ELISA法检测血清抗核小体抗体诊断系统性红斑狼疮价值的系统评价
抗核抗体谱的检测及意义简介
ANA谱17项（免疫印迹法）
疾病
项目名称
抗双链DNA抗体IgG抗体
抗核小体抗体
系统性红斑狼疮
常
抗组蛋白抗体 抗Sm抗体
见
抗增殖细胞核抗原抗体（PCNA)
抗核糖体P蛋白（PO）
的
抗SS-A/R060抗体
自
干燥综合征/系统性红斑狼疮
抗SSA/R052抗体
身
抗SSB/La抗体
抗
系统性硬化
抗着丝点B抗体（CENP-B） 抗Scl-70抗体（Scl-70）
39
系统性血管炎的分类(Chapel Hill)
• 大血管 Takayasu动脉炎（大动脉炎） 巨细胞动脉炎（颞动脉炎）
白塞氏病
• 中血管 结节性多动脉炎
Kawasaki病 • 小血管
韦格纳肉芽肿
Churg-Strauss 综合症 显微镜下多血管炎
过敏性紫癜
冷球蛋白血症性血管炎
皮肤白细胞破碎性血管炎
➢ 在原发性干燥综合征时，此抗体阳性率为60%。 ➢ 约40%SLE患者此抗体为阳性。 ➢ RA及SSc等继发干燥综合征时此抗体为阳性。 ➢ 在亚急性皮肤型红斑狼疮（SCLE）时，此抗体阳
性率可高达75%而ANA可阴性。
抗SSB/La抗体
现已证实1975年命名抗SSB抗体与1974年发现的抗La 抗体为同一抗体，简称抗SSB抗体。其临床意义如下： ➢ 原发性干燥综合征，此抗体阳性率为40%。 ➢ 抗SSB抗体阳性对诊断SS比抗SSA抗体阳性更具特异性， 故可认为抗SSB抗体是SS的标记性抗体。 ➢ 抗SSB抗体阳性时，抗SSA抗体肯定阳性，但抗SSA抗体 阳性时，抗SSB抗体可以阴性。
SSc: 30%
SS:
抗染色质抗体检测在SLE诊断及病情发展中的意义
抗染色质抗体检测在SLE诊断及病情发展中的意义贾汝琳;朱雷;李云;杨冬月;张霞;李珊珊;马晓旭;何菁;栗占国【摘要】目的检测SLE患者血清中抗染色质抗体(anti-chromatin antibody,AchA)水平,评价其在SLE诊断和病情发展中的意义.方法选取SLE患者154例,疾病对照组155例(类风湿关节炎46例,干燥综合征49例,骨关节炎10例,系统性硬化症20例,肾病综合征30例),健康人对照107名.用ELISA检测AchA水平,并探讨其与SLE患者发病年龄、病程、疾病活动指数(SLEDAI)评分、其他自身抗体、补体、免疫球蛋白(IgG)、ESR、24 h尿蛋白、肾功能指标等的关系.结果SLE患者血清中AchA的阳性率为63.6％ (98/154),明显高于疾病对照组5.8％(9/155)及健康人对照组0％(P均＜0.01).AchA诊断SLE的特异性为96.6％,敏感性为63.6％,阳性预测值和阴性预测值分别为91.6％和81.9％.SLE患者血清中AchA水平明显高于疾病对照组和健康人对照组(P均＜0.000 1).与AchA阴性SLE 患者比较,AchA阳性SLE患者SLEDAI评分、24 h尿蛋白水平、ESR升高,C3、C4、WBC降低,抗核小体抗体(AnuA)、抗dsDNA抗体、抗核糖体P蛋白抗体水平升高(P均＜0.05).相关性分析显示,AchA水平与ESR(r =0.218,P=0.01)、C3(r=0.451,P＜0.000 1)、Alb(r=0.295,P＜0.000 1)、AnuA(r=0.349,P＜0.000 1)、抗dsDNA抗体(r=0.311,P＜0.000 1)、24 h尿蛋白(r=0.243,P=0.003)、SLEDAI评分(r=0.202,P=0.015)均具有相关性.结论 AchA对SLE的诊断具有较高的敏感性和特异性,并且与疾病活动及病情严重程度相关,与狼疮肾损害强相关,提示其在狼疮肾发病及病理过程中的重要作用.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2014(032)003【总页数】4页(P173-176)【关键词】抗染色质抗体;系统性红斑狼疮;狼疮肾炎【作者】贾汝琳;朱雷;李云;杨冬月;张霞;李珊珊;马晓旭;何菁;栗占国【作者单位】北京大学人民医院风湿免疫科,北京100044;北京大学人民医院风湿免疫科,北京100044;北京大学人民医院风湿免疫科,北京100044;北京大学人民医院风湿免疫科,北京100044;北京大学人民医院风湿免疫科,北京100044;北京大学人民医院风湿免疫科,北京100044;北京大学人民医院风湿免疫科,北京100044;北京大学人民医院风湿免疫科,北京100044;北京大学人民医院风湿免疫科,北京100044【正文语种】中文【中图分类】R446.6SLE患者由于机体免疫耐受丧失，通过细胞介导，针对血清中核抗原成分产生大量自身抗体及免疫复合物而导致多器官、多系统如肾脏、关节、神经系统、造血器官等受累。
SLE
（一）系统性红斑狼疮SLE：ANA 、ANA-8S、ENA-6S、抗dsDNA抗体、抗Sm抗体、抗核小体抗体、抗组蛋白抗体、抗C1q抗体1、抗核抗体（ANA）1）是最常出现于自身免疫性风湿病（结缔组织病）患者血清中的一组自身抗体的总称。
2）ANA阳性已被美国风湿病学会列为SLE的诊断标准之一。
3）抗核抗体检测通常是免疫诊断诸如SLE等系统性自身免疫病的第一步。
2、抗双链DNA(dsDNA)抗体1）是系统性红斑狼疮的标志性抗体之一。
2）对狼疮的特异性达到95%，且与SLE的活动性，特别的狼疮肾炎的活动密切相关。
3）抗dsDNA抗体的滴度随疾病的活动程度而消长。
1）抗dsDNA自身抗体是SLE最重要的标志性抗自身抗体；2）美国风湿病学会已将抗dsDNA阳性列为SLE诊断标准之一。
它对于诊断狼疮的特异性为95%，对SLE特异性可达85%；3）RA患者阳性率最多为1%；干燥综合征，MCTD阳性率在10%以内；4）高滴度抗dsDNA抗体提示SLE处于活动期.3.抗小核糖体核蛋白（sm）抗体）见于1/3或以上的SLE患者；2）对SLE诊断有特异性，不出现于其它疾病中；3）不论是否是活动期，抗Sm均可阳性，可作为SLE的标志性抗体.4）高滴度抗nRNP阳性且抗Sm抗体阴性是混合型结缔组织病的特4、抗核小体抗体1）在系统红斑狼疮诱导和致病中有重要意义；2）在SLE中阳性率为82-86%，特异性大于98%；3）AnuA是比抗-dsDNA、组蛋白更敏感的SLE标记物，更早出现于系统性红斑狼疮的早期，可能是SLE诊断的标记性抗体；4）联合检测AnuA、抗-dsDNA抗体、抗-Sm抗体能有效提高SLE的实验诊断率。
5、抗组蛋白抗体1）抗组蛋白抗体可在多种自身免疫性疾病（DIL、SLE、RA、SSc ）中出现。
2）药物性狼疮（DIL）阳性率达95%。
3）系统性红斑狼疮（SLE）阳性率为50%(活动期SLE可达90%）。
4）类风湿关节炎（RA）阳性率为23.1%,A HA中IgM-AIH占优势，但AHA中Ig类型与关节病变表现无关。
2种检测系统测定抗核抗体谱的一致性分析
2种检测系统测定抗核抗体谱的一致性分析詹文丽;李立新;黄卓春;胡静;武永康【摘要】Objective To evaluate the consistency of commonly-used 2 systems for the determination of antinuclear antibody(ANA) profile,and to provide a reference for choosing methods for ANA profile determination. Methods Sera from 358 patients with systemic lupuserythematosus(SLE),147 patients with autoimmune disease and 47 healthy subjects were collected,and were determined for ANA profile by 2 systems, HUMAN(Germany) Diagnostics Ltd. and EUROIMMUN(China) Medical Diagnosis Ltd.. The calculated consistency and McNemar test were used to evaluate the consistency of 2 systems. Results The consistencies of anti-Smith(Sm) antibody,anti-ribosomal protein(RIB) antibody and anti-ribonucleoprotein(RNP) antibody were 79.9%,93.5%and 82.4%,with statistical significance(P<0.001). The consistencies of other 4 indices[anti-Sjogren syndrome A(SS-A) antibody,anti-Sjogren syndrome B(SS-B)antibody,anti-scleroderma 70(Scl-70) antibody and anti-Jo-1 antibody] were>90%,without statistical significance(P>0.05). Among 358 SLE patients, the positive rates of anti-Sm antibody were 48.6%by HUMAN and 27.1%by EUROIMMUN. Among 194 non-SLE patients,the specificities of anti-Sm antibody were 93.3%by HUMAN and 99.5%by EUROIMMUN. Conclusions The consistencies of HUMAN and EUROIMMUN in determining anti-Sm,anti-RIB and anti-RNP antibodies are low,while the other 4 indices show good consistencies. For the determination of anti-Smantibody,HUMAN reveals a better determination rate and lower specificity than EUROIMMUN.%目的：比较临床常用的2种抗核抗体（ANA）谱检测系统检测结果的一致性，为临床选择ANA谱检测方法提供依据。
ANA检测
IMTEC ANA相关产品
ACR --ANA检测
100年前，保罗·艾尔利希首次提出“自身免疫”概念 60年前，ANA检测方法的诞生，临床免疫学的里程碑 ANA检测方法逐年更新，敏感性和特异性得以提高 2009年，将间接免疫荧光法（IIF）作为ANA检测的金标准 2014年，IIF法就已经被称为“参考方法” 2015年，Wener教授建议用特异性方法配合检测（ELISA 法或印迹法）
高滴度的自身抗体或ANAS的存 在预示着自身免疫性疾病的风险。 99% 以上的 SLE 患者在其病程的 某一阶段会表现为 ANAs 阳性。 最近一些研究发现，ANAs 和其 他一些自身抗体于 SLE 出现典型 临床症状 10 年之前即可被检测 到。
青少年 关节炎 狼疮
硬皮病
Sjögren’s 综合征
自身免疫性疾病
“5D”疾病
自身免疫性疾病研究背景
1854-1915年, Paul Ehrlich 用(“horror auto-toxicus”) 描述 自身免疫性疾病
1940年, Waaler 描述了一种 因子(之后发现是类风湿因子)
1948年, Hargraves et al. 发现红斑狼疮细胞, 巨噬细胞吞噬 变性细胞
蝶状红斑
网状青斑
光敏感
盘状狼疮伴脱发
硬腭溃疡
系统性红斑狼（SLE，Lupus） 临床诊断标准
1982年，美国 风湿学会提出 的分类标准
1997年，ACR 标准进行修改
2012年，最新 的 SLE 诊断标 准由 SLICC 工 作组所提出
多年来，SLE 的诊断主要围绕着一系列的临床症状和实验室指标。
Tonuttia E，Bassetti D，Piazza A，Visentini D，Poletto M， Bassetto F，Caciagli P，Villalta D，Tozzoli R，Bizzaro N.
抗核抗体检测及临床意义-张瑾
有助于弥漫性结缔组织病的分类和诊断 抗Sm抗体是SLE的标记抗体； 抗Scl-70抗体是SSc的标记抗体； 抗Jo-1抗体是PM/DM的标记抗体； 观察疾病活动度和治疗反应 抗dsDNA抗体 研究发病机理 抗核小体抗体、抗dsDNA抗体
基本概念
ANA荧光核型 ANAs中的常见抗体
抗核抗体
抗核抗体谱（ANAs）
dsDNA 抗核不溶成分
抗DNA抗体 抗核小体抗体
ssDNA
抗组蛋白 H1,H2A, H2B, H3,H4
ANAs
抗Sm,U1RNP,SSA,SSB
抗核可溶成分 （抗ENA）
抗染色体DNA蛋白 抗核仁抗体
抗Scl-70,Jo-1,PM-1
抗rRNP,PCNA…….
抗着丝点抗体（ACA) 抗5sRNA
与预后相关的抗体：抗Scl-70（差）、ACA（好）
案例1
女性，34岁 游走性多关节痛，雷诺现象半年 RF 56U/L；抗CCP抗体阴性； ANA 1：320 （核仁型） 胸部CT：轻度肺间质病变 诊断？治疗？
UCTD ILD 发展为 SSc可能性大 Pred+CTX
抗均质型或核膜型抗体常与SLE有关。
Take Home Massage
抗dsDNA：SLE特异性抗体，与LN及疾病活动度 有关，至少两种方法联合检测（如：
IIF法+ ELISA法）。
抗核小体、抗组蛋白、抗dsDNA三抗体阳性者强烈 提示增殖性LN。 与疾病活动性相关的抗体：抗dsDNA、抗核小体、 抗组蛋白、抗Jo-1、抗rRNP
核 膜
型 (M)
斑 点 型 (S)
神经系统疾病的免疫学检测指标及临床意义
副肿瘤抗体与疾病
抗体名称 Hu Yo PCA-2 Tr Ri amphiphysin CRMP 肿瘤类型 小细胞肺癌 妇科肿瘤 小细胞肺癌 Hodgkin‘s 淋巴瘤 乳腺癌 乳腺癌及小细胞肺癌 周围神经 靶组织或细胞 神经元核 Purkinje 细胞 Purkinje 细胞 Purkinje 细胞 神经元核 疾病 感觉性神经病、脑脊髓神经病 小脑性共济失调、感觉或运动 神经病 边缘叶脑炎、LEMS、 自主神 经病、运动神经病 亚急性小脑共济失调 眼阵挛 脑脊髓神经根神经病 周围神经病
OB
• 克隆(clone)指一个无性细胞株。 • 寡克隆(oligoclone):两个或多个细胞克隆活化造成 不连续IgG带群。 • 寡克隆区带(al bands, OB)是一电泳用语，是检测 鞘内Ig合成的又一重要方法。 • 测定方法及要点：IEF＋银染；CSF与血同时电泳， 蛋白量标化。 • 意义：OB是MS诊断的重要参考指标，但是OB的 存在并非MS病人所特有，在其它神经系统疾病中 也可出现。
细菌性脑膜炎
• 指标：细菌抗原 • 检测方法：对流免疫电泳、乳胶凝集试验、 放射免疫法及ELISA等 • 临床不常用
结核性脑膜炎
• 指标：结核抗体 • 检测方法：ELISA法检测 • 检测的敏感性、特异性与所用的方法以及所用 的抗原特异性有关。 • 常用的抗原：PPD
新型隐球菌脑膜炎
• CSF隐球菌荚膜多糖抗原检测
• 特异性：TPHA、FTA-ABS
VDRL(Venereal Disease Research Laboratory)
• 抗原与抗体（反应素）反应，加入卵磷脂加强心磷脂的 抗原性，加入胆固醇增强抗原的敏感性 • 优点特异性较高，用于诊断神经梅毒的特异性为100%， 美国CDC诊断标准提到若CSF－VDRL实验(+)，即可诊 断神经梅毒 • 缺点敏感性仅为27%，特别是在无症状神经梅毒中仅 10%。抗原需要灭活，试剂需临时配制，需要显微镜， 目前多用改良RPR实验代替。
四种不同方法检测梅毒螺旋体抗体比较
四种不同方法检测梅毒螺旋体抗体的比较硕士研究生：王雨新指导老师：张卓然教授专业名称：病原生物学摘要梅毒（ｓｙｐｈｉｌｉｓ）是危害人类健康较为严重的性传播疾病之一，近年来在我国的发病率呈上升趋势，梅毒的早期诊断和早期治疗对控制其蔓延至关重要。
病原学检测结果的敏感性和准确性，可直接影响梅毒的治疗与预防。
至今还未建立梅毒螺旋体的培养方法，直接检测病原体很困难，血清学检测在梅毒的诊断及鉴别诊断中具有决定性意义。
梅毒病原体是梅毒螺旋体（ｔｒｅｐｏｎｅｍａｌｐａｌｌｉｄｕｍ，ＴＰ），其含有表面抗原，能刺激机体产生两类抗体，一类为非特异性抗体；另一类为抗螺旋体的特异性抗体。
血清学试验包括非特异性试验和特异性试验。
非特异性试验是以类脂质为抗原的实验方法，其中较为常用的是甲苯胺红不加热血清反应素试验（ｔｏｌｕｉｄｉｎｅｒｅｄｕｎｈｅａｔｅｄｓｅｌ＇Ｌｉｍｒｅｇａｉｎｔｅｓｔ，ＴＲＵＳＴ）；特异性试验是以梅毒螺旋体本身或非致病的螺旋体为抗原，以检查病人血清中抗螺旋体的特异性抗体，目前应用的方法有：（１）梅毒螺旋体血球凝集试验（ｔｒｅｐｏｎｅｍａｌｐａｌｌｉｄｕｍｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎａｓｓａｙ，ＴＰＨＡ）；（２）梅毒螺旋体酶联免疫吸附实验（ｔｒｅｐｏｎｅｍａｌｐａｌｌｉｄｕｍ－ｅｎｚｙｍｅｌｉｎｋｅｄｉｍｍｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ，ＴＰ—ＥＬＩＳＡ）；（３）荧光密螺旋体抗体吸收试验（ｆｌｕｏｒｅｓｅｎｔｔｒｅｐｏｎｅｍａｌａｎｔｉｂｏｄｙ．ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｔｅｓｔ，ＦＴＡ．ＡＢＳ）等。
通过对这几种方法的研究，寻求一种敏感性高、特异性强且更为简单快速的方法，用于输血前和对梅毒早诊断、早治疗的最佳方法。
１．研究对象和方法确诊为梅毒的患者７９例，Ｉ期梅毒２７例，ＩＩ期梅毒２４例，潜伏·１‘梅毒２８例；非梅毒对照组９８例，抗核抗体（ＡＮＡ）阳性患者２２例，妊娠妇女２６例，孕期为２６．２８周，健康对照组５０例。
血清同型半胱氨酸检测在系统性红斑狼疮中的应用价值
３ ７ ２
陕 西 医学 杂 志 ２ ０ １ ５年 ３月第 ４ ４卷 第 ３期
血清 同型 半胱 氨 酸检 测在 系统 性红 斑 狼 疮 中的应 用 价值
西 安市 第五 医院（ 西安 ７ １ ０ ０ ８ ２ ） 曹 团平 刘 宏毅 王 梦涛 刘 小玲 刘 立平 张 杰 刘 丹△
ｕ Ａ） 、 抗 双链 ＤＮＡ（ ｄ ｓ Ｄ ＮＡ） 、 抗 Ｓ ｍ抗体、 抗 核抗 体 （ ＡＮＡ） 、 Ｉ ｇ 、 Ｃ 。 、 Ｃ 的浓 度 ， 并记 录 Ｓ Ｌ Ｅ 患者 的 各种 临床表 现及 其 它 实验 室指标 以分析 比较 。 结果 ： ①Ｓ Ｌ Ｅ组 Ｈｃ ｙ （ １ ７ ． ６ ０ ±６ ． ４ ０ ￣ ｍｏ ｌ ／ Ｌ ） 显 著 高
Ｉ ｇ 、 ｃ 。 、 ｃ 速 率 散 射 比浊 法 试 剂 盒 （ 欧洲诊断公 司） ； 酶标仪 、 特种 蛋 白仪 Ｉ ＭＭＡＧＥ Ｓ Ｏ ０ （ 美国 Ｂ Ｅ Ｃ ＫＭＡＮ —
ＣＯＵＬＴＥＲ 公 司 ） 。
常， 产生 大量 的 自身抗 体 ， 形 成 免 疫 复 合 物沉 积 等 ， 造
摘 要 目的 ： 探 讨血 清 同型半胱 氨 酸（ Ｈｃ ｙ ） 检 测在 系统性 红斑狼 疮 （ Ｓ Ｌ Ｅ ） 中的应 用价 值 。 方 法 ：对 １ ２ ０例 Ｓ Ｌ Ｅ患者和 ４ ０例 体 检 健 康 者血 清分 别 检 测 Ｈｃ ｙ 、 Ｖｉ ｔ Ｂ ｚ 、 叶酸、 抗核 小体 抗 体 （ Ａｎ —
抗核抗体和抗核抗体谱联合检测诊断自身免疫性疾病的临床价值
China &Foreign Medical Treatment中外医疗自身免疫性疾病(AID)是指因人体自身存在的具有免疫效应的物质或细胞对人体自身产生的过度免疫应答,从而发生一系列的组织损伤与机体功能障碍[1]。
AID 可累及皮肤、关节、神经、肾脏等多种器官、组织与DOI:10.16662/ki.1674-0742.2020.34.029抗核抗体和抗核抗体谱联合检测诊断自身免疫性疾病的临床价值陈利琼,刘玉平,李陈林克拉玛依市中心医院检验科,新疆克拉玛依834000[摘要]目的探讨应用抗核抗体与抗核抗体谱联合检测对于诊断自身免疫性疾病的临床价值。
方法该院方便选取2017年1月—2019年12月期间收治的最终确诊为自身免疫性疾病的97例患者进行研究,分别采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)和线性免疫印迹法对所有患者的抗核抗体(ANA)和抗核抗体谱(ANAs)进行检测,并进行统计分析。
结果女性患者检出各项的阳性率:ANA(75.81%)、Ul-SnRNP(8.06%)、抗SSA(37.10%)、抗SSB(20.97%)、抗核小体(30.65%)和抗组蛋白(37.10%),明显高于男性患者,均差异有统计学意义(χ2=6.014、4.273、2.042、2.026、2.021、4.250,P<0.05)。
抗SmDl、抗Jo-1、抗Scl-70在性别间比较,均差异无统计学意义(P>0.05)。
经不同检测方法与AID 确诊情况对比,结果发现ANA 检测的准确率为67.01%,ANAs 检测的准确率为92.78%。
ANAs 检测与ANA 检测结果对比,差异有统计学意义(χ2=20.058,P<0.05)。
结论采用抗核抗体谱联合检测对自身免疫性疾病进行诊断,相比于单纯应用抗核抗体检测能够有效提高该病的诊断率,降低失误,对于自身免疫性疾病(AID)的诊断和治疗具有重要价值。
[关键词]抗核抗体检测;抗核抗体谱检测;自身免疫性疾病[中图分类号]R4[文献标识码]A[文章编号]1674-0742(2020)12(a)-0029-03The Clinical Value of Combined Detection of Antinuclear Antibody and Antinuclear Antibody Repertoire in the Diagnosis of Autoimmune DiseasesCHEN Li-qiong,LIU Yu-ping,LI Chen-linDepartment of Laboratory Medicine,Karamay Central Hospital,Karamay,Xinjiang Uigur Autonomous Region,834000China [Abstract]Objective To explore the clinical value of combined detection of antinuclear antibody and antinuclear antibody profile for the diagnosis of autoimmune diseases.Methods The hospital convenient selected 97patients who were finally diagnosed as autoimmune diseases admitted from January 2017to December 2019for research.All patients were treated by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)and linear western blotting respectively.The anti-nuclear antibody (ANA)andanti-nuclear antibody profile (ANAs)were tested and statistically analyzed.Results ANA (75.81%),Ul-SnRNP (8.06%),anti-SSA (37.10%),anti-SSB (20.97%),anti-nucleosome (30.65%)and anti-histone (37.10%)were detected in female patients,whose positivity rate was higher than that of male patients,the difference was statistically significant (χ2=6.014,4.273,2.042,2.026,2.021,4.250,P<0.05).There was no statistically significant difference in anti -SmDl,anti -Jo -1,andanti-Scl-70between sexes (P>0.05).After comparing different detection methods with the diagnosis of AID,it was foundthat the accuracy of ANA detection was 67.07%,and the accuracy of ANAs detection was 92.78%.The comparison between ANAs test and ANA test results was statistically significant difference (χ2=20.058,P<0.05).Conclusion The combined detection of antinuclear antibody spectrum for the diagnosis of autoimmune diseases can effectively improve the diagnosis rate of the disease,reduce errors,and diagnose and treat autoimmune diseases (AID)compared to purely using antinuclear antibody detection,it has important value.[Key words]Antinuclear antibody detection;Antinuclear antibody repertoire detection;Autoimmune diseases[作者简介]陈利琼(1972-),女,本科,主管检验师,研究方向为免疫。