柠檬黄
柠檬黄GB4481.1-1999《食品添加剂柠檬黄》
1范围
本标准适用于由对氨基苯磺酸重氮化后与1-（4’-磺酸基苯基）-3-羧基甲（乙）酯-5-吡
唑啉酮偶合并水解或由对氨基苯磺酸重氮化后与1-（4’-磺酸基苯基）-3-羧基-5-吡唑啉
酮偶合而制得的食品添加剂柠檬黄。
2规范性引用文件
本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注
日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）
适用于本标准。
3化学名称、结构式、分子式、相对分子质量
3.1化学名称：
1-(4’-磺酸基苯基)-3-羧基-4-（4’-磺酸苯基偶氮基）-5-吡唑啉酮三钠盐
3.2结构式：
3.3分子式
C16H9N4Na3O9S2
3.4相对分子质量
534.36
4技术要求
4.1感官要求：
表1感官要求
项目要求检验方法
色泽橙黄或亮橙色自然光线下采用目视评定
组织状态粉末或颗粒
4.2理化指标：
表2 理化指标
项目指标检验方法
柠檬黄，w/% ≥87.0 附录A中A.4 干重减重、氯化物（以NaCl计）及硫酸盐（以Na2SO4计）总量，w/%≤13.0 附录A中A.5 水不溶物，w/% ≤0.20 附录A中A.6 对氨基苯磺酸钠，w/% ≤0.20 附录A中A.7 1-（4’-磺酸基苯基）-3-羧基-5-吡唑啉酮二钠盐，w/% ≤0.20 附录A中A.8 1-（4’-磺酸基苯基）-3-羧基甲（乙）酯基-5-吡唑啉酮二钠盐≤0.10 附录A中A.9 4,4’-(重氮亚氨基)二苯磺酸二钠盐，w/% ≤0.05 附录A中A.10 未磺化芳族伯胺（以苯胺计），w/% ≤0.01 附录A中A.11 副染料，w/% ≤ 1.0 附录A中A.12 砷（A S）/（mg/kg）≤ 1.0 附录A中A.13
铅（Pb）/（mg/kg）≤10.0 附录A中A.14 汞（Hg）/（mg/kg）≤ 1.0 附录A中A.15
附录 A
（规范性附录）
检验方法
A.1 安全提示
本标准试验方法中使用的部分试剂具有毒性或腐蚀性，按相关规定操作，操作时需小心谨慎。
若溅到皮肤上应立即用水冲洗，严重者应立即治疗。在使用挥发性酸时，要在通风橱中进行。
A.2 一般规定
本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T 6682—2008规定的
三级水。试验中所需标准溶液、杂质标准溶液、制剂及制品在没有注明其他规定时，均按
GB/T 601、GB/T602、GB/T 603规定配制和标定。
A.3 鉴别试验
A.3.1 试剂和材料
A.3.1.1 硫酸。
A.3.1.2 乙酸铵溶液：1.5g/L。
A.3.2 仪器和设备
A.3.2.1 分光光度计。
A.3.2.2 比色皿：10mm
A.3.3 鉴别方法
应满足如下条件：
A.3.3.1 称取约0.1g试样（精确至0.01g），溶于100mL水中，显黄色澄清溶液。
A.3.3.2 称取约0.1g试样（精确至0.01g），加硫酸10mL后显黄色，取此液2滴～3滴加入5mL
水中显黄色。
A.3.3.3 称取约0.1g试样（精确至0.01g），溶于100mL乙酸铵溶液中，取此溶液1mL，加乙
酸铵溶液配至100mL，该溶液的最大吸收波长为428 nm±2nm。
A.4 柠檬黄的测定
A.4.1 三氯化钛滴定法(仲裁法)
A.4.1.1 方法提要
在酸性介质中，柠檬黄中的偶氮基被三氯化钛还原分解，按三氯化钛标准滴定溶液的消耗量，
计算其含量。
A.4.1.2 试剂和材料
A.4.1.2.1 酒石酸氢钠；
A.4.1.2.2 三氯化钛标准滴定溶液：c(TiCl3)=0.1mol/L(现用现配，配制方法见附录B)；
A.4.1.2.3 钢瓶装二氧化碳。
A.4.1.3 仪器和设备
A ——锥形瓶(500mL)；
B ——棕色滴定管(50mL)；
C ——包黑纸的下口玻璃瓶(2000mL)；
D ——装有100g/L 碳酸铵溶液和100g/L 硫酸亚铁溶液等量混合液的容器(5000mL)；
E ——活塞；
F ——空瓶；
G ——装有水的洗气瓶。
图A.1 三氯化钛滴定法的装置图
A.4.1.4 分析步骤
称取约0.5g 试样（精确至0.0001g ），置于500mL 锥形瓶中，溶于50mL 煮沸并冷却至室温的水中，加入15g 酒石酸氢钠和150mL 沸水，振荡溶解后，按图A.1 装好仪器，在液面下通入二氧化碳
的同时，加热沸腾，用三氯化钛标准滴定溶液滴定使其固有颜色消失为终点。 A.4.1.5 结果计算
柠檬黄以质量分数1 w 计，数值用％ 表示，按公式(A.1)计算:
w 1=
%100)
4/)(1000/(1
m M V c (A.1)
式中：
c —— 三氯化钛标准滴定溶液浓度的准确数值，单位为摩尔每升（mol/L ）；
V —— 滴定试样耗用的三氯化钛标准滴定溶液体积的准确数值，单位为毫升（mL ）；
M ——柠檬黄的摩尔质量数值，单位为克每摩尔（g/mol ）[M （C 16H 9N 4Na 3O 9S 2）=534.36]； m 1 ——试样的质量数值，单位为克（g ）。 计算结果表示到小数点后1 位。
平行测定结果的绝对差值不大于1.0％（质量分数），取其算术平均值作为测定结果。
A.4.2 分光光度比色法 A.4.2.1 方法提要
将试样与已知含量的柠檬黄标准品分别用水溶解，用乙酸铵溶液稀释定容后，在最大吸收波长处，分别测其吸光度值，计算其含量。 A.4.2.2 试剂和材料
A.4.2.2.1 乙酸铵溶液：1.5g/L 。
A.4.2.2.2 柠檬黄标准品：≥87.0％（质量分数、按A.4.1测定）。 A.4.2.3 仪器和设备 A.4.2.3.1 分光光度计。 A.4.2.3.2 比色皿：10mm 。 A.4.2.4 柠檬黄标样溶液的配制
称取约0.25g 柠檬黄标准品（精确到0.0001g ），溶于适量水中，移入1000mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。吸取10mL ，移入500mL 容量瓶中，加乙酸铵溶液稀释至刻度，摇匀，备用。
A.4.2.5 柠檬黄试样溶液的配制
称量与操作方法同A.4.2.4 标样溶液的配制。 A.4.2.6 分析步骤
将柠檬黄标样溶液和柠檬黄试样溶液分别置于10mm 比色皿中，同在最大吸收波长处用分光光度计测定各自的吸光度值，用乙酸铵溶液作参比液。 A.4.2.7 结果计算
柠檬黄以质量分数1 w 计，数值用％表示，按公式(A.2)计算：
w1=
000
m
m w A A ? (A.2) 式中：
A ——柠檬黄试样溶液的吸光度值；
m 0——柠檬黄标准品质量的数值，单位为克（g ）； A 0——柠檬黄标样溶液的吸光度值；
m ——试样质量的数值，单位为克（g ）； w 0——柠檬黄标准品的质量分数％。 计算结果表示到小数点后1 位。
平行测定结果的绝对差值不大于1.0％（质量分数），取其算术平均值作为测定结果。 A.5 干燥减量、氯化物(以NaCl 计)及硫酸盐(以Na 2S04 计)总量的测定 A.5.1 干燥减量的测定 A.5.1.1 分析步骤
称取约2g 试样（精确至0.001g ），置于已在135℃±2℃恒温干燥箱恒量的称量瓶中，在135℃±2℃恒温干燥箱中烘至恒量 A.5.1.2 结果计算
干燥减量的质量分数以2 w 计，数值用％表示，按公式(A.3)计算： w2=
%100m 2
3
2?-m m (A.3)
式中：
m 2—— 试样干燥前质量的数值，单位为克（g ）； m 3——试样干燥至恒量的质量数值，单位为克（g ）。 计算结果表示到小数点后1位。
平行测定结果的绝对差值不大于0.2%（质量分数），取其算术平均值作为测定结果。 A.5.2 氯化物(以NaCl 计)的测定 A.5.2.1 试剂和材料 A.5.2.1.1 硝基苯。
A.5.2.1.2 活性炭；767针型。 A.5.2.1.3 硝酸溶液：1+1。
A.5.2.1.4 硝酸银溶液：c (AgNO 3)=0.1mol/L 。 A.5.2.1.5 硫酸铁铵溶液：
配制方法：称取约14g 硫酸铁铵，溶于100mL 水中，过滤，加10mL 硝酸，贮存于棕色瓶中； A.5.2.1.6 硫氰酸铵标准滴定溶液： c (NH 4CNS)=0.1mol/L 。 A.5.2.2 试样溶液的配制
称取约2g 试样（精确至0.001g ），溶于150mL 水中，加约15g 活性炭，温和煮沸2 min ～3min ，加入1mL 硝酸溶液，不断摇动均匀，放置30min(其间不时摇动)。用干燥滤纸过滤。如滤液有色，则再加5g 活性炭，不时摇动下放置1h ，再用干燥滤纸过滤(如仍有色则更换活性炭重复操作至滤液无色)。
每次以水10mL 洗活性炭三次，滤液合并移至200mL 容量瓶中，加水至刻度，摇匀。用于氯化物和硫酸盐含量的测定。 A.5.2.3 分析步骤
移取50mL 试样溶液，置于500mL 锥形瓶中，加2mL 硝酸溶液和10mL 硝酸银溶液 (氯化物含量多时要多加些)及5mL 硝基苯，剧烈摇动至氯化银凝结，加入1mL 硫酸铁铵溶液，用硫氰酸铵标准滴定溶液滴定过量的硝酸银到终点并保持1min ，同时以同样方法做一空白试验。 A.5.2.4 结果计算
氯化物(以NaCl 计)以质量分数3 w 计，数值用％表示，按公式(A.4)计算：
w3=
%100)
200/50(]1000/)[(c 41
011?-m M V V ………………………（A.4）
式中：
c 1 —— 硫氰酸铵标准滴定溶液浓度的准确数值，单位为摩尔每升（mol/L ）；
V １ ——滴定空白溶液耗用硫氰酸铵标准滴定溶液体积的准确数值，单位为毫升（mL ）； V 0 ——滴定试样溶液耗用硫氰酸铵标准滴定溶液体积的准确数值，单位为毫升（mL ）； M 1 ——氯化钠的摩尔质量数值，单位为克每摩尔（g/mol ）[M 1（NaCl ）=58.4]； m 4——试样质量的数值，单位为克（g ）。 计算结果表示到小数点后1位。
平行测定结果的绝对差值不大于0.3％（质量分数），取其算术平均值作为测定结果。 A.5.3 硫酸盐(以Na 2S04计)的测定 A.5.3.1 试剂和材料
A.5.3.1.1 氢氧化钠溶液： 2g/L ； A.5.3.1.2 盐酸溶液：1+1999；
A.5.3.1.3 氯化钡标准滴定溶液：c (1/2BaCl 2)=0.l mol/L （配制方法见附录C ）； A.5.3.1.4 酚酞指示液：10g/L ；
A.5.3.1.5 玫瑰红酸钠指示液：称取0.lg 玫瑰红酸钠，溶于10mL 水中(现用现配)。
A.5.3.2 分析步骤
吸取25mL 试样溶液（A.5.2.2），置于250mL 锥形瓶中，加1滴酚酞指示液，滴加氢氧化钠溶液呈粉红色，然后滴加盐酸溶液至粉红色消失，摇匀，溶解后在不断摇动下用氯化钡标准滴定溶液滴定，以玫瑰红酸钠指示液作外指示液，反应液与指示液在滤纸上交汇处呈现玫瑰红色斑点并保持2min 不褪色为终点。 同时以相同方法做空白试验。
A.5.3.3 结果计算
硫酸盐（以Na 2SO 4计）以质量分数4 w 计，数值用％表示，按公式(A.5)计算：
w4=
%100)
200/25()
2/](1000/)[(42322?-m M V V c ………………………（A.5）
式中：
c 2 —— 氯化钡标准滴定溶液浓度的准确数值，单位为摩尔每升（mol/L ）；
V 2—— 滴定试样溶液耗用氯化钡标准滴定溶液体积的准确数值，单位为毫升（mL ）； V 3—— 滴定空白溶液耗用氯化钡标准滴定溶液体积的准确数值，单位为毫升（mL ）； M 2 ——硫酸钠的摩尔质量的数值，单位为克每摩尔（g/mol ）[M 2（Na 2SO 4）=142.04]； m 4 ——试样质量的数值，单位为克（g ）。 计算结果表示到小数点后1位。
平行测定结果的绝对差值不大于0.2％（质量分数），取其算术平均值作为测定结果。 A.5.4 干燥减量、氯化物(以NaCl 计)及硫酸盐(以Na 2SO 4计)总量的结果计算
干燥减量和氯化物(以NaCl 计)及硫酸盐(以Na 2SO 4计)的总量以质量分数5 w 计，数值用％表示，
按公式(A.6)计算：
w 5 = w 2 + w 3 + w 4 ………………………（A.6）
式中：
2 w —干燥减量的质量分数％；
3 w —氯化物(以NaCl 计)的质量分数％；
4 w —硫酸盐(以Na 2SO 4计) 的质量分数％。 计算结果表示到小数点后1位。 A.6 水不溶物的测定 A.6.1 仪器和设备
A.6.1.1 玻璃砂芯坩埚：G4，孔径为5μm ～15μm 。 A.6.1.2 恒温干燥箱。 A.6.2 分析步骤
称取约3g 试样（精确至0.001g ），置于500mL 烧杯中，加入50℃～60℃热水250mL ，使之溶解，用已在135℃±2℃烘至恒量的玻璃砂芯坩埚过滤，并用热水充分洗涤到洗涤液无色，在135℃±2℃恒温干燥箱中烘至恒量。 A.6.3 结果计算
水不溶物以质量分数6 w 计，数值用％表示，按公式(A.7)计算： w 6=%100m 5
6
?m ………………………（A.7）
式中：
m6 ——干燥后水不溶物质量的数值，单位为克（g）；
m5 ——试样质量的数值，单位为克（g）。
计算结果表示到小数点后2位。
平行测定结果的绝对差值不大于0.05％（质量分数），取其算术平均值作为测定结果。
A.7 对氨基苯磺酸钠的测定
A.7.1 方法提要
采用反相液相色谱法，用外标法进行定量，计算对氨基苯磺酸钠的质量分数。
A.7.2 试剂和材料
A.7.2.1 甲醇。
A.7.2.2 对氨基苯磺酸钠。
A.7.2.3 乙酸铵溶液：2g／L。
A.7.3 仪器和设备
A.7.3.1 高效液相色谱仪：输液泵-流量范围0.1 mL/min～5.0mL/min，在此范围内其流量稳定性为
±1%；检测器-多波长紫外分光检测器或具有同等性能的紫外分光检测器。
A.7.3.2 色谱柱：长为150mm ，内径为4.6mm的不锈钢柱，固定相为C18、粒径5μm。
A.7.3.3 色谱工作站或积分仪。
A.7.3.4 超声波发生器。
A.7.3.5 定量环：20μL。
A.7.3.6 微量注射器：20μL～100μL。
A.7.4 色谱分析条件
A.7.4.1 检测波长：254nm。
A.7.4.2 柱温：40℃；
A.7.4.3 流动相：A，乙酸铵溶液；B，甲醇；
浓度梯度：40min线性浓度梯度从A（95）比B（5）至A（50）比B（50）；
A.7.4.4 流量：1mL/min；
A.7.4.5 进样量：20μL。
可根据仪器不同，选择最佳分析条件，流动相应摇匀后用超声波发生器进行脱气。
A.7.5 试样溶液的配制
称取0.1g试样（精确至0.0001g），加乙酸铵溶液溶解，稀释至100mL，此为试样溶液。
A.7.6 标准溶液的配制
称取0.01g（精确至0.0001g）已置于真空干燥器中干燥24h后的对氨基苯磺酸钠，用乙酸铵溶液溶解，稀释至100mL。吸取上述溶液10mL，加乙酸铵溶液稀释至100mL后分别吸取2.5mL、
2.0mL、1.0mL此溶液，再用乙酸铵溶液分别稀释定容至100mL，作为系列标准溶液。
A.7.7 分析步骤
在A.7.4规定的色谱分析条件下，分别用微量注射器吸取试样溶液及各系列标准溶液注入并充满定量环进行色谱检测，待最后一个组分流出完毕，进行结果处理。测定系列标准溶液中对氨基苯磺酸钠的峰面积，绘制成标准曲线。测定试样溶液中对氨基苯磺酸钠的峰面积，根据标准曲线计算对氨基苯磺酸钠的含量。色谱图见附录D。
A.8 1-（4′-磺酸基苯基）-3-羧基-5-吡唑啉酮二钠盐的测定
A.8.1 方法提要
采用反相液相色谱法，用外标法进行定量，计算1-（4′-磺酸基苯基）-3-羧基-5-吡唑啉酮二钠盐
的质量分数。
A.8.2 试剂和材料
A.8.2.1 1-（4′-磺酸基苯基）-3-羧基-5-吡唑啉酮二钠盐。
A.8.2.2 其余同A.7.2。
A.8.3 仪器和设备
同A.7.3。
A.8.4 试样溶液的配制
同A.7.5。
A.8.5 标准溶液的配制
称取约0.01g（精确至0.0001g）已置于真空干燥器中干燥24h 后的1-（4′-磺酸基苯基）-3-羧基-5-吡唑啉酮二钠盐，用乙酸铵溶液溶解，稀释定容至100mL。吸取上述溶液10mL，加乙酸铵溶液
稀释定容至100mL。分别吸取2.5mL、2.0mL、1.0mL，再用乙酸铵溶液准确稀释定容至100mL，作为系列标准溶液。
A.8.6 色谱分析条件
同A.7.4。
A.8.7 分析步骤
在A 8.6 规定的色谱分析条件下，分别用微量注射器吸取试样溶液及各系列标准溶液注入并充满定量环进行色谱检测，待最后一个组分流出完毕，进行结果处理。测定系列标准溶液中1-（4′-磺酸基苯基）-3-羧基-5-吡唑啉酮二钠盐的峰面积，绘制成标准曲线。测定试样溶液中1-（4′-磺酸基苯基）-3-羧基-5-吡唑啉酮二钠盐的峰面积，根据标准曲线计算1-（4′-磺酸基苯基）-3-羧基-5-吡唑啉酮二钠盐的含量。色谱图见附录D。
A.9 1-（4′-磺酸基苯基）-3-羧酸甲(乙)酯基-5-吡唑啉酮钠盐的测定
A.9.1 方法提要
采用反相液相色谱法，用外标法进行定量，计算1-（4′-磺酸基苯基）-3-羧酸甲(乙)酯基-5-吡唑啉酮钠盐的质量分数。
A.9.2 试剂和材料
A.9.2.1 1-（4′-磺酸基苯基）-3-羧酸甲(乙)酯基-5-吡唑啉酮钠盐。
A.9.2.2 其余同A.7.2。
A.9.3 仪器和设备
同A.7.3。
A.9.4 试样溶液的配制
同A.7.5。
A.9.5 标准溶液的配制
称取约0.01g（精确至0.0001g）已置于真空干燥器中干燥24h 后的1-（4′-磺酸基苯基）-3-羧酸甲（乙）酯基-5-吡唑啉酮钠盐，用乙酸铵溶液溶解，稀释定容至100mL。吸取10mL 上述溶液，加乙酸铵溶液，稀释定容至100mL 后分别吸取10.0mL、5.0mL、2.0mL、1.0mL，再用乙酸铵溶液稀释定容至100mL，作为系列标准溶液。
A.9.6 色谱分析条件
同A.7.4。
A.9.7 分析步骤
在A.9.6 规定的色谱分析条件下，分别用微量注射器吸取试样溶液及各系列标准溶液注入并充满定量环进行色谱检测，待最后一个组分流出完毕，进行结果处理。测定系列标准溶液中1-（4′-磺酸基苯基）-3-羧酸甲（乙）酯基-5-吡唑啉酮钠盐的峰面积，绘制成标准曲线。测
定试样溶液中1-（4′-磺酸基苯基）-3-羧酸甲（乙）酯基-5-吡唑啉酮钠盐的峰面积，根据标准曲线计算1-（4′-磺酸基苯基）-3-羧酸甲（乙）酯基-5-吡唑啉酮钠盐的含量。色谱图见附录D。
A.10 4,4′-（重氮亚氨基）二苯磺酸二钠盐的测定
A.10.1 方法提要
采用反相液相色谱法，用外标法进行定量，计算4,4′-（重氮亚氨基）二苯磺酸二钠盐的质量分
数。
A.10.2 试剂和材料
A.10.2.1 4,4′-（重氮亚氨基）二苯磺酸二钠盐。
A.10.2.2 其余同A.7.2。
A.10.3 仪器和设备
同A.7.3。
A.10.4 试样溶液的配制
同A.7.5。
A.10.5 标准溶液的配制
称取约0.01g（精确至0.0001g）已置于真空干燥器中干燥24h 后的4,4′-（重氮亚氨基）二苯磺酸二钠盐，用乙酸铵溶液溶解，稀释定容至100mL。吸取10mL 上述溶液，加乙酸铵溶液，稀释定容至100mL 后分别吸取10.0mL、5.0mL、2.0mL、1.0mL，再用乙酸铵溶液稀释定容至100mL，作为系列标准溶液。
A.10.6 色谱分析条件
A.10.6.1 检测波长：358nm。
A.10.6.2 其他同A.7.4。
A.10.7 分析步骤
在A.10.6 规定的色谱分析条件下，分别用微量注射器吸取试样溶液及各系列标准溶液注入并充满定量环进行色谱检测，待最后一个组分流出完毕，进行结果处理。测定系列标准溶液中4,4′-（重氮亚氨基）二苯磺酸二钠盐的峰面积，绘制成标准曲线。测定试样溶液中4,4′-（重氮亚氨基）二苯磺酸二钠盐的峰面积，根据标准曲线计算4,4′-（重氮亚氨基）二苯磺酸二钠盐的含量。色谱图见附录D。
A.11 未磺化芳族伯胺(以苯胺计)的测定
A.11.1 方法提要
以乙酸乙酯萃取出试样中未磺化芳族伯胺成分，将萃取液和苯胺标准溶液分别经重氮化和偶合后再测定各自生成染料的吸光度予以比较与判别。
A.11.2 试剂和材料
A.11.2.1 乙酸乙酯。
A.11.2.2 盐酸溶液：1+10。
A.11.2.3 盐酸溶液：1+3。
A.11.2.4 溴化钾溶液：500g／L。
A.11.2.5 碳酸钠溶液：200g/L。
A.11.2.6 氢氧化钠溶液：40g／L。
A.11.2.7 氢氧化钠溶液：4g/L。
A.11.2.8 R盐溶液：20g/L。
A.11.2.9 亚硝酸钠溶液：3.52g/L。
A.11.2.10 苯胺标准溶液：0.1000g/L。
配制：用小烧杯称取0.5000g新蒸馏的苯胺，移至500mL容量瓶中，以150mL盐酸溶液（1+3）分三次洗涤烧杯，并入500mL容量瓶中，水稀释至刻度。移取25mL该溶液至250mL容量瓶中，水定容。此溶液苯胺浓度为0.1000g/L。
A.11.3 仪器和设备
A.11.3.1 可见分光光度计。
A.11.3.2 比色皿：40mm。
A.11.4 试样萃取溶液的配制
称取约2g试样（精确至0.001g）于150mL烧杯中，加100mL水和5mL氢氧化钠溶液（40g/L），在温水浴中搅拌至完全溶解。将此溶液移入分液漏斗中，少量水洗净烧杯。每次以50mL乙酸乙酯萃取两次，合并萃取液。以10mL氢氧化钠溶液（4g/L）洗涤乙酸乙酯萃取液，除去痕量色素。再每次以10mL盐酸溶液（1+3）对乙酸乙酯溶液反萃取三次。合并该盐酸萃取液，然后用水稀释至100mL，摇匀。此溶液为试样萃取溶液。
A.11.5 标准对照溶液的制备
吸取2.0mL苯胺标准溶液至100mL容量瓶中，用盐酸溶液（1+10）稀释至刻度，混合均匀，此为
标准对照溶液。
A.11.6 重氮化偶合溶液的制备
吸取10mL试样萃取溶液，移入透明洁净的试管中，浸入盛有冰水混合物的烧杯内冷却10min。在试管中加入1mL溴化钾溶液及0.5mL亚硝酸钠溶液，稍用力摇匀后仍置于冰水浴中冷却
10min，进行重氮化反应。另取一个25mL容量瓶移入1mL R盐溶液和10mL碳酸钠溶液。将上述试管中的苯胺重氮盐溶液加至盛有R盐溶液的容量瓶中，边加边略振摇容量瓶，用少许水洗净试管一并加入容量瓶中，再以水定容。充分混匀后在暗处放置15min。该溶液为试样重氮化偶合溶液。标准重氮化偶合溶液的制备，吸取10mL标准对照溶液，其余步骤同上。
A.11.7 参比溶液的制备
吸取10mL盐酸溶液（1+10）、10mL碳酸钠溶液及1mL R盐溶液于25mL容量瓶中，水定容。该溶液为参比溶液。
A.11.8 分析步骤
将标准重氮化偶合溶液和试样重氮化偶合溶液分别置于比色皿中，在510nm波长处用分光光度计测定各自的吸光度A a、A b，以A.11.7作参比溶液。
A.11.9 结果判定
A b≤A a即为合格。
A.12 副染料的测定
A.12.1 方法提要
用纸上层析法将各组分分离，洗脱，然后用分光光度法定量。
A.12.2 试剂和材料
A.12.2.1 无水乙醇。
A.12.2.2 正丁醇。
A.12.2.3 丙酮溶液：1+1。
A.12.2.4 氨水溶液：4+96。
A.12.2.5 碳酸氢钠溶液：4g/L。
A.12.3 仪器和设备
A.12.3.1 分光光度计。
A.12.3.2 层析滤纸：1号中速，150mm×250mm。
A.12.3.3 层析缸：φ240mm×300mm。
A.12.3.4 微量进样器：100μL。
A.12.3.5 纳氏比色管：50mL有玻璃磨口塞。
A.12.3.6 玻璃砂芯漏斗：G3，孔径为15μm～40μm。
A.12.3.7 50mm比色皿。
A.12.3.8 10mm比色皿。
A.12.4 分析步骤
A.12.4.1 纸上层析条件
A.12.4.1.1 展开剂：正丁醇+无水乙醇+氨水溶液＝6+2+3。
A.12.4.2 试样溶液的配制
称取约1g 试样（精确至0.001g），置于烧杯中，加入适量水溶解后，移入100mL 容量瓶中，稀释至刻度，摇匀备用，该试样溶液浓度为1%。
A.12.4.3 试样洗出液的制备
用微量进样器吸取100μL 试样溶液，均匀地注在离滤纸底边25mm 的一条基线上，成一直线，使其在滤纸上的宽度不超过5mm，长度为130mm，用吹风机吹干。将滤纸放入装有预先配制好展开剂的层析缸中展开，滤纸底边浸入展开剂液面下l0mm，待展开剂前沿线上升至150mm 或直到副染料分离满意为止。取出层析滤纸，用冷风吹干。
用空白滤纸在相同条件下展开，该空白滤纸应与上述步骤展开用的滤纸在同一张滤纸上相邻部位裁取。
副染料纸上层析示意图见图A.2。
将展开后取得的各个副染料和在空白滤纸上与各副染料相对应的部位的滤纸按同样大小剪下，并剪成约5mm×15mm 的细条，分别置于50mL 的纳氏比色管中，准确加入丙酮溶液5mL，摇动3min～5min 后,再准确加入20mL 碳酸氢钠溶液，充分摇动，然后分别在G3 玻璃砂芯漏斗中自然过滤,滤液应澄清，无悬浮物。分别得到各副染料和空白的洗出液。在各自副染料的最大吸收波长处，用50mm比色皿，将各副染料的洗出液在分光光度计上测定各自的吸光度值。
在分光光度计上测定吸光度值时，以5mL 丙酮溶液和20mL 碳酸氢钠溶液的混合液作参比液。
A.12.4.4 标准溶液的配制
吸取2mL 1％的试样溶液移入100mL 容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，该溶液为标准溶液。
A.12.4.5 标准洗出液的制备
用微量进样器吸取100μL 标准溶液，均匀地点注在离滤纸底边25mm 的一条基线上，用吹风机吹干。将滤纸放入装有预先配制好展开剂的层析缸中展开，待展开剂前沿线上升
40mm，取出用冷风吹干，剪下所有展开的染料部分，按A.12.4.3 方法进行操作，得到标准洗出液。用10mm 比色皿在最大吸收波长处测吸光度值。
同时用空白滤纸在相同条件下展开，按相同方法操作后测空白洗出液的吸光度值。
A.12.4.6 结果计算
副染料以质量分数7 w 计，数值用％表示，按公式(A.8)计算：
w 7=S B A B A B A s s n n ?--+??????-)
2/100)((5/)]()[(11………………………（A.8）
式中：
A 1…A n —— 各副染料洗出液以50mm 光径长度测定出的吸光度值；
b 1…b n —— 各副染料对照空白洗出液以50mm 光径长度测定出的吸光度值； A s —— 标准洗出液以10mm 光径长度测定出的吸光度值；
b s —— 标准对照空白洗出液以10mm 光径长度测定出的吸光度值； 5 —— 折算成以10mm 光径长度的比数；
100/2 —— 标准洗出液折算成1％试样溶液的比数； S —— 试样的质量分数％。 计算结果表示到小数点后1 位。
平行测定结果的绝对差值不大于0.2％（质量分数），取其算术平均值作为测定结果。 A.13 砷的测定 A.13.1 方法提要
柠檬黄经湿法消解后，制备成试样溶液，用原子吸收光谱法测定砷的含量。 A.13.2 试剂和材料 A.13.2.1 硝酸。
A.13.2.2 硫酸溶液：1+1。
A.13.2.3 硝酸-高氯酸混合溶液：3+1。
A.13.2.4 砷（As ）标准溶液：按GB/T 602配制和标定后,再根据使用的仪器要求进行稀释配制成含
砷相应浓度的三种标准溶液。 A.13.2.5 氢氧化钠溶液：1g/L 。
A.13.2.6 硼氢化钠溶液：8g/L(溶剂为1g/L 的氢氧化钠溶液)。 A.13.2.7 盐酸溶液：1+10。
A.13.2.8 碘化钾溶液：200g/L。
A.13.3 仪器和设备
A.13.3.1 原子吸收光谱仪
A.13.3.2 仪器参考条件：砷空心阴极灯分析线波长：193.7nm；狭缝：0.5nm～1.0nm；灯电流：6
mA～10mA。
A.13.3.3 载气流速：氩气250mL/min。
A.13.3.4 原子化器温度：900℃。
A.13.4 分析步骤
A.13.4.1 试样消解
称取约1g 试样（精确至0.001g），置于250mL 三角或圆底烧瓶中，加10mL～15mL 硝酸和2mL硫酸溶液，摇匀后用小火加热赶出二氧化氮气体，溶液变成棕色，停止加热，放冷后加入5mL 硝酸-高氯酸混合液，强火加热至溶液透明或微黄色，如仍不透明，放冷后再补加5mL 硝酸-高氯酸混合溶液，继续加热至溶液透明无色或微黄色并产生白烟（避免烧干出现炭化现象），停止加热，放冷后加水5mL 加热至沸，除去残余的硝酸-高氯酸(必要时可再加水煮沸一次)，继续加热至发生白烟，保持10min，放冷后移入100mL 容量瓶（若溶液出现浑浊、沉淀或机械杂质须过滤），用盐酸溶液稀释定容。
同时按相同的方法制备空白溶液。
A.13.4.2 测定
量取25mL消解后的试样溶液至50mL容量瓶，加入5mL碘化钾溶液，用盐酸溶液稀释定容，摇匀，静置15min。
同时按相同的方法以空白溶液制备空白测试液。
开启仪器，待仪器及砷空心阴极灯充分预热，基线稳定后，用硼氢化钠溶液作氢化物还原发生剂，以标准空白、标准溶液、样品空白测试液及样品溶液的顺序，按电脑指令分别进样。测试结束后电脑自动生成工作曲线及扣除样品空白后的样品溶液中砷浓度，输入样品信息（名称、称样量、稀释体积等），即自动换算出试样中砷的含量。
平行测定结果的绝对差值不大于0.1mg/kg，取其算术平均值作为测定结果。
A.14 铅的测定
A.14.1 方法提要
柠檬黄经湿法消解后，制备成试样溶液，用原子吸收光谱法测定铅的含量。
A.14.2 试剂和材料
A.14.2.1 铅（Pb）标准溶液：按GB/T 602配制和标定后,再根据使用的仪器要求进行稀释配制成含
铅相应浓度的三种标准溶液。
A.14.2.2 氢氧化钠溶液：1g/L。
A.14.2.3 硼氢化钠溶液：8g/L(溶剂为1g/L的氢氧化钠溶液)。
A.14.2.4 盐酸溶液：1+10。
A.14.3 仪器和设备
A.14.3.1 原子吸收光谱仪
A.14.3.2 仪器参考条件：GB 5009.12-2010 第三法火焰原子吸收光谱法。
A.14.4 分析步骤
可直接采用A.13.4.1的试样溶液和空白溶液。
按GB 5009.12-2010 第三法火焰原子吸收光谱法操作。
平行测定结果的绝对差值不大于1.0mg/kg，取其算术平均值作为测定结果。
A.15 汞的测定
A.15.1 方法提要
柠檬黄经微波或回流消解后，制备成试样溶液，用原子吸收光谱法测定汞的含量。
A.15.2 试剂和材料
A.15.2.1 汞（Hg）标准溶液：按GB/T 602配制和标定后,再稀释配制成1mL含汞0.5μg、1μg、2μg
的三种标准溶液。
A.15.2.2 硝酸。
A.15.2.3 过氧化氢。
A.15.2.4 氢氧化钠溶液：1g/L。
A.15.2.5 硼氢化钠溶液：8g/L(溶剂为1g/L的氢氧化钠溶液)。
A.15.2.6 盐酸溶液：1+10。
A.15.3 仪器和设备
A.15.3.1 原子吸收光谱仪。
A.15.3.2 仪器参考条件：汞空心阴极灯分析线波长：253.7nm；狭缝：0.5nm；灯电流：6mA。
A.15.3.3 载气流速：氩气200mL/min。
A.15.3.4 原子化器温度：常温。
A.15.4 分析步骤
A.15.4.1 微波消解
称取约0.1g 试样（精确至0.001g），置于消解罐中，加入10mL 硝酸和2mL 过氧化氢，盖好安全阀后，将消解罐置于微波炉中，10min 内升温至130℃，停留2min 后再5min 升温至150℃，停留3min 后再5min 升温至180℃，保温10min。待完全冷却后将试样转移至25mL 容量瓶中（若溶液出现浑浊、沉淀或机械杂质须过滤），用盐酸溶液稀释定容。
A.15.4.2 回流消解
参考GB/T 5009.17-2003 第二法冷原子吸收光谱法中的回流消解。
同时按相同的方法制备空白溶液，作为空白参比液。
A.15.4.3 测定
开启仪器，待仪器及汞空心阴极灯充分预热，基线稳定后，用硼氢化钠溶液作氢化物还原发生剂，以标准空白、标准溶液、样品空白及样品溶液的顺序，按电脑指令分别进样。测试结束后电脑自动生成工作曲线及扣除样品空白后的样品溶液中汞浓度，输入样品信息（名称、称样量、稀释体积等），即自动换算出试样中汞的含量。
平行测定结果的绝对差值不大于0.1mg/kg，取其算术平均值作为测定结果。
附 录 B （规范性附录）
三氯化钛标准滴定溶液的配制方法
B.1 试剂和材料 B.1.1 盐酸。
B.1.2 硫酸亚铁铵。
B.1.3 硫氰酸铵溶液：200g/L 。 B.1.4 硫酸溶液：1+1。 B.1.5 三氯化钛溶液。
B.1.6 重铬酸钾标准滴定溶液：c (1/6K 2Cr 2O 7)=0.1mol/L ，按GB /T602配制与标定。 B.2 仪器和设备 见图A.1。
B.3 三氯化钛标准滴定溶液的配制 B.3.1 配制
取100mL 三氯化钛溶液和75mL 盐酸，置于1000mL 棕色容量瓶中，用煮沸并已冷却到室温的
水稀释至刻度，摇匀，立即倒入避光的下口瓶中，在二氧化碳气体保护下贮藏。 B.3.2 标定
称取约3g （精确至0.0001g ）硫酸亚铁铵，置于500mL 锥形瓶中，在二氧化碳气流保护作用下，
加入50mL 煮沸并已冷却的水，使其溶解，再加入25mL 硫酸溶液，继续在液面下通入二氧化碳气
流作保护，迅速准确加入35mL 重铬酸钾标准滴定溶液，然后用需标定的三氯化钛标准溶液滴定到
接近计算量终点，立即加入25mL 硫氰酸铵溶液，并继续用需标定的三氯化钛标准溶液滴定到红色
转变为绿色，即为终点。整个滴定过程应在二氧化碳气流保护下操作，同时做一空白试验。 B.3.3 结果计算
三氯化钛标准溶液的浓度以c (TiCl 3)计，单位以摩尔每升（mol/L ）表示，按公式(B.1)计算：
c(TiCl 3)=
3
21
cV V V ………………………（B.1）
式中：
c —— 重铬酸钾标准滴定溶液浓度的准确数值，单位为摩尔每升（mol/L ）； V 1 —— 重铬酸钾标准滴定溶液体积的准确数值，单位为毫升（mL ）；
V 2 —— 滴定被重铬酸钾标准滴定溶液氧化成高钛所用去的三氯化钛标准滴定溶液体积的准确数值，单位为毫升（mL ）；
V 3 —— 滴定空白用去三氯化钛标准滴定溶液体积的准确数值，单位为毫升（mL ） 计算结果表示到小数点后4 位。
以上标定需在分析样品时即时标定。
（规范性附录）
氯化钡标准溶液的配制方法
C.1 试剂和材料 C.1.1 氯化钡。 C.1.2 氨水。
C.1.3 硫酸标准滴定溶液： c (1/2H 2SO 4)=0.1mol/L ，按GB/T601配制与标定。 C.1.4 玫瑰红酸钠指示液（称取0.1g 玫瑰红酸钠，溶于10mL 水中，现用现配）。 C.1.5 广范pH 试纸。 C.2 配制
称取12.25g 氯化钡，溶于500mL 水，移入1000mL 容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。 C.3 标定方法
吸取20mL 硫酸标准滴定溶液，置于250mL 锥形瓶中，加50 mL 水，并用氨水中和到广范pH 试纸
为8，然后用氯化钡标准滴定溶液滴定，以玫瑰红酸钠指示液作外指示液，反应液与指示液在滤纸上
交汇处呈现玫瑰红色斑点且保持2min 不褪色为终点。 C.4 结果计算
氯化钡标准滴定溶液浓度的以c (1/2BaCl 2)计，单位以摩尔每升（mol/L ）表示，按公式(C.1)计算：
c(
21
BaCl2)=5
41V c V ………………………（C.1） 式中：
c 1 —— 硫酸标准滴定溶液浓度的准确数值，单位为摩尔每升（mol/L ）； V 4 —— 硫酸标准滴定溶液体积的准确数值，单位为毫升（mL ）；
V 5—— 消耗氯化钡标准滴定溶液体积的准确数值，单位为毫升（mL ）。 计算结果表示到小数点后4位。
（资料性附录）
柠檬黄液相色谱示意图和各组分保留时间
D.1 柠檬黄液相色谱示意图
1. 1-（4′-磺酸基苯基）-3-羧基-5-吡唑啉酮二钠盐;
2. 对氨基苯磺酸钠;
3. 未知物;
4. 1-（4′-磺酸基苯基）-3-羧酸甲（乙）酯基-5-吡唑啉酮钠盐;
4,4′-（重氮亚氨基）二苯磺酸二钠盐;
5. 柠檬黄.
图D.1 柠檬黄液相色谱示意图
D.2 柠檬黄各组分保留时间
表D.1 柠檬黄各组分保留时间
峰号组分名称保留时间/min
1 1-（4′-磺酸基苯基）-3-羧基-5-吡唑啉酮二钠盐 1.589
2 对氨基苯磺酸钠 2.109
3 未知物7.620
4 1-（4′-磺酸基苯基）-3-羧酸甲（乙）酯基-5-吡唑啉酮钠盐9.50
4,4′-（重氮亚氨基）二苯磺酸二钠盐12.5
5 柠檬黄13.46
注：不同仪器、不同分离柱、甚至不同时间进样各组分的保留时间均会有所不同，但各组分的洗脱顺序是不变的。
高效液相色谱法测定杏罐头中的柠檬黄_日落黄
2010年9月第31卷第9期 食品研究与开发 [J].分析测试学报，2004，23(3)：26-30 收稿日期：2009-09-03 为了改善食品的感官性状，常在食品中添加人工合成着色剂（又称色素）。色素色泽鲜艳，着色力强，性质稳定，不易褪色，用量较低，可任意拼色，价格便宜。但色素主要以苯、甲苯、萘等化工产品为原料，经化学合成，主要属苯胺类色素，有的色素在人体内可形成致癌性物质α-氨基萘酚和β-萘胺。因此，世界各国对色素的品种、 使用范围和使用量都有严格限制。目前，我国对人工合成着色剂的使用范围和使用量都有严格 的规定。GB 2760-2007《食品添加剂使用卫生标准》 [1] 规定，西瓜酱罐头允许限量使用日落黄外其余均不得添加合成色素。采用无水乙醇-氨水溶液浸泡，离心的方法提取被杏果肉吸附的柠檬黄、日落黄，高效液相色谱法测定，方法的重复性好，回收率、精密度较高。 1材料与方法 1.1仪器与试剂1.1.1仪器 液相色谱仪： FINNIGAN Surveyor LC 美国菲尼根高效液相色谱仪JJ-2型；匀浆机：江苏省金坛市环宇科学仪器厂SK-1型；快速混匀器：江苏省金坛市医疗仪器厂KQ-250DB ； 超声波清洗器：昆山市超声仪器有限公司型；AK/QC-058型离心机：上海安亭。1.1.2试剂 柠檬黄、日落黄溶液标准物质：国家标准物质研究中心；去离子水；无水乙醇、氨水、甲醇、甲酸、乙酸、柠檬酸、乙酸铵，均为分析纯；聚酰胺粉过200目筛；甲醇：色谱纯[2]。1.2色谱条件 色谱柱：Inertsil ODS-3V 4.6×250mm ；流动相：甲 高效液相色谱法测定杏罐头中的柠檬黄、日落黄 王冬妍，杨书宁 （沈阳产品质量监督检验院，辽宁沈阳110022 ）摘 要：水果罐头中添加的合成色素大部分被果肉所吸附，为充分提取色素，优化水果罐头中合成色素的测定方法。 采用无水乙醇-氨水溶液浸泡、离心，提取被杏果肉吸附的柠檬黄、日落黄，高效液相色谱法测定。柠檬黄、日落黄的平均回收率分别为99.32%和98.96%，相对标准偏差分别为0.51%和0.33%。关键词：高效液相色谱法；杏罐头；柠檬黄；日落黄 Determination of Tartrazine,Sunset Yellow in Canned Apricot High Performance Liquid Chromatography WANG Dong-yan ，YANG Shu-ning （Shenyang Product Quality Supervision ＆Inspection Institute ，Shenyang 110022，Liaoning,China ）Abstract ：Synthetic pigment added to canned fruit is adsorbed by pulp,in order to fully extract the pigment,optimize the determination of synthetic pigment in canned fruit.This study extracts the tartrazine and sunset yellow adsorbed by apricot pulp with dipping in anhydrous ethanol-ammonia and centrifuging,and determines with high performance liquid chromatography.The average recovery rate of tartrazine and sunset yellow was 99.32%and 98.96%， the relative standard deviation （RSD ）was 0.51%,and 0.33%respectively.Key words ：HPLC ；canned apricot ；tartrazine ；sunset yellow 作者简介：王冬妍（1977—），女（汉），工程师，硕士，研究方向：食品检测技术研究。 777777777777777777777777777777777777777777777777 检测分析 134
柠檬黄与日落黄
柠檬黄与日落黄 1.物理化学性质 柠檬黄为橙黄色均匀粉末，无臭，易溶于水。0.1%水溶液呈黄色，柠檬黄溶于甘油、丙二醇、微溶于乙醇，不溶于油脂。21℃时在水中的溶解度为11.8 %，在乙醇中的溶解度为9 %-10 %。耐热性、耐光性、耐盐性均好。耐氧化性较差，遇碱稍变红，还原时褪色。我国食品添加剂卫生标准规定，柠檬黄最大使用量为0.1mg/kg，婴儿食品不得使用。人体日允许摄入量暂定为0～0.75mg/ kg。 日落黄为橙色的颗粒或粉末，无臭，易溶于水。0.1%水溶液呈橙黄色，日落黄溶于甘油、丙二醇，但难溶于乙醇，不溶于油脂，21℃时在水中的溶解度为25.3%，乙醇中的溶解度为0.9%～50%。耐光性、耐热性、耐酸性非常强，耐碱性较好，遇碱呈红褐色，还原时褪色。我国食品添加剂卫生标准规定，日落黄最大使用量为0.1g/ kg，婴儿食品不得使用。人体日允许摄入量暂定为0～2.5mg/ kg。 2.食用合成色素应用现状 食品加工中食用色素的用量一般很少，但是在着色方面却能发挥巨大的作用，近年来，我国食品结构发生了巨大变革，食用合成色素在食品工业中起的作用越发突出，每年食用合成色素的用量已增至800吨左右。随着食品工业的发展其需求量仍在不断增长，目前年增长率约为3.2％。至2000年止，我国批准使用的食用合成色素有苋菜红、胭脂红、赤藓红、新红、诱惑红、日落黄、柠檬黄、亮蓝、靛蓝以及它们的色淀，酸性红、二氧化肽、β叶绿素铜钠，胡萝卜素（合成）等21种。我国政府对食用合成色素的使用范围和使用量均作出了严格的规定：凡是肉类及其加工品（红肠肠衣除外）、鱼类及其加工品、醋、酱油、腐乳等调味品、水果及其制品、乳类及乳制品、婴儿食品、饼干、糕点都不能使用人工合成色素。只有汽水、冷饮食品、糖果、配制酒和果汁露可以少量使用，一般不得超过1/10000。然而，事实上，在巨大的经济利益的驱使下，食品中合成色素的超标、超范围使用现象屡禁不止。据国家质检总局近年来的国家监督抽查显示，滥用食用色素的现象主要集中在粮食、蜜饯、水果罐头、肉制品等行业。对市场抽检结果表明，一方面消费者在购买食品时较重视食品的外观色泽，另一方面对又滥用色素的现象缺乏鉴别的知识和手段，以及国家相关部门监管和控制等方面所存在的难度都使得滥用合成色素的违法行为在食品工业中有日益扩展的趋势。 3.过量摄入食用合成色素的危害性 食用合成色素是指用人工化学合成方法所制造的有机色素，自19世纪问世以来，由于成本低廉、色泽鲜艳、着色力强、性质稳定、可任意调配、让生产者用起来得心应手，以至于在食品生产中应用广泛。在添加色素的食品中，使用天然色素的不足20%，其余均为食用合成色素。但是食用合成色素多以苯、甲苯、萘等化学产品为原料，经过磺化、硝化、偶氮化等一系列化学反应合成。这些色素大多带有毒性，主要是其化学性能直接影响人体健康，或在代谢过程中产生有害物质，使人体受到损害。大量研究结果表明：食用合成色素有致癌性是由于其大多为偶氮化合物。食用类偶氮色素分子的芳香部分大都有萘环与偶氮键，它们是偶氮色素的颜色载体，偶氮色素由于化学性质较活泼，在强还原剂作用下，R—N=N—R 容易发生断裂，萘环被还原成α—萘胺、β—萘胺，这两种物质具有致癌性。另外，在加工过程中，砷、铅、铜、苯酚、苯胺、乙醚、氯化物等化工产品会对食用合成色素造成不同程度的污染，也会对人体造成危害。 天然色素由于价格还较高和受目前生活水平所限，其在国内食品制造业中的应用量还较少。随着我国人民生活水平的进一步提高及大众健康意识的增强，回归大自然、食用全天然原料的产品必将成为今后食品消费的主流。广大消费者在日常生活中应加强自我健康和维权意识，在购买商品时不要过分追求食品的色泽，同时认真查阅商品包装上的成分标识，尽量选用无色素或使用天然色素的食品。
与黄色色素有关的食品分类号
食品分类号食品名称/分类添加剂名称功能最大使用量（g/kg）备注标准来源 04.01.02.09 装饰性果蔬茶黄色素， 茶绿色素 着色 剂 按生产需要适量使用表A1 05.02 糖果茶黄色素， 茶绿色素 着色 剂 按生产需要适量使用表A1 07.02.04 糕点上彩装茶黄色素， 茶绿色素 着色 剂 按生产需要适量使用表A1 14.02.03 果蔬汁（肉）饮料茶黄色素， 茶绿色素 着色 剂 按生产需要适量使用表A1 14.04.02.02 风味饮料（包括果味饮 料，乳味，茶味及其他味 饮料）（限果味饮料） 茶黄色素， 茶绿色素 着色 剂 按生产需要适量使用表A1 14.05.01 茶类饮料茶黄色素， 茶绿色素 着色 剂 按生产需要适量使用表A1 15.02 配制酒茶黄色素， 茶绿色素 着色 剂 按生产需要适量使用表A1 06.03.02.02 生干面制品柑橘黄着色 剂 按生产需要适量使用表A1 03.0 冷冻饮品（03.04食用冰 除外） 红花黄 着色 剂 0.2 表A1 04.01.02.04 水果罐头红花黄着色 剂 0.2 表A1 04.01.02.08 蜜饯凉果红花黄着色 剂 0.2 表A1 04.01.02.09 装饰性果蔬红花黄着色 剂 0.2 表A1 04.02.02.04 蔬菜罐头红花黄着色 剂 0.2 表A1 05.02 糖果红花黄着色 剂 0.2 表A1 06.04.02.01 八宝粥罐头红花黄着色 剂 0.2 表A1 06.07 方便米面制品红花黄着色 剂 0.5 表A1 07.02.04 糕点上彩装红花黄着色 剂 0.2 表A1
14.02.03 果蔬汁（肉）饮料红花黄着色 剂 0.2 表A1 14.04.01 碳酸饮料红花黄着色 剂 0.2 表A1 14.04.02.02 风味饮料（包括果味饮 料，乳味，茶味及其他味 饮料）（限果味饮料） 红花黄 着色 剂 0.2 表A1 15.02 配制酒红花黄着色 剂 0.2 表A1 16.01 果冻红花黄着色 剂 0.2 如果用 于果冻 粉，按冲 调倍数 加使用 量 表A1 03.0 冷冻饮品（03.04食用冰 除外） 黄蜀葵胶 增稠 剂 5.0 表A1 04.01.02.05 果酱黄蜀葵胶增稠 剂 10.0 表A1 07.01 面包黄蜀葵胶增稠 剂 10.0 表A1 07.02 糕点黄蜀葵胶增稠 剂 10.0 表A1 07.03 饼干黄蜀葵胶增稠 剂 10.0 表A1 01.05.01 稀奶油黄原胶（又 名汉生胶） 稳定 剂、 增稠 剂 按生产需要适量使用表A1 02.02.01.01 黄油和浓缩黄油黄原胶（又 名汉生胶） 稳定 剂、 增稠 剂 5.0 表A1 06.03.02.01 生湿面制品（如面条，饺 子皮，馄饨皮，烧卖皮） 黄原胶（又 名汉生胶） 稳定 剂、 增稠 剂 10.0 表A1 06.03.02.02 生干面制品黄原胶（又稳定 4.0 表A1
柠檬黄
柠檬黄GB4481.1-1999《食品添加剂柠檬黄》 1范围 本标准适用于由对氨基苯磺酸重氮化后与1-（4’-磺酸基苯基）-3-羧基甲（乙）酯-5-吡 唑啉酮偶合并水解或由对氨基苯磺酸重氮化后与1-（4’-磺酸基苯基）-3-羧基-5-吡唑啉 酮偶合而制得的食品添加剂柠檬黄。 2规范性引用文件 本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注 日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单） 适用于本标准。 3化学名称、结构式、分子式、相对分子质量 3.1化学名称： 1-(4’-磺酸基苯基)-3-羧基-4-（4’-磺酸苯基偶氮基）-5-吡唑啉酮三钠盐 3.2结构式： 3.3分子式 C16H9N4Na3O9S2 3.4相对分子质量 534.36 4技术要求 4.1感官要求： 表1感官要求 项目要求检验方法 色泽橙黄或亮橙色自然光线下采用目视评定 组织状态粉末或颗粒 4.2理化指标： 表2 理化指标 项目指标检验方法 柠檬黄，w/% ≥87.0 附录A中A.4 干重减重、氯化物（以NaCl计）及硫酸盐（以Na2SO4计）总量，w/%≤13.0 附录A中A.5 水不溶物，w/% ≤0.20 附录A中A.6 对氨基苯磺酸钠，w/% ≤0.20 附录A中A.7 1-（4’-磺酸基苯基）-3-羧基-5-吡唑啉酮二钠盐，w/% ≤0.20 附录A中A.8 1-（4’-磺酸基苯基）-3-羧基甲（乙）酯基-5-吡唑啉酮二钠盐≤0.10 附录A中A.9 4,4’-(重氮亚氨基)二苯磺酸二钠盐，w/% ≤0.05 附录A中A.10 未磺化芳族伯胺（以苯胺计），w/% ≤0.01 附录A中A.11 副染料，w/% ≤ 1.0 附录A中A.12 砷（A S）/（mg/kg）≤ 1.0 附录A中A.13
柠檬黄检测
柠檬黄检测成分分析饮料糖果柠檬黄含量检测 柠檬黄水溶性合成色素，鲜艳的嫩黄色，单色品种。适量的柠檬黄可安全地用于食品、饮料、药品、化妆品、饲料、玩具、食品包装材料等的着色。中国允许使用的合成色素有苋菜红、胭脂红、柠檬黄、日落黄和靛蓝。它们分别用于果味水、果味粉、果子露、汽水、配制酒、红绿丝、罐头，以及糕点表面上彩等。这些合成色素的确把食品表面装扮的格外惹人喜爱，但是，它们禁止用于下列食品：肉类及其加工品(包括内脏加工品)、鱼类及其加工品、水果及其制品，包括果汁、果脯、果酱、果子冻和酿造果酒、调味品、婴幼儿食品、饼干等。8.15 按照中国的《食品添加剂使用卫生标准》规定，柠檬黄可用于果汁饮料、碳酸饮料、糖果、果冻等食物，但用量有严格限制。卫生执法人员介绍，人如果长期或一次性大量食用柠檬黄、日落黄等色素含量超标的食品，可能会引起过敏、腹泻等症状。常用的食品添加剂及着色剂酒石黄偶可引起多动。 科标化工分析检测柠檬黄检测标准如下： GB4481.1-2010食品添加剂柠檬黄 GB4481.2-2010食品添加剂柠檬黄铝色淀 SN/T2105-2008化妆品中柠檬黄和桔黄等水溶性色素的测定方法 YY0143-1993药用辅料柠檬黄 978-7-5066-5143-1《食品添加剂使用卫生标准》应用指南 DB37/T1106-2008饮料中16种食品添加剂的快速测定超高效液相色谱法 GB25533-2010食品添加剂果胶 GB2760-2011食品安全国家标准食品添加剂使用标准 SN/T2360.1-2009进出口食品添加剂检验规程第1部分：通则 SN/T2360.10-2009进出口食品添加剂检验规程第10部分：护色剂 SN/T2360.9-2009进出口食品添加剂检验规程第9部分：着色剂 SN/T2606-2010进出口食品检验中食品添加剂摄入量的简要评估方法指南 SN/T3257-2012出口食品添加剂生产企业HACCP应用指南 服务范围：成分分析、物理性能、理化性能、可靠性试验、含量分析等。 科标化工分析检测，从事化工材料与制品性能测试、成分分析、配方研究的分析测试研发。10
食用合成色素日落黄和柠檬黄荧光光谱解析
食用合成色素日落黄和柠檬黄荧光光谱 食用色素,又称食用染料或着色剂,作为最重要的食品添加剂之一,一直被广泛用于食品生产、医药和化妆品工业。食用色素按其来源可分为天然色素和食用合成色素,食用合成色素大多为含有R-N=N-R键、苯环,或氧杂蒽等结构的化合物,被人体吸收后可转化成致癌物质,对人体造成不同程度的损害。因此,必须严格控制其使用品种、数量,限制每日允许摄入量(ADI),并建立快速有效的检测方法。近几年,在世界范围内,食品安全事件屡屡发生(如苏丹红事件、农药残留、三聚氰胺奶制品等),触目惊心、举世震惊。世界各国都将食品安全视为国家公共安全,纷纷加强管理制度,积极建立有效的检测方法。目前,科研人员已运用紫外分光光度法,高效液相色谱法,导数吸附伏安法等方法对食用合成色素进行了检测研究。然而,在国内外,鲜有运用分子荧光光谱法定性表征、定量检测食用合成色素的报道。分子荧光光谱法具有测量精确,样品量少、高分辨率等特点,能解决传统方法中,分析过程繁琐、费时且不易推广等不足,是高效、精确的分析方法,近年来在测定物质种类、含量残留等方面取得了很好的应用。但是,食用合成色素含有多个荧光团,其荧光光谱规律较复杂,荧光相对强度与其浓度存在的非线性关系难以用偏最小二乘(PLS),多元线性回归等方法定性、定量分析。本文采用Roper Scientific SP--2558多功能光谱测量系统对浓度为 0.100mg/ml的日落黄、柠檬黄溶液的荧光光谱进行了实验研究,实验发现,在波长310nm-400nm的紫外光激励下,日落黄溶液荧光光谱的最佳激发波长为370nm,荧光峰值波长为576nm,柠檬黄溶液荧光光谱的最佳激发波长为350nm,荧光峰值波长为569nm。根据分子光谱理论,日落黄和柠檬黄能产生荧光,是因为其分子 中含有=C=O、、苯环或萘环等荧光发色基团及-OH、-SO3Na等荧光助色基团,通过偶氮键连结在一起,形成足够长的共轭双键体系,电子主要以π→π*跃迁方 式吸收光子,产生荧光。进而检测并分析了不同浓度日落黄和柠檬黄溶液的荧光光谱特性。在实验的基础上,本文运用导数光谱法对日落黄和柠檬黄的荧光光谱数据进行处理,突显了日落黄和柠檬黄荧光光谱之间的差异,增强了荧光光谱对日落黄和柠檬黄的识别能力;并引入BP神经网络、径向基函数神经网络(RBF)、遗传算法-神经网络(GA-BP)等智能算法应用荧光光谱对日落黄和柠檬黄进行识别和浓度预测。这些方法各有其优点:径向基函数神经网络与BP神经网络在处理过程中不需要考虑系统误差、不需要知道对象的数学模型,即能完成复杂的非线性识别,且相比之下,径向基神经网络测得结果更精确,更稳定,训练时间也更短。遗传算法-神经网络(GA-BP)模型兼有神经网络的广泛映射能力和遗传算法(GA)的快速、全局收敛以及增强式学习能力等性能,能够准确预测日落黄的浓度。本文还将小波变换应用于对荧光光谱数据的压缩,保持了原始光谱的特征峰,大大压缩了数据量,在网络训练及预测等程序上缩减了训练时间,提高了测量精度。这些方法在利用本身优点的同时,也很好地发挥了荧光光谱法高灵敏度、高准确度和高选择性的特点,将预测的平均误差和标准偏差(RSD)均保持在5%以下。本文虽以日落黄和柠檬黄为研究对象,但研究内容具有普遍性,所用方法也可应用于其它的食用合成色素和食品添加剂的种类识别和浓度预测。通过探索日落黄和柠檬黄的荧光产生机理和光谱特性与其分子结构的关系,为进一步研究食用合成色素的分子结构及毒性产生机理提供了一定的理论支持,可促进分子光谱理论的发展,拓展其应用,为食品安全检测提供新的思路与方法。 同主题文章
日落黄色素毒性的研究
日落黄色素毒性的研究 摘要：食品安全是现在人们普遍关注的问题，对于食品安全中人们尤其注义食品添加剂的安全。日落黄，是一种人工合成的偶氮型色素，属于我国批准使用的食品添加剂之一。与天然色素相比，具有色泽鲜艳、着色力强、稳定性好、价格低廉等优点。目前，作为食品添加剂已经广泛应用于果蔬饮料、罐头、糖果等食品的生产中。但人体食用过量日落黄可以引起过敏、腹泻、偏头痛、支气管哮喘等症状，还可能会对肾脏、肝脏和神经系统产生一定伤害。因此，本论文通过很多数据来说明日落黄色素对人体造成的负面影响。 关键词：日落黄制备不稳定性毒性 1.前言 随着食品工业的迅猛发展,各种化学产品与日俱增,环境污染愈加严重,而食品毒理学检测手段的提高,使人们逐步认识到食品卫生问题,并引起高度重视。那些可能导致食品污染的食品添加剂、洗涤剂、农药等与人类生活密切相关的化学产品,以及对它们的毒理学检测,已成为当前遗传毒理学、环境科学、预防医学等学科的重要研究课题。1992年在葡萄牙举行的/北大西洋公约组织高科技讨论会上认定:今后对环境污染的监测将使用人体、动物、植物三大系统(1),这无疑是对环境污染的生物学监测的意义和必要性给予了充分的肯定。近年来也有采用植物系统的生物监测手段对食品中化学诱变剂进行检测的报道[2-3]。采用的紫露草四分体微核技术和蚕豆根尖细胞微核技术这两种生物学检测系统,是当今应用于诱变物质检测的较好的遗传毒理学短期测试系统[4-5],已被收入国家环境保护局1986年颁布)96)的5环境污染监测规范6中。利用这两种测试系统对国产食用合成色素的诱变性进行检测,对其遗传毒理学效应作出评价。
“日落黄”是一种人工合成着色剂，有改变食品外观颜色的作用，国家食品卫生标准GB2760-2007 对其使用有明确的限量规定。如果消费者长期或一次性大量食用日落黄含量超标的食品，可能会引起过敏、腹泻等症状，当摄入量过大，超过肝脏负荷时，会在体内蓄积，对肾脏、肝脏产生一定伤害。按ISO/IEC17025《检测和校准试验室能力的通用要求》的规定，当检测结果处于产品标准要求的临界值即有可能判定被检测产品不合格时，应该给出测量不确定度［6］。不确定度是检测技术的重要概念，也是保证检测结果质量的关键要素。随着全球经济发展的需要，评估不确定度已成为国际检测实验室之间互认和通用准则接轨的基础［7］。 2.日落黄的制备： 2.1以日落黄为模板分子，邻氨基酚为功能单体，采用电化学聚合法在石墨电极表面形成了带有日落黄的邻氨基酚聚合膜，经电化学方法将模板分子去除，制得具有特异识别空穴的日落黄分子印迹修饰电极。详细讨论了制备分子印迹修饰电极的最佳条件，结果表明最佳聚合条件为：聚合电位上限为+1.50 V、聚合支持电解质为0.10 mol/LHClO4、功能单体邻氨基酚浓度为0.0135 mol/L、模板分子日落黄的浓度为2.50×10-3mol/L、聚合圈数为50 圈，模板分子的洗脱液为H2SO4溶液。对比了分子印迹修饰电极与非印迹分子修饰电极对日落黄的吸附特性。结果表明分子印迹修饰电极比非印迹分子修饰电极灵敏度更高、选择性更好。采用扫描电镜、紫外可见分光光度法和电化学法对分子印迹修饰电极进行了表征。 2.2详细讨论了分子印迹修饰电极测定日落黄的最佳条件实验表明，将制备好的修饰电极插入含有待测组分的0.10 mol/L HClO4溶液中，静置吸附30 min，
高效液相色谱等梯度测定食品中柠檬黄_苋菜红_胭脂红_日落黄
?实验研究? 高效液相色谱等梯度测定食品中柠檬黄、 苋菜红、胭脂红、日落黄 刘丽珍 徐晓枫 杨剑业 包玉龙 010031 内蒙古 呼和浩特市 内蒙古疾病预防控制中心检测中心 摘 要 目的:建立食品中常用四种合成著色剂的检测新方法;方法:选择适宜的高效液相流动相最佳配比;结果:在流动相为甲醇-0.02mol/L 乙酸铵(20/80,v/v );流速:1ml/min ;检测器波长:254nm 色谱条件下,方法回收率80%-95%;结论:本方法具有设备要求简单、工作效率高等优点。 关键词:高效液相法 流动相 合成著色剂 等梯度洗脱 中图分类号:R155.5 文献标识码:A 文章编号:1003-6245(2007)02-0101-02 Study on contents of in food by high perform ance liquid chrom atography using gradient elution L IU L i -z hen ,X u X iao -f eng ,YangJ ian -ye ,B ao Yu -L ong (Center for Disease Control and Prevention of Inner Mongolia ,Hohhot ,010020) Abstract Objective :To establish a method to judge and determine the contents of in food ;Method :A best com 2ponent in mobile phases ;R esults and Conclusion :The methods were facilitate and effective K ey w ords :HPL C ;Mobile Phases ;Synthetic Pigment ;Gradient elution 作者简介:刘丽珍,女,1949年,副主任检验技师,长期从事食品理化检验工作。 随着市场监督力度的不断加强,常常需要检测部门开展食品中合成著色剂的检测工作。国标G B/T5009.35-2003中规定高效液相色谱法是测 定食品中合成著色剂的首选方法,方法需用梯度洗脱对设备要求较高[1],我们在方法的基础上,充分利用现有设备结合自身条件,尝试用等梯度洗脱法测定食品中常见合成著色剂,顺利地完成了卫生部下达的对于以上四种合成著色剂的质控样的测定,为没有配备双泵以上高效液相色谱的检测部门能够顺应当前需求,开展此项检测工作提供了借鉴。1 材料与方法 1.1 仪器及试剂:岛津液相色谱仪(SPD -10A 紫 外检测器、L C -10AD 单元泵、手动进样器)TL -9900色谱工作站;色谱纯甲醇;0.02mol/L 乙酸铵 溶液;浓度为1.00mg/ml 的柠檬黄、苋菜红、胭脂 红、日落黄标准溶液;浓度为5、10、20、40μg/ml 的柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄混合标准溶液。1.2 色谱条件: 色谱柱:GEM -C18(dp 5 μm4.6mmID ×250mm ;保护柱:C18;柱温:室温;流动相:甲醇-0.02mol/L 乙酸铵(20/80,v/v );流速:1ml/min ;检 测器波长:254nm ;进样20 μl 。1.3 样品处理:同G B/T5009.35-2003。 1.4 测定:分别取经0.45 μm 滤膜过滤的合成色素标准使用液、标准混合液及样品色素提取液各20 μl ,注入高效液相色谱仪分析测定,根据谱峰保留时间、峰面积与标准峰比较,进行定性、定量。2 结果与讨论2.1 色谱条件的选择2.1.1 流动相配比的选择:流动相的选择关系到检测的分离度、灵敏度、检出限。试验表明,在C18柱中,甲醇、0.02mol/L 乙酸铵是合成色素分离的理想的洗脱液,但需选择合适的配比,甲醇比例过大,可造成分离不完全;甲醇比例过小,又使得运行时间拖长,且后面的谱峰展宽,难以检测。本试验通过改变二者的比例[2],以5/95、10/90、20/80、25/75(v/v )的比例分别进行分离实验,选择出甲醇与乙酸铵比例为20/80(v/v )时,分离度和分析时间均能得到较好的效果。能使以上四种色素得到很好分离。2.1.2 流速的选择:流速的大小直接影响柱及系统的压力、各组分离度、洗脱时间,在流动相选定之后,则需选择最佳分离度、最佳分析时间的流速。流速太小,分析时间长且后流出组分峰型变差;流速太大,导致系统压力增高,容易冲塌柱,本试验以0.5、0.8、1.0和1.2ml/min 流速进行试验,选定1.
日落黄检测
日落黄检测成分分析饮料糖果日落黄含量检测 日落黄，由对氨基苯磺酸重氮化，与2-萘酚-6-磺酸偶合，经精制而得。主要用于食品和药物的着色，也可用于制造铝盐色淀颜料。溶于水呈黄光橙色澄清溶液，不溶于油脂，几乎不溶于乙醇，遇浓硫酸呈红光橙色，稀释后呈黄色。其水溶液遇浓盐酸不变色，遇浓氢氧化钠呈棕红色，具有酸性染料特性，能使动物纤维直接染色。日落黄是一种人工合成着色剂，有增加外观颜色好看的作用；二氧化硫有防腐、漂白作用；甲醛是一种刺激性很强的化学物，医学上用作防腐剂。不过，如果消费者吃了违规使用这类添加剂的食品，健康可能会受到严重损害。8.15 科标化工分析检测日落黄检测标准如下： GB6227.1-2010食品添加剂日落黄 GB6227.2-2005食品添加剂日落黄铝色淀 SN/T1743-2006食品中诱惑红、酸件红、亮蓝、日落黄的含量检测高效液相色谱法 YY0144-1993药用辅料日落黄 978-7-5066-5143-1《食品添加剂使用卫生标准》应用指南 DB37/T1106-2008饮料中16种食品添加剂的快速测定超高效液相色谱法 GB25533-2010食品添加剂果胶 GB2760-2011食品安全国家标准食品添加剂使用标准 SN/T2360.1-2009进出口食品添加剂检验规程第1部分：通则 SN/T2360.10-2009进出口食品添加剂检验规程第10部分：护色剂 SN/T2360.9-2009进出口食品添加剂检验规程第9部分：着色剂 SN/T2606-2010进出口食品检验中食品添加剂摄入量的简要评估方法指南 SN/T3257-2012出口食品添加剂生产企业HACCP应用指南 服务范围：成分分析、物理性能、理化性能、可靠性试验、含量分析等。 科标化工分析检测，从事化工材料与制品性能测试、成分分析、配方研究的分析测试研发。10
食用黄色5号(日落黄色素)
食用黄色5号（日落黄色素） Food Yellow No.5 C16H10N2Na2O7S2 分子量452.38 含量本品含6-羟基-5-（4-磺基苯偶氮）-2-萘磺酸二钠盐（C16H10N2Na2O7S2）大于85.0% 性状橙红色均匀粉末或颗粒，无臭。易溶于水（6.9%，0o C）、甘油、丙二醇，微溶于乙醇，不溶于油脂。水溶液呈黄橙色。吸湿性，耐热性、耐光性强。在柠檬酸、酒石中稳定，遇碱变带褐色的红色，还原时退色。 制法对氨基苯磺酸重氮化后与2-苯酚-6-磺酸偶合。
鉴别试验 （1）本品的水溶液（1+1000）显橙色。 （2）本品的硫酸盐溶液（1+100）显橙红色，取此液2-3滴加水5ml时，显橙黄色。（3）取本品0.1g,加乙酸铵溶液（3+2000）100ml 溶解，取此液1ml，加乙酸铵溶液（3+2000）配至100ml的溶液，在波长480-484nm处有最大吸收带。 纯度试验 （1）水不容物小于0.20%（合成色素试验法）。 （2）氯化物及硫酸盐以总量计，小于5.0%（合成色素试验法。） （3）重金属以Pb计，小于20ug/g[合成色素试验法中的重金属（5）]。 （4）砷以As2O3计，小于4.0ug/g(合成色素试验法)。 （5）其他色素[合成色素实验法中的其他色素（1）]。 干燥失重小于10.0%（135o C，6h）。 定量法精确称取本品1.3g，加水溶解，准确配至250ml,准确量取此液50ml，作为检测液.按合成色素试验法中的定量法的三氯化钛法（iii）定量。 0.1N三氯化钛溶液1ml=11.309mg C16H10N2Na2O7S2 使用 使用范围及使用量我国《食用添加剂使用卫生标准》（GB 2760-1996）规定：可用于果汁饮料类、碳酸饮料、配置酒、糖果、糕点上彩妆、西瓜酱罐头、青梅、乳酸菌饮料、植物蛋白饮料、虾片，最大使用量0.10g/kg ；用于糖果包衣、红绿丝，0.2g/kg ；用于冰淇淋，最大食用量0.09g/kg。用于超高温杀菌风味奶、风味酸奶，最大使用量0.05g/kg；用于香橙果真干粉，按稀释倍数计算，不超过GB2760-1996的规定。
柠檬黄
添加剂（柠檬黄）的色谱分析法 摘要本文主要讲色素添加剂柠檬黄、日落黄等对于食品卫生的影响，以及如何检测食品中添加的色素的含量。食品添加剂在一定安全剂量内食用，并无危害，但若违规超量和长期食用，则对人体有危害，甚至可能致癌。本文讲述了一些色谱法来检测食品中柠檬黄的含量。 关键词：柠檬黄色素添加剂色谱法 引言 近些年来，食品安全问题已经成为我们持久不变的话题，越来越多的食品安全事故让我们触目惊心。4月23日上午，中山市质监局在港口镇铺锦村偏僻鱼塘处查封一家粉条工厂，当场查获约1万斤假粉条成品。令人惊讶的是，这家工厂证照齐全。检查发现，该作坊的红薯粉是用普通玉米淀粉做原料。现场还发现大量墨汁、柠檬黄60、果绿等添加剂，黑色液体也正是由这些添加剂兑成。执法人员查获了1万多斤已包装好的“纯红薯粉条”成品，还有大量半成品在晾晒或浸泡。执法人员称已经有很多市民吃了从市场上买的红薯粉后上吐下泻。 合成着色剂柠檬黄、日落黄是国 家批准使用的人工合成色素, 因其独 特的外观颜色, 作为食品添加剂已经 广泛地应用于果蔬汁中, 但是其添加必须在规定范围内按规定限量使用, 而且添加之后必须在食品标签上注明GB 2760- 1996[1]规定, 柠檬黄、日落黄用于果汁饮料的最大使用量为 0.1g/kg[2]。据了解, 人体食用过量的柠檬黄、日落黄可引起过敏、腹泻、偏头痛、忧郁症、支气管哮喘等症状, 还可能对人体的肾脏、肝脏和神经系统造成危害。因此对食品中的柠檬黄进行检测非常重要。[3] 色谱检测方法 （1）高效液相色谱法 对液相色谱法测定果蔬汁中柠檬黄和日落黄进行了方法优化, 对色谱条件进行了调整, 采用ODS- C18型( 250 mm – 4.6 mm )色谱柱, 流动相甲醇- 0.02 mol/L乙酸铵(体积比40:60, pH=4), 流速为0. 6 mL /min。采用紫外检测器, 柠檬黄检测波长为430 nm,
柠檬黄、日落黄
一，仪器：WATERS600E型高效液相色谱仪编号：M016CE075T PT-310型电子天平编号：71105173 二，样品称重（g） 三，将样品依法处理: 1.提取： 将样品捣碎,均匀取样, 置入50mL离心管中,加入10g 海砂，混合均匀，分别加入2.5mL亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液（沉淀蛋白），加入25 mL乙醇氨水溶液（7+2+1）、振摇10min，超声30 min，提取色素，4 ℃，10000 转/min，离心10min，将溶液置入100mL烧杯，残渣继续用乙醇氨水溶液提取，每次25 mL，至提取液无色。合并溶液于100mL烧杯中，80℃水浴蒸发至溶液10mL以下，溶液pH至中性，将溶液用柠檬酸溶液（pH=4）调至酸性为样品提取液。 2. 净化： 将2g聚酰胺粉用水调成糊状（活化），倒入样品提取液中，混合均匀，转移至G3漏斗中，用80℃pH=4的柠檬酸溶液洗涤2~3次，用10mL甲醇+柠檬酸（10+2）溶液洗涤2~3次，再用80℃水洗至中性，抽干，少量多次用乙醇氨水溶液解吸色素，至解吸液无色，收集解吸液，80℃水浴蒸发至2mL以下溶液pH至中性，用水定容至mL，用0.45μm滤膜过滤,待测。 四，混合标准溶液： 柠檬黄（0.500mg/mL GBW(E)100001a 10001 exp：2013.3）、 日落黄（0.50 mg/mL GBW(E)100003a 09001 exp：2012.8）、 50.0 μg/mL柠檬黄、日落黄等九种色素混标溶液。（2012.2.23，朱其明配制，有 效期：半年）
混合标准溶液系列(μg/mL)：5.0、10.0、20.0、30.0、40.0、50.0（临用现配）分别准确吸取0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL 50.0 μg/mL柠檬黄、日落黄等九种色素混标溶液用水定容至5.00 mL。 五，色谱条件： 温度：℃湿度：％RH 色谱柱：Eclipse XDB-C18 （4.6×250mm 5μm） 柱 进样量：10μL ，根据Rt定性，外标法定量 六，计算结果：（g/kg） 方法检出限：柠檬黄、日落黄为0.25mg/kg