ABO血型鉴定操作规程

ABO血型鉴定操作规程

111.01.0.0.0 原理原理原理原理

根据红细胞上和血清（或血浆）中有无A 抗原和（或）B 抗原及其抗体，将血型分为A 型、B 型、AB 型及 O 型。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型鉴定 ABO 血

型。正定型正定型正定型是指用已知抗正定型 -A、抗-B血清来检测受检红细胞上有无相应的A 抗原和（或）

B 抗原；反定型反定型是指用已知反定型反定型 A1 型、B 型红细胞来检测受检血清（或血浆）中有无相

应的抗-A和（或）抗-B。

222.02.0.0.0 原始样品要求原始样品要求原始样品要求原始样品要求

5 mL静脉全血。

333.03.0.0.0 样品容器和添加剂样品容器和添加剂样品容器和添加剂样品容器和添加剂

真空试管，EDTA.K2 抗凝/普通试管，不抗凝。

444.04.0.0.0 检测环境要求检测环境要求检测环境要求检测环境要求温度：18℃～27℃，湿度：30%～70%。

555.05.0.0.0 所需材料和设备所需材料和设备所需材料和设备所需材料和设备

5.1 设备普通离心机、免疫血液学离心机、显微镜、恒温水箱、定时器。

5.2 材料抗-A、抗-B 血清、ABO 标准抗原红细胞试剂、移液器、加样吸头、生理盐水（NS）、干净空试管。

666.06.0.0.0 检测操作过程检测操作过程检测操作过程检测操作过程

6.1 将受检标本以 1000g离心5min，使标本血浆/血清与红细胞分离，吸取红细胞，用 NS 洗涤三次后，配成 3%～5%红细胞悬液。

6.2 取 6 支小试管，分别标记“-A”、“-B”、“自身”、“Ac”、“Bc”、“Oc”。6.3 在“-A”、“-B”管中分别加入抗-A 和抗-B 血清各 50μL ，其余管加入受检血浆/血清各

100μL 。

6.4 在“-A”、“-B”、“自身”管中加入受检者 3%～5%红细胞悬液各 50μL ，摇匀。

6.5 在“Ac”、“Bc”、“Oc”管中分别加入A1、B、O红细胞试剂各 50μL ，摇匀。6.6 1000g离心15sec，轻轻悬浮红细胞，观察结果并记录。

6.7 根据实验需要，除室温下观察结果外，另可增加在4℃、37℃下观察结果。

777.07.0.0.0 结果判断结果判断结果判断结果判断

7.1 凝集强度判断标准见表 1。

表表表表1 凝集强度判断标准凝集强度判断标准表凝集强度判断标准凝集强度判断标准表表表

凝集凝集凝集强度凝集强度强度强度判断标准判断标准判断标准判断标准

4+ 红细胞凝集成一大块，液体背景透明，无游离红细胞

3+ 数个大凝集块，液体背景透明，无游离红细胞

2+ 有很多小凝集块，液体背景透明，无游离红细胞

1+ 有许多很小的凝集块，肉眼可见，液体背景不透明，有游离红细胞

±微小的凝集块，肉眼很难看清，需要用显微镜观察

-或θ无凝集，无溶血，全是游离红细胞

MF 混合凝集外观，镜下可见少数红细胞凝集，而大部分是游离红细胞

pH 部分溶血

H 完全溶血

7.2 ABO血型结果判断见表2：

表表表表2 2 2 血型结果判断表2 血型结果判断表血型结果判断表血型结果判断表

正定型正定型正定型正定型反反反定型反定型定型定型

自身对照自身对照自身对照自身对照血型血型血型血型

抗抗抗-抗---AAAA 血清血清血清血清抗抗抗-抗---BBBB 血清血清血清血清AcAcAc Ac BcBcBc Bc OcOcOc Oc

＋――＋―― A

―＋＋――― B

――＋＋―― O

＋＋―――― AB

注：“＋”表示凝集或溶血；“―”表示不凝集。

7.3 正反定型不一致、ABO 抗原减弱、抗-A 或抗-B 减弱、O 细胞凝集时，排除人为操作错误后，执行《疑难血型鉴定操作规程》进行最终确认。

7.4 根据上述判断标准，作出结论并记录在《免疫血液学检查实验记录》。

888.08.0.0.0 结果报告结果报告结果报告结果报告

根据实验结果，打印《免疫血液学实验报告》。报告的形式为：A型/B型/O型/AB 型。999.09.0.0.0 实验结果解释实验结果解释实验结果解释实验结果解释

实验结果为A 型、B 型、AB 型，O 型，说明受检者 ABO 血型分别属于A型、B型、

AB 型，O 型。红细胞上分别有 A 抗原、B 抗原、皆有 A 抗原和 B 抗原、皆无 A 抗

原和B 抗原；血浆中分别有抗-B、抗-A、抗-AB、皆无抗-A(B)。

11101000.0.0.0.0 质量控制质量控制质量控制质量控制

当受检标本与正、反定型试剂反应，凝集强度少于 2+时，取标准抗-A、抗-B 或 A、

B、O红细胞与正、反定型试剂反应，以验证试剂效能是否下降。

11111111.0.0.0.0 注意事项注意事项注意事项注意事项

11.1 试管必须清洁、干燥，防止溶血。

11.2 加样顺序一般先加血清，再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。

11.3 分型血清效价太低，抗原抗体比例不适当，可使反应不明显误判为阴性反应。

11.4 用立即试管法可能不能测出亚型（如 AX），需延长作用时间。

11.5 观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于亚型、类 B或 cisAB 的发

现。

11.6 各种原因引起的红细胞溶解，容易误判为不凝集；部分溶血时，可溶性血型物质中和了相应的抗体，也会造成不凝集。

11.7 受检者红细胞上抗原位点过少（如亚型）或抗原性减弱（多见于白血病或恶性肿瘤）以及类 B或 cisAB等，易被误判为不凝集。

11.8 ABO正反定型不一致常见原因