Rh血型鉴定操作规程

版号:第A版第0次修改

1.目的：

为准确鉴定RH血型及了解基因型

2.要求：

要求全科人员熟练掌握原理及其操作，对有疑问的结果能够做出解释及妥善解决。

3.原理：

该系统主要有五种抗血清，即抗D、抗C、抗c、抗E、抗e。.用五种抗Rh分型血清来检查红细胞抗原，有18种表现型。在临床输血中，一般只做D抗原的鉴定，凡被鉴红细胞和抗D血清凝集者为Rh.阳性，不凝集者为Rh阴性。其它Rh抗原鉴定和D抗原一样只是加相应的抗血清既可。其鉴定方法，由抗血清的性质而定。如盐水抗体用盐水法，lgG抗体用聚凝胺，抗人球蛋白等方法。

4.试剂与材料

4.1 抗D、抗C、抗c、抗E、抗e分型血清。

4.2 受检者血样。

4.3含有相应抗原2%~5%红细胞悬液（从谱细胞中选取）。

5.操作

5.1取清洁白瓷板一块,滴加lgM抗D血清一滴，再用竹签分别蘸取被检红细胞混匀;阴性对照蘸取已知RH阴性红细胞混匀。将白瓷板不断轻轻转动，使血清与细胞充分混匀，2~3分钟后观察结果，连续观察10分钟，以肉眼观察,阴性对照不凝集,被检者凝集者为阳性，不凝集者为阴性

5.2 瓷板结果阴性者,再用试管法复查.( lgM抗D血清1滴+2%~5%红细胞悬液1滴,1000g离心15秒),凝集者为阳性,不凝集者为阴性,

5.3 试管法阴性者进行确认实验

Rh血型确认实验

取3支试管，分别标记“1”、“2”、“3”，分别加入3批IgG或（lgM+ IgG）抗D血清试剂各1滴，再各加入2%~5%受检者红细胞悬液一滴，1000g离心15秒,凝集者为阳性，不凝集者放置于37℃水浴箱水浴30分钟，取出三洗后用滤纸

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吸取加入抗球蛋白试剂2滴，以1000g离心15秒，肉眼观察结果，若均无凝集，可确认为Rh阴性，任何一管有凝集者可怀疑为Rh变异型。另对此血清做抗筛实验，方法详见抗体筛选实验。

6.RH基因型检侧.

6.1 取小试管五支，标记抗D、抗C、抗E、和抗c,按标记分别加上述五种抗血清各1滴，再分别加2%~5%受检者红细胞1滴，混匀。阳性对照从谱细胞中分别挑取含有相应抗原细胞1滴（最好用杂合子细胞），阴性对照从谱细胞中分别挑取不含有相应抗原细胞1滴，以1000g离心15秒，将试管轻轻摇动，以肉眼观察有无凝集或溶血现象。

6.2如抗E管凝集再做抗e管，如抗E不凝集，直接认为抗e管为凝集（e纯合子）。

7.结果判断

如阳性对照管凝集，阴性对照不凝集，受检者凝集，即表示受检红细胞上有相应抗原；受检管不凝集，即表示受检红细胞上没有相应抗原。用五种抗Rh血清的检查结果可有18种表现型;CCdee CcDee CCDEe CcDEe CCDEE ccDEE ccDee ccDEe CcDEE Ccdee ccdEE CcdEe Ccdee ccdEe CCdEE CcdEe CcdEE ccdee。

8.相关文件

8.1《中国输血技术操作规程》

9.相关表单

9.1 CB—001青海省血液中心血型参比实验室免疫血液学研究

9.2 CB—002 Rh阴性确认试验记录单

9.3 CB—003 Rh（D）检测结果报告单

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