血型鉴定操作规程教学文案

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检验科ABO及RH血型标准操作规程

检验科ABO及RH血型标准操作规程

检验科ABO及RH血型标准操作规程1.【目的】确保红细胞ABO及RH(D)血型鉴定试验的准确性,防止误定型,特制定本规程。

2.【职责】2.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP,室负责人监督落实。

2.2本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:室负责人、科主任。

3.【样本类型及实验前准备】3.1样本类型:EDTA -K2抗凝管采集血液2ml (标本应新鲜,注意避免污染)3.2患者准备:患者处于安静状态精神、体力、情绪等因素的影响较小。

3.3容器添加剂类型:EDTA -K2抗凝管3.4实验试剂:1.ABO: 1. 1抗A、抗B和抗AB血型定型试剂。

1.25%A、B及O型试剂红细胞悬液。

1.3受检者血清。

1.4受检者5%红细胞盐水悬液。

2.RH 2.1IgG型抗D标准血清。

2.25%D阳性红细胞生理悬液。

2.3 5%D阴性红细胞生理悬液。

4.【测定原理】ABO血型鉴定:生理盐水凝集法一试管法常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原,以及血清中存在的血型抗体,依据抗原抗体存在的情况判定血型。

常用的方法有:①正向定型:用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。

②反向定型:用已知血型的标准红细胞检查血清中的未知抗体。

结果判定:凡红细胞出现凝集者为阳性,呈散在游离状态为阴性。

RH鉴定:红细胞RH表型可用特殊的具有抗D、C、c、E和e抗血清来鉴定。

虽然Rh血型系不能在盐水介不能在盐水介质中与红统中有许多种抗原,但常规只用抗D血清检查有无D抗原。

Rh(D)抗体属于IgG类,细胞发生凝集,因此必须采用低离子强度盐水试验或酶介质法。

5.【操作步骤】ABO鉴定步骤:1.试管架每一竖排准备2只试管,分别为抗A,抗B试管。

2.标本接收后进行标号,对应相应的试管标号。

3.分别加入A,B型标准血清和受试者的红细胞悬液各两滴,混匀后离心2分钟。

4.取出试管后用手指轻弹试管底,若沉淀物成团漂起,表示发生凝聚现象;若试管内沉淀物恢复悬液状态,表示无凝集现象。

初中血型鉴定教案

初中血型鉴定教案

初中血型鉴定教案教案标题:初中血型鉴定教案教案目标:1. 了解血型的概念和分类。

2. 掌握血型鉴定实验的基本步骤和原理。

3. 培养学生的观察、记录和分析能力。

4. 培养学生的合作与沟通能力。

教材准备:1. 血型鉴定实验所需材料:抗A血清、抗B血清、抗Rh血清、玻璃滴管、玻璃棒、玻璃片、草纸、棉签、酒精棉球等。

2. 血型鉴定实验操作指导书。

3. PowerPoint演示文稿。

教学过程:一、导入(5分钟)1. 利用幻灯片向学生展示不同的血型标志,并引导学生猜测它们的含义。

2. 引发学生对血型的思考:你知道自己的血型吗?血型有什么作用?二、知识讲解(15分钟)1. 通过幻灯片讲解血型的概念和分类,包括A、B、AB、O四种血型及Rh血型的概念。

2. 向学生介绍血型鉴定实验的基本原理:根据抗体和抗原的反应,确定血液中的血型。

3. 解释为什么在输血和器官移植等医疗过程中需要进行血型鉴定。

三、实验操作(30分钟)1. 将学生分成小组,每组4-5人。

2. 向学生发放实验操作指导书和所需材料。

3. 指导学生按照实验操作指导书的步骤进行血型鉴定实验。

4. 强调实验操作的安全性和仪器的正确使用方法。

5. 鼓励学生在实验过程中观察、记录和分析实验结果。

四、实验结果分析(15分钟)1. 引导学生讨论实验结果,并解释不同血型的含义。

2. 指导学生根据实验结果判断自己的血型,并与实际情况进行对比。

3. 引导学生思考不同血型的遗传规律和家族血型的关系。

五、实验总结与拓展(10分钟)1. 向学生提问:你在实验中遇到了哪些困难?你觉得血型鉴定实验有什么应用价值?2. 引导学生总结本节课所学的知识和实验操作技巧。

3. 提出拓展问题:除了A、B、AB、O四种血型外,还有其他血型吗?为什么?教学反思:1. 教师应提前准备好实验所需材料,并确保实验操作的安全性。

2. 在实验操作环节,教师应密切关注学生的实验过程,及时解答疑问。

3. 在实验结果分析环节,教师应引导学生积极思考和讨论,激发学生的学习兴趣。

血型操作规程

血型操作规程

血型操作规程血型操作规程为确保血型鉴定工作的准确性和安全性,维护献血者的利益,血型操作规程被制定出来。

该规程是献血工作中的重要参考,下面将详细介绍该规程的内容。

一、血型检测前的准备工作1. 核对献血者的身份信息,确保信息的准确性。

2. 准备检测所需要的试剂和相关工具,保证其完好。

3. 检查仪器设备是否处于正常工作状态,如有异常及时修复。

二、血型检测流程1. 筛查阶段a. 清洗献血者的手指,以确保无血迹和污物。

b. 选择合适的血型试剂,确保其品质符合相关标准。

c. 使用洁净的试剂滴管,将试剂滴在试管中。

d. 采集献血者的血样,一般情况下只需采集一滴血即可。

e. 将采集的血液滴在试管中,与试剂充分混合。

f. 观察试管中的混合物是否出现凝固或凝集现象。

2. 鉴定阶段a. 根据观察结果进行血型鉴定。

根据血液混合产生的凝固或凝集现象确定血型。

b. 一般情况下,血型鉴定可分为ABO血型和RH血型。

c. ABO血型可根据血液与ABO抗体的凝聚情况进行判断。

d. RH血型可根据血液与RH抗体的凝聚情况进行判断。

三、血型鉴定结果的处理1. 对于A、B、O和AB四种血型的鉴定,应保证鉴定结果的准确性。

2. 鉴定结果一般以ABO血型和RH血型的组合形式呈现,比如O型血RH阳性。

3. 如有疑问,可进行二次检测或借助其他技术手段进行验证。

4. 在发现献血者血型异常时,应立即停止献血,将异常情况上报给相关部门。

四、血型操作规程的注意事项1. 操作过程中要保持清洁,避免外界污染。

2. 使用过的试剂和工具要进行正确的处理和消毒,保证再次使用的安全性。

3. 不得在实验室中食用食品或饮用饮料。

4. 严格按照规定时间进行实验,可适当调整时间和条件,但需保证可靠性和准确性。

5. 目测判断血型时,要确保实验者具备专业知识和经验。

血型操作规程是血液检验工作必不可少的参考,操作者应严格遵守该规程的要求,确保血型鉴定工作的准确性和安全性。

同时,操作者还应不断加强自身的专业知识和技能,提高实验能力,为献血工作做出贡献。

验血型实训课教案模板范文

验血型实训课教案模板范文

一、课程基本信息课程名称:验血型实训课专业:医学检验技术学期:第X学期班别:X班人数:X人周数:X周教师:XXX二、教学目标1. 知识目标:- 掌握ABO血型系统的基本原理。

- 了解Rh血型系统的相关知识。

- 熟悉血型鉴定操作流程及注意事项。

2. 能力目标:- 学会使用血型鉴定试剂和仪器。

- 能够独立进行血型鉴定实验。

- 培养学生严谨、细致的操作习惯。

3. 素质目标:- 增强学生的团队协作意识。

- 培养学生的责任心和使命感。

- 提高学生的实验操作技能和实际应用能力。

三、教学内容1. ABO血型系统:- 血型鉴定的原理。

- ABO血型鉴定方法。

- 血型鉴定试剂的使用。

2. Rh血型系统:- Rh血型鉴定的原理。

- Rh血型鉴定方法。

- Rh血型鉴定试剂的使用。

3. 血型鉴定实验操作流程:- 实验器材准备。

- 样本采集。

- 实验操作步骤。

- 结果判定。

四、教学过程1. 导入- 结合实际案例,介绍血型鉴定的意义和重要性。

2. 理论讲解- 讲解ABO血型和Rh血型的基本原理。

- 讲解血型鉴定方法及试剂使用。

3. 实验操作- 学生分组进行实验操作。

- 教师巡回指导,解答学生疑问。

4. 结果分析- 学生互相交换实验结果,进行讨论分析。

- 教师点评,总结实验结果。

5. 课堂小结- 回顾本节课所学内容。

- 强调实验操作注意事项。

五、教学评价1. 实验操作:- 观察学生实验操作的规范性、熟练程度。

2. 实验结果:- 检查学生实验结果的准确性。

3. 学生讨论:- 评价学生团队合作、讨论分析能力。

六、教学反思1. 教师应根据学生的实际情况,调整教学内容和进度。

2. 注重培养学生的实验操作技能和实际应用能力。

3. 鼓励学生积极参与实验操作,提高学习兴趣。

4. 加强实验教学,提高教学质量。

七、教学资源1. 血型鉴定试剂和仪器。

2. 血型鉴定实验指导书。

3. 相关实验操作视频。

八、教学安排1. 第1周:讲解ABO血型系统。

血型鉴定标准操作规程

血型鉴定标准操作规程

血型鉴定标准操作规程1.目的为规范各血型系统血型鉴定的技术操作,保证鉴定结果准确及临床输血安全有效,特制定本规程。

2.适用范围适用于输血科(血库)进行各血型系统血型鉴定。

3.职责输血科(血库)技术人员负责各血型系统血型鉴定。

4.所需设备和试剂设备普通离心机,血型血清学专用离心机,普通显微镜。

试剂各血型系统单克隆血型试剂,3%-5%的A、B、O型试剂红细胞。

5.检测环境条件室温应控制在18-27℃,湿度应保持30%-70%。

6.项目及方法ABO血型鉴定ABO血型鉴定原理红细胞上具有A抗原,而血清中含有抗B抗体者为A型;红细胞上有B抗原,而血清中含有抗A抗体者为B型;红细胞上没有A和B抗原,而血清中含有抗A、B抗体者为O 型;红细胞上有A和B抗原,而血清中没有相应抗体者为AB型,见表1。

表1.试剂血清、红细胞鉴定血型(一)玻板法实验操作(1)洁静的玻板,用记号笔在正定型一侧注明抗A、抗B、抗A(B),反定型一侧孔中注明A细胞、B细胞、O细胞。

(2)在正定型一侧孔中先加入相应试剂血清1滴,再加入待检者20%红细胞悬液1滴;在反定型一侧先加入待检者血清2滴,再加入相应20%试剂红细胞(为3-5人份的混合红细胞)1滴。

(3)摇动玻板数次,5min后观察凝集现象,判断并报告检测结果。

如有怀疑者,须做试管法对照。

(4)报告方式:通过计算机信息系统发布正式血型结果。

注意事项(1)操作者必须认真细致,严格查对,准确报告血型结果。

(2)鉴定血型时,室内温度宜在18-27℃,以免产生假阳性。

遇有可疑冷凝集时 (1)先将玻板放在日光灯处加热3-5分钟后观察 (2)将待检者红细胞用37℃生理盐水洗涤2-3次后,再做血型鉴定。

(3)抗A、抗B、抗A(B)试剂血清,效价不低于256,亲和力在15s以内出现凝集,3min 时凝块不小于1mm2,冷凝集等效价在1:4以下。

(4)应另备有一套合格的试剂的血清作对照。

(5)所有待检者的血型均应做正、反定型,防止误定血型。

血型鉴定操作规程

血型鉴定操作规程

血型鉴定操作规程血型鉴定是一项重要的实验技术,用于确定一个人的血型类型。

在医学和生物学中,血型鉴定对于输血、配型、疾病诊断和遗传学研究都具有重要的意义。

为了确保血型鉴定的准确性和可靠性,下面是一份血型鉴定操作规程。

实验准备:1.准备所需的实验器材,包括试剂盒、试管、离心管、离心机等。

2.保证实验室工作台的清洁和无菌状态。

3.检查试剂盒和试剂的有效期,确保使用的试剂没有过期。

4.按照实验操作流程规划各个步骤,确保整个实验的顺利进行。

实验操作流程:1.洗手并戴上实验手套,以避免交叉污染。

2.根据需要,准备待检血液样本。

血液样本可以来自采血针和采血管,也可以是已被提前采集的血液样本。

3.将待检样本和试剂同时取出并放在一个平稳的工作台上。

4.将待检血液样本分别滴入试管中,一般每个试管滴入样本约10μL。

5.使用试剂盒中的试剂,根据说明书的指导,将试剂滴入相应的试管中。

6.轻轻摇晃试管,使血液样本和试剂充分混合。

7.置于常温下反应一段时间,一般为15~30分钟。

8.准备离心管,将试管中的液体小心地转入离心管中。

9.将离心管放入离心机中,以适当的转速离心,分离血型表现物质。

10.离心结束后,使离心管保持水平,仔细观察血型表现物质的沉积情况。

11.根据沉积情况,确定待检样本的血型类型。

常见的血型有A型、B 型、AB型和O型,有时还会有RH阴性或阳性的判断。

12.将结果记录下来,并进行结果校对。

实验注意事项:1.操作过程中需佩戴手套,以避免污染和感染。

2.确保待检血液样本干净、无异物和杂质。

3.操作前要仔细阅读试剂盒的说明书,了解试剂的用途和使用方法。

4.严格按照试剂盒说明书的要求操作,避免试剂的交叉污染。

5.实验操作过程中要注意试剂的保存和保养,确保试剂的有效性。

6.避免强烈震荡试管和离心管,以避免溅出和破损。

7.注意对试剂和废弃物的正确处理,以保护环境和安全。

血型鉴定操作规程的目的在于确保操作的准确性和可靠性,从而得出准确的血型结果。

ABO血型鉴定操作规程

ABO血型鉴定操作规程

ABO血型鉴定操作规程ABO血型鉴定是一种常见的血液学检验方法,用于确定个体的血型类型。

ABO血型鉴定操作规程是指在进行ABO血型鉴定时应该遵循的步骤和操作规范,以确保检验结果的准确性和可靠性。

下面将介绍一份ABO血型鉴定操作规程,供参考。

一、实验室准备2.确保实验室环境清洁整洁,工作台面干净无异物。

3.检查试剂盒和试剂的有效期和保存条件,确保试剂的质量良好。

4.对实验室设备进行日常检查和维护,确保设备正常工作。

二、标本采集与处理1.根据要求收集患者的血样,确保标本采集过程无菌无误。

2.将标本装在标本采集管中并进行标注,确保标本不被混淆。

3.采用标本离心的方法分离血浆和红细胞,准备好把血浆和红细胞分开的离心管。

三、试剂的稀释与标记1.根据试剂盒的说明书和标准操作规程对试剂进行稀释和标记。

2.确保试剂的标记清晰明确,不混淆。

3.标记好试剂的试管,准备好用于分析的试管。

四、ABO血型鉴定实验过程1.将患者的血浆和稀释后的抗体试剂混合均匀。

2.通过凝集试验和沉淀试验等方法对混合后的血浆进行判断,确定患者的血型类型。

3.记录检验结果并进行复核,确保结果的准确性。

五、实验数据的记录和存储1.记录实验的时间、地点、操作人员等基本信息。

2.记录检验结果和分析过程,确保数据的完整和准确。

3.存储检验数据和样本,确保数据的可追溯性和保密性。

六、结果解读与报告1.根据实验结果进行血型鉴定,判断患者的血型类型。

2.根据实验结果填写并发放血型鉴定报告,包括患者姓名、血型类型、检验日期等信息。

以上就是一份ABO血型鉴定操作规程的简要介绍,希望对实验室工作人员在进行ABO血型鉴定时提供一定的参考。

在进行实验操作时要严格按照规程和标准操作程序进行,确保检验结果的准确性和可靠性。

血型鉴定标准教案模板范文

血型鉴定标准教案模板范文

教学目标:1. 了解血型鉴定的基本原理和方法。

2. 掌握A型、B型、O型和AB型血型的鉴定方法。

3. 理解血型在临床医学和输血中的应用。

教学重点:1. 血型鉴定的原理和方法。

2. A型、B型、O型和AB型血型的鉴定方法。

教学难点:1. 血型鉴定实验操作的正确步骤。

2. 血型在临床医学和输血中的应用。

教学过程:一、导入1. 引导学生思考:什么是血型?血型与人体健康有什么关系?2. 提出问题:如何进行血型鉴定?有哪些血型?二、新课讲解1. 血型鉴定的原理:根据人体血液中含有的血型抗原来分类。

2. 常见的血型:A型、B型、O型和AB型。

3. 血型鉴定方法:a. 抗原抗体反应法:通过观察红细胞与抗血清之间的反应,判断血型。

b. 凝集试验法:将抗血清与待测红细胞混合,观察红细胞是否发生凝集。

4. 血型鉴定步骤:a. 准备试剂:抗A血清、抗B血清、生理盐水、待测红细胞。

b. 取适量待测红细胞加入试管中。

c. 分别加入抗A血清和抗B血清。

d. 观察红细胞是否发生凝集。

5. 血型在临床医学和输血中的应用:a. 输血时,确保供血者和受血者血型相匹配,避免输血反应。

b. 在器官移植等手术中,血型鉴定有助于减少排斥反应。

三、实验操作1. 学生分组进行血型鉴定实验。

2. 教师巡视指导,纠正实验操作错误。

3. 实验结束后,让学生分享实验结果。

四、课堂小结1. 回顾血型鉴定的原理和方法。

2. 强调血型在临床医学和输血中的应用。

五、作业布置1. 查阅资料,了解其他血型(如RH血型)的鉴定方法。

2. 思考:血型鉴定在日常生活和医学领域有哪些重要作用?教学反思:本节课通过讲解血型鉴定的原理、方法和应用,使学生了解了血型鉴定在临床医学和输血中的重要性。

在教学过程中,注重实验操作,培养学生的动手能力。

同时,引导学生思考血型在日常生活和医学领域的作用,提高学生的学习兴趣。

在今后的教学中,可结合实际案例,进一步加深学生对血型鉴定的认识。

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血型鉴定操作规程
血型鉴定操作规程
一.玻片法(仅适用于正定型)
1 .原理:
1.1根据红细胞上有无A抗原或(和)B抗原,可以将红细胞血型分为A 型、B型、AB型和O型。

根据抗-A和抗-B抗体与对应红细胞的凝集反应,可以鉴定ABO血型。

1.2根据抗-D抗体与对应红细胞抗原的凝集反应,区分RhD阳性和RhD 阳性。

2 .标本采集:
用EDTA抗凝管采集被检对象静脉血,充分混匀,确保抗凝充分。

紧急情况下可以使用抗凝动脉血。

婴幼儿及其他不便于真空管采血的患者,如不进行反定型试验可采集末梢血。

3. 标本运送与储存:
采集好的标本与申请单同期尽快(一般2小时内)送往输血科。

标本采集后和检测后,应置于2~8℃环境下。

检测后的标本应至少保存7天,以备结果查对。

4 .仪器与材料:
抗-A/B血型定型试剂(单克隆抗体)、RhD(IgM)血型定型试剂(单克隆抗体)、载玻片、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。

5. 操作步骤:
5.1用标记笔在载玻片上划分成A、B、D三个区域;
5.2在标记好的玻片上分别加1滴抗-A、抗-B和抗-D血型定型试剂;
5.3再各加1滴10%患者红细胞悬液(该红细胞悬液可以是盐水悬液,也可
以是悬浮于自身血浆或血清中的红细胞);
5.4用干净的搅拌棒将红细胞悬液和试剂充分混合,并把混合物均匀涂开,
使其覆盖大约直径20mm的面积;
5.5缓慢连倾斜摇动玻片1-2min,观察结果并记录。

6. 结果判定:
6.1凝集或发生溶血为阳性结果;
6.2细胞混匀2min后仍呈悬液状态的为阴性结果;
6.3对结果有怀疑,应用试管法或微柱凝胶法重复实验。

二、纸板法
1 .原理:
1.1根据红细胞上有无A抗原或(和)B抗原,可以将红细胞血型分为A 型、B型、AB型和O型。

根据抗-A和抗-B抗体与对应红细胞的凝集反应,可以鉴定ABO血型正定型。

A1细胞上含有A和A1抗原,B细胞上含有B抗原。

用已知的A、B细胞检测被检者血清中有无相应的抗-A或抗-B抗体,即反定型。

综合正反定型结果确定受检标本ABO血型。

1.2根据抗-D抗体与对应红细胞抗原的凝集反应,区分RhD阳性和RhD 阳性。

2 .标本采集:
用EDTA抗凝管采集被检对象静脉血,充分混匀,确保抗凝充分。

紧急情况下可以使用抗凝动脉血。

婴幼儿及其他不便于真空管采血的患者,可采集末梢血。

3. 标本运送与储存:
采集好的标本与申请单同期尽快(一般2小时内)送往输血科。

标本采集后和检测后,应置于2~8℃环境下储存。

检测后的标本应至少保存7天,以备结果查对。

4 .仪器与材料:
抗-A/B血型定型试剂(单克隆抗体)、RhD(IgM)血型定型试剂(单克隆抗体)、血型鉴定专用纸板、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。

5. 操作步骤:
5.1取洁净五孔血型鉴定专用纸板,做好姓名标记;
5.2 按纸板标识向每孔中分别加入相应试剂抗A、抗B、抗D血清各1滴以及受检者血清各2滴;
5.3 各孔中分别加入受检者红细胞适量及相应所需3-5%A型、B型试剂红细胞(自制或商品化试剂)并搅匀,使其覆盖直径15-20mm的面积;
5.4 轻轻旋转摇晃混匀,直到形成均匀的细胞悬液或凝集块,边摇边观察;
5.5 3min以上记录结果。

记录观察到的凝集程度或溶血程度。

6. 结果判定:
6.1凝集或发生溶血为阳性结果;
6.2细胞混匀2min后仍呈悬液状态的为阴性结果;
6.3对结果有怀疑,应用试管法或微柱凝胶法重复实验。

三、试管法
1 .原理:
1.1根据红细胞上有无A抗原或(和)B抗原,可以将红细胞血型分为A 型、B型、AB型和O型。

根据抗-A和抗-B抗体与对应红细胞的凝集反应,可以鉴定ABO血型正定型。

A1细胞上含有A和A1抗原,B细胞上含有B抗原。

用已知的A、B细胞检测被检者血清中有无相应的抗-A或抗-B抗体,即反定型。

综合正反定型结果确定受检标本ABO血型。

1.2根据抗-D抗体与对应红细胞抗原的凝集反应,区分RhD阳性和RhD 阳性。

2 .标本采集:
用EDTA抗凝管采集被检对象静脉血,充分混匀,确保抗凝充分。

紧急情况下可以使用抗凝动脉血。

婴幼儿及其他不便于真空管采血的患者,如不进行反定型试验可采集末梢血。

3. 标本运送与储存:
采集好的标本与申请单同期尽快(一般2小时内)送往输血科。

标本采集后和检测后,应置于2~8℃环境下储存。

检测后的标本应至少保存7天,以备结果查对。

4 .仪器与材料:
抗-A/B血型定型试剂(单克隆抗体)、RhD(IgM)血型定型试剂(单克隆抗体)、一次性试管、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。

5. 操作步骤:
5.1 ABO血型正定型试验
5.1.1 取两支洁净试管,做好标记,按试管标记向试管中加入抗-A、抗-B 血清各1滴;
5.1.2 向每管中各加入1滴3-5%被检红细胞盐水(血清或血浆)悬液;
5.1.3 轻轻混合试管内容物,1000g离心15s;
5.1.4 结果判断:将试管拿成锐角,缓慢倾斜,使液体通过细胞扣,当细胞不再附着在试管上时,继续缓慢地倾斜和振摇,直到形成均匀的细胞悬液或凝集块;
5.1.5 记录结果:记录观察到的凝集程度或溶血程度。

用ABO反定型实验进一步验证正定型结果。

5.2 ABO血型反定型试验
5.2.1 取两支洁净试管,做好标记,向每管中各加2滴被检血清(或血浆);
5.2.2 按试管标记向试管中加入3-5%A型、B型试剂红细胞各1滴;
5.2.3 轻轻混合试管内容物, 1000g离心15s;
5.2.4 结果判断:将试管拿成锐角,缓慢倾斜,使液体通过细胞扣,当细胞不再附着在试管上时,继续缓慢地倾斜和振摇,直到形成均匀的细胞悬液或凝集块;
5.2.5 记录结果:记录观察到的凝集程度或溶血程度。

与正定型结果进行相互验证;
5.2.6 如果反应较弱,可将试管于室温(或4℃)放置5~10min,以促进弱抗体的反应,再离心观察结果。

如果反应还是很弱可以增加血清(或血浆)滴数,最多到6滴以加强反应。

5.3 RhD血型鉴定试验
5.3.1 取一支洁净试管,做好标记,加入抗-D血清1滴;
5.3.2 向试管中加入1滴3-5%被检红细胞盐水(血清或血浆)悬液;
5.3.3 轻轻混合试管内容物,1000g离心15s;
5.3.4 结果判断:将试管拿成锐角,缓慢倾斜,使液体通过细胞扣,当细胞不再附着在试管上时,继续缓慢地倾斜和振摇,直到形成均匀的细胞悬液或凝集块;
5.3.5 记录结果:记录观察到的凝集程度或溶血程度。

6.1凝集或发生溶血为阳性结果;
6.2细胞混匀2min后仍呈悬液状态的为阴性结果。

四、微柱凝胶法
1.原理:
ABO/RhD卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗A、抗B、抗D标准血清,如果红细胞表面存在A或B或D抗原,就会与对应的抗体发生凝集反应,凝胶颗粒具有分子筛的作用,可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒,使其悬浮在凝胶颗粒中,未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。

2 .标本采集及处理:
用EDTA抗凝管采集被检对象静脉血,充分混匀,确保抗凝充分。

紧急情况下可以使用抗凝动脉血。

3000rpm,离心3-5min。

(婴幼儿及其他不便于真空管采血的患者,如不进行反定型试验可采集末梢血。


3. 标本运送与储存:
采集好的标本与申请单同期尽快(一般2小时内)送往输血科。

标本采集后和检测后,应置于2~8℃环境下储存。

检测后的标本应至少保存7天,以备结果查对。

4 .仪器与材料:
ABO\RhD血型定型检测卡(单克隆抗体)、ABO\RhD血型检测卡(微柱凝胶)、、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、一次性试管。

5. 操作步骤:
5.1将微住凝胶试剂卡做好患者姓名等标记;
5.2 将待检红细胞用低离子强度溶液稀释成0.5%-0.8%的悬浮液,加入标有-
A、-
B、-D(和对照)的微管中,各1滴(或50ul);
5.3用低离子溶液将反定型红细胞A1、B配成0.5%~0.8%浓度,分别加入对应的微孔A C、B C中,各1滴(或50μl)。

再分别加入患者血浆各1滴(或50μl);
5.4专用离心机离心5分钟,2分钟900rpm, 3分钟1500rpm,取出肉眼判定结果。

6. 结果判定:
6.1阳性结果:红细胞抗原与相应抗体在微住凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中,为阳性反应。

6.1 反应强度:特异性红细胞抗原抗体复合物位于凝胶表面,为强阳性反应;复合物在凝胶中为弱阳性反应;愈靠近凝胶底部颗粒愈小,反应愈弱。

6.1 阴性结果:被检红细胞抗原无相应的抗体结合,不出现特异性抗原抗体复合物,红细胞沉于为主凝胶的底部。

附:
血型反应格局与结果对照表。

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