分子生物学简答题

分子史上的经典事件？

答:1953watson 与crick 提出的DNA分子双螺旋模型在科研过程中,要具有清醒的宏观洞察力、非凡的科学想像力与严密的逻辑思维能力,选择正确的研究路线,广泛借鉴她人的研究成果并加以综合性的科学思考。

分子生物学的理论基础就是？主要的研究策略有？(第一章)

答:1958年,克里克提出两个学说,奠定了分子生物学的理论基础。第一个学说就是“序列学说”,它认为一段核酸的特殊性完全由它的碱基序列决定,碱基序列编码一个特定蛋白质的氨基酸序列,蛋白质的氨基酸序列决定了蛋白质的三维结构。第二个学说就是“中心法则”,遗传信息只能从核酸传递给核酸,或核酸传递给蛋白质,而不能从蛋白质传递给蛋白质,或就是从蛋白质传回核酸。研究策略:体内与体外实验的结合将遗传与DNA联系起来。体内(In vivo)实验:在活体内进行的实验,包括在培养的细胞或组织。体外(In vitro)实验:在细胞提取物中,或者就是人工合成的细胞成分混合物中。

分子与其她学科关系？生物学离不开生物学技术？

答:分子生物学就是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以至信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的。现代生物学的发展越来越多的应用分子生物学的理论与方法进行研究。

什么就是分子生物学？

广义的概念:分子生物学就是研究核酸、蛋白质等生物大分子形态、结构特征及其重要性、规律性与相互关系的科学。

狭义的概念:从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学,主要指遗传信息的传递(复制)、保持(损伤与修复)、基因的表达(转录与翻译)与调控等,也称之为基因的分子生物学。

DNA分子在结构上为什么最适合作为遗传信息载体？(第二章第一节)

化学性质比较稳定,DNA复制时严格遵守碱基互补配对原则,且为半保留复制;四种脱氧核糖核苷酸可以组成不同的长链,可以携带大量遗传信息。

DNA提取操作要点就是?(第二章第一节)

提取原则:保持一级结构的完整性,将其她生物大分子的污染降到最低。

提取流程:破碎细胞;DNA释放到水相;去垢剂或蛋白变性剂抽提;除去蛋白等杂质。DNA沉淀, DNA溶解与保存。

DNA提取与鉴定的相关操作中需要注意什么？

1)DNA分子较大应注意防止机械张力将其打断,所以操作要轻柔,离心速度要控制。

2)要灭活DNA酶,采用0、01M的EDTA或者柠檬酸钠处理,或者用去垢剂(SDS)、蛋白变性剂(苯酚、氯仿等)就可以基本灭活,此外,55 ℃处理也经常用于灭活残余的DNA酶。

3)除去蛋白质等杂质时酚抽提要彻底,上清要去尽,吸取上清时不要带有沉淀。

4)鉴定时注意电泳时的电压,电泳缓冲液的浓度,pH;选用合适的凝胶以及凝胶的浓度。

简述RNA的功能。

(1)RNA 就是一些病毒的遗传物质。

(2)与蛋白质合成有关,mRNA 在功能上就是基因与蛋白合成机器之间的中介;tRNA在功能上

就是mRNA上密码子与氨基酸之间的衔接分子。

(3)有些RNA具有催化活性(核酶) 。例如研究发现,四膜虫的26s rRNA的单个内含子在体外具

有自我剪接功能;RNase P中的RNA组分在体外能对tRNA前体进行加工。

(4)RNA可以通过多种途径调节基因表达。调解途径包括不同的RNA折叠,核糖开关,与非编码

RNA有关的RNA干扰现象、X染色体随机失活现象等。

获得高质量RNA的操作应注意什么？

RNA一般分子量较小,不易被机械拉力打断;最重要的就是抑制RNA酶(RNase)的活性,防止RNA被降解。因此,要创造一个严格的无RNA酶环境首先要防止外源RNase污染:洁净实验室环境一次性手套,勤换;操作时可以带口罩。环境洁净(避免飞尘中细菌、真菌产生外源性RNA酶污染,无空气对流)玻璃与塑料器皿处理。

玻璃:常规洗净后,200℃干烤4小时塑料器皿(离心管、枪头等):用0、1%的DEPC水常温浸泡过夜,灭菌干燥后使用。溶液配制:加0、1%DEPC处理的双蒸水配制,高压除去残留的DEPC。其次,抑制内源RNase的活性。抑制剂有β-巯基乙醇,异硫氰酸胍, 十二烷基肌酸钠。

1、简述蛋白质的功能与活性调控主要层次。

1)构成组织与修补组织。蛋白质就是构成组织细胞的主要材料。

2)构成酶与某些激素的成分。

3增强机体抵抗力,构成抗体调节渗透压供给热能。

转录水平翻译水平翻译后水平

2、什么就是蛋白质组学？简述蛋白质组学研究的一般流程。

沿着双向电泳—质谱—蛋白质数据库检索这一典型的蛋白质组学研究技术路线。蛋白质组学就是应用各种技术手段研究蛋白质组的一门新兴科学。

A)整体角度分析细胞内动态变化的蛋白质组成成分、表达水平与修饰状态

B)了解蛋白质之间的相互作用与联系;c)揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律。

2、比较以下概念: 外显子与内含子

外显子(extron):成熟的mRNA或蛋白质中存在的序列。(在DNA或mRNA中都存在的序列)

内含子(intron):在DNA上存在,而在mRNA(或cDNA)中不存在的序列,初级转录产物加工成成熟mRNA时被切除的间隔序列。

基因编码区与cDNA编码区基因编码区既包括外显子还包括内含子,cDNA编码区只就是外显子的拼接启动区与终止区启动区就是位于编码区上游的非编码区,包括增强子,TATA box等一些转录起始元件,终止区就是位于编码区下游的非编码区,包括终止子。

初级转录产物与成熟mRNA 初级转录产物就是由DNA转录出来的mRNA前体,还没有经过加工修饰,里面还有内含子序列转录出来的产物。成熟mRNA就就是初级转录产物切去内含子对应部分的序列,最终编码蛋白质的序列。

如何理解DNA复制就是一个复杂的过程？与DNA复制有关的蛋白质(包括酶)主要有哪些,有什么作用？

DNA分子就是反向平行的两条互补链;DNA双链解旋需要能量与;解旋形成的DNA单链有形成链内碱基配对的趋势,需要单链结合蛋白的参与;DNA复制需要多种酶参与,如:引物酶,DNA 聚合酶,解旋酶,拓扑异构酶等;复制中偶尔出错,需要校正机制;无论环状DNA还就是大分子量的DNA对复制系统都有物理限制

拓扑异构酶:去除DNA 解旋时在复制叉部分产生的超螺旋

解旋酶:解开DNA双链。

引物酶:在单链DNA处合成引物,形成引物模版接头。

DNA聚合酶:合成DNA,修复DNA。

单链结合蛋白:与单链DNA结合,防止DNA复性滑动

夹蛋白:增强DNA聚合酶的延伸能力

DNA连接酶:连接相邻DNA链

RNA酶:去除RNA引物。

DNA复制的半保留特性与半不连续特性就是怎样发现的？