豚鼠气道平滑肌ATP敏感钾通道电流的动力学特性
离子通道电流
（三） 其他电流
➢ ICl ：氯离子电流，外流产生一种内向电流， 在起搏细胞旳自动除极化中起一定旳作用；
➢ I Na/Kpump (I pump ) ：钠钾泵电流，每次运转 时泵出3个Na+换进2个K+，因而产生一种微小 旳外向电流，称泵流。
二、钠通道电流
INa 是神经和肌肉，涉及心肌，兴奋或去极 化旳第一种离子流。在心肌细胞，去极化过程 中有无INa参加是产生快反应电位与慢反应电位 旳根本原因。所以，它旳变化对兴奋旳发生及 传播都有主要意义。
Na+通道旳H—H工作模型
5. 钠通道旳电流特点
（1）特点
➢ ① 膜去极化达阈电位（约－70mV）时此电流出现；
➢ ② 膜去极化达Na+平衡电位时消失（约＋30mV）；
➢ ③ 具有时间依赖性（τ＝1ms），虽然膜电位维持在 Na+通道开放所需旳电位水平， Na+电流亦可作为时间旳 函数而消失；
➢ ④ 在膜完全去极阶跃（full depolaring step）之 前将膜维持在一低电压状态，则Na+电流失活，此时再经 一去极化电流也不能激活Na+电流。
➢ 3. 其他内向电流：If 是由Na+携带旳内向电流，属于起搏电
流之一。
（二）携带外向电流旳通道
➢ IK1 ：内向整流钾电流 ➢ IK ：延迟整流钾电流(IKur, IKr, IKs) ➢ Ito ：瞬时外向钾电流 ➢ IKAch ：乙酰胆碱敏感钾电流 ➢ IKATP ：ATP敏感钾电流 ➢ IKCa：钙激活钾通道电流
（4）通道闸门
快Na+电流是Na+经过通道时旳离子电流。故其动力学取 决于Na+通道旳开放状态。根据Hodgkxin-Huxley旳闸门学说 来解释INa旳激活与失活过程。设想，Na+通道有两组带电粒子 起着门控作用。
药物对豚鼠离体肠平滑肌的作用及PA2、PD2测定的实验方案
2、PA2、PD2 值 PA2 是一种用以表示竞争性拮抗剂作用强度的指标， 其意义是能使激动剂 提高到原来的 2 倍时，可产生与原来浓度相同效应所需的拮抗剂克分子浓度的 负对数(-log(B))。PA2 的值越大说明拮抗剂的作用越强。pA2 是拮抗参数(ant agonism parameter)：当有一定浓度的拮抗药存在时，激动剂增加 2 倍时才能 达到原来效应，此时拮抗药的负对数即拮抗参数， pA2 = -log[I] = -logKI PD2：是激动剂与受体亲和力的定量表示。按照Ariens的定义，PD2是产 生50％最大效应(E=1／2Emax)的摩尔浓度的负对数(-log[D])。PD2值越大，说 明药物和受体的亲和力越大，药效越强。计算方法与PA2相似
实验名药物对豚鼠离体肠平滑肌的作用及pa2pd2测定项目背景实验的目的意义以及欲解决的问题和国内外研究现状实验的目的掌握pa2pd2值的测定方法实验意义掌握pa2pd2值的测定方法国内外研究现状分析一阿托品对胃肠道的研究状况阿托品可以抑制受体节后胆碱能神经支配的平滑肌与腺体活动并根据本品剂量大小有刺激或抑制中枢神经系统作用
实验名 称
药物对豚鼠离体肠平滑肌的作用及 PA2、PD2 测定
项目背景（实验的目的、 项目背景（实验的目的、意义，以及欲解决的问题和国内外研究现状） 以及欲解决的问题和国内外研究现状） 实验的目的 1. 建立豚鼠离体肠平滑肌实验模型； 2. 观察阿托品对乙酰胆碱的竞争性拮抗作用 3. 掌握 pA2、pD2 值的测定方法 实验意义 1 建立方法研究药物拮抗作用 2 掌握 pA2、pD2 值的测定方法 国内外研究现状分析 （一）阿托品对胃肠道的研究状况 阿托品可以抑制受体节后胆碱能神经支配的平滑肌与腺体活动，并根据 本品剂量大小，有刺激或抑制中枢神经系统作用。解毒系在 M-胆碱受体部 位拮抗胆碱酯酶抑制剂的作用, 如增加气管、肠道系粘液腺与唾液腺的分 泌，肠道平滑肌挛缩，以及植物神经节受刺激后的亢进。此外，阿托品能 兴奋或抑制中枢神经系统，具有一定的剂量依赖性。对心脏、肠和肠道平 滑肌作用比其他颠茄生物碱更强而持久。 （二）乙酰胆碱的研究状况 ACh 可明显兴奋胃肠道，使其收缩幅度、张力增加，胃、肠平滑肌蠕动增 加，并可促进胃、肠分泌，导致恶心、嗳气、呕吐、腹痛及排便等症状。Ach 还 可使泪腺、 气管和肠道腺体、 唾液腺、 消化道腺体和汗腺分泌增加， 使肠道收缩， 颈动脉和主动脉体化学受体兴奋。当 ACh 局部滴眼时，可致瞳孔收缩，调节于
活性氧对豚鼠心室肌细胞不同钾通道离子电流的影响
活性氧对豚鼠心室肌细胞不同钾通道离子电流的影响徐长庆;李玉荣;孙可青;杨宝峰;单宏丽;娄延平;傅国辉【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】1999(015)009【摘要】目的:揭示氧自由基导致跨膜电位变化的离子电流基础.方法:采用全细胞膜片钳技术,观察了H2O2(lmmol/L)对豚鼠单个心室肌细胞不同钾通道的影响.结果:H2O2使豚鼠心肌细胞静息电位(RP)降低,动作电位时程(APD)显著缩短的同时,明显抑制超极化时的内向整流钾电流(IK1),致(IK1)正常呈N字型I-V曲线几乎变成一条斜线;增强延迟整流钾电流(IK)的快组分(IKr)和慢组分(IKs),尤其IKr增加更显著,并使电流电压曲线向右上偏移.结论:氧自由基对心室肌细胞的IK1和IK的不同影响,是其所致跨膜电位变化和心律失常的可能离子机制.【总页数】4页(P773-776)【作者】徐长庆;李玉荣;孙可青;杨宝峰;单宏丽;娄延平;傅国辉【作者单位】哈尔滨医科大学,病理生理教研室,哈尔滨,150086;哈尔滨医科大学,生理教研室,哈尔滨,150086;黑龙江省医院;哈尔滨医科大学,药理教研室,哈尔滨,150086;哈尔滨医科大学,病理生理教研室,哈尔滨,150086;哈尔滨医科大学,病理生理教研室,哈尔滨,150086;哈尔滨医科大学,病理生理教研室,哈尔滨,150086【正文语种】中文【中图分类】R363【相关文献】1.前列腺素E1预处理对豚鼠缺血/再灌注心室肌细胞钾通道的影响 [J], 角灿武;付润芳;韩圣娜;张莉蓉;张艳侠2.前列腺素E1药理性预适应对缺血-再灌注豚鼠心室肌细胞ATP敏感性钾通道的影响 [J], 角灿武;付润芳3.粉防己碱对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾通道的影响 [J], 骆红艳;唐明;吴克忠;钱悦;李守宾;别毕华;岳远坤;白润涛;胡新武4.雷诺嗪对豚鼠心室肌细胞钠离子电流的影响 [J], 王国涛;白焱;范秀玲;于淋淋5.血小板活化因子对豚鼠心室肌细胞动作电位和钾通道的影响(英文) [J], 杜以梅;唐明;刘长金;柯琴梅;骆红艳;胡新武因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
葛根素对豚鼠心肌线粒体ATP敏感性钾通道的作用
葛根素对豚鼠心肌线粒体ATP敏感性钾通道的作用
周逸;唐其柱;史锡滕;王滕;付金容
【期刊名称】《中国心脏起搏与心电生理杂志》
【年(卷),期】2004(018)0z1
【摘要】研究葛根素(Pur)对豚鼠心肌线粒体ATP敏感性钾通道(mito KATP)的作用,以探讨其对缺血心肌保护作用的机制.……
【总页数】1页(P100)
【作者】周逸;唐其柱;史锡滕;王滕;付金容
【作者单位】武汉大学人民医院心血管内科,湖北,武汉,430060;武汉大学人民医院心血管内科,湖北,武汉,430060;武汉大学人民医院生物医学工程研究室,湖北,武汉,430060;武汉大学人民医院心血管内科,湖北,武汉,430060;武汉大学人民医院心血管内科,湖北,武汉,430060
【正文语种】中文
【中图分类】R5
【相关文献】
1.刺五加皂甙B对心肌线粒体ATP敏感性钾通道的作用 [J], 周逸;唐其柱;史锡滕;王滕;付金容
2.刺五加皂甙B对豚鼠心肌线粒体ATP敏感性钾通道的作用 [J], 唐其柱;周逸;付金容;史锡滕;王滕
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4.葛根素对豚鼠心肌线粒体ATP敏感性钾通道的作用 [J], 周逸;唐其柱;史锡滕;王滕;付金容
5.烧伤血浆中分子对豚鼠心肌线粒体脂质过氧化作用的影响 [J], 叶本兰;肖家思因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
小肠平滑肌的生理特性和药物的影响
小肠平滑肌的生理特性和药物的影响姓名：学号：班级：一、实验目的1.学习离体肠平滑肌器官灌流的实验方法。
2.观察豚鼠离体小肠平滑肌的一般生理特性。
3.观察药物对豚鼠离体小肠平滑肌生理特性的影响。
二、实验材料1.实验动物：豚鼠2.器材：小肠平滑肌恒温水浴装置，球胆（气泵或氧气筒），张力换能器，烧杯，温度计，注射器，注射针头，棉线，手术剪，培养皿，滴管。
3.药品：台式液，10-5mol/L乙酰胆碱，10-4mol/L苯海拉明，10-5mol/L磷酸组胺，10-3mol/L硫酸阿托品，1%BaCl2溶液。
三、实验方法和步骤1.豚鼠离体肠平滑肌的制备以手倒提豚鼠，用木槌猛击其头后部令其急死，立即剖开腹腔，轻轻剪取回肠，迅速置于冷台式液中，除去肠系膜，并将肠管剪成数段，用台式液将肠内容物冲洗干净，然后剪成小段备用。
注意操作应轻柔。
2.实验装置的准备此装置由恒温、供气、供液和排液以及记录部分组成。
浴槽内水温由恒温装置控制在37±0.5℃。
浴管与浴槽相连，以使浴管内营养液保持同样的恒温。
气源（充气气囊或气泵等）与浴管相连，气流量以1～2个小气泡为宜。
浴管下端与排液管相连，其上端管口处可随时充入新的恒温营养液。
3.标本连接及记录轻取一段标本，一端用线系在装置的小钩上，对角线方向将另一端用与张力换能器相连的小钩钩住，慢慢放入浴管中并调节其紧张度至适宜，此时标本通过张力换能器与计算机相连。
标本连接好后向浴管内充入37±0.5℃营养液，适应10~15min后，描记一段离体回肠平滑肌正常收缩曲线。
4.如果环境适宜，标本存活，适应10～15min后，描记一段正常曲线，然后按如下步骤给药。
5.加入药物观察并记录曲线1)加入10-5mol/L乙酰胆碱0.2ml，待收缩到最高点时，加入10-3mol/L硫酸阿托品0.1ml，然后再加入同量的乙酰胆碱，观察结果。
实验完毕后冲洗浴管三次。
2)加入10-5mol/L磷酸组胺溶液0.3ml，待收缩到最高点时，加入10-4mol/L苯海拉明0.3ml，3min后再加入同量的磷酸组胺溶液，观察结果。
《生理学》背诵重点
《生理学》背诵重点（一）名词解释1、内环境（internalenvironment）：细胞外液是细胞直接接触和赖以生存的的环境，围绕在多细胞动物体内细胞周围的体液称为内环境。
2、稳态（homeostasis）：是指内环境的理化性质的相对稳定，如温度、PH、渗透压和各种液体成分的相对恒定状态。
3、原发性主动转运：细胞直接利用代谢产生的能量将物质逆浓度梯度或电位梯度进行跨膜转运的过程，称为原发性主动转运。
4、继发性主动转运：许多物质主动转运时所需的驱动力并不直接来自ATP的分解，而是利用原发性主动转运所形成的某些离子的浓度梯度，在这些离子顺浓度梯度扩散的同时使其他物质逆浓度梯度和电位梯度跨膜转运，这种间接利用ATP能量的主动转运过程，称为继发性主动转运。
5、受体（receptor）：是指细胞中具有接受和传导信息功能的蛋白质，分布于细胞膜中的受体称为膜受体，位于胞质内和核内的受体则分别称为胞质受体和膜受体。
6、第二信使（secondmessenger）：是指激素、神经递质、细胞因子等细胞外信号分子（第一信使）作用、DG、cGMP、Ca2+。
于膜受体后产生的细胞内信号分子。
较重要的第二信使有cAMP、IP37、静息电位（restingpotential，RP）：细胞处于安静状态（未受刺激）时，细胞膜两侧存在着外正内负相对平稳的电位差，称为静息电位。
8、动作电位（actionpotential，ap）：是指细胞在静息电位的基础上接受有效刺激后产生的一个迅速的可向远处传播的膜电位波动。
9、兴奋-收缩耦联：将横纹肌细胞产生动作电位的电兴奋过程与肌丝滑行的机械收缩联系起来的中介机制或过程，成为兴奋-收缩耦联。
10、极化（polarization）：生理学中，通常将安静时细胞膜两侧处于外正内负的状态称为极化。
11、超射（overshoot）：膜电位高于零电位的部分称为超射。
12、血液凝固（bloodcogulation）：简称凝血，指血液从流动的液体状态转变为不流动的凝胶状态的过程。
豚鼠心肌细胞分离方法及电生理特性的观察
豚鼠心肌细胞分离方法及电生理特性的观察宋建国;侯月梅【摘要】目的:建立膜片钳实验室单个心肌细胞的分离方法和膜片钳技术平台.方法:采用酶解法分离豚鼠心室肌细胞;在膜片钳全细胞模式下记录不同基础刺激周长时的动作电位以及L-型钙电流、延迟性整流钾电流.结果:酶解法分离豚鼠心室肌可以得到90%的存活细胞;豚鼠的单个心室肌细胞静息电位为(-74.0±2.2)mV,基础刺激周长1 000 ms时复极90%的动作电位时程(APD90)为(313.2±20.72) ms;APD90和复极50%的动作电位时程(APD50)均随着基础刺激周长的延长而延长.L-型钙电流峰值电流密度为(-7.36±1.10)pA/pF,0.1 mmol/L verapamil灌流后为(-1.22±0.49 )pA/pF,100 μmol/L CdCl2灌流后内向电流消失;延迟性整流钾电流密度为(4.88±0.96)pA/pF,2 μmol/L Dofetilide灌流后降低为(3.48±0.37)pA/pF.结论:酶解法分离的豚鼠心室肌细胞可以满足膜片钳实验的要求,此膜片钳技术可作为更深入电生理研究的平台.【期刊名称】《新疆医科大学学报》【年(卷),期】2007(030)005【总页数】5页(P490-493,497)【关键词】膜片钳;单个心室肌细胞;动作电位;离子电流【作者】宋建国;侯月梅【作者单位】新疆医科大学第一附属医院心功能科,新疆,乌鲁木齐,830054;新疆医科大学第一附属医院心功能科,新疆,乌鲁木齐,830054【正文语种】中文【中图分类】R-332;R33膜片钳技术的成熟应用已经有20多年的历史，通过所谓的“膜片钳”的特殊电极，同时实现电压钳和电流钳的功能，通过对跨膜电压和电流的控制，既可以记录全细胞的宏电流，也可以监测单个通道的微观电流，达到研究离子通道乃至细胞的电生理特性的目的，是心脏电生理和生物膜特性研究中的一项重要的工具[1]。
【国家自然科学基金】_钾通道电流_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140802
科研热词 推荐指数 膜片钳技术 9 钾通道 8 大电导钙激活钾通道 3 herg 3 钾电流 2 蛋白激酶c 2 膜片钳术 2 突变 2 神经元 2 电压门控钾通道 2 电压钳技术 2 生物效应 2 爪蟾卵母细胞 2 海马 2 毛细胞 2 延迟整流钾通道 2 前庭 2 内耳 2 乙酰胆碱 2 雌激素 1 阿司咪唑 1 长时程相关 1 钠通道 1 钠电流 1 钙通道,l型 1 钙库 1 酮色林 1 通道表达 1 迷走神经 1 超极化 1 调节性容积减小 1 蜜蜂 1 蒺藜皂苷 1 自发放电 1 自发性瞬时外向电漉 1 自发性瞬时外向电流 1 膜电位 1 膜片钳 1 脑水肿 1 脉冲磁场 1 胞质钙 1 胞外信号调节激酶 1 背根神经节小细胞 1 肺泡臣噬细胞 1 肺动脉平滑肌细胞 1 耳蜗螺旋动脉 1 缺血性心脏病 1 缺氧缺血,脑 1 缺氧 1 细胞松弛素b 1 线粒体膜上atp敏感的钾通道 1 纳米材料 1
53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80
心脏 心肌细胞 心肌 心房颤动 延迟整流钾通道 平滑肌细胞 大鼠 外向钾通道 基因表达 四乙胺 吗啡后处理 双苯氟嗪 双电极电压钳 参松养心胶囊 卡维地洛 共表达 全细胞膜片钳技术 保卫细胞 二异丙酚 乙酰胆碱 中华绒螯蟹 β -淀粉样肽25~35 westernblot技术 herg钾通道 herg fhl2 atp敏感钾通道 5-羟色胺
推荐指数 10 5 3 3 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
cGMP信号传导通路及钙敏感钾通道在D型钠尿肽抑制豚鼠胃动力中的作用
cGMP信号传导通路及钙敏感钾通道在D型钠尿肽抑制豚鼠胃动力中的作用张曙影;蔡正旭;蔡春玉;郭慧淑【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2010(50)25【摘要】目的观察豚鼠胃内是否存在钠尿肽(NP)受体,并观察cGMP信号传导通路及钙敏感钾通道在D型钠尿肽(DNP)抑制豚鼠胃动力中的作用.方法用放射自显影技术检测NP受体在胃内的分布,用四道生理记录仪记录胃平滑肌的自发性收缩活动,用膜片钳技术的全细胞技术记录钙敏感钾电流.结果NP受体存在于豚鼠胃底、胃体和胃窦,并在胃窦部密度最大.DNP抑制胃窦环形肌自发性收缩活动并呈现剂量依赖关系,DNP的这种抑制效应被鸟苷酸环化酶抑制剂LY83583所减弱而被cGMP敏感的磷酸酯酶抑制剂所增强.非选择性钾通道抑制剂四乙胺明显抑制DNP 对豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动的抑制作用.10 nmol/L的DNP增加豚鼠胃窦环形肌上钙敏感钾通道.结论 NP受体存在于豚鼠胃内并在胃窦部位分布密度最大,DNP明显抑制豚鼠胃窦环形肌自发性收缩活动,这种抑制效应可能通过cGMP途径实现,并且钙敏感钾通道可能也参与此过程.【总页数】3页(P1-3)【作者】张曙影;蔡正旭;蔡春玉;郭慧淑【作者单位】大连医科大学附属第一医院,辽宁大连116011;大连大学附属中山医院;大连医科大学附属第一医院,辽宁大连116011;延边大学附属医院;大连医科大学附属第一医院,辽宁大连116011【正文语种】中文【中图分类】R333【相关文献】1.2.135钙敏感钾电流参与调节C型钠尿肽对豚鼠胃窦环行肌舒张作用 [J], 郭慧淑;李香兰;孙嘉斌;郑海锋;许文燮2.D型钠尿肽对豚鼠胃窦环形肌细胞钙敏感钾电流的影响及其作用机制 [J], 张曙影;李萍;闻庆平;曲成龙;蔡正旭;郭慧淑3.L-型钙通道电流在D型钠尿肽抑制豚鼠胃动力中的作用 [J], 郭莉;李萍;邱阳;刘越坚;贺守城;法欣欣;郭慧淑4.钾通道在D型钠尿肽抑制胃动力中的作用 [J], 闻庆平;蔡春玉;李萍;蔡正旭;程雷;齐清会;郭慧淑5.NP-cGMP-PKG信号通路在D型钠尿肽抑制延迟整流型钾电流中的作用 [J], 蔡正旭;李胜;蔡春玉;曲成龙;齐清会;郭慧淑因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
钾、钙、镁、锌、硒、牛磺酸对豚鼠离体气道反应性的影响
钾、钙、镁、锌、硒、牛磺酸对豚鼠离体气道反应性的影响罗志刚;金咸;王容【期刊名称】《同济医科大学学报》【年(卷),期】1999(28)3【摘要】研究钾、钙、镁、锌、硒、牛磺酸对豚鼠气道反应性的影响及支气管上皮在其中的作用。
结果发现，Ｍｇ２＋（１．２５×１０－３ｍｏｌ／Ｌ）、牛磺酸（６．２５×１０－２ｍｏｌ／Ｌ）能降低支气管的基础张力，Ｃａ２＋（３．１３×１０－２ｍｏｌ／Ｌ）、Ｋ＋（４．８８×１０－２ｍｏｌ／Ｌ）则能增强之（Ｐ＜０．０５）。
用不影响支气管基础张力的浓度时，Ｍｇ２＋（４×１０－７～２．５×１０－４ｍｏｌ／Ｌ）和牛磺酸（２．５×１０－３～１．２５×１０－２ｍｏｌ／Ｌ）能降低其对Ａｃｈ的收缩反应性（Ｐ＜０．００１）；Ｚｎ２＋在６．２５×１０－６～１．６９×１０－４ｍｏｌ／Ｌ时对气道收缩反应无影响，但３．１３×１０－４ｍｏｌ／Ｌ时，可降低收缩反应性（Ｐ＜０．００１）；Ｋ＋（１．５６×１０－５～９．７５×１０－３ｍｏｌ／Ｌ）可增强收缩反应性（Ｐ＜０．０１）；Ｃａ２＋（１×１０－５～６．２５×１０－３ｍｏｌ／Ｌ）不影响反应性；Ｓｅ４＋在４×１０－７～５×１０－５ｍｏｌ／Ｌ时，对反应性无影响，当浓度≥２．５×１０－４ｍｏｌ／Ｌ时可能损伤支气管。
支气管去除上皮后对Ａｃｈ反应降低，但基本不改变各营养素对支气管收缩反应性的影响。
还研究了牛磺酸降低气道反应?【总页数】4页(P204-207)【关键词】钾;钙;镁;锌;硒;牛磺酸;气道反应性【作者】罗志刚;金咸;王容【作者单位】同济医科大学基础医学院病理生理学教研室【正文语种】中文【中图分类】Q581;R332.2【相关文献】1.豚鼠哮喘模型气道重建对气道反应性的影响 [J], 杨汀;王辰;庞宝森;黄克武;夏成青;牛淑洁2.牛磺酸镁配合物对豚鼠心室肌细胞钠离子和钙离子通道的影响 [J], 于雷;尹永强;李欣;高卫真;康毅;娄建石3.牛磺酸镁对豚鼠心室肌细胞钾离子通道的影响 [J], 于雷;尹永强;李欣;高卫真;康毅;娄建石4.补硒对克山病病区低硒居民血清锌、铜、铁、锰、钙和镁的影响 [J], 雷艳霞;代晓霞;赵俊杰;张培毅;刘作功;扬占田;宋鸿彬5.纤维和不同锌化合物对钙、磷、镁、钠、钾在雏鸡体组织中浓度和沉积的影响[J], 单安山;王安因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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2011年8月第31卷第8期基础医学与临床Basic＆ClinicalMedicineAugust2011
Vol．31No．8
收稿日期：2010－06－10修回日期
：2010－11－04
基金项目：国家自然科学基金
（30900581）
*
通信作者
（correspondingauthor）：shycm@fimmu．com
文章编号
：1001-6325（2011）08-0936-02
豚鼠气道平滑肌ATP敏感钾通道电流的动力学特性
孙红宇1，邹飞2，李勃兴3，陈明
3*
（南方医科大学1.基础医学院生理教研室；2.公共卫生与热带医学学院；3.
基础医学院
神经生物学教研室，广东广州
510515）
中图分类号：R322.3文献标志码
：A
气道平滑肌的主要作用是调节气道的紧张度和口径，而
钾通道开放剂可经ATP敏感钾通道
（ATP-sensitivepotassium
channel，K
ATP通道）使气道平滑肌松弛，此作用能被KATP
通道
特异性阻断剂优降糖阻断［1］。因此，KATP通道在气道平滑肌
高反应性所致气道阻力增高疾病中有重要的影响。但气道
平滑肌KATP通道动力学特性却一直未阐明。本研究用膜片
钳内面向外式记录，研究了豚鼠气道平滑肌KATP通道单通道
电流的动力学特性，为进一步揭示其在呼吸道疾病中的作用
提供了一些依据
。
1
材料与方法
1.1支气管平滑肌细胞急性分离：取SPF级、体质量300～
400g豚鼠，雌雄不拘，
由南方医科大学实验动物中心提供
［合格证号SCXK（粤）2006-0015］。
常规方法分离支气管平
滑肌细胞［2］，用1.5%链霉蛋白酶E（pronaseE）消化
。
1.2单离子通道记录：采用膜片钳技术的内面向外式［3］。
单通道电流用膜片钳放大器（CEZ-2200，Kohden公司）放大
，
用4道磁带录音机（RMG-5204，Kohden公司）记录资料。经
LabmasterDMA数据采集系统输入电脑后，以pCLAMP5.5.1
进行测量与分析
。
1.3统计学分析：数据用均数±标准差（x—±s）表示。
曲线
拟合与评估使用SPSS16.0软件进行统计学分析
。
2
结果
2.1单通道电流：
外向电流随去极化程度增大而幅度增高
（图1）。通道的电导为（112.4±5.1）pS（n=6）。
2.2通道开放时间：通道开放时间符合双指数拟合。
以钳
制电压－40mV为例，两个开放时间常数τo1及τo2分别为
（1.55±0.32）ms和（59.32±71.12）ms，
其中短成分及长成
分分别占61.22%及38.78%（n=6）。在－60～0mV之间
，
通道的平均开放时间Tom（Y）与钳制电压（X）的关系符合指
图1不同钳制电压下KATP通道的活动
Fig1ActivitiesofKATPchannelatdifferent
clampingvoltages
A.－20mV；B.－40mV；C.－60mV
数拟合：Y=2.184e0.688X（n=6，P＜0.05）。开放时间的长成
分τo2（Y）与钳制电压（X）符合指数拟合
：Y=13.437e0.401X（n
=6，P＜0.05）。
2.3通道关闭时间：通道关闭时间也符合双指数拟合。
以
钳制电压－40mV为例，两个关闭时间常数τc1及τc2分别为
（3.52±3.79）ms和（77.04±56.74）ms（n=6）。
其中短成分
及长成分分别占66.07%及33.93%。在－60mV～0之间
，
通道平均关闭时间Tcm（Y）与钳制电压（X）之间的关系可以
用拟合方程Y=－973.974X－2.14（n=6，P＜0.05）来表示
。
τ
c2
（Y）与钳制电压（X）的关系可以用拟合方程Y=
－1728.854X
－1.715
（n=6，P＜0.05）来表示。
2.4通道开放概率：通道开放概率（P
o
）
具有明显的电压依
赖性，随去极化程度加大而增加。在－60mV到－20mV之
间，电压（X）和Po（Y）的关系可以用拟合方程
Y=－0.008+
0.411lnX（n=6，P＜0.05）来表示。
2.5通道激活与去极化电压的关系：有2
例在去极化为
孙红宇豚鼠气道平滑肌ATP敏感钾通道电流的动力学特性
－60mV时出现二级通道电流，当去极化减少到－40mV
时，二级开放明显减少乃至逐渐消失。这种二级通道活动可被5mmol/LATP所阻断（图2）。通道的一、二级开放幅度分别为－6.81pA和－3.61pA。二级开放的平均开放时间是（6.73±9.58）ms，与一级开放的平均开放时间相似。图2KATP通道的二级电流Fig2TwolevelcurrentsofKATPchannelA.twolevelcurrentsat－60mV；B.thecurrentswasblockedbyATP3讨论豚鼠气道平滑肌KATP通道开放有长、短两种成分。从拟合方程可以发现，τo2和Tom、τc2和Tcm有着一致性，均与去极化程度相关。同时也表明，Tom和Tcm主要受开放时间和关闭时间中的长成分影响。开放概率与钳制电压之间符合对数拟合，说明KATP通道在对抗去极化中的作用是高效的，这很可能是正常状况下气
道平滑肌没有动作电位的原因之一
。
豚鼠气道平滑肌KATP通道在较大去极化钳制电压作用
下出现的二级开放现象，可能表明KATP通道具有两种不同的
开放状态，在环境变化过大时，有效地减少不利因素对细胞
的损伤作用
。
参考文献
：
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directinhibitoryeffectontheATP-sensitivepotassium
channel［J］．EurJPharmacol，2010，634：26－32．
科学家解开囊状口腔炎病毒的3D结构
据美国BIOCOMPARE科技新闻网（2010-03-05）报道，长久以来，囊状口腔炎病毒（Vesicularstomatitisvirus，VSV）就是研
究及了解negative-strandRNA病毒的良好模式，这一类病毒通常会引起流行性感冒，麻疹以及狂犬病等，更重要的是，有些研
究已显示VSV非常具有潜力能作为抗癌剂，因此，能解开VSV的立体结构，对相关疾病的预防及治疗有很大的作用，此研究
由UCLA加州纳米系统研究所、微生物研究所以及免疫及分子遗传研究所的研究团队共同完成，研究由Z．HongZhou教授主
导，研究成果发表于近期的《科学》（Science）期刊上
。
基于VSV的结构，研究团队提出了一个病毒组装的模式，起始点就在其子弹形状的尖端，数据显示VSV的组装是通过许
多被转译出来的病毒蛋白序列，在可能的交互界面下轮流使用，再将它的蛋白质以及RNA链旋转缠绕成子弹型形状。在
10.6-A的分辨率下，能观察到病毒体内的N及M蛋白，同时也能清楚的看到nucleocapsid环绕在外。研究人员指出，VSV
结
构的解开将有利于HIV及其他致死性病毒疫苗的开发
。
ASIC2
孔道蛋白可帮助控制血压
据美国BIOCOMPARE科技新闻网（2010-03-02）报道，爱荷华大学的研究人员最近发现了一个关键的孔道蛋白质
（protein
channel），可以帮助神经感测血管里的血压，并维持一定的平衡。
主导研究计划的FrankAbboud博士表示，身体能自动感测血压的变化并立即加以调整，可以说是非常重要的，当你一发
怒，血压可能立即飙升，没有适当而且立刻的调整，很容易就会引发病变的发生，甚至产生立即的危险
。
在这一个研究计划中，研究人员利用小鼠实验模型，发现了神经细胞上一个称为ASIC2孔道蛋白（ASIC2channel），就像神
经细胞上的压力传感器（baroreceptor），血管上的这个蛋白分子如果异常，那么神经细胞的功能就会受损，如果将这个蛋白质
的基因剔除，那么小鼠绝对会出现高血压的症状
。
研究人员认为ASIC2蛋白孔道的主要功能是在帮助神经感应血压，并且将相关的讯号提供给大脑，及时而有效的调节血
压，以避免危险的发生，而下一个目标，就试着看看人类的神经细胞上，是不是也存在着同样的一个压力传感器，也许一些发
生血压异常的高血压患者，出现病症的关键，就在这个分子身上
。
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