绞股蓝皂甙的提取研究 毕业论文
微波干法辅助提取绞股蓝总皂苷的研究
微波干法辅助提取绞股蓝总皂苷的研究
郭辉力;邓泽元
【期刊名称】《食品与机械》
【年(卷),期】2009(025)001
【摘要】以绞股蓝为原料,研究微波干法辅助提取绞股蓝总皂苷的新工艺.通过正交试验,得出微波处理最佳工艺参数为:功率800 w、100%微波、辐射时间2 min.在此条件下,经微波预处理70%乙醇快速浸泡提取,所得的绞股蓝总皂苷提取率为8.37%.与传统的乙醇回流提取法进行比较,发现微波干法辅助提取绞股蓝总皂苷提取时间缩短了近9 h,提取率提高了15.8%.
【总页数】4页(P68-71)
【作者】郭辉力;邓泽元
【作者单位】食品科学与技术国家重点实验室,南昌大学高等研究院,江西南昌330047;食品科学与技术国家重点实验室,南昌大学高等研究院,江西南昌330047【正文语种】中文
【中图分类】TS2
【相关文献】
1.藜麦皮总皂苷微波辅助提取工艺及其抗氧化活性研究 [J], 杨洁;高凤祥;杨敏;边红聿;张仕刚;赵二劳
2.纤维素酶-微波辅助法提取金樱子总皂苷的工艺研究 [J], 王慧竹;陈帅;朱岩;李佳俊;钟方丽
3.响应曲面法优化微波辅助提取陕产瞿麦中总皂苷的工艺研究 [J], 张爽;杨创勃
4.微波辅助山银花中总皂苷提取工艺研究及含量测定 [J], 张卫军;颜清丽
5.微波辅助超声法提取刺梨总皂苷的工艺研究 [J], 陈帅; 张兴涛; 姜茹心; 陈春雪; 赵桂芝; 王慧竹
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中药绞股蓝药理作用的研究发展
中药绞股蓝药理作用的研究发展摘要】绞股蓝[Gynostemma Pentaphyllum(Thumb)Mak]为双子叶纲葫芦科绞股蓝属多年生草质藤本植物，常用其全草或根茎。
绞股蓝味甘、苦，性寒，无毒，具有化痰止咳、清热解毒、益气健脾等功效。
而现代研究发现绞股蓝中含有皂苷、黄酮、有机酸、氨基酸、多糖及微量元素等有效成分。
现笔者就对中药绞股蓝药理作用的研究发展作一综述。
【关键词】绞股蓝药理作用绞股蓝有非常重要的药用价值，又被称之为“七叶胆”，主要在我国长江以南地区生长，在《金匮要略》中很早就有所记载，是葫芦科绞股蓝属植物。
传统中医认为绞股蓝能够化痰止咳、解毒清热、益气安神及降血压。
现代药理研究则发现，绞股蓝具有抗肿瘤、调节免疫、降血压、降血糖、降血脂、抗动脉粥样硬化、抗衰老、抗氧化、保护肝脏、抗溃疡及保护肾脏等作用，现就将其中主要的药理作用做一综述。
1.抗肿瘤的作用徐长福[1]等学者通过动物实验证实了，小鼠在给予绞股蓝总皂甙（GP）后其肿瘤的体积明显减少，小鼠进展期S180肉瘤的生长也被显著的抑制；小鼠S180肉瘤坏死率及肿瘤坏死面积与肿瘤总面积的比率（TNA /TTA）明显增加；巨噬和瘤内淋巴细胞浸润数量明显增加；实验研究也得出，使用了绞股蓝总皂甙（GP）后K562细胞的生长受到明显的抑制。
由此表明，绞股蓝具有一定抗肿瘤的活性，其中的绞股蓝总皂甙（GP）不仅能杀伤肿瘤细胞，并且能增强患者的免疫功能发挥一定的抑制肿瘤生长的作用。
杜小燕[2]等学者则并通过肿瘤抑瘤率为指标，通过小鼠移植瘤模型研究绞股蓝中的多糖成分对肉瘤S180的体内抗肿瘤作用；用不同浓度的绞股蓝多糖通过MTT法检测其对体外培养的肿瘤细胞增殖的抑制作用；用比色法对给予小鼠不同浓度的绞股蓝多糖后对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能以及其释放NO进行测定；同时也测定了给予不同浓度绞股蓝多糖后对1L-1β和TNF-α含量的影响。
结果得出，小鼠体内肿瘤在给予绞股蓝多糖后其生长受到明显的抑制并且随剂量的增加呈依赖关系；但给予绞股蓝多糖体后外培养的肿瘤细胞未受到明显的影响；经不同浓度绞股蓝多糖刺激的巨噬细胞活性增加；并且对巨噬细胞产生的细胞因子也有一定促进作用。
绞股蓝胶囊中绞股蓝总皂苷的稳定性研究
张微血管 、 降低血液黏度 ， 改善微循环 ， 从而改善血 流动力学
各 项 指 标 Ｊ 。外 伤 性 周 围 神 经 损 伤 采 用 奥 扎 格 雷 钠 作 用 于
受 累 末 梢 神 经 病周 围 的 毛细 血 管 使 之 变 发 生 血 流 加 速 ， 而 继
苷Ｒｌ ｂ 对照 品溶液 ５ ｌ２ｍ ／ １ 分别 置具塞试 管 中 ， ０ （ ｇｍ ） 在 ６ ℃水浴中蒸干 ， ５ Ｏ 加 ％香草 醛一 冰醋酸溶液 ０ ２ｍ ， ． ｌ高氯 酸 ０ ８ｍ ， ． ｌ摇匀 ， 密塞 ， ６ 于 ＆Ｃ水浴 中加热 １ ｉ， 出立 即用 ５ｍ ｎ 取 自来水冷却 ， 各加冰醋酸 ５ｍ ， ｌ摇匀 ， ５０— ０ ｍ波长处 于 ０ ６０ ｎ 测定吸收光谱 ， 结果均在 ５０ｎ ５ ｍ处有最 大吸收波长 ， 故选 择 ５０ａ 为测 定 波 长 。 ５ ｍ
甲醇 溶 解 ， 量 转 移 到 ｌ １ 瓶 中 ， 稀 释 至 刻 度 ， 匀 ， 定 Ｏｍ 量 并 摇 作 供试液 。
３ 实验 方 法 与 结 果 ３１ 最 大 吸 收 波 长 的 确 定 ． 精 密 吸 取 供 试 液 １ ｌ人 参 皂 Ｏ ，
健脾 ， 益气和血 ， 痰化瘀 ， 祛 降血 脂。用 于高 血脂 ， 见有 心悸
２００～３０ ０条 直 径 ５ ｍ 以上 的 有 髓 轴 突 增 殖 ， 说 明 可 ０ ０ 并
性周 围神经损伤的作用 ， 但其确切的作用机制 尚需进一步 研
究 。 总之 ， 本组 资料 采 用 奥 扎 格 雷 钠 联 合 大 剂 量 维 生 素 Ｂ 。
治疗外伤性周 围神经损 伤取得 了满意疗效 ， 有效 率 ７ ． ％ ， ６３
绞股蓝的化学成分与药理作用
绞股蓝的化学成分与药理作用【摘要】随着对绞股蓝进一步的开发和利用,人们对绞股蓝化学成分和药理作用的研究日渐深入,并且取得了很大的进展。
文章就绞股蓝化学成分和药理作用方面的研究近况进行了系统的总结,特别是在绞股蓝新皂苷的发现和多糖成分的研究方面及绞股蓝抗肿瘤、降血糖、降血脂、免疫调节、护肝等方面进行了论述,为绞股蓝临床应用及进一步研究提供了参考和依据。
【关键词】绞股蓝;化学成分;药理作用绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum(Thunb) Makino]为葫芦科绞股蓝属多年生草质藤本植物,又名七叶胆、甘茶蔓、七叶参等,早在我国《救荒本草》中已有记载。
主要分布在东南亚及我国长江以南的广大地区,资源丰富。
绞股蓝中含有皂苷、多糖、黄酮类化合物、有机酸和微量元素等多种化学成分。
绞股蓝能够有效地保护心、脑、血管和肝脏,降低血脂、降胆固醇、降转氨酶、调节免疫和抗诱变,而且在抗衰老、抗疲劳、抗辐射和消除自由基的同时,还能改善神经系统功能、调节内分泌活动[1]。
因此,研究绞股蓝中的化学成分和药理作用有利于进一步开发和利用绞股蓝,明确绞股蓝中的药理活性成分。
本文旨在介绍了绞股蓝的化学成分和药理作用,为绞股蓝的应用提供参考。
1 绞股蓝化学成分绞股蓝植物中含多种皂苷成分,绞股蓝皂苷(Gypenoside,GP)含有人参皂苷相同的四环三萜达玛烷型结构。
1976年日本人永井正博等在绞股蓝中分离得到了人参二醇和2α-羟基人参二醇,首次揭示了绞股蓝中含有达玛烷(dam-marane)型皂苷类成分。
随后,人们对绞股蓝的化学成分进行了大量的研究,迄今发现的绞股蓝皂苷(GP)总共达136种,其中有绞股蓝皂苷(GP)Ⅲ、Ⅳ、Ⅷ、Ⅻ与人参皂苷(Gin) -Rb1, -Rb3, -Rd和-F2完全相同,此外还分离得到了人参皂苷Rd3,K,其余为人参皂苷的类似物。
1990年后,又有52种绞股蓝皂苷被相继报道。
方氏等[2]从绞股蓝地上部分提取分离出芦丁、商陆苷和丙二酸。
绞股蓝研究近况
绞股蓝研究进展摘要：绞股蓝含有绞股蓝皂苷及绞股蓝多糖等多种成分，具有广泛的药理作用。
近年来人们对其鉴别方法、药理作用和临床研究均有深入发展。
关键词：绞股蓝化学成分鉴别方法药理作用临床研究绞股蓝为葫芦科（Cucurbitaceae）植物绞股蓝Cynostemma pentaphyllum (Thunb．)Makion的干燥全草。
又名小苦药、甘蔓茶、仙草、七叶胆、五叶参、公罗锅底、五叶藤、遍地生根等，有“南方人参”和“第二人参”的美誉。
绞股蓝广泛分布于亚热带，全世界约有16种和3个变种,我国有15种和3个变种,分布于秦岭和长江以南地区,其中以云南分布最广、资源最丰富、种类最多,多数分布于海拔1 000～2000 m。
[1]绞股蓝是一种非常重要的中草药，其早在明清《救荒本草》、《农政全书》、《植物名实图考》中就有记载[2]，近年来日益受到重视并得到广泛及深入的研究。
绞股蓝主要药效成分为绞股蓝皂甙(Gypenoside，Gyp)，其中有与人参皂甙(Ginsenoside，Gin)相同的成分，具有调血脂、抗衰老、抗肿瘤等多种生理功效, 由此引发了对绞股蓝植物的科研和开发热潮。
本文主要综述了绞股蓝的研究近况。
1.绞股蓝的植物学特征：多年生草质攀援植物,茎细弱,长达4-5m,具分枝,有棱,被白毛。
叶膜质，鸟足状，互生，小叶5-7(9)，有小叶柄，叶片卵状长圆形或披针形，中央小叶较长，长3-16cm,宽2-6cm，边缘具锯齿，两面均疏被短硬毛。
茎卷须常2歧，稀单一。
雌雄异株，圆锥花序，雄花直径3mm，花萼5裂，裂片三角形，长约0.7mm；花冠淡绿色或白色，5深裂，裂片卵状披针形，长2.5-3mm；雄蕊5，花丝合生。
雌花圆锥花序，远较雄花序短小，花梗基部有1-2mm长的苞片，雌花直径4mm；子房下位，球形，花柱3，短而叉开，柱头2裂。
浆果球形，成熟后黑色。
花期7-8月，果期9-10月[3]。
刘世彪等论文[4]所记载的绞股蓝植物形态与上述有较大区别。
水溶性绞股蓝皂苷和多糖提取工艺
多糖，过滤提取液，测定皂苷和总糖提取率。
1.2.2 绞股蓝多糖含量的测定
1.2.4 正交试验设计
总糖含量测定采用蒽酮比色 法[12]，标 准 曲 线 回 归
选 择 超 声 波 功 率 (A）、 超 声 波 作 用 时 间 (B)、 浸 提 温
方程为：y=0.35x-0.008 2
度 （C）及溶液的酸碱度(D)等 4 个 影 响 因 素 ，各 取 3 个
1.2.1 绞股蓝皂苷含量的测定
1.2.3 不同提取工艺对绞股蓝皂苷和总糖提取率的影响
标 准 曲 线 法 ： 通过测量人参皂苷含量，求出回归方
取绞股蓝颗粒 4 份各 10 g，分别按照一种水浸提、
程 ：A =2.824 C +0.080 （0.033 mg/mL ～0.33 mg/mL，R2 = 三种超声强化浸提等 4 种不同工艺提取绞股蓝皂苷和
水溶性绞股蓝皂苷和多糖提取工艺
易湘茜 1，2，3，曾世祥 4 （1.广西中医学院，广西 南宁 530001；2.中国科学院南海海洋研究所，广东 广州 510301；
3.中国科学院，研究生院，北京 100049；4.南宁市轻工食品研究所，广西 南宁 530031）
摘 要：以绞股蓝为原料，采用热水浸提、超声波强化、大孔树脂层析等方法，对绞股蓝中的主要活性成分皂苷和多 糖进行综合提取、分离和纯化。通过正交试验对提取工艺条件进行优化，得出最佳工艺条件为超声波功率 20 W、作用 时间 15 min、85 ℃、pH9。绞股蓝皂苷的得率和纯度分别为 3.06 ％和 90.16 ％；绞股蓝多糖的得率和纯度分别为 10.34 ％ 和 81.52 ％。 关键词：超声强化；绞股蓝；皂苷；多糖
在超声波的空化粉碎的特殊作用下绞股蓝的细胞组织随着溶剂中瞬间产生的空化泡崩溃而破裂使溶剂渗透到细胞中增加了溶剂穿透力从而使细胞中的成分溶于溶剂之中提高有效成分溶出速度和次数从而缩短提取时间加速提取过程从而达到快速高效提取有效成分的目的
绞股蓝皂甙(gypenoside,GP)的药理作用分析
绞股蓝皂甙（gypenoside，GP）的药理作用分析绞股蓝的功效主要来源于其所含有的多种皂甙成分。
那绞股蓝的皂甙药理作用有哪些呢？小面，咱们一块来看看吧！绞股蓝作为五加科意外的含有与人参皂甙相似结构皂甙的植物，因其所含的化学成分较多，药理活性广泛，湿气不仅可以供药用，还可以制成保健滋补品。
有着极为重要的开发利用价值。
目前，虽然研究者们对绞股蓝的药理作用进行了大量的研究工作，但大多数停留在器官水平。
而且，很多药理作用的机制还没有被阐述明白，各项研究工作还需要更加深入的开展，使绞股蓝得以利用，造福人类！在1976-1987年间，已经从绞股蓝中分类鉴定了82种与人参皂甙有类似骨架的达玛烷型绞股蓝皂甙（gypenoside，GP）。
具有多种活性，证明其对癌细胞的控制，减慢衰老速度、防溃疡、减轻疼痛、降低血脂方面都有作用。
并且已经得到了药理和临床研究的证实。
在我国，本身就有着丰富的植物资源，近年来对绞股蓝的研究更为广泛。
因为绞股蓝的英文是Gynostemma pentaphylla，所以很多研究者将绞股蓝简称为（GP）。
实验人员进行了绞股蓝皂甙对动力学及心房胜利特性影响。
研究人员用GP对犬静脉注射绞股蓝（以下简称GP），5、10mg/kg，可明显降低血压和外周血管、脑血管与冠状血管阻力、增加冠脉流量，减慢心率，使心脏张力时间指数下降，降低心肌耗氧量，且上述作用略强于人参皂甙。
鉴于绞股蓝皂甙能明显降低血压，而不明显影响心肌收缩性和心脏泵血功能、研究者们推测其降压作用与其扩张外周血管有关。
由于绞股蓝皂甙降低血压的同时，降低脑血管血流了的作用并不明显，因此认为GP对高血压，心脑血管痉挛性疾病及心功能不全的人可能有一定的益处。
绞股蓝、人参、三七，它们都含有皂甙成分，人参是最早被人们所熟知并广泛应用的。
近些年，三七和山里印象绞股蓝也被越来越多的人所熟知并利用。
希望大家真正能从绞股蓝的功效中获得帮助！。
应用均匀设计优化提取绞股蓝多糖工艺的研究大学毕业论文英文文献翻译
毕业设计（论文）外文文献翻译文献、资料中文题目：应用均匀设计优化提取绞股蓝多糖工艺的研究文献、资料英文题目：Optimization of polysaccharides extraction fromGynostemma pentaphyllum Makino using Uniform Design 文献、资料来源：文献、资料发表（出版）日期：院（部）：专业：班级：姓名：学号：指导教师：翻译日期：2017.02.14应用均匀设计优化提取绞股蓝多糖工艺的研究罗巅辉王昭晶蔡婀娜摘要：本文应用均匀设计优化提取绞股蓝多糖提取率的工艺条件，对以下四个工艺条件进行了研究，包括水提时间(min），料液比（g/ml），浸泡时间(min），水提温度(℃) 。
确定了优化条件，并通过数学模型绘制了三维响应曲面图。
T检验和P值表明浸泡时间和水提时间(X2X4)在响应值中出现了互动效应，接着还出现了水萃取时间 (X4)的线性项，浸泡时间和水提温度(X2X3)的互动效应。
考虑到效率因素，绞股蓝萃多糖提取的优化条件是：料液比比为1:67，浸泡时间10分钟，水提温度为95℃，水提时间为15分钟。
在优化条件下，多糖提取率为11.29%，接近预测提取率。
因此，应用均匀设计法从绞股蓝中提取多糖，能够极大缩短提取时间。
关键词：绞股蓝；多糖；提取；均匀设计摘要1.前言 (2)2.材料与方法 (3)2.1实验材料与仪器 (3)2.2绞股蓝中多糖的提取 (3)2.3多糖含量的测定 (3)2.4多糖提取率的计算 (3)2.5多糖提取因素的研究 (3)2.6实验设计和数据分析 (3)3.1单因素的实验结果 (5)3.1.1浸泡时间对多糖提取率的影响 (5)3.1.2料液比对多糖提取率的影响 (5)3.1.3.水提温度对多糖提取率的影响 (6)3.1.4水提时间对多糖提取率的影响 (6)3.2数据分析和均匀设计 (7)4.结论 (11)碳水化合物能够作为细胞的结构组成部分和能量源泉，这一点是大家所公认的。
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第1页 绞股蓝皂甙的提取研究 摘 要 本文主要研究绞股蓝皂甙的提取工艺，采用单因素法及正交设计法，以绞股蓝皂甙提取量为参考指标，对影响绞股蓝皂甙提取工艺的因素进行优选，结果表明，绞股蓝皂甙的最佳提取工艺为：浸提温度为100℃，浸提时间为1.5h～2.0h，浸提溶剂量为50倍。
关键词：绞股蓝皂甙；提取工艺；单因素法；正交设计 第1页
目 录 引言…………………………………………..……………………………………… 4 1材料与方法…………………………………..……………………..………………4 1.1实验材料 ………………………………………………………….……………4 1.2实验试剂………………………………………………………….………………5 1.3实验仪器…………………………………………..…………...…………………5 1.4绞股蓝皂甙的提取研究………………………………..…………...……………5 1.5绞股蓝皂甙含量的测定………………………………………………………… 5 1.5.1预处理 …………………………………………………………………………5 1.5.2样品液的配制 …………………………………………………………………5 1.5.3标准液的配制 …………………………………………………………………6 1.5.4结果计算 ………………………………………………………………………6 1.6 实验分析方法 …………………………………………………………………6 1.6.1. 单因素法………………………………………………………………………6 1.6.2. 正交设计法……………………………………………………………………7 2结果…………………………………………………………………………………7 2.1单因素法分析对绞股蓝皂甙得率的影响……………….………………………7 2.1.1浸提时间对绞股蓝皂甙得率的影响……………………….………………… 7 2.1.2浸提温度对绞股蓝皂甙得率的影响 …………………………………………8 2.1.3浸提溶剂量对绞股蓝皂甙得率的影响…………………………………….… 8 2.2正交设计法分析绞股蓝皂甙的最适提取条件 ……….……………………......9 3 讨论 ………………….………………………………………………………… 10 3.1绞股蓝干样与鲜样的选择………………………………………………………10 3.2标准品的选择 ……….………………………………………………………… 10 3.3最大波长的选择 …….………………………………………………………… 10 3.4净化方法的选择 …….………………………………………………………… 10 第1页
3.5绞股蓝皂甙提取温度的选择 ………………………………… ……………… 10 3.6 绞股蓝皂甙提取时间的选择 ………………………………… ………………10 4结论.…………………………………………………………….………………….11 5参考文献……………………………………………………….…………………. 12
引 言 绞股蓝 (Oynostemma pentaphyllum(Thunb)makino) 系葫芦科绞股蓝属多年生草本植物，绞股蓝在长江以南的地区均有分布，野生资源丰富。它的医疗和保健价值已有研究报道。在临床上除普遍用作防癌药物外 ，对白细胞减少症 、高血脂症及胃溃疡、肝炎等均有确切疗效。系统药理学和临床试验也证明：绞股蓝中含有独特的生物活性物质，其主要有效成分为人参皂甙、黄酮类物质、多糖以及多种氨基酸和微量元素[1]。因此，已有以绞股蓝为原料研制各种保健品的报道。有些产品(如饮料、医药品和食品添加剂等)需要先浸提。绞股蓝总皂苷片作为药品已经上市多年，用于高脂血症，见有心悸气短、胸闷肢麻、眩晕头痛、健忘耳鸣、自汗乏力或脘腹胀满等心脾气虚、痰阻血瘀者。所以绞股蓝皂甙，可以有效的调节儿童生理机能、增强肌体免疫力、清除激素类药物副作用、抗癌、抗疲劳、抗缺氧、抗热、抗衰老、促进细胞新陈代谢，强壮补矗等作用。对大脑中枢有良好的镇静、兴奋双向调节作用及白嫩肌肤等功能．且无毒副作用，无三致作用，是目前医药及保健品行业大量需要的原料[2-4]。 为了最大限度提取并保持绞股蓝的有效成分，保证绞股蓝药材资源的充分利用，提高经济效益，本文以绞股蓝为材料，设置浸提温度、浸提时间、浸提溶剂量3个因素，采用单因素法和正交实验设计，研究提取绞股蓝皂甙保健成分的最佳浸提条件，从而使绞股蓝的有效成分能得到充分利用。此工艺提取物质质量好，生产成本低，提取速度快，其中所含的保健因子适合应用于各类保健品中[5,6]。
1 材料与方法 1.1实验材料 第1页
绞股蓝，浙江缙云 1.2实验试剂 香兰素冰醋酸溶液：称取5g香兰素，加冰已酸溶解并定溶至100ml 高氯酸：分析纯 天津市鑫源化工厂 20060902 人参皂甙Re粉：中国药品生物制品检定所 PT大孔树脂：南开大学试剂厂 人参皂甙Re标准溶液：精确称取人参皂甙Re标准品0.020g，用甲醇溶解并定容至10.0 ml：即每毫升含人参皂甙Re2.0m g 冰醋酸：分析纯 国药集团化学试剂有限公司 20070911
1.3实验仪器 双联打浆机,型号 MDJ 真空浸提灌,型号SLG-500 电热鼓风干燥箱, 型号DGF-5AB 20目细度的滤布, 夹层锅, 型号100L 恒温水浴锅，浙江海宁新华医疗器械厂，型号HHS-2 大孔树脂预柱，江苏省江阴第二医疗器械厂，型号DT 微量进样管，宁波市镇海玻璃仪器厂 电子天平，余姚市金诺天平仪器有限公司，型号JT 721分光光度计，上海精密科学仪器有限公司，型号16C14
1.4绞股蓝皂甙的提取 称取1g绞股蓝样品→放入高型烧杯→加入50ml水→盖上表面皿→温度控制在100℃→提取过程中每 5 min搅拌1次→水提1.5h左右→浸提后用滤纸过滤定容至100 ml。
1.5绞股蓝皂甙含量的测定步骤 第1页
1.5.1预处理 用25ml纯化水洗柱，洗液弃去（水洗）→ 用25ml70％的酒精洗柱，洗液弃去（酒精洗）→再用25ml纯化水洗柱，洗液弃去（再水洗） 1.5.2样品液的配制 用1ml移液管移取1ml样品入柱→用25ml纯化水洗柱，洗液弃去→用25ml70％的酒精洗柱，接收洗液（可用25ml容量瓶，也可用蒸发皿直接接收）→60℃水浴挥干（注：水温不高于70℃）→加入0.2ml5％的香兰素冰醋酸溶液（用1ml吸管吸）→加0.8ml高氯酸（分两次加，洗涤蒸发皿）→60℃水浴→10min迅速冷却→加5ml冰醋酸，混匀，倒进10ml的比色皿中，比色，波长560nm，与标准管一起比色测定 1.5.3标准液的配制 精密称取人参皂苷 Re标准溶液（2.0mg/ml）50ul放入具塞试管中→加入新配置的0.2ml5％的香兰素冰醋酸溶液（用1ml吸管吸）→加0.8ml高氯酸（分两次加，洗涤蒸发皿）→60℃水浴，10min迅速冷却→加5ml冰醋酸，摇匀，作为供试品溶液→另取15 ml具塞试管中→加入新配置的0.2ml5％的香兰素冰醋酸溶液（用1ml吸管吸）→加0.8ml高氯酸（分两次加，洗涤蒸发皿）→60℃水浴，10min迅速冷却→加5ml冰醋酸，摇匀，作为空白溶液→取供试品溶液和空白溶液，在 560 nm的波长处分别测定吸收度。 1.5.4结果计算
X= A1 ×C÷ V × 100 × 1 A2 m 1000 1000 X----试样中总皂甙量,g/100g
A1----测液的吸光度值 A2----标准液的吸光度值 C----标准管人参皂甙Re的量,ug V----试样稀释体积ml m----试样质量
1.6 实验分析方法 第1页
1.6.1. 单因素法 根据初步试验结果，选用三个单因素，分别为浸提温度，浸提时间，浸提溶剂量，并且每因素选择3个水平进行试验，以绞股蓝皂甙得率为考察指标进行优选。 1.6.2. 正交设计法 根据初步试验结果，选用三因素三水平正交试验表，以温度(A)、料液比(B)、提取时间(C)为试验因素，每个因素取 3个水平(见表 1)。取样品，并按照正交设计进行实验，以绞股蓝总皂苷的提取量为考察指标，进行提取工艺的优选。 表1 正交设计水平、因素编码表
2 结果 2.1单因素法分析对绞股蓝皂甙得率的影响 2.1.1浸提时间对绞股蓝皂甙得率的影响 绞股蓝原料的总质量约为1g，在温度为100℃,在料液比为1:50的条件下，在不同的时间下浸提,结果见表2。 表2 浸提时间对绞股蓝皂甙得率的影响
水 平 因 素 A B C （温度/℃） （料:液） （时间/h） 1 60 1:40 1.0 2 80 1:50 1.5 3 100 1:60 2.0 第1页
从表2可以看出，浸提时间对绞股蓝皂甙的浸出率影响较大，有增加的趋势， 1.5h~2.0 h的浸出率达到最高值。 2.1.2浸提温度对绞股蓝皂甙得率的影响 绞股蓝原料的总质量约为1g，料液比为1:50，浸提时间为1.5h~2.0 h的前提下, 在不同的温度下浸提,结果见表3。 表3 浸提温度对绞股蓝皂甙得率的影响
从表3可以看出，随浸提温度的升高，绞股蓝皂甙的浸出率呈逐渐增加的趋势，100℃时的浸出率达到最高。 2.1.3浸提溶剂对绞股蓝皂甙得率的影响 绞股蓝原料的总质量为1g，浸提时间为1.5h~2.0 h，温度为100℃，在浸提溶剂不同的条件下浸提，结果见表4。 表4浸提溶剂对绞股蓝皂甙得率的影响
浸提时间（h） 绞股蓝原料的总质量（g） 绞股蓝皂甙含量（mg） 得率（%） 1 1.006 13.078 1.30 1.5 1.003 14.844 1.48 2 1.006 14.889 1.48
温度(℃) 绞股蓝原料的总质量（g） 绞股蓝皂甙含量（mg） 得率（%） 60 1.008 9.274 0.92 80 1.009 9.383 0.93 100 1.003 14.844 1.48