血清铁及血清总铁结合力测定
血清铁及血清总铁结合力测定
铁是必需元素，原子式亚铁原子为Fe2＋，正铁原子Fe3＋，原子量为55．84。正常成人体内铁总量为71．63 ～89．54 m mol／L ，其中2／3左右有生理活性，1／3为贮存铁。
血清铁正常参考值
成年男子11．0 ～30．0μmol／L
成年女子9．0 ～27．0μmol／L
儿童9．0 ～32．2μmol／L
老年7．2 ～14．4μmol／L
血清总铁结合力正常参考值
1．血清TIBC 成年48．3～68．0μmol／L
2．血清UIB C25．0～50．1μmol／L
3．血清铁饱和度男性约为40 ％女性约为35 ％
临床意义
1．血清铁增高
（1）红细胞破坏增多，如溶血性贫血。
（2）红细胞再生或成熟障碍性疾病，如再生障碍性贫血，巨幼红细胞性贫血等。
（3）铁的利用率减低，如铅中毒或维生素B6 缺乏引起的造血功能减退。
（4）贮存铁释放增加，如急性肝细胞损害、坏死性肝炎等，从受损的肝细胞释出贮存铁，释出铁蛋白。
（5）铁的吸收率增加，如血色素沉着症、含铁血黄素沉着症、反复输血治疗或肌肉注射铁剂引起急性中毒症等。
2．血清铁降低
（1）机体摄取不足如营养不良、胃肠道病变、消化性溃疡、慢性腹泻等，引起进量不足和吸收量不足，导致缺铁性贫血，血清铁可低于8．9μmol／L 以下。
（2）机体失铁增加如失血，包括了大量和隐性失血，特别是肾炎、肾结核、阴道出血、溃疡病等，泌尿生殖道和胃肠道的出血。
（3）体内铁的需要量增加又未及时补充、如妊娠，婴儿生长期等也有血清铁减少的倾向。
（4）体内贮存铁释放减少，如急性和慢性感染，尿毒症、恶液质等均可引起单核巨噬细胞系统的铁释出减少。
（5）某些药物治疗，如促肾上腺皮质激素或肾上腺皮质激素治疗时亦可引起血清铁
减少。
3．血清总铁结合力增高
（1）慢性缺铁，如缺铁性贫血，促使运铁蛋白的合成增加。
（2）单核巨噬细胞系统急性损害，如肝细胞的坏死使得铁蛋白释出增加。
4．血清总铁结合力降低
（1）运铁蛋白的丢失如肾病、尿毒症等。
（2）运铁蛋白的合成不足如遗传性运铁蛋白缺乏症。
（3）铁蛋白缺少见于肝硬化，血色素沉着症等。
临床上把血清铁、TIBC 、铁饱和度结合起来观察治疗疾病，临床意义更大，主要疾病见下表
表各种疾病时血清铁、TIBC 、铁饱和度的变动情况
铁代谢检测
铁来源外源性铁——饮食（经肠道吸收） 内源性铁——衰老红细胞分解破坏出的铁被机体重新利用 铁吸收与转运以2价铁的形式吸收，3价铁的形式转运，铁转运的工具为转铁蛋白，吸收部位在十二指肠及空肠上段。 铁储存形式铁蛋白、含铁血黄素 铁排泄由体表或消化道细胞脱落排除 铁是人体最丰富的必需微量元素之一，广泛参与机体内的代谢过程。人体内含铁量为4克左右，其中约2/3存在于红细胞的血红蛋白当中，1/3储存在肝、脾和骨髓中。缺铁或含铁过多会引发各种疾病。为了诊断与铁代谢有关的疾病,已设立多种检测指标。这些检测指标涉及铁的吸收、运输、储备及生理功能的实现。目前检验科开展的铁代谢相关指标有：血清铁、血清总铁结合力、不饱和铁结合力、血清转铁蛋白、血清铁蛋白等。
血清铁：指与转铁蛋白结合的Fe3+（不是Fe2+）的浓度。 血清中的铁离子约与1/3转铁蛋白结合，是铁离子的运输形式，称为血清铁。 临床意义： ?降低: 常见于缺铁性贫血、吸收不足（如营养不良、胃肠道病变、消化性溃疡、慢性腹泻等）、体内贮存于网状内皮系统的铁释放减少（如急慢性感染、尿毒症、恶液质等）、慢性长期失血及肿瘤等。 ?升高: 见于红细胞破坏增多时，如溶血性贫血、恶性贫血及红细胞的再生或成熟障碍，如再生障碍性贫血、巨红细胞性贫血、铅中毒引起的贫血。此外还可见于铁的吸收率增加，如血液色素沉着症、含铁血黄素沉着症、肾炎及反复输血等。 ?局限性: ?血清铁含量有昼夜波动，早上最高，然后逐渐降低，午夜时最低，因此标本最好固定时间进行。建议留取早晨空腹时候的血标本。 ?血清铁检测易受近期口服药物等多种因素影响，阿司匹林、糖皮质激素可使结果降低。右旋糖酐、避孕药和铁剂可使测定结果升高。 总铁结合力：指转铁蛋白所能结合的最大铁离子浓度。由于血清中95%以上的非血红素结合铁都与血清转铁蛋白结合，因此，总铁结合力与转铁蛋白的水平高度相关，反映转铁蛋白的水平。 临床意义： 缺铁时升高，在营养不良、炎症、慢性感染和癌症患者体内均降低。 不饱和铁结合力：指血清转铁蛋白中尚未结合铁的部分，即由总铁结合力减去血清铁的值。
血清铁及血清总铁结合力测定
血清铁及血清总铁结合力测定 铁是必需元素，原子式亚铁原子为Fe2＋，正铁原子Fe3＋，原子量为55．84。正常成人体内铁总量为71．63 ～89．54 m mol／L ，其中2／3左右有生理活性，1／3为贮存铁。 血清铁正常参考值 成年男子11．0 ～30．0μmol／L 成年女子9．0 ～27．0μmol／L 儿童9．0 ～32．2μmol／L 老年7．2 ～14．4μmol／L 血清总铁结合力正常参考值 1．血清TIBC 成年48．3～68．0μmol／L 2．血清UIB C25．0～50．1μmol／L 3．血清铁饱和度男性约为40 ％女性约为35 ％ 临床意义 1．血清铁增高 （1）红细胞破坏增多，如溶血性贫血。 （2）红细胞再生或成熟障碍性疾病，如再生障碍性贫血，巨幼红细胞性贫血等。 （3）铁的利用率减低，如铅中毒或维生素B6 缺乏引起的造血功能减退。 （4）贮存铁释放增加，如急性肝细胞损害、坏死性肝炎等，从受损的肝细胞释出贮存铁，释出铁蛋白。 （5）铁的吸收率增加，如血色素沉着症、含铁血黄素沉着症、反复输血治疗或肌肉注射铁剂引起急性中毒症等。
2．血清铁降低 （1）机体摄取不足如营养不良、胃肠道病变、消化性溃疡、慢性腹泻等，引起进量不足和吸收量不足，导致缺铁性贫血，血清铁可低于8．9μmol／L 以下。 （2）机体失铁增加如失血，包括了大量和隐性失血，特别是肾炎、肾结核、阴道出血、溃疡病等，泌尿生殖道和胃肠道的出血。 （3）体内铁的需要量增加又未及时补充、如妊娠，婴儿生长期等也有血清铁减少的倾向。 （4）体内贮存铁释放减少，如急性和慢性感染，尿毒症、恶液质等均可引起单核巨噬细胞系统的铁释出减少。 （5）某些药物治疗，如促肾上腺皮质激素或肾上腺皮质激素治疗时亦可引起血清铁 减少。 3．血清总铁结合力增高 （1）慢性缺铁，如缺铁性贫血，促使运铁蛋白的合成增加。 （2）单核巨噬细胞系统急性损害，如肝细胞的坏死使得铁蛋白释出增加。 4．血清总铁结合力降低 （1）运铁蛋白的丢失如肾病、尿毒症等。 （2）运铁蛋白的合成不足如遗传性运铁蛋白缺乏症。 （3）铁蛋白缺少见于肝硬化，血色素沉着症等。 临床上把血清铁、TIBC 、铁饱和度结合起来观察治疗疾病，临床意义更大，主要疾病见下表 表各种疾病时血清铁、TIBC 、铁饱和度的变动情况
铁含量的测定
铁含量（硫氰酸钾比色法） 1、原理：铁离子与硫氰酸盐生成一种血红色络合物，可用比色测定。 Fe3++6SCN-→Fe（SCN）63- 硫氰酸钾的浓度对颜色深浅有显著影响，所以应当严格控制，使标准溶液与分析溶液中硫氰酸盐的浓度一致。所形成的络合物不够稳定放置时间久就会退色，应在变色后一小时内完成测定。 2、试剂 （1）铁标准溶液：称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵晶体溶于50ml蒸馏水中，再加入6毫升1：1盐酸和0.1克过硫酸铵，摇匀放置3～5分钟。将溶液移入1升容量瓶中。稀释至刻度。上述1ml溶液中含0.1毫克Fe3+ （2）硫氰酸钾溶液：取50克分析纯硫氰酸钾晶体，溶于50ml蒸馏水中，并稀释至100ml （3）1：1盐酸 （4）过硫酸铵AR(100g/L) （5）浓硫酸 （6）1：1氨水 3、测定步骤 （1）取40ml水样于150ml锥形瓶中，加5ml浓硝酸加热煮沸5分钟，冷却后以氨水调节至中性（用试纸） （2）、加入4ml 1：1盐酸和0.1克过硫酸铵，放10分钟移入50ml比色管，用蒸馏水稀释至刻度。 （3）加入2ml硫氰酸钾，混合均匀后，于510nm处测其光密度。 （4）标准曲线的绘制：取一系列50ml比色管，分别加入0、0.2、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0铁标准溶液，加4ml1：1盐酸和0.1克过硫酸铵，用蒸馏水稀释至刻度，加2ml硫氰酸钾，发色后测其光密度，绘制标准曲线。 4、计算：总铁：（毫克/升=A×1000/V） 式中：A-相应于光密度数值的铁含量（配制样标准比色液时所用的硫酸铁铵标准液的体积） V-水样体积 分光光度计的使用 提前30分钟开机，使仪器提前预热 1、在比色皿中倒入一个蒸馏水和试样，分别放入相应的测量位置。 2、在空白处，即没有东西处调零（开盖调零），调节时指示灯T/%显示。 3、闭盖调100（在蒸馏水处调100），按下Δ（OA/100%）即可，同2。 4、然后把位置拉到所测试样处，在这时指示灯所显示位置在T/%处，按A/T/C/F键，使指示 灯在Abs处显示即可得吸光度。 5、Fe3+（铁离子）：（仪器所测-0.0546）÷0.2462×0.1×1000 40
血清铁浓度检测试剂盒说明书
货号：MS2802 规格：100管/96样 血清铁浓度检测试剂盒说明书 微量法 注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义： 血清铁是指血液中转铁蛋白所结合的铁，该指标常用于鉴别缺铁性与非缺铁性贫血。 测定原理： 亚硫酸钠还原血清Fe3+生成成Fe2+，Fe2+进一步与2, 2’- 联吡啶显色，在520nm处有吸收峰，测定该波长光吸收值即可计算血清铁含量。 自备实验用品及仪器： 离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、冰醋酸、氯仿和蒸馏水。 试剂组成和配置： 试剂一：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前配制，加入15mL蒸馏水充分溶解。 试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前配制，加入469μL冰醋酸，加入15mL蒸馏水充分溶解。 标准液：液体×1 支（EP管），100μmol/L Fe3+标准液，4℃保存。 测定： 1. 分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长到520nm，蒸馏水调零。 2. 标准液解冻：提前取出标准液，置于室温下充分解冻后混匀。 3. 空白管：取EP管，依次加入125μL蒸馏水，125μL试剂一，125μL试剂二，混匀后盖紧， 置于沸水浴5min，自来水冷却。加入62μL氯仿（自备），充分震荡混匀；室温10000rpm，离心10min，小心吸取上层液210μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于520nm 测定吸光度，记为A空白管。 4. 标准管：取EP管，依次加入125μL标准液，125μL试剂一，125μL试剂二，混匀后盖紧， 置于沸水浴5min，自来水冷却。加入62μL氯仿，充分震荡混匀；室温10000rpm，离心10min，小心吸取上层液210μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于520nm测定吸光度，记为A标准管。 5. 测定管：取EP管，依次加入125μL血清，125μL试剂一，125μL试剂二，混匀后盖紧，置 于沸水浴5min，自来水冷却。加入62μL氯仿，充分震荡混匀；室温10000rpm，离心10min，小心吸取上层液210μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于520nm测定吸光度，记为A测定管。注意：空白管和标准管只需测定一次。 血清铁浓度计算公式： 血清铁含量(μmol/dL)=[C 标准液×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)]×V 总=10× (A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管) C 标准液：100 μmol/L Fe 3+ 标准液；V 总：1 dL=0.1 L。 注意事项： 1、血清铁含量少，所用器皿（EP 管）需要注意，避免被铁污染。 2、试剂一和试剂二溶液不稳定，需现配现用，新配制的试剂只能当天使用。 3. 最低检出限为1μmol/L。 第1页，共1页
血清铁蛋白
约占体内贮存铁的1/3，而血循环中的铁蛋白又被肝细胞清除，所以肝病时可造成血清铁蛋白升高。另外恶性肿瘤细胞合成铁蛋白量增加，所以铁蛋白也是恶性肿瘤的标志物之一。 临床意义: 铁蛋白升高：原因是铁蛋白的来源增加或存在清除障碍。如患肝癌、肺癌、胰癌、白血病等时，癌细胞合成的铁蛋白增加，使血清铁蛋白升高。患肝病时肝细胞受损功能下降，使血清铁蛋白升高。 铁蛋白降低：缺铁性贫血、失血、长期腹泻造成的铁吸收障碍等。参考值： M （男）15-20μg/LF（女）12-150μg/L注：因试剂及方法不规范，各实验室要有自己的参考值。 血清铁蛋白（SF）测定意义 1.血清铁蛋白降低见于： ⑴缺铁性贫血，具有早期诊断价值。 ⑵营养不良、严重慢性疾病体内贮存铁减少导致的继发性贫血。 2.血清铁蛋白增高见于： ⑴体内铁贮存过多，如长期接受输血和不恰当的铁剂治疗； ⑵恶性肿瘤； ⑶急性感染和炎症； ⑷肝脏疾病如肝硬化、肝坏死和心肌梗死等。 3.红细胞体积分布宽度（RDW）意义 1.根据MCV、RDW值可将贫血分为6种： ⑴小细胞均一性贫血：MCV减小，RDW正常，如轻型珠蛋白生成障碍性贫 血。 ⑵小细胞不均一性贫血：MCV减小，RDW增大，如缺铁性贫血 ⑶正细胞均一性贫血：MCV、RDW均正常，如各种慢性疾病所致的贫血。 ⑷正细胞不均一性贫血：MCV正常，RDW增大，如早期缺铁性贫血、营养 性贫血。 ⑸大细胞均一性贫血：MCV增大，RDW正常，如再生障碍性贫血。 ⑹大细胞不均一性贫血：MCV、RDW均增大，如巨幼红细胞性贫血。 2．用于缺铁性贫血治疗时的观察。缺铁性贫血RDW值增大，当给予铁剂 治疗有效时， RDW值可一过性进一步增大，随后再逐渐降到正常。 4.血小板比容（PCT）意义 1. 血小板比容增高见于：骨髓纤维化、脾切除、慢性粒细胞性白血病等； 2. 血小板比容降低见于：再生障碍性贫血、血小板减少症、化疗后等。 5.平均血小板体积（MPV）意义 1．平均血小板体积增大见于：骨髓纤维化、原发性血小板减少性紫癜、血栓性疾病、脾切除、慢性粒细胞性白血病、巨血小板综合征、镰刀细胞性贫血等。 2．平均血小板体积减小见于：再生障碍性贫血、巨幼细胞性贫血、脾亢、化疗后等。 6.血小板体积分布宽度（PDW）意义 1.血小板体积分布宽度增大见于：巨幼红细胞性贫血、慢性粒细胞性白血
铁含量的测定方法
铁含量的测定方法 铁含量的测定采用邻菲啰啉比色法。 一、原理 在一定酸度条件下，试液中亚铁离子（Fe2+）与1,10-邻菲啰啉生成红色配合物，于波长为506nm处，测定其吸光度，即可计算出铁含量。 二、试剂和仪器 柠檬酸三钠水溶液，150g/L；盐酸羟胺溶液，50 g/L；盐酸溶液，3mol/L；氨水溶液，2.5%；1,1 0-邻菲啰啉溶液，2.5 g/L：称量2.5g1, 10-邻菲啰啉溶于80℃的约l00ml水中，加lml浓盐酸，冷却后加水稀释至1000ml，储于阴凉处备用； 醋酸-醋酸钠缓冲溶液：称量272g醋酸钠（NaCH3·CO2·3H2O）于约500m1水中，加入冰醋酸240ml，加水稀释至1000ml； Fe2+标准溶液，lmg/ml：称量7.024g硫酸亚铁铵于约500ml水中，加入浓盐酸10ml，移入l000ml 容量瓶中，稀释至刻度； Fe2+标准溶液，20?g/ml：吸取lmg/ml的亚铁标准溶液20ml于1000ml容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀，临用前配制。 仪器：分光光度计；1cm比色皿。 三、测定步骤 （一）工作曲线的绘制 量取20?g/ml的亚铁标准溶液0.00m1、2 .50m1、5 .00ml、10.00ml、20.00ml(相当于分别含0、50、100、200、400?g/ Fe2+)分别加入l00ml烧杯中，用水稀释至50ml，加入150g/L柠檬酸三钠溶液5m1，用3mol/L盐酸或2.5%氨水溶液调节溶液pH为2.4~2.6，加入50 g/L盐酸羟胺溶液5ml混匀，加入1,10-邻菲罗琳溶液5m1，加入醋酸-醋酸钠缓冲溶液l0ml，将溶液移入到l00 ml容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀放置60min。 用分光光度计在波长506nm处用lcm比色皿，以水为参比溶液测定该标准系列的吸光度，以Fe2+标准溶液浓度（?g/100ml）为横坐标，以其对应吸光度作纵坐标绘制工作曲线。 （二）湿法磷酸中铁含量的测定 吸取1 ml湿法磷酸，用水稀释至100m1，混匀，移取1m1到100m1的烧杯中，用水稀释至50m1，以下操作同工作曲线的绘制，测定其吸光度。 不加试样，在同样条件下进行空白试验。 （三）计算 总铁含量按下式计算 w(Fe)= 式中：m1为从工作曲线上查得被测试液Fe的质量，?g；m0为从工作曲线上查得试剂空白溶液中Fe的质量，?g；m为吸取试样溶液相当于试样的质量，g
血清铁总铁结合力测定的临床意义
血清铁（ＩＲＯＮ）、总铁结合力（ＴＩＢＣ）测定的临床意义 人体内含铁量为4克左右，其中三分之二存在于红血球的血红蛋白当中，其余三分之一储备在肝、脾和骨髓中。血清中的铁离子全部与转铁蛋白结合，是铁离子的运输形式，称为血清铁（ＩＲＯＮ或Ｆe）。通常血清中内有三分之一转铁蛋白结合，其余转铁蛋白结合铁的潜力称为不饱和铁结合力（ＵＩＢＣ）。血清转铁蛋白结合最大铁量称为总铁结合力（ＴＩＢＣ）它等于血清铁与不饱和铁结合之和。 一、血清铁（ＩＲＯＮ或Ｆe） 正常参考值：－μmol/l 成人男子－μmol/l 成人女子－μmol/l 儿童－μmol/l 老人－μmol/l 临床意义： 1、血清铁增高：红细胞破坏增多，如溶血性贫血；红细胞再生成熟障碍性疾病，如再生障 碍性贫血，巨幼红细胞性贫血等；铁的利用率减低，如铅中毒或维生素Ｂ6缺乏引起的造血功能减退；贮存铁释放增加，如急性肝细胞损害、坏死性肝炎等；铁的吸收率增加，如血色素沉着症、含铁血黄素沉着症、反复输血或铁剂治疗。 2、血清铁降低：机体摄取不足，如营养不良、胃肠道病、慢性腹泻等；失铁增加，如失血； 生理成长所需补充不足，如妊娠、婴儿生长期；铁释放减少，如急性玫慢性感染、尿毒症等；某些药物治疗所致。 二、血清总铁结合力（ＴＩＢＣ）正常参考值：—μmol/l 临床意义： 1、血清总铁结合力增高：转铁蛋白合成增加，如缺铁性贫血；转铁蛋白释放增加，如肝细 胞坏死。 2、血清总铁结合力降低：转铁蛋白丢失，如肾病、尿毒症等；转铁蛋白合成不足，如遗传 性转铁蛋白缺乏症。 三、未饱和铁结合力（ＵＩＢＣ） 正常参考值：－μmol/l 参考下图可助说明：
铁测定试剂盒(PAPS显色剂法)产品技术要求huayuyikang
铁测定试剂盒（PAPS显色剂法） 适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清中铁的含量。 1.1 产品型号/规格 试剂1：1×20 ml、试剂2：1×5 ml；试剂1：1×40 ml、试剂2：1×10 ml；试剂1：2×40 ml、试剂2：2×10 ml；试剂1：4×40 ml、试剂2：4×10 ml；试剂1：4×60 ml、试剂2：2×30 ml；试剂1：1×80 ml、试剂2：1×20 ml；试剂1：2×80 ml、试剂2：2×20 ml；试剂1：5×80 ml、试剂2：5×20 ml；试剂1：3×60 ml、试剂2：1×45 ml；试剂1：6×70 ml、试剂2：3×35 ml；试剂1：5×40 ml、试剂2：1×50 ml；试剂1：4×40 ml、试剂2：2×20 ml；试剂1：4×80 ml、试剂2：4×20 ml；试剂1：4×50 ml、试剂2：1×50 ml；试剂1：8×50 ml、试剂2：2×50 ml；试剂1：8×16.8 ml、试剂2：8×4.2 ml。 1.2 划分说明 试剂1：醋酸缓冲液 0.2 mol/L 表面活性剂适量 稳定剂适量 试剂2：PAPS 2.6 mmol/L 2. 性能指标 2.1 外观和性状 2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；中文包装标签应清晰、准确、牢固。 2.1.2 试剂1应为无色澄清液体；试剂2应为棕色液体。 2.2 净含量
不少于标示值。 2.3 试剂空白吸光度 在光径1 cm、主波长578 nm下，以蒸馏水为检测样本时，吸光度应不大于0.300 。 2.4 分析灵敏度 铁含量为30.00 μmol/L时，测定吸光度差值（△A）应大于0.080。 2.5 线性范围 铁试剂在线性范围(0～120] μmol/L内： （a）回归系数r应不小于0.990； （b）在（0～12.0 ] μmol/L范围内，线性绝对偏差应不大于±1.2 μmol/L；（c）在（12.0～120]范围内，线性相对偏差应不大于±10%。 2.6 测量精密度 2.6.1 重复性 变异系数（CV）均应不大于5%。 2.6.2 批间差 相对偏差（R）应不大于5%。 2.7 准确度 采用GBW09152 冷冻人血清中无机成分分析标准物质对试剂盒进行测试，相对偏差应不超过±10%。 2.8 稳定性 铁试剂盒贮存于2 ℃～8 ℃、避光环境中，有效期为12个月。有效期满后应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。
血清总铁结合力(Total Iron Binding Capacity,TIBC)试剂盒说明书
货号：MS2811 规格：100管/96样血清总铁结合力(Total Iron Binding Capacity，TIBC)试剂盒说明书 微量法 注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义： 血清总铁结合能力指血清转铁蛋白可结合铁的能力，其含量高低与缺铁性贫血、急性肝炎等疾病的发生密切相关。 测定原理： Fe2+与菲洛嗪反应形成紫红色化合物，在562nm处有特征吸收峰。碱性条件下，血清转铁蛋白可以与Fe3+结合，剩余未结合的Fe3+可以被还原成Fe2+，此时吸光度A1与未结合Fe3+数量正相关；酸化后，转铁蛋白结合的Fe3+释放，并且进一步被还原 Fe2+，此时吸光度A2与总Fe3+数量正相关。A2减A1与TIBC浓度呈正比。 自备实验用品及仪器： 天平、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。 试剂组成和配制： 试剂一：液体 30mL×1 瓶，4℃保存。 试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。 试剂三：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。（临用前根据用量将A液和B液按1:1混合） 试剂四：液体 7mL×1 瓶，4℃保存。 测定操作表： 1、分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至562nm。 血清总铁结合力计算公式： 总铁结合能力定义：37℃条件下，每升血清结合Fe3+的μmol数。 a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下 标准曲线：y=0.5478x+0.0281，R2=0.9981 总铁结合能力TIBC（μmol/L）=（ΔA-0.0281）÷0.5478×V反总÷V样=20.99×（ΔA-0.0281）b. 用 96 孔板测定的计算公式如下 第1页，共2页
总铁结合力测定试剂盒(Ferene法)产品技术要求九州泰康
总铁结合力测定试剂盒(Ferene法) 适用范围：用于体外定量测定人血清中的总铁结合力。1.1包装规格 试剂Ⅰ（R1）：60mL×3、试剂Ⅱ（R2）：20mL×3、试剂Ⅲ（R1）：60mL×3、试剂Ⅳ（R2）：20mL×3； 试剂Ⅰ（R1）：60mL×2、试剂Ⅱ（R2）：20mL×2、试剂Ⅲ（R1）：60mL×2、试剂Ⅳ（R2）：20mL×2； 试剂Ⅰ（R1）：60mL×1、试剂Ⅱ（R2）：20mL×1、试剂Ⅲ（R1）：60mL×1、试剂Ⅳ（R2）：20mL×1； 试剂Ⅰ（R1）：45mL×1、试剂Ⅱ（R2）：15mL×1、试剂Ⅲ（R1）：45mL×1、试剂Ⅳ（R2）：15mL×1； 试剂Ⅰ（R1）：90mL×1、试剂Ⅱ（R2）：15mL×2、试剂Ⅲ（R1）：90mL×1、试剂Ⅳ（R2）：15mL×2。1.2主要组成成分
2.1 外观 试剂盒外观应整洁，文字符号标识清晰；试剂均为澄清溶液，无未溶解物。2.2 装量 试剂瓶内试剂的净含量不少于标示值。 2.3 试剂空白吸光度 在波长A600nm，记录吸光度值，试剂空白吸光度（R1+R2）不超过0.80A，试剂空白吸光度（R3+R4）不超过0.80A。 2.4 分析灵敏度 Fe：测试浓度100μmol/L的样本，吸光度变化值不低于0.002A。 UIBC：测试浓度50μmol/L的样本，吸光度变化值不低于0.002A。 2.5 线性 2.5.1铁离子： 在[1，120]μmol/L范围内，线性回归的确定系数应不低于0.990； 在[1，30)μmol/L范围内，线性绝对偏差不超过±3.0μmol/L； 在[30，120]μmol/L范围内，线性相对偏差不超过±10%； 2.5.2不饱和铁： 在[1，80]μmol/L范围内，线性回归的确定系数应不低于0.990； 在[1，30)μmol/L范围内，线性绝对偏差不超过±3.0μmol/L； 在[30，80]μmol/L范围内，线性相对偏差不超过±10%。 2.6 重复性 2.6.1批内重复性
血清铁蛋白检测在急性白血病诊断、疗效评定中的价值
血清铁蛋白检测在急性白血病诊断、疗效评定中的价值 发表时间：2016-06-21T09:26:33.020Z 来源：《医药前沿》2016年5月第14期作者：刘志刚唐川张松徐善亮 [导读] 近年研究［1-3］发现，许多恶性肿瘤可以合成和分泌SF，使血清SF 的浓度增高。 刘志刚唐川张松徐善亮 （大竹县人民医院血液科四川达州 635100） 【摘要】目的：探讨血清铁蛋白（SF）检测在急性白血病诊断、疗效评定中的价值。方法：将64例急性白血病患者归为研究组，随机分化疗前的初诊患者为研究1组可31例；经过化疗后缓解的患者为研究2组33例；再30例健康人员归为对照组，通过对照组与研究1组进行SF对比研究分析，研究1组与研究2组进行SF对比分析。结果：经研究表明，研究组1组血清铁蛋白水平要高于对照组，具有显著的比较差异（P＜0.05）。研究1组与研究2组的SF对比，研究2组的血清铁蛋白水平明显降低，说明通过1-6个疗程化疗后急性白血病患者的血清铁蛋白逐渐恢复正常水平，具有显著的比较差异（P＜0.05）。结论：由于急性白血病患者存在铁代谢紊乱等情况，血清铁蛋白检测的结果可 作为急性白血病诊断和疗效的观察指标，具有非常重要的价值，值得临床应用和推广。 【关键词】血清铁蛋白检测；急性白血病；诊断；疗效评定；价值 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）14-0029-02 Diagnostic value of serum ferritin in the diagnosis and treatment of acute leukemia Liu Zhigang, Tang Chuan, Zhang Song, Xu Shanliang,. The People's Hospital of Dazhu County, Sichuan Province, Dazhou 635100, China 【Abstract】 Objective To study the serum ferritin (SF) detection in acute leukemia diagnosis and curative effect evaluation of value. Methods 64 patients with acute leukemia were classified as group, random points before chemotherapy was as the study group 1 to 31 cases; For studying two groups of patients in remission after chemotherapy in 33 cases; 30 cases of healthy persons as control group, again through the control group and study group 1 SF, comparative research and analysis, study 1 and study 2 group SF, contrast analysis. Results The study shows that, the team 1 set of serum ferritin level is higher than the control group, the comparison of has significant difference (P < 0.05). Study 1 and study 2 group of SF, contrast, study two groups significantly lower levels of serum ferritin, explanation by 1-6 courses of chemotherapy in patients with acute leukemia after serum ferritin gradually returned to normal level, the comparison of has significant difference (P < 0.05). Conclusion Due to the presence of iron metabolism disorders such as acute leukemia patients, serum ferritin detection Results can be used as acute leukemia diagnosis and curative effect of observation indexes, has very important value, worthy of clinical application and promotion. 【Key words】 The serum ferritin detection; Acute leukemia; Diagnosis; Curative effect evaluation; The value of 近年研究［1-3］发现，许多恶性肿瘤可以合成和分泌SF，使血清SF 的浓度增高，因此常作为肿瘤标志物用于肿瘤的诊断和疗效观察。但是在急性白血病诊断、疗效评定中SF的价值研究文献报告较少，故我院从2014年1月～2015年10月针对该课题进行了研究，现报道如下。 1.资料和方法 1.1一般资料 选取我院2014年1月～2015年10月收治的64例确诊为急性白血病患者作为研究对象，并将其归为研究组，然后将30例健康人员归为对照组。对照组为我院健康体检人群：男性15例，女性15例，年龄27～58岁，平均年龄（34.5±5.7）岁，凡具有肝病、感染等可干扰血清铁蛋白测定的研究对象不列入对照组；研究组：急性髓系白血病（AML）41例，急性淋巴细胞白血病(ALL)23例，男性30例，女性34例，年龄28～68岁，平均年龄（40.6.5±8.4）岁，有肝病、感染等病例先进行治疗，待干扰血清铁蛋白测定因素排除后再采集标本进行SF测定,如果SF测定的干扰因素不能排除的病例不列入研究组。 1.2 方法 将64例急性白血病患者归为研究组，随机分化疗前的初诊患者为研究1组31例；经过化疗后缓解（部分缓解、完全缓解）的患者为研究2组33例；再30例健康人员归为对照组，通过对照组与研究1组进行SF对比研究分析，研究1组与研究2组进行SF对比分析。 1.2.1治疗方法 对照组为健康人群，已排除有肝病、感染等可干扰血清铁蛋白测定的研究对象不需用特殊治疗；研究组为急性白血病患者，入院后若发现有干扰SF检测因素的患者，首先是治疗影响SF检测的疾病，如有感染存在的进行联合抗生素治疗，有肝功异常的则保肝治疗，病毒性肝炎的则抗病毒治疗，疗程7天，待干扰因素排除后所有急性白血病患者在化疗前采集SF检测标本，经过治疗若仍然不能排除影响SF检测疾病该病例不列入研究组。急性白血病的化疗：AML采取DA、MA或中、大剂量阿糖胞苷方案治疗，1～6疗程，ALL采取VP、VLP或VDLP 方案治疗，1～6疗程，根据张之南关于急性白血病疗效标准[4]进行评定达部分缓解（PR）、完全缓解（CR）。 1.2.2标本采集和检测 研究组所有患者在明确诊断后，在没有输血与化疗前进行抽血；而健康人员则进行空腹非抗凝血（4mL）检测；将血清分离后，放置到冰箱进行冷藏，1周后进行血清铁蛋白检测。主要采用化学发光法进行SF检测，其中正常参考值为23～274 g/L。 1.3 评价指标 经研究表明，研究组的患者血清铁蛋白水平升高，在排除干扰的情况下可能预示着病人患有急性白血病或存在白血病复发等情况，之后如果白血病患者血清铁蛋白下降，可以表示患者白血病治疗后得到缓解。 1.4 统计学分析 统计相关数据，采用统计学软件SPSS19.0处理数据，两组数据的组间差距用χ2检验。P＞0.05表示对比结果差异不显著，无统计学意义，P＜0.05表示对比差异显著，有统计学意义。 2.结果 经研究表明，研究组1组血清铁蛋白水平要高于对照组，具有显著的比较差异（P＜0.05）。通过长时间的抗肿瘤治疗后，研究1组与研
血清铁总铁结合力未饱和铁结合力铁饱和度
血清铁总铁结合力未饱 和铁结合力铁饱和度 SANY标准化小组 #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#
血清铁、总铁结合力、未饱和铁结合力、铁饱和度 １．原理：血清铁离子在酸性溶液中与显色剂反应生成红色络合物，其颜色的深浅与铁含量成正比，与标准铁比较可求得血清铁的含量。测铁结合力时，在被检血中加入过量的铁，使血清中的铁蛋白饱和，过剩的铁用碱性碳酸镁吸附，去除，然后用血清铁方法测定。 ２．试剂：试剂ＲⅠ抗坏血酸，试剂ＲⅡ缓冲液，试剂ＲⅢ显色剂。 结合力试剂盒内ＲⅠ铁溶液，ＲⅡ碱性碳酸镁。 ３．操作：工作液配制：取一定量ＲⅡ复溶一瓶ＲⅠ即为工作液。 血清铁测定： 再次混匀，分别读取吸光度为终末吸光度。 ４．计算：Ｒ、Ｓ、Ｂ管分别减自已的试剂空白，其结果用下公式计算 Ｆe=(R-B/S-B)标准液浓度。 总铁结合力测定： 血清测定前要作如下处理：血清加铁溶液１ml混匀1分钟，置室温５－３０分钟再加入２／３量匙的碳酸镁，混匀１分钟，放室温３０－６０分钟，其间振摇５次，然后3000转／分离心５分钟，取上清液按血清铁法进行铁测定。 计算：总铁结合力＝（Ｒ－Ｂ／Ｓ－Ｂ）×标准液浓度×３ 未饱和铁结合力＝总铁结合力－血清铁 铁饱和度＝（血清铁／总铁结合力）×１００％ ５．正常参考值： ＳＩ脐血：~L，出生时：~L；6个月~２岁：~L,２~6岁：~L,６~12岁：~／Ｌ; SI 男：~／L。女：~L。 TIBC男：~L。女~L。 UIBC男：~L。女：~L ISAT男：~。女：~。 ６．注意事项：标本新鲜无溶血，所有的用器不能含有铁，每次需作试剂空白。 ７．临床意义：血清铁及总铁结合力的高低受铁的吸收、贮存及利用因素的影响，在不同疾病有相应的变化。血清铁水平代表铁进入和离开循环之间的平衡，总铁结合力于铁贮存减少时开始增高。 ７．１血清铁增加：见于ＨＡ、ＡＡ、ＭＡ、ＳＡ等。 ７．２血清铁降低：见于ＩＤＡ、肾病综合症、慢性贫血、Vit 缺乏、先天性转铁蛋白缺乏。
铁测定试剂盒(亚铁嗪法)产品技术要求lepu
铁测定试剂盒(亚铁嗪法) 适用范围：用于体外定量测定人血清中铁的浓度。1.1规格 试剂1: 1×30mL，试剂2: 1×10mL； 试剂1: 2×60mL，试剂2: 2×20mL； 试剂1: 1×50mL，试剂2: 1×10mL； 试剂1: 1×40mL，试剂2: 1×10mL； 试剂1: 2×40mL，试剂2: 1×20mL； 试剂1: 2×40mL，试剂2: 2×10mL； 试剂1:3×28mL，试剂2:3×7mL； 试剂1:1×4L，试剂2:1×1L； 试剂1:2×4L，试剂2:1×2L。 1.2主要组成成分 试剂1主要组分： 试剂2主要组分： 2.1 净含量
应不低于试剂瓶标示装量。 2.2 外观 试剂1应为无色或浅色澄清液体，试剂2应为浅色或橙色澄清液体。外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。 2.3 试剂空白 在600nm处测定试剂空白吸光度，应≤1.5； 2.4 分析灵敏度 测试25μmol/L的被测物时，吸光度变化（ΔA）应不低于0.005. 2.5 准确度 用参考物质（GBW09152）对试剂（盒）进行测试，相对偏差不超过±5%。 2.6 重复性 批内变异系数（CV）应不超过5％。 2.7 线性 2.7.1在[1,100]μmol/L 区间内，线性相关系数r应不低于0.990； 2.7.2[1,8)μmol/L区间内绝对偏差不超过±0.64μmol/L；[8,100]μmol/L区间内相对偏差不超过±8%。 2.8 批间差 对同一份样品进行重复测定，相对极差≤6％。 2.9 稳定性 取在2℃～8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测，应符合本标准2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7之规定。
铁蛋白测定方法及临床意义
铁蛋白测定方法及临床意义 铁蛋白广泛分布于人体组织细胞内和体液中。是一种贮铁蛋白质。1972年Addison等人建立血清铁蛋白放射免疫测定方法后，相继对外周血细胞及体液中铁蛋白也能测定。其定义为机体内一种贮存铁的可溶组织蛋白，正常人血清中含有少量铁蛋白，但不同的检测法有不同的正常值，一般正常均值男性约80－ 130ug/L(80-130ng/ml)女性约35－55ug/L (35-55ng/ml)，血清铁水平在妊娠期 及急性贫血时降低，急慢性肝脏损害和肝癌时升高，国内报道肝癌患者阳性率高达90%。 一、铁蛋白的分子结构和功能 铁蛋白分子量为450000，由24个多肽亚单位组成一个中间空心的球形蛋白质。其外壳即为去铁铁蛋白。中空核心部分是贮存铁胶体分子团（羟基磷酸化高铁）的地，核心中铁原子含量不等。平均2000个，最多可达4500个。去铁铁蛋白可摄取Fe++，经其6个通道进入核心，氧化成Fe+++沉积下来，铁原子释放时要经还原剂的作用。铁本身又可刺激去铁铁蛋白的合成。 铁蛋白存在于体内各组织和细胞，特别在肝、脾、骨髓中含量高，脑组织中也含有，外周血细胞包括红细胞、白细胞和血小板都含有铁蛋白。不同组织来源的铁蛋白有明显的异质性。人体的铁蛋白达20种以上。总称为异铁蛋白（isoferritin）.它由两种不同的亚单位（L和H）.按不同比例构成，L和H亚单位的分子量和所带电荷量不同，前者分子量为19000.后者为21000，心型铁蛋白为酸性铁蛋白，主要由H亚单位组成，等电点4.8～5.2.与心肌铁蛋白抗体结合力强；脾型铁蛋白为碱性铁蛋白，主要由L亚单位组成。等电点5.3～5.8， 与睥铁蛋白抗体结合力强：肾铁蛋白介于两者之闻。碱性铁蛋白存在于正常成人肝细胞厦肝、脾、骨髓等网状内皮细胞中。酸性铁蛋白见于正常成人心肌，肾，胰及胎肝中。血清铁蛋白主要由网状内皮系统的吞噬细胞释放出来。由碱性铁蛋白和微量酸性铁蛋白所组成。在血循环中半寿期为27～30小时。为肝实质细胞所清除。正常人外周血细饱内铁蛋白含量甚微，红细咆内铁蛋白台量碱性铁蛋白为0.025fg／细胞。酸性铁蛋白比前者高10倍；白细胞碱性铁蛋白；多形核粒 细胞6.6fg／细胞，淋巴细胞为8.0fg／细胞单核细胞含量最高为54.6fg／细胞。血小板中含量甚微。 铁蛋白的生理功能：（1）作为铁的贮存库用于血红蛋白合成：（2）将铁保存在中空的球形蛋白内，防止细胞内游离铁过多而产生有害作用。成熟红细胞内铁蛋白是幼红细胞铁蛋白残留下来的。其碱性铁蛋白和持存有关，酸性铁蛋白则起铁转运作用。 二、血清铁蛋白测定 （一）血清铁蛋白（SF）测定方法有多种，如放射免疫双抗体法，放射免疫标记抗体法，碱性磷酸酶或辣根过氧化酶标记抗体酶联免疫法及直接乳胶凝集法。
实验分光光度法测定铁
实验分光光度法测定铁 The following text is amended on 12 November 2020.
实验十四邻二氮菲分光光度法测定铁的含量 一、实验目的 1．学习吸光光度法测量波长的选择方法; 2．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理及方法; 3. 掌握分光光度计的使用方法。 二、实验原理 分光光度法是根据物质对光选择性吸收而进行分析的方法，分光光度法用于定量分析的理论基础是朗伯比尔定律，其数学表达式为：A=εb C 邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的较好试剂，在pH=2～9的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。摩尔吸光系数ε＝11000 L·mol-1·cm-1。在显色前，用盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+。 2Fe3+＋2NH 2OHHCl→2Fe2+＋N 2 ＋4H＋＋2H 2 O＋2Cl- Fe2+ + Phen = Fe2+ - Phen (橘红色) 用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钴、镍、铜、铅与试剂形成有色配合物；钨、铂、镉、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的pH范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用。 三、仪器与试剂 1．醋酸钠：l mol·L-1； 2．盐酸：6 mol·L-1； 3．盐酸羟胺：10％（用时配制）； 4．邻二氮菲（%）：邻二氮菲溶解在100mL1:1乙醇溶液中； 5．铁标准溶液。 (1)100μg·mL-1铁标准溶液：准确称取（NH 4） 2 Fe（SO 4 ） 2 ·12H 2 0于烧杯中， 加入20 mL 6 mol·L-1盐酸及少量水，移至1L容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀. 6．仪器:7200型分光光度计及l cm比色皿。 四、实验步骤 1.系列标准溶液配制 (1)用移液管吸取10mL100μg·mL-1铁标准溶液于100mL容量瓶中，加入2mL 6 mol·L-1盐酸溶液, 以水稀释至刻度，摇匀. 此溶液Fe3+浓度为10μg·mL-1. (2) 标准曲线的绘制: 取50 mL比色管6个，用吸量管分别加入0 mL，2 mL，4 mL, 6 mL, 8 mL和10 mL10μg·mL-l铁标准溶液，各加l mL盐酸羟胺，摇匀; 经再加2mL邻二氮菲溶液, 5 mL醋酸钠溶液，摇匀, 以水稀释至刻度，摇匀后放置 10min。 2.吸收曲线的绘制 取上述标准溶液中的一个, 在分光光度计上，用l cm比色皿，以水为参比溶液，用不同的波长，从440～560 nm，每隔10 nm测定一次吸光度，在最大吸收波长
组织铁含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法
组织铁含量检测试剂盒说明书可见分光光度法 注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 货号：BC4350 规格：50T/48S 产品内容： 提取液：液体55mL×1瓶，4℃保存。 试剂一：粉剂×2瓶，4℃保存；临用前配制，加入7.5mL蒸馏水充分溶解，试剂一变黑后则不能使用； 试剂二：粉剂×2瓶，4℃保存；临用前配制，加入375μL冰醋酸，加入12mL蒸馏水充分溶解；溶解后4℃保存一周； 标准液：液体3mL×1瓶，1μmol/mL Fe3+标准液，4℃保存；临用前稀释8倍即0.125μmol/mL的标准溶液进行实验，现用现配。 产品说明： 铁是人体必须的微量元素之一，它是血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素及其他酶系统的主要成分，帮助氧的运输，促进脂肪氧化。缺乏铁元素容易造成贫血、代谢纷乱，并影响机体的免疫功能。 亚硫酸钠还原Fe3+生成Fe2+，Fe2+进一步与2,2’-联吡啶显色，在520nm处有吸收峰，测定该波长吸光度即可计算铁含量。 自备实验用品及仪器： 可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、氯仿、冰和蒸馏水。 测定操作： 1、样本处理：称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆。4000g4℃离心10分钟，取上清。 2、操作步骤： （1）可见分光光度计预热30min，波长调至520nm。蒸馏水调零。 （2）加样表： 第1页，共2页
加入试剂（μL）空白管测定管标准管蒸馏水400-- --400 0.125μmol/mL标准 液 样本-400- 试剂一200200200 试剂二400400400 混匀后盖紧，置于沸水浴5min，自来水冷却；加入200μL氯仿（自备），充分震荡混匀；室温10000rpm，离心10min，小心吸取上层液800μL，加入1mL玻璃比色皿，于520nm立即测定吸光度，分别记为A空白管，A测定管，A标准管，计算ΔA标准=A标准管-A空白管，ΔA测定=A测定管-A空白管。 3、组织铁含量计算： （1）按组织鲜重计算: 组织铁含量（μg/g鲜重）=（C标准液×ΔA测定÷ΔA标准）×V提取×55.845÷W = 6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷W （2）按组织蛋白浓度计算 组织铁含量（μg/mg prot）=（C标准液×ΔA测定÷ΔA标准）×V提取×55.845÷（Cpr×V提取） = 6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr。 C标准液：0.125μmol/mL Fe3+标准液；55.845：Fe的相对分子质量，55.845μg/μmol；Cpr：样品蛋 白浓度，mg/mL；W：样品质量，g；V提取：提取液体积，1mL。 注意事项： 1、当ΔA大于1时，建议将样品用提取液稀释后进行测定；ΔA过小时，可增加酶促反应时间（1h或2h）或 增加加入的样品体积来测定。 2、试剂一溶解变黑后则不能使用；试剂二有毒性，做好防护措施。 第2页，共2页