ABO血型鉴定检测中常用实验技术及错误原因分析解决

中外医学研究　２０１０年１０月　第８卷第２２期ＣＨＩＮＥＳＥ　ＡＮＤ　ＦＯＲＥＩＧＮ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　影７雾与检　≯　≯　一　一｜　｜　｜｜誊｜　．　薯。＿｜　曩季．｜　｜ｌｌ｜曩｜。｜　曩…誊叠｜ｌ曩．．曩薯　譬　＿　≯＿　

ＡＢＯ血型鉴定检测中常用实验技术及错误原因分析解决　孙月娥韩君儒　巢湖市第二人民医院（安徽巢湖２３８０００）　

【摘要】　临床工作中血型鉴定工作非常重要，应尽力把错误的发生率降到最低。血型鉴定中各种实验检测技术各有利弊和适用　范围，本文探讨常用的血型鉴定试验技术，并探讨在血型报告中常出现错误的原因及其避免方式。　【关键词】　血型鉴定；　实验技术；错误原因分析解决　ＡＢＯ血型抗原是由ＡＢＯ血型抗原基因编码的特异性糖基转　移酶催化合成的红细胞表面的糖蛋白和糖脂。ＡＢＯ抗原决定簇　共有５种类型，由单糖经转移酶转移到特定核心多糖链的末端生　成，分别决定血型抗原基础物质、Ｈ抗原、Ａ抗原、Ａ１抗原以及Ｂ　抗原的抗原表型。根据红细胞上有或无Ａ抗原或和Ｂ抗原，将　血型分为Ａ型、Ｂ型、ＡＢ型及Ｏ型四种。Ａ型红细胞膜上含有Ａ　抗原，Ｂ型红细胞膜上含有Ｂ抗原，ＡＢ型红细胞膜上含有Ａ、Ｂ　抗原，抗Ａ、抗Ｂ试剂是分别针对Ａ抗原和Ｂ抗原的特异性抗体。　可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ＡＢＯ血型。所　谓正定型，是用已知的抗Ａ、抗Ｂ试剂与受检者的红细胞混合时，　与抗Ａ试剂发生凝集者即为Ａ型，与抗Ｂ分型试剂发生凝集者　即为Ｂ型，与抗Ａ、抗Ｂ试剂均发生凝集者即为ＡＢ型，与抗Ａ、抗　Ｂ试剂均不凝集者即为０型。所谓反定型，是用已知Ａ细胞和Ｂ　细胞来测定血清中有无相应的抗Ａ或和抗Ｂ…由于血型的鉴定　中存在着不同程度的误判，因此，探讨ＡＢＯ『ｆｆＬ型分型鉴定中的错　误原因也是非常重要的。将应用较多的集中实验检测技术和常　见分型错误原因汇报如下。　１　常用试验检测技术　１．１　血凝试验抗体和红细胞在液体介质中发生肉眼可见的凝　集反应。根据操作方法的不同，主要可以分为玻片法、试管法和　全自动微板法。　１．１．１玻片法　目前临床常用的血型鉴定的初筛试验方法是玻　片法，该法根据标准抗体血清与待测红细胞在干燥玻片上是否发　生凝集反应来确定待测红细胞血型，该法操作简单，省时省力。　１．１．２试管法实验室常用的交叉配血试验是应用试管法，在　更大的空间以更敏感的方式来进行血型的分型。　１．１．３全自动微板法是临床常用的血型分类检测方法，通过　标准化加样、孵育、离心、悬浮、静止以及反应前后吸光度值增加　数值的计算，从而达到对血型进行定型与反定型的目的，使献血　者常规ＡＢＯ血型鉴定实现了标准化、批量化、自动化，节约大量　昂贵抗　清、缩短检测时间、操作程序简单，消除了许多人为因素　造成的血型误定。据报道，应用ＡＢＯ血型自动化检测方法进行　正反定型试验，一次判读正确率存９９．８％以上，且能提高检测灵　敏度，使弱凝集标本更易显现。但该法对Ｂ　亚型伴抗Ｂ的判断　有待进一步完善。　１．２酶联免疫吸附试验通过酶联免疫吸附实验的原理、相应　的酶标单抗技术以及酶与底物反应显色的原理达到鉴定血型的　目的。比经典的红细胞凝集抑制实验鉴定血型的方法敏感性要　高。对样本要求小，即使样本在高温下保存４０℃温度下保存８　７０一　个月，样本中仍有超过６０％的Ｐ８４血型物质生物学活性存在，仍　然可以用该法进行血型鉴定。　１．３流式细胞技术通过用荧光素标记人源抗Ａ、抗Ｂ以及相　应的亚型抗体，将待测血样的红细胞稀释分装，入加荧光素标记　抗体，抗原与相应荧光标记抗体结合后用流式细胞仪检测与荧光　标记抗体结合的红细胞，通过软件分析，得出待测细胞中与抗Ａ、　抗Ｂ结合的细胞的百分率，从而得到待测样本的红细胞血型。流　式细胞术能快速、准确地检测大量单个细胞或生物颗粒，且灵敏　度高、重复性好等。适合应用于ＡＢＯ血型亚型的快速鉴定。解　决了急诊交叉配廊不合时，难以做到及时、快速、准确地鉴定供、　受者的ｌ血型亚型的问题　。　１．４微柱凝胶试验用凝胶技术进行抗球蛋白试验可提高试验　的灵敏度及特异性，目前微柱凝胶试验在国外输血领域已逐渐作　为常规应用于ＡＢＯ及Ｒｈ血型定型，未知血型抗体筛查以及直接　抗球蛋白试验。该法与经典盐水法相比，所需样本量少，操作简　单，结果明确可靠、易判读，灵敏度高，重复性好，对需大量或反复　输血的患者配血既安全又快速。　目前ＡＢＯ血型的实验室检测方法较多，既有操作较为简便　易行的血凝试验，也有结果较　为可靠的微柱凝胶试验和基因型检测。这也给医务人员提　出了新的挑战，如何优化出更准确更经济更省时省力的检测方法　是目前研究的新趋势。更简单更方便的试纸条也许是下一步要　追求的新的优化方法　。　２　常见血型报告错误的原因　２．１　血型测定的错误　哑型检测时因患者红细胞悬液过浓或过　淡，抗原和抗体比例不当，使反应不明显，误判为阴性反应；离心　速度及时问不适合，出现假阳性或假阴性结果。在这两种情况　下，又不做反定型检测，都可以造成定型报告错误。为防止血型　鉴定的错误，在进行血型鉴定的过程中，一定要严格执行操作规　程，正、反定型同时进行，使用质量合格的试剂及细心观察结果，　就可避免很多不必要的错误。　２．２检验者工作粗心的错误　由于工作精力不集中造成一些人　为错误，如试管上未编号，离心后拿错试管，不按规定操作（应先　加血清，然后再加红细胞悬液），填写血型结果时笔误，都会造成　血型报告结果的错误。在工作中应认真细致，精力集中，严格把　住血型定型这一关。　２．３临床医生的错误临床医生在填写输血申请时，没有做血　型检测，或者填错申请单或者输血检验报告单夹错。护十抽取血　标本时，弄错输血患者的姓名和床号，都会造成血型报告的错误。　中外医学研究　２０１０年１０月　第８卷第２２期ＣＨＩＮＥＳＥ　ＡＮＤ　ＦＯＲＥＩＧＮ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　一蔓≯　毒　薯　≯　．　曩　－－－　垮誊　！ｔ｜　｜≯－－－≯　曩　！譬　誊鼻．．１　－碧　≯　≯　Ｉ　Ｉ誊｜蓦菩∥薯　≯｜Ｉ　≯｜　

应注意此现象并加以避免。　２．４血站发Ｉ札的错误由于血站发送的血液袋上的血型与血袋　内的血液的血型不符而造成献血者的血型错误。可能是由于血　站人员的工作粗心失误错拿了血型。在工作中应注意力集中，尤　其对于人命关天的输血事件更应该严格把关，设立监督，做到万　无一失。　２．５　疾病导致血型结果的错误　某些疾病可使受检者血液中红　细胞上的抗原减弱或含有较高的冷凝集素，而产生自凝现象。高　球蛋白血症的标本常见红细胞呈缗钱状排列，而干扰血型判断。　如试验结果红细胞呈缗钱状排列，加等渗盐水１滴混匀，往往可　使缗钱现象消失ｌ４　Ｊ。　参考文献　［１］兰炯采，孟庆宝，张印则，等．ＡＢＯ血型基因分型及应用．中国　免疫学杂志，２Ｏｏ２，１８（６）：４３０．　［２］徐树良，戴宇东，田爱民，等．流式细胞术快速鉴定ＡＢＯ血型　亚型．中国输血杂志，２００３，１６（３）：１６５．　［３］胡继征，陆典瑞，李启辉．全自动微板法检测２８３７９例献血者　ＡＢＯ血型的统计分析．国际医药卫生导报，２００３，９（９）：７５．　［４］张萍，陈荇．常见ＡＢＯ血型鉴定错误原因分析．检验医学与临　床杂志，２００９，１（１）：７５—７６．　

【收稿日期】２０１０—０８—０２　（本文编辑：李嫂）　

ａＶＲ导联在逆行Ｐ波起源鉴别中的价值　姜健慧　承德市中心医院（河北承德０６７０００）　

【关键词】ａＶＲ导联；逆行Ｐ波起源；鉴别诊断　逆行Ｐ波指异位激动沿与窦性激动相反的顺序传人心房产　生的Ｐ波，其心电图特征为：ＰⅡ、１１１、ａＶＦ倒置，ＰａｖＲ直立…。逆　行Ｐ波因起源点位置不同，可位于相关的ＱＲＳ波群之前、之中或　之后，当逆行Ｐ波位于ＱＲＳ之前时，根据Ｐ—Ｒ间期判断其起源　一般并不困难，但笔者观察了一组由于逆行Ｐ波起点不清或Ｐ—　Ｒ问期离散导致逆行Ｐ波起源诊断有误的病例，现分析如下。　１资料与方法　１．１一般资料　选择笔者所在医院心电图室２００７年１月～　２００９年７月描记的心电图中有逆行Ｐ波的病例１０７例，剔除逆行　Ｐ波位于ＱＲＳ波群之中及之后的病例，进行回顾性分析。　１．２方法１０７例均采用ＧＥ　ＭＡＣ５０００十五导联同步心电图仪　进行描记，打印方式为３×４＋３个节律导联，３个节律导联选择　Ⅱ导联、ａＶＲ导联及Ｖ１导联。　２结果　２．１　１０７例中，逆行Ｐ波符合上述诊断标准者１０２例，占　９５．３％，Ｐ波起点欠明确导致逆行Ｐ波不典型者５例，占４．７％；Ｐ　—Ｒ间期在各同步导联中数值相近者９８例，占９１．６％，Ｐ—Ｒ间　期在各同步导联中差异较大者９例，占８．４％。　２．２　５例Ｐ波起点欠明确者，其Ｐ—Ｒ波在Ⅱ导联显示直立，类　似窦性Ｐ波，但Ｐ—Ｒ间期＜０．１２　ｓ，仔细观察同步描记的ａＶＲ导　联，该Ｐ波呈正负双向，Ｐ—Ｒ间期＞０，１２ｓ，为心房下部逆传激动　心房的逆行Ｐ波，推断该Ｐ—Ｒ波在Ⅱ导联应为负正双向，其起　始负向成分振幅较小或位于等电位线上不易辨认。　２．３　９例Ｐ—Ｒ间期离散者，其特征为：Ｐ—Ｒ间期在ａＶＲ导联最　长，其他导联相应较短。　３讨论　３．１位于相关ＱＲＳ波群之前的逆行Ｐ波可见于起源于心房下　部的激动逆传心房，及起源于交界区上部的激动逆传心房，此２　种情况的鉴别主要依赖于Ｐ—Ｒ间期的数值，即：当Ｐ—Ｒ间期≥　０．１２　ｓ时，为起源于心房下部的激动，当Ｐ—Ｒ间期＜０．１２　ｓ时，　为起源于交界区上部的激动　Ｊ，可见诊断逆行Ｐ波起源Ｐ—Ｒ间　期的数值起着至关重要的作用。准确的测量Ｐ—Ｒ间期的关键　是确定Ｐ波起点的位置。上述５例Ｐ—Ｒ波在Ⅱ导联显示直立，　Ｐ—Ｒ间期＜０．１２ｓ，而在同步描记的ａＶＲ导联中，该Ｐ波呈正负　双向，因起始负向成分振幅小或位于等电位线上，造成Ｐ波起点　不明确，使逆行Ｐ波的确定出现疑问，Ｐ—Ｂ间期的测量出现误　差。Ｐ—Ｒ波在Ⅱ导联显示不清，在ａＶＲ导联清晰可见，可能是　由于Ｐ—Ｒ波起始向量的方向朝向右上方，与Ⅱ导联接近垂直，　而与ａＶＲ导联夹角较小，在ａＶＲ导联的投影较早的缘故，在这种　情况下，确定逆行Ｐ波的起点时参照ａＶＲ导联的数值较为可靠。　３．２上述９例Ｐ—Ｒ间期离散者，其最长的Ｐ—Ｒ间期亦为ａＶＲ　导联，其机理亦应与Ｐ波起始向量方向于各导联轴之间的夹角不　同有关。因此认为，位于ＱＲＳ波群之前的逆行Ｐ—Ｒ波起源的确　定应以ａＶＲ导联Ｐ—Ｒ间期测量的数值为准，辅以其他导联Ｐ—　Ｒ问期的测定，才能使Ｐ—Ｒ问期的测量较少出现误差，为逆行Ｐ　波起源的确定提供更可靠的依据。　参考文献　［１］杨志寅．心电学词典．中国医药科技出版社．２００６：２２２．　［２］山东医学院附属医院．实用心电图学．山东：山东科学技术出　版社．２００７：５９．