第六章 兽药残留检测技术 苯并咪唑类
第六章兽药残留检测技术磺胺类1.pptx
柱切换技术
在线痕量富集技术可分离/净化牛奶样品中9种磺胺 类药物：
磺胺类药物在预富集柱RP-C18(10µm)中被保留浓缩, 干扰杂质用淋洗剂洗去后,预柱中的磺胺类药物再用 洗脱液洗脱,进入分析柱中分离。
有研究者将TSK凝胶渗透柱和PLRP-S预富集柱串 联使用,用于净化猪组织中的磺胺二甲氧嘧啶、磺胺 甲恶唑和甲氧苄啶。
般采取均质、液-液萃取或固相萃取净化等步骤。 液-液萃取操作烦琐,而蛋白沉淀后直接进样,虽操作简便、
并具有较高的回收率,但对色谱柱的损害较为严重。
溶剂提取
溶剂提取时,应尽可能使组织中结合态的残留物溶解,并 且除去大部分的蛋白质。
一般可采用酸性水溶液、乙腈、氯仿、乙酸乙酯、二氯 甲烷、丙酮或混合溶剂等极性溶剂进行提取。
第六章 兽药残留检测技术
第五节 磺胺类药物残留的危害分 析与检测方法
一、概述
磺胺类(Sµlfonamides)药物是兽医上较常用的一 类合成抗感染药物,具有抗病原体范围广、化学 性质稳定、使用方便、易于生产等优点。
磺胺药种类繁多,兽医上常用的有10余种(图) 。
磺胺药单独使用,病原体易产生耐药性,与抗菌增 效剂如TMP(甲氧苄啶)等联用,抗菌范围扩大,疗 效明显增强,用来治疗畜禽肠道感染、乳腺炎、 肺炎等疾病。
离子对提取法亦有应用,例如,水相提取液调节pH至 10~11,加入四丁基铵离子对试剂,形成磺胺类离子对,可以 被二氯甲烷提取。
用正己烷或乙醚进行液-液萃取,可以脱脂肪。
固相萃取
由于甲氧苄啶常和其他磺胺药物同时使用,而它们具有不 同的pKa和溶剂亲和力,难以在给定的pH值和溶剂系统 中同时提取,宜采用固相萃取法(SPE)。
有时为了获得高的净化效果,几种方法相结合应用。
液相色谱串联质谱法测定饲料中8种苯并咪唑类药物
物在 不 同动 物体 内 （ 肉 、组织 、奶等 ）的最 高残 肌
留限量 。饲 料安 全直 接 关 系到 动 物性 食 品 的安 全 ，
Ｅ ｒｎｔ ｆｒ 。 乙腈 、 二 甲 亚 砜 和 甲 酸 为 色 谱 纯 ｈｅ ｓ ｒ ） ｏｅ
苯 咪 唑 、 甲苯 咪 唑 、丙 氧 苯 唑 和 三 氯 苯 唑 ） 的液 相 色 谱 串 联 质 谱 分 析 方 法 。饲 料 样 品 直 接 用 酸化 乙腈 提 取 。提
取 液 用 甲 酸 溶 液 稀 释 后 直 接 进 行 分 析 。 分 析 时 采 用 Ｘ ｒ ｇＴ １ Ｂ ｉ ｅＭ Ｃ ８色 谱 柱 ， 以 甲 酸 溶 液 一 腈 体 系进 行 梯 度 洗 ｄ 乙
控 对象 ，且 Ｂ Ｚ 在 体 内转化 的代谢 产 物仍具 有 毒 Ｍｓ 理 作用 ｌｌ １ ，所 以我 国 以及联 合 国粮 农组 织 、欧盟 、 － ｚ 美 国 、 日本 等 国家 和组织都 将苯 并咪 唑类药 物列入
限制使用 的兽药 药物 ，并制 订 出各 种苯 并咪 唑类药
ｄｒ 司 ） ａｄ公 ；硫 苯 咪 唑 、苯 硫 氧 咪 唑 、氟苯 咪唑 、
［ ６ １
。
质 谱条 件 ：Ｅ Ｉ 正离 子模 式 电离 ；多反应 监 Ｓ源
测 （ Ｍ） ＭＲ ；毛细 管 电压 ：３０ Ｖ；萃取 锥孔 电压 ： ． Ｋ
２ Ｖ；ＲＦ透 镜 电压 ：０５ ０ ． Ｖ；离 子 源 温 度 ： １０ ； １℃
考虑 到 苯并 咪唑 类 药物 在我 国使用 情 况 ．本 研
到 ２ ％，再 在 ２５ ｉ ５ ．ｍ ｎ内线性增 加 到 ９ ％，保 持 ３ ５ ． ５ ｍｎ ｉ ，然后 在 ０１ ｉ ．ｍ ｎ内降 至 １ ％，保持 ４９ ｉ ；流 ５ ． ｎ ｍ 速 ：０３ ／ ｉ ；进 样量 ：ｌ ｌ ． ｍＬｒ ｎ ａ Ｏ Ｌ；柱温 ：３ ℃。 ｘ Ｏ
畜牧养殖中兽药残留有那几种种类
通过项目实施，初步建立了口服狂犬病疫苗的生产规程及质量标准，在实验室条件下，制备了3批狂犬病口服活疫苗，且正进行产品质量的各项实验研究，一旦通过产品质量试验研究后将在GMP条件下中试生产临床试验产品，并申报农业部大规模应用临床试验批件。
兽用狂犬病口服疫苗的开发将带动产业升级和技术创新能力提升，对现有的宠物疫苗生产乃至动物疫苗生产都将产生革命性的意义，促进动物疫苗免疫剂型的革新。
（来源：中国农业新闻网）畜牧养殖中兽药残留有那几种种类目前，畜牧养殖中兽药残留可分为7类：①抗生素类;②驱肠虫药类;③生长促进剂类;④抗原虫药类;⑤灭锥虫药类;⑥镇静剂类;⑦β-肾上腺素能受体阻断剂。
在动物源食品中较容易引起兽药残留量超标的兽药主要有抗生素类、磺胺类、呋喃类、抗寄生虫类和激素类药物。
1产生兽药残留的主要兽药1.1抗生素类大量、频繁地使用抗生素，可使动物机体中的耐药致病菌很容易感染人类；而且抗生素药物残留可使人体中细菌产生耐药性，扰乱人体微生态而产生各种毒副作用。
目前，在畜产品中容易造成残留量超标的抗生素主要有氯霉素、四环素、土霉素、金霉素等。
1.2磺胺类磺胺类药物主要通过输液、口服、创伤外用等用药方式或作为饲料添加剂而残留在动物源食品中。
在近15年～20年，动物源食品中磺胺类药物残留量超标现象十分严重，多在猪、禽、牛等动物中发生。
1.3激素和β-兴奋剂类在养殖业中常见使用的激素和β-兴奋剂类主要有性激素类、皮质激素类和盐酸克仑特罗等。
目前，许多研究已经表明盐酸克仑特罗、已烯雌酚等激素类药物在动物源食品中的残留超标可极大危害人类健康。
其中，盐酸克仑特罗（瘦肉精）很容易在动物源食品中造成残留，健康人摄入盐酸克仑特罗超过20μg就有药效，5倍～10倍的摄入量则会导致中毒。
2其他兽药呋喃唑酮和硝呋烯腙常用于猪或鸡的饲料中来预防疾病，它们在动物源食品中应为零残留，即不得检出，是我国食品动物禁用兽药。
苯并咪唑类能在机体各组织器官中蓄积，并在投药期，肉、蛋、奶中有较高残留。
农药兽药残留检测技术 PPT
1 食品安全现状
食品安全事件
畜禽肉（特别是冻鸡）兽药残留 — 欧盟、日本 冻虾仁氯霉素残留； 茶叶农药残留 — 多国； 鸭肉禽流感病毒 — 韩国； 酱油氯丙醇 — 欧盟； 花生黄曲霉毒素； 美国FDA以有害物质超标为由(主要问题是含杂质和农药残
WHO:联合国世界卫生组织
截止2004年底，CAC制定标准、规定等情况如下:
237个食品标准 ；41个卫生规定或技术规程 ；185种的杀虫剂评价 ；3274种 杀虫剂限量 ；25种污染物指南。
对176种农药在375种食品中规定了2439条农药残留标准。 中华人民共和国食品卫生法（1995年10月30日施实）
仅对104种农药在粮食、水果、蔬菜、肉等45种食品中规定了允许的残留量， 总含291个指标。
1 食品安全现状
食品安全法规
美国食品和药物管理局(FDA) 欧盟 2006年1月1日正式实施食品安全新法规， 该法规主要特点：
1 新食品法大大简化了食品生产、流通及销售的监督检测程序； 2 强化了食品安全的检查手段； 3 大大提高了食品市场准入的标准； 4 增加了已经准入欧盟市场的食品安全的问责制； 5 将更加注意食品生产的过程安全，不仅要求进入欧盟市场的食品本身符合新的食品安全 标准，而且从食品生产的初始阶段就必须符合食品生产安全标准，特别是肉食，不仅要求 其终端产品要符合标准，而且要求在整个生产过程中的每一个环节也要符合标准。 欧盟是我畜产品、动物源性产品及水海产品的重要出口市场 。
采样与样品制备→提取→净化→浓缩(衍生化)→分辨→检测
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蔬菜水果中多菌灵等4 种苯并咪唑类农药残留量的测定
河南农业2020年第6期（上）40.0 mL 乙腈，15 000 r/min 高速匀浆1 min，加入5.0 g 氯化钠，在高速匀浆提取1 min，放入离心机里2500 r/多菌灵噻菌灵甲基硫菌灵2-氨基苯并咪唑202.1/175.1343.0/151.0134.1/92.143191202343.685.493.18202.1/131.1343.0/226.0134.1/65.135；4522；1325；350.251395三、数据结果分析（一）工作标准曲线将多菌灵、噻菌灵、甲基硫菌灵、2-氨基苯并咪唑的标准品用甲醇+水（50+50）苹果空白基质分别配成0.01~0.2 mg/L 的浓度的标准溶液，按照液相串联质谱仪器条件进行测定，多菌灵等4种苯并咪唑类农药在一定的质量浓度范围非均与峰面积成良好的线性关系，相关系数r=0.999 3~0.999 7，有很强的相关性。
多菌灵等4种苯并咪唑类农药定量离子（见下页图1至图4）。
（二）加标回收率及计算公式在蔬菜水果样品中进行加标回收试验，多菌灵等4河南农业2020年第6期（上）X=Ar 0VV 2V 0A 0 mV 1V 3种苯并咪唑类的添加量分别为0.01 mg/kg、0.1 mg/kg、0.2 mg/kg，每个添加浓度5个重复，均可以取得较好的结果，回收率在87.0%~106%，相对标准偏差在0.62%~8.7%，满足检测要求。
式中，V 1—分取试液体积，单位为毫升（mL）；V 2—上机液定容体积，单位为毫升（mL）；V 0—标液上机体积，单位为毫升（mL）；V 3—试样上机体积，单位为毫升（mL）；V—定容体积，单位为毫升（mL）； m—样品质量，单位为克（g）；Ar—样品中被测农药的峰面积； A 0—农药标准溶液中被测农药的峰面积。
四、结论由于液相色谱串联质谱仪器灵敏度高，样品前处理简单，重现性好，灵敏度高，可以通过稀释的方法解决复杂基质的基质效应问题，因此，可以作为检测蔬菜水果中多菌灵等4种苯并咪唑类残留量的方法。
农产品中苯并咪唑类农药残留量的测定高效液相色谱法-浙江质
ICS67.040 C53DB33农产品中苯并咪唑类农药残留量的测定高效液相色谱法Determination of benzimidazole in agricultural products -High performance liquid chromatographyXX 省质量技术监督局 发布前言本标准的附录A为资料性附录。
本标准由农业部稻米及制品质量监督检验测试中心提出。
本标准由并XX省农业厅归口。
本标准起草单位：农业部稻米及制品质量监督检验测试中心、中国水稻研究所、XX大地农作物产品质量安全检测中心。
本标准主要起草人：牟仁祥、陈铭学、闵捷、应兴华、吴俐、许萍、曹赵云。
农产品中苯并咪唑类农药残留量的测定高效液相色谱法1 X围本标准规定了用反相离子对高效液相色谱法测定农产品中多菌灵、噻菌灵、甲基硫菌灵和2－氨基苯并咪唑残留量的方法。
本标准适用于农产品中多菌灵、噻菌灵、甲基硫菌灵苯并咪唑类农药及代谢物残留量的测定。
本标准检出限：本方法最小检出量多菌灵为1.4×10-9 g，噻菌灵为1.0×10-9 g，甲基硫菌灵为1.8×10-9 g，2－氨基苯并咪唑为2×10-9 g。
若称取25 g试样，进样量为40 μL，本标准的最低检出浓度多菌灵为0.07 mg／kg ，甲基硫菌灵为0.09 mg／kg，噻菌灵为0.05 mg／kg，2－氨基苯并咪唑为0.10 mg ／kg。
2 规X性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T 6379.1测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第1部分:总则与定义GB/T 6379.2 测量方法与结果的准确度(正确度与精密度) 第2部分:确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法（neq ISO 3936）3 原理样品中的苯并咪唑类农药用乙腈提取，硫酸镁盐析，沉淀法净化，经反相离子对色谱分离，根据保留时间定性，外标法定量。
鸡肉中16种苯并咪唑及其代谢物残留量快速检测方法的研究
鸡肉中16种苯并咪唑及其代谢物残留量快速检测方法的研究翟纹静;徐振东;陈娟
【期刊名称】《中国家禽》
【年(卷),期】2018(40)18
【摘要】为建立测定鸡肉中16种苯并咪唑及其代谢物残留量的高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法,采用QuEChERS分散固相萃取技术,Xbridge BEH C18色谱柱为分析柱,乙酸铵溶液和乙腈作流动相,电喷雾正离子多反应监测模式进行检测,空白基质匹配标准溶液校正的外标法定量。
结果表明:0～100μg/L范围内16种苯并咪唑及其代谢物的浓度和峰面积线性关系良好。
确定该方法的测定低限为10μg/kg,对阴性鸡肉样品中进行3个加标水平,目标物的回收率在70.82%～117.75%之间,且变异系数满足《GB/T 27404-2008》要求。
该方法的线性相关性良好,定量限和检出限低,精密度和准确度均符合要求,能够满足鸡肉中苯并咪唑及其代谢物残留量的检测要求。
【总页数】5页(P40-44)
【作者】翟纹静;徐振东;陈娟
【作者单位】苏州出入境检验检疫综合技术中心;苏州华博日化品检测服务有限公司
【正文语种】中文
【中图分类】TS207.3
【相关文献】
1.烹饪方法对鸡蛋及鸡肉中氟虫腈及其代谢物残留量的影响
2.QuEChERS方法结合超高效液相色谱-串联质谱法快速检测鸡肉组织中扎那米韦药物的残留量
3.超高效亲水色谱-串联质谱法快速检测鸡肉及其制品中的利巴韦林及其代谢物的总残留量
4.水产品中硝基呋喃类代谢物残留量高效液相色谱串联质谱快速检测法的研究
5.高效液相色谱-串联质谱法检测猪肝中苯并咪唑类药物及其代谢物的残留量
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高效液相色谱法同时测定动物组织中16种苯并咪唑类药物残留
高效液相色谱法同时测定动物组织中16种苯并咪唑类药物残留林海丹;林峰;张美金;谢守新;吴映璇;邵琳智;姚仰勋【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2011(032)002【摘要】建立同时测定动物组织中16种苯并咪唑类药物及其代谢物多残留的高效液相色谱分析方法.试样经乙酸乙酯、50g/100mL氢氧化钾溶液、1g/100mL BHT溶液(20+0.15+1,V/V)提取后,正己烷脱脂,MCX同相萃取柱净化,用高效液相色谱C18柱分离,乙腈-0.025mol/L乙酸铵作为流动相,流速为1.0mL/min,梯度洗脱,紫外检测波长为292nm,外标法峰面积定量.16种苯并昧唑类药物在0.025～1.0mg/L质量浓度范围内线性良好,相关系数γ均大于0.99,动物组织样品在10、50、100μ/g添加水甲的添加回收率在81.6%～110%之间,相对标准偏差为1.8%～13.1%(n=10),方法的定量限为10μg/kg.方法灵敏度高、重现性好,适用于动物组织中苯并咪唑类药物多残留的检测.【总页数】6页(P231-236)【作者】林海丹;林峰;张美金;谢守新;吴映璇;邵琳智;姚仰勋【作者单位】广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,广东,广州,510623;广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,广东,广州,510623;广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,广东,广州,510623;广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,广东,广州,510623;广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,广东,广州,510623;广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,广东,广州,510623;广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,广东,广州,510623【正文语种】中文【中图分类】O657.72【相关文献】1.反相高效液相色谱法同时测定动物组织中苯并咪唑类兽药残留量 [J], 陈毓芳;彭肖颜2.高效液相色谱法测定动物组织中8种磺胺类药物残留量 [J], 王曼霞;林黎明;刘心同;王翠霞3.固相萃取-高效液相色谱法测定动物组织中甲氧苄氨嘧啶及磺胺类药物残留 [J], 刘振伟;姜兆兴;曹旭;王智亮4.高效液相色谱法测定脂肪中11种苯并咪唑类药物残留标志物 [J], 邵琳智; 邹游; 陈思敏5.高效液相色谱法测定鸡组织中苯并咪唑类药物残留标志物 [J], 邹游; 邵琳智; 吴映璇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
食品快检兽药残留报告
动物源性食品中的兽药残留问题姓名：张浩学号：20090802310097一. 背景知识1、动物源性食品（Animal Derived Food）是指全部可食用的动物组织以及蛋和奶，包括肉类及其制品（含动物脏器）、水生动物产品等。
而近年来，动物源性食品中兽药残留在国内外已成为一个影响广泛且颇具争议的问题，这个问题不但与公众的健康息息相关，也直接关系到畜牧、兽医、兽药等产业界的经济利益，甚至关系到国家的对外经贸往来和国际形象。
2、兽药（Veterinary Drugs）：是指用于预防、治疗、诊断动物疾病或者有目的地调节动物生理机能的物质（含药物饲料添加剂），主要包括：血清制品、疫苗、诊断制品、微生态制品、中药材、中成药、化学药品、抗生素、生化药品、放射性药品及外用杀虫剂、消毒剂等。
而所谓兽药残留，是指给畜禽等动物用药后蓄积或贮存在动物细胞、组织和器官以及可食性产品中的药物或化学物的原形、代谢产物和杂质。
3、来源起因：兽药残留成为公众关注的问题，其起因是近50年来畜牧业生产中普遍采用的抗生素亚治疗量用法。
类似这种用药方法产生的根源，一是畜牧业生产者一直致力寻找一种能够促进动物生长的动物蛋白因子（animal protein factors APFs）,二是工厂化、高密度饲养方式使现代畜牧业面临发病率和死亡率的巨大压力。
20世纪40年代以来出现的各种抗生素、激素等药物及其所显示的快速高效的治疗效果，诱使人们不但随即将其用于动物疾病的治疗，而且很快添加到动物的饮食中。
由于非治疗性的防病和促生长目的，称为药物性饲料添加剂（medicated feed additives, MFAs）,使用剂量常为治疗剂量的三分之一或更低。
药物添加剂无论在试验或生产中均呈现显著的应用效果主要表现为发病率和死亡率下降、促生长、提高饲料利用率、改善产品皮质（如提高瘦肉率）等，生产性能提高10％以上。
这些直接和巨大的商业利益改变了人们对药物作用的观念，提高动物的生产性能逐渐成为动物药品的重要功用。
牛肌肉组织中苯并咪唑类药物的基质固相分散-高效液相色谱多残留分析法
牛肌肉组织中苯并咪唑类药物的基质固相分散-高效液相色谱多残留分析法张素霞;李俊锁;钱传范【期刊名称】《中国兽医学报》【年(卷),期】2000(20)6【摘要】将基质固相分散 ( MSPD)与酸碱萃取相结合 ,对组织中的残留物进行净化。
反相高效液相色谱( HPLC)测定 ,流动相为乙腈 -0 .0 1 7mol/L磷酸 ( 7+ 3) ,检测波长 2 90 nm。
建立了牛肌肉组织中 4种苯并咪唑类药物的基质固相分散 -高效液相色谱 ( MSPD-HPLC)多残留分析法。
在 0 .0 5～ 0 .4 0 mg/kg添加范围内 ,4种苯并咪唑类药物的平均回收率为( 6 9.2± 1 2 .4 ) %。
本方法检测限为0 .0 1～ 0 .0 5mg /kg。
【总页数】3页(P569-571)【关键词】牛肌肉;苯并咪唑类药物;基质固相分散;HPLC【作者】张素霞;李俊锁;钱传范【作者单位】中国农业大学动物医学院【正文语种】中文【中图分类】S859.8【相关文献】1.分散固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡肝中磺胺类、喹诺酮类和苯并咪唑类药物及其代谢物的残留量 [J], 李锋格;苏敏;李晓岩;张洪霞;姚伟琴;窦辉;张万权2.超高效液相色谱串联质谱法结合分散固相萃取技术快速测定化妆品中36种抗感染类药物残留 [J], 王庆龄;裘钧陶;詹越城;叶磊海;仰海清;何斌;盛丽娜3.超高效液相色谱串联质谱法结合分散固相萃取技术快速测定化妆品中36种抗感染类药物残留 [J], 王庆龄;裘钧陶;詹越城;叶磊海;仰海清;何斌;盛丽娜4.分散微固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定水样中3种氯霉素类和11种激素类药物残留 [J], 粟有志;李艳美;周均;尚爽;李芳;王兴磊5.分散固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定蔬菜中17种喹诺酮类药物残留[J], 盛华栋;张水峰;崔海容;叶明立因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。