糖尿病大鼠骨髓基质细胞的体外生长特性研究

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EPO促进大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖的实验研究的开题报告

EPO促进大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖的实验研究的开题报告一、研究背景与意义：脊髓损伤是一种严重的神经系统损伤，目前仍没有有效的治疗方法。

内源性神经干细胞（NSCs）在成年动物脊髓中存在，能够分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞等成分，具有重要的再生潜能。

因此，寻找能够促进NSCs增殖与分化的治疗方法，对于脊髓损伤的治疗尤为重要。

EPO（人类促红细胞生成素）是一种内源性角蛋白质，已被证明能促进神经细胞的增殖和分化，减轻脊髓损伤的后果。

然而，EPO是否可以促进大鼠脊髓损伤后NSCs的增殖，尚未得到完全证实。

因此，本研究旨在探究EPO是否能够促进大鼠脊髓损伤后NSCs的增殖与分化。

二、研究方法：1.建立脊髓损伤的大鼠模型选取SD大鼠，采用影响法建立脊髓损伤模型。

2.NSCs的分离和培养通过玻璃棒摇匀轻抚方法，从大鼠脊髓中分离出NSCs，并进行原代培养。

采用胶质细胞培养基添加EGF和FGF2等方法，进行NSCs的进一步培养。

3.实验分组将实验大鼠随机分为对照组和EPO处理组，每组n=8。

4.给药方法对照组注射生理盐水，EPO处理组注射EPO，剂量为1000U/kg一日，连续注射7天。

5.检测指标采用光镜和电镜分别观察大鼠脊髓和NSCs的形态结构。

同时，采用免疫荧光方法检测Nestin蛋白、β-tubulin-III和GFAP的表达水平。

使用Western blot方法检测PCNA和Ki-67的表达水平。

三、研究意义通过本研究，可以探究EPO在大鼠脊髓损伤后人NSCs的增殖与分化方面的潜在作用。

该研究结果有望为脊髓损伤的治疗方法提供新的思路和策略。

间充质干细胞治疗1型糖尿病及其并发症的研究进展

间充质干细胞治疗1型糖尿病及其并发症的研究进展许跃;顾志峰【摘要】1型糖尿病是一种T细胞介导的组织特异性自身免疫性疾病,以抗胰岛细胞抗体出现、严重的胰岛炎症和自身免疫性胰岛β细胞破坏为特征.间充质干细胞(mesenchylnal stem cells,MSCs)是一类具有自我更新,多向分化潜能,免疫调节和低免疫原性的细胞.近年来越来越多的研究表明,间充质干细胞移植对1型糖尿病及其慢性并发症治疗有效.本文就间充质干细胞治疗1型糖尿病及其慢性并发症研究进展做一综述.【期刊名称】《交通医学》【年(卷),期】2011(025)003【总页数】4页(P220-223)【关键词】间充质干细胞;1型糖尿病;糖尿病性心脏病;糖尿病肾病;糖尿病性多神经病变;糖尿病性视网膜病变【作者】许跃;顾志峰【作者单位】南通大学附属医院,江苏,226001;南通大学附属医院,江苏,226001【正文语种】中文【中图分类】R587.11型糖尿病是一种T细胞介导的器官特异性自身免疫性疾病[1-2]。

在遗传、环境等诸多种因素作用下机体产生胰岛自身抗体，T淋巴细胞浸润，使胰岛β细胞破坏，最终引起胰岛素分泌绝对缺乏。

近年来1型糖尿病的发病率不断增加，由于其并发糖尿病性心脏病、肾病、多神经病变和视网膜病变等严重并发症，目前已成为危及人类健康的重要问题[1]。

1型糖尿病一旦发病需要终身依赖胰岛素，胰岛移植虽能达到不依赖胰岛素效果，但因排斥反应和供体来源不足限制其临床应用。

近年来干细胞理论和技术快速发展，给糖尿病患者治疗带来新的希望，干细胞移植有望替代胰岛移植治疗糖尿病。

间充质干细胞（MSCs）由于其多向分化潜能及免疫调节功能，提示其具有治疗1型糖尿病及其慢性并发症的能力。

本文就MSCs治疗1型糖尿病及慢性并发症做一综述。

1 间充质干细胞生物学特性及免疫特性MSCs是一种来源广泛的多能祖细胞，骨髓、脐带、脐带血等各种组织中均可获得，其形态与成纤维细胞相似，不表达造血细胞标志CD14，CD31、CD34和CD45，表达基质细胞特有标志CD73和CD105及Stro-1，CD71，CD106，CD120，CD124 等表面抗原，表达极低水平MHC-I类抗原，不表达MHC-Ⅱ类抗原及FasL。

胰岛素样生长因子-1的研究现状与进展

Advances in Clinical Medicine 临床医学进展, 2019, 9(7), 827-830Published Online July 2019 in Hans. /journal/acmhttps:///10.12677/acm.2019.97127Research Status and Progress of Insulin-Like Growth Factor-1Bo Yang, Hongbin Xue, Fang WangDepartment of Plastic Surgery, Yan’an University Hospital, Yan’an University, Yan’an ShaanxiReceived: Jun. 15th, 2019; accepted: Jul. 4th, 2019; published: Jul. 11th, 2019AbstractInsulin-like growth factor-1 (IGF-1) is a multifunctional cell proliferation regulator that is widely distributed in various tissues and plays an important role in the growth and development of indi-vidual cells. Studies have shown that IGF-1 plays an important role in related fields such as cardi-ovascular disease, diabetes and wound repair. The current research status and progress are re-viewed, aiming to provide ideas and directions for further research of IGF-1.KeywordsInsulin-Like Growth Factor, Myocardial Infraction, Wound Repair, Progress, Review胰岛素样生长因子-1的研究现状与进展杨波，薛宏斌，王芳延安大学，延安大学附属医院烧伤整形外科，陕西延安收稿日期：2019年6月15日；录用日期：2019年7月4日；发布日期：2019年7月11日摘要胰岛素样生长因子-1 (insulin-like growth factor 1, IGF-1)是一种多功能细胞增殖调控因子，广泛分布于各个组织当中，在细胞的分化增殖个体的生长发育中具有重要的作用。

二甲双胍抑制高糖状态下大鼠肾小球系膜细胞增殖作用机制的进一步研究

ＡＩＣＡＲ组相比，加二甲双胍干预后ＨＢＺＹ一１增殖进一步抑制，有显著性差异（Ｐ＜０．０１）；与ＨＧ＋ＣｏｍｐｏｕｎｄＣ组相比，加二甲双胍干预后ＨＢＺＹ一１增殖明显抑制，有显著性差异（Ｐ＜０．叭）； ②与ＮＣ组相比，高糖刺激２４ｈ后ＨＢＺＹ一１细胞内Ｐ—ＡＭＰＫ表达水平明显下降（Ｐ均＜０．０１）；与ＨＧ组相比，加ＡＩＣＡＲ干预后Ｐ—ＡＭＰＫ表达水平明显升高，加ＣｏｍｐｏｕｎｄＣ干预后Ｐ—ＡＭＰＫ表达水平进一步下降，均有显著性差异（Ｐ均＜０．０１）；与ＨＧ＋ＡＩＣＡＲ组相比。加二甲双胍干预后ＨＢＺＹ —ｌ细胞内Ｐ— ＡＭＰＫ表达水平进一步升高，有显著性差异（Ｐ＜０．０１）；与ＨＧ＋ＣｏｍｐｏｕｎｄＣ组相
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００８—８８４９．２０１４．１１．００３
［中图分类号］Ｒ一３３２
［文献标识码］Ａ
［文章编号］１００８—８８４９（２０１４）１ｌ一１１４７— ０４
表达的变化。蛄果 ① 与ＮＣ组相比，高糖刺激２４ｈ后ＨＢＺＹ一１增殖明显（Ｐ均＜０．Ｏ１）；与ＨＧ组相比，加ＡＩＣＡＲ干预后ＨＢＺＹ一１增殖明显抑制，加ＣｏｍｐｏｕｎｄＣ干预后系膜细胞进一步增殖，均有显著性差异（Ｐ均＜０．０１）；与ＨＧ＋

地塞米松对骨髓细胞有什么诱导作用

地塞米松对骨髓细胞有什么诱导作用发表时间：2019-08-06T14:22:42.140Z 来源：《总装备部医学学报》2019年第05期作者：赵菊[导读] 所以对于地塞米松与骨髓细胞之间的关系，我们也进行了系列的监测试验和探索。

四川省凉山彝族自治州冕宁县中医医院 615600地塞米松（Dexamethasone）是治疗多发性骨髓疾病方案中的重要组成部分，疗效已经被认可，但是其引起不良的反应也较多。

随着对骨组织的进程研究和发展，骨髓细胞的成骨潜能受到了越来越多人的关注和重视。

正常的骨髓细胞成分是比较复杂的，包括造血和基质两个大系统，其中具有成骨潜能的细胞多数来自于基质干细胞。

所以对于地塞米松与骨髓细胞之间的关系，我们也进行了系列的监测试验和探索。

一、地塞米松的背景地塞米松又叫氟美松或德沙美松、是猪病防治中常用的一种人工合成的长效的糖皮质激素，是泼尼松龙的氟化衍生物。

在肝内可以转换成氢化考的松地塞米松，属于肾上腺皮质激素类的药物。

具有抗炎、抗过敏、抗休克和抗毒等作用，临床上一般用于严重的细菌感染性疾病、过敏性疾病、休克、局部炎症等综合治疗。

来那度胺联合地塞米松的治疗方案已经应用于初治并且不适合的移植和复发难治的骨髓疾病，第一代的蛋白酶体抑制剂硼也被批准治疗于初治并且适合移植的骨髓病了。

目前这两种药分别联合地塞米松用于治疗骨髓病的效果都得到了广泛的认可。

大剂量与小剂量的研究通常是解决骨髓病化疗方案中不可缺少的因素。

地塞米松的应用也会导致一些不良的反应，其中包括升高血糖导致继发的糖尿病和原发糖尿病并发症的进展、血压的升高、乙肝病毒再激活导致的爆发性肝炎、增加感染的几率、精神异常、骨质疏松、白内障等疾病。

在临床工作中，临床如需要应用地塞米松治疗，含地塞米松在内的治疗方案同时也会给患者带来一系列的不良反应。

因此在关注治疗药物疗效的同时，我们也应关注药物的不良反应。

二、骨髓基质细胞骨髓基质细胞是存在于成体骨髓组织中的一类细胞，具有多向分化潜能。

大鼠BMSCs的体外分离培养和鉴定

在使用的血清浓度问题上，国内外不同的实验室所用并
贴壁生长的特性，通过换液去除不贴壁的其它杂质细胞后，不一致，报道多在５％一２０％之间Ｌ一。虽然也有人对比过
获得呈梭形的贴壁干细胞。之后人们采用密度梯度离心法不同浓度血清对所培养ＢＭＳＣｓ的影响，但因实验条件和所使
ｍｉｌｌ。无菌条件下取出双侧股骨，去除附带组织，两端剪断暴露骨髓腔。以１ｍｌ注射器吸取低糖ＤＭＥＭ细胞培养液反复冲洗，至骨质发白为止，将所收集的细胞悬液用２０Ｏ目滤网过滤，制备成单细胞悬液。细胞计数后以１．０×ｌＯ６／ｎａ接种到含加％胎牛血清的低糖ＤＭＥＭ细胞培养液的培养瓶内。１．３骨髓问充质干细胞的传代培养和扩增
一
ｌ８４０一
［１］劳业兴，张冰若，苏薇薇．松针化学成分及药理学研究进展［Ｊ］．中药材，２０Ｏ３。２６（９）６８１．
［２】张霞，孙爱东．松针提取物的研究进展［Ｊ】．中国食物与营养，２００９，９（９）：２３．
［３］ＷａｎｇＣ，ＬｉＪ，ＣｈｅｒｔＬ．Ａｍｅｔｉｏｔ＇ａｔｉｖｅｅｆｅｃｔｂｅ由既ｉｎｅ∞ ｅｎｄｏｄｌｄｉａｌ由ｓ－ｆｌｌｎ￣ｏ［１ｉｎｄｉａｂｃｒａｔｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙｈｉｇｈｄｉｅｔａｎｄａｘｑ，ｔｏ￣ｔｏｄｎ［Ｊ］．ＥｕｒＪＰｈａｒｍａｃｏｌ，２０Ｏ９，６２０（１—３）：１３１．
即增殖期。
２．３向成骨细胞诱导结果
诱导培养后，细胞变为多角形、不规则形，胞浆中含有较
多颗粒，部分细胞聚集成集落，碱性磷酸酶染色呈阳性（图２）。

bFGF基因体外转染缺血性心肌病患者骨髓基质干细胞研究

医学信息
・
２７・３８
Ｎ．２１ｏ９００
ＭＤＣＬＩｏＭＴｏＥＩＡＦＲ＿ＩＮＮＡ
临床医学
工作，定期产前检查，早期发现可能导致难产的因素，及时纠正，产科医生要２（）２— ．５１：８严格掌握的剖官产手术指征，降低剖宫产率。［］李华，４李磐芝，张玉英，１９等．０９例剖官产指征的探讨．实用妇产科杂
刘效波张海宁赵晓华
１潍坊医学院附属医院胸心外科，．山东潍坊２１３；．６０１２青岛大学医学院附属医院，山东青岛２６０６０３
【摘要】目的： “ ｏａｉ转染试剂介导，用ｐｔｎｆｒｅｎ将重组真核表达质粒ｐＥ２ＥＦ — ＦＦＩＳ一ＧＰｂＧ转染体外培养的缺血性心肌病患者骨髓基质干细胞，Ｐ检测转
ＰｄｏＡ．ｏｅｒＰｍａＭＤ．ｆｃ８ｆｂｔｆｉｎｃａａｔｒｓｃｎｅａｃｎｄｌｅｙＥｅｔｏｓｅｃａｈｒｃｅｔｓｏｃ．ｔａｅｉｒｉｏｉｉｉｓ＇ｖ
志，９２８１：３．１９，（）２９— １
（）２９５：．５
［］程志厚．２剖官产及相关问题．北京：北京出版社，９２：．１９，３９４［］张振钧，３刘棣监．剖官产学术研讨会纪要［］中华妇产科杂志，９０Ｊ．１９，
１ｏ６：６１７．８（）１４— ３１３
ｂＧＦＦ基因体外转染缺血性心肌病患者骨髓基质干细胞研究
【关键词】基质干细胞；碱性成纤维细胞生长因子；缺血性心肌病；转染

阿胶对体外培养大鼠成骨细胞增殖、分化功能的影响

阿胶含药血清的制备健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只，体重
基金项目：国家自然科学基金资助项目（３０１７１１６９）
ｌ
（２８０±２０）ｇ，雌雄各半随机分为４组，空白血清对照组，阿胶低剂量组，阿胶中剂量组，阿胶高剂量组。给药方法：按人鼠体表面积法换算，以成人临床等效剂量的７倍为低剂量组
（１Ｓ／ｋｇ），低剂量组的２倍为中剂量组（２Ｓ／ｋｇ），低剂量组的４
ｄｕｃｅｓ
ｂｅｈａｖｉｏｒａｌｉｍｐａｉｒｍｅｎｔａｎｄｐｌａｑｕｅｓｉｎ
ａ
ｍｏｄｅｌｏｆＡｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓｄｉｓ・
［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，２０００；４０８（６８１５）：９８２－５．
ｅａ８ｅ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，２０００；４０８（６８１５）：９７９－－８２．
６
［２００８－１１讲收稿２００９－０５－０３修回］
ｔｈｅｍｕｈｉｐｌｉｃａｔｉｖｅＴｈｅｍｅｄｉ—
ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔａｎｄＥＬＩＳＡｍｅｔｏｄ
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１０ｍｌ０．０１ｍｉｎ×３。ｍｇＤＡＢ
ｍｏｉ／Ｌ的Ｔｒｉｓ－ＣＩｐＨ７．６，过滤去除沉渣，加
ｍｏ／Ｌ
ｐ．ＩＨ２０２）轻摇１５ｒａｉｎ，加入５０一２
Ｈ２ＳＯ。终止液使反
应停止。（６）结果测定：酶标仪测量每孔的ＯＤ值（波长
４９０
ｎｍ）。
１．３统计学方法

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ＳＴＺ１周后，实验组７５％的大鼠随机血糖均＞１６．７ｍｍｏｌ／Ｌ，出现糖尿病症状，对照组血糖正常，体重无减轻。Ａ组
ＢＭＳＣｓ与正常组相比，克隆无明显减少，形态类似，各阶段细胞量差别不具有显著性（Ｐ＞０．０５）；Ｂ组ＢＭＳＣｓ与正
常组相比，克隆少，胞体略大，生长缓慢，倍增时间延长，抗衰亡能力减弱。与正常组相比，Ａ、Ｂ组贴壁功能在２４ｈ内差别均不显著（Ｐ＞０．０５）。细胞计数结果显示，第２ｄ至第８ｄ，Ｂ组ＢＭＳＣｓ比Ａ组和正常组ＢＭＳＣｓ均明显减少（Ｐ＜０．Ｏ１）。结论ＳＴＺ能够成功复制出１型糖尿病大鼠模型。建模４周后糖尿病大鼠ＢＭＳＣｓ的增殖能力已受影响，抗衰亡能力减弱。
【摘要】目的建立实验性１型糖尿病大鼠模型，培养不同病程糖尿病来源的骨髓基质细胞（ｂｏｎｅｍａｒｒｏｗ
ｍｅｎｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，ＢＭＳＣｓ），观察其体外的生长特性。方法采用空腹腹腔一次性注射６ｔｒｅｐｔｏｚｏｃｉｎ，ＳＴＺ）建立１型糖尿病大鼠模型，分别在第２周（Ａ组）、第４周（Ｂ组）取其四肢长骨ＢＭＳＣｓ，进行体外培养和观察，细胞计数并绘制细胞生长曲线图。对照组按照体重注射柠檬酸缓冲液。结果一次性空腹腹腔注射
【关键词】糖尿病动物；骨髓基质细胞；链脲佐菌素；生长曲线【中图号】Ｒ３９４．２６【文献标识码】Ａ【文章编号】１００６－６７３Ｘ（２０１３）０６－０３１４－０４
ＧｒｏｗｔｈｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｏｆｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｒｏｍａｌｃｅｌｌｓｏｆｄｉａｂｅｔｉｃｒａｔｓｉｎｖｉｔｒｏＬＩＡＯＱｉｎｇ — ｑｉｎｇ．ｚＥＮＧＪｉａｎ — ｙｕＺＨＡＮＧＭｉｎ，ＷＥＮＹｉｎｇｓＵＮＹｉｎｇ — ｌ，ＴＡＮＢａｏ — ｓｈｅｎｇ，ＣＨＥＮＧＷｅｉ．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｒｏｓｔｈｏｄｏｎｔｉｃｓ，ＣａｐｉｔａｌＭｅｄｉｃａｌ
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口腔医学２０１３年第２ｌ卷第６期ＢｅｉｉｉｎｇＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｔｏｍａｔ
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糖尿病大鼠骨髓基质细胞的体外生长特性研究
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ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＳｃｈｏｏｌｆｏＳｔｏｍａｔｏｌｏｇｙ．Ｂｅｇ１ｏｏ０５ｏ。Ｃｈｉｎａ
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅｔｙｐｅ１ｄｉａｂｅｔｉｃｒａｔｍｏｄｅｌ，ｔｏｃｕｌｔｉｖａｔｅｂｏｎｅｍａｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ
ｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｉａｂｅｔｉｃｃｏｕｒｓｅｓｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｉｒｇｒｏｗｔｈｃｈａｒａｃｔｅｉｒｓｔｉｃ．ＭｅｔｈｏｄｓＳｔｒｅｐｔｏｚｏｃｉｎｗａｓｉｎｊｅｃｔｅｄ