜的菠菜叶片进行了一系列的色素提取与定量测定实验，实验结果如下表。
足细胞损伤的诱导途径：血管紧张素Ⅱ-足细胞瞬时受体电位阳离子通道蛋白6信号通路
足细胞损伤的诱导途径：血管紧张素Ⅱ-足细胞瞬时受体电位阳离子通道蛋白6信号通路姚丹丹;马瑞霞;翟丽慧;李作林;李臻【摘要】BACKGROUND:Transient receptor potential channel C6 (TRPC6) is a new and important slit diaphragm-associated protein in podocytes involved in regulating glomerular filter function. Glomerular TRPC6 expression is closely associated with proteinuria in diabetic kidney disease. OBJECTIVE: To investigate the expression of canonical TRPC6 in mouse podocytes induced by high glucose, and to explore the possible mechanism of diabetic kidney disease. METHODS:Mouse podocyte cels were cultured and divided into normal glucose group (5.6 mmol/L D-glucose), normal control group (5.6 mmol/L D-glucose+25 mmol/L mannitol) and experimental groups which were in the environment of high glucose (30 mmol/L). The experimental groups included high glucose group, valsartan treatment groups (10-5 mol/L) and U73122 control group (10μmol/L U73122). After 48 hours, the expressions of mRNA and proteins of TRPC6, nephrin and angiotensin II (AngII) were detected respectively by real-time quantitative PCR and western blot analysis. RESULTS AND CONCLUSION:Compared with the normal control group, the expressions of mRNA and proteins of TRPC6 and angiotensin II were markedly elevated in the high glucose group (P < 0.01), while the expressions of mRNA and proteins of nephrin were decreased (P < 0.01). The mRNA and proteins of TRPC6 and angiotensin II expressions were significantly down-regulated byvalsartan (P < 0.05,P < 0.01), while the mRNA and protein expressions of nephrin were effectively up-regulated (P < 0.05). Compared with the high glucose group, the expressions of mRNA and proteins of TRPC6 and angiotensin II were ameliorated in the U73122 control group. The expressions of mRNA and proteins of TRPC6, nephrin and angiotensin II had no statistical significance between the normal control group and normal glucose group (P > 0.05). Angiotensin II-TRPC6 signaling pathway may mediate high glucose-induced podocyte injury, meanwhile it provides a new theoretical basis for the treatment of diabetic kidney disease, by which the angiotensin receptor blockers can protect podocytes in diabetic kidney disease.%背景：瞬时受体电位阳离子通道蛋白6是足细胞上一种新发现的阳离子通道蛋白，是组成裂隙隔膜重要蛋白之一，其表达变化与糖尿病肾病蛋白尿密切相关。
糖尿病肾病足细胞病理生理机制研究进展
糖尿病肾病足细胞病理生理机制研究进展颜平①张蕊①△①哈尔滨医科大学附属第二医院肾病三科（哈尔滨150001）△通讯作者糖尿病肾病（diabetic nephropathy ，DN ）作为终末期肾功能衰竭的主要病因之一，是糖尿病患者最严重的并发症之一［1］。
越来越多的研究表明糖尿病肾病中尿蛋白的增加与足细胞的功能和形态学改变密切相关。
足细胞是一种独特的、高度分化的终末分化细胞，是肾小球滤过屏障不可分割的组成部分。
糖尿病肾病中足细胞损伤后易发生一系列形态学变化，主要包括足细胞肥大、足细胞上皮间充质转分化（epithelial mesenchymaltransformation ，EMT ）、足细胞脱离和足细胞凋亡［2］。
本文就糖尿病肾病足细胞的病理生理机制研究进展做一综述，为延缓DN 进展提供新的治疗靶点。
1足细胞肥大在糖尿病的早期，肾小球高滤过往往伴随着足细胞肥大，因足细胞是终末分化细胞，受损后不能再生。
一般来说，足细胞可通过细胞肥大适应机械应力，有利于覆盖肾小球基底膜（GBM ）的剥落区域，但过度的压力会造成细胞功能和骨架的失调。
虽然DN 早期足细胞肥大的病理生理学机制尚不十分明确，但动物和人类的研究已经证实肾小球足细胞肥大与DN 的发生有关［3］。
哺乳动物的雷帕霉素（MTOＲ）信号靶点主要由mTOＲC1和mTOＲC2组成，一些研究表明mTOＲC 1与高糖诱导的足细胞肥大密切相关［4］。
最近Zhuo 等［5］应用小干扰ＲNA （siＲNA ）技术证实了AMPK －mTOＲ通路在高糖诱导的足细胞肥大中的作用。
Kim 等［6］发现翻译调控肿瘤蛋白（TCTP ）作为细胞生长的中介信号，在糖尿病小鼠肾小球中高表达，导致足细胞肥大。
细胞周期素依赖激酶抑制蛋白（CKIs ）是一类细胞周期负调控蛋白，荧光双标记法表明TCTP 主要存在于足细胞，TCTP 能激活mTOＲC1信号通路，促进CKIs 的高表达，从而引起足细胞周期停滞和肥大。
环氧合酶-2基因敲低对足细胞相关蛋白表达的影响
Ｐ ｏ ｄ ｏ ｃ ｉ ｎ 、 Ｃ Ｄ２ 相 关蛋 白 （ Ｃ Ｄ ２ ＡＰ ） 的表 达 水 平 。 结 果 ： 与足 细胞 正 常对照组 及 阴性转 染组相 比 ， 足 细
胞Ｃ ＯＸ 一 ２基 因敲 低 组 Ｃ ０Ｘ ＿ ２蛋 白表 达 明 显 降低 、 细胞凋 亡率明显增 高， 而 Ｎｅ ｐ ｈ ｒ ｉ ｎ 、 Ｐ ｏ ｄ ｏ ｃ ｉ ｎ 、 Ｃ Ｄ ２ ＡＰ蛋 白表 达 则 显 著 降低 。 结论 ： 足 细胞 Ｃ Ｏ Ｘ 一 ２基 因敲 低 可 以导 致 足 细 胞 凋 亡 ， 且 足 细胞
摘
要 目的 ： 观察 足 细胞环 氧 合 酶一 ２ （ Ｃ ＯＸ 一 ２ ） 基 因敲低 对 足 细胞 Biblioteka 关蛋 白表 达 的影 响 。方
法： 以条 件 永生性 小 鼠足 细胞 株 为研 究对 象， 分为足 细胞 正 常对 照组 、 足 细胞 Ｃ ０Ｘ 一 ２基 因敲 低 组和
足 细胞 阴性 转 染 组 ， 用 流 式 细胞 仪 检 测 足 细胞 凋 亡 水 平 ， 用 Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ｂ ｏ ｌ ｔ检 测 ＣＯＸ－ ２ 、 Ｎｅ ｐ ｈ ｒ ｉ ｎ 、
ａ ｓ ｓ ｏ ｃ ｉ ａ ｔ ｅ ｄ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ｓ ．Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ：Ｔｈ ｅ ｃ ｏ ｎ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ ｌ ｙ ｉ ｍｍｏ ｒ ｔ ａ ｌ ｉ ｚ ｅ ｄ ｍｕ ｒ ｉ ｎ ｅ ｐ ｏ ｄ ｏ ｃ ｙ ｔ ｅ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｄ ｉ ｖ ｉ ｄ ｅ ｄ ｉ ｎ ｔ ｏ ｔ ｈ ｒ ｅ ｅ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｓ ： ｎ ｏ ｒ —
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科研热词 足细胞 蛋白尿 nephrin 阿霉素肾病 足细胞相关分子 裂孔隔膜 肾小球疾病 羧基端 祛风通络方 抗原 受体相关蛋白 信号转导 heymann肾炎 cd2相关蛋白
推荐指数 3 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2010年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23
科研热词 足细胞 细胞增殖 靶基因 蛋白质谱 蛋白尿 肾脏疾病 肾组织 肾小球系膜细胞 肾小球疾病 肾小球标志物 肾小球 肝炎病毒,乙型 纤维连接蛋白 糖尿病肾病 差异表达 完全互补 多维蛋白鉴定技术 同源基因 免疫调节 乙型肝炎病毒x蛋白 iga dc-sign a 足细胞 7 蛋白尿 4 nephrin 3 血管紧张素ⅱ 2 细胞凋亡 2 信号转导 2 podocin 2 黄芪多糖 1 高表达 1 钙 1 表达量 1 血浆蛋白 1 致病因素 1 腺苷酸环化酶 1 肾损伤 1 肾小球肥大 1 肾小球疾病 1 肾小球滤过屏障 1 肾小球基底膜 1 肾小球内皮细胞 1 肌动蛋白细胞骨架 1 细胞生物学 1 糖尿病肾病 1 祛风通络方 1 环腺苷酸 1 环磷酸腺苷 1 形态特性 1 局灶节段肾小球硬化 1 基底膜 1 受体,亲代谢性谷氨酸盐 1 凤仙白粉病菌 1 凋亡 1 内质网应激 1 信号通路 1 toll样受体 1 signal transduction 1 sig-1r 1 podocytes 1 its 1 camp反应元件结合蛋白质 1 apoptosis 1 angiotensin ⅱ 1
临床医学检验士必做试题（含答案）
临床医学检验士必做试题（含答案）2021 临床医学检验士必做试题（含答案）1.初次免疫应答时，抗体产生的特点是A.早期以IgM 为主B.IgG 与IgM 几乎同时产生C.抗体效价高D.为高亲和性抗体E.维持时间长答案：A 解析: :初次应答抗体产生早期以lgM 为主，抗体效价较低，与抗原亲和力低，维持时间较短；再次应答抗体IgG 与IgM 几乎同时产生，抗体效价高，为高亲和性抗体，维持时间长。
2.在选择培养基(杂交瘤技术)中，中断DNA 主要合成途径的组分是A.次黄嘌呤核苷酸B.胸腺嘧啶核苷酸C.鸟嘌呤核苷酸D.胞嘧啶核苷酸E.氨基蝶呤答案：E 解析: :选择培养基是指HAT 培养基，其中 A 为中断DNA 主要合成途径的组分，H 和T 是DNA 合成的原料。
3.产妇初乳中含量丰富的免疫球蛋白是A.IgGB.IgMC.sIgAD.IgEE.IgD 答案：C 解析: :sIgA 主要存在于胃肠道、支气管分泌液、初乳、唾液、泪液中，是参与黏膜局部免疫的主要抗体。
4.如发生宫内感染，脐带血中升高的lg 是A.IgG B.IgM C.IgA D.IgDE.IgE 答案：B 解析: :IgM 是个体发育最早合成的抗体，也是抗原刺激后体液免疫应答中最先产生的抗体，感染过程中血清IgM 水平升高，说明近期感染，新生儿脐血中若IgM 增高，提示有宫腔内感染。
5.B 淋巴细胞主要的表面标志是A.CD2 B.CD3 C.CD4D.mlgE.TCR 答案：D 解析: :B 淋巴细胞表面标志有mlg、CD19/15、CD21、CD35、CD32、CD40、CD80/86 分子等6.血清中含量最高的补体成分是A.C1 B.C2 C.C3 D.C4 E.C5 答案：C 解析: :血清中共含有30 多种补体成分及调节因子，其中C3 含量最高，作用最重要。
7.可作为半抗原载体的是A.鞭毛B.绵羊红细胞C.牛血清清蛋白D.脂多糖 E.外毒素答案：C 解析: :半抗原载体有蛋白质类，常用的有血清清蛋白、牛血清清蛋白、血蓝蛋白等；多肽类聚合物，常用多聚赖氢酸；大分子聚合物和某些颗粒，如聚乙烯吡咯烷酮、活性炭等8.免疫比浊测定中造成高剂量钩状效应的因素是 A.抗原分子量小 B.抗体效价低C.抗原过量 D.抗体过量 E.抗原抗体亲和力低答案: :：C 解析: :兔疫比浊测定过程中，当抗原过量时，形成的lC 分子小，而且会发生再解离，使浊度反而下降，光散射亦减少，形成高剂量钩状效应9.免疫放射分析法与放射免疫分析法的主要区别在于 A.标记核素不同 B.标记抗体 C.单抗用量少 D.分离法不同 E.定量抗体答案：B 解析: :免疫放射分析法标记抗体，放射免疫分析法标记抗原。
大学细胞生物学考试练习题及答案1611
大学细胞生物学考试练习题及答案161.[单选题]G1 期的长短之所以变化很大,与 G1 期内存在一个校正点或限制点有关,这个点通常称为( )A)R 点B)P 点C)E 点D)C 点答案:A解析:2.[单选题]细胞内Ca2＋的储备库是（ ）。
[中国科学院大学2016研]A)细胞质B)内质网C)高尔基体D)溶酶体答案:B解析:3.[单选题]奢侈基因( )A)只在特定细胞中表达B)只在分裂细胞中表达C)不能表达的基因片段D)多余的基因答案:A解析:4.[单选题]微粉干涉显微镜是将（ ）转变成明暗差A)景深差B)焦距差C)相位差D)色差答案:C解析:5.[单选题]哺乳动物成熟的红细胞（ ）A)没有细胞核B)没有线粒体C)永远失去了分裂能力6.[单选题]下列哪种膜结构模型认为二维流体的膜脂双层是不均一的,存在许多相对稳定的微区结构,它们由一些特殊脂质和蛋白质组成( )A)脂筏模型B)单位膜模型C)流动镶嵌模型D)片层结构模型答案:A解析:7.[单选题]以下物质分子中不能以简单扩散方式透过细胞膜的是（ ）A)H2OB)O2C)尿素D)葡萄糖答案:D解析:8.[单选题]新型冠状病毒是（ ）。
A)DNA病毒B)RNA病毒C)类病毒D)朊病毒答案:B解析:9.[单选题]用磷脂酶处理完整的人类红细胞，以下哪种膜脂容易被降解 （ ）A)磷脂酰胆碱B)磷脂酰乙醇胺C)磷脂酰丝氨酸D)鞘磷脂答案:A解析:10.[单选题]（ ）不是细胞表面受体。
A)离子通道B)酶联受体C)G蛋白偶联受体D)核受体11.[单选题]在SDS-PAGE凝胶电泳中使用的蛋白质变性剂属于（ ）A)阴离子去垢剂B)阳离子去垢剂C)碱性去垢剂D)酸性去垢剂答案:A解析:12.[单选题]减数分裂的标本细胞中观察到V形或O形的染色体，表明细胞处于（ ）A)终变期B)双线期C)粗线期D)偶线期答案:B解析:13.[单选题]动物细胞在体外培养条件下生长情况是（ ）。
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生理学报 Acta Physiologica Sinica, February 25, 2008, 60 (1): 135-142http://www.actaps.com.cn135
Received 2007-05-23 Accepted 2007-07-30This work was supported by the National Natural Science Foundation of China (No. 30500245) and the Science Research Founda-tion of Health Department of Hubei Province (No. NX200510).*Corresponding author. Tel: +86-27-85726380; E-mail: drzhangchun@yahoo.com
CD2相关蛋白在足细胞分化中的作用姜华军1，常 莹2，朱忠华1，刘建社1，邓安国1，张 春1,*
华中科技大学同济医学院1附属协和医院肾内科，武汉 430022；2附属同济医院肝病研究所，武汉 430030摘 要：本文旨在研究肾脏足细胞的分化特点及CD2相关蛋白(CD2-associated protein, CD2AP)在足细胞分化过程中的作用。用RPMI 1640培养基在33 ºC许可条件下培养永生化小鼠足细胞系(未分化组)，转染针对CD2AP的小分子干扰RNA (smallinterfering RNA, siRNA)后置于37 ºC非许可条件下培养(转染组)，并将非许可条件下未转染组作为对照组。用MTT法检测足细胞的生长速度；用RT-PCR方法检测CD2AP、WT1、synaptopodin和nephrin mRNA表达；用Western blot检测CD2AP、WT1和nephrin蛋白表达；用免疫荧光结合激光共聚焦方法检测CD2AP、nephrin、F-actin和tubulin在分化及未分化足细胞中的分布及其共定位情况。结果显示，CD2AP、WT1和nephrin在分化及未分化足细胞中均可稳定表达，而synaptopodin仅表达于已分化足细胞，在未分化足细胞无表达。在足细胞分化过程中，CD2AP和nephrin的表达上调(P<0.05)；CD2AP、tubulin和F-actin在细胞内的分布发生改变，CD2AP与nephrin及F-actin在未分化足细胞中存在共定位关
系。转染特异性siRNA下调CD2AP表达，细胞生长速度明显减慢，synaptopodin mRNA表达下调(P<0.05)，细胞分化迟滞。结果表明，足细胞分化过程中伴随细胞骨架的重新分布和细胞形态的改变；CD2AP可能作为足细胞裂孔隔膜分子与细胞骨架的连接蛋白，在足细胞分化过程中发挥重要作用。
关键词：CD2相关蛋白；足细胞；nephrin；synaptopodin；WT1中图分类号：R329.2；R334.1
Role of CD2-associated protein in podocyte differentiationJIANG Hua-Jun1, CHANG Ying2, ZHU Zhong-Hua1, LIU Jian-She1, DENG An-Guo1, ZHANG Chun1,*
1Department of Nephrology, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430022,
China; 2Institute of Liver Disease, Tongji Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan430030, China
Abstract: To study the cellular changes and the potential role of CD2-associated protein (CD2AP) in podocyte differentiation,conditionally immortalized murine podocyte cell line was cultured in RPMI 1640 medium under permissive condition at 33 ºC. Aftertransfection with CD2AP small interfering RNA (siRNA) the cells were shifted to non-permissive condition at 37 ºC. Simultaneously,untransfected cells were taken as differentiation control. The podocyte proliferation rate was determined by MTT method. Theexpressions of CD2AP, WT1, synaptopodin and nephrin mRNAs were examined by RT-PCR. CD2AP, WT1 and nephrin proteinexpressions were examined by Western blot. The distribution of CD2AP, nephrin, F-actin and tubulin in differentiated and undifferen-tiated podocytes was detected by laser scanning confocal microscopy. The results showed: (1) CD2AP, WT1 and nephrin were stablyexpressed in differentiated and undifferentiated podocytes while synaptopodin was only expressed in differentiated podocytes. (2)CD2AP and nephrin mRNA and protein expressions were up-regulated during podocyte differentiation (P<0.05). (3) CD2AP andtubulin were distributed in the cytoplasm and perinulcear region in undifferentiated podocytes, and F-actin was predominantlylocalized to a cortical belt and paralleled to the cell axis. Under differentiation condition, CD2AP distribution profile was presented asperipheral accumulation, tubulin took on fascicular style and F-actin extended into foot processes in podocytes. CD2AP colocalizedwith nephrin and F-actin in undifferentiated podocytes. (4) After transfection with CD2AP siRNA, the expression of CD2AP was 生理学报 Acta Physiologica Sinica, February 25, 2008, 60(1): 135-142136
partially inhibited and cell growth was arrested; Synaptopodin, the differentiation podocyte marker, was apparently down-regulated;The differentiation of podocytes was delayed. The results demonstrate that podocyte differentiation is accompanied by cytoskeletonrearrangement and cell morphology change. CD2AP might play an essential role in podocyte differentiation.
Key words: CD2-associated protein; podocytes; nephrin; synaptopodin; WT1
足细胞即肾小球脏层上皮细胞，其胞体、足突以及足突间的裂孔隔膜(slit diaphragm, SD)构成了肾小球滤过屏障的最外层，在维持肾小球结构和功能中发挥重要作用[1]。CD2相关蛋白(CD2-associatedprotein, CD2AP)是近年来发现的与蛋白尿发生密切相关的SD分子[2]。已有研究表明，CD2AP与细胞骨架F-actin直接相连，可能参与了胞内众多与F-actin相关的生理活动，如细胞黏附、迁移和维持细胞形态等[3,4]。足细胞是既有上皮细胞特点又有间叶细胞特点的一种特殊分化细胞，在肾脏发育过程中经历了由未分化到高度分化的过程[5]。由于足细胞属终末分化细胞，体外原代培养的足细胞不能传代生长，因此体外研究足细胞的生理特点比较困难。近年来，人们成功构建了H-2Kb-tsA58转基因动物，使足细胞能在体外稳定传代培养[6,7]。目前，足细胞分化过程中的特点、相关SD分子表达的变化等尚未阐明，CD2AP在足细胞分化中的作用尚无文献报道。本研究通过体外培养未分化的足细胞，研究足细胞在分化过程中的形态、生长特点及相关结构蛋白的表达和分布变化，初步探讨CD2AP在足细胞分化中的作用。1 材料与方法1.1 主要试剂 RPMI 1640培养基、胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)、TRIzol试剂、DNase I均购自Invitrogen公司(美国)；I型胶原蛋白和小鼠重组γ-干扰素(γ-interferon, γ-IFN)购自Sigma公司(美国)；逆转录试剂盒和Taq DNA聚合酶购自MBI公司(立陶宛)；转染试剂Metafectene购自Biontex公司(德国)；兔抗小鼠CD2AP (H-290)多克隆抗体、CD2AP siRNA (m)、control siRNA (fluoresceinconjugate)-A和羊抗小鼠nephrin (N-20)多克隆抗体均购自Santa Cruz公司(美国)；小鼠WT1单克隆抗体购自Chemicon公司(美国)；FITC标记的phalloidin购自Alexis公司(美国)；Oregon Green® 488标记的paclitaxel购自Molecular Probes公司(美国)；FITC标记的羊抗兔IgG和TRITC标记的羊抗兔IgG购自KPL公司(美国)；小鼠抗大鼠GAPDH多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG、辣根过氧化物酶标记的兔抗羊IgG、辣根过氧化物酶标记的羊抗小鼠IgG、FITC标记的驴抗兔IgG以及TRITC标记的驴抗羊IgG均购自武汉三鹰生物技术有限公司。1.2 细胞培养及转染 条件永生化小鼠足细胞是从H-2Kb-tsA58转基因小鼠肾脏中分离后建立的细胞系，由美国Mount Sinai 医学院Mundel教授授权，复旦大学附属华山医院郝传明教授转赠，传代数≤15代。足细胞培养方法参照文献[8]。未分化足细胞用含10% FBS的RPMI 1640培养基(添加小鼠重组γ-IFN)在33 ºC许可条件(permissive condition)下传代培养。诱导分化时，将未分化足细胞置于37 ºC非许可条件(non-permissive condition)下(不添加γ-IFN)传代培养至少2周。倒置显微镜(Nikon ECLIPSETS100，Nikon公司，日本)下观察未分化及已分化足细胞形态。将细胞以2.0×104个/cm2接种于6孔板内，待细胞贴壁生长24~48 h后进行RT-PCR、Western blot及免疫荧光检测。按照Biontex公司转染试剂Metafectene说明书，用CD2AP siRNA (m)转染未分化的足细胞。24 h后荧光显微镜(NikonECLIPSE TE2000，Nikon公司，日本)下观察siRNA转染情况，以流式细胞仪(FACSCalibur，BectonDickinson公司，美国)检测转染效率；48 h后RT-PCR和Western blot检测CD2AP的表达。1.3 细胞计数及MTT检测 细胞计数后将未分化足细胞以1.0×103个/孔接种于96孔板，分别置于33 ºC许可条件下及37 ºC非许可条件下培养，MTT法检测足细胞在不同培养条件下的生长状况(每时间点设6孔)。将未分化足细胞和转染24 h后的细胞均以2.0×105个/孔接种于包被I型胶原蛋白的玻璃培养瓶，置于37 ºC非许可条件下培养，分别在第3和第7日经胰酶消化后，用血球计数板计数细胞的量。每组设3个样本，该实验重复3次。1.4 RT-PCR TRIzol试剂抽提各组细胞总RNA后，取2 μg总RNA，用DNase I去除RNA中痕量基因组DNA，然后按逆转录试剂盒说明合成cDNA。取2 μL cDNA为模板，在Taq DNA聚合