MS培养基

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ms培养基配方表

ms培养基配方表

ms培养基配方表ms培养基是一种常用的细胞培养基,用于无菌条件下培养哺乳动物细胞,特别是鼠胚胎成纤维细胞(Mouse Embryo Fibroblast,MEF)。

它是由多种有机和无机化合物组成的复杂混合物,可以提供细胞生长所需的必需氨基酸、糖类、维生素和微量元素等营养物质。

同时,它还包含有机缓冲剂和盐类,可以调节培养品的 pH 值和离子浓度,保持培养条件的稳定性。

下面介绍 ms培养基的配方表:MS培养基水相1. 将1L 去离子水(DI水)加入1mol/L NaCl 至5mL2. 加入HEPES缓冲液(1mol/L)27.7g,调节至pH7.2-7.43. 加入葡萄糖25.0g,混合直至葡萄糖完全溶解4. 加入 L-谷氨酸1.42g,细胞培养I 类和 II 类所需濃度5. 加入 L-苏氨酸0.07g,细胞培养所需濃度6. 加入 L-半胱氨酸0.16g7. 加入 L-赖氨酸0.07g8. 加入 L-缬氨酸0.07g9. 加入L-异亮氨酸0.07g10. 加入L-亮氨酸0.14g11. 加入L-丙氨酸0.14g12. 加入L-天冬氨酸0.15g13. 加入L-芸香氨基酸0.42g14. 加入 L-色氨酸0.03g15. 加入 L-酪氨酸0.03g16. 加入 L-精氨酸0.17g17. 加入 L-组氨酸0.03g18. 加入 L-甘氨酸0.10gMS培养基固相1. 加入 NaHCO3(7.5%)4mL,细胞培养所需濃度2. 加入 4-(2-羟乙基)吡啶盐酸盐(HEP)2g,细胞培养所需濃度;过度使用可导致凝块形成3. 加入 MgSO4(7H2O)0.94g,细胞培养所需濃度4. 加入 KH2PO4 0.17g,细胞培养所需濃度5. 加入 NaH2PO4(H2O,2. H2O)0.19g,细胞培养所需濃度6. 加入 Na2HPO4(7H2O)3.05g,细胞培养所需濃度7. 加入次黄嘌呤(NEAA)1mL,必需的非必需氨基酸,促进细胞生长8. 加入乳酸钠2.72g,利用减少氧淤积,促进细胞生长9.加入硫酸铜子(10-5M))1mL,为MEF的细胞类型提供最佳的增生所需注:以上配方根据MS原始文献略作调整,如果在实验中出现差异,请根据实际情况微调。

ms培养基的烟酸作用

ms培养基的烟酸作用

ms培养基的烟酸作用
烟酸在MS培养基中起着重要的作用。

MS培养基是一种常用的植物组织培养基,广泛用于植物离体培养和组织培养。

烟酸是维生素B3的一种形式,也称为烟酸酰胺或烟酸胺。

在MS培养基中,烟酸具有以下几个重要作用:
1. 生长促进作用,烟酸可以促进植物体外组织的生长。

它在细胞分裂和伸长过程中发挥重要作用,有助于培养基中植物组织的生长和增殖。

2. 代谢调节作用,烟酸参与植物体内的代谢过程,特别是在能量代谢和氧化还原反应中发挥作用。

它可以影响植物细胞的新陈代谢,有助于维持培养组织的正常代谢活动。

3. 抗氧化作用,烟酸具有一定的抗氧化作用,可以帮助减少培养组织中的氧化应激,保护细胞免受氧化损伤。

4. 激素合成前体,烟酸在植物体内还可以作为激素生物合成的前体物质,参与植物生长发育调控。

总的来说,烟酸在MS培养基中对植物组织的生长、代谢和抗逆性都起着重要作用。

因此,合适的烟酸浓度和添加量对于培养基的配制和植物离体培养具有重要意义。

希望这些信息能够对你有所帮助。

ms培养基倒板操作流程

ms培养基倒板操作流程

ms培养基倒板操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。

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ms培养基主要成分及作用

ms培养基主要成分及作用

ms培养基主要成分及作用
MS培养基是常用的植物组织培养基之一,其主要成分包括微量元素、无机盐和有机物等。

下面我们来具体介绍一下MS培养基的成分和
作用。

微量元素是MS培养基中的重要成分之一,微量元素指的是植物在
生长过程中只需以微量的形式摄取的元素,包括铁、锰、锌、铜、钼、氯等。

这些元素虽然只需要很少的量,但对植物生长和发育起到了至
关重要的作用。

无机盐是MS培养基中另一重要成分,无机盐的主要作用是提供植
物所需的重要离子,如钾离子、钠离子、钙离子等,同时也起到了调
节植物生理代谢的作用。

无机盐中的每一个元素都有其特定的作用,
合理配比能够提高植物的生长效果。

有机物是MS培养基中的第三个重要成分,有机物的主要作用是为
植物提供能量和营养,促进其正常生长和发育。

有机物中的糖类、蛋
白质和维生素等物质可被植物吸收并转化成能量。

有机物的含量对MS
培养基的品质和成果也有很大的影响。

除了以上三个主要成分外,MS培养基中还含有一些添加剂,如椰
子汁、植物生长素、生长素拮抗剂等。

这些添加剂能够增强植物的生
长性能、促进其分化和再生。

总之,MS培养基中的微量元素、无机盐和有机物等成分各具特定的作用,它们的合理配比能够提高植物的生长效果,促进组织培养工作的顺利进行。

因此,在进行植物组织培养和研究时,选择合适的培养基和合理的组分配比是非常关键的。

如何配制MS培养基

如何配制MS培养基
MS培养基是目前应用最多最普遍的培养基。无机盐的浓 度较高,能保证组织培生长所需的矿物质营养。并且因 为离子浓度高,在配制、贮存、消毒过程中,即使有些 成分略有出入,也不致影响培养基中的离子平衡


二 、
无机盐
培 养
有机物


植物激素

培养体支持材料
辅助性物质

一、无 机 盐

氮 枝叶生长需要氮素,缺氮老叶先发黄; 氮过量,枝叶过度茂盛 。 磷 缺磷,植株生长缓慢,老叶暗紫色。 钾 促进花卉生长健壮,增强抗性,茎秆
受高温影响小,可高温消毒
等 电 点 PH=6.0, 碱 性 溶 液 中 易变质,光能加速变质 对光、空气、热稳定是转氨酶 的辅酶 受高温影响小,可高温消毒, 参与丝氨酸转变为甘氨酸过程
123.11 极易溶于水、乙醇 对空气、光、热、PH值稳定
244.31 441.40 176.12 180.16
溶于水、乙醇 易溶于乙酸、 NaOH、微溶于水 极易溶于水
VB3
与植物代谢和胚的发育有关系

氨基酸:甘氨酸、精氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬 氨酸、 天冬酰胺、丙氨酸等等。因培养基的种类不同, 其种类和浓度不同。 肌醇:又称环己六醇,在糖类的转化中起作用
常见糖和维生素及其主要性质
名称 蔗糖 山梨糖 葡萄糖 果糖 盐酸硫胺素(VB1) 核黄素(VB2) 盐酸吡哆素(VB6) 钴胺素(VB12) 烟酸(VPP) 生物素(VH) 叶酸(VM) 抗坏血酸(VC) 肌醇
又称环己六醇在糖类的转化中起作用名称分子量溶解性质性质蔗糖34230溶于水乙醇无变旋现象山梨糖18016溶于水甜味与蔗糖相似葡萄糖18016溶于水有变旋现象以游离态或磷酯形式存在果糖18016溶于水乙醇有变旋现象甜度高于蔗糖盐酸硫胺素vb133728溶于水乙醇甘受高温影响小可高温消毒核黄素vb237637溶于无水乙醇微溶于水等电点ph60碱性溶液中易变质光能加速变质盐酸吡哆素vb620564溶于水乙醇对光空气热稳定是转氨酶的辅酶钴胺素vb12135542溶于水乙醇受高温影响小可高温消毒参与丝氨酸转变为甘氨酸过程烟酸vpp12311极易溶于水乙醇对空气光热ph值稳定生物素vh24431溶于水乙醇对空气温度稳定叶酸vm44140易溶于乙酸naoh微溶于水参与生物甲基化作用抗坏血酸vc17612极易溶于水有较强的还原能力可做抗氧化剂用参与酪氨酸代谢及色氨酸的羟基化作用18016易溶于水植物中广泛存在可能与iaa的代谢有关常见糖和维生素及其主要性质椰乳

MS培养基的配制

MS培养基的配制

MS 培养基的配制1、配制几种母液(1)配制MS 大量元素母液一般将大量元素分别配制成100倍的母液,使用时再分别稀释100倍。

倍。

分别称取分别称取名称名称 重量重量 名称名称 重量重量 NH 4NO 3 165g 82.5 KH 2PO4 17g 8.5 KNO 3 190g 95 CaCl 2·2H 2O 44g 22 MgSO 4·7H 2O37g18.5各自配成1L 1L((500ml 500ml)的母液。

各自倒入)的母液。

各自倒入1L 1L((500ml 500ml)试剂瓶中,存放于冰箱中。

)试剂瓶中,存放于冰箱中。

)试剂瓶中,存放于冰箱中。

(2)配制MS 微量元素母液一般将微量元素配制成100倍母液。

倍母液。

依次称取(注:溶好一个后,再加下一个)依次称取(注:溶好一个后,再加下一个)名称名称 重量重量 名称名称 重量重量 KI 0.083g Na 2MoO 4·2H 2O 0.025gH 3BO 3 0.62g CuSO 4·5H 2O 0.0025g MnSO 4·H 2O 1.69g CoCl 2·6H 2O 0.0025g ZnSO 4·7H 2O0.86g配成配成1L 母液,倒入1L 试剂瓶中,存放于冰箱中。

试剂瓶中,存放于冰箱中。

注:注:CuSO CuSO 4·5H 2O 和CoCl 2·6H 2O O 由于称取量很小,如果天平精确度没有达到万分之一,由于称取量很小,如果天平精确度没有达到万分之一,可先配成调整液。

可先配成调整液。

分别称取CuSO 4·5H 2O 0.05g O 0.05g,,CoCl 2·6H2O ·6H2O 0.05g 0.05g各自配成100ml 的调整液,然后取5ml 就还有0.0025g 的量。

的量。

(3)配制MS 有机母液一般配制成100倍MS 有机母液。

MS培养基的配制

MS培养基的配制

一、MS培养基的配制1. 培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的10倍或100倍分别称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液。

2. 按配方表配制MS培养基母液:大量元素50×,微量元素配100×,铁盐、有机成分配制成100×,母液贮存于4℃的冰箱中。

激素配成浓度为0.1mg/mL.3. 配制各种母液是,成分顺序加入,上一成分溶解后再加下一成分。

钙液和铁盐都单独配制。

生长素配制时,先用微量1MNaOH溶解,再以蒸馏水定容;细胞分裂素配制时,先用微量0.1MHCl溶解,再以蒸馏水定容。

二、MS母液配制取作表序号药品名称MS量(mg/L)扩大倍数母液量(g)定容取作量(mg/L)甲液NH4NO3KNO3MgSO4.7H20KH2PO41650190037017050×41.2547.59.254.25500ml 20钙液无水CaCl2440 100×11 500ml 20乙液MnSO4.4H2O或MnSO4. H2OZnSO4.7H2OH3BO3KI22.316.98.66.20.83100× 1.120.850.430.310.0415500ml 10铁盐Na2.EDTA.2H2OFeSO4.7H2037.227.8100× 1.861.39500ml 10有机成分盐酸吡哆醇(VB6)烟酸甘氨酸0.50.52100×0.0050.0050.02100ml 10丙液ⅠNa2MoO4.2H2O.2H2OCuSO4.5H2OCoCl2.6H2O0.250.0250.025100×0.01250.001250.00125500ml 10丙液Ⅱ肌醇100 100× 2 200ml 10丙液Ⅲ盐酸硫胺素(VB1) 0.4 50×0.02 100ml 2附注琼脂5.5-6.5g/L 蔗糖30g/LpH5.8-6.2备注:1钙液的母液量由于易沉淀所以取11g2丙液Ⅰ由于取的量太少所以先去12.5mg,溶于10mL水,再取1mL溶液稀释三、注意事项1、药品的质量问题:为了避免杂质及有害物质对组织培养的影响,必须注意药品质量,国内药品采用国际上通用标准,分为:一级,即保证试剂、优质纯试剂Guaranteed Reagent, GR级;二级,即分析纯试剂,Analytical Reagent, AR级;三级,即化学纯试剂,Chemical Pure, CP级;四级,即实验试剂,Laboratory Reagent, LR级。

组织培养实验MS培养基及配制注意事项

组织培养实验MS培养基及配制注意事项

一、MS培养基母液的配制注意:1.除CaCl2·2H2O单独配制外,大量元素按照使用时高10倍的数值称取,将各种化合物称量后,分别用少量水在不同的容器内充分溶解,然后在500ml烧杯中按顺序加入各溶液,加适量蒸馏水,用玻璃棒搅拌促溶,倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度,置小口瓶中保存,贴上标签注明化合物名称(或编号),浓缩倍数,配制日期和配制者姓名,CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。

2.微量元素母液的配制按要求浓缩100倍的数值称取,分别将各种化合物称量除铁盐(FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O)作为一组单独配制外,其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后,定容在1000ml容量瓶中,置小口瓶中保存,贴上标签。

3.铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中,加热,(很重要)不断搅拌,溶解后,两液混合,调PH至5.5加水定容至1000ml,置于小口瓶中,贴上标签。

4.有机物母液配制,按母液要求浓缩50倍,除蔗糖按3%单独临时称量外,其余分别称量后,溶解,定容在500ml容量瓶中,置于小口瓶中保存,贴上标签。

5.母液最好在2~4℃的冰箱中贮存,特别是有机类物质,贮存时间不宜过长,无机盐母液最好在一个月内用完,如发现有霉菌和沉淀产生,就不能再使用。

A.制备母液和营养培养基时,所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求,化学药品必须是高纯度的(分析纯)。

B.称量药物采用高灵敏度的天平,每种药品专用一药匙。

二、培养基配制和灭菌一.养培养基配制程序(一).母液吸取量的计算配制培养基的升数母液吸取量= 母液体积(CC)×——————————母液浓缩倍数(二)各种母液按顺序编号排列A.大量元素;B.CaCl2.2H2O;C.微量元素;D.铁盐;E.有机物;F.生长素萘乙酸(NAA):配制0.5mg/ml的NAA称取50mg , NAA用少量95% 酒精溶解后加蒸馏水定容至1000ml;G..细胞分裂素、激动素(KT)配制0.5mg/ml的KT 称50mgKT 用少量1N HCL溶解后,加蒸馏水定容至100ml。

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MS培养基
注意事项:
1.母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1 L.
2。

母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5。

5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。

3。

MS培养基中还需要加入2,4—二氯苯氧乙酸(2,4—D)、萘乙酸(NAA)、6 苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质,并且分别配成母液(0 1 mg/mL)。

其配制方法是:分别称取这3种物质各10 mg,将2,4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶,将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0。

1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解过程需要水浴加热,最后分别定容至100 mL,即得质量浓度为0 1 mg/mL的母液。

4。

组织培养是否能够获得成功,主要取决于对培养基的选择。

不同的培养基具有不同的特点,也就适合于不同的植物种类和接种材料。

在开展组织培养项目时,首先要对各种培养基进行了解和分析,以便能从中选择合适的使用。

组培用的培养基一般包括基础培养基和激素,但是植物激素的种类和数量,随着不同培养阶段和不同材料有变化,因此各培养基配方中均不列入植物激素。

常用的基础培养基除了有MS培养基,还有B5培养基,N6培养基.。

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