免疫学应用

抗体 抗体
一 二 、
混 有
、 抗 原
剂 分 离
分 离 抗 体
抗 体 结 合
抗体
抗体
可逆性示意图
抗原抗体反应类型
反应类型 凝集反应 实验技术 直接凝集试验 间接凝集试验 抗球蛋白试验 沉淀反应 液相沉淀试验 免疫电泳技术 补体参与 的反应 补体溶血试验 结果判断 观察凝集现象 同上 同上 观察沉淀， 观察沉淀，检测浊度 观察扫描沉淀峰、 观察扫描沉淀峰、沉淀弧 观察测定溶血现象
②荧光免疫技术 ④化学发光免疫技术
凝集反应
间接凝集反应
载体颗粒： 型红细胞、 载体颗粒：人O型红细胞、绵羊红细胞、乳胶颗粒等 型红细胞 绵羊红细胞、
凝集反应
反向间接凝集反应
凝集反应
间接凝集抑制反应
如：临床上乳胶凝集抑制试验→妊娠早期诊断 临床上乳胶凝集抑制试验 妊娠早期诊断
沉淀反应
沉 单向琼脂扩散 (1)抗体混于凝胶中 (1)抗体混于凝胶中 (2)抗原加入孔内 (2)抗原加入孔内 (3)抗原自由扩散 (3)抗原自由扩散 淀 环 直 径
补体结合试验
同上
抗原抗体反应类型
反应类型 中和反应 实验技术 病毒中和试验 毒素中和试验 标记免疫反应 荧光免疫技术 放射免疫技术 酶免疫技术 发光免疫技术 金免疫技术 结果判断 检测病毒感染性 检测外毒素毒性 检测荧光现象 检测放射性强度 检测酶底物显色 检测发光强度 检测金颗粒沉淀
抗原抗体反应类型
抗原抗体反应特点
特异性： 特异性： 抗原与抗体 结合反应的 专一性 分子基础是 抗原表位与 抗体分子高 变区之间空 间构型的互 补性
抗原抗体反应特点
交叉反应（cross reactions） 交叉反应（ reactions）
两种不同的抗原 分子具有部分相 同或类似结构的 抗原表位， 抗原表位，可与 彼此相应的抗血 清发生反应
复习题
Ag-Ab反应有什么特点 Ag-Ab反应有什么特点 人工主动免疫与被动免疫的区别 常用的免疫制剂有哪些，分别属于什么类型？ 常用的免疫制剂有哪些，分别属于什么类型？
抗原抗体交叉反应示意图
抗原抗体反应特点
比例性（可见性）：抗 比例性（可见性）：抗 ）： 原与抗体发生可见反应需 遵循一定的量比关系
前带(prezone)： 前带(prezone)：抗体过量 (prezone) 后带(postzone) (postzone)： 后带(postzone)：抗原过量 等价带(equivalence zone)： 等价带(equivalence zone)： 抗原抗体比例合适
利用免疫学原理，针对疾病发病机制， 利用免疫学原理，针对疾病发病机制，应用制剂人为 调整免疫状态，达到到治疗或缓解疾病的目的。 调整免疫状态，达到到治疗或缓解疾病的目的。 免疫调节 免疫增强：用与肿瘤辅助治疗， 免疫增强：用与肿瘤辅助治疗，抗病毒治疗 免疫抑制：用于自身免疫病、 免疫抑制：用于自身免疫病、器官移植抗排异反应治 疗 免疫治疗 治疗性疫苗 细胞因子 过继免疫治疗 干细胞移植
免疫学应用
本课要解决的一些问题
体外Ag-Ab反应原理是什么？ 体外Ag-Ab反应原理是什么？ Ag 反应原理是什么 Ag-Ab反应有什么特点 反应有什么特点？ Ag-Ab反应有什么特点？ 现代医学免疫学检验应用有哪些？ 现代医学免疫学检验应用有哪些？ 人工主动免疫与被动免疫的意义 现代医学免疫治疗方法
免疫学应用
免疫诊断 抗原、抗体诊断技术 抗原、 细胞诊断技术 免疫预防 人工主动免疫 人工被动免疫 免疫治疗 免疫调节－增强、 免疫调节－增强、抑制 免疫治疗
免疫诊断
抗原、抗体诊断技术 抗原、 抗原和相应的抗体之间可以发生特异性结合， 抗原和相应的抗体之间可以发生特异性结合，这种 反应还能在体外进行 试管内或玻片上）。 体外进行（ ）。呈现出 反应还能在体外进行（试管内或玻片上）。呈现出 反应现象。 凝集、沉淀等可见的反应现象 凝集、沉淀等可见的反应现象。 抗原抗体的结合具有特异性， 抗原抗体的结合具有特异性，可以用已知抗体检测 未知抗原，也可以用已知抗原检测未知抗体， 未知抗原，也可以用已知抗原检测未知抗体，来达 到实验诊断或研究的目的。 到实验诊断或研究的目的。 抗体主要存在于血清中，试验时一般都需要血清做 抗体主要存在于血清中， 试验材料， 试验材料，所以传统上将体外的抗原抗体反应又称 血清学反应。 为血清学反应。
标记免疫技术：用荧光物质、放射性核素、 标记免疫技术：用荧光物质、放射性核素、酶或化学发光 物质等标记抗原或抗体，进行抗原抗体反应后， 物质等标记抗原或抗体，进行抗原抗体反应后，通过检测 标记物对抗原或抗体进行定性、 标记物对抗原或抗体进行定性、定位或定量分析 按实际用途分为: 按实际用途分为: 免疫组织化学技术(immunohistochemistry ①免疫组织化学技术(immunohistochemistry technique,IHCT) 免疫测定(immunoassay) ②免疫测定(immunoassay) 按测定反应体系的物理状态分为: 按测定反应体系的物理状态分为: ①均相免疫测定(homogenous immunoassay） 均相免疫测定(homogenous immunoassay） ②非均相免疫测定(heterogenous immunoassay) 非均相免疫测定(heterogenous 按检测现象分为: 按检测现象分为: ①放射免疫技术 ③酶免疫技术 ⑤金免疫技术
免疫预防
人工被动免疫 给机体输入抗体等效应物质， 给机体输入抗体等效应物质，直接产生免 疫作用 人工被动免疫产生的免疫力出现较快， 人工被动免疫产生的免疫力出现较快，但 免疫力不持久，临床上多用于临时治疗。 免疫力不持久，临床上多用于临时治疗。 抗血清 免疫球蛋白 细胞因子
免疫预防
免疫预防
免疫治疗
抗原 抗原 (4) (5) 抗原 沉淀 应
沉淀反应
双向琼脂扩散
(1)抗原抗体双向自由扩散 (1)抗原抗体双向自由扩散 (2)24小时出结果 (2)24小时出结果 (3)呈现沉淀线或弧 (3)呈现沉淀线或弧
免疫酶技术
免疫荧光技术
金免疫标记技术
手持端
兔抗鼠IgG 兔抗鼠 鼠抗HCG单抗 单抗 鼠抗
抗原抗体来自百度文库应比例性示意图
抗原抗体反应特点
阶段性 第一阶段：特异性结合阶段，反应快， 第一阶段：特异性结合阶段，反应快，不 可见 第二阶段：反应可见阶段，反应慢， 第二阶段：反应可见阶段，反应慢，出现 凝集、 凝集、 沉淀和细胞溶解等现象
抗原抗体反应特点
可逆性：抗原与相应抗体结合成复合物后， 可逆性：抗原与相应抗体结合成复合物后， 在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体 的特性 影响因素： 影响因素： 抗体对相应抗原的亲合力－亲合力越高， 抗体对相应抗原的亲合力－亲合力越高， 结合越牢固， 结合越牢固，越不易解离 环境因素对复合物的影响－pH、 环境因素对复合物的影响－pH、离子强度
尿液浸湿标志线 金标鼠抗HCG单抗 单抗 金标鼠抗 斑点金免疫层析试验检测HCG 斑点金免疫层析试验检测
金免疫标记技术
阳性 弱阳性 阴性 无效
质控线
测试线
尿样 斑点金免疫层析试验检测HCG 斑点金免疫层析试验检测
免疫细胞检测
非特异性免疫细胞检测 中性粒细胞运动、 中性粒细胞运动、吞噬和杀菌功能检测 巨噬细胞检测 NK细胞检测 NK细胞检测 特异性免疫细胞检测 细胞亚群、数量、 T细胞亚群、数量、功能检测 B细胞功能检测
抗原、抗体诊断技术 抗原、
、 、 技术 、 、 、 、
体 外 抗 原 － 抗 体 诊 断 技 术
体 、 、 体
抗体 技术 、
技术、 技术、 、 、
、 技术
酶免疫分析
免疫比浊
化学发光免疫分析
流式细胞术
抗原抗体反应原理
Ag决定簇和Ab分子超变区相互作用(相互吻合,具有互补性) Ag决定簇和Ab分子超变区相互作用(相互吻合,具有互补性)，分子 决定簇和Ab分子超变区相互作用 表面特异的可逆的弱结合力在极短距离内才能发生。 表面特异的可逆的弱结合力在极短距离内才能发生。 两个阶段： 两个阶段： 特异性结合阶段， 特异性结合阶段，这种结合是基于两种分子间的结构互补性和亲 和性； 几秒到几分。 和性；快、几秒到几分。 可见反应阶段：抗原抗体复合物在环境因素（电解质、温度、 可见反应阶段：抗原抗体复合物在环境因素（电解质、温度、PH 影响下，进一步交联和聚集，表现为凝集、 等）影响下，进一步交联和聚集，表现为凝集、沉淀等肉眼可见 反应； 数分钟到数小时。 反应；慢、数分钟到数小时。 物质基础： 物质基础： 抗原表位与抗体高变区间的互补结合 抗原表位与抗体高变区的沟槽分子表面的结合 抗原抗体之间的结合力 亲水胶体转化为疏水胶体
PHA刺激 刺激 48~72小时 小时
免疫预防
人工主动免疫 是给机体输入疫苗或类毒素等抗原物质， 是给机体输入疫苗或类毒素等抗原物质，刺激机体产 生特异性免疫力。 生特异性免疫力。 经人工主动免疫产生的免疫力出现较慢， 经人工主动免疫产生的免疫力出现较慢，但免疫力较 持久，临床上多用于预防。 持久，临床上多用于预防。 死疫苗：伤寒、乙脑、百日咳、 死疫苗：伤寒、乙脑、百日咳、狂犬病及钩体病等疫 苗 活疫苗：活疫苗有卡介苗、麻疹、风疹、 活疫苗：活疫苗有卡介苗、麻疹、风疹、脊髓灰质炎 等疫苗 类毒素： 类毒素：白百破三联疫苗 新型疫苗：亚单位疫苗:HBsAg 合成疫苗、 :HBsAg、 新型疫苗：亚单位疫苗:HBsAg、合成疫苗、基因工程 疫苗。 疫苗。