质粒载体介绍
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Figure. Representative FERTILITY PLASMID. A fertility plasmid carries the genes for conjugation as well as a number of other genes. In this figure the fertility plasmid also carries antibiotic resistant genes.
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来自百度文库
几种代表性质粒
• 1. F–因子（fertility factor）：又称致育因 子或性因子，62×106Dalton，94.5kb，相 当于核染色体DNA2%的环状双链DNA，足 以编码94个中等大小多肽，其中1/3基因 （tra区）与接合作用有关。存在于肠细菌 属、假单胞菌属、嗜血杆菌、奈瑟氏球菌、 链球菌等细菌中，决定性别。
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3.Ti质粒
• 当细菌侵入植物细胞 中后，在其细胞中溶 解，把细菌的DNA释 放到植物细胞中。这 时，含有复制基因的 Ti质粒的小片段与植 物细胞中的核染色体 发生整合，破坏控制 细胞分裂的激素调节 系统，从而使它转变 成癌细胞。
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pUC18 和 pUC19
• • pUC18 和 pUC19 大小 只有 2686bp ，是最常用 的质粒载体，其结构组成 紧凑，几乎不含多余的 DNA 片段，GenBank注 册号为 L08752（pUC18） 和 X02514（pUC19）。 由 pBR322 改造而来， 其中 lacZ （MSC） 来 自 M13mp18/19 图 3-4 是其质粒图谱。 这两个质粒的结构几乎是 完全一样 的，只是多克隆 位点的排列方向相反。这 些质粒缺乏控制拷贝数的 rop 基因，因此其拷贝数达 500-700 。 pUC 系列载体 含有一段 lacZ 蛋白氨基末 端的部分编码序列，在特 定的受体细胞中可表现 α互补作用。因此在多克隆 位点中插入了外源片段后， 可通过 α-互补作用形成的 蓝色和白色菌落筛选重组 质粒。
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pBR322
pBR322 质粒的大小为 4361bp ， GenBank 注 册号为 V0lll9 和 J01749 ， 含有 30 多个单一位点， 具有四环素抗性基因 （tetr）和氨苄青霉素抗 性基因（ampr），其质 粒复制区来自 pMB1 （如图 3-3）。目前使用 广泛的多质粒载体几乎都 是由此发展而来的。利用 四环素抗性基因内部的 BamHⅠ 位点来插入外 源 DNA 片段，可通过插 入失活进行筛选。
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• 成员：鲍臻 胡俊逸 何钦 林圳
目录
质粒载体概念
质粒载体性质
几种质粒介绍
何为质粒载体？
• 质粒载体是是一类小 型闭合环状核外双螺 旋DNA分子，能独立于 细胞核进行自主复制。 约2~100×106Dalton， 上面携带有数个到数 十个甚至上百个基因。
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质粒载体的性质
• ①可以在细胞质中独立于染色体之外独立存在（游离态），也可以 通过交换掺入染色体上，以附加体（episome）的形式存在； • ②质粒是一种复制子（replicon），根据自我复制能力的不同，可 把质粒复制的控制形式分为严紧型和松弛型两种，严紧型质粒的复 制受细胞核控制，与染色体DNA复制相伴随,一般一个寄主细胞内只 有少数几个（1~5）个拷贝；松弛型质粒的复制不受细胞核控制，在 染色体DNA复制停止的情况下仍可以进行复制，在细胞内的数量可以 达到10~200个或更多的。 • 可以通过转化、转导或接合作用而由一个细菌细胞转移到另一个菌 细胞中，使两个细胞都成为带有质粒的细胞；质粒转移时，它可以 单独转移，也可以携带着染色体（片段）一起进行转移，所以它可 成为基因工程的载体。
Figure. Representative FERTILITY PLASMID. A fertility plasmid carries the genes for conjugation as well as a number of other genes. In this figure the fertility plasmid also carries antibiotic resistant genes.
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几种代表性质粒
• 1. F–因子（fertility factor）：又称致育因 子或性因子，62×106Dalton，94.5kb，相 当于核染色体DNA2%的环状双链DNA，足 以编码94个中等大小多肽，其中1/3基因 （tra区）与接合作用有关。存在于肠细菌 属、假单胞菌属、嗜血杆菌、奈瑟氏球菌、 链球菌等细菌中，决定性别。
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3.Ti质粒
• 当细菌侵入植物细胞 中后，在其细胞中溶 解，把细菌的DNA释 放到植物细胞中。这 时，含有复制基因的 Ti质粒的小片段与植 物细胞中的核染色体 发生整合，破坏控制 细胞分裂的激素调节 系统，从而使它转变 成癌细胞。
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pUC18 和 pUC19
• • pUC18 和 pUC19 大小 只有 2686bp ，是最常用 的质粒载体，其结构组成 紧凑，几乎不含多余的 DNA 片段，GenBank注 册号为 L08752（pUC18） 和 X02514（pUC19）。 由 pBR322 改造而来， 其中 lacZ （MSC） 来 自 M13mp18/19 图 3-4 是其质粒图谱。 这两个质粒的结构几乎是 完全一样 的，只是多克隆 位点的排列方向相反。这 些质粒缺乏控制拷贝数的 rop 基因，因此其拷贝数达 500-700 。 pUC 系列载体 含有一段 lacZ 蛋白氨基末 端的部分编码序列，在特 定的受体细胞中可表现 α互补作用。因此在多克隆 位点中插入了外源片段后， 可通过 α-互补作用形成的 蓝色和白色菌落筛选重组 质粒。
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pBR322 质粒的大小为 4361bp ， GenBank 注 册号为 V0lll9 和 J01749 ， 含有 30 多个单一位点， 具有四环素抗性基因 （tetr）和氨苄青霉素抗 性基因（ampr），其质 粒复制区来自 pMB1 （如图 3-3）。目前使用 广泛的多质粒载体几乎都 是由此发展而来的。利用 四环素抗性基因内部的 BamHⅠ 位点来插入外 源 DNA 片段，可通过插 入失活进行筛选。
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质粒载体概念
质粒载体性质
几种质粒介绍
何为质粒载体？
• 质粒载体是是一类小 型闭合环状核外双螺 旋DNA分子，能独立于 细胞核进行自主复制。 约2~100×106Dalton， 上面携带有数个到数 十个甚至上百个基因。
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质粒载体的性质
• ①可以在细胞质中独立于染色体之外独立存在（游离态），也可以 通过交换掺入染色体上，以附加体（episome）的形式存在； • ②质粒是一种复制子（replicon），根据自我复制能力的不同，可 把质粒复制的控制形式分为严紧型和松弛型两种，严紧型质粒的复 制受细胞核控制，与染色体DNA复制相伴随,一般一个寄主细胞内只 有少数几个（1~5）个拷贝；松弛型质粒的复制不受细胞核控制，在 染色体DNA复制停止的情况下仍可以进行复制，在细胞内的数量可以 达到10~200个或更多的。 • 可以通过转化、转导或接合作用而由一个细菌细胞转移到另一个菌 细胞中，使两个细胞都成为带有质粒的细胞；质粒转移时，它可以 单独转移，也可以携带着染色体（片段）一起进行转移，所以它可 成为基因工程的载体。