紫外分光光度法检测荷叶中荷叶生物碱..
荷叶黄酮和生物碱的提纯及调节血脂作用比较
作用并不清楚 ， 通过 对荷 叶黄酮和生物碱提取 、 离和 纯化 ， 用两分 离组分进行 大鼠 动物 实验 ， 分 并 比较 它们 的
调 节血 脂功效。结果表明 ： 叶浸膏 、 叶生物碱 对调 节血 脂 中甘 油三酯 （ Ｇ） 荷 荷 Ｔ 的指标 有极 显著作 用 ， 叶黄 荷
酮对调节血脂 中甘 油三酯 的有显著 作用 ， 同样 剂量生 药提 炼的生物碱 明显优 于荷叶黄酮 的降血脂 功效。
１ 实验 材 料 和 方 法
１ １ 实验 材料 ．
１ １１ 供试 品 由本实验室制备 ； ．． 荷叶浸膏（ ｎｇ １ ａ 相当于生药 １ ．１ ａ）荷叶黄酮（ ｎ 相当于生药 ０ １ ｇ ； ｎ １ａ ｇ ８ ．０ｍ ）荷叶生物碱 （ ｍ 相当于生药 ７０ｍ ） ００ ｇ ； １ ｇ ９ ｇ 。 １ １２ 动物 Ｓ ．． Ｄ雄性大 鼠， 自上海斯莱克实验动物有 限责任公司［Ｃ Ｋ 沪 ２ ０ — ０ ３ ］ 购 Ｓ Ｘ （ ０３ ００）。
２０ ０６年
第 ３期
扬州大学烹饪学报
第２ ３卷
总第 ８ 期 ３
洗液 脱熹
荷 口粉末 十 滤液
荷黄 叶酮
浸提 生 堕塑墼
氯仿层
１２ ２ 荷 叶生 物碱 的提取 ．．
酸水相
滤液
荷 叶生 物碱 荷 叶 中总黄 酮采 用芦 丁为 标样 ￣ （ ｄ ＮＯ３３ ） 络合 分 光光 度 法［ 荷 叶 中 ；
１２ 分 析 与实验 方 法 ．
１２ １ 荷 叶浸 膏和 黄 酮类 化合 物 的提取 ．．
荷叶粉末 ６ 乙 浸 Ｏ 醇 提 浸提液塑 ％
收 稿 日期 ：２０ —０ —０ ０６ ４ ２
浸膏
滤液一 大孑树脂柱层析 Ｌ
第七讲 生物碱分析
第七讲生物碱分析生物碱分布■含生物碱较多的科有粗榧科、毛莨科、小檗科、防已科、罂含生物碱较多的科有粗榧科、毛莨科、小檗科、防已科、罂粟科、豆科、马钱科、夹竹桃科、茄科、菊科、百合科和石蒜粟科、豆科、马钱科、夹竹桃科、茄科、菊科、百合科和石蒜科等。
有些科几乎全科植物均含生物碱，如罂粟科。
同一科属或亲缘关系相近的植物中往往含有相同或相似的生物碱，如茄或亲缘关系相近的植物中往往含有相同或相似的生物碱，如茄科的颠茄属(Atropa Atropa)、曼陀罗属(Datura Datura)、莨菪属( Hyoscyamus Hyoscyamus)、东莨菪属(Scopolia Scopolia)等属的植物都含有莨菪碱(hyoscyamine hyoscyamine)。
■同一种生物碱也可分布于不同科中，如在毛莨科、小檗科、防已科与芸香科的一些植物中都有小檗碱。
已科与芸香科的一些植物中都有小檗碱。
■生物碱可存在于植物体内各个器官中，同种植物中所含生物碱常不止一种，有的可含数种至数十种，如罂粟约含25种生物碱，长春花中含70余种生物碱。
■生物碱在植物体内各部分中分布是不相等的，往往集中于某一器官或某一部分中。
如乌头（根）、黄连（根茎）、黄柏（树皮）、颠茄（叶）、麻黄（地上茎）、洋地黄（花）、吴茱萸皮）、颠茄（叶）、麻黄（地上茎）、洋地黄（花）、吴茱萸（果实）、马钱子（种子）等。
在同一植物的不同部分，不但生物碱的含量有差异，而且生物碱的种类也可能不同。
特点■生药中生物碱的含量大多低于1%，有少数含量特别低，如长春花中长春新碱含量为百万分之一，美登木中美登木素含量为千万分之一；也有些含量特别高，如黄连中小檗碱含量可达9%、金鸡纳皮中奎宁含量高达15%。
在植物体内，生物碱一般与有机酸（苹果酸、枸橼酸、酒石酸等酸和鞣酸等）结合成盐类，呈溶解状态存在于液泡中，有些是与糖结合成甙而存在，更有少数生物碱是呈游离状存在的，如咖啡碱(caffeine)与秋水仙碱(colchicine)等。
论文-荷叶提取物工艺的研究
荷叶提取物最佳工艺的研究摘要：荷叶提取物有较好的调节血脂功效，有药理[1]研究表明其主要活性组分为荷叶生物碱、黄酮类化合物。
并且目前荷叶生物碱[2]、黄酮的需求量不断增加，但是缺少方便有效的分离分析荷叶生物碱和黄酮的方法[3]，限制了对荷叶资源进一步的开发和利用。
本实验通过对荷叶生物碱、黄酮的提取、分离纯化，寻找荷叶提取物的最佳工艺，以期为荷叶提取物的深入研究和合理开发利用提供参考。
关键词：荷叶提取物;黄酮;生物碱;分离纯化Abstract: Better regulation of blood lipid effect of the extract from Lotus leaf, pharmacological research has shown that group into the alkaloid from Lotus leaf, its main activity of flavonoid compounds. And Lotus Leaf alkaloids, flavonoids in demand now increasing, but the lack of convenient and effective method of separation and analysis of alkaloids and flavonoids in Lotus leaf, limited the further development and utilization of resources in Lotus leaf. This experiment by alkaloids from Lotus leaves, extraction, isolation and purification of the flavonoids, finding best technology of Lotus leaf extract, for in-depth research and rational development and utilization of Lotus leaf extract of reference.Key words: Lotus leaf extract; flavonoids; alkaloids; isolation and purification1.前言荷叶属睡莲科植物(Nelumbo nuxifera Gaerth)的叶片，作为一种天然、安全有效的保健食品和药物[4]，越来越受到人们的青睐。
华山参片总生物碱的含量测定
实训二十一华山参片总生物碱的含量测定一、实训目的1.掌握紫外-可见分光光度法（对照品比较法）含量测定的一般操作步骤和技能。
2.理解紫外-可见分光光度法（对照品比较法）含量测定原理二、测定依据1.华山参片药品标准 [《中国药典》2005年版（一部）正文部分 440页]本品为华山参浸膏片【含量测定】对照品溶液的制备精密称取在120℃干燥至恒重的硫酸阿托品，加水制成每1ml相当于含莨菪碱7μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取本品40片，除去糖衣，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于12片的重量），置具塞锥形瓶内，精密加入枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液（pH4.0）25ml，振摇5分钟，放置过夜，用干燥滤纸滤过，取续滤液，即得。
测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液各2ml，分别置分液漏斗中，各精密加枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液（pH4.0）10ml，再精密加入用上述缓冲液配制的0.04%溴甲酚绿溶液2ml，摇匀，用10ml三氯甲烷振摇提取5分钟，待溶液完全分层后，分取三氯甲烷液，用三氯甲烷湿润的滤纸滤入25ml量瓶中，再用三氯甲烷提取3次，每次5ml，依次滤入量瓶中，并用三氯甲烷洗涤滤纸，滤入量瓶中，加三氯甲烷至刻度。
照紫外-分光光度法（附录ⅤA）分别在415nm的波长处测定吸光度，计算，即得。
本品含生物碱以莨菪碱（C17H23NO3）计，应为标示量的80.0%～120.0％。
【规格】0.12mg2.紫外-可见分光光度法[《中国药典》2005年版（一部）附录Ⅴ A]三、测定原理1.本品有效成分为莨菪类生物碱，主要有莨菪碱、东莨菪碱、山莨菪碱和东莨菪内酯等（图5-36）。
药品标准以莨菪碱为指标，测定总生物碱的含量，以此控制药品质量的优劣。
N OCOCHCH 2OHR 1R 2CH 3图5-36 主要莨菪类生物碱的结构式莨菪碱（R 1,R 2=H ） 东莨菪碱（C 6-O-C 7 R 1,R 2=H ） 山莨菪碱（R 1=OH,R 2=H ） 2.莨菪类生物碱为无色结晶，具有中强碱性，溶于酸水、甲醇、乙醇、三氯甲烷等，故本实验采用枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液（pH4.0）提取总生物碱。
桑叶中生物碱的的含量测定方法
实验方法：将桑叶粗提物样品用蒸馏水溶解后经制备型液相色谱仪分离，质谱 引导，质谱检测质荷比163.3+1（DNJ+H）,柱温为室温，流速10mL/min。通 过质谱对收集液进行鉴定，离子轰击源为点喷雾ESI电离源，雾化气N2，对分离 纯化的 DNJ 溶液，50℃恒温旋转蒸发去除乙腈，-50 ℃冷冻干燥成淡黄色粉末。 经柱前荧光衍生-反相高效液相色谱法检测DNJ的含量，样品DNJ纯度＞95% 。
原理：气相色谱法主要是利用物质的沸点、极性及 吸附性质的差异来实现混合物的分离，如右图所示:
待分析样品在汽化室汽化后被载气带入色谱柱， 柱内含有液体或固体固定相，由于样品中各组分的 沸点、极性或吸附性能不同，每种组分都倾向于在 流动相和固定相之间形成分配或吸附平衡。但由于 载气是流动的，这种平衡实际上很难建立起来。也 正是由于载气的流动，使样品组分在运动中进行反 复多次的分配或吸附/解吸附，结果是在载气中浓度 大的组分先流出色谱柱，而在固定相中分配浓度大 的组分后流出。当组分流出色谱柱后，立即进入检 测器。检测器能够将样品组分转变为电信号，而电 信号的大小与被测组分的量或浓度成正比。
二、重量法
硅钨酸是生物碱沉淀试剂之一，桑叶生物碱与硅钨酸反应生成白色沉淀。 重量法的原理是在酸性环境下，硅钨酸能够和多数生物碱生成一定的沉淀， 一分子硅钨酸可以和四分子含一个碱性氮原子或二分子含二个碱性氮原子 的生物碱相结合，生成硅钨酸盐沉淀。
乌头碱类生物碱的测定
乌头碱类生物碱的测定
乌头碱是一种含氮的生物碱，主要存在于乌头属植物中，如乌头、白附子等。
测定乌头碱的方法有多种，常用的方法有以下几种：1. 酸碱滴定法：将待测样品加入酸性介质中，使乌头碱转变为酸性溶液，再加入酸性碘化钾溶液，溶液呈现深蓝色，用硫酸滴定至溶液颜色变浅为止，根据滴定所需的硫酸量计算乌头碱的含量。
2. 气相色谱法：将待测样品经过提取和洗涤，得到乌头碱的纯化样品。
然后将样品注入气相色谱仪中，通过样品在色谱柱中的分离和检测，测定乌头碱的含量。
3. 高效液相色谱法：将待测样品经过提取和洗涤，得到乌头碱的纯化样品。
然后将样品注入高效液相色谱仪中，通过样品在色谱柱中的分离和检测，测定乌头碱的含量。
4. 紫外分光光度法：将待测样品溶解于酸性溶液中，然后使用紫外分光光度计测定样品溶液的吸收光谱，根据乌头碱在特定波长下的吸光度值，计算乌头碱的含量。
以上是常用的几种乌头碱的测定方法，具体选择哪种方法可以根据实际情况和实验要求来确定。
苦参碱的含量测定方法
苦参碱的含量测定方法苦参碱（Matrine）是一种从苦参中提取得到的天然生物碱，具有广泛的药理活性，被广泛用于药物研发和临床治疗。
为了保证苦参碱的质量和安全性，准确测定其含量非常重要。
下面将介绍十种常用的苦参碱含量测定方法，并详细描述其原理和操作步骤。
这些方法包括二氧化硅柱层析法、高效液相色谱法、气相色谱法、红外光谱法、紫外分光光度法、差示扫描量热法、核磁共振法、质谱法、比色法和比重法。
1. 二氧化硅柱层析法原理：利用苦参碱与二氧化硅柱的亲和作用差异，通过洗脱移除非目标化合物，然后定量检测苦参碱峰。
操作步骤：1）样品准备：采用适当的溶剂将苦参提取物溶解，过滤除去杂质。
2）装柱：将提取液加入装有二氧化硅的柱子，柱子上部用砂芯填塞。
3）洗脱：用适当的溶剂冲洗柱子，将非目标化合物洗脱。
4）检测：用合适的检测方法检测苦参碱峰进行定量。
2. 高效液相色谱法原理：利用样品在高效液相色谱柱中的分离性，通过检测样品峰面积或峰高来定量苦参碱。
操作步骤：1）样品制备：将苦参提取物溶解并过滤除去杂质。
2）色谱条件：选择适当的色谱柱、流动相和检测波长，保证样品分离效果和检测信号。
3）进样：用合适的进样器将样品注入色谱柱。
4）检测：采用紫外检测器检测样品峰面积或峰高，进而定量苦参碱。
3. 气相色谱法原理：将样品中的苦参碱转化为易于挥发的衍生化物，然后通过气相色谱柱的分离、检测来定量苦参碱。
操作步骤：1）样品制备：将苦参提取物溶解并经过适当的衍生化反应。
2）色谱条件：选择合适的气相色谱柱、进样方式和检测条件，确保样品分离和检测的可行性。
3）进样：将衍生化后的样品注入气相色谱柱。
4）检测：采用化学检测器或质谱检测器检测苦参碱的峰面积或峰高。
4. 红外光谱法原理：苦参碱的分子结构中含有特定的红外吸收峰，通过红外光谱仪测定样品中的红外吸收峰强度来定量苦参碱。
操作步骤：1）样品制备：将苦参提取物溶解并制备适当的样品片。
2）光谱扫描：将样品片放入红外光谱仪中，进行光谱扫描，记录样品的红外吸收峰。
紫外分光光度法测定氨茶碱的含量
内标物的选择要符合以下要求：
（1）内标物的峰与组分峰能完全分离。 （2）内标物峰在色谱图上出现的位置，最好在欲定量组分
峰的邻近位置。如果样品中有几个组分需要定量，并 且他们的k’值差别较大，这时就需要用几个内标物来 作定量测定。 （3）内标物的性质和浓度尽量与预测定峰的接近。 （4）内标物是样品中不存在的，与样品各组分、柱填料和 移动相不发生化学反应。
0.05.
测定法
应以配制样品溶液的同批溶剂为空白对照，吸 收峰波长应在该品种项下规定的波长±2nm以内， 并以吸光度最大的波长为测定波长。
含量测定
（1）对照品比较法
（2）吸收系数法
（3）计算分光光度法
（4）比色法 样品本身在紫外-可见区没有强吸收，或在紫外
区虽有吸收但为避免干扰或提高灵敏度，可加入 适当的显色剂显色后测定。
式中A为吸收度 ；E为吸收系数，即单位浓度、单位液 层厚度的吸收度数值；C为溶液浓度；L为液层厚度。
紫外-可见分光光度法是根据物质分子对波长为200760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立的光谱分析
方法。其主要特点为：灵敏度高，可达10-4g/ml～10-
7g/ml；准确度高，相对误差为2％-5％。中药中有紫外 吸收的成分或本身有颜色的成分，在一定的浓度范围内， 其溶液的吸收度与浓度符合朗伯-比尔定律，均可用此法 进行分析。
内标法
内标法 internal standard method 是色谱分析中一种 比较准确的定量方法，尤其在没有标准物对照时，此方法 更显其优越性。它尤其广泛的应用于高效液相色谱中。这 种方法可以抵消仪器和操作过程带来的误差。
内标法是将一定重量的纯物质作为内标物加到一定量的被 分析样品混合物中，然后对含有内标物的样品进行色谱分 析，分别测定内标物和待测组分的峰面积（或峰高）及相 对校正因子，内标物在色谱图上得到分离的峰。根据已知 含量的内标物的峰面积和样品的峰面积，计算组分的百分 含量。