马铃薯病毒的常用检测方法
2025年高考生物复习新题速递之基因工程(2024年9月)
2025年高考生物复习新题速递之基因工程（2024年9月）一．选择题（共18小题）1．关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法错误的是（）A．过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解B．DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸馏水C．粗提取的DNA中含有核蛋白、多糖等杂质D．将粗提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂DNA被染成蓝色2．大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。
用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。
下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述不正确的是（）A．提取DNA时可加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解B．将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺试剂进行鉴定C．电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理D．根据电泳结果，质粒上一定没有限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位点，而有限制酶Ⅲ的切割位点3．某同学拟用限制酶（酶1、酶2、酶3和酶4）、DNA连接酶为工具，将目的基因（两端含相应限制酶的识别序列和切割位点）和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。
限制酶的切割位点如图所示，下列分析合理的是（）A．可选择酶3切割质粒和目的基因，再用E.coliDNA连接酶连接B．可选择酶2和酶4切割质粒和目的基因，再用E.coliDNA连接酶连接C．可选择酶2切割质粒、酶4切割目的基因，再用E.coliDNA连接酶连接，连接后的片段仍能被酶2和酶4切割D．为了让重组表达载体的构建合理且高效，可用酶1和酶2切割质粒和目的基因，再用T4DNA连接酶连接4．将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因PinⅡ导入杨树细胞，培育成了抗虫杨树。
如图表示含目的基因的DNA 分子和农杆菌质粒，图中Amp r表示氨苄青霉素抗性基因，Neo r表示新霉素抗性基因，箭头表示识别序列完全不同的几种限制酶的切割位点。
马铃薯Y病毒的株系种类、分子特征及鉴定方法研究进展
马铃薯Y病毒的株系种类、分子特征及鉴定方法研究进展吴兴泉;李月;孙强;李萌萌;王梦科【摘要】There are many strains of potato virus Y ( PVY ) identified in the last few decades. As molecular technology and immunity technology were applied in the identification of the PVY strains, a series of strain identification methods were developed. Here the types of the strains and substrains, molecular characters and the identification methods of PVY are reviewed.%马铃薯Y病毒( PVY)株系分化现象明显，具有多个株系类型。
随着分子生物学技术和免疫学技术逐渐被引入PVY的株系鉴定中，产生了一系列的株系鉴定方法。
为此，对PVY的主要株系、亚株系的种类及分类依据、分子特征以及近年来应用于PVY株系鉴定的传统生物学方法、分子生物学方法、免疫学方法等进行了综述。
【期刊名称】《河南农业科学》【年(卷),期】2015(000)003【总页数】4页(P5-8)【关键词】马铃薯Y病毒;株系;分子特征;鉴定【作者】吴兴泉;李月;孙强;李萌萌;王梦科【作者单位】河南工业大学生物工程学院，河南郑州450001;河南工业大学生物工程学院，河南郑州450001;黑龙江北大荒农业股份有限公司八五四分公司，黑龙江虎林158403;河南工业大学生物工程学院，河南郑州450001;河南工业大学生物工程学院，河南郑州450001【正文语种】中文【中图分类】S435.32马铃薯Y病毒(potato virus Y, PVY)是马铃薯上危害最严重的病毒之一，可造成马铃薯严重减产。
贵州黔南烟草马铃薯Y病毒(PVY)株系的血清学鉴定
贵州黔南烟草马铃薯Y病毒(PVY)株系的血清学鉴定罗红香;李余湘;刘会忠;徐明勇;王林玉;赵中汇;何玉安;李章海;江彤【摘要】2010年从贵州省黔南州烟草产区共采集201个表现明显马铃薯Y病毒病症状的烟草样本.采用Tas-ELISA检测PVY的3个株系PVYN、PVYO和PVYC.结果显示,201个样本中共检测出171个样本受到PVY侵染,其中PVYN 37个,占21.6%；PVYO 133个,占77.8%；PVYC 0个,PVYN和PVYO复合侵染1个,占0.6%.PVY株系分布具有一定规律,侵染黔南州烟草的PVY以PVYO为主要株系,PVYN侵染相对较少,为次要株系,所有样本均没有检测到PVYC侵染,复合侵染零星发生.%10.3969/j.issn.1007-5119.2012.05.011【期刊名称】《中国烟草科学》【年(卷),期】2012(000)005【总页数】3页(P60-62)【关键词】贵州;烟草;马铃薯Y病毒;ELISA;株系鉴定【作者】罗红香;李余湘;刘会忠;徐明勇;王林玉;赵中汇;何玉安;李章海;江彤【作者单位】贵州省黔南州烟草公司,贵州都匀 558000;贵州省黔南州烟草公司,贵州都匀 558000;贵州省黔南州烟草公司,贵州都匀 558000;贵州省黔南州烟草公司,贵州都匀 558000;贵州省黔南州烟草公司,贵州都匀 558000;贵州省黔南州烟草公司,贵州都匀 558000;贵州省黔南州烟草公司,贵州都匀 558000;中国科学技术大学烟草研究中心,合肥 230051;安徽农业大学植保学院,合肥 230036【正文语种】中文【中图分类】S572.08马铃薯Y病毒（Potato virus Y，PVY）是马铃薯Y病毒属（Potyvirus）的典型成员，能侵染烟草、马铃薯、番茄和辣椒等多种茄科作物[1]。
根据PVY的鉴别寄主症状反应和血清学反应类型，进一步将其划分为多个株系，常见的有PVYO、PVYN和PVYC等株系。
中国部分马铃薯产区马铃薯Y病毒(PVY)的株系分化与鉴定
株 系分 布 普 遍 ， 能 已经 成 为 中 国部 分 马 铃 薯 产 区 Ｐ Ｙ 的主 要 流 行 株 系． 可 Ｖ
关键词 ： 马铃 薯 Ｙ病 毒 ； 系； 子 鉴 定 株 分
中 图 分 类 号 ：４ ２ １ Ｓ ３ ． 文献标志码 ： Ａ
Ｓ ｕ ｙ ｏ ｈ ｔ ｄ ｎ ｔ ｅ ＰＶＹ ｔ ａ ｎ ｄ ｆｅ ｅ ｔａ ｉ ｎ ａ ｄ ｉ ｅ ｔｆｃ ｔｏ ｆ ｓ ｍ ｅ ｓｒ ｉ ｉ ｒ ｎ ｉ ｔｏ ｎ ｄ ｎ ｉ ａ ｉ ｎ ｏ ｏ ｉ ｐ ｔ ｔ ｒ ｄ ｃ ｎ ｒ ａ ｎ Ｃｈｉ ａ ｏ ａ ｏ ｐ ｏ ｕ ｉ ｇ ａ ｅ ｓｉ ｎ
第４ ５卷 第 ５期
２ ０１１矩
河 南 农 业 大 学 学 报
Ｊ ｕ ｎ ｌｏ ｎ ｎ Ａｇ ｉｕ ｔ ｒ ｌＵｎ ｖ ｒｉｙ ｏ ｒ ａ ｆＨｅ ａ ｒｃ ｌｕ ａ ｉ ｅ ｓｔ
Ｖｏ ． ５ Ｎｏ ５ １４ ． ０ｃ ． ｔ ２ Ｏ１１
１ ０月
文章 编 号 ：０ ０— ３０ ２ １ ）５— ５ ８— ４ １０ ２ ４ （０ １ ０ ０ ４ ０
马铃薯 Ｙ病 毒 （ ｏａ ｉ ｓＹ，Ｖ 是 马铃 薯 ｐ ｔ ｏｖ ｕ Ｐ Ｙ） ｔ ｒ 上 最常见 、 危害最 重 的马铃薯 病毒 之一 ， 病严重 时 发 减 产 可 达 ８ ％ 以 上． 铃 薯 Ｙ 病 毒 为 正 义 单 链 ０ 马
Ｒ Ａ病 毒 ， Ｎ 线状 ， 全基 因组长度在 ９７０ｎ 左右 ， １ ０ ｔ 由
２ ．Ｈｅａ ｇｉ ｌ ｒｌ ｎｖｒｉ ， ｈ ｎ ｚｏ ５ ０ ２， ｈｎ ） ｎ ｎＡ ｒ ｕｔ ａ Ｕ ｉｅｓｙ Ｚ ｅｇｈｕ４ ０ ０ Ｃ ｉａ ｃ ｕ ｔ
Ａ ｓ ａ ｔ Ｔ ｅｐ ｅｅ ａｄ ｃ ｅ ｅｏ Ｖ ｓｌｔ ｒｍ ｔｅ Ｈ ｉ ｎｊ ｎ ，Ｓ ａｘ ａｄ Ｇ ｉ ｏ ｂ ｔ ｃ ： ｈ ｌｇｎ ｎ ｐ ｇｎ ｆ Ｐ Ｙ ｉ ａｅ ｆ ｈ ｅ ｏ ｇ ａ ｇ ｈｎ ｉ ｎ ｕｚ ｕ ｒ ４ ｏ ｓ ｏ ｌ ｉ ｈ
马铃薯病毒病
马铃薯病毒病(一)病原及侵染对马铃薯能够侵染并且造成损失的病原病毒有马铃薯X 病毒、Y病毒等多种。
马铃薯花叶病毒(PVX)，是一种长520-550nm的线状病毒，有时在电镜下能看到病毒颗粒的中心孔。
在病毒外壳由亚基形成时，可看到它的横纹，这一点是与马铃薯重花叶病毒在形态结构上的主要区别。
马铃薯重花叶病毒(PVY)，是一种长680-900nm的线状病毒，在电镜下找不到它的中心孔和外壳蛋白亚基的横纹。
它比PVX更细一些、更长一些。
此外，还发现了马铃薯S病毒、M病毒、黄矮病毒和类病毒中的马铃薯纤块茎病毒。
对于马铃薯病毒侵染造成马铃薯病毒病的途径，主要是汁液传播。
汁液传播的主要媒介是蚜虫。
蚜虫有探食性特性，就是说，蚜虫在接触植物(主要是幼嫩叶片)时，首先在着落点吐出唾液，停一会再在有唾液部位，连同刺吸的汁液和唾液一同吸回，最后才确定是否继续吸食下去，正是由于这个特性，病毒在汁液悬浮中就依靠蚜虫这个主要媒介而传播。
所以，一般的农药杀蚜，并不能解决蚜传病毒问题。
蚜虫被杀死了，病毒也早已传播了。
PVX通过汁传后，在马铃薯植株上造成的症状是轻花叶，PVY通过汁液传播后，在马铃薯植株上造成的症状是重花叶，PVX与PVY的重复感染在马铃薯上产生明显的重花叶和斑枯，对产量和品质的影响就严重了。
在生产实际中，往往是复合感染，因此，后果严重。
成片的马铃薯枯斑坏死是屡见不鲜的。
直至收获的块茎都出现肉质褐变。
(二)微公害、无公害防治技术1.选留和选用无病种薯种用马铃薯，一般以秋薯为佳，一来腐烂率小，二来薯块较小而匀称，经济实用。
作为选留无病种薯，一般用目测法，植株生长健壮，芽眼鲜嫩无病，薯块韧实而鲜壮，同时注意尽量用新窖或未贮存过病株的场所，历经一段时间后，播前对选留的种薯再作一次逐块检查。
2.茎尖脱毒培养马铃薯病毒有一个很重要的特点，实践证明，在植株的生长点部位是不带毒的。
也就是说，病毒在寄主体内传递的速度不如植株生长的速度快，利用这一特性，在无毒条件下切取茎尖0.3-0.5毫米，”栽种”在烧瓶培养基上，培育无毒小苗和无毒小种薯，用这种无毒小种薯作一级种薯，再在无病地块中进行二级种薯扩大繁殖，用于大田生产。
免疫试纸条结合RT-PCR法快速检测马铃薯Y病毒
免疫试纸条结合RT-PCR法快速检测马铃薯Y病毒朱云芬;程群;沈艳芬;马作江;王尔惠;魏凯【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2011(50)5【摘要】Potato vires Y was rapidly detected by immunostrip assay, the results indicated that the PVY could be tested by immunostrip within 2 minutes and no-specific reaction was observerd for healthy leaves. RT-PCR amplification could produce a specific DNA band with an expected size, which was a validation of the results of immunostrip.%利用马铃薯Y病毒(PVY)免疫试纸条,对PVY进行了快速检测,结果表明,试纸在2 min内,可特异性检出PVY,而健康的叶片无反应.刮下试纸条上显示的检测带,进行RT-PCR,能扩增到与预期大小相同的DNA条带,是对快速检测试纸条检测结果的验证.【总页数】3页(P1056-1057,1062)【作者】朱云芬;程群;沈艳芬;马作江;王尔惠;魏凯【作者单位】中国南方马铃薯研究中心,湖北,恩施,445002;中国南方马铃薯研究中心,湖北,恩施,445002;中国南方马铃薯研究中心,湖北,恩施,445002;中国南方马铃薯研究中心,湖北,恩施,445002;中国南方马铃薯研究中心,湖北,恩施,445002;湖北省恩施州农业局,湖北,恩施,445000【正文语种】中文【中图分类】S432.4+1;Q503【相关文献】1.胶体金免疫层析试纸结合RT-PCR法快速检测烟草环斑病毒 [J], 杨翠云;魏梅生;于翠;乔艳艳2.胶体金免疫层析试纸条法快速检测动物性食品中的氨苯砜 [J], 赵兴然;郑小娇;沙芳芳;王敬;蔡亚鹏;王向红3.马铃薯X病毒和马铃薯Y病毒胶体金免疫层析试纸条的研制 [J], 魏梅生;刘洪义;李桂芬;陈燕芳4.莱克多巴胺胶体金免疫层析法快速检测试纸条的研制 [J], 蒋蔚;刘迎春;陈永军;王权5.环介导等温扩增结合免疫层析试纸条快速检测羊肉及其制品中的鸭源成分 [J], 柳海宾;张海鑫;宋腾飞;刘聪;聂付磊因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
中国马铃薯病虫害检测技术标准解析
中国马铃薯病虫害检测技术标准解析范国权; 喻江; 白艳菊; 高艳玲; 张威; 张抒; 申宇; 邱彩玲; 胡林双; 孙妍【期刊名称】《《中国马铃薯》》【年(卷),期】2019(033)004【总页数】10页(P227-236)【关键词】马铃薯; 病虫害; 标准; 检测技术【作者】范国权; 喻江; 白艳菊; 高艳玲; 张威; 张抒; 申宇; 邱彩玲; 胡林双; 孙妍【作者单位】黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所黑龙江哈尔滨 150086; 哈尔滨商业大学黑龙江哈尔滨 150028; 农业农村部工程建设服务中心北京100000【正文语种】中文【中图分类】S532马铃薯是一种营养体无性繁殖植物，植株和块茎都易感病，侵染马铃薯的病虫害有几十种，主要包括真菌、细菌、病毒、类病毒、甲虫、线虫等。
这些病虫害可以随种薯传播，其中，细菌、病毒和类病毒病害还可以通过种苗传播，造成病害大面积扩散，严重影响马铃薯的产量和质量。
病虫害一般可造成马铃薯减产10%～30%，严重情况下减产可达70%以上，是影响马铃薯产业发展的瓶颈之一。
因此，在马铃薯生产中病虫害检测工作极为重要，及时发现并确认病虫害，有利于其有效防控，可以防止大面积扩散，降低产量和质量损失。
现有28个病虫害检测标准，其中涉及马铃薯细菌检测标准4个，病毒检测标准10个，类病毒检测标准4个，真菌检测标准7个，甲虫检测标准1个和线虫检测标准2个。
从检测病虫害种类看，可检测病虫害包括细菌性病害青枯病[Ralstonia solanacearum（Smith）] 和环腐病（Clavibacter michiganensissubsp.sepedonicus）；病毒病有马铃薯卷叶病毒（Potato leaf roll virus，PLRV）、马铃薯Y 病毒（Potato virus Y，PVY）、马铃薯X 病毒（Potatovirus X，PVX）、马铃薯A 病毒（Potato virus A，PVA）、马铃薯M 病毒（Potato virus M，PVM）、马铃薯S 病毒（Potato virus S，PVS）、马铃薯V 病毒（Potato virus V，PVV）、马铃薯帚顶病毒（Potato mop-top virus，PMTV）和马铃薯黄化矮缩病毒（Potato yellow dwarf virus，PYDV）；类病毒有马铃薯纺锤块茎类病毒（Potato spindle tuber viroid，PSTVd）；真菌病害包括马铃薯银屑病（Helminthosporium solani Durieu et Mont.）、马铃薯黑粉病[Thecaphora solani（Thirumalachar & O.Brien）Mordue]、马铃薯坏疽病（Phoma exigua var.foveata）、马铃薯绯腐病（Phytophthora erythroseptica Pethybridge）、马铃薯炭疽病[Colletotrichum coccodes （Wallr.）Hughes]、马铃薯皮斑病[Polyscytalum pustulans（M. N. Owen et Wakef.）M. B. Ellis]和马铃薯癌肿病[Synchytrium endobiticum （Schilberszky）Percival]；马铃薯甲虫（Colorado potato beetle）[Leptinotarsa decemlineata（Say）]；线虫包括马铃薯白线虫（White potato cyst nematode）[Globodera pallida（Stone）Behrens]和马铃薯金线虫（Golden potato cyst nematode）[Globodera rostochiensis（Wollenweber）Behrens]，总计22种病虫害。
马铃薯花叶病防治和治疗办法
传播途径与发病条件
传播途径
主要通过蚜虫和汁液摩擦传播。
发病条件
适宜的温度和湿度条件有利于病毒繁殖和传播，高温干旱或阴雨多湿的季节容 易发病。
对马铃薯生产的影响
01
02
03
产量降低
病毒侵染导致植株生长受 阻，结实减少，最终导致 产量降低。
品质下降
病毒影响马铃薯块茎的正 常发育，导致薯块变小、 畸形，品质下降。
防治技术瓶颈
目前防治马铃薯花叶病的技术手段有限，且防治效果不稳 定，需要加大科研投入，突破技术瓶颈，提高防治效果。
环保要求
随着人们对环境保护意识的提高，对化学药剂的使用限制 越来越严格，需要研发环保、安全的防治技术，减少对环 境的负面影响。
பைடு நூலகம்
THANKS
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通过基因工程技术可以将抗病毒基因导入马铃薯植株中，提高其抗病毒 能力；通过细胞工程技术可以培养出具有抗病性的马铃薯新品种，降低
花叶病的发生和扩散。
以上三种治疗方式各有优缺点，需要根据实际情况选择合适的治疗方式 。同时，防治和治疗马铃薯花叶病还需要加强植物检疫、推广抗病品种 等综合措施，以提高防治效果。
力。
监控方法
定期调查
在马铃薯生长季节定期进行病情 调查，观察植株生长状况和叶片
症状。
样本采集与检测
采集疑似感染的马铃薯叶片样本， 进行病毒检测和鉴定，以确定病情 。
数据记录与分析
记录调查和检测数据，分析病情分 布和变化趋势，为防治提供依据。
预警系统建立
监测点设置
01
在马铃薯主产区设置病情监测点，实时监测病情变化和病毒传
农业技术治疗
农业技术治疗是通过调整马铃薯的种 植和管理方式来防治花叶病的发生和 扩散，例如选择健康的种薯、加强田 间管理等措施。
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马铃薯病毒的常用检测方法
刘玲玲;韩黎明;张尚智;禹娟红
【期刊名称】《中国马铃薯》
【年(卷),期】2013(27)4
【摘要】目前常用马铃薯病毒检测的方法，主要包括寄主生物学检测法、抗血清检测法、电子显微镜检测法、酶联免疫检测法和分子生物学检测法。
重点讨论了分子生物学方法中的各种RT-PCR方法。
同时对各种方法的优缺点进行了比较，并总结出将传统生物学检测技术、免疫学检测技术和分子生物学检测技术相结合必将成为检测植物病毒最经济有效的手段。
%The common test methods for potato virus detection were reviewed, including host biology detection, antiserological detection assay, electron microscopy, enzyme-linked immunosorbent assay and molecular biological detection assay, with emphasis on the various RT-PCR methods of molecular biology methods. At the same time, the merit and demerit were compared with different methods, concluding that the combination of traditional biological detection, immunological detection and molecular biology detection technology would be the most cost-effective means for detection of plant viruses.
【总页数】4页(P239-242)
【作者】刘玲玲;韩黎明;张尚智;禹娟红
【作者单位】定西师范高等专科学校生化系,甘肃定西,743000;定西师范高等专科学校生化系,甘肃定西,743000;定西师范高等专科学校生化系,甘肃定西,743000;定西师范高等专科学校生化系,甘肃定西,743000
【正文语种】中文
【中图分类】S532
【相关文献】
1.马铃薯病毒种类及主要病毒检测方法 [J], 罗燕娜;刘江娜;王航
2.烟草马铃薯X病毒(Potatoes Virus X, PVX)快速检测方法及抗性诱导物质抑制效果研究 [J], 匡传富;孙现超;陈德鑫
3.马铃薯Y病毒衣壳蛋白抗原表位分析及其快速ELISA检测方法的建立 [J], 梁雨欣;吴建祥;李小宇;张春雨;侯吉超;周雪平;王永志
4.马铃薯卷叶病毒RT-LAMP检测方法的建立研究 [J], 康明蛟
5.马铃薯卷叶病毒RT-LAMP检测方法的建立 [J], 高彦萍;吕和平;张武;王国祥;吴雁斌;梁宏杰
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