H7N9亚型重组禽流感病毒rGD76株灭活疫苗的研制
新支流(Re-9)三联灭活疫苗优势
10.8
10.4
8.9
4.8
2.7
2.8
1.6
表3
组别 新支流（Re-9） A 疫苗 B 疫苗 空白对照 1d 7.8 7.8 7.8
免疫新支流油苗组H9抗体滴度比较
3d 7.6 6.8 6.4 7d 5.6 5 5.6 14d 3.3 2.3 2.1 21d 5.1 3.2 2.8 28d 6.2 5.5 5 35d 7.3 6 5.8
7.8
7.8
5.6
3
1.8
1.1
0.5
表4
组别 新支流（ Re-9 ） A 疫苗 B 疫苗 空白对照 1d 1118 1118 1118 1118
免疫新支流油苗组IB抗体滴度比较
3d 519 942 978 1169 7d 447 246 556 636 14d 397 281 358 236 21d 330 123 78 66 28d 883 233 289 102 35d 1838 1039 1227 154
1毒株优势--基因重组技术
Re-9株： 2个表面基因HA、NA基因来自禽流感（H9N2）病 毒,6个内部基因PB2、PB1、PA、NP、M、NS基因来自流感（ H1N1）病毒。
H1N1 H9N2 H1N1
H9N2
H1N1
H1N1
1.1毒株优势---强大研发技术
普莱柯：国家兽用药品工程技术研究中心，国家级企业 技术中心。新支流（HL株）三联灭活疫苗，国内首创。 国家禽流感参考实验室（OIE禽流感参考实验室），成熟 的流感病毒基因工程重组技术。
2.国家“863”最新科研成果----新型复合 佐剂
新型复合佐剂：由可降解的多聚物构成 ; 抗原被包 裹在微粒中; 是新一代的佐剂 ; 有发展为单次剂量疫苗 的潜力，可降低疫苗接种量。 作用机制：长期的储存库效应， 长达数周至数月; 脉冲式的释放抗原; 靶向APC；可以模拟传统疫苗的初次 免疫和加强免疫效应。
鸡新城疫病毒、禽流感病毒(H9亚型)病毒、禽腺病毒三联灭活疫苗抗体免疫持续期研究
究取鸡新城疫、禽流感（H9 亚型）、禽腺病毒三联
灭活疫苗免疫 7 日龄和 21 日龄 SPF 鸡，于免后不同
时间进行血清抗体测定，来确定该产品的免疫持续
20
饲料博览 2021 年第 5 期
期，以期指导鸡病系灭活疫苗
鸡新城疫病毒、禽流感病毒（H9 亚型）、禽
80％
[ 6-7 ]
。该病主要发生于 3~5 周龄的肉鸡，肉杂
鸡（817）、麻鸡、种鸡和蛋鸡亦可在相似的日龄段
发病，是目前危害养禽业健康发展的最严重的传染
病之一，在我国每年都有不同程度的流行，严重危
害集约化养禽业的持续、稳定、健康发展，给养禽
业造成巨大的经济损失。
近几年来以上三种病毒混合感染在我国家禽上
produced by Harbin Pharmaceutical Group Biological Vaccine Co., Ltd. Seven-day and 21-day SPF chickens were
inoculated subcutaneously with the triple inactivated avian adenovirus vaccine. Blood samples were collected on the
protection standard in the 5th month after immunization. The results showed that the immune duration of chickens
under two weeks old was two months, and that of chickens over two weeks old was four months.
重组禽流感病毒h5+h7亚型三价灭活疫苗(h5n1re-11株、re-12株+h7n9re-2)对蛋
营养与疾病 Nutrition and Disease重组禽流感病毒H5+H7亚型三价天活疫苗(H5N1 Re-11 栋、Re- 12<+H7N9Re-2)对蛋鸡免疫效崇抗体监测以及安全性试验评估杨起贺，杨浩，高鹏，荣富龙，李叔伟**收稿日期：2019-10-24作者简介：杨起贺(1986-),男，黑龙江哈尔滨人，初级兽医师，主要从事动物疫苗的服务工作。
*通讯作者：E-mail: 23674649@(哈药集团生物疫苗有限公司，哈尔滨150000)摘要：试验通过对重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗(H5NlRe-ll 株+Re-12株+H7N9H7Re2株)在接种蛋 鸡后产生抗体效价值的情况，评价重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗(H5NlRe-ll 株+Re-12株+H7N9 Re-2株) 对蛋鸡预防高致病性禽流感疫病的效果。
同时进行安全性试验。
结果表明，蛋鸡在15日龄接种重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗(H5NlRe-ll 株+Re-12株+H7N9 H7Re2株)，45日龄进行二次免疫，75日龄进行三免，产生H5NlRe-ll 株抗体滴度、H5NlRe-12株抗体滴度、H7N9 Re-2株抗体滴度都较高，从抗体消长规律来看，对产蛋前的蛋鸡都有校好的保护力，疫苗接种后未对鸡群造成应激反应。
通过本试验在蛋鸡上接种重组禽流感病毒(H5+H7)三 价灭活疫苗(H5NlRe-ll 株+Re-12株+H7N9H7Re2株)首次免疫后14d 产生抗体有保护力，二免后14d 抗体滴度达到高峰，对蛋鸡有很好的保护力，为预防蛋鸡高致病性禽流感疫病提供临床依据。
关键词：禽流感；消长规律；HI;安全中图分类号：S858.31文献标志码：A 文章编号：1001-0084(2019)12-0042-03Antibody Monitoring and Safety Evaluation of RecombinantH5+H7 Trivalent Inactivated Vaccine (H5H1 Re-11 Strain,Re-12 Strain+H7N9Re-2) for Laying HensYANG Qihe, YANG Hao, GAO Peng, RONG Fulong, LI Shuwei *(Harbin Pharmaceytical Group Biological Vaccine Co., Ltd., Harbin 150000, China)Abstract ： In order to evaluated the effect of recombinant avian influenza virus (H5Nlre-l 1 strain + Re-12 strain +H7N9 H7Re2 strain) trivalent inactivated vaccine (H5NlRe-ll strain + Re-12 strain +H7N9 Re —2 strain) on the prevention of highly pathogenic avian influenza in laying hens. At the same time, carry out safety test. The resultsshowed that the antibody titer of H5NlRe-ll strain + Re-12 strain + H7N9 H7Re2 strain was higher than that ofH5NlRe-12 strain and H7N9 H7Re2 strain at the age of 15 days, and the antibody titer of H5NlRe-l 1 strain, H5N 1 Re-12 strain and H7N9 Re-2 strain were higher at the age of 75 days No stress reaction was caused to chickensafter vaccination. In this experiment, the recombinant avian influenza virus (H5 + H7) trivalent inactivated vaccine42 饲料博览2019年第12期Nutrition and Disease营养与疾病(H5NlRe-l1strain+Re-12strain+H7N9H7Re2strain)was inoculated on laying hens for the first time.The antibody produced a protective effect14days after the first immunization.The antibody titer reached a peak14days after the second immunization,which had a very good protective effect on laying hens and provided a clinical basis for the prevention of highly pathogenic avian influenza disease in laying hens.Key words：avian influenza;law of fluctuation;HI;safety1材料与方法1.1供试材料哈药集团生物疫苗有限公司重组禽流感病毒H5+H7亚型三价灭活疫苗（H5NlRe-ll株、Re-12株+H7N9Re-2）灭活疫苗。
H5N1亚型重组禽流感病毒灭活疫苗_Re_6株_田间试验效果观察
在家禽业生产中， 目前应用的禽流感疫苗主要 是鸡胚源灭活疫苗， 这类疫苗存在批间抗原差异大、 同源疫病病原污染危险性和免疫应急大等缺点。 研究显示当前理想禽流感疫苗的要求之一是寻 找新方法来代替蛋内制备禽流感疫苗的方法 。而 利用国际先进的细胞悬浮培养技术生产的重组禽 克服了鸡胚源疫苗的缺点， 是我国禽流感疫苗生 产的发展趋势。为了验证重组禽流感病毒 （H5N1 亚型） 灭活疫苗 （细胞源， Re-6 株） 对家禽的安全 流感病毒 （H5N1 亚型） 灭活疫苗 （细胞源， Re-6 株） ，
采食量、 粪便， 以及鸡群的死亡率， 按照说明注射 剂量注射的 3 个鸡群均无异常情况发生， 疫苗对肉 的副反应较小。 2.2
起至 75 d， 两期试验的抗体合格率均超过农业部
用和蛋用雏鸡群免疫都是安全的， 而且疫苗引起 母源抗体测定结果
测， 结果显示禽流感抗体合格率均为 0， 表明 2 鸡 群为禽流感非免疫鸡群， 而且已无母源抗体。 2.3 免疫效果测定结果
45、 60、 75 d 各采血 1 次。翅下静脉采血， 1~2 mL/只， 分离血清， 冷藏或冷冻备用。 1.2.3 HI 抗体效价测定
［2］
的免疫抗体合格率分别为 24% 、 100.0% 、 97.92% 、 100.0% 、 95.38% ， 平均抗体滴度分别为 2.52 log2、 7.74 log2、 7.31 log2、 7.15 log2、 6.6 log2。免疫后 75 d 养殖中， 35 日龄时使用该疫苗免疫， 一次即可。 的抗体滴度仍分别为 4.50 log2、 6.60 log2， 说明疫苗
南成功研制国内首个禽流感(H9)三联灭活疫苗
一 ５ 一 ５
铁骑力 年产３ 万吨新厂竣工投产 士： ６
２０ ０７年 １月 ２ ８日， 骑力 士位 于 成都 西南 铁 航 空港 的 占地 １０亩 的新 厂成 都 鸭 料 专业 化 公 ２
司正式 峻工 投产 ， 开业 当天销 量突破 ４ ０ ０ ０吨 。
少， 西南大学在这方面走在了全国前列。此次西
近 日， 美国医药研究院与西南大学签署合作
协议 ， 共建 国内首家 国际 中兽 医药研究 所 。 中兽 医药 是将 中 医 的理论 技 术 运用 到 临床 兽 医学上 ， 以往 国 内的中 医界 多是研 究如 何将 而 中医 运 用 到 人 的临 床 治 疗 上 ， 兽 医 的研 究 较 对
与操作 台、 模拟屏 、 秤体等组合成完善的全套控
制配 料 系统 ， 粒采 用 目前 国产 最大 的全 自动制 制
粒机 ， 整条 生产线 年 产量 可达 ３ ６万 吨 。
者从 河南 省 畜 牧局 获 悉 ， 内首 个 “ 针 三 防 ” 国 一
的禽流感（ ９ 三联灭活疫苗在该 省研制成功 ， Ｈ）
湖南 浏 阳河饲料 有 限公 司 ， 是集 生产 、 销 、 营 养殖技 术服务 为一体 的科 技 型股份 制企 业 ， 湖 是
蛋下降和生长缓慢 ， 给养禽业造成 巨大损失 。
正昌 承建， 河饲料工程投产 浏阳
由正昌承建 的浏 阳河二十 四万吨高档饲料
生产线 ， 阳光 明媚 的 日子里 隆重 开业 了 。江苏 在 正 昌集 团总裁郝 波 、 工程 部项 目经理 张华 出席 了
开 业仪 式 。
重庆将建国内 首家国际中 兽医药研究所
之五 十。
司。随着现在饲料行业分工 的细化以及规模养 殖的扩大 ， 专业化生产公司在产品研发、 原料采
国家三类新兽药重组新城疫病毒、禽流感病毒(H9亚型)二联灭活疫苗(αSG10株+G株)
动态本栏目主要是及时报道国家批准 的新兽药和企业内部研制的新产品（包 括原料药、成品药、疫苗及各种检测 试纸），为广大读者提供最新的兽药信 息，着重介绍药物的特点、作用机理、 作用用途及临床应用效果。
欢迎来稿！E —mail:sysc.**********引领兽药市场/直面兽药销售/沟通兽药产销/探索营销之道国家三类新兽药重组新城疫病毒、禽流感病毒（H9亚型）二联灭活疫苗（aSG10株+G 株）吉林正业生物制品股份有限公司发证日期:（H9亚型）二联灭活疫苗（aSGlO 株+G 株）根据《兽药管理条例》，该兽药符合规定，准予注册|中华人民共和国新兽药注册证书重组新城疫病毒、禽流感病毒（H9亚型）二联灭活疫苗（aSG10 株+G 株）由中国农大动物医学院副院长、博士生导师张国中教授主导研发；中国农业大学、中国兽医药品监察所、吉林正业生物制品股份有限公司等5家单位联合研制,为国家三类新兽药【注册证号：（2019）新兽药证字26号铱。
一、产品特点和优势（一）最新流行毒株，与当前流行毒株更为匹配，保护力更高该产品采用基因VII 型人工致弱鸡新城疫病毒aSG10株和H9N2亚型禽流感病毒G 株双新毒株制备遥新城疫病毒aSG10疫苗株是通过对近5年国内流行的NDV 毒株进行系统分析筛选得到的一株基因V 型代表性毒株,并将该毒株利用反向遗传操作技术进行了人工致弱,对目前流行的新城疫有很高的保护作用遥H9亚型禽流感病毒G 株是通过对近5年国内流行的500株H9-AIV 毒株进行系统分析筛选出与其他毒株交叉保护好的代表性毒株，核酸同源性高达93.2%-99.0%遥分析结果显示,该产品对近五年田间分离的不同地区NDV 和H9-AIV 代表性流行毒株进行攻毒保护试验,免疫 保护效果均在90%以上遥（二）起效快,保护期至少6个月该产品具有免疫产生期早、免疫持续期长、免疫保护效率高的优点遥将3批疫苗分别免疫21日龄SPF 鸡和120 日龄海兰褐商品蛋鸡,0.25mL/只遥疫苗免疫后21天,H9-HI 抗体效价达9log2以上；H9-AIV 流行株攻击后,鸡群不表现任何临床症状,且有效抑制排毒率达90%以上遥本疫苗免疫后14天即可产生较好的免疫保护效果,免疫持续期至少为24周遥新药动态12SPF 鸡NDV-HI 抗体商品蛋鸡NDV-H1抗体108 642 O1(g )车曇垢壬A-*-201301 -•-201302T-201303T-对照组108 6 421(嘗°】$樣拴军三06 8 10 12 14 16 IS 20 22 24 26 28 30 32免疫后不同时间（周〉-*-201301■-201302-*>201303T*-对照组Bl商品蛋鸡H9-HI 抗体SPF 鸡H 9-HI 抗体0 2 4 6 8 10 12 14 16 1S 20 22 24 26 28 30 32A2免疫后不同时间（周〉-♦-201301 -•-201302 -*-201303对照组0 8 6421(2800H E -*-201301-0-201302 —*—201303对照组4 6 & 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32免疫后不同时间（周）O2B 图1疫苗免疫后HI 抗体消长情况A1: SPF 鸡 NDV-HI 抗体；A2 ： SPF 鸡 H9-HI 抗体；B1:商品蛋鸡NDV-HI 抗体；B2：商品蛋鸡H9-HI 抗体判定标准：新城疫HI 抗体平均值M5log2；禽流感H9亚型HI 抗体平均值:&7log2该产品对近几年田间分离株的攻毒保护实验该产品以0.25ml/只剂量经颈部皮下注射途径接种3周龄SPF 鸡,免疫后21日NDV HI 抗体平均滴度在7log2以上,AIV HI 抗体平均值在8.5log2以上；用近几年田间分离株攻毒,NDV 对照鸡在攻毒后4日全部死亡,免疫鸡观察期内全部健活且病毒分离阴性率不小于9/10，攻毒保护率达90%以上；AIV 对照鸡病毒分离率均为5/5阳性，免疫鸡观察期内全部健活且病毒分离均为阴性，攻毒保护率为100%遥（见表1、表2）表1免疫鸡对不同NDV 毒株的攻毒保护情况新药动态D 攻毒毒株HI 抗体（Iog2）发病情况死亡慵况病毒分离攻毒保护免疫组7.70/100/101/109/10未免疫组0.05/55/55/50/5cm □ fH-免疫组7.30/100/100/1010/10未免疫组0.05/55/55/50/5l*4R1 A -免疫组7.50/100/101/109/10未免疫组0.05/55/55/50/5免疫组8.10/100/100/1010/10HLJlb 秣"未免疫组0.05/55/55/50/5cvi a 址免疫组8.20/100/100/1010/10未免疫组0.05/55/55/50/5/空白对照0.00/50/50/5/编辑部电话：0311-8 5151289表2免疫鸡对不同H9AIV 的攻毒保护情况攻壽毒株HI 抗体(Iog2 )死亡情况病毒分离情况攻毒將JS12 株免疫组9.20/100/1010/10未免疫组0.01/55/50/5HB13 株免疫组9.30/100/1010/10未免疫组0.01/55/50/5SD14 株-免疫组8.70/100/1010/10未免疫组0.00/55/50/5JS15 株免疫组9.50/100/1010/10未免疫组0.00/55/50/5HN16 株、免疫组9.10/100/1010/10未免疫组0.01/55/50/5/空白对照组0.00/50/5/该产品与国內其他同类疫苗的比较使用新城疫、禽流感疫苗免疫3周龄SPF 鸡,免后21日的测定HI 抗体平均滴度,并使用NDV 强毒株（SG10株）与G 株对不同免疫组进行攻毒,观察其攻毒保护率遥实验结果显示:该产品在安全性方面与其它厂家疫苗无明显差异曰在免疫效力方面，免疫21日后,该产品HI 抗 体平均滴度与其它厂家疫苗无明显差异遥新城疫部分,本疫苗和重组新城疫病毒灭活疫苗（A-VII 株）攻毒保护效果相当曰禽流感部分，攻毒保护效果优于其它两款疫苗遥（见表3、表4）表3 4种疫苗的免疫效力检验结果（新城疫部分）疫苗名称HI 抗体平均滴度（Iog2）（本毒株腿检测）发病数/死亡靭攻毒数病毒分离阳删/攻毒数保护数/攻毒数A （禽正好）6.20/0/102/108/10B 5.8///C5.6///D 6.10/0/102/108/10攻毒对照组0.05/5/55/50/5表43种疫苗的免疫效力检验结果（禽流感部分）尉翔攻毒数病毒分离阳性数 欣毒数HI 抗体平均滴度（Iog2 ）G 株驱 本毒株腿疫苗名称A （禽正好）9.19.10/1010/10B 6.89.02/108/10C7.08.91/109A0攻毒对照组0.00.05/50/5备注：A ,重组新城疫病毒、禽流感病毒（H9亚型）二联灭活疫苗（aSG10株+ G 株）；B ,新城疫、禽流感（H9亚 型）二联灭活疫苗（La Sota 株+ F 株）；C ,鸡新城疫、禽流感（H9亚型）二联灭活疫苗（La Sota 株+ HL 株）；D ,重组新城疫病毒灭活疫苗（A-VII 株）遥新药动态基因VII 型NDV 疫苗产生的保护效果明显优于LaSota 疫苗株HI 抗体水平丄‘攻毒方式-*■ ■ ■ ■80604020 (案)#牟举免疫：LaSota免疫：aSGlO 攻毒：SG10攻毒：SG10试验结果显示：当NDV-HI 抗体大于3log2时，本制品与LaSota 灭活疫苗均可保护鸡只不表现临床症状或死亡, 但免疫鸡只的排毒率存在明显差异。
鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(N7a株+M41株+SZ株)说明书和内包装标签2020版
鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感（H9亚型）三联灭活疫苗（N7a株+M41株+SZ株）说明书和内包装标签（一）鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感（H9亚型）三联灭活疫苗（N7a 株+M41株+SZ株）说明书【兽药名称】通用名鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感（H9亚型）三联灭活疫苗（N7a株+M41株+SZ株）商品名无英文名Newcastle Disease, Infectious Bronchitis and Avian Influenza (Subtype H9) Vaccine, Inactivated(Strain N7a+Strain M41+Strain SZ)汉语拼音Ji Xinchengyi Chuanranxingzhiqiguanyan Qinliugan（H9 Yaxing）Sanlian Miehuoyimiao（N7a Zhu+M41 Zhu+SZ Zhu）【主要成分与含量】疫苗中含有灭活的鸡新城疫病毒N7a株，灭活前病毒含量≥108.4EID50/0.1ml；含灭活的鸡传染性支气管炎病毒M41株，灭活前病毒含量≥106.4EID50/0.1ml；含灭活的禽流感（H9亚型）病毒SZ株，灭活前病毒含量≥108.4EID50/0.1ml。
【性状】乳白色均匀乳剂。
【作用与用途】用于预防鸡新城疫、鸡传染性支气管炎和H9亚型禽流感。
免后21日可产生免疫力，免疫期为6个月。
【用法与用量】皮下或肌肉注射。
2～5周龄鸡，每只0.3ml；5周龄以上鸡，每只0.5ml。
【注意事项】（1）该疫苗免疫前或免疫同时应使用鸡传染性支气管炎活疫苗作基础免疫。
（2）仅用于接种健康鸡。
（3）使用前须检查，如出现变色、破乳、破漏、混有异物等均不得使用。
（4）使用前应使疫苗恢复至室温，并充分摇匀。
（5）疫苗开启后限24小时内用完。
（6）接种器具应无菌，注射部位应消毒。
（7）用过的疫苗瓶、器具和未用完的疫苗等应进行无害化处理。