1.ABO血型鉴定操作规程复习课程
ABO 血型鉴定操作规程
1.0 原理ABO 血型鉴定操作规程2.03.04.05.0 5.1 5.26.0 6.16.2 6.36.4 6.5 6.66.77.0 7.1 根据红细胞上和血清（或血浆）中有无 A 抗原和（或）B 抗原及其抗体，将血型分为A 型、B 型、AB 型及 O 型。
可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型鉴定 ABO 血型。
正定型正定是指用已知抗-A、抗-B 血清来检测受检红细胞上有无相应的 A 抗原和（或）B 抗原；反定型反定是指用已知 A1型、B 型红细胞来检测受检血清（或血浆）中有无相应的抗-A 和（或）抗-B。
原始样品要求5 mL 静脉全血。
样品容器和添加剂真空试管，EDTA.K2抗凝/普通试管，不抗凝。
检测环境要求温度：18℃～27℃，湿度：30%～70%。
所需材料和设备设备普通离心机、免疫血液学离心机、显微镜、恒温水箱、定时器。
材料抗-A、抗-B 血清、ABO 标准抗原红细胞试剂、移液器、加样吸头、生理盐水（NS）、干净空试管。
检测操作过程将受检标本以 1000g 离心 5min，使标本血浆/血清与红细胞分离，吸取红细胞，用 NS洗涤三次后，配成 3%～5%红细胞悬液。
取 6 支小试管，分别标记“-A”、“-B”、“自身”、“Ac”、“Bc”、“Oc”。
在“-A”、“-B”管中分别加入抗-A 和抗-B 血清各 50 L ，其余管加入受检血浆/血清各100 L 。
在“-A”、“-B”、“自身”管中加入受检者 3%～5%红细胞悬液各 50 L ，摇匀。
在“Ac”、“Bc”、“Oc”管中分别加入 A1、B、O 红细胞试剂各 50 L ，摇匀。
1000g 离心 15sec，轻轻悬浮红细胞，观察结果并记录。
根据实验需要，除室温下观察结果外，另可增加在 4℃、37℃下观察结果。
结果判断凝集强度判断标准见表 1。
表1 凝集强度判断标准表凝集强度4+3+2+1+±-或θMFpHH判断标准红细胞凝集成一大块，液体背景透明，无游离红细胞数个大凝集块，液体背景透明，无游离红细胞有很多小凝集块，液体背景透明，无游离红细胞有许多很小的凝集块，肉眼可见，液体背景不透明，有游离红细胞微小的凝集块，肉眼很难看清，需要用显微镜观察无凝集，无溶血，全是游离红细胞混合凝集外观，镜下可见少数红细胞凝集，而大部分是游离红细胞部分溶血完全溶血7.2 ABO 血型结果判断见表2：正定型抗-A 血清血抗-B 血清血Ac表 2 2 血型结果判断表反定型定Bc Oc自身对照血型＋――＋―＋―＋―＋＋―＋―＋―――――――――ABOAB7.37.48.09.010.0注：“＋”表示凝集或溶血；“―”表示不凝集。
ABO血型鉴定操作规程
ABO血型鉴定操作规程ABO血型鉴定是一种常见的血液学检验方法，用于确定个体的血型类型。
ABO血型鉴定操作规程是指在进行ABO血型鉴定时应该遵循的步骤和操作规范，以确保检验结果的准确性和可靠性。
下面将介绍一份ABO血型鉴定操作规程，供参考。
一、实验室准备2.确保实验室环境清洁整洁，工作台面干净无异物。
3.检查试剂盒和试剂的有效期和保存条件，确保试剂的质量良好。
4.对实验室设备进行日常检查和维护，确保设备正常工作。
二、标本采集与处理1.根据要求收集患者的血样，确保标本采集过程无菌无误。
2.将标本装在标本采集管中并进行标注，确保标本不被混淆。
3.采用标本离心的方法分离血浆和红细胞，准备好把血浆和红细胞分开的离心管。
三、试剂的稀释与标记1.根据试剂盒的说明书和标准操作规程对试剂进行稀释和标记。
2.确保试剂的标记清晰明确，不混淆。
3.标记好试剂的试管，准备好用于分析的试管。
四、ABO血型鉴定实验过程1.将患者的血浆和稀释后的抗体试剂混合均匀。
2.通过凝集试验和沉淀试验等方法对混合后的血浆进行判断，确定患者的血型类型。
3.记录检验结果并进行复核，确保结果的准确性。
五、实验数据的记录和存储1.记录实验的时间、地点、操作人员等基本信息。
2.记录检验结果和分析过程，确保数据的完整和准确。
3.存储检验数据和样本，确保数据的可追溯性和保密性。
六、结果解读与报告1.根据实验结果进行血型鉴定，判断患者的血型类型。
2.根据实验结果填写并发放血型鉴定报告，包括患者姓名、血型类型、检验日期等信息。
以上就是一份ABO血型鉴定操作规程的简要介绍，希望对实验室工作人员在进行ABO血型鉴定时提供一定的参考。
在进行实验操作时要严格按照规程和标准操作程序进行，确保检验结果的准确性和可靠性。
ABO血型鉴定操作规程(试管法)
宁晋县中西医结合医院ABO血型鉴定操作规程一．项目名称ABO 血型鉴定（正定型）二．方法试管法三．检验原理根据红细胞上有无A抗原或（和）B抗原，以及血清中有无抗A或（和）抗B抗体，可以将红细胞血型分为A型、B型、O型和AB型。
根据抗A和抗B抗体与对应红细胞抗原的凝集反应，可以鉴定ABO血型。
四．试剂上海血液生物医药有限公司抗A血型定型试剂和抗B血型定型试剂（单克隆抗体）五．标本采集抗凝或不抗凝的末梢血或静脉血均可，用生理盐水做成2-5%红细胞悬液六．操作1 取试管2支并分别标注抗A和抗B。
2 抗A试管中加入抗A试剂一滴，在抗B试管中加入抗B试剂一滴。
3 在抗A、抗B试管中分别加入受检者2-5%的红细胞悬液一滴，混匀。
4 用离心机3400离心15秒。
5 检验是否有溶血（溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染），然后轻轻摇晃，使细胞再悬浮。
6 观察凝集情况，并记录结果。
必要时借助显微镜。
7 许多红细胞亚型（如Ax）能在抗AB试剂的盐水中凝集，但与抗A不凝，在室温（23±3℃）中放置几分钟，可以增强反应，但放置时间不宜超过30分钟。
8 检验结果的解释ABO血型反应格局表正定型血型抗A试剂抗B试剂+ - A- + B- - O+ + AB七．检验方法的局限性与反定型一起进行，正反定型不一致须进一步检查。
八．注意事项1 对含有较多自身冷凝剂素的受检者，需要37℃的生理盐水溶液洗涤受检者红细胞2-3次，去除吸附在红细胞上的冷凝集素，然后在鉴定血型。
2 新生儿的血样中抗体含量较低，抗原发育不完全。
同时可能含有母亲血液中的抗A或抗B抗体，可能导致假阳性或假阴性的出现。
3 出现ABO正反定型不符，须查明原因并解决问题后在记录结果。
ABO血型鉴定操作规程
1 目的指导工作人员进行ABO血型实验。
2 适用范围血型检验岗位工作人员3 职责负责送检标本ABO血型的检测工作。
4 【原理】ABO血型鉴定,是根据IgM类特异性血型抗体与红细胞膜上特异性抗原结合能出现凝集反应的原理，用已知IgM类特异性标准抗A和抗B血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B抗原。
同时用已知标准A型红细胞和B型红细胞来测定血清中有无相应的天然IgM类抗A或/和抗B。
【标本】1．静脉抗凝或不抗凝血1.5～2.0ml。
【器材】载玻片、滴管、小试管、台式离心机或微柱凝胶离心机、玻璃棒、蜡笔或记号笔、显微镜等。
【试剂】1.1 抗-A、抗-B试剂1.2 5%和10%A、B及O型试剂红细胞盐水悬液1.3 受检者血清1.4 受检者5%和10%红细胞盐水悬液1.5 10mm×60mm透明的玻璃试管或塑料试管【操作步骤】2.1 试管法2.1.1查抗原：取洁净小试管2支，分别标明抗-A、抗-B，用滴管加入抗-A和抗-B分型血清各 2滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者5%红细胞盐水悬液1滴，混匀。
2.1.2查抗体：取洁净小试管3支，分别标明A型、B型和O型细胞。
用滴管分别加入受检者血清2滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B、O型5%试剂红细胞悬液1滴，混匀。
2.1.3立即1000rpm离心(离心时间为离心机校准时间)。
2.1.4轻轻摇动试管,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集(或溶血)现象,如肉眼观察不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再以低倍镜下观察有无凝集。
主题内容ABO血型鉴定操作规程生效日期：2010/10/23 第页共5页2.1.5 凝集强度判断标准4+=红细胞凝集成一大块,血清清晰透明；3+=红细胞凝集成几大块,血清尚清晰；2+=红细胞成中等大凝块,游离红细胞<1/2；1+=红细胞成小凝集块，游离红细胞>1/2；±=红细胞成微小凝集块，周围有很多游离红细胞。
ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程
ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程(一)检验目的检测红细胞表面ABO血型抗原、RhD抗原及血清(或血浆)中抗A、抗B抗体，确定受检者ABO及RhD血型。
(二)检验原理1.手工试管法、玻片法或纸板法利用标准IgM抗A／B血清鉴定红细胞表面ABO抗原即正定型，利用已知ABO 血型反定型红细胞鉴定同一标本血清(或血浆)中的抗A／B 抗体即反定型，综合正反定型结果确定受检标本ABO血型；利用标准IgM抗D直接鉴定RhD血型。
2.微柱凝胶法ABO／RhD卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗A、抗B、抗D标准血清，如果红细胞表面存在A或B或D抗原，就会与对应的抗体发生凝集反应，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶颗粒中，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3.玻璃珠微柱法ABO／RhD卡的微管中装填有玻璃微珠和抗A、抗B、抗D标准血清，如果红细胞表面存在A或B或D抗原，就会与对应的抗体发生凝集反应，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工、半自动、全自动ABO血型及RhD血型鉴定试验。
(四)设备性能参数各种血型检测系统性能指标参见相应血型检测系统说明书。
(五)器材与试剂1.器材WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO 血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro AutoVue Innova全自动血型配血系统、B600-A型低速离心机、KA-2200血清学专用离心机、阅片灯箱、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×12mm和75m m×l2mm)、血型鉴定专用纸板、玻片、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
2.试剂Diana DG Gel ABO-CDE血型卡、DiaMed ABO／RhD血型卡、OTHROBiovueABO／RhD血型卡、2％氢氧化钠溶液、生理盐水、抗A／B标准血清、抗D标准血清、3％～5％反定型试剂红细胞、1％反定型试剂红细胞。
ABO血型测定标准操作规程
1.目的和适用范围：1.1.为保证原料血浆的质量，规范实验操作，特制定本操作规程。
1.2.适用于本公司检验科，全体工作人员都必须严格按照本操作规程进行操作。
2.术语：无。
3.职责：3.1.实验室工作人员都必须严格按照本操作规程进行操作。
4.工作程序4.1.操作说明4.1.1.实验原理：ABO系统中的血型是根据红细胞上有无A或B抗原及血清中有无抗A或抗B抗体来决定。
用抗A、抗B定型血清分别加入被测红细胞，以观察其抗原、抗体反应结果。
4.1.2.实验所需设备和材料：血型反应板、竹签、微量振荡器、被检测标本、抗A定型血清（效价1:128以上），抗B定型血清（效价1:64以上）亲和力应在15秒钟以内出现凝集现象，并在3分钟时凝集块的大小应不小于1mm4.2.实验操作步骤：4.2.1.方法：正定型法4.2.2.受检者全血和血型试剂在纸片上按1：1比例混合，摇匀，按照有无凝集判定结果。
4.3.结果判读：4.3.1.受检者红细胞与抗A血型试剂发生凝集反应而不和抗B血型试剂发生凝集反应为A型。
4.3.2.受检者红细胞与抗A血型试剂不发生凝集反应而和抗B血型试剂发生凝集反应为B型。
4.3.3.受检者红细胞与抗A、抗B血型试剂都不发生凝集反应0型。
注：“＋”=凝集；“－”=不凝集4.4.注意事项：4.4.1.如果由于受检者的红细胞抗原弱，或抗A、抗B血清凝集力低，需要充分时间方能判定结果，则要加做反定型。
4.4.2.A型及B型定型红细胞悬液，不能互相掺杂。
4.4.3.ABO血型测定必须两人交替核对报告单，确认无误，方可发出报告。
4.4.4.要严防搞错标本、加错标本或者加错定型血清。
5.记录表式：5.1.《血型测定记录表》（记录编号：PAFC-BXJY-SOP-LM04-07-R01A）6.相关文件：无7.相关记录：无8.附件：无9.文件履历血型测定记录表记录编号：PAFC-BXJY-SOP-LM04-07-R01A本记录保存至供浆期满后10年。
S006红细胞ABO血型(反定型)鉴定标准化操作规程
红细胞ABO血型（反定型）鉴定标准化操作规程一、目的为保证血液及血液成分的红细胞ABO血型在临床上同型输注，确保临床输血安全、有效，根据《临床输血技术规范》第十五条特制定本标准化操作规程。
二、方法采用试管法检测红细胞ABO血型（反定型）。
三、原理用已知的A1、B、O标准红细胞测定被检者血清中有无相应的抗A或抗B抗体，结合正定型结果判断ABO血型。
四、适用范围适用于输血前患者与献血者红细胞ABO血型(反定型)确认。
五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、试剂1、试剂名称：人ABO血型反定型用红细胞试剂盒；2、试剂生产厂家：上海血液生物医药有限公司；3、批准文号：国药准字S2*******；4、包装规格：A1、B、O试剂各1支， 10ml /支；5、贮藏条件；2-8℃保存，不能冰冻。
6、有效期：自检定合格之日起2个月；7、试剂性能：外观、溶血率%、特异性、抗原性均符合检定规程要求。
七、检测样本要求1、标本类型：静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。
2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。
3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。
4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。
八、操作步骤1、取10mmx60mm洁净小试管3支，分别标明A1型细胞、B型细胞、O型细胞，用滴管分别加入受检者血清1滴于试管，再分别用滴管加入A1、B、O型试剂红细胞悬液1滴。
2、，摇动试管，立即以1000rpm离心1min或3400rpm离心15s。
3．先观察是否有溶血，溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染；将试管轻轻摇晃，使沉于管底的红细胞浮起，观察细胞扣情况，并判断凝集强度（见下表）。
如肉眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。
红细胞ABO血型（反定型）结果凝集强度判断对照表4、ABO血型（反定型）表现型反应格局表九、质量控制1、对新进批号的试剂应作亲和力与效价验定。
ABO和Rh (D) 血型鉴定操作规程(盐水法)复习过程
A B O和R h(D)血型鉴定操作规程(盐水法)ABO和Rh (D) 血型鉴定操作规程（盐水法）一．目的规范ABO/Rh (D) 血型鉴定的操作流程；保证临床用血的安全性及有效性。
二．职责血库技术人员负责ABO和Rh (D) 血型鉴定。
三．适用范围适用于血库ABO和Rh（D）血型鉴定血标本。
四．所需材料和设备1.材料抗-A、抗-B、抗-D试剂、A、B、O型反定型试剂红细胞、生理盐水、小试管、滴管、患者血标本。
2.设备普通离心机、显微镜、血型血清学专用离心机。
五．操作步骤1.将标本2000r/分钟离心2分钟，使标本血浆/血清与红细胞分离，并吸取红细胞配制3%悬液。
2.取小试管3支，分别标明-A、抗-B、抗-D，用滴管分别加抗-A、抗-B、抗-D试剂各2滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者3%红细胞悬液1滴，混匀。
3.另取小试管3支，分别标明A、B、O细胞，用滴管分别加入受检者血清2滴于试管底部，再分别以滴管加入3% A、B、O型试剂红细胞悬液1滴，混匀。
4.以1000r/分钟离心1分钟。
5.将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观察有无凝集（或溶血）现象，如肉眼不见凝集，应将反应物倒在玻片上，再以显微镜检查。
6. ABO血型结果判定（见下表）：ABO血型结果判断分型试剂+受检者红细胞（正定型）受检者血清+试剂红细胞（反定型）抗-A 抗-B A细胞 B细胞 O细胞血型注：“＋”凝集；“－”不凝集7.Rh（D）血型判定：红细胞与抗-D试剂凝集为Rh (D) 阳性无凝集为Rh阴性。
8.凝集强度判断标准：4+ 红细胞凝集成一大块，背景清晰透明；3+ 红细胞凝集成数小块，背景尚清晰；2+ 红细胞凝块分散成许多小块，背景可见到游离红细胞；1+ 肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞；±镜下可见数个红细胞凝集在一块，周围有许多游离红细胞；混合外观凝集（Mixed Field, MF）是指镜下可见少数红细胞凝集，而绝大多数红细胞仍分散分布；－（阴性）镜下未见凝集，红细胞均匀分布。
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ABO血型鉴定操作规程1.目的:定性鉴定患者ABO血型2.适用范围:适用于献血员筛查、临床检测和血液制品检测3.方法及原理:根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型四种。
A 型红细胞膜上含有A抗原，B型红细胞膜上含有B抗原，AB型红细胞膜上含有A、B抗原，抗A、抗B试剂是分别针对A抗原和B抗原的特异性抗体。
可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。
可用已知的抗A、抗B试剂血清鉴定红细胞上有无对应的A抗原/B抗原（正定型），采用已知A型红细胞和B行红细胞来测定血清中有无相应的抗-A或/和抗-B抗体（反定型），必须从正定型和反定型两项试验来确定样本的ABO血型。
4.试剂与设备4.1试剂抗-A、抗-B定型试剂（单克隆抗体）；0.9%生理盐水；2%—5%A、B和O型试剂红细胞悬液4.2试剂组成试剂1：抗A分型试剂（蓝色），效价1：128，2℃-8℃避光保存，室温放置不宜过久。
试剂2：抗B分型试剂（黄色），效价1：128，2℃-8℃避光保存，室温放置不宜过久。
试剂3：5％A、B及O型红细胞盐水悬液，自制。
配制方法：分别采取已知A、 B、O三种血型的红细胞，经盐水洗涤3次，以压积红细胞配成不同浓度的红细胞悬液。
红细胞悬液的配制悬液浓度（％）压积红细胞（滴）盐水（滴）2 5 10 20 11112ml（40）0.8ml（16）0.4ml（8）0.2ml（4）为了防止红细胞悬液敏感性不一致，可随机采取3个或以上的健康成人血液，按A、B、O型分别混合后，按上法制备。
4.3设备透明光洁试管、显微镜、血清学专用水平离心机5.样本采集与处理:5.1标本种类：新抽取的抗凝血或手指末梢血和血清。
5.2标本要求：5.2.1抗凝剂：如用抗凝血，多主张用EDTA K2（㎎/dL）抗凝。
5.2.2手指血作血型检测时，最少样品量为100ul，如手指有冻疮，则主张采耳垂血。
5.3标本储存：2小时内完成实验，室温放置下不超过8小时，4℃-8℃，保存不超过48小时。
5.4. 标本运输：室温运输5.5. 标本拒收标准：细菌污染、溶血标本不能作测定。
6.操作步骤:6.1 取洁净小试管（内径10mm×60mm）2支，分别标上A、B字样，用滴管分别向A管滴加抗A分型试剂1滴。
向B管滴加抗B分型试剂1滴。
向A、B管各滴加待检血样的5％红细胞悬液各1滴，混合。
6.2 另取洁净小试管（内径10mm×60mm）3支，分别标明A、B和O细胞。
用滴管分别加入受检者血清1滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B和O型5％红细胞悬液1滴，混合。
6.3 摇匀后以1000转/分的速度离心1分钟判定结果。
7. 结果判断:7.1先以肉眼观察上清液是否有无溶血现象，然后轻轻摇动试管，使沉于管底的细胞扣悬浮，检查有无凝集块，观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B 亚型、类B或cisAB的发现。
7.2 溶血或凝集都判定为阳性结果7.3凝集强度判断标准：4＋＝红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。
3＋＝红细胞凝集成数小块，血清尚清晰。
2＋＝红细胞凝块分散成许多小块，见到游离红细胞。
1＋＝肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞。
±=镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞。
MF＝混合凝集外观是指镜下可见少数红细胞凝集，而绝大多数红细胞仍呈分散分布。
－表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。
7.5 按下表报告受检者红细胞ABO血型ABO血型正反定型结果分型血清＋受检者红细胞受检者受检者血清＋试剂红细胞抗－A＋——＋抗－B—＋—＋抗－A＋B＋＋—＋血型ABOABA细胞—＋＋—B细胞＋—＋—O细胞————注+为凝集；-为不凝集8.干扰因素:8.1冷凝集和自身凝集现象8.2血浆成分异常8.3抗体减弱或丢失8.4抗原减弱或变异8.5亚型9.超出范围结果处理:9.1 红细胞自凝：冷凝集系增高是最为常见原因。
应用37℃-40℃的生理盐水洗涤红细胞可去除红细胞表面附着的导致红细胞凝集的冷集素。
9.2正反定型结果不一致原因9.2.1 分型血清效价太低、亲和力不强。
如抗—A血清效价不高，可将A亚型误定为O 型，AB型误定为B型。
9.2.2红细胞悬液过浓或过淡，抗原抗体比例则不适当，使反应不明显，误判为阴性反应。
9.2.3受检者红细胞上抗原位点过少（如亚型）或抗原性减弱（见于白血病或恶性肿瘤）以及类B或cisAB等。
9.2.4 受检者血清中蛋白紊乱（高球蛋白血症），或实验时温度过高，常引起红细胞呈缗钱状排列。
9.2.5 受检者血清中缺乏应有的抗—A和抗—B抗体，如丙种球蛋白缺乏症。
9.2.6各种原因引起的红细胞溶解，误判为不凝集，部分溶血时，可溶性血型物质中和了相应的抗体。
9.2.7 由细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因。
9.2.9 血清中有意外抗体，如自身抗—I，常引起干扰。
9.2.9老年人血清中抗体水平大幅度下降。
9.3 正反定型结果不一致的解决方法：9.3.1另从受检者采取1份新鲜血液标本，这样可以纠正因污染或搞错样本造成的不符合。
9.3.2 将红细胞洗涤数次，配成2％盐水细胞悬液，用抗—A、抗—B、抗—AI，抗—A ＋B及抗—H做试验可以得到其它有用的信息。
9.3.3 对受检红细胞作直接抗球蛋白试验，如结果呈阳性，表示红细胞已被抗体致敏。
9.3.4用A1、A2、B、O红细胞从自身红细胞检查受检血清。
如果怀疑是抗—I，用O型（或ABO相合的）脐血红细胞检查。
9.3.5 如果试验结果未见凝集，应将细胞及血清试验至少在室温和4℃放置30min，用显微镜检查核实。
9.3.6 如疑为A抗原或B抗原减弱，则可将受检红细胞与抗A或抗—B血清作吸收及放散试验以及受检者唾液作A、B、H血型物质测定。
后者只对90％HAB分泌型的人有用。
9.3.7 如试验结果红细胞呈缗钱状排列，加等渗盐水1滴，混合。
往往可使缗钱现象消失。
应注意不应先加盐水1滴于受检者血清中而后和红细胞作试验，以免使血清中抗体被稀释。
9.3.8 如受检者为A型血而疑为有类B抗原时，可用下列方法进行鉴别：9.3.8.1观察细胞与抗—A及抗B的凝集强度，与抗A的反应要比抗—B的反应强。
这种区别用玻片法作试验更为明显。
9.3.8.2 用受检者红细胞与自身血清作试验，血清中的抗—B不凝集自身红细胞上的类B抗原。
9.3.8.3检查唾液中是否有A、B物质，如果是分泌型，可检出A物质而无B物质。
9.3.8.4核对患者的诊断，类B抗原的形成与结肠癌、直肠癌、革兰阴件杆菌感染有关。
10.质量控制:10.1每更换一批号抗血清试剂，均要滴定抗体效价。
10.2分型血清质量性能符合要求，用毕后，应放置冰箱保存，以免细菌污染，分型血清应保存在2～6℃，对长期数月不用的试剂，可保存于-20℃。
10.3IgM抗A或抗B血凝效价≥1210，亲和力≤15秒，冷凝集素效价＜1：4，必须具有检出A2、A2B的能力。
10.4 试剂一旦发现浑浊不得使用。
10.5红细胞悬液配制要准确，抗原抗体比例要适当。
10.6试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。
10.7操作方法应按规定，一般应先加血清，然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清.10.8按理IgM抗—A和抗—B与相应红细胞的反应温度以4℃为最强，但为了防止冷凝集现象干扰，一般仍在室温（20℃-24℃）内进行试验，37℃可使反应减弱.10.9离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或假阴性结果。
10.10观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱状排列的区别。
10.11判断结果后应仔细核对、记录，避免笔误。
11.医学解释:11.1血型鉴定是实施输血治疗的首要步骤。
进行交叉配血前必须准确检测受血者和供血者的血型。
11.2进行组织器官移植时，供、受器官者的ABO系统血型必须相同。
11.3母、子ABO系统血型不合可以造成ABO系统新生儿溶血病。
11.4ABO血型在人群中的分布，可作遗传学的研究。
12.最常见的误差来源:12.1标本采集错误12.2标本信息登记错误12.3红细胞和血清比例不当12.4离心过度或不足12.5阳性反应产生溶血现象或弱凝集未能识别12.6漏加试剂12.7结果记录或者判断错误12.8其他原因导致的血型鉴定困难13.方法评价:13.1试管法定型反应快、时间短，特别是紧急输血时可在抗原抗体反应1分钟后离心观察结果；通过离心增强凝集，可发现亚型和较弱的抗原抗体反应，结果准确可靠。
13.2微柱凝胶法定型使用安全，操作简单，结果稳定可靠，灵敏度高，重复性好，但费用昂贵，需要特殊的仪器设备。
14.相关文件:《全国临床检验操作规程（第三版）》ABO血型鉴定试剂盒说明书。