肿瘤坏死因子受体与炎性肠病发病机制研究进展

・４４３・第２２卷第４期医学研究生学报Ｖ０１．２２Ｎｏ．４

２００９年４月ＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｅｄｉｃａｌ

ＰｏｓｔｇｒａｄｕａｔｅｓＡｐｒ．２００９

・综述・

肿瘤坏死因子受体与炎性肠病发病机制研究进展魏晓为综述，李宁，朱维铭审校黧竺耋堕噎雹兰曼普外研究所，江苏南京２１０００２（南京军区南京总医院）……～…’……一

摘要：肿瘤坏死因子．ａ（ＴＮＦ．Ｏｔ）是一种多效的细胞因子，具有极强的促炎性反应以及免疫调节特性，其在炎性肠病发病机制中的作用已经大量研究证实。ＴＮＦ．仅主要通过细胞膜上的受体ＴＮＦＲＩ和ＴＮＦＲ２发挥生物效应，ＴＮＦＲｌ是ＴＮＦ．ａ信号传导的主要介质，而ＴＮＦＲ２只起辅助作用。近年来，临床和实验研究表明ＴＮＦ—ｏｔ／ＴＮＦＲ２信号传导通路在炎性肠病的炎性反应中起重要的作用。为了深入理解炎性肠病的发病机制并寻找新的治疗方法，文中综述ＴＮＦＲｌ和ＴＮＦＲ２两种受体在炎性肠病的炎侄反应中的不同作用。关键词：肿瘤坏死冈子受体２；发病机制；差异；炎性肠病中图分类号：Ｒ３９２．１１；Ｒ５７４文献标识码：Ａ文章编号：１００８－８１９９（２００９）０４旬４４３－０４

ＰｒｏｇｒｅｓｓｅｓｏｎｔｈｅｒｏｌｅｏｆＴＮＦｒｅｃｅｐｔｏｒｓｉｎｔｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆＩＢＤＷＥＩＸｉａｏ—ｗｅｉｒｅｖｉｅｗｉｎｇ，ＬＩＮｉｎｇ，ＺＨＵＷｅｉ・ｒｕｉｎｇｃｈｅｃｋｉｎｇ

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乒ｎｇ２１０００２，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ）

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ｉｓｋｎｏｗｎｔｏｐｌａｙａｌｌｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｂｏｗｅｌｄｉｓｅａｓｅ（ＩＢＤ）．Ｔｈｅｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ

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ｅｌｄｉｓｅａｓｅ

。引言篓誊夏墓焉荔墨毳嘉簇曼翼怒耋喜篥薯囊

肿瘤坏死因子．仅（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ，ｏｔ，’ｒＮＦ—ａ）少的作用，是肠粘膜炎症反应的核心环节‘卜３１。收穑日期：２００７—１１—１６；修订日期：２００７ｒ１２－２７作者简介：魏晓为（１９８２－），男，江苏海安人，医学博士研究生，从事普通外科专业。通讯作者：朱维铭（１９６３．），男．辽宁鞍山人，主任医师．博士研究生导师．从事普通外科专业。Ｅ—ｍａｉｌ：ｊｕｗｉｍｉｎｇ＠ｙａｈｏｏ．咖１．ｃｎ

万方数据・４４Ｊ４・医学研究生学报２００９年４月第２２卷以’讯Ｆ．ｄ为靶点的治疗药物如英夫利昔单抗亦已在临床广泛应用并取得了良好效果。但长期阻断ＴＮＦ・ｄ易致严重的免疫缺陷，增加感染结核菌、组织胞浆菌、隐球菌以及曲霉等的风险ＨＪ。由于ＴＮＦ一０【主要通过细胞膜上的受体发挥生物学效应，为了发现治疗炎性肠病的新靶点，ＴＮＦ－ａ受体在炎性肠病发病机制中的作用受到关注。肿瘤坏死因子受体（ＴＮＦｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＴＮＦＲ）家族包括ＴＮＦＲｌ和ＴＮＦＲ２，是相对分子质量分别为５５０００和７５０００的蛋白质。两者存在于所有有核细胞上，并通过不同的信号传导途径介导细胞反应【５Ｊ。ＴＮＦＲｌ的细胞内段具有死亡结构域，可通过激活半胱天冬酶（ｃｃａｓｐａｓｅ）和核因子一ＫＢ（ｎｕｃ｜ｅａｒｆａｃｔｏｒ．ｋａｐｐａＢ，ＮＦ．ＫＢ）活性介导凋亡，引起炎性因子、趋化因子以及抗凋亡蛋白的转录。在活化的Ｔ淋巴细胞内ＴＮＦＲｌ介导的细胞凋亡具有抗病毒效果，可有效清除感染受损细胞，维持机体内环境稳定。ＴＮＦＲ２信号可促进胸腺细胞分化及Ｔ细胞增殖【６’７Ｊ，与ＴＮＦＲｌ相比，其细胞内段无死亡结构域，但可通过ＲＩＰ（ｒｅｃｅｐｔｏｒ—ｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ，ＲＩＰ）激酶介导细胞凋亡旧ｊ。ＴＮＦＲｌ和ＴＮＦＲ２两种信号通路的交互作用对于调节细胞内稳态非常重要【９Ｊ。近期研究表明两种受体的功能并无绝对的差异，产生何种作用往往取决于细胞的类型伟ｊ。１ＴＮＦ．Ｑ与ＴＮＦＲ的亲和力差异ＴＮＦ．ｄ具有跨膜型（ｍＴＮＦ—ｄ）和分泌型（ｓＴＮＦ一０【）两种形式。在人体内ｍＴＮＦ．仅是ＴＮＦ一仅基因转录的最初产物，在膜结合金属蛋白酶裂解其细胞外域后释放出ｓＴＮＦ一仅，研究表明ＴＮＦ—Ｏｔ的作用多数是以ｓＴＮＦ－ａ形式产生的，而ＴＮＦＲ２与ｓＴＮＦ—ｄ的亲和力比ＴＮＦＲｌ低约２０倍。长期以来，ＴＮＦＲｌ一直被认为是ＴＮＦ．ｄ信号传导途径的主要介质。但近来发现ＴＮＦＲ２对ｍＴＮＦ一仅具有高度亲和力，并可通过旁分泌或自分泌形式优先被ｍＴＮＦ一０【激活。因此，ｍＴＮＦ—ａ／ＴＮＦＲ２信号系统可能在局部水平上起重要的免疫调节作用¨引。体外研究发现ｍＴＮＦ．∥１＇ＮＦＲ２信号通路在某些炎性疾病中作用是相对独立的，其传导过程并不需要ＴＮＦＲｌ的参与。以ＴＮＦ．Ｑ为靶点的药物临床实验结果支持ＴＮＦＲ２在炎性肠病发病机制中的作用。英夫利昔单抗（Ｉｎｆｌｉｘｉｍａｂ）是一种ｌｓＧｌ人鼠嵌合型单克隆抗体，在体内能够与ｓＴＮＦ—ａ和ｍＴＮＦ—ａ结合，阻断ＴＮＦ－Ｑ以及ＴＮＦＲ之间的相互作用，快速诱导外周血单核细胞以及肠黏膜固有层Ｔ淋巴细胞的凋亡而发挥治疗作用。英夫利昔单抗能明显改善重度及糖皮质激素耐受的克罗恩病患者的临床症状。依那西普（Ｅｔａｎｅｒｃｅｒｐｔ）是一种重组的人可溶性ＴＮＦＲ蛋白，为二聚体融合蛋白，由人类ＴＮＦＲ２的细胞外配体结合部分与人类ＩｇＧｌＦｃ段连接而成。其作用机制为竞争性结合ｓＴＮＦ－仅，但不与ｍＴＮＦ一仅结合，阻断ｓＴＮＦ—ａ和细胞表面ＴＮＦ受体结合，降低ｓＴＮＦ．仅活性，从而干扰ｓＴＮＦ．ｏｔ／ＴＮＦＲ信号途径发挥疗效。该药治疗类风湿关节炎效果明显，但治疗克罗恩病的实验组治疗效果与对照组相比无明显差异。根据ＴＮＦ－仅与ＴＮＦＲ之间亲和力的差异以及上述两种药物作用机制，推；！煲｜ｌｍＴＮＦ．∥ｒＩ’ＮＦＲ２信号级联反应可能在克罗恩病发病机制中起关键作用，而ｓＴＮＦ．∥ｒＩ’ＮＦＲｌ信号通路可能仅起次要的作用一Ｊ。

２ＴＮＦＲ在炎性肠病中表达水平差异在炎性肠病患者以及炎性条件下炎性肠病模型动物的尿液、外周血液、腹水、肠上皮细胞以及肠粘膜固有层Ｔ淋巴细胞中ＴＮＦＲ２表达水平明显上调，且与炎症以及组织损伤严重程度具有一定正相关。ＴＮＦＲＩ表达水平也上升，但程度远不及ＴＮ・ＦＲ２［９，１１’１２】。有文献…１指出２，４，６．三硝基苯磺酸诱导的肠炎小鼠结肠ＴＮＦＲ２基因表达水平较对照组升高６８倍，而ＴＮＦＲｌ仅升高３．４倍。ＴＮＦＲ２与疾病严重程度的正相关性使其在今后有可能成为评价炎性肠病的病情以及组织损伤程度的一项指标【５Ｊ。

ＴＮＦＲ２在克罗恩病和溃疡性结肠炎的组织病理

学分布也存在一定差异，对１０名克罗恩病患者及１３名溃疡性结肠炎患者结肠组织切片免疫组化分析后发现，克罗恩病患者肠上皮细胞ＴＮＦＲ２阳性率为９０％，强阳性率为２５％，染色区域主要分布于隐窝上皮细胞，其他散在分布于内皮淋巴细胞以及肠固有层细胞。溃疡性结肠炎患者肠上皮细胞ＴＮＦＲ２阳性率为８０％，但比克罗恩病患者表达更为强烈，强阳性率达６２％；染色区域同样主要分布于隐窝上皮细胞。两种疾病不同之处是溃疡性结肠炎患者肠黏膜固有层细胞中无ＴＮＦＲ２的表达。正常人结肠组织切片中ＴＮＦＲ２的免疫组化分析结果亦为阴性一１。ＴＮＦ－仅是体内重要的刺激ＴＮＦＲ２表达的细胞

万方数据第４期魏晓为，等肿瘤坏死因子受体与炎性肠病发病机制研究进展・４４５・因子。但体外研究发现，单独ＴＮＦ－仅并不能诱导ＴＮＦＲ２表达，只有在自介素巧（ＩＬ－６）、干扰素（ＩＦＮ）等促炎因子的协同作用下才能引起ＴＮＦＲ２的表达。ＩＬ－６基因敲除小鼠模型也证实了这一点，并提示该过程是通过激活ｌＬ与／ＳＴＡｌ＇３信号通路介导的【８Ｊ３Ｉ。可以认为炎性肠病中过量分泌的ＴＮＦ．仅、ＩＬ－６、ＩＦＮ等促炎因子之间的相互作用是诱导ＴＮＦＲ２表达上调的主要原因。３ＴＮＦＲ基因多态性与炎性肠病目前已知的ＴＮＦＲｌ基因多态性有３个，分别位于外显子１、内显子５和７。州Ｆ砣基因则有更多的多态性，位于启动子区、外显子４、６、９及３’旁侧区。Ｓａｓｈｉｏ等¨４１对１２４名克罗恩病患者、１０６名溃疡性结肠炎患者及１１１名健康人进行了ＴＮＦＲ基因多态性的研究。检测了位于ＴＮＦＲｌ基因外显子１中密码子１２位点的单核苷酸多态性（ｓｉｎｇｌｅｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，ＳＮＰ）以及位于ＴＮＦＲ２基因３’旁侧区１４６６Ａ／Ｇ、１４９３Ｃ／Ｔ两个位点的ＳＮＰ，发现克罗恩病和溃疡性结肠炎患者ＴＮＦＲ２基因多态性的频率明显高于健康人群（分别为２５％和１３．５％），在并发肠内、外瘘及常规治疗（包括营养支持、药物及手术治疗）不敏感的患者中这种差异更为明显，其ＴＮＦＲ２基因多态性频率达４９．２％。丽在同一项研究中，姗１基因多态性在克罗恩病、溃疡性结肠炎患者以及健康人群之间并无显著差异。ＴＮＦＲ２的基因多态性使克罗恩病的发病风险更高，患者对标准治疗方案不敏感以及出现肠瘘的可能性也大大增加。４ＴＮＦＲ在炎性肠病中的作用机制的探究目前临床及实验证据均表明ＴＮＦＲ２在炎性肠病发病机制中起关键作用，而ＴＮＦＲｌ仅处于次要地位。删Ｆ腔基因敲除小鼠经２，４，６一三硝基苯磺酸诱导慢性肠炎后体质量下降和低体温现象与对照组相比明显减少，组织损伤程度减轻，死亡率也大大降低。而ＴＮＦＲｌ基因敲除小鼠的情况正相反。这一结果提示ＴＮＦ／ＴＮＦＲＩ信号通路在肠道慢性炎症中的作用更可能是一种保护机制¨¨。在ＴＮＦＲ２转基因小鼠中也发现肠黏膜同有层单个核细胞过度表达ＴＮＦＲ２后，可加重克罗恩病模型小鼠Ｔｈｌ依赖的慢性肠炎。ＴＮＦＲ２能够抑制肠黏膜同有层Ｔ淋巴细胞凋亡、增强ｒ１１１．１相关细胞因子分泌，并能影响肠上皮细胞内稳态，从而导致炎性肠病慢性炎症的发生发展。在ＴＮＦＲ２信号通路中ＮＦ．ＫＢｐ６５是关键的效应分子，ＴＮＦＲ２可以激活ＮＦ・ＫＢｐ６５的活性，进一步上调肿瘤坏死因子受体相关因子ＴＲＡＦｌ、ＴＲＡＦ２以及两种抗凋亡蛋白ｃ．ＩＡＰｌ、ｃ—ｌＡＰ２来抑制ｅａｓｐａｓｅ－８活性，从而产生抗细胞凋亡作用。此外，活化的ＮＦ．ＫＢｐ６５进入细胞核可直接作用于多种促