酵母双杂交技术应用进展
酵母双杂交及其衍生系统_黄欣媛

酵母双杂交及其衍生系统_黄欣媛技术与方法?生物技术通报BIOTECHNOLOGY BULLETIN2014年第1期生物大分子间的相互作用是有机体细胞活动的基础,在蛋白质层面上揭示生命活动本质是现代生物学的一个主要目标。
1989年诞生的酵母双杂交(Yeast two -hybrid,Y2H)系统以及随后出现的各种衍生系统是研究蛋白质之间以及蛋白质和RNA、小分子化合物之间相互作用的最重要的工具,已成功揭示了大量的蛋白相互作用,在细胞信号转导、蛋白质组学、病理学、药物研发等方面有着广泛应用[1]。
本文对Y2H 系统的基本原理、衍生系统和应用进展等方面进行介绍。
1 酵母双杂交系统的原理酵母GAL4转录因子由两个可以分开的结构域组成:DNA 结合域(DNA binding domain,BD)负责结合基因的上游激活序列,将转录激活域(Transcriptional activation domain,AD)募集到启动收稿日期:2013-08-03基金项目:特色果蔬质量安全控制湖北省重点实验室开放基金项目(2013K04)作者简介:黄欣媛,女,博士,研究方向:生物化学与分子生物学;E -mail :huangxycn@/doc/c810045302.html, 酵母双杂交及其衍生系统黄欣媛1 范红波2(1.湖北工程学院特色果蔬质量安全控制湖北省重点实验室,孝感 432000;2.湖北职业技术学院,孝感 432000)摘要:酵母双杂交系统是一种研究蛋白质相互作用的分子生物学方法,过去20多年里,大量衍生系统的出现使得这套双杂交技术体系更加完善和高效,成为研究蛋白质-配体相互作用的重要技术手段,广泛应用于功能基因组学、蛋白质组学、病理学等研究领域。
对酵母双杂交及其衍生系统的基本原理和应用进展进行综述。
关键词:酵母双杂交系统蛋白质相互作用双杂交技术体系The Yeast Two -Hybrid System and Its Several Derived SystemsHuang Xinyuan 1 Fan Hongbo 2(1. Hubei Key Laboratory of Quality Control of Characteristic Fruits and Vegetables ,Hubei Engineering University ,Xiaogan 432000;2.HubeiPolytechnic Institute ,Xiaogan 432000)Abstract: The Yeast two -hybrid(Y2H)system is a molecular biology approach to detect protein -protein interactions. A diverse series of technologies derived from it have emerged in the past 20 years, which makes this two -hybrid methodology system more complete and efficient. They have been among the most important and powerful tools to study ptotein -ligand interactions that widely used in functional genomics, proteomics and pathology study. This article provides an overview on the basic principles and application progress of Y2H system and some derived techniques.Key words: Yeast two -hybrid(Y2H)system Protein -protein interaction Two -hybrid methodology system子区域从而激活基因的转录。
蛋白质互作技术研究进展

蛋白质互作技术研究进展蛋白质是细胞中最重要的生物大分子,扮演着结构支持、酶催化、信号传导等各种重要生理功能的角色。
研究蛋白质的互作关系对于揭示细胞的生理过程、疾病发生机制具有重要意义。
近年来,人们通过不同的实验方法与技术手段,对蛋白质互作进行了深入研究,并取得了一系列重要的进展。
本文将对蛋白质互作技术的研究进展进行综述。
近年来,一系列蛋白质互作技术的发展使得我们能够系统地研究蛋白质之间的相互作用。
最经典的蛋白质互作技术包括酵母双杂交技术、GST pull-down技术、共沉淀技术、荧光共熄灭技术等。
酵母双杂交技术是最早应用于蛋白质互作研究的方法之一。
该技术利用酵母双杂交系统,将感兴趣的蛋白质与酵母细胞中的转录激活因子结合,进而观察它们之间是否存在相互作用。
该方法凭借其简单易行、高通量的特点,成为研究蛋白质互作的重要手段。
该技术也存在一些局限性,比如不能检测脆性蛋白质相互作用。
GST pull-down技术是通过将悬浮在待测物表面的蛋白质与GST蛋白质(谷胱甘肽S转移酶)结合,利用其亲和力分离与其结合的蛋白质。
这种分离方法简单、速度快,并能有效地富集感兴趣的蛋白质互作体。
该方法也存在一些缺点,比如无法检测动态的蛋白质互作。
共沉淀技术是一种通过蛋白质或其他分子在条件下相互结合形成复合物,然后通过离心将复合物与其他非结合物分离的方法。
共沉淀技术在蛋白质互作研究中得到了广泛应用,具有较高的特异性和准确性。
该技术也存在一些缺点,如需要较高纯度的蛋白样品、浓度较高的目标蛋白等。
荧光共熄灭技术是一种基于荧光共熄灭效应的蛋白质互作研究方法。
该技术利用荧光标记的蛋白质或荧光染料,在近距离相互作用时发生荧光共熄灭效应,从而可以检测蛋白质之间的相互作用。
该方法不需要标记蛋白质,具有实时监测、无需缓冲剂等优点,适用于研究生物样品中蛋白质的互作。
除了上述经典的蛋白质互作技术,近年来,人们还开发了一系列新的方法和技术来研究蛋白质的互作。
酵母双杂交技术及其在植物与病原物互作中的应用

( o eeo Lf Si cs N r w s A cl rl n oet n esy Y nl g720 , hn ) C lg f i c ne, o h et ut a adFrsyU i rt, agn 110 C i l e e t u r v i i a
酵母双 杂交体 系简称 双杂 交体 系 ( w — yr s T o hb ds — i y
t ) 又称 相互 作用 陷阱 (Itrc o r ) 是 1 8 由 e , n r neat nt p , 9 9年 i a
F ls id 等在研 究 真 核 基 因转 录 调 控 中提 出并 初 步 建 立 e 的 。典型 的真 核生 长转 录 因子 , Gl、c4等都 含 如 a Gn 4 有 2个不 同 的结 构 域 : N 结 合 结构 域 ( N b d g DA D A— i i nn
白相互作用后, 减去了纯化蛋白质的繁琐步骤 , 大大缩 短实验周期。真实性 : 酵母细胞是真核细胞, 融合蛋 白之
间 的相 互作 用是在 真核 细胞 内进行 的 , 白质 经 过 翻译 蛋
后 的修 饰 , 可能保 持 蛋 白质 的天 然空 间构象 和 折叠 状 有
1 酵母 双杂 交 系统 的原理
21 酵 母双 杂交 系统 的优点 . 灵敏性 : 能够采用 高拷 贝 和强启 动 子 的表 达 载 体 使 杂 和 蛋 白过 量 表 达 , 通 过 并 m N 产生多 种稳定 的 酶使信 号 放 大等 手 段 , 最 终 发 RA 使 生 在核 内的微小 的反 应被 放 大到 体外 , 检 测存 在 于 蛋 来 白质之 间的微弱 的或 暂 时 的相互 作 用 。简 洁性 : 合蛋 融
酵母双杂杂交回复验证实验

酵母双杂杂交回复验证实验一、引言酵母双杂杂交回复验证实验是一项常用于研究酵母菌遗传性状的实验方法。
通过将两个不同株系的酵母菌互相杂交,观察其后代的表型,可以确定不同基因型对于特定性状的影响,以及基因之间的相互作用关系。
这项实验提供了一种有效的手段来研究酵母菌的遗传特性,并为从酵母菌到其他生物的研究提供了重要参考。
二、实验设计1. 实验目的确认酵母菌的遗传性状以及基因型之间的相互作用关系。
2. 实验步骤1.选取两个不同基因型的酵母菌株进行杂交。
2.将两个酵母菌株分别培养在适宜的培养基上,以获得足够数量的酵母菌细胞。
3.将两个酵母菌株的细胞混合在一起,使其进行杂交。
4.将混合后的酵母菌细胞培养在选择性培养基上,以筛选出杂交后的酵母菌子代。
5.观察酵母菌子代的表型特征,并将其形态记录下来。
3. 实验材料•两个不同基因型的酵母菌株•培养基及培养仪器•选择性培养基4. 实验结果通过观察酵母菌子代的表型特征,可以得到各个基因型对于特定性状的影响情况。
如果两个酵母菌株的基因型在某一性状上有不同表现,那么杂交后的子代在该性状上可能表现出两种不同的表型。
这种表型的分离现象可以帮助确定酵母菌的遗传性状。
5. 实验分析通过对大量的酵母菌子代进行观察和统计,可以得到不同基因型对于特定性状的影响程度,以及基因之间的相互作用关系。
这些数据可以用来构建酵母菌的遗传模型,推测特定基因在遗传性状中的作用机制。
三、实验应用酵母双杂杂交回复验证实验在酵母研究领域具有广泛的应用价值。
以下是一些应用示例:1. 基因功能研究通过观察不同基因型的酵母菌子代的表型,可以推测特定基因在酵母菌生命周期、代谢途径等方面的作用。
这对于全面理解基因功能具有重要意义。
2. 病原机制研究酵母双杂杂交回复验证实验可以帮助研究人员解析酵母菌导致疾病的机制。
通过分析酵母菌的基因型与特定疾病的发生关系,可以发现关键基因及其表达调控途径,为疾病治疗和预防提供新思路。
酵母双杂交

酵母双杂交随着分子生物学研究的迅猛发展与人类基因组计划的完成, 基因工程领域的研究已从结构基因组时代走进了功能基因组时代。
功能基因组学的主要任务就是对生物基因组中包含的全部基因及其所翻译的蛋白质的功能加以解读和描述, 尤其是大量未知基因的功能及其相应蛋白质产物的功能。
系统综合分析蛋白- 蛋白相互作用将为了解蛋白质的功能提供重要的信息。
酵母双杂交是目前研究蛋白-蛋白相互作用的所有方法中较为简便、灵敏和高效的一种方法。
它是利用酵母遗传学方法在真核细胞体内研究蛋白质之间相互作用的非常有效的分子生物学技术, 可有效地用来分离能与一种已知的靶蛋白相互作用的蛋白质的编码基因。
酵母双杂交技术的可行性和有效性在验证已知蛋白质之间的相互作用或筛选与靶蛋白特异作用的诱饵蛋白的研究中已被广泛的得到证实。
随着人类、水稻和拟南芥等模式生物基因组测序的完成, 酵母双杂交及其衍生的相关技术将在蛋白质组学、细胞周期调控、细胞信号转导和肿瘤基因表达等领域的研究中发挥着越来越重要的作用。
一、酵母双杂交原理蛋白的酵母双杂交实验是以酵母的遗传分析为基础,研究反式作用因子之间的相互作用对真核基因转录调控影响的实验。
很早就已知道,转录活化蛋白可以和DNA上特异的序列结合而启动相应基因的转录反应。
这种DNA结合与转录激活的功能是由转录活化蛋白上两个相互独立的结构域即DNA结合结构域(Binding Domain, BD)和转录活化结构域(Activation Domain, AD)分别来完成的,并且这两个结构域对于基因的转录活化都是必须的。
二、酵母双杂交的系统酵母双杂交常用的有两种系统,第一种为LexA系统:DNA结合结构域由一个完整的原核蛋白LexA构成,转录活化结构域则由一个88个氨基酸的酸性的大肠杆菌多肽B42构成,它在酵母中可以活化基因的转录; 第二种为Gal4系统:BD和AD分别由Gal4蛋白上不同的两个结构域(1-147aa与768-881aa)构成。
酵母双杂交和双分子荧光互补技术

酵母双杂交和双分子荧光互补技术酵母双杂交和双分子荧光互补技术酵母双杂交技术是目前最常用的蛋白质相互作用检测方法之一。
该技术基于酵母细胞中的转录活化因子二分2 system,利用质粒构建的蛋白质融合表达。
通过酵母双杂交,能够检测到蛋白质之间的相互作用,对于基因调控、药物发现等研究有重要意义。
随着人们对分子生物学和信号转导等领域的研究不断深入,越来越多的蛋白质与蛋白质相互作用被发现。
因此,单独使用酵母双杂交技术进行筛选,容易出现假阳性或假阴性结果。
为了解决这一问题,科学家们发明了双分子荧光互补技术(Bimolecular Fluorescence Complementation, BiFC)。
双分子荧光互补技术的基本原理是将目标蛋白质中感光的荧光蛋白质分别与绿色荧光蛋白(GFP)的N-末端和C-末端融合,然后观察这些融合蛋白质是否能够在细胞内共同形成荧光复合物。
当目标蛋白质相互作用时,它们会聚集在一起,形成荧光复合物。
这种方法不但避免了假阳性结果的出现,而且观察融合蛋白质的荧光信号可直观地检测相互作用的结果。
酵母双杂交技术与双分子荧光互补技术的结合,使相互作用的筛选更加准确、可靠。
这种方法将目标蛋白在酵母细胞中表达,并用双分子荧光互补技术验证相互作用的结果。
该方法具有高效、灵敏、特异性强、适用范围广的优点。
事实上,酵母双杂交和双分子荧光互补技术已经在细胞生物学和遗传学研究中广泛应用。
例如,它们可用于发现肿瘤细胞与正常细胞的区别,有助于新药的发现和研究;它们也可用于研究蛋白质相互作用引起的疾病及其治疗。
总之,酵母双杂交和双分子荧光互补技术的优点在于可以提高蛋白质相互作用的可靠性和准确性,带来诸多的应用研究前景。
尽管这些方法已被广泛应用,但人们对于这一技术的认知和了解还有待进一步扩展和深化。
酵母双杂交的原理

酵母双杂交的原理
酵母双杂交(YeastTwo-hybridSystem,Y2H)是一种具有实验性方法的蛋白质相互作用实验,它可以用来验证和确定两个蛋白在体内及体外之间存在相互作用。
这种蛋白质相互作用可以发生在体内,也可以发生在体外。
在这种实验中,使用的物质是由两个融合的蛋白质组成的双融合蛋白,一个蛋白是结合调控区或结合位点,另一个蛋白质是响应元件,它可以检测到调控区里结合的物质的存在,从而启动一系列的反应,其结果是显示双杂交蛋白中调控区是否与响应元件相结合。
二、酵母双杂交的原理
酵母双杂交的基本原理源于酵母菌的基因调控机制。
它的基本原理是,将一个结合调控区的蛋白(称为“结合蛋白”)与一个响应元件(称为“受体蛋白”)结合起来,当结合蛋白结合到调控区并激活响应元件时,酵母细胞就会对外在的细胞因子做出反应。
当结合蛋白结合调控区并激活响应元件时,酵母细胞就会产生一种光变化,从而表明蛋白质之间存在相互作用。
简单地说,酵母双杂交的原理是利用双融合蛋白将一个结合调控区的蛋白和一个响应元件结合在一起,当结合调控区的蛋白结合到结合调控区时,响应元件就会激活,酵母细胞就会产生一些外在细胞因子,如光变化。
从而可以检测到蛋白质之间发生相互作用。
三、酵母双杂交的应用
酵母双杂交技术的应用非常广泛,可以用来验证和确定蛋白质之
间的相互作用,也可以用来研究蛋白的结构和功能,并有助于发现新的药物靶标。
此外,它也可以用于研究基因调控机制,研究染色体的结构,以及研究蛋白质和核酸之间的相互作用等。
酵母双杂交自激活

蛋白质相互作用在细胞生物学和疾病中的作用。
此外,酵母双杂交系统还可以用于筛选新的药物靶点或鉴定新
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的治疗策略。
酵母双杂交系统的优缺点
优点
酵母双杂交系统具有高灵敏度和特异性,能够检测到低亲和力的相互作用。此外 ,它还具有高通量和高可重复性的特点,可以同时检测多个蛋白质之间的相互作 用。
缺点
然而,酵母双杂交系统也存在一些局限性。例如,它可能受到酵母细胞内其他因 素的影响,导致假阳性结果。此外,由于酵母细胞与人类细胞存在差异,因此某 些在酵母细胞中检测到的相互作用可能无法在人类细胞中重现。
蛋白质的相互作用可以通过多种方式进 在酵母双杂交实验中,了解蛋白质之间 行,例如通过蛋白质的直接接触或通过 的相互作用有助于预测自激活的可能性, 与它们相关的其他分子之间的相互作用。 并采取措施避免或减少这种现象的发生。
基因表达水平的影响
基因表达水平对酵母双杂交自激活也有重要影响。当一个基因的表达水平过高时, 它可能会产生过多的蛋白质,导致自激活。
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该系统基于两种基本的酵母转录因子,即GAL4 和STE12,它们可以分别与DNA结合并激活转录。
3
当一个转录因子与另一个转录因子结合时,它们 可以形成一个杂合二聚体,从而激活转录。
酵母双杂交系统的应用
01
酵母双杂交系统被广泛应用于研究蛋白质之间的相互作用,特 别是在信号转导和转录调控领域。
02
它可以帮助科学家确定蛋白质相互作用的结构基础,以及研究
酵母双杂交自激活
目录
• 酵母双杂交系统简介 • 酵母双杂交自激活的发现与确认 • 酵母双杂交自激活的影响因素
目录
• 酵母双杂交自激活的调控策略 • 酵母双杂交自激活的实际应用 • 未来展望与研究方向
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酵母双杂交技术应用进展
酵母双杂交技术是一种强大的生物技术方法,用于研究蛋白质之间的相互作用。
这项技术自20世纪80年代问世以来,已经广泛应用于基因功能研究、药物研发和生物技术应用等领域。
本文将介绍酵母双杂交技术的原理、应用进展及未来展望。
酵母双杂交技术是基于真核生物体内两个互补的转录因子,即GAL4和DBD-VP16,以及一个含有报告基因的载体穿梭质粒构建而成的。
在该技术中,一个转录因子(DBD-VP16)与一个诱饵蛋白结合,另一个转录因子(GAL4)与目标蛋白结合。
当诱饵蛋白与目标蛋白相互作用时,两个转录因子将形成一个复合物,该复合物将激活报告基因的表达。
通过检测报告基因的表达情况,可以确定蛋白质之间的相互作用。
基因功能研究
酵母双杂交技术已成为研究基因功能的重要工具。
通过使用该技术,科学家们可以筛选出与特定基因相互作用的其他基因,从而揭示基因在细胞中的功能。
例如,一项研究发现人类肺癌细胞中抑癌基因TP53的相互作用蛋白,从而为肺癌治疗提供新的思路1。
在药物研发方面,酵母双杂交技术也发挥了重要作用。
通过该技术,科学家们可以筛选出能够与特定药物靶点相互作用的小分子化合物,从而发现新的药物候选。
例如,利用酵母双杂交技术成功发现了一种能够抑制乳腺癌细胞增殖的新药候选2。
酵母双杂交技术在生物技术应用方面也具有广泛的应用价值。
例如,利用该技术成功克隆了一个编码具有工业应用价值的酶的基因,并实现了该基因的高效表达3。
酵母双杂交技术还被用于构建具有重要应用价值的基因调控网络。
随着基因组学、蛋白质组学和代谢组学等研究的深入发展,酵母双杂交技术的应用前景将更加广阔。
在基因组学领域,利用酵母双杂交技术可以揭示基因之间的相互作用和调控关系,有助于深入理解生命活动的复杂性。
在蛋白质组学领域,酵母双杂交技术可以应用于蛋白质相互作用的研究,为揭示生物学过程和疾病机制提供有力支持。
在代谢组学领域,酵母双杂交技术可以帮助研究代谢物之间的相互作用和调控机制,为代谢调控和代谢性疾病研究提供新的视角。
酵母双杂交技术是一种非常有用的生物技术方法,在基因功能研究、药物研发和生物技术应用等领域均具有广泛的应用价值。
随着相关研究的深入发展,酵母双杂交技术的应用前景将更加广阔。
未来可以进
一步拓展该技术在基因组学、蛋白质组学和代谢组学等领域的应用,为生命科学和医学研究提供更多创新性的研究思路和方法。
酵母双杂交技术是一种基于真核生物体内两种不同转录因子相互作
用的实验方法,用于研究蛋白质相互作用和基因表达调控。
该技术自1989年首次报道以来,已经广泛应用于基因功能、基因表达调控、
表观遗传学等领域的研究。
本文将介绍酵母双杂交技术的原理、研究进展及其面临的问题和解决方案,并探讨该技术的未来发展方向和应用前景。
酵母双杂交技术是由美国学者Fields和Song在1989年提出的一种
实验方法,旨在研究真核生物基因转录因子之间的相互作用。
该技术利用两种不同转录因子(融合蛋白)的结合,激活报告基因的表达,从而实现对蛋白质相互作用的检测。
由于该技术具有高灵敏度和可定量等优点,迅速成为研究蛋白质功能和基因表达调控的重要工具。
酵母双杂交技术的原理是将两种不同转录因子融合成一种蛋白质,其中一个转录因子与另一个转录因子结合后,能够激活报告基因的表达。
通常,这种融合蛋白有两种形式:一种是 bait蛋白,它与目标蛋白结合;另一种是 prey蛋白,它与 bait蛋白结合。
通过检测报告基
因的表达水平,可以推断出两种转录因子之间的相互作用。
在酵母双杂交系统中,一般包括三个基本元件: bait蛋白、prey蛋白和报告基因。
bait蛋白与 prey蛋白进行融合,形成 bait-prey 融合蛋白。
然后,将 bait-prey融合蛋白转入酵母细胞中,与目标蛋白进行相互作用。
如果 bait蛋白与目标蛋白相互作用,则会导致报告基因的表达。
通过测定报告基因的表达水平,可以判断 bait蛋白与目标蛋白之间的相互作用是否发生。
酵母双杂交技术自问世以来,已经广泛应用于各个领域的研究。
在基因功能研究方面,酵母双杂交技术被用于鉴定蛋白质相互作用网络中的关键节点,揭示基因在细胞生长、代谢和信号转导中的作用。
例如,利用酵母双杂交技术发现了一种新的激酶抑制剂,对胰腺癌治疗具有潜在应用价值1。
在基因表达调控方面,酵母双杂交技术也有着广泛的应用。
例如,研究转录因子与顺式作用元件的相互作用,揭示基因转录调控的机制2。
在表观遗传学领域,酵母双杂交技术也被用于研究 DNA甲基化、组蛋白修饰等对基因表达的影响。
例如,利用酵母双杂交技术发现了一种新的组蛋白去甲基化酶,揭示了组蛋白修饰对基因表达调控的作用3。
酵母双杂交技术还被用于研究细胞信号转导、肿瘤发生发展等领域。
酵母双杂交技术在各个领域的研究中都发挥了重要作用,为科学
研究提供了有力的实验手段。
虽然酵母双杂交技术具有许多优点,但也存在一些挑战和问题。
bt 和 prey蛋白的融合可能存在不稳定性,影响实验结果的可靠性。
为了解决这个问题,可以采取优化融合蛋白结构、使用筛选的稳定融合伙伴等方法4。
酵母双杂交实验的假阳性结果也比较常见。
为了降低假阳性率,可以采取多种策略,如使用多个不同的 bt和 prey组合、验证相互作用在体内外的一致性等5。
酵母双杂交技术对于大规模蛋白质相互作用研究还存在一定的局限性。
为了克服这一挑战,可以结合其他高通量技术(如 mass spectrometry)、计算生物学方法(如network analysis)等进行综合分析6]。
结论酵母双杂交技术作为一种有效的蛋白质相互作用研究方法,在基因功能、基因表达调控和表观遗传学等领域得到了广泛应用。
虽然该技术存在一些挑战和问题,但通过优化实验方案、结合其他技术手段等策略,可以有效地提高实验结果的可靠性和准确性。
随着相关技术的不断发展,酵母双杂交技术未来有望在更多领域的研究中发挥重要作用,为生物医学研究提供更多有价值的信息。
酵母双杂交技术是一种强大的生物分子相互作用研究方法,已在病毒学研究中发挥了重要作用。
该技术通过将酵母细胞中的两个蛋白质伴
侣进行人工结合,以检测它们之间的相互作用。
这种技术为病毒学研究提供了新的视野,有助于揭示病毒与宿主细胞之间的相互作用机制。
酵母双杂交技术是基于酵母菌株的基因调控机制而发展起来的一种
研究方法。
在酵母菌株中,转录因子与顺式作用元件之间的相互作用参与了基因转录的调控。
利用这一现象,通过将两个蛋白质伴侣与顺式作用元件分别融合,进而观察它们在酵母细胞中的相互作用情况。
这种技术在病毒学研究中具有重要意义,可帮助科学家们深入了解病毒的生命活动及其与宿主细胞之间的相互作用。
检测病毒核酸序列
在病毒学研究中,酵母双杂交技术可用于检测病毒核酸序列。
例如,将病毒的某个非结构蛋白与酵母转录因子进行融合,再将酵母细胞的另一个转录因子与受该转录因子调控的顺式作用元件进行融合。
如果两种融合蛋白之间存在相互作用,则会导致酵母细胞的表型变化,进而证明病毒核酸序列的存在及其功能。
酵母双杂交技术还可用于分析病毒血清学反应。
将病毒蛋白或多肽与酵母转录因子融合,将其接种于血清学反应中,观察是否有抗体产生。
如果有抗体产生,则证明酵母细胞中的融合蛋白具有免疫原性,进而分析病毒血清学反应。
酵母双杂交技术在病毒学研究中具有以下优点:高灵敏度、高分辨率、可检测蛋白质之间的弱相互作用。
然而,该技术也存在不足之处,如对实验条件要求较高、实验周期较长等。
酵母双杂交技术无法直接应用于体内研究,对于复杂生物样品的应用也受到一定限制。
酵母双杂交技术在病毒学研究中的应用为深入了解病毒与宿主细胞
之间的相互作用提供了有力支持。
虽然该技术存在一些不足之处,但随着技术的不断发展和优化,相信其在病毒学研究中的应用前景仍然广阔。