糖尿病大鼠视网膜早期病变中PDGF(一)
大鼠糖尿病早期视网膜超微结构变化
大鼠糖尿病早期视网膜超微结构变化
刘学政;李莉霞;萧鸿
【期刊名称】《吉林医药学院学报》
【年(卷),期】2001(000)002
【摘要】目的探讨大鼠糖尿病视网膜病变 (DR)早期视网膜毛细血管及视细胞(视感受器 )的病变规律。
方法选择健康成年Wistar大鼠 ,腹腔内注射链脲佐菌素 (STZ)诱导大鼠糖尿病 ,在透射电镜下观察DR早期视网膜血管及视细胞的超微结构改变。
结果病程 1月组 ,周细胞和内皮细胞核异染色质边集 ,视杆细胞膜盘模糊不清 ,间隙略有扩大 ;病程 3月组 ,上述改变加重 ,毛细血管扩张、基底膜增厚 ,视杆细胞核固缩、异染色质浓集 ;病程 6月组 ,上述改变更加严重 ,但毛细血管由扩张转为狭窄、变形 ,甚至闭塞。
结论大鼠DR早期出现视网膜毛细血管和视感受器超微结构的改变 ,并有随病程逐渐加重的趋势
【总页数】1页(P)
【作者】刘学政;李莉霞;萧鸿
【作者单位】锦州医学院人体解剖学教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R361.3
【相关文献】
1.糖尿病早期大鼠视网膜毛细血管及视细胞超微结构变化规律 [J], 刘学政;萧鸿;庞东渤;李瑞祥
2.滋肾健脾化瘀片对糖尿病大鼠早期视网膜超微结构的影响 [J], 王小川;余杨桂
3.rhEPO对早期糖尿病大鼠视网膜超微结构和EPO-R表达的影响 [J], 朱弼珺;王卫峻;许迅
4.早期糖尿病大鼠视网膜毛细血管及视细胞超微结构变化 [J], 萧鸿;刘学政;李永洋;李莉霞;李瑞祥
5.大鼠糖尿病早期视网膜超微结构变化 [J], 刘学政;李莉霞;萧鸿
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正常和早期糖尿病大鼠视网膜的蛋白组学初步研究
功能等等。由于蛋白数量庞大，蛋白的分类及功能论证工作尚未完成，故而无法
复旦大学硕士学位论文
对所有差异蛋白进行全面阐述。本文仅着重探讨了以下几种具有重要意义的蛋白： 高移动族核小体结合域家族的Ｈｍｇｎｌ、酪氨酸３单加氧酶（Ｙｗｈａｇ
第二章所述工作为论证蛋白组学研究视网膜样本的可行性，以及选择恰当的
蛋白组学研究方案，先用正常大鼠神经视网膜样品进行蛋白组学预试验。本实验 中共从６只ＳＤ大鼠、１２只眼的神经视网膜中提取到了蛋白３ ｍｇ，进行２－ＰＡＤＥ 电泳跑胶，考马斯亮蓝染色后得到了清晰的条带和蛋白点。故提示大鼠视网膜的
蛋白组研究对蛋白样品量要求至少达到３ｍｇ以上，才能得到较清晰的结果。也就 是实验设计中要求每组样品至少有６只以上大鼠的双眼视网膜方可达到蛋白组
ａｎ
ｉｍｐｏｒｔａｎｔ
ｉ ｓｓｕｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｐｕｂｌ ｉｃ ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａｌ ｌ ｔｈｅ ｃｏｕｎｔｒｉｅｓ ａｒｏｕｎｄ ｔｈｅ ｗｏｒｌｄ．Ａｂｏｕｔ ２０％ｔｏ ２４％ｏｆ ｔｈｅｓｅ ｔｈｅｒｍｏｒｅ。ｔｈｅ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｃｏｍｐｌ ｉｃａｔｉｏｎｓ ａｆｆｅｃｔ ｔｈｅ ｅｙｅｓ．Ｆｕｒ— ｏｆ ｂｌｉｎｄｎｅｓｓ ｔｈｅ ｍｅｃｈａｎｉ ｓｍ ｔｈｅ
得了很多重大的成就。
本硕士研究生论文工作是复旦大学眼耳鼻喉科医院玻璃体视网膜疾病课题 组与复旦大学上海医学院生物医学平台的合作项目。本研究工作的主要贡献为： 采用ＳＴＺ诱导的糖尿病大鼠模型，对成模早期（成模后Ｉ，２，４，６，８周内）５组时点
及正常大鼠的神经视网膜进行了蛋白组学液相色谱串联质谱分析。研究初步建立 了基本的正常大鼠视网膜的蛋白谱，以此作为研究早期糖尿病大鼠视网膜蛋白表
脑红蛋白在糖尿病大鼠视网膜病变发展中的表达变化
脑红蛋白在糖尿病大鼠视网膜病变发展中的表达变化【摘要】本研究探讨了脑红蛋白在糖尿病大鼠视网膜病变发展中的表达变化。
研究发现，在糖尿病大鼠视网膜病变的发展过程中，脑红蛋白的表达水平发生了明显变化。
脑红蛋白在糖尿病大鼠视网膜病变中具有重要的生理功能，并且受多种因素影响其表达。
研究还揭示了脑红蛋白对糖尿病大鼠视网膜病变的影响。
结论部分指出脑红蛋白在糖尿病大鼠视网膜病变发展中可能具有潜在作用，并对未来研究提出了启示。
值得注意的是，本研究也存在一定的局限性，未来的研究应该进一步完善方法和拓展研究范围。
这些发现对了解糖尿病大鼠视网膜病变的发展机制和寻找新的治疗途径具有重要意义。
【关键词】脑红蛋白、糖尿病、大鼠、视网膜病变、表达变化、生理功能、影响因素、潜在作用、研究展望、局限性、未来研究、研究意义1. 引言1.1 背景介绍糖尿病是一种全球性流行病，其合并症之一是糖尿病视网膜病变。
糖尿病视网膜病变是导致视力损伤和失明的主要原因之一，严重影响患者的生活质量。
在糖尿病视网膜病变的发展过程中，多种因素如高血糖、炎症反应、氧化应激等均起到重要作用。
对于糖尿病视网膜病变发展的分子机制仍存在许多未知。
脑红蛋白是一种重要的神经保护蛋白，在脑部发挥重要作用，具有抗氧化、抗炎症等多种生理功能。
最近的研究表明，脑红蛋白在糖尿病大鼠视网膜病变的发展中可能发生表达变化，但其具体作用机制尚不清楚。
研究脑红蛋白在糖尿病视网膜病变发展中的表达变化及其可能的作用机制对于深入了解糖尿病视网膜病变的发病机制具有重要意义。
本研究旨在探讨脑红蛋白在糖尿病大鼠视网膜病变中的表达变化及其影响，为进一步研究糖尿病视网膜病变的发病机制提供新的理论依据。
1.2 研究目的本研究旨在探究脑红蛋白在糖尿病大鼠视网膜病变发展中的表达变化，并通过深入研究脑红蛋白的生理功能和对糖尿病大鼠视网膜病变的影响，揭示其在疾病发展中可能扮演的角色及其作用机制。
通过研究脑红蛋白的表达变化及影响因素，我们旨在为糖尿病视网膜病变的发病机制提供新的视角和途径，为未来的临床治疗提供新的靶点和策略。
糖尿病早期大鼠视网膜中细胞外信号调节激酶与c-fos的变化及脑源性神经营养因子的作用
糖尿病早期大鼠视网膜中细胞外信号调节激酶与c-fos的变化及脑源性神经营养因子的作用万超;刘宁宁;柳力敏;才娜;陈蕾【期刊名称】《中华实验眼科杂志》【年(卷),期】2012(030)002【摘要】背景研究表明糖尿病患者视网膜的神经病变出现在血管并发症之前,严重危害患者的视力,而神经营养因子对其具有保护作用.目的观察在糖尿病大鼠玻璃体腔内注射脑源性神经营养因子(BDNF)前后大鼠视网膜中BDNF及其受体TrkB、通路蛋白磷酸化细胞外信号调节激酶1/2( p-ERK1/2)、c-fos质量浓度的变化.方法 9周龄雄性健康Wistar大鼠按随机数字表法随机分为BDNF治疗组、糖尿病对照组和正常对照组,每组20只.BDNF治疗组、糖尿病对照组大鼠应用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射制成糖尿病模型,BDNF治疗组大鼠于成模后2周开始向玻璃体腔内注射1 g/L BDNF溶液5μl.于成模后4周处死全部大鼠,取出眼球进行BDNF原位杂交,计数视网膜中BDNF阳性细胞数.采用ELISA抗体夹心法检测视网膜中TrkB、p-ERK1/2以及c-fos蛋白质的质量浓度. 结果糖尿病对照组大鼠视网膜中BDNF阳性细胞数目明显少于正常对照组及BDNF治疗组,且染色浅,3个组BDNF阳性细胞数及阳性细胞灰度值比较差异均有统计学意义(F=102.36、92.55,P＜0.05).3个组TrkB、p-ERK1/2及c-fos表达的比较,差异均有统计学意义( F=92.54、95.46、94.84,P＜0.05).糖尿病对照组较正常对照组及BDNF治疗组TrkB质量浓度降低,而通路蛋白p-ERK1/2、c-fos质量浓度升高(P＜0.05)；正常对照组与BDNF治疗组间上述3个指标比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论在糖尿病早期,大鼠视网膜中BDNF mRNA水平及其受体TrkB蛋白质量浓度降低,其下游通路蛋白p-ERK1/2、c -fos质量浓度升高,玻璃体腔内注射BDNF可逆转上述变化.%Background Recent studies showed that diabetic retinal neuropathy is an earlier and more dangerous complication and neurotrophin has a protective effect on retina. Objective The present study was to observe the changes of brain derived neurotrophic factor (BDNF),its receptor TrkB,signal pathway protein phosphatized extracellular signal-regulated protein kinase1/2 (p-ERK1/2) and c-fos in the retina after injection of BDNF into the vitreous in STZ induced Wistar diabetic rats. Methods Wistar rats aged 9 weeks-old were randomly divided into BDNF injection group,diabetes mellitus (DM) control group and normal control group and 20 rats for each group.STZ was intraperitoneally injected in the rats of BDNF injection group and DM control group to create the experimental DM.BDNF was intravitreously injected in the rats of BDNF group 2 weeks after administration of STZ in three-day interval for 5 times,and BSS containing O.1％ bovine serum albumin (BSA) was used at the same way in the DM control group and normal control group.The retina was isolated for hybridization in situ for BDNF,and TrkB,p-ERK1/2 and c-fos.Levels in retina were detected using sandwich method ELISA. Results The number of BDNF positive cells and the gray scale were lower obviously in the rat retina of DM control group than those of BDNF injection group and normal control group,showing significant differences among the 3 groups ( F =102.36,92.55 ;P＜0.05 ).ELISA assay showed that TrkB,p-ERK1/2 and c-fos values in retina were statistically significantly different among the 3 groups ( F =92.54,95.46,94.84,P＜0.05 ).The TrkBlevel in retina was statistically reduced,but the p-ERK1/2 and c-fos levels in retina were increased statistically in DM control group compared with BDNF injection group and normal control group( P＜0.05 ).No statistical difference was found in TrkB,p-ERK1/2 and c-fos values between the BDNF injection group and normal control group(P＞0.05). Conclusions The injection of BDNF into the vitreous cavity can protect retina from downregulating BDNF and TrkB levels and up-regulating the p-ERK1/2 and c-fos protein levels in the early stage of DM.【总页数】4页(P107-110)【作者】万超;刘宁宁;柳力敏;才娜;陈蕾【作者单位】110001 沈阳,中国医科大学附属第一医院眼科;110001 沈阳,中国医科大学附属第一医院眼科;110001 沈阳,中国医科大学附属第一医院眼科;110001 沈阳,中国医科大学附属第一医院眼科;110001 沈阳,中国医科大学附属第一医院眼科【正文语种】中文【相关文献】1.脑源性神经营养因子对糖尿病大鼠视网膜Müller细胞的保护作用 [J], 梁汇珉;李赵伟;李铮;左中夫;刘学政2.糖尿病早期大鼠视网膜中细胞外信号调节激酶与c-fos的变化及脑源性神经营养因子的作用 [J], 万超;刘宁宁;柳力敏;才娜;陈蕾3.腺病毒介导的脑源性神经营养因子对早期糖尿病大鼠神经视网膜病变的影响 [J], 万超;刘宁宁;柳力敏;才娜;陈蕾4.糖尿病早期大鼠视神经的变化以及脑源性神经营养因子BDNF的治疗作用 [J],卢艳;张婧;孙异临;王蓉;李林5.脑源性神经营养因子对糖尿病大鼠早期神经视网膜病变的影响 [J], 万超;陈蕾因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
糖尿病性视网膜病变
糖尿病性视网膜病变糖尿病性视网膜病变是一种糖尿病患者常见的并发症，是由于糖尿病引起的视网膜受损的疾病。
糖尿病性视网膜病变通常分为非增殖性和增殖性两种类型。
非增殖性糖尿病性视网膜病变是最常见和最早出现的类型，它通常不需要治疗。
增殖性糖尿病性视网膜病变是由于毛细血管新生和渗漏所引起的，通常需要治疗。
糖尿病是一种慢性代谢性疾病，会对全身各个组织和器官造成损伤，包括视网膜。
糖尿病患者易患糖尿病性视网膜病变，尤其是那些糖尿病已存在相当时间的患者，并且在一定程度上失去了控制糖尿病的能力。
糖尿病性视网膜病变最早的症状可能是在视力上的小改变，甚至可以被视为渐进的和持续的。
不过，有时病症可能没有明显症状，这意味着患者可能需要在视力正常时就要接受视网膜检查。
糖尿病患者一般需要每年接受一次视网膜检查，以便及早发现和治疗糖尿病性视网膜病变。
非增殖性糖尿病性视网膜病变的特征是微血管堆积，对视力的影响往往很小或者没有明显症状。
这种类型的病变不需要治疗，但是病人需要进行常规的眼科检查，以便及时发现病情的变化。
增殖性糖尿病性视网膜病变的特征是毛细血管新生，可以导致渗漏和出血，并对视力造成更加显著的影响。
当毛细血管开始生长到视网膜表面时，这种类型的病变通常会引起严重的视力障碍。
患者可能会看到模糊的影像、黑色点或线，或者出现影像消失的情况，如果不及时治疗，患者可能会出现失明。
治疗糖尿病性视网膜病变需要针对不同类型的病变采取不同的方法。
对非增殖性病变，我们通常会密切监测和控制糖尿病，并通过调节胆固醇和血压来降低病变的风险。
对增殖性病变，可以采用激光治疗、手术治疗、注射药物等方式来逆转病变，这些疗法的效果通常取决于病变的程度和类型。
患者也需要注意饮食、控制体重、定期运动等，以保持身体健康。
总之，糖尿病性视网膜病变是一种常见并危险的糖尿病并发症。
病人应该及时接受视网膜检查，以及时发现和治疗病变的迹象。
合理的治疗和管理可以减轻病人的痛苦，防止视力受损，提高生活质量。
《糖尿病人早期视网膜神经纤维层变化研究》
《糖尿病人早期视网膜神经纤维层变化研究》糖尿病早期视网膜神经纤维层变化研究一、引言糖尿病作为一种慢性疾病，其主要特点在于长时间的高血糖状态对全身各器官和系统产生严重影响。
视网膜作为视觉系统的关键部分，在糖尿病的病程中，其神经纤维层可能发生早期变化。
本文旨在探讨糖尿病人早期视网膜神经纤维层的变化情况，以及这一变化对早期发现糖尿病视网膜病变的影响。
二、糖尿病与视网膜神经纤维层的变化视网膜主要由多种类型的神经元组成，这些神经元通过复杂的网络连接形成神经纤维层。
糖尿病患者的视网膜神经纤维层在早期就可能出现变化，包括神经纤维的形态改变、数量减少等。
这些变化在初期可能并不明显，但随着病情的发展，这些改变可能进一步影响视网膜的正常功能，进而引发视力问题。
三、研究方法本研究采用了高分辨率的眼科影像学技术对糖尿病人和正常人的视网膜神经纤维层进行了对比分析。
具体包括：1. 收集样本：选取一定数量的糖尿病患者和健康人作为研究对象。
2. 影像学检查：使用高分辨率的眼底图像技术对所有研究对象的视网膜进行扫描，获取视网膜神经纤维层的图像。
3. 数据分析：对获取的图像进行量化分析，比较糖尿病组和正常组在视网膜神经纤维层上的差异。
四、结果通过对数据的分析，我们发现：1. 糖尿病患者的视网膜神经纤维层在早期就可能出现形态上的改变，包括神经纤维的变细、扭曲等。
2. 与健康人相比，糖尿病患者的视网膜神经纤维数量在早期就有明显的减少。
3. 视网膜神经纤维层的改变与糖尿病的病程、血糖控制情况等因素密切相关。
病程越长、血糖控制越差的患者，其视网膜神经纤维层的改变越明显。
五、讨论本研究表明，糖尿病患者在早期就可能出现视网膜神经纤维层的变化。
这些变化可能与糖尿病的病程、血糖控制情况等因素密切相关。
因此，对于糖尿病患者而言，定期进行眼底检查，观察视网膜神经纤维层的变化，对于早期发现糖尿病视网膜病变具有重要意义。
六、结论本研究通过高分辨率眼科影像学技术对糖尿病人和正常人的视网膜神经纤维层进行了对比分析，发现糖尿病患者在早期就可能出现视网膜神经纤维层的变化。
糖尿病视网膜病变：专家共识解读
糖尿病视网膜病变：专家共识解读糖尿病视网膜病变（Diabetic Retinopathy，简称DR）是糖尿病最常见的微血管并发症之一，我国糖尿病患者已超过1亿，其中约30%～40%的患者伴有视网膜病变。
这一严峻形势促使我国眼科学界对糖尿病视网膜病变进行了深入研究，并形成了专家共识。
专家共识指出，糖尿病视网膜病变的病理机制主要包括微循环障碍、神经功能障碍和纤维组织增生。
微循环障碍导致视网膜毛细血管壁损伤，神经功能障碍使视网膜神经细胞受损，纤维组织增生则导致视网膜病变加重。
在糖尿病视网膜病变的早期阶段，患者可能没有任何自觉症状，但通过眼底检查可以发现微血管病变。
随着病情的进展，患者可出现视力模糊、视物变形等症状。
此时，糖尿病视网膜病变已进入中晚期，治疗难度较大，视力恢复效果不佳。
专家共识强调，早期筛查和干预是预防糖尿病视网膜病变的关键。
对于糖尿病患者，建议在确诊后立即进行眼底检查，以后每隔1～2年进行一次复查。
对于高风险患者，如年龄大于60岁、病程较长、血糖控制不佳等，应缩短筛查间隔。
在治疗方面，专家共识推荐了多种治疗方法，包括药物治疗、激光治疗和手术治疗。
药物治疗主要用于早期糖尿病视网膜病变，如抗血管内皮生长因子（VEGF）药物、抗血小板药物等。
激光治疗是糖尿病视网膜病变中晚期患者的首选治疗方法，通过激光凝固病变区域，减轻视网膜病变程度。
手术治疗主要用于严重糖尿病视网膜病变患者，如玻璃体切割术、视网膜移植等。
让我们通过一个实际案例来进一步了解糖尿病视网膜病变的防治。
张先生，50岁，糖尿病患者，因“视力下降”就诊。
经检查发现，张先生患有糖尿病视网膜病变，处于早期阶段。
医生建议他进行眼底检查，并定期复查。
同时，给予抗VEGF药物治疗，以减轻视网膜病变程度。
张先生遵循医嘱，定期复查并接受药物治疗，病情得到有效控制。
重点和难点解析：在上述文档中，有几个关键细节需要我们特别关注。
糖尿病视网膜病变（DR）是糖尿病最常见的微血管并发症之一。
VEGF和PEDF的基因多态性与增殖型糖尿病视网膜病变的关系的开题报告
VEGF和PEDF的基因多态性与增殖型糖尿病视网
膜病变的关系的开题报告
研究背景：
增殖型糖尿病视网膜病变（PDR）是糖尿病患者中常见的一种眼病，它是由糖尿病引起的视网膜新生血管生长所致的。
研究表明，血管内皮
生长因子（VEGF）和视黄醇脱酸酶（PEDF）是导致PDR的两个重要因素。
近来的研究认为，VEGF和PEDF的基因多态性也与糖尿病视网膜病
变的发生和发展有关。
研究目的：
本研究旨在探讨VEGF和PEDF基因多态性与增殖型糖尿病视网膜病变发生的关系。
研究内容与方法：
采用病例对照的横断面研究设计，招募100例糖尿病患者作为病例组，另选取100例无糖尿病和视网膜病变的健康人作为对照组。
对所有
研究对象进行基因分型分析，检测VEGF和PEDF基因的多态性，包括单核苷酸多态性（SNP）和多重等位基因（MAF）。
通过卡方检验和逻辑回归分析，探究VEGF和PEDF基因多态性与PDR发生的关系。
研究意义：
本研究可为PDR的防治提供重要的遗传学依据，为临床治疗和疾病
预防提供一定的理论基础。
同时，它也为PDR的分子机制探讨提供了新
的思路和角度。
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糖尿病大鼠视网膜早期病变中PDGF(一)
作者：刘丽娟，李茂欣，汤旭磊，高林，朱任之
【关键词】糖尿病视网膜病变
ExpressionofPDGFBinretinaofratswithearlystagediabeticretinopathy
【Abstract】
AIM:ToobservetheexpressionofplateletderivedgrowthfactorBchain(PDGFB)mRNAintheretinaofdia
beticratsattheearlystageofdiabeticretinopathy.METHODS:Atotalof60healthyadultmaleWistarratsw
ererandomlydividedintocontrolanddiabeticgroups.Streptozotocin（60mg/kg）
wasinjectedintothetailveintoinducediabetesin35ratsindiabeticgroup,while25ratsincontrolgroupw
eretreatedwiththesamevolumeofcitricacidbuffersolution.Onthe3rddayafterinjection,theratswhos
eurineglucosewasmorethan++andfastingbloodglucose≥16.7mmol/Lwerechosenaslaboratoryobjec
ts.Attheendof1st,2ndand3rdmonths,6ratsinbothgroupswererandomlysacrificedandtheretinaswer
edissectedandtotalRNAwasisolatedforthedetectionofmRNAforPDGFBbysemiquantitativereversetr
anscriptionpolymerasechainreaction(RTPCR).Theretinasoftheotherratsinbothgroupsweretakenan
dpreparedastheultrathinandobservedbytransmissionelectronmicroscope.RESULTS:ThelevelsofmR
NAencodingPDGFBintheretinasofdiabeticratsweresignificantlyhigherthanthoseincontrolsateachob
servedtimepoint
（P0.05orP0.01attheendof1stand3rdmonth）.Obviousultrastructuraldamages,whichwereinrelati
ontothecourseofdiabetes,couldbeseenintheretinasofdiabeticrats.CONCLUSION:Diabetesupregulat
esPDGFBmRNAlevelsintheretinasofdiabeticratsinatimedependentmanner.
【Keywords】diabeticretinopathy；pericyte；plateletderivedgrowthfactorBchain；RTPCR
【摘要】目的：探讨血小板源生长因子B（PDGFB）mRNA表达水平在糖尿病(DM)大鼠视网
膜中的变化规律及其作用.方法：雄性Wistar大鼠60只，随机分为正常对照组（25只）与
造模组（35只）.造模组以链脲佐菌素(STZ)尾iv，3d后测定血糖≥16.7mmol/L，尿糖以上者
定为DM大鼠.分别于造模成功后1，2，3mo末各组随机取6只大鼠，采用半定量逆转录聚
合酶链反应（RTPCR）方法检测PDGFBmRNA在大鼠视网膜中的表达水平；电镜观察DM大
鼠视网膜超微结构的改变.结果：随着病程的延长，视网膜中PDGFBmRNA表达水平在DM组
明显升高，与正常对照组相比于造模后1mo末时即差异具有统计学意义（P＜0.05），3mo
末时差异显著（P0.01）；DM大鼠视网膜超微结构的损害随病程进展逐渐加重.结论：
PDGFBmRNA在视网膜中的表达水平随DM病程进展逐步升高.
【关键词】糖尿病视网膜病变；周细胞；血小板源生长因子B；逆转录聚合酶链反应
0引言
视网膜周细胞的渐进性功能丧失及死亡为糖尿病(diabetesmelitus,DM)视网膜病变
（diabeticretinopathy,DR）的早期典型病理特征.周细胞对于保持微血管形态与功能的完整都
有重要作用，缺乏周细胞将导致内皮细胞增生及血管形态异常〔1〕，并且促使DR进展〔2〕.
血小板源生长因子B（plateletderivedgrowthfactorB，PDGFB）是周细胞最重要的生长因子，
与周细胞表达的受体PDGFRβ结合维持着周细胞的密度和数量.PDGFB可以显著减少因缺血
缺氧导致的周细胞死亡、减少缺氧对体外培养的视网膜微血管的损害〔3〕.因此，探讨PDGFB
在早期DR中表达的变化规律及其作用，可为DR的早期检测、防治提供理论依据.
1材料和方法
1.1材料
雄性Wistar大鼠60只，体质量(200±20)g，由兰州军区总医院实验动物中心提供；链脲佐菌
素（streptozotocin,STZ）（美国Alexis公司）；Trizol（BBI产品）；罗氏血糖仪及试纸条；PDGFB
的引物为：5＇CGCTCCTTTGATGACCTTC3＇,5＇GCACTCGGCGATTACGG3＇（长177bp），βactin
引物为：5＇GAGGGAAATCGTGCGTGAC3＇,5＇GGAGCCAGGGCAGTAATC3＇（长351bp），由大
连宝生物公司合成；Takara一步法RTPCR试剂盒；PE2400型PCR仪（AppliedBiosystems公
司）；UVIpro凝胶成像与分析系统（华粤公司）.
1.2方法
雄性Wistar大鼠60只，体质量(200±20)g，随机分为正常对照组（25只）与造模组（35只）.
造模组禁食12h后，将STZ以0.1mol/L，pH4.4柠檬酸缓冲液溶解配制成20g/L的溶液后以
60mg/kg一次性尾iv，正常对照组仅注射等体积的柠檬酸缓冲液.3d后尾静脉采血测定血糖
≥16.7mmol/L，尿糖以上者定为DM大鼠，分笼喂养，以后每2wk称体质量、测血糖2次取
均值.DM组和对照组大鼠均喂养普通颗粒饲料，实验期间自由摄食饮水，自然昼夜照明.于
造模后1，2，3mo末DM大鼠组随机取2只大鼠用作电镜观察.摘取眼球、剥离视网膜组织
切成15mm×15mm的小块,25g/L戊二醛固定2h,10g/L锇酸后固定1h,梯度乙醇脱水,环氧树脂
包埋,聚合LKB超薄切片机切片,醋酸双氧铀及枸椽酸铅双重染色,于日本JEM100CX透射电镜
下观察.分别于造模后1，2，3mo末各组取大鼠6只，称体质量、测空腹血糖后处死轻摘眼
球，剥离视网膜，每2只眼为一组，将分离的视网膜置于去RNA酶的冻存管中，液氮中保
存待用.Trizol提取视网膜总RNA，测定纯度及含量，10mL/L甲醛变性凝胶电泳测定其完整性.
按Takara一步法RTPCR试剂盒说明操作，反应条件均为逆转录过程50℃30min；94℃预变
性3min；扩增94℃30s;50℃30s;72℃1min;30个循环；72℃延伸7min.PCR产物以15g/L琼脂
糖电泳.以UVIpro凝胶成像与分析系统检测电泳结果，以PDGFB与βactinPCR产物DNA条带
的像素亮度总和之比作为反映PDGFBmRNA水平的相对指标.
统计学处理：数据用SPSS10.0进行统计学分析，采用成组设计资料两样本均数比较t检验,
结果以x±s表示.P＜0.05表示差异有统计学意义.