高级免疫学考试

名词解释： 1. 半抗原（hapten） 具有抗原性，不具有免疫原性的小分子物质。 2. 半抗原-载体效应 B细胞特异性识别半抗原；蛋白载体含CD4+T细胞表位，被B细胞或其他APC提呈并活化CD4+T细胞。 3. 超抗原（superantigen） 某些抗原物质，只需极低浓度即可非特异激活人体内总T细胞库中2%~20%的T细胞克隆，产生极强的免疫应答。 4. 佐剂（adjuvant） 预先或与抗原同时注入体内，可增强机体对抗原的免疫应答或该表免疫应答类型的非特异性免疫增强物质。 5. 新型疫苗/合成肽疫苗（synthetic peptide vaccine） 根据有效的免疫原的氨基酸序列，设计和合成的免疫原性多肽，以期用最小的免疫原性肽激发有效的适应性免疫应答。 6. MHC 一组决定移植组织是否相容、与免疫应答密切相关、紧密连锁的基因群。人类的MHC成为HLA基因复合体，具有多态性，指群体中单个基因座位存在两个以上不同等位基因的现象。 7. 共刺激分子 为T或B细胞完全活化提供刺激信号的细胞表面分子及其配体。 8. Foxp3（forkhead box p3） 是一种转录因子，是Treg的重要标志，参与Treg的分化和功能，Foxp3缺陷会使得Treg减少或缺如，从而导致严重的自身免疫病。 9. 抗原提呈细胞（APC） 能够加工抗原并以抗原肽-MHC分子复合物的形式将抗原提呈给T细胞的一类细胞。 10. 巨大多功能蛋白酶体（LMP） 可将内源性蛋白降解为6~30个氨基酸残基大小的、C端为多碱基或疏水氨基酸的抗原肽，有利于其与MHC1类分子的抗原肽槽结合。 11. 免疫突触 T细胞与APC表面粘附分子之间通过受体－配体相互作用得以紧密接触，形成了一个瞬时性结构，该结构以TCR-MHC-抗原肽三元结构为簇状中心，周围环形分布着粘附分子，称之为免疫突触 12. 自身免疫调节因子（AIRE） 一种转录控制分子，驱使很多原本仅在外周组织表达的自身抗原在胸腺髓质上皮细胞异位表达。 13. 免疫受体酪氨酸激活基序（ITAM） 活化受体与相应配体结合后，在细胞膜相连的一类蛋白酪氨酸激酶PTK的作用下，其酪氨酸被磷酸化，进一步招募胞内游离的其他蛋白激酶或衔接蛋白，向细胞内传导活化信号。 14. 抗体亲和力成熟 初次免疫应答时，大量抗原可激活表达不同亲和力BCR的B细胞克隆，而这些B细胞克隆大多产生低亲和力抗体。当大量抗原被清楚，或再次免疫应答仅有少量抗原出现时，表达高亲和力BCR的B细胞克隆会优先结合抗原并得到扩增，最终产生高亲和力抗体，即为抗体亲和力成熟。 15. 免疫耐受 机体免疫系统对特定抗原的免疫无应答状态称为免疫耐受，包括自身耐受和诱导耐受 16. 免疫标记技术 将抗原抗体反应与标记技术结合，将已知的抗体或抗原标记上示踪物质，通过检测标记物，间接测定抗原-抗体复合物的一类试验方法。 17. 酶联免疫斑点试验（ELISPOT） 用已知细胞因子的抗体包被固相载体，加入待检的效应细胞，温育一段时间后洗去细胞，如待检效应细胞产生相应细胞因子，则与已包被的抗体结合，再加入酶标记的另一种抗该细胞因子抗体，最后加入底物显色。

简单题： 1. 固有免疫与适应性免疫 固有免疫 适应免疫 获得形式 先天性免疫 无需抗原激发 获得性免疫 需抗原激发 发挥作用时相 早期，快速，数分钟至4天 4-5天后发挥效应 免疫原识别受体 模式识别受体 特异性抗原识别受体 细胞发育中基因重排产生多样性 免疫记忆 无 有，产生记忆细胞 举例 抑菌、杀菌物质，补体，炎症因子 吞噬细胞，NK细胞，NKT细胞 T细胞（细胞免疫-效应T细胞等） B细胞（体液免疫-抗体）

2. T细胞表位与B细胞表位 T细胞表位 B细胞表位 识别表位受体 TCR BCR MHC分子参与 必须 无需 表位性质 蛋白多肽 蛋白多肽、多糖、脂多糖、核酸等 表位大小 8-10个氨基酸（CD8+T细胞表位） 13-17个氨基酸（CD4+T细胞表位） 5-15个氨基酸

表位类型 线性表位 线性表位或构象表位 表位位置 抗原分子任意部位 通常位于抗原分子表面 3. TD-Ag与TI--Ag TD-Ag TI-Ag 结构特点 复杂，含多种表位 单一表位 表位组成 B细胞表位和T细胞表位 重复B细胞表位 T细胞辅助 必需 无需 MHC限制性 有 无 激活的B细胞 B2 B1 免疫应答类型 体液免疫和细胞免疫 体液免疫 抗体类型 IgM、IgG、IgA等 IgM 免疫记忆 有 无 4. 超抗原与普通抗原 超抗原 普通抗原 化学性质 细菌外毒素、反转录病毒蛋白等 普通蛋白质、多糖等

MHC结合部位 α 螺旋外壳 抗原肽结合槽内部 TCR结合部位 Vβ 链 Vα 、Jα 、及Vβ 、Dβ 、Jβ MHC限制性 无 有 应答特点 直接激活大量T细胞 APC处理后激活特异性T细胞 反应细胞 CD4+T细胞 T、B细胞 T细胞反应频率 1/20~1/5 1/106~1/104 5. 灭活疫苗与减毒活疫苗 灭活疫苗 减毒活疫苗 方式 皮下注射 模仿自热感染 剂量 大 小 次数 2次或更多 1次 副反应 较重 较轻 持续时间 短 长 突变 不可能 可能 保存 容易 4℃或冰冻 6. 单克隆抗体的制备 用抗原免疫小鼠，取其免疫脾细胞，与骨髓瘤细胞在PEG作用下融合成杂交瘤细胞，在HAT培养基上选择培养，未融合的细胞死亡，杂交瘤细胞存活，筛选阳性克隆，克隆扩增，大量制备McAb。 7. 细胞因子的特征 小分子蛋白质； 可溶性； 高效性； 半衰期短； 可诱导产生； 效应范围小； 通过结合细胞表面相应受体发挥生物学效应。 8. MHC分子的生物学功能 作为抗原提呈分子参与适应性免疫应答 MHC限制性 参与T细胞在胸腺中的选择和分化 决定疾病易感性的选择和分化 参与构成种群基因结构的异质性 作为调节分子参与固有免疫应答 经典3类基因编码补体成分，参与炎症反应和对病原体的杀伤 非经典1类基因和MICA基因产物可作为配体分子，调节NK细胞和部分杀伤 细胞的活性 炎症相关基因参与启动和调控炎症反应，并在应急反应中发挥作用 9. MHC1类抗原与MHC2类抗原 MHC类别 分子结构 肽结合结构域 表达特点 组织分布 功能

1类（A、B、C） α链45kD β2m12kD α1+α2 共显性 所有有核细胞表面 识别、提呈内源性抗原，与CD8结合，对CTL识别起限制作用 2类（DR、DQ、DP） α链35kD β链28kD α1+β1 共显性 APC、活化的T细胞 识别、提呈外源性抗原肽，与CD4结合，对Th的识别起限制作用 10. MHC复合体中免疫功能相关基因及其作用 血清补体成分的编码基因：编码补体组份 抗原提呈相关基因： 蛋白酶体β亚单位（PSMB）基因：编码胞质溶胶蛋白酶体的β亚单位，加工 内源性抗原 抗原加工相关转运物（TAP）基因：编码TAP，转运内源性抗原 HLA-DM基因：参与外源性抗原通路 HLA-DO基因：编码DO分子，负相调控DM TAP相关蛋白基因：编码tapasin，参与内源性抗原通路 非经典1类基因： HLA-E：抑制NK细胞对自身细胞的杀伤作用 HLA-G：在母胎耐受中发挥功能 炎症相关基因： 肿瘤坏死因子基因家族 转录调节基因或类转录因子基因家族 MHC1类链相关分子基因家族 热休克蛋白基因家族 11. T细胞在胸腺中的发育过程 首先要经历其抗原识别受体（TCR）的基因重排，表达多样性的TCR，并在IL-7等细胞因子的诱导下，表达CD4和CD8，未成熟DP细胞表达的随机多样特异性的TCR与胸腺上皮细胞表面的自身抗原肽-MHC1或2类分子复合物相互作用，不能结合或结合亲和力过高的DP细胞发生凋亡，能以适当亲和力结合的DP细胞成活并获得MHC限制性，DP细胞分化为SP细胞，SP细胞在皮质髓质交界处及髓质区，与胸腺树突状细胞、巨噬细胞等表面的自身抗原肽-MHC1或2类分子复合物相互作用，高亲和力结合的SP细胞发生凋亡，少部分分化为调节性T细胞，不能结合的SP细胞存活，成为能特异性识别抗原肽-MHC1或2类分子复合物、具有自身MHC限制性及其自身免疫耐受的初始T细胞。 12. MHC1类与2类分子抗原提呈途径 MHC1类分子途径 MHC2类分子途径 抗原来源 内源性抗原 外源性抗原 抗原降解位置 蛋白酶体 溶酶体、M2C 抗原与MHC结合部位 内质网 M2C 提呈抗原肽的MHC MHC1类分子 MHC2类分子 伴侣分子和转运分子 钙联蛋白、TAP Li链、钙联蛋白 加工和提呈抗原的细胞 所有有核细胞 专职抗原提呈细胞 识别和应答的细胞 CTL Th 13. Th细胞如何辅助B细胞的免疫应答 Th细胞与B细胞相互作用，BCR识别并结合抗原，抗原-抗体复合物内化，抗原被加工成抗原肽后与MHC2类分子形成复合物，提呈给T细胞的TCR，产生T细胞活化的第一信号。B细胞识别抗原后表达B7分子，与T细胞表面的CD28结合提供T细胞活化的第二信号。活化的T细胞表达CD40L，与B细胞表面组成性表达的CD40结合，产生B细胞活化的第二信号。活化的Th细胞分泌IL-2、IL-4、IL-21、IL-6等多种细胞因子，诱导活化B细胞的分化和Ig的产生。 14. 外周免疫耐受的机制 克隆失能，多数组织细胞表达自身抗原，但不表达共刺激分子，不成熟DC提呈自身抗原，也不表达共刺激分子。活化诱导的细胞凋亡，持续性自身抗原的刺激诱导表达Fas和FasL。调节性T细胞。抑制性受体。 15. CFSE染色的原理和应用 CFSE能够轻易穿透细胞膜，在活细胞内与胞内蛋白共价结合，水解后释放出绿色荧光。在细胞分裂增殖过程中，它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减，标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，可被用于检测细胞增殖，细胞周期的估算及细胞分裂等方面。 16. Annexin V-FITC 结合PI 是一种检测细胞凋亡的试剂，正常细胞中，磷脂酰丝氨酸分布在细胞膜脂质双层的内侧，细胞凋亡早期，膜磷脂酰丝氨酸由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V作为一种磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸高亲和力特异性结合。PI是核酸染料，不能透过完整的细胞膜，但能够透过凋亡中晚期的细胞和死细胞，使细胞核染红。用于检测细胞凋亡和区分细胞坏死。 17. FACS的基本原理 将待测细胞悬液与荧光素标记的抗体反应后，在压力作用下，细胞排成单列喷出形成液滴射流，每一液滴包裹一个细胞。当液滴射流与高速聚焦激光束相交，液滴中的细胞受到激发光照射，产生散射光并发出各种荧光信号，后者被接收器检测。同时，分选部件将欲分选的荧光素标记细胞赋以电荷，带电液滴在分选器作用下偏向带相反电荷的偏导板，落入适当容器中，达到分选的目的，同时还能进行细胞周期、细胞凋亡等分析。 18. 凋亡细胞的检测方法 形态学检测：凋亡细胞形态学表现为体积变小，细胞变圆，与周围细胞脱离，胞质浓缩，内质网扩张，核仁消失，最后出现凋亡小体。 梯状凝胶电泳：凋亡细胞的DNA被核酸内切酶在核小体之间切割，产生核小体及其倍数的寡核苷酸片段，在琼脂糖凝胶电泳时呈梯状DNA区带图谱。 FACS：正常细胞DNA为二倍体，细胞凋亡时由于DNA断裂呈非二倍体或亚二倍体，在FACS的二倍体峰前出现一个亚二倍体峰，根据峰值大小可判断细胞凋亡的百分比。 TUNEL法：在细胞培养液中加入TdT和生物素标记的dUTP，TdT可将含生物素标记的dUTP连接断裂的DNA3’末端，利用亲和素-生物素-酶放大系统，在DNA断裂处着色，显示凋亡细胞。