不同浓度透明质酸水凝胶对骨形态发生蛋白2基因修饰的BMSCs特性的影响
透明质酸水凝胶包裹骨髓间充质干细胞改善心肌梗死大鼠的心功能(Ⅱ)
《中国组织工程研究》Chinese Journal of Tissue Engineering Research VSy/^/S .不开穷障著透明质酸水凝胶包裹骨髓间充质干细胞改善心肌梗死大鼠的心功能(II)八商青青1'2,周建业2(1滨州医学院附属医院疼痛科，山东省滨州市256603;2中国医学科学院，北京协和医学院，国家心血管病中心,阜外心血管病医院，心血管疾病国家重点实验室，北京市100037)DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2106ORCID:0000-0002-3332-2642(商青青)文章快速阅读:文章特点一(1)从组织学水平变化证实了透明质酸水凝胶作为骨间充质干鈿胞移植的载体促进了大亂心肌梗死后心脏修复及心功能的改善；(2)二者联合应用可使梗死区室壁厚度增厚，而且療痕及胶原沉积减少，新生血管和存活心肌增多，发挥了修复受损心脏的義大效应。
结论：在组织学水平，透明质酸水凝胶包裹骨聽间充质干细胞取得修复梗死心肌的最大效应.实验动物造模：(1)建立雌性大鼠心肌梗死模型；(2)1周后行超声检测,符合条件者按以下分组行心肌注射。
分组：(1)PBS对照组：心肌内注射50pL PBS;⑵水凝胶组：心肌内注射50|JL透明质酸水凝胶；(3)细胞组：心肌内注射用50|j LPBS溶解的1^()6个骨髓间充质干细胞；⑷细胞+水凝胶组：心肌内注射用50pL透明质酸水凝胶包封的1x106个骨髓间充质干细胞。
XL检测指标：7—1移植后4周，苏木精-伊红染色、Masson1染色及免疫组化染色评价心脏的血管再生、心肌保护以及心室重塑。
商青青，女，1987年生，山东省巨野县人，汉族，2014年北京协和医学院毕业，硕士，主要从事慢性疼痛及心血管组织工程研究。
现工作单位为滨州医学院附属医院疼痛科。
通讯作者：周建业，硕士，教授，中国医学科学院，北京协和医学院，国家心血管病中心，阜外心血管病医院，心血管疾病国家重点实验室，北京市100037文题释义：透明质酸：是一种线性的糖胺聚糖，在多种天然组织细胞外基质中含量丰富，参与细胞黏附、迁移、增殖及分化，在机体组织水分保持、关节润滑和损伤修复过程中发挥重要作用。
骨髓间充质干细胞研究与应用概况
骨髓间充质干细胞研究与应用概况于雷;高俊玲【摘要】骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal cells,BMSCs)是当下热点研究对象之一。
1867年德国病理学家Cohnheim教授[1]在研究创口愈合过程中发现骨髓中存在一种非造血系统的多潜能细胞,但研究因为条件原因未能深入。
后来有研究者[2]在20世纪60年代开展一系列开创性研究,发现从骨髓中分离得到长梭状、成纤维细胞样的细胞群,在塑料培养皿中呈集落样贴壁生长;1987年,又发现这种骨髓单核细胞可在一定的条件下分化为成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞和成肌细胞。
培养增殖二十代后仍保有其多向分化的潜能。
于是把这种多能细胞称为间充质干细胞(mesenchyma stem cell,MSC)。
【期刊名称】《华北理工大学学报：医学版》【年(卷),期】2018(020)002【总页数】5页(P164-168)【关键词】骨髓间充质干细胞;肺纤维化;缺血性脑卒中【作者】于雷;高俊玲【作者单位】[1]华北理工大学基础医学院,河北唐山063000;[1]华北理工大学基础医学院,河北唐山063000;【正文语种】中文【中图分类】R329.2骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal cells，BMSCs)是当下热点研究对象之一。
1867年德国病理学家Cohnheim教授[1]在研究创口愈合过程中发现骨髓中存在一种非造血系统的多潜能细胞，但研究因为条件原因未能深入。
后来有研究者[2]在20世纪60年代开展一系列开创性研究，发现从骨髓中分离得到长梭状、成纤维细胞样的细胞群，在塑料培养皿中呈集落样贴壁生长；1987年，又发现这种骨髓单核细胞可在一定的条件下分化为成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞和成肌细胞。
培养增殖二十代后仍保有其多向分化的潜能。
于是把这种多能细胞称为间充质干细胞(mesenchyma stem cell，MSC)。
基于透明质酸的复合水凝胶修复骨关节炎软骨损伤：应用与机制
二、制备方法
3、制备水凝胶：将前驱体溶液浇铸到预定形状的模具中，然后进行分离、干 燥等工艺，最终得到水凝胶成品。
三、特性分析
三、特性分析
基于透明质酸构建的水凝胶具有以下特性： 1、机械性能：透明质酸水凝胶具有优异的弹性和机械强度，能够承受一定的 外界压力和拉伸力。
三、特性分析
2、化学稳定性：透明质酸水凝胶对酸碱和酶有较强的稳定性，不易发生降解 和变质。
基于透明质酸构建的水凝胶应用 于细胞膜片的复合及抗菌敷料
一、背景介绍
一、背景介绍
透明质酸是一种天然高分子聚合物，广泛存在于人体结缔组织中，具有优良 的生物相容性和保湿性能。水凝胶是一种由水溶性聚合物形成的新型生物材料， 具有三维网络结构，能够保持一定的形状和体积。在医学领域，透明质酸和水凝 胶结合使用，可以发挥两者的优势，为细胞膜片的复合和抗菌敷料的应用提供有 效的解决方案。
研究现状
研究现状
近年来，越来越多的研究表明，透明质酸在骨关节炎软骨损伤修复中发挥重 要作用。实验设计方面，研究者多采用兔、狗、鼠等动物模型来模拟骨关节炎病 变，通过对其软骨损伤部位进行透明质酸局部注射或水凝胶植入，观察其疗效及 作用机制。在临床试验方面，已有报道显示，基于透明质酸的复合水凝胶对于骨 关节炎软骨损伤具有显著的治疗效果。
相比之下，明胶海藻酸盐复合微球在修复效果和生物活性方面表现出更大的 优势。一方面，复合微球具有更加丰富的内部孔结构和更大的比表面积，能够提 供更好的细胞生长和增殖环境；另一方面，明胶海藻酸盐复合微球还具有优异的 吸水性和保水性，可以为受损软骨组织提供更好的保湿环境，促进细胞的粘附和 分化。
内容摘要
结论与展望
展望未来研究方向，我们建议进一步深入研究透明质酸复合水凝胶的作用机 制，以便为其在骨关节炎临床治疗中的应用提供更多理论依据。同时，可以探索 优化复合水凝胶的制备工艺和控释性能，提高其临床应用效果和安全性。此外， 随着3D打印技术的不断发展，可以尝试将透明质酸复合水凝胶与3D打印技术相结 合，实现个性化、精准化的骨关节炎治疗。这将为骨关节炎软骨损伤修复研究开 辟新的领域和前景。
负载BMP-2组织工程骨修复骨缺损的研究进展
负载BMP-2组织工程骨修复骨缺损的研究进展符来想【摘要】组织工程骨修复骨缺损是当前研究的热点.骨形态发生蛋白(BMP)具有强大的促成骨活性,能够诱导间充质细胞不可逆地分化为骨、软骨组织;BMP-2是成骨能力最强的BMP之一,目前已被广泛应用于骨组织工程领域,并且展现出良好的应用前景.在此分析了近年来BMP-2在骨组织工程中应用研究的文献,概述国际上关于负载BMP-2组织工程骨研究现状及临床应用进展.%Repairing bone defects using tissue engineered bone has become a hot spot. There is a strong osteomductive potentiality in bone morphogenetio protem( BMP ), which could induce the irreversible differentiation of mesenchymal cells into bone and cartilage. BMP-2 is one of BMPs with the most osteoinductive potentiality, which has been widely used in the bone tissue engineering presenting an excellent application prospect. Here reviews literatures published in recent years on the application of BMP-2 in bone tissue engineering , and summarizes the research progress and clinical applications of repairing bone defects with BMP-2 loaded tissue engineered bone.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2013(019)004【总页数】4页(P590-593)【关键词】骨形态发生蛋白2;组织工程骨;骨缺损【作者】符来想【作者单位】中国人民解放军第一零五医院骨一科,合肥,230031【正文语种】中文【中图分类】R68骨缺损的修复一直是骨科领域的一大难题。
不同浓度重组人骨形成蛋白2对人胎盘问充质干细胞增殖和碱性磷酸酶表达的影响
ｃｅｌｌｓ Ｌ／Ａ０ Ｘｉａｏ—ｙｕ ，ＰＥＮＧ Ｊｕｎ，ＳＯＮＧ Ｙａｎｇ，ＬＩ Ｙａｎ． Ｇｕａｎｇｈｕａ Ｓｃｈｏｏｌ ｏ厂Ｓｔｏｍａｔｏｌｏｇｙ，Ｈｏｓｐｉｔａｌ ０厂 Ｓｔｏｍａｔｏｌｏｇｙ， Ｓｕｎ Ｙａｔ—ｓｅｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｉａ！ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｓｔｏｍａｔｏｌｏｇｙ，
ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ ２ （ｒｈＢＭＰ一２）ｏｎ ｃｅｌｌ ｐｅｒｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ （ＡＬＰ）ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｐｌａｃｅｎｔａ—ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ （ＨＰＤＭＳＣｓ）．Ｍ ｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ＨＰＤＭＳＣｓ ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ
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中华 口腔医学研究杂志（电子版）２０１２年 ８月第 ６卷第 ４期 Ｃｈｉｎ Ｊ Ｓｔｏｍａｔｏｌ Ｒｅｓ（Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ Ｅｄｉｔｉｏｎ），Ａｕｇｕｓｔ ２０１２，Ｖｏ１．６，Ｎｏ．４
重组人甲状旁腺素对人骨髓间充质干细胞表达骨形态发生蛋白2的影响
重组人甲状旁腺素对人骨髓间充质干细胞表达骨形态发生蛋白2的影响目的：探讨不同浓度的重组人甲状旁腺素（hPTH1-34）对人骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic protein 2，BMP2）表达的影响。
方法：培养人骨髓间充质干细胞，分为空白对照组、阳性对照组、hPTH1-34组（共3组，PTH浓度分别为40 μg/L、400 μg/L、4000 μg/L组）。
给药后第4、7、14天检测碱性磷酸酶活性、BMP2的表达。
结果：给药第7、14天，较高剂量组（4000 μg/L、400 μg/L）碱性磷酸酶活性较低剂量组（40 μg/L）有下降。
给药第14天，所有给药组的碱性磷酸酶活性均低于阳性对照组（P＜0.05）。
给药第7、14天，较高剂量组（4000 μg/L、400 μg/L）的BMP2含量低于低剂量组（40 μg/L）（P ＜0.05）。
hPTH1-34低剂量组（40 μg/L）BMP2浓度较空白对照组明显高（P＜0.05）。
结论：在一定浓度范围内，hPTH1-34间歇用药有促成骨细胞增生与分化作用，并呈时间依赖性；超过一定浓度后则反而抑制成骨细胞的增殖与分化。
[Abstract] Objective：To detect the effect of recombinant human parathyroid hormone（hPTH1-34）on the expression of bone morphogenetic protein 2（BMP2）in human bone marrow mesenchymal stem cells.Method：The cultured human bone marrow mesenchymal stem cells（MSCs）were divided into blank control group，positive control group，hPTH1-34 group（the concentrations were 40 μg/L，400 μg/L，4000 μg/L group）.The alkaline phosphatase activity and the concentration of BMP2 were detected in the 4th，7th and 14th day after administration.Result：In the 7th and 14th day，the alkaline phosphatase activity of high dose group（4000 μg/L，400 μg/L）were lower than low dose group（40 μg/L）.In the 14th day，the activities of the alkaline phosphatase in all hPTH1-34 groups were lower than the positive control group.In the 7th and 14th day，the BMP2 concentration in high dose group（4000 μg/L，400 μg/L）were lower than low dose group（40 μg/L）.The BMP2 concentration in low dose group（40 μg/L）was significantly higher than the control group.Conclusion：In a certain concentration range，intermittent medication of hPTH1-34 can promote the proliferation and differentiation of osteoblast in a time-dependent manner.However，when exceeding certain concentration，hPTH1-34 can inhibit the proliferation and differentiation of osteoblasts.[Key words] Recombinant human parathyroid hormone；Human bone marrow mesenchymal stem cells；Bone morphogenetic protein 2目前对于骨质疏松的治疗主要包括三个方面，（1）减少或延缓骨吸收：常用双膦酸盐类、降钙素类、雌激素类和选择性雌激素受体调节剂等；（2）活性维生素D、维生素K、锶盐、钙剂和中药等则通过其他途径改善骨量；（3）增加骨重建的药物包括氟化物、PTH（parathyroid hormone，甲状旁腺素）、他汀类和锶盐等[1]。
BMP转染骨髓间充质干细胞治疗骨缺损的研究进展
仍是亟待解决的问题。利用基因转移技术将编码 ＢＭＰ一２的基因片段转移至ＭＳＣｓ中，有可能为上述 问题的解决提供新的思路。胡运生等１２０１采用腺病毒 表达载体Ａｄｅｎｏ—ＸＴＭ将ｈＢＭＰ一２基因导入兔骨 髓间充质干细胞，利用免疫组化染色检测细胞ＢＭＰ 一２的表达，然后通过Ｍ，ｒｒ法分析其对细胞增殖的 影响，并分别通过体外检测Ｉ型胶原合成与表达情 况、碱性磷酸酶染色和钙结节Ｙｏｎ Ｋｏｓｓａ染色，观察 腺病毒介导ｈＢＭＰ一２基因转染兔ＢＭＳＣｓ的成骨分 化能力。结果显示，ｈＢＭＰ一２基因转染ＭＳＣｓ后可获 得稳定表达，且基因表达产物能促进ＭＳＣｓ增殖，并
ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ
Ｂｌｏｏｄ
ｐａｔｉｅｎｔｓ【Ｊ】．Ｂｉｏｌ
３８９—３９８． １ｌ Ａｒｉｎｚｅｈ Ｔ
Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ，２００５，ｌｌ（５）：
Ｌ。ｎ吐ｅｒ Ｓ Ｊ，Ａｗｈａｍｂａｕｌｔ Ｍ Ｐ。ｅｔ ａ１．ＡＩｌｏｇｅｎｅｉｃ ｂｏｎｅ ｉｎ
ａ
ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃ婀ｌｌｓ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅ ｎｉｎｅ ｓｅｇｍｅｎｔａｌ
代骨缺损已成为一种研究趋势，而利用ＭＳＣｓ来源
广泛、对机体损伤小、容易分化等优点将其作为骨组 织工程的种子细胞，在体外或者体内一定条件下使 其定向分化为成骨细胞用于骨缺损的治疗是又一个 新的研究方向。在ＭＳＣｓ向成骨细胞分化过程中，需
化和基质分泌，在体内外均可诱导ＭＳＣｓ向成骨细
胞转化１１８，１９１。但在组织工程化骨的构建过程中如何 保证ｈＢＭＰ一２的持续释放及发挥其诱导成骨功能
诱导其向成骨细胞分化。李建军等１２１评价携带骨形
态发生蛋白２基因的重组腺病毒（Ａｄ—ＢＭＰ一２）转 染人骨髓间充质干细胞（ＭＳＣ）对其成骨分化的影 响，发现转染后细胞稳定表达ＢＭＰ－２基因，核心结
骨形态发生蛋白2抑制骨髓间充质干细胞成脂分化的优选浓度
骨形态发生蛋白2抑制骨髓间充质干细胞成脂分化的优选浓度陈明;张涛;刘俊;李志云;闵燕【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2016(020)045【摘要】BACKGROUND:Bone morphogenetic protein 2 cannot only promote osteogenesis, but also at different concentration ranges regulate the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cel s into adipocytes. Therefore, it is very important for the prevention and treatment of osteoporosis, if the range of concentrations of bone morphogenetic protein 2 can be found to regulate the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cel s into adipocytes, after the induction of bone marrow mesenchymal stem cel s. <br> OBJECTIVE:To determine the optimal concentration of bone morphogenetic protein 2 to inhibit the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cel s into adipocytes. <br> METHODS:Bone marrow samples were obtained from the femur and tibia of rats. Primary cultured bone marrow mesenchymal stem cel s were obtained by adherent culture method in vitro. Flow cytometry was used to identify the surface antigens of passage 2 bone marrow mesenchymal stem cel s. Cel s at passages 2 and 3 were taken and cultured in adipogenic induction medium for 3 days fol owed by the addition of 0.5, 5, 50, 100, 200μg/L bone morphogenetic protein 2, or culture medium of bonemarrow mesenchymal stem cel s (control group), respectively. <br> RESULTS AND CONCLUSION:Bone marrow mesenchymal stem cel s cultured were identified by the flow cytometry. Oil red O staining results showed that the increasing number of lipid droplets was shown in bone marrow mesenchymal stem cel s induced by bone morphogenetic protein 2 under the increasing concentration of 0.5 to 50μg/L;while the number of lipid droplets in bone marrow mesenchymal stem cel s decreased after 17 days of induction with bone morphogenetic protein 2 under the concentration of 100 to 200μg/L. These findings indicate that 100μg/L bone morphogenetic protein 2 can inhibit adipogenic differentiation of bone marrow mesenchymal stem cel , so as to reduce the formation of adipocytes in rats. Therefore, 100μg/L bone morphogenetic protein 2 is better to inhibit adipogenic differentiation of bone marrow mesenchymal stem cel s.%背景：骨形态发生蛋白2既可以促进成骨，在不同浓度范围又可以调控骨髓间充质干细胞成脂分化的趋势。
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不同浓度透明质酸水凝胶对骨形态发生蛋白2基因修饰的BMSCs特性的影响麻凤玉;吴彬;章旭;管大凡;齐豹;孟纯阳【摘要】目的探讨不同浓度透明质酸水凝胶(hyaluronic acid hydrogel,HAH)包封携带骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)基因的腺病毒载体(Ad-BMP-2)转染兔骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)后对细胞形态、增殖活性及蛋白表达的影响.方法提取、培养BMSCs;通过成骨、成脂诱导分化及细胞表面抗原检测对BMSCs进行鉴定.体外制备不同浓度的HAH并构建携带BMP-2腺病毒载体转染至BMSCs.实验分为5组:0g/L HAH+Ad-BMP-2 BMSCs组、2g/L HAH+Ad-BMP-2 BMSCs组、4g/L HAH+Ad-BMP-2 BMSCs组、8g/L HAH+Ad-BMP-2 BMSCs组和12g/L HAH+Ad-BMP-2 BMSCs组.激光共聚焦显微镜观察不同浓度HAH下Ad-BMP-2 BMSCs的形态特征,并进行三维重建.在第1、2、4、6、8、10、12、14天不同时相点使用CCK-8法检测Ad-BMP-2 BMSCs的增殖活性;ELISA检测各组BMP-2的表达情况.结果激光共聚焦显微镜下三维重建可见Ad-BMP-2 BMSCs在不同浓度HAH中呈现不同的形态:Ad-BMP-2 BMSCs在2、4、8g/L HAH中可多个方向铺展,具有充足的生长空间,在12g/L HAH中呈圆形.细胞增殖活性检测显示:多组间细胞增殖活性比较差异性具有统计学意义( P ＜0.05);4g/L HAH+Ad-BMP-2 BMSCs组和8g/L HAH+Ad-BMP-2 BMSCs组增殖活性最佳.ELISA检测BMP-2表达结果显示:各组均可表达BMP-2,8g/L HAH+Ad-BMP-2 BMSCs组表达BMP-2最高,且与其他4组相比差异具有统计学意义( P ＜0.05).结论不同浓度HAH中Ad-BMP-2 BMSC细胞形态、增殖活性、BMP-2的表达均不同,8g/L HAH包封下具有最显著的细胞活性.%Objective The different concentrationsof hyaluronic acid hydrogel (HAH) encapsulated carrying bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) adenovirus vector transfection of rabbit bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) and surveyed the effect on cell morphology,proliferation and protein expression.Methods BMSCs were extracted and cultured and identified by the use of osteogenesis and fat cell differentiation and cell surface antigen detection method.The different concentrations of HAH had been preparation in vitro.Adenovirus vector carrying BMP-2 gene were built and transfected into the BMSCs.The experiment was divided into five groups:0g/L HAH+Ad-BMP-2 BMSCs group;2g/L HAH+Ad-BMP-2 BMSCs group;4g/L HAH+Ad-BMP-2 BMSCs group;8g/L HAH+Ad-BMP-2 BMSCs group;12g/L HAH+Ad-BMP-2 BMSCs ser scanning confocal microscopy at different concentrations HAH encapsulating observed the morphological characteristics Ad-BMP-2 BMSCs and the cells were been three-dimensional reconstruction.Ad-BMP-2 BMSCs proliferation activity was detected by CCK-8 assay method and ELISA method were used to detect the expression of BMP-2 in each group at 1,2,4,6,8,10,12,14d.Results Cell morphology was built by the Three-dimensional reconstruction under the laser confocal microscopy and was different in different concentrations HAH:Ad-BMP-2 BMSCs spread out in multiple directions and had plenty of growth space in the 2,4 and 8 g/L HAH,and cells gathered into a round shape in the 12 g/L HAH.The difference was significant statistically with comparison of the cell proliferation activity (P<0.05);4g/L HAH+Ad-BMP-2 BMSCs and 8g/L HAH+Ad-BMP-2 BMSCs had the best proliferation activity.ELISA methodwas used to detect the expression of BMP-2.BMP-2 could be expressed in each groups.8g/L HAH+Ad-BMP-2 BMSCs was the highest expression of BMP-2 and compared with the other four groups,and the difference was statistically significant (P<0.05).Conclusion The different concentrations of HAH in the Ad-BMP-2 BMSC cell morphology,proliferation activity and the expression of BMP-2 had differences.Cell proliferation activity under the 8g/L HAH+Ad-BMP-2 BMSCs was the best.【期刊名称】《济宁医学院学报》【年(卷),期】2017(040)002【总页数】6页(P87-92)【关键词】透明质酸水凝胶;骨髓间充质干细胞;骨形态发生蛋白2;组织工程【作者】麻凤玉;吴彬;章旭;管大凡;齐豹;孟纯阳【作者单位】济宁医学院,济宁 272067;济宁医学院附属医院,济宁 272029;济宁医学院附属医院,济宁 272029;安康市中心医院,安康 725000;济宁医学院,济宁272067;济宁医学院附属医院,济宁 272029【正文语种】中文【中图分类】R318.08透明质酸水凝胶(hyaluronic acid hydrogel,HAH)是透明质酸与相应交联剂交联，形成具有一定的生物相容性、可降解以及无免疫原性的水凝胶，在再生医学领域广泛应用与研究。
HAH在包封细胞时，可以为细胞提供三维立体生长环境，克服了二维环境里的“接触抑制”，同时还具有一定的机械强度，可与细胞相互作用，常被用于组织工程的水凝胶支架[1]。
因其在制备过程中，不同浓度的HAH在包封细胞时对细胞形态及增殖活性等方面的作用具有明显差异，特别是当被包封的细胞与HAH包封前经过特殊处理时(如转染病毒、质粒、mRNA等)，如果忽略，最后取得的实验结果甚至可能与预期相反，经常困扰着科研工作者。
而且在骨与关节再生研究中，骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)由于易提取、低免疫原性、多向分化潜能等具有良好应用前景[2]；骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2，BMP-2)是唯一经FDA批准用于骨移植替代的生长因子[3]。
故我们联合HAH、BMP-2与BMSCs三者构建一种新的组织工程材料，研究其对BMSCs活性的影响。
目前，不同浓度HAH对包封未进一步处理的BMSCs的影响已见报道[4]，但是关于使用HAH包封对进一步处理的BMSCs研究较少。
本文采用不同浓度HAH(2、4、8、12g/L)包封经携带BMP-2基因的腺病毒载体基因修饰BMSCs(Ad-BMP-2 BMSCs)，探讨不同浓度HAH下对Ad-BMP-2 BMSCs细胞三维形态、增殖活性及其表达BMP-2的影响。
1.1 材料1.1.1 实验动物健康新西兰胎兔4只，雌雄不拘，1月龄，体重约0.5kg,购于山东省鲁抗医药股份有限公司实验动物中心。
1.1.2 试剂器材胎牛血清、DMEM/F12培养基 ( 美国Gibco公司)；戊巴比妥钠(北京索莱宝公司)；小鼠抗兔CD14-APC(德国Miltenyi公司)；小鼠抗兔CD31-PE(美国Novus Biologicals公司)；小鼠抗兔CD90-PE (德国antibodies-online 公司)；小鼠抗兔CD105-FITC (美国GeneTex公司)；透明质酸水凝胶试剂盒(美国BioTime公司)；CCK-8试剂盒(日本Dojindo公司)；Ad-BMP-2(上海汉恒生物公司)；人BMP2酶联免疫试剂盒(武汉博士德生物公司)。
1.2 方法1.2.1 BMSCs的提取、培养、鉴定新西兰胎兔经耳缘静脉缓慢推注1% 戊巴比妥钠( 3.5 ml /kg)，速度约1ml/min。