院感细菌培养

院感细菌培养
院感细菌培养

第一部分

卫生标准

1、各类环境空气、物体表面、医护人员手卫生标准

1.1、细菌菌落总数

允许检岀值见表1

表1各类环境空气、物体表面、医护人员手细菌菌落总数卫生标准

1.2致病性微生物

不得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及其他致病性微生物。在可疑污染情况下进行相应指标的检测。

母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿及儿科病房的物体表面和医护人员手上,不得检岀沙门氏菌。 ________

2、医疗用品卫生标准

2.1进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、粘膜的医疗用品必须无菌。

2.2接触粘膜的医疗用品

细菌菌落总数应w 20cfu/g或100cm2::致病性微生物不得检岀。

3、使用中消毒剂与无菌器械保存液卫生标准

3.1使用中消毒剂

细菌菌落总数应w 100cfu/ml,致病性微生物不得检岀。

3.2、无菌器械保存液必须无菌

4、污物处理卫生标准

污染物品无论是回收再使用的物品,或是废弃的物品,必须进行无害化处理。不得检岀致病性微生物。在可疑污染情况下,进行相应指标的检测。

第二部分

采样方法

1、采样及检查原则

采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测,送检时间不得超过6h。若样品保存0—4C条件时,送检时间不

得超过24h。

2、空气采样方法

2.1 采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。

2.2 采样高度与地面垂直高度80—150cm。

2.3 布点方法

室内面积w 30m2,设一条对角线上取3点,既中心一点、两端各距墙1m处各取一点:室内面积〉30m2,设东、西、南、北、中5点,其中东、西、南、北点均距墙1m。

2.4 采样方法

用9cm 直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min 后送检培养。

3、物体表面采样方法

3.1 采样时间选择消毒处理后4h 内进行采样。

3.2 采样面积

被采表面v 100cm2,取全部表面:被采表面》100cm2,取100cm2

3.3 采样方法

用5 x 5cm2的标准灭菌规格板,放在被检物体表面,用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭纸1支,在规格板内横

竖往返各涂抹5 次,并随之转动棉拭纸,连续采样1—4个规格板面积,剪去手接触部分,将棉拭纸放入装10ml 采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭纸直接涂抹物体的方法采样。

4、医护人员手采样方法

4.1 采样时间在接触病人、从事医疗活动前进行采样。

4.2 采样面积及方法被检人五指并拢,将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭纸一支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次(一只

手涂擦面积30cm2)并随之转动采样棉拭纸,剪去手接触部位,将棉拭纸放入装有10ml采样液的试管内送检。

采样面积按平方厘米计算。

5、医疗用品采样方法

5.1 采样时间在消毒或灭菌处理后,存放有效期内采样。

5.2 采样量及采样方法

可用破坏性方法取样的医疗用品,如输液(血)器、注射器和注射针等均参照《中华人民共和国药典》1990年版一部附录中《无菌检查法》规定执行。对不能用破坏性方法取样的特殊医疗用品,可用浸有无菌生理盐水采

样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样,被采表面v 100cm2,取全部表面;被采表面》100cm2,取100 cm2。

6、使用中消毒剂与无菌器械保存液

6.1 采样时间采取更换钱使用中的消毒剂与无菌器械保存液。

6.2 采样量及方法

在无菌条件下,用无菌吸管吸取1ml 被检样液,加入9ml 稀释液中混均,对于醇类与酚类消毒剂,稀释液用普通营养肉汤即可;对于含氯消毒剂、含典消毒剂、过氧化物消毒剂,需在肉汤中加入0.1%硫代硫酸钠;对于

洗必泰,季铵盐类消毒剂,需在肉汤中加入3% (w/v )吐温80和0.3%卵磷脂;对于醛类消毒剂,需在肉汤中

加入0.3%甘氨酸;对于含有表面活性剂的各种复方消毒剂,需在肉汤中加入3% (w/v)吐温80,以中和备检样

液的残效作用。

6.3 结果分析

平板上有菌生长,证明被检样液有残存活菌,若每个平板菌落数在10个以下,仍可用于消毒处理(但不能用于灭菌),若每个平板菌落数超过10个,说明每毫升被检样液含菌量已超过100个,即不宜再用。

7、污染采样方法

7.1 采样时间

在消毒或灭菌处理后进行采样

7.2 采样量及采样方法按5.2 执行

普通细菌培养鉴定操作规程

普通细菌培养鉴定操作规程 1 检验目的 做疾病的病原学诊断,查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系,指导临床治疗及预后和流行病学的调查。 2 原理 人体很多部位与外界相通,存在栖息菌群,但不致病,当菌群失调或分离到致病菌则具有临床意义;另外机体某些部位是无菌的,如检出细菌则视为致病菌。并排除采样及操作污染。 3 标本要求 (1)标本类型:血液,骨髓,脑脊液,胸水,腹水,尿液,等体液;痰液,前列腺液,脓液,组织分泌物或穿刺液等。 (2)标本采集:见标本采集手册 (3)标本储存和运输:室温放置,室温运输并立即送检。 (4)标本拒收状态:非无菌方式采集的标本或未按要求部位采取的标本。 4 容器和添加剂类型 均使用灭菌器皿盛放标本 5 试剂 (1)试剂名称:革兰氏染液、氧化酶试剂、3%触酶、血平板、中国蓝平板、SS平板、柯玛嘉平板、相关生化试剂等。 6仪器设备: (1)接种针、接种环、酒精灯 (2)梅里埃ATB药敏鉴定仪 (3)显微镜、SPX-150B型生化培养箱、超净工作台、台式离心机、天平 7 校准程序 (送市计量质量检测研究所校准) 8操作步骤

(1)所有标本按照培养目的增菌培养12-18小时后盲目接种,血培养发现阳性立即进行接种。 (2)接种:以上增菌标本及其他临床标本用接种环取标本接种环划线血平板及其他选择性培养基上,35℃培养过夜,观察结果。 (3)涂片:肉眼见细菌生长,取生长物涂片做革兰氏染色; (4)纯培养:根据需要接种血平板、巧克力、中国蓝/柯玛嘉或厌氧平板过夜培养以获得纯培养。 (5)鉴定:按照鉴定仪要求调配菌液浓度,细菌的鉴定见梅里埃ATB微生物鉴定系统 9质量控制: 参加我科质量管理小组组织的各项质量控制活动 10 生物参考区间 血液,尿液,脑脊液等无菌部位采取的标本未见细菌生长;其他标本如大便,痰液为正常菌群或未见致病菌。 11 患者检验结果的可报告区间 细菌鉴定到种或属;菌群调查报告比例。 12 临床意义: 为医生提供病原学诊断,并为进一步药敏实验提供依据。

无菌室沉降菌测试标准操作规程

无菌室沉降菌测试标准操作规程 一、目的:建立无菌室中沉降菌的测试标准操作规程,保证微生物检验在规定洁净级别内进行。 二、范围:无菌室的沉降菌的监测。 三、依据:国家标准GB/T 16294-1996。 四、职责:微生物检验人员对本制度的实施负责。 五、内容 1、菌落:细菌培养后,由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落,简称CFU。通常用个数表示。 2、测试方法:沉降法,即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿,经48小时以上培养,在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数,来评定洁净环境内的活微生物数,并以此来评定洁净室的洁净度。 3、所用的仪器和设备 1)高压灭菌锅锅 2)恒温培养箱:必须定期对培养箱进行检定。 3)培养皿:一般采用中90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿。使用前将培养皿置于121℃湿热灭菌20分钟。 4、培养基:普通营养琼脂培养基。将培养基加热熔化,冷却至约45℃在无菌操作条件下将培养基注入培养皿,每皿约15m1。待琼脂培养基凝固后,将培养基平皿放入30~35℃恒温培养箱中培养数小时,若培养基平皿上确无菌落生长,即可供采样用,制备好的培养基平皿应在2~8℃的环境中存放。 5、测试步骤 1)采样方法:将已制备好的培养皿放置在预先确定的取样点,打开培养皿盖,使培养基表面暴露0.5小时,再将培养皿盖上盖后倒置。 2)培养,时间不少于48小时。每批培养基应有对照试验,检查培养基本身是否污染,可每批选定3只培养皿作对照培养。 3)菌落计数:用肉眼直接计数,然后用5~10倍放大镜检查,有否遗漏。若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠,可分辨时仍以2个或2个以上的菌落计数。 6、注意事项 1)测试用具要做灭菌处理,以确保测试的可靠性、正确性。 2)采取一切措施防止人为对样本的污染。 3)对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。 4)由于细菌种类繁多,差别甚大,计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察,不要漏计培养皿边缘生长的菌落,并须注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别,必要时用显微镜鉴别。 5)采样前应仔细检查每个培养皿的质量,如发现变质、破损或污染的应剔除。 7、测试规则 1)测试状态 (1)沉降菌测试前:被测试洁净室(区)的温湿度须达到规定的要求,静压差、必须控制在规定值内。被测试洁净室(区)已消毒。 (2)测试状态有静态和动态两种,并在报告中注明测试状态。 (3)测试人员:测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。静态测试时,室内测试人员不得多于2个人。

院感细菌培养操作

1.目的: 医院是病原微生物较集中,抵抗力低的人群密集的地方,加之化疗、放疗等手段的采用,影响病人免疫机能下降,大量使用抗生素,引起耐药菌株增多,菌群失调,以及先进医疗仪器广泛应用等原因,增加消毒灭菌的难度,致使院内感染已成为当前医疗实践的严重障碍,直接影响医疗效果。进一步规范院内感染监测标本的程序,更好、更快检测病原微生物的生长情况,预防医院感染的发生。 2.设备、试剂与材料 2.1 VITEK 2 compact鉴定药敏分析系统 2.2 VITEK 32鉴定药敏分析系统 2.3美国FORMAⅡ级生物安全柜 2.4显微镜 2.5酒精灯 2.6接种环 2.7恒温培养箱 2.8各种培养基 2.9 革兰氏染色液 2.10触酶试剂 2.11氧化酶试剂 2.12移液器 2.13无菌吸嘴 3.院感标本采集 3.1空气的采样 3.1.1采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 3.1.2采样高度与地面垂直高度80-150CM。 3.1.3布点方法室内面积<30m2,设一条对角线上取三点,即中心一点,两端各距墙1m 处各取一点;室内面积>30m2,设东、西、南、北、中5点,其中东、西、南、北点均距墙1m。 3.1.4采样方法用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检。 3.2物体表面采样 3.2.1采样时间选择消毒处理后4小时内进行采样。 3.2.2采样面积被采表面<100cm2,取全部表面;被采表面>100cm2,则取100cm2。3.2.3采样方法用5×5 cm2的标准来灭菌规格板,放在被检物体表面,用无菌规格板,放在被检物体表面,用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支,在规格板内横竖往返各涂抹5次,并随之转动棉拭子,连续采样1-4个规格板面积,剪支手接触部位,将棉拭子放入装10ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。3.3医护人员手采样

细菌培养的流程介绍

血培养是如何从标本中获得细菌培养及药敏报告的? 1、常规的血培养标本需采集两管,一份为需氧菌培养,一份为厌氧菌培养。血培养瓶为密封装置,其底部含有培养基、显色剂。当血液标本中有细菌生长时,细菌会产生二氧化碳,二氧化碳可造成密封样本内气压和PH值的改变,显色剂也会变色。因此血培养中获得阳性结果。若培养5天后显色剂没有变化,则提示样本中没有细菌生长,血培养获得阴性结果。 2、血培养标本出现阳性结果后,采集少量血培养样本,在玻片上进行图片进行革兰染色进行初步鉴定,并向临床出具初步报告。同时在培养皿中进行接种。接种方法为分区划线法。其原理是,在一个培养皿中,通过划线的方式将样本进行充分的不定量的倍比稀释,使得培养皿中生成可分离的单个细菌生成的单克隆菌落。若不进行分区划线,培养皿中的菌落会非常密集,不便于挑取菌落进行鉴定,鉴定后向临床出具二级报告。我院采用三区划线,某些医院要求高会采用五区划线,通常三区划线后就可获得有效的单克隆菌落。 培养皿中所使用的培养基会根据细菌的特征进行选择,常用的有普通“血琼脂培养基”、“巧克力培养基”。某些特殊细菌需要特殊的培养基。 3、培养皿中获取单克隆菌落后,需要根据经验鉴定哪种细菌为优势菌,哪种细菌为致病菌,哪种细菌为定植菌。选择致病菌进行再次培养,并将其定容为1个“麦氏浓度”。此时开始进行药敏鉴定。经典的药敏方法有2种。1、倍比稀释法:将某种抗生素进行精确的倍比稀释,观察在哪种浓度的抗生素培养基中细菌会出现生长与不生长的交界。此浓度为该种抗生素对该细菌的“最低抑菌浓度(MIC)”。该方法虽然精确定量,但耗时耗力,一种抗生素需要配置多个浓度,一种细菌需要选择多种抗生素进行药敏鉴定,在此基础上,发展出“纸片法”。2、纸片法:在固态培养皿中均匀进行细菌接种,以培养皿中心为界进行扇形分区。将含有某种抗生素的纸片放在一个区域中,多个区域可以放置多种抗生素纸片,因此在一个培养皿中就可以对多种抗生素进行药敏鉴定。要求每个抗生素纸片距离边界不少于10mm,每两个纸片间的距离,不少于14mm。经过一段时间培养,细菌生长至肉眼可见的菌落。若细菌对某种抗生素敏感,则在某种抗生素纸片的周边形成一个没有细菌菌落生长的圆形空白区域。该圆形空白区域的大小与该抗生素对于该细菌的最低抑菌浓度成负相关。最低抑菌浓度越低,空白区域越大。采用纸片法可以获得半定量的药敏结果,“敏感、中介、耐药”。本院采用的药敏鉴定方法为自动化的药敏鉴定卡。药敏鉴定卡的模式如下图,一个纵列中含有多种抗生素海绵,一个药敏鉴定卡含有多个纵列,即一个药敏鉴定卡可以对多个菌株同时进行药敏鉴定。1个麦氏浓度的菌液均匀的接种于每个抗生素海绵中,机器可以自动感知某种抗生素海绵中细菌的生长情况,从而获得药敏结果。

生化培养箱的使用标准操作规程

生化培养箱的使用标准操作规程 1 目的 建立生化培养箱使用标准操作规程,规范生化培养箱操作程序, 保证该设备的正常运行 2 范围:适用于本公司生化培养箱的运行操作。 3 责任者:生化培养箱的运行操作人员、设备管理人员。 4 内容 4.1设备概况 生化培养箱是用于细菌、霉菌、微生物、组织细胞的培养保存, 是生物、遗传工程、医学等行业实验室作稳定性实验及生物培养的重要实验设备,该设备外形为立式,容积为80升,箱体及箱内均采用优质 钢板表面喷塑,采用双层玻璃观察窗的结构,箱内装有可控制的照明灯,不开箱门就可清晰观察箱内培养物品的状况,工作室采用优质镜面不锈钢版,内有由不锈钢丝制成的可方便移动的多层隔板,隔板的间距可灵活改变。电源开关、电源指示灯、控温仪等集中于箱体上部。 该设备采用高精度微机控温仪及控湿仪,具有响应快、超调小、精度高的特点,使用轻触按键设定参数,具有可调温差报警方式、可调定时控制方式、基本控制模式等基本功能。 4.2设备主要参数

4.4 操作前的准备 4.4.1 确认设备状态是否处于完好已清洁。 4.4.2 取下完好已清洁状态标识卡,挂上运行状态标识卡。 4.5 操作 4.5.1 设定工作温度(最高可设定到60℃) 4.5.1.1 打开电源开关,此时控温仪会进行自检并显示箱内温度。 4.5.1.2 按“SET”键设定工作温度,这时控温仪上显示的温度值会闪烁。 4.5.1.3 根据工艺要求按“▲”升高键或“▼”降低键不放设定工作温度。 4.5.1.4 到达设定温度后放开“▲”升高键或“▼”降低键,这时设定的显示值会闪烁。 4.5.1.5 按一下“SET”键确认设定温度,新温度设定后,这时控温仪就转换为显示箱内实际温度。

院感细菌培养操作20813讲课讲稿

院感细菌培养操作 20813

1.目的: 医院是病原微生物较集中,抵抗力低的人群密集的地方,加之化疗、放疗等手段的采用,影响病人免疫机能下降,大量使用抗生素,引起耐药菌株增多,菌群失调,以及先进医疗仪器广泛应用等原因,增加消毒灭菌的难度,致使院内感染已成为当前医疗实践的严重障碍,直接影响医疗效果。进一步规范院内感染监测标本的程序,更好、更快检测病原微生物的生长情况,预防医院感染的发生。 2.设备、试剂与材料 2.1 VITEK 2 compact鉴定药敏分析系统 2.2 VITEK 32鉴定药敏分析系统 2.3美国FORMAⅡ级生物安全柜 2.4显微镜 2.5酒精灯 2.6接种环 2.7恒温培养箱 2.8各种培养基 2.9 革兰氏染色液 2.10触酶试剂 2.11氧化酶试剂 2.12移液器 2.13无菌吸嘴 3.院感标本采集 3.1空气的采样 3.1.1采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 3.1.2采样高度与地面垂直高度80-150CM。 3.1.3布点方法室内面积<30m2,设一条对角线上取三点,即中心一点,两端各距墙1m处各取一点;室内面积>30m2,设东、西、南、北、中5点,其中东、西、南、北点均距墙1m。 3.1.4采样方法用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检。 3.2物体表面采样 3.2.1采样时间选择消毒处理后4小时内进行采样。

3.2.2采样面积被采表面<100cm2,取全部表面;被采表面>100cm2,则取100cm2。3.2.3采样方法用5×5 cm2的标准来灭菌规格板,放在被检物体表面,用无菌规格板,放在被检物体表面,用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支,在规格板内横竖往返各涂抹5次,并随之转动棉拭子,连续采样1-4个规格板面积,剪支手接触部位,将棉拭子放入装10ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。 3.3医护人员手采样 3.3.1采样时间在接触病人、从事医疗活动前进行采样。 3.3.2采样面积及方法被检人五指并拢,将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子一枝在双手指曲面从指跟到指端来回涂擦各两次(一只手涂擦面积30 cm2),并随之转动采样棉拭子,剪去手接触部位,将棉拭子放入装有10ml采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米(cm2)计算。 3.4医疗用品采样 3.4.1采样时间在消毒或灭菌处理后,存放有效期内采样。 3.4.2采样方法右用破坏性方法取样的医疗用品,如输液(血)器、注射器和注射针等,取其中的一部分放培养液中培养。对不能用破坏性方法取样的特殊医疗用品,可用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样,被采表面<100cm2,取全部表面;被采表面≥100cm2,取100cm2。 3.5使用中消毒剂的采集 3.5.1采样时间采取使用中的消毒剂。 3.5.2采样方法在无菌条件下,用无菌注射器抽取1ml被检样品,加入10ml稀释液混匀。(对于醇类与酚类消毒剂稀释液用灭菌生长盐水;对于含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂,需在灭菌生理盐水中加入0.1%硫代硫酸钠;对于洗必泰、季铵盐类消毒剂,需在灭菌生理盐水中加入3%(w/v)吐温80和0.3%卵磷脂;对于醛类消毒剂,需在灭菌生理盐水中加入0.3%甘氨酸;对于含有表面活性剂的各种消毒剂,需在灭菌生理盐水中加入3%(w/v)吐温80,以中和被检样液的残效作用。) 3.6内镜的采样 3.6.1咽喉镜、支纤镜用10ml戊二醛中和液冲洗内镜后,送检实验室。 3.6.2胃镜、消化镜、宫腔镜用10ml0.1%硫代硫酸钠中和液冲洗内镜后,送检实验室。 3.6.3鼻咽镜、过氧化氢消毒的腔镜类用10ml生理盐水中和液冲洗内镜后,送检实验室。 3.7透析液的采样用灭菌的空试管取透析液10ml送检。 4.院感标本的运送及交接签收 4.1标本的采集

MHP-250霉菌培养箱使用操作规程

MHP-250霉菌培养箱使用操作规程 1 目的:规范MHP-250霉菌培养箱的操作,保证培养效果。 2 范围:MHP-250霉菌培养箱 3 职责:化验员负责对仪器的使用,化验室主任负责对仪器使用情况的监督。 4 内容 4.1概述:MHP-250霉菌培养箱(以下简称培养箱)是具有冷热控制的高精度恒温设备,是细菌、霉菌、微生物培养及育种试验的恒温培养装置,特别适用于生物遗传工程,医学研究卫生防疫、药检、环境保护、农村科学、水产、畜牧等领域从事科研和生产使用的理想设备。 4.2技术参数 电源电压:220V±10% 50Hz。 功率: 650W 制冷剂:任选 控温测温范围:0~60℃。 显示分辨率:0.1℃。 温度波动:±0.5℃ 4.3使用方法: 点击设定键,进入到温度设定状态,通过增加、简少键修改所需的值;再按下设定键,进入到时间设定状态,时间小时区闪烁,再按下设定键,时间分钟区闪烁,可通过增加、减少键修改所需的值,再按下设定键,保存并退出设定状态。当时间设置“0”时,表示没有定时功能;当设定时间不为“0”时,则等测量温度达到设定温度,定时器开始计时,时间到,运行结束,“停止”字符点

亮,蜂鸣器鸣叫30秒钟,长按减小键4秒钟,程序重新开始运行,蜂鸣器鸣叫时,可用增加键消音。 照明(或灭菌)可按使用客户的需要,选择打开或者关闭,并有对应指示灯亮或灭。 在非设定状态下,点击“减小∕在运行∕背光”键可开关液晶屏的背光灯。 4.4注意事项 本产品搬运中,禁止倒置与大于45度平放。 在使用中不要频繁设定温度,以免压缩机频繁启动造成过载影响寿命。 箱内不需要照明时,应按一下照明键即关闭照明,以免影响上层温度,同时延长灯管使用时间。 箱内培养物品不宜存放太多,摆放应留有间隙,以利箱内空气循环。 切忌触摸、碰撞箱内感温探头,以免损坏造成失控。 请勿用酸、碱及其它腐蚀性溶液擦拭表面,可用干布擦净。当设备不用时,应保持箱内干燥,并切断电源开关置于“0”位置。 该产品必须有专业人员负责操作和维护,非电器人员不得检修该设备,严禁带电检修。 使用本设备前请认真阅读产品使用说明书,再进行各项操作。

院感细菌培养

第一部分 卫生标准 1、各类环境空气、物体表面、医护人员手卫生标准 1.1、细菌菌落总数 允许检岀值见表1 表1各类环境空气、物体表面、医护人员手细菌菌落总数卫生标准 1.2致病性微生物 不得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及其他致病性微生物。在可疑污染情况下进行相应指标的检测。 母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿及儿科病房的物体表面和医护人员手上,不得检岀沙门氏菌。 ________ 2、医疗用品卫生标准 2.1进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、粘膜的医疗用品必须无菌。 2.2接触粘膜的医疗用品 细菌菌落总数应w 20cfu/g或100cm2::致病性微生物不得检岀。 3、使用中消毒剂与无菌器械保存液卫生标准 3.1使用中消毒剂 细菌菌落总数应w 100cfu/ml,致病性微生物不得检岀。 3.2、无菌器械保存液必须无菌 4、污物处理卫生标准 污染物品无论是回收再使用的物品,或是废弃的物品,必须进行无害化处理。不得检岀致病性微生物。在可疑污染情况下,进行相应指标的检测。 第二部分 采样方法 1、采样及检查原则 采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测,送检时间不得超过6h。若样品保存0—4C条件时,送检时间不 得超过24h。

2、空气采样方法 2.1 采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 2.2 采样高度与地面垂直高度80—150cm。 2.3 布点方法 室内面积w 30m2,设一条对角线上取3点,既中心一点、两端各距墙1m处各取一点:室内面积〉30m2,设东、西、南、北、中5点,其中东、西、南、北点均距墙1m。 2.4 采样方法 用9cm 直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min 后送检培养。 3、物体表面采样方法 3.1 采样时间选择消毒处理后4h 内进行采样。 3.2 采样面积 被采表面v 100cm2,取全部表面:被采表面》100cm2,取100cm2 3.3 采样方法 用5 x 5cm2的标准灭菌规格板,放在被检物体表面,用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭纸1支,在规格板内横 竖往返各涂抹5 次,并随之转动棉拭纸,连续采样1—4个规格板面积,剪去手接触部分,将棉拭纸放入装10ml 采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭纸直接涂抹物体的方法采样。 4、医护人员手采样方法 4.1 采样时间在接触病人、从事医疗活动前进行采样。 4.2 采样面积及方法被检人五指并拢,将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭纸一支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次(一只 手涂擦面积30cm2)并随之转动采样棉拭纸,剪去手接触部位,将棉拭纸放入装有10ml采样液的试管内送检。 采样面积按平方厘米计算。 5、医疗用品采样方法 5.1 采样时间在消毒或灭菌处理后,存放有效期内采样。 5.2 采样量及采样方法 可用破坏性方法取样的医疗用品,如输液(血)器、注射器和注射针等均参照《中华人民共和国药典》1990年版一部附录中《无菌检查法》规定执行。对不能用破坏性方法取样的特殊医疗用品,可用浸有无菌生理盐水采 样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样,被采表面v 100cm2,取全部表面;被采表面》100cm2,取100 cm2。 6、使用中消毒剂与无菌器械保存液 6.1 采样时间采取更换钱使用中的消毒剂与无菌器械保存液。 6.2 采样量及方法 在无菌条件下,用无菌吸管吸取1ml 被检样液,加入9ml 稀释液中混均,对于醇类与酚类消毒剂,稀释液用普通营养肉汤即可;对于含氯消毒剂、含典消毒剂、过氧化物消毒剂,需在肉汤中加入0.1%硫代硫酸钠;对于 洗必泰,季铵盐类消毒剂,需在肉汤中加入3% (w/v )吐温80和0.3%卵磷脂;对于醛类消毒剂,需在肉汤中 加入0.3%甘氨酸;对于含有表面活性剂的各种复方消毒剂,需在肉汤中加入3% (w/v)吐温80,以中和备检样 液的残效作用。 6.3 结果分析 平板上有菌生长,证明被检样液有残存活菌,若每个平板菌落数在10个以下,仍可用于消毒处理(但不能用于灭菌),若每个平板菌落数超过10个,说明每毫升被检样液含菌量已超过100个,即不宜再用。 7、污染采样方法 7.1 采样时间 在消毒或灭菌处理后进行采样 7.2 采样量及采样方法按5.2 执行

洁净室(区)浮游菌测定标准操作规程

1.目的:建立一个洁净室(区)浮游菌测定的标准操作规程,确保洁净室(区)洁净程度。 2.范围:适用于洁净室和洁净区、无菌室或局部空气净化区域(包括洁净工作台)的浮游菌的测定和环境的验证。 3.责任:质量管理部QA监测员对本规程的实施负责。 4.程序: 4.1.术语和定义:下列术语和定义适用于本标准操作规程。 :微生物培养后,由一个或几个微生物繁殖而形成的微生物集落,简称CFU。通常用个数表示。 ,通过专门的培养基,在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。 ,以计数浓度表示,单位是个/m3或个/L。 ,由使用者自行设定微生物含量等级。当检测结果超过该等级时,应启动监测程序对该区域的微生物污染情况立即进行跟踪。 ,由使用者自行设定一个微生物含量等级,从而给定了一个正常状态相比最早警戒的偏差值。当超过该最早警戒的偏差值时,应启动保证工艺或环境不受影响的程序及相关措施。 4.2.测试方法 ,经若干时间和适宜的生长条件让其繁殖到可见的菌落计数,以判定该洁净室的微生物浓度。 ,其中包含涉及的卫生知识和基本微生物知识。 洁净室(区)的测试人员应选择与生产操作的空气洁净度级别要求相适应的

穿戴方式。 选择合适的浮游菌采样器,包括采用无油的抽气泵,较低的气流流速和较大的采样流量,以保证培养基表面的水分不被吹干。 本测试需要具备仪器、辅助设备和培养基如下: 浮游菌采样器、培养皿、培养基(见本标准附录B)、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器。 浮游菌采样器一般采用撞击法机理,可分为狭缝式采样器、离心式或针孔式采样器。狭缝式采样器由内部风机将气流吸入,通过采样器的狭缝式平板,将采集的空气喷射并撞击到缓慢旋转的平板培养基表面上,附着的活微生物粒子经培养后形成菌落。离心式采样器由于内部风机的高速旋转,气流从采样器前部吸入从后部流出,在离心力的作用下,空气中的活微生物粒子有足够的时间撞击到专用的固形培养条上,附着的活微生物粒子经培养后形成菌落。针孔式采样器是气流通过一个金属盖吸入,盖子上市密集的经过机械加工的特制小孔,通过风机将收集到得细小的空气流直接撞击到平板培养基表面上,附着的活微生物粒子经培养后形成菌落。 本标准操作规程中使用的浮游菌采样器为狭缝式采样器。 ,定期对仪器作检定,使用校验合格,且在使用有效期内的仪器。 ,若必需,则先清洁表面,或在相应的洁净室内准备和存放(用保护罩或其他适应当地外罩保护仪器)。 ,上面应蒙上一张透明不沾尘的覆盖物,在A级洁净室内不能用铅笔和橡皮。 ,预热至稳定后,方可按仪器说明书的规定对仪器进行校正,同时检查采样

院感监测SOP(操作规程)

院感监测操作规程 一、目的: 为了预防和控制医院感染,提高医疗质量,确保医疗安全,需定期对院内感染相关的各项目进行监测,并及时发现院内感染薄弱环节及存在问题,为采取控制感染措施提供依据。 二、内容: 根据本院实际情况,需做院感监测的项目包括空气培养,手卫生,一次性物品细菌培养,无菌物品培养,高压锅灭菌效果生物监测,物体表面细菌培养,紫外线灭菌效果监测。 三、操作规程 1、层流手术室定义 不同级别的层流手术室,其空气洁净度标准不同 1). 百级层流手术室的标准:每立方尺空气中≥0.5um的尘粒数≤100颗(或每升空气中≤3.5颗)。可做关节置换、器官移植、脑外科、心脏外科、眼科等手术。(本院无) 2). 千级层流手术室的标准:每立方尺空气中≥0.5um的尘粒数≤1000颗(或每升空气中≤35颗)。本院有1间手术室,作为Ⅰ类切口无菌手术,如整形外科、胸外科肝胆胰外科等手术。3). 万级层流手术室的标准:每立方尺空气中≥0.5um的尘粒数≤10000颗(或每升空气中≤350颗)。本院有7间手术室,作为Ⅱ类切口,如单睑、鞍鼻等手术。 4). 十万级层流手术室的标准:每立方尺空气中≥0.5um的尘粒数≤100000颗(或每升空气中≤3500颗)。本院有5间手术室,作为Ⅲ类切口手术。 5). 洁净辅助用房:本院为万级和10万级。 2、洁净手术室、洁净辅助用房要求 表1. 洁净手术室的等级标准 注:本院手术室等级为Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级。

表2. 洁净辅助用房的等级标准 2、层流手术室静态空气净化效果的监测: 1)设备材料:90mm培养皿,普通培养基,37℃温箱. 2)采样时间:洁净手术室房间清洁并搽拭消毒后状态,然后进行测试,室内应无工作人员。 3)监测人员要求:穿洁净服,戴口罩,手卫生。动作要轻,避免产生二次污染。 4)布点顺序: 原则:放置培养皿从总平面中最靠里的房间开始布置,依次向外,最后人员撤出。 每间房间都是从房间最靠里的点开始布置,最后布置门附近的点,然后人员撤出。 收取培养皿的顺序相反,从最外边的房间开始收,每间房间从门附近的培养皿开始收,最先布置的培养皿最后收,沉降时间略有差别。 5).布点高度:室内地面至0.8m高度的任意高度,若有固定设备、仪器、手术床等,可放置在设备上。 6).布点位置及数量:测试皿、对照皿在洁净间内均匀布置即可。 具体布点数量及位置[2] 洁净度局部千级设置9个点(●)洁净度局部万级设置7个点(●)洁净度十万级设置5个点周围万级设置4个点(▲)周围十万级设置2个点(▲) ▲▲▲ ●●● ●●●● ●●●●●●● ●●●● ○●●● ▲▲▲ 备注:千级手术室设○点为空白对照皿。操作方法:此培养皿打开后立即封盖。图上灰色区为手术床。7).采样方法:每个培养皿布点前必须按上述表格贴上手术室的级别、位置的标签。申请单上要注

最新院感细菌培养操作20813说课材料

1.目的: 医院是病原微生物较集中,抵抗力低 的人群密集的地方,加之化疗、放疗等手 段的采用,影响病人免疫机能下降,大量 使用抗生素,引起耐药菌株增多,菌群失 调,以及先进医疗仪器广泛应用等原因,增加消毒灭菌的难度,致使院内感染已成 为当前医疗实践的严重障碍,直接影响医 疗效果。进一步规范院内感染监测标本的 程序,更好、更快检测病原微生物的生长 情况,预防医院感染的发生。 2.设备、试剂与材料 2.1 VITEK 2 compact鉴定药敏分析系统 2.2 VITEK 32鉴定药敏分析系统 2.3美国FORMAⅡ级生物安全柜 2.4显微镜 2.5酒精灯 2.6接种环 1.

2.7恒温培养箱 2.8各种培养基 2.9 革兰氏染色液 2.10触酶试剂 2.11氧化酶试剂 2.12移液器 2.13无菌吸嘴 3.院感标本采集 3.1空气的采样 3.1.1采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 3.1.2采样高度与地面垂直高度80-150CM。 3.1.3布点方法室内面积<30m2,设一条对角线上取三点,即中心一点,两端各距 墙1m处各取一点;室内面积>30m2,设东、西、南、北、中5点,其中东、西、南、 2.

北点均距墙1m。 3.1.4采样方法用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检。 3.2物体表面采样 3.2.1采样时间选择消毒处理后4小时内进行采样。 3.2.2采样面积被采表面<100cm2,取全部表面;被采表面>100cm2,则取100cm2。 3.2.3采样方法用5×5 cm2的标准来灭菌规格板,放在被检物体表面,用无菌规格 板,放在被检物体表面,用浸有无菌生理 盐水采样液的棉拭子1支,在规格板内横 竖往返各涂抹5次,并随之转动棉拭子, 连续采样1-4个规格板面积,剪支手接触 部位,将棉拭子放入装10ml采样液的试 管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭 子直接涂抹物体的方法采样。 3.3医护人员手采样 3.

细菌培养实验报告(新)

篇一:培养基的制备与灭菌实验报告 陕西师范大学远程教育学院 生物学实验报告 报告题目培养基的制备与灭菌 姓名刘伟 学号 专业生物科学 批次/层次 指导教师 学习中心培养基的制备与灭菌 一、目的要求 1. 掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。 2. 掌握培养基的配置原则和方法。 3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。 二、基本原理 牛肉膏蛋白胨培养基: 是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供细菌生长繁殖之用。 高压蒸汽灭菌: 主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽,关闭排气阀继续加热。此时蒸汽不溢出,压力增大,沸点升高,获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性,而达到灭菌的目的。 三、实验材料 1. 药品:牛肉膏、蛋白胨、nacl、琼脂、1mol/l的naoh和hcl溶液。 2. 仪器及玻璃器皿:天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三 角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。 3. 其他物品:药匙、称量纸、ph试纸、记号笔、棉花等。 四、操作步骤 (一)玻璃器皿的洗涤和包装 1.玻璃器皿的洗涤 玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。将三角瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中.用毛刷刷洗,然后用自来水及蒸馏水冲净。移液管先用含有洗涤剂的水浸泡,再用自来水及蒸馏水冲洗。洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。 2.灭菌前玻璃器皿的包装 (1)培养皿的包扎:培养皿由一盖一底组成一套,可用报纸将几套培养皿包 成一包,或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内,加盖灭菌。包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。 (2)移液管的包扎:在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉),它的作 用是避免外界及口中杂菌进入管内,并防止菌液等吸入口中。塞入此小段棉花应距管口约0.5cm 左右,棉花自身长度约1~1.5cm。塞棉花时.可用一外围拉直的曲别针、将少许棉花塞入管口内。棉花要塞得松紧适宜,吹时以能通气而又不使棉花滑下为准。 先将报纸裁成宽约5cm左右的长纸条,然后将已塞好棉花的移液管尖端放在长条报纸的一端,约成45℃角,折叠纸条包住尖端,用左手握住移液管身,有手将移液管压紧.在桌面上向前搓转,以螺旋式包扎起来。上端剩余纸条,折叠打结,准备灭菌。 (二)液体及固体培养基的配制过程 1.液体培养基配制

霉菌培养箱操作规程

霉菌培养箱操作规程 一、使用说明 1.设备到位后,锁紧前脚轮,使箱体安置平稳。 2.接通220V/50Hz电源,且电源插座应有可靠接地。 3.控制器操作说明。(配用仪表,PC-2002-PT100) 1)面板示意图参照图: 面板上左窗口3位数码管,可显示测量温度或设定温度,右窗口4个数码管可 显示设定时间或计时值(倒计时),同时对应的指示灯亮。 2)面板右下部为一组按键,功能分别如下: ①温度/时间键在上电状态下,按一下该键,仪表进入温度设定状态,仪表左窗口显示原先设定的温度值,且末位数码管闪烁,同时温度设定指示灯亮,用户可根据需要修改参数。再按一下,仪表进入时间设定状态,仪表右窗口显示原先设定的时间值,同时时间设定指示灯亮,用户可根据需要修改参数。(若工作时间设定为000,则表示定时器不工作,在此状态下运行时,右窗口显示设定温度)再按一下该键,则又回到温度设定状态,如此循环。 按住该键不松开,约5秒后,仪表进入其他参数设定状态,左、右窗口分别显示: sc **.*表示温度修正值(一~+℃)(出厂值0) dEL ***表示压缩机延时时间(60~300秒)(出厂值180) AL ***表示超温报警温度~10.Ot)(出厂值)

设定完毕,按设定写入键退出设定状态。 若上电后,无任何键按下,约10秒后,仪表进入运行状态,计时指示灯亮,仪表根据设定的温度控制值,对系统进行温度控制,并根据设定的定时值,开始倒计时,当计时值为零后,仪表结束运行,仪表显示End,并有蜂鸣器输出,呜叫约30秒钟。用户若需再次运行,可按一下温度/时间键,10秒后,仪表自动进入运行状态。 ②▲键该键为加数键。在设定参数时,数字中有一个闪烁。若按该键,则设定数值末位数加1。若按住该键不松开,约2秒后,设定值连续加(时间连续加10);按住该键不松开约5秒后,时间设定值连续加100。 ⑧▼键该键为减数键。在设定参数时,若按该键,则设定数值减l,若按住该键不松开,经3秒后,设定值连续减(时间连续减10);按住该键不松开约5秒后,时间设定值连续减100。 ④设定写入键在设定完成后,按一下该键退出设定状态。 ⑤照明开/关键在任何时候,按一下该键,则照明控制继电器接通,再按一下,则继电器断开。 说明: ①仪表加热时,加热指示灯亮。 ②压缩机延时时间为所设定的dEL值。压缩机工作时,制冷指示灯亮;若此时压缩机延时保护时间未到,则压缩机继续等待,且制冷指示灯闪烁。 ⑧如果测量温度>设定温度+AL时,则有蜂鸣器报警,报警指示灯亮,

MJX-100B-Z型霉菌培养箱标准操作规程

1、概述: MJX型霉菌培养箱是具有冷热控制的高精度恒温设备,可用于植物培养,育种试验,细菌、霉菌、微生物的培养、保存,水体分析的BOD测定以及其它用途的恒温试验。是生物遗传工程、医疗、卫生防疫、药检、化妆品检验、农牧水产等科研单位及公司的理想试验设备。 2、目的: 建立一个MJX-160B-Z型霉菌培养箱的使用标准操作程序,使操作过程标准化。确保霉菌培养箱的正确使用。 3、适用范围: 本标准适用于MJX-160B-Z型霉菌培养箱的使用。 4、依据:MJX-160B-Z型霉菌培养箱的使用说明书。 5、责任人员:微生物检验人员。 6、结构特点: 本机箱体采用优质薄板加工而成,表面涂装牢固、美观。箱门中装有双层中空玻璃视窗,并附有紫外线杀菌灯,使工作室可以杀菌消毒。内胆采用镜面不锈钢薄板,四角圆弧形加工制成,箱内温度均匀性好,经久耐用,清洗方便,湿度采用自然蒸发加湿。控温部分采用以单片机技术的新型智能数显温度调节仪,用户可根据不同要求,通过操作控制面板的触摸键对温度及时间进行设定、调节,达到试验目的。 7、工作原理: 培养箱由位于箱内温度传感器所感受到的实际温度转换成电信号,经微电脑来控制加热器或制冷压缩机工作,从而达到所需温度。 8、技术参数: 8.1 公称容积:100L; 8.2 控温范围:5~50℃; 8.3 温度波动允差:±1℃; 8.4 温度均匀度允差:±1.5℃; 8.5 电源电压:交流220V/50Hz; 8.6 输入功率:280W(100L); 8.7 工作环境:环境温度10~30℃,相对湿度70%以下; 8.8 制冷剂:R12。 9、安装方法: 9.1 本设备需安装于避开阳光直射,通风干燥的室内,设备与墙壁必须有10cm以上距离。 9.2 箱体可用底部调节螺钉调节,使箱体安置平稳。 9.3 本设备使用交流220V/50Hz电源,供电电路中必须有可靠接地线,保证使用安全。 10、使用方法: 10.1 接通电源,打开电源开关,使开关处于“通”的位置,设备进入上电状态。此时即可开始温度和时间的设定操作。 10.2 温度/时间键可进行温度与时间切换 10.2.1 温度设定:按一下温度/时间键,仪表的温度设定指示灯亮。按设定键进入SV 状态,设定显示窗三个数字中有一个数闪烁,再按移位键(<)将闪烁数位移至需设定位,然后按∨或∧键即可改变温度设定值到所需温度(最小值0.1℃),最后按下设定键将设定值存入单片机,此时左显示窗显示测量温度,右显示窗口显示设定温度。

生化培养箱使用标准操作规程

********有限公司管理文件 标题SHP-80生化培养箱使用标准操作规程文件编号SOP-SBCZ-05 页码第1页,共4页 起草人起草日期年月日版号2012年A版 审核人审核日期年月日生效日期年月日批准人批准日期年月日颁发份数3份 分发部门质量部、技术部、行政部 1 目的 建立SHP-80生化培养箱使用标准操作规程,规范SHP-80生化培养箱操作程序,保证该设备的正常运行 2 范围:适用于本公司SHP-80生化培养箱的运行操作。 3 责任者:SHP-80生化培养箱的运行操作人员、设备管理人员。 4内容 4.1 设备概况 SHP-80生化培养箱是用于细菌、霉菌、微生物、组织细胞的培养保存,是生物、遗传工程、医学等行业实验室作稳定性实验及生物培养的重要实验设备,该设备外形为立式,容积为80升,箱体及箱门均采用优质钢板表面喷塑,采用双层玻璃观察窗的结构,箱内装有可控制的照明灯,不开箱门就可清晰观察箱内培养物品的状况,工作室采用优质镜面不锈钢板,内有由不锈钢丝制成的可方便移动的多层隔板,隔板的间距可灵活改变。电源开关、电源指示灯、控温仪等集中于箱体上部。 该设备采用高精度微机控温仪及控湿仪,具有响应快、超调小、精度高的特点,使用轻触按键设定参数,具有可调温差报警方式、可调定时控制方式、基本控制模式等基本功能。 4.2 设备主要参数 型号电源(V/HZ) 温度范围(℃)温度波动(℃)SHP-80生化培养箱220V/50HZ 5~60 ±0.3 报警温度(℃)加热功率(W)制冷功率(W)工作室尺寸(mm)+2 280 145 400×400×500

4.3 控温仪示意图 4.4 操作前的准备 4.4.1 确认设备状态是否处于完好已清洁。 4.4.2 取下完好已清洁状态标识卡,挂上运行中状态标识卡。 4.5 操作 4.5.1 设定工作温度(最高可设定到60℃) 4.5.1.1 打开电源开关,此时控温仪会进行自检并显示箱内温度。 4.5.1.2 按“SET”键设定工作温度,这时控温仪上显示的温度值会闪烁。 4.5.1.3 根据工艺要求按“▲”升高键或“▼”降低键不放设定工作温度。 4.5.1.4 到达设定温度后放开“▲”升高键或“▼”降低键,这时设定的显示值会闪烁。 4.5.1.5 按一下“SET”键确认设定温度,新温度设定后,这时控温仪就转换为显示箱内实际温度。 4.5.2 设定定时时间:该设备目前默认到达设定温度后开始定时的方式(最高可设定到99小时),如需改为设定温度后开始计时方式需由设备管理人员更改。 4.5.2.1 按“SET”键约3秒启用定时功能,这时控温仪显示“0.00”并闪烁,定时器处于关闭状态,等待设定。 4.5.2.2 按“▲”升高键设定需要的时间(1分钟~99小时)。 4.5.2.3 按一下“SET”键确认设定时间,这时黄灯闪烁表示定时器开始工作,同时控温 SET 6 7 1 3 4 5 2 8 1. 加热指示灯(绿) 2. 风机指示灯(黄) 3. 温度显示 4. 报警指示灯(红) 5. 控制功能键 6. 加键 7. 减键 8. 压缩机运行指示灯(蓝)

生化培养箱的使用标准操作规程

生化培养箱的使用标准操作规程 1目的 建立生化培养箱使用标准操作规程,规范生化培养箱操作程序,保证该设备的正常运行 2范围:适用于本公司生化培养箱的运行操作。 3责任者:生化培养箱的运行操作人员、设备管理人员。 4内容 4.1设备概况 生化培养箱是用于细菌、霉菌、微生物、组织细胞的培养保存,是生物、遗传工程、医学等行业实验室作稳定性实验及生物培养的重要实验设备,该设备外形为立式,容积为 80升,箱体及箱内均采用优质钢板表面喷塑,采用双层玻璃观察窗的结构,箱内装有可控制的照明灯,不开箱门就可清晰观察箱内培养物品的状况,工作室米用优质镜面不锈钢版,内有由不锈钢丝制成的可方便移动的多层隔板,隔板的间距可灵活改变。电源开关、电源指示灯、控温仪等集中于箱体上部。 该设备采用高精度微机控温仪及控湿仪,具有响应快、超调小、精度高的特点,使用轻触按键设定参数,具有可调温差报警方式、可调定时控制方式、基本控制模式等基本功能。 4.2设备主要参数

1.加热指示叮〔绿) 2凤机16示灯 3,浣度显示 4撮警指示灯〔红) S控制功能挺 6 tn縫 了■減建 8 &络机住?亍指示叮互 6 4.4操作前的准备 441 确认设备状态是否处于完好已清洁。 4.4.2取下完好已清洁状态标识卡,挂上运行状态标识卡。 4.5操作 4.5.1设定工作温度(最高可设定到 60C) 4.5.1.1打开电源开关,此时控温仪会进行自检并显示箱内温度。 4.5.1.2按“SET键设定工作温度,这时控温仪上显示的温度值会闪烁。 4.5.1.3根据工艺要求按“ ▲”升高键或“ ▼”降低键不放设定工作温度。 4.5.1.4到达设定温度后放开“ ▲”升高键或“ ▼”降低键,这时设定的显示值会闪烁。 4.5.1.5按一下“ SET键确认设定温度,新温度设定后,这时控温仪就转换为显示箱内实际温度。

细菌培养操作

细菌培养 灭菌物品:试管、枪头、平皿、ep管、涂布棒、培养基。 无菌室灭菌:桌子、凳子用质量分数为2%-3%的来苏水擦洗,再用紫外灯照射15分钟。LB培养基的配制:(用于肺炎克雷伯杆菌) (1)称取NaCl 1g/100ML 胰蛋白胨(Tryptone)1g/100ML 酵母提取物(Yeast Extract)0.5g/100ML 琼脂1.5-2g/100ML (只在配固体培养基时加) (2)加热溶解 (3)调PH 7.2-7.4 (用NaOH) (4)分装,加塞,包扎 (5)灭菌0.1Mpa 121.3摄氏度20分钟 (6)无菌观察:将已灭好菌的培养基放入37摄氏度的温箱中培养1-2天, 若无菌生长放入冰箱储存备用。 肉汤培养基的配置:(用于金葡菌) (1)营养肉汤18g/100ML (2)其余步骤同上,但不用调PH 玻璃器皿须用干热灭菌法灭菌: (1)试管:每个管口用铝铂纸包好,2个一组用报纸包好。 平皿:每组5个,用报纸包好 (2)将待灭菌的物品放入烘箱中,但摆放不要太挤,不要接触内壁的铁 板,以防止报纸着火。 (3)升温至160摄氏度,2小时 (4)降温,切断电源自然降温,70摄氏度以下打开箱门,取出物品,防 止温度骤降导致玻璃器皿炸裂。 镜检: (1)涂片:左手拿试管,右手拿接种环,将接种环在酒精灯上烧红灭菌,烧至伸入试管的部位。用右手的小手指及手边缘部位拔出试管的塞子,将试管口在火焰 上烧一圈,然后将接种环伸入试管内取出一环,迅速将试管口在火焰上烧一圈, 塞上塞子(此过程塞子一直在手中)。将接种环上的菌液轻轻涂在平板上,均匀 涂成直径为1 cm的圆。(若在涂的过程中出现回缩现象说明载波片没有洗干净)(2)干燥:涂片在室温下自然干燥,有时为了加快干燥,可将标本面朝上,手持载波片的一端,在酒精灯的火焰上方微微加热,切勿靠近火焰,热度以不宜烫手 为宜。 (3)固定:加热法:标本面朝上,在酒精灯火焰外层来回通过3-4次,共约2-3秒,并不时以载波片反面触皮肤,以热而不烫为度,放置待冷后,进行染色。 (4)染色:标本固定后采用合适的染料进行染色,一般1-3分钟。我们用沙红(也叫番红)safranine 染色2分钟。 (5)水洗:一般用自来水,将载波片倾斜,沿着上侧使水流缓缓冲下染液,一般以冲下来的水基本无色为度,(不要对者标本直接冲,以免冲去被检标本)(6)干燥:室温中自然干燥或用吸水纸轻轻敷在标本上吸干,干透后镜检(不可在标本上擦拭,以免损伤标本)。 显微镜观察: (1)先用低倍镜观察,将载物台升至最高,然后再用粗准焦螺旋慢慢下降,当

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