不同消毒方法及时间对铁皮石斛茎段污染率及出愈率的影响

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第14章铁皮石斛快速繁育

1、鲜吃。洗净去衣直接食用。 2、煎汤—鲜铁皮石斛洗净去衣切碎或拍破加水入锅
文火先煎煮2个小时以上，连渣食用。 3、泡茶—洗净去衣后切薄片，加清水若干，武火
煮沸再文火煮30分钟或直接沸水冲饮，连渣食用。 4、入膳—洗净去衣切碎或拍破和鸡鸭等一起文火
炖60分钟，连渣食用。 5、浸酒—洗净去衣切碎拍破、单味或和其他物料
• 2000年，经浙江卫生防疫站检测表明有辅助抑制肿瘤的作用。
2.2 『功效特点』
主治：
※ 病后伤阴，阴虚干咳，声音嘶哑，虚火牙痛，心悸失眠，盗汗自汗
※ 眼燥目糊，手足心热，神疲烦倦，腰膝酸软，记忆力衰退，大便干结，体弱多病
※ 烟酒过度，夜生活过度，劳累过度等引起的机体不适
2.3 不同石斛品种的药用价值及价格差异
紫瓣石斛
小黄花石斛
小双花石斛
球花石斛
美花石斛
密花石斛
铁皮石斛
• 铁皮石斛是所有石斛中的极品，它因表皮呈铁绿色而得名。又名铁皮枫斗或枫斗.
• 铁皮石斛等少数品种之嫩茎，扭成螺旋状或弹簧状，晒干，商品称为耳环石斛。
• 除了前面讲述的观赏价值外，铁皮石斛更重要的是其独特的药用价值，一般以其茎和花入药。
Eg：经过多年比较，云南普洱市种植的铁皮石斛产量与浙江、广东、四川等种植地区相比，可增加0·5~1倍左右，每年生长期长达10个多月，采收周期由3年缩短至1年半左右(普洱市委政研室, 2008)。
3.1 铁皮石斛种苗生产
• 目前铁皮石斛主要是通过组织培养技术来繁殖种苗。
• 种苗的价格也因品种不同而差异较大，最高可达到30元/株，平均20左右元/瓶。
• 目前市场价格几百元一斤的铁皮石斛肯定是假货。

羊角槭愈伤组织诱导、增殖与分化

羊角槭愈伤组织诱导、增殖与分化胡佳卉;王小德【摘要】以羊角槭Acer yangjuechi幼嫩茎段和叶片为外植体,研究基本培养基和植物生长调节剂6-苄氨基腺嘌呤(6-BA),萘乙酸(NAA),激动素(KT)和N-苯基-N'-1,2,3-噻二唑-5-脲(TDZ)对愈伤组织诱导、增殖与分化的影响.试验通过植物组织培养技术诱导外植体产生愈伤组织,并对愈伤组织进行增殖与分化.结果表明:最适宜愈伤组织诱导的外植体为茎段,基本培养基和适当的植物生长调节剂配比均能促进愈伤组织的诱导增殖与分化;诱导效果最好的基本培养基为木本植物培养基(WPM培养基).在诱导中,6-BA的效果显著高于NAA和KT.羊角槭愈伤组织诱导最佳培养基为WPM+ 0.3 mg·L-1 NAA +0.5 mg·L-1KT+0.5 mg·L-1 6-BA,诱导率达62.9％;愈伤组织增殖最佳培养基为WPM+1.0 mg·L-1 6-BA+O.1 mg·L-1 NAA,增殖倍数达2.4倍.TDZ对分化有重要作用,WPM+1.0 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1NAA+1.5 mg· L-1TDZ能促进愈伤组织产生最多不定芽芽点.【期刊名称】《浙江农林大学学报》【年(卷),期】2018(035)005【总页数】6页(P975-980)【关键词】森林培育学;羊角槭;愈伤组织;诱导;增殖;分化【作者】胡佳卉;王小德【作者单位】浙江农林大学风景园林与建筑学院,浙江杭州311300;浙江农林大学风景园林与建筑学院,浙江杭州311300【正文语种】中文【中图分类】S792.3羊角槭Acer yangjuechi是槭树科Aceraceae槭属Acer落叶乔木。

该种仅分布于浙江西天目山狭窄的范围，生长于海拔700 m的疏林中［1］，为浙江省特有种，其数量极少，长势衰退。

茎段培养实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 掌握茎段培养的方法和技术，理解茎段培养形成幼苗的基本原理。

2. 学习并操作茎尖剥离的技巧，认识茎尖生长点的形态特征。

3. 了解不同植物激素对茎段生长的影响。

二、实验材料与仪器1. 材料：某植物幼嫩茎段、茎尖、愈伤组织诱导培养基、再生培养基、植物激素（生长素、赤霉素等）。

2. 仪器：无菌操作台、剪刀、镊子、解剖针、显微镜、培养箱、天平、酒精灯、高压灭菌锅等。

三、实验方法1. 茎段培养（1）选取健康的某植物幼嫩茎段，剪成约1-2cm长的切段。

（2）将切段放入75%酒精中消毒30秒，再用无菌水冲洗3次。

（3）将切段接种到愈伤组织诱导培养基中，置于培养箱中培养。

（4）观察并记录愈伤组织的形成和生长情况。

2. 茎尖剥离（1）选取健康的某植物茎尖，用解剖针剥离出茎尖生长点。

（2）将茎尖生长点放入75%酒精中消毒30秒，再用无菌水冲洗3次。

（3）将茎尖生长点接种到再生培养基中，置于培养箱中培养。

（4）观察并记录茎尖生长点的生长情况。

3. 植物激素对茎段生长的影响（1）将茎段接种到含有不同浓度生长素和赤霉素的培养基中。

（2）置于培养箱中培养，观察并记录茎段生长情况。

四、实验结果与分析1. 茎段培养结果经过一段时间的培养，愈伤组织诱导培养基中的切段逐渐形成愈伤组织，并逐渐生长。

2. 茎尖剥离结果经过一段时间的培养，再生培养基中的茎尖生长点逐渐生长，形成新的植株。

3. 植物激素对茎段生长的影响（1）生长素对茎段生长的影响：低浓度生长素能促进茎段生长，高浓度生长素则抑制茎段生长。

（2）赤霉素对茎段生长的影响：赤霉素能促进茎段生长，其促进作用随浓度增加而增强。

五、实验结论1. 通过茎段培养实验，掌握了茎段培养的方法和技术，理解了茎段培养形成幼苗的基本原理。

2. 通过茎尖剥离实验，学习了茎尖剥离的技巧，认识了茎尖生长点的形态特征。

3. 通过植物激素对茎段生长的影响实验，了解了生长素和赤霉素对茎段生长的促进作用及其浓度依赖性。

LED辐射的不同光质对铁皮石斛生长的影响

２结果与分析
试验在上海孙桥农业园区半导体照明现代农业应
用联合实验室进行。以种源为浙江雁荡山的铁皮石斛（Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕ１１］ｏｆｇｃｉｎａｌｅＫｉｍｕｒａｅｔＭｉｇｏ）为试验材料，购于上海兰蕙园林绿化发展有限公司，植株大小为组培
和枇杷等果树引种试验及栽培技术研究与推广。
平均穗重增加３９５ｇ，增加率为４４．８％，果粒平均增大４．５ｇ，增大率４７％。差异达极显著水平，其商品性和经
济效益大幅度提高。
⑤
现代园艺
２０１３年第ｌ０期
究生产的实验架专用可调光ＬＥＤ光源模块（功率３０Ｗ），分红色、蓝色单色光，可实现分别调节光强大
小。
１．２试验方法
在岩溶地区的珍贵中药材植物，民间有 “ 救命仙草” 、 “ 中华仙草 ” 的美称。光照是地球上各种生物生长发育的能量与信号来源，动植物的形态建成与新陈代谢过
２０１３年第１Ｏ期
现代园艺
ＬＥＤ辐射的不同光质对铁皮石斛生长的影响
尹翠翠卜崇兴张艳苓张志新（上海孙桥农业技术有限公司２０１２１０）
摘要：以铁皮石斛驯化苗为试验材料，探讨了５个光质对铁皮石斛生长的影响。结果表明：红光有利于植株伸长生长，蓝光则抑制伸长生长而有利于茎的横向加粗，红蓝组合对于铁皮石斛生长最为重要，既可以促进伸长生长，又可以促进横向加粗。ＬＥＤ光源

石斛组织培养方法研究

［摘要］目的：综述国内外对石斛组织培养进行的深入研究。

方法：系统查阅国内外近10年来的有关文献20余篇。

结果与结论：介绍了石斛组培的多种方法，对培养基、激素及多种条件对组培的影响作了论述，并提出了存在的问题及对策。

［关键词］石斛；组织培养［中图分类号］S567.035.3 ［文献标识码］A［文章编号］1001-5302(2000)06-0323-04石斛属Dendrobium为兰科第2大属，多年生草本植物，全球计有1 500种。

多生于树皮或岩石上，开花多，结果少，每果可含100万粒种子。

种子细如粉尘［1］，每粒重约0.3～0.4 μg。

种胚不超过球形阶段，即存在后熟现象。

由于缺乏胚乳组织，需与真菌共生(symbiotical)才能萌发，自然条件下发芽率一般不及5%。

石斛为合轴生长(sympodial)，分株是其繁殖的主要方式，对生长条件的要求较为苛刻。

石斛属植物中有不少是名贵中药，在《本草纲目》中石斛被列为上品。

我国76种石斛属植物中有近40种作药用［2］，著名的有D.nobile(金钗石斛)、D.candium(铁皮石斛)、D.huosanness(霍山石斛)等。

具有强阴益精、补肾益力、轻生延年等作用，其应用范围正迅速扩大。

石斛属植物约有四分之一可供观赏［3］，称为石斛兰D.orchids，以花艳丽而著称，近年作为观赏植物发展迅速，已形成独立产业。

集药用和观赏于一体的价值，加之过度的采伐利用和繁殖率低，造成了石斛供需之间的紧张状况，我国已将其列为濒于绝灭的受保护的中药品种之一。

自1960年法国人Gmorel利用石斛基尖组织培养无病毒植株的无性繁殖技术创立以来，石斛组织培养逐步走向深入化。

近年来，石斛组织培养的最佳条件，包括光照、温度、pH以及如何选用外植体，选用激素等取得长足进展，并利用组培技术研究种子萌发过程中的生理生化变化等，还获得了转基因石斛植株。

我国石斛组织培养研究起步较晚，直到1984年，徐云鹏等才首次报道获得霍山石斛试管苗［4］。

铁皮石斛温室高效栽培与加工技术

铁皮石斛温室高效栽培与加工技术引言“北有人参，南有石斛”，石斛是我国传统的名贵中药材，民间称其为“救命仙草”，国际药用植物界称为“药界大熊猫”。

铁皮石斛在石斛中最为名贵、药用价值及市场占有量最高，具有益胃生津、滋阴清热等独特的功效，被誉为“滋阴圣品” 。

铁皮石斛培育研究与产业发展具有资源多、分布广，药效高、价格贵、需求大、前景好的特点。

因此大力开展铁皮石斛高效生态培育、开发利用与示范推广工作，具有十分重要的意义。

1 设施大棚建设1.1 场地的选择栽培场地宜选择开阔平坦、通风排灌良好的地块，还应注意避开风口、低洼地带，远离污染源，交通应相对便利。

1.2 设施的选择栽培设施可选择玻璃温室、塑料大棚、简易大棚等。

玻璃温室较稳固，使用寿命长，但建设成本较高；独栋或连栋塑料钢架大棚稳固性不如玻璃温室，塑料无滴薄膜使用寿命较短，但建设成本低，适合普通农户及规模化生产；简易大棚适用于环境优越的区域。

设施大棚以南北走向为宜，建设前应清理场地，并硬化栽培地面。

考虑到铁皮石斛对温度、湿度及光照强度的要求较高，玻璃温室应配备喷淋、遮阳、通风和增降温设备，地面设置排水系统，同时配备温湿度计、照度计等。

条件允许时，可安装智能温室调控系统及水肥一体化系统等。

塑料大棚则覆盖无滴薄膜、遮阳网，配备灌溉设施即可。

2 设施栽培2.1 基质选择与处理栽培基质应选择透水透气性好、不易腐烂且含有一定养分的材料。

江苏地区宜选择大块、干燥的新松树皮，树皮粒径1-2 cm，以提高保水性。

种植前尽量暴晒，并用1000-2000 倍高锰酸钾稀释液进行浸泡杀菌处理，浸泡处理时间不低于10 分钟。

基质铺设时应松紧适度，基质厚约 8 公分，易于种植时扎根。

2.2 种苗定植2.2.1 种苗选择规模化的铁皮石斛繁育主要采用组织培养，品种应选择抗性强、产量高、适宜当地栽培的品种。

合格的铁皮石斛生产用苗应选择生长健壮，株高大于 3 cm，茎粗大于 0.2 cm，叶片 4 片以上，根长 2～3 cm，根数大于 3 条的壮苗。

不同干燥方法对铁皮石斛多糖和甘露糖含量的影响

不同干燥方法对铁皮石斛多糖和甘露糖含量的影响【摘要】本研究旨在探讨不同干燥方法对铁皮石斛多糖和甘露糖含量的影响。

通过对热风干燥、真空干燥、微波干燥、冷冻干燥和晒干这五种干燥方法的比较研究，发现不同干燥方法对铁皮石斛化学成分的影响存在差异。

热风干燥和真空干燥在保持多糖和甘露糖含量方面表现较优，微波干燥和冷冻干燥相对较差。

晒干方法在实际应用中存在一定局限性。

结论部分总结了各干燥方法的优缺点，并提出进一步研究的展望，为铁皮石斛的干燥加工提供了参考。

该研究对于提高铁皮石斛产品的品质和开发相关产品具有一定的指导意义。

【关键词】铁皮石斛、多糖、甘露糖、干燥方法、热风干燥、真空干燥、微波干燥、冷冻干燥、晒干、含量、影响、总结、研究、展望。

1. 引言1.1 研究背景铁皮石斛是一种常见的中草药材，含有丰富的多糖和甘露糖成分，具有多种药用价值和保健功效。

在传统的药用加工过程中，干燥是不可或缺的环节，不同的干燥方法可能会对铁皮石斛中多糖和甘露糖的含量产生影响。

研究显示，不同的干燥方法会导致铁皮石斛中多糖和甘露糖的含量有所变化。

热风干燥、真空干燥、微波干燥、冷冻干燥和晒干等干燥方法都对铁皮石斛中的有效成分产生不同程度的影响。

深入研究不同干燥方法对铁皮石斛中多糖和甘露糖含量的影响，可以为其药用价值和保健功效的充分发挥提供科学依据。

1.2 研究目的本研究旨在探究不同干燥方法对铁皮石斛中多糖和甘露糖含量的影响。

铁皮石斛是一种重要的药用植物，在中医药领域有着悠久的历史。

其中的多糖和甘露糖是其主要活性成分，具有多种药理作用，如提高免疫力、抗肿瘤、抗氧化等。

在实际应用中，铁皮石斛需要进行干燥处理以便保存和加工。

不同的干燥方法可能会对多糖和甘露糖的含量产生影响，进而影响其药效。

2. 正文2.1 热风干燥对铁皮石斛多糖和甘露糖含量的影响热风干燥是一种常见的干燥方法，对于铁皮石斛中多糖和甘露糖含量的影响也备受关注。

研究表明，热风干燥过程中，温度和风速是两个重要的影响因素。

铁皮石斛春季养殖方法

铁皮石斛春季养殖方法引言铁皮石斛是一种珍贵的中药材，被广泛用于中医药领域。

在春季，石斛的生长速度会加快，这是一个适宜的季节来进行养殖工作。

本文将介绍一些铁皮石斛春季养殖的方法，以帮助种植者更好地进行石斛的种植和管理。

环境准备1. 土壤准备：铁皮石斛适宜于生长在疏松、湿润、排水良好的土壤中，土质以砂质壤土为宜。

在春季养殖前，需要对土壤进行腐熟处理，并进行必要的消毒工作。

2. 光照要求：石斛对光照的需求较高，一般要求每天光照时间在8-10小时以上。

在春季，需确保石斛能够充分接受阳光的照射，可以选择合适的位置或进行人工补光。

种植方法1. 基质选择：选用疏松、透气性好的培养基作为种植基质。

可选用腐叶土和高山土进行混合，确保水分容易渗透，根部能够得到充分的供氧。

2. 种子处理：将石斛种子浸泡在温水中，浸泡时间一般为24小时左右。

浸泡后的种子取出，进行表面消毒处理，用0.1%过氧化氢液或5%的次氯酸钠溶液进行浸泡约10分钟，然后用清水漂洗干净备用。

3. 播种：将处理好的种子均匀撒播在基质表面，覆盖0.5-1厘米的薄层覆土，轻轻拍实。

保持基质湿润，避免水分过多。

4. 温度控制：铁皮石斛适宜生长的温度为15-25C，保持适宜的温度有利于幼苗生长。

可以选择覆盖保鲜膜或使用温室进行控温，以提供稳定的温度环境。

5. 幼苗管理：在幼苗出土后，保持适宜的湿度，避免水分过多或干燥。

同时注意通风，避免热气积聚，导致植株生长不良。

每隔一段时间对幼苗进行适当的追肥，可使用稀释的有机肥料。

养护管理1. 浇水：春季为植株生长旺盛的季节，铁皮石斛对水分的需求较大，保持土壤湿润是关键。

但浇水要适量，避免水logging，否则容易导致根部腐烂。

2. 施肥：适量施用有机肥或复合肥，供给植株所需的养分。

每隔1-2个月进行一次施肥，选择在早晨或傍晚施肥效果较好。

3. 病虫害防治：注意对石斛植株进行定期巡查，发现病虫害及时采取措施进行防治，以避免病害的扩散和产量的降低。

铁皮石斛种植方法

铁皮石斛种植方法铁皮石斛是一种珍贵的药用植物，需要有效的种植管理方法：一、种植环境准备温度和光照铁皮石斛适宜生长温度为15 - 28℃。

在夏季，当温度超过30℃时，需要进行遮荫降温处理，避免阳光直射导致温度过高对植株造成伤害。

可以使用遮阳网，遮光率在50% - 70% 左右较为合适。

在冬季，温度不能低于0℃，否则可能会冻伤植株。

它对光照要求为半阴环境，早晚可适当接受柔和的阳光照射，中午强光时需遮荫。

湿度和通风铁皮石斛喜欢湿润的环境，空气湿度应保持在60% - 80% 之间。

可以通过喷雾装置或者加湿器来增加空气湿度。

同时，良好的通风条件也很重要，以防止病虫害的滋生。

在室内种植时，要定期开窗通风；在温室种植时，可安装通风设备，如排风扇等。

基质选择铁皮石斛是附生植物，基质要求疏松、透气、排水良好且有一定的保水性。

常用的基质有树皮（如松树皮、栎树皮等）、木屑、水苔、碎石等。

一般可以将树皮和木屑按照3:1 的比例混合，再加入少量的水苔，以增加基质的保水性。

基质在使用前要进行消毒处理，可采用高温蒸汽消毒或者化学药剂消毒。

例如，用0.1% - 0.2% 的高锰酸钾溶液浸泡基质30 分钟左右，然后用清水冲洗干净，晾干后即可使用。

二、繁殖方法种子繁殖铁皮石斛种子极小，没有胚乳，在自然条件下萌发率很低。

在人工种植时，需要在无菌条件下进行播种。

首先，将种子接种在适宜的培养基上，培养基一般含有大量元素（如氮、磷、钾等）、微量元素（如铁、锌、锰等）、维生素、植物激素（如生长素、细胞分裂素等）等营养成分。

经过一段时间的培养，种子会逐渐萌发形成原球茎，再将原球茎转移到分化培养基上，诱导其分化出芽和根，形成幼苗。

不过，种子繁殖技术要求高，一般在科研机构或者专业的种苗繁育企业应用较多。

分株繁殖这是比较常用的繁殖方法。

一般在春季或秋季进行分株，选择生长健壮、根系发达、无病虫害的植株。

将植株从基质中取出，轻轻抖落根部的基质，然后用锋利的刀具将植株分成若干小丛，每丛至少要有 3 - 5 株种苗，并且带有一定的根系。

山茱萸腋芽诱导及增殖研究

山茱萸腋芽诱导及增殖研究作者：王会来源：《农村经济与科技》2017年第21期[摘要]研究了消毒时间、基本培养基、不同激素组合、光照长度对山茱萸腋芽诱导及增殖影响。

结果表明：用0.1%升汞溶液+吐温80消毒处理山茱萸嫩茎14～16min，外植体的污染和死亡得到较好控制，成活率高达85.5%。

在1/2MS基本培养基中，添加6-BA1.0mg·L-1+GA0.5 mg·L-1+IBA0.5mg·L-1腋芽诱导增殖系数达4.8；在山茱萸腋芽诱导增殖阶段，能获得较高的增殖系数而又能较好控制玻璃化苗率光照时数应14 h/d。

[关键词]]山茱萸；腋芽诱导；增殖[中图分类号]Q945.45 [文献标识码]A山茱萸（Macrocarpium officinalis）为山茱萸科、山茱萸属的落叶灌木、小乔木，是我国传统的珍贵中药材，也是一味集观赏、药用、食用和材用于一体的多用途植物。

湖北襄阳种植山茱萸历史悠久，但山茱萸的常规繁殖中种子繁殖速度慢且变异率大，扦插繁殖成活率、生根率低，嫁接繁殖则需要耗费大量的劳力和财力。

所以利用组织培养技术来获取山茱萸优良无性系后代，快速高效地获得大量无性系组培苗，是山茱萸规模化种植的必然趋势。

本试验通过基本培养基、不同激素组合、光照长度等对山茱萸腋芽诱导增殖影响的研究，筛选出有利于腋芽诱导增殖的基本培养基及激素的最佳组合等条件，为建立稳定的高频再生系统，实现山茱萸工厂化、规模化生产提供技术支持。

1 试验材料和方法1.1 试验材料采自湖北襄阳保康山茱萸盛果期当年生的嫩茎。

1.2 试验方法1.2.1 外植体的消毒灭菌。

将嫩茎用洗衣粉浸泡30分钟后流水冲洗，再放入75%酒精浸泡30s，然后在0.1%升汞溶液+吐温80中分别灭菌8～10min、11～13 min、14～16min、17～19 min，用无菌水冲洗4～5次，在超净台上将嫩茎切成1～1.5cm茎段，每段带1个腋芽，接种在1/2MS培养基上，每组50瓶。

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Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ；ｄｉｓｉｆｅｎｃｔｉｏｎｍｅｈｏｔｄｓ；ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎｒａｔｅａｎｄｅｍｅｒｇｅｎｃｅｒａｔｅｆｏｃａｌｌｕｓ
ＸＩＡＯＹｉｎｇ，ＳＵＮＷｅｉ，ＤＯＮＧＣｕｉ
（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＸｉｎｙａｎｇＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＦｏｒｅｓｔｒｙ，Ｘｉｎｙｎｇａ４６４０００，Ｃｈｉｎａ）
第２３信阳农业高等专科学校学报
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＸｉｎｙａｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＣｏｌｌｅｇｅ
Ｖ０１．２３Ｎｏ．３Ｓｅｐ．２０１３
铁皮石斛¨ （ＤｅｎｄｒｏｂｉｕｍｃａｎｄｉｄｉｕｍＷａｌ１．ｅｘＨｇＣ１、吐温２０，均为市面所售。
Ｌｉｎｄ１．）为兰科（Ｏｒｃｈｉｄａｃｅａｅ）石斛属（Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ）多１．２试验方法
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｅｔｅｓｔｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｄｉｆｅｒｅｎｔｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎｍｅｈｏｔｄｓａｎｄｔｉｍｅｏｎｈｅｔｓｔｅｍｓｏｆＤｅｎｄｒｏｂｉｕｍｅｏｎｔａｍｉ —
Ｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｍｒｅｎｔｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓａｎｄｔｉｍｅｏｎｔｈｅｓｔｅｍｓｏｆ
Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎｒａｔｅａｎｄｅｍｅｒｇｅｎｃｅｒａｔｅｏｆｃａｌｌｕｓ
９月
不同消毒方法及时间对铁皮石斛茎段污染率及出愈率的影响
肖颖，孙伟，董翠
（信阳农林学院生物技术系，河南信阳４６４０００）
摘要：研究了不同消毒方法及时间对铁皮石斛茎段污染率及出愈率的影响。结果表明：０．１％ＨｇＣ１：和吐温
加按比例１００００：１的混合溶液消毒７ａｉｒｎ，铁皮石斛茎段效果最佳。
关键词：铁皮石斛；消毒方法；污染率及出愈率中圈分类号：Ｒ２８２．２文献标识码：Ａ文章编号：１００８－４９１６（２０１３）０３－００９３－０３
．２．１不同消毒液处理将处理后的茎段在自来水年生草本植物，是一种生长缓慢、自身繁殖能力低下１的兰科附生植物，加之铁皮石斛独特的药用价值，因下冲洗外表泥土，然后用棉花蘸淡肥皂水轻轻擦洗，自来水冲洗０．５ｈ。在无菌超净工作台里用７５％酒精此组织培养便显得尤为重要。但是进行组织培养，首先碰到的就是污染的问题。本文以铁皮石斛为例，用浸泡１ｍｉｎ，用无菌水冲洗３次后，用３种不同的方法
ｎａｔｉｏｎｒａｔｅａｎｄｅｍｅｒｇｅｎｃｅｒａｔｅｏｆｃａｌｌｕｓ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄａｓ￣ｌｌｏｗｓ：Ｏ．１％ＨｇＣ１２ａｎｄＴｗｅｅｎ２０ｉｎｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｔｏｈｅｔｍｉｘｅｄｓｏｌｕｔｉｏｎｏｆ１０，０００：１ｄｉｓｉｆｅｎｃｔ７ａｉｒｎＤｅｎｄｒｏｂｉｕｍｓｔｅｍｉｓｈｅｔｂｅｓｔｒｅｓｕｌｔ．
Ａ）１０％次氯酸钠消毒１０ｍｉｎ；Ｂ）几种消毒方法对外植体进行处理，通过比较，筛选出处理铁皮石斛茎段：较佳的消毒灭菌途径。０．１％ＨｇＣ１２消毒７ｍｉｎ；Ｃ）Ｏ．１％ＨｇＣｌ２和Ｔｗｅｅｎ２０按比例１００００：１的混合溶液消毒７ｍｉｎ。之后再用无１材料与方法菌水冲洗４— ５次后接种在培养基中，每种方法处理１．１材料８Ｏ个茎段。该培养基以ＭＳ为基本培养基，在ＭＳ培以铁皮石斛当年新生茎段（由信阳师范学院生养基中附加ＮＡＡ０．０１ｍｇ／Ｌ＋蔗糖１０．０ｇ／Ｌ＋琼脂７．命科学学院植物研究所培育）为外植体材料，其内源０＃Ｌ，在１２１ｏＣ下灭菌２０ｍｉｎ。调节ＰＨ值到５．５。菌较多，难以消除。选取生长健壮无病虫害的植株，培养条件为温度２５ ± ２ｏＣ，暗培养５ｄ，白天４０Ｗ目光在超净工作台上剪取新萌发的嫩茎段３～４ｃｍ长，每灯辅助光照，光照时间８ｈ／ｄ，光照３０００—４０００ｋ，下