病理学中的组织切片技术

病理学中的组织切片技术

病理学是医学领域中非常重要的一个学科,研究人体各个器官和组织的疾病变化及其发生、发展机制。而组织切片技术是病理学中的基础操作,是为了观察和诊断疾病而必要的步骤之一。本文将详细介绍组织切片技术的相关知识和方法。

一、组织切片技术的概述

组织切片技术是指将人体组织切割成薄片并染色,以便于病理学家观察。这项技术已经存在了很长时间,并且随着技术的发展和改进,已经成为了诊断和治疗疾病的重要手段之一。组织切片技术可以被广泛应用于疾病的研究、诊断和治疗中。

二、组织切片技术的步骤

组织切片技术的主要步骤包括取样、固定、脱水、包埋、切片和染色。下面将对这些步骤进行详细的介绍:

1. 取样

组织切片的第一步是取样,即从人体组织中取出一小块,以便于后续的操作。取样的方法根据不同的情况会有所不同,比如在手术中取样,就需要根据病变的部位和特点来选择取样点,而在活检中取样,就需要根据患者的症状和体征来确定取样点。

2. 固定

取样后,需要用一种方法把组织中的细胞和结构固定住,以便于后

续处理。目前常用的固定剂是福尔马林,它可以迅速把组织中的蛋白

质交联,使其不易变性,从而保持组织形态的完整。

3. 脱水

在固定后,需要将组织逐渐从水中转移到酒精、乙醇等脱水剂中,

以便于把组织中的水去除,使其硬化。这是组织切片的关键步骤之一,如果脱水不彻底,切出的组织切片会变形或破损。

4. 包埋

将脱水的组织置于熔蜡中,使其被包覆在蜡中。这么做可以保持组

织的形态,并使其更易于切割。

5. 切片

蜡包埋后,组织需要被切成薄片。切片可以使用手工或自动切片机

完成,手工切片需要技巧和经验,而自动切片机可以更好地保证切片

的厚度和质量。

6. 染色

切片完成后,需要对组织进行染色,以便于病理学家对其进行观察。目前常用的染色剂有血液学染色剂、组织学染色剂以及免疫组化染色

剂等。

三、组织切片技术的应用

组织切片技术在病理学中有广泛的应用,其中包括:

1. 诊断和治疗疾病

组织切片技术是病理学家进行诊断和治疗疾病的重要手段之一。通

过对组织切片的观察,可以确定病变的类型、程度和性质,以便于制

定相应的治疗方案。

2. 疾病研究

组织切片技术也被广泛用于疾病的研究中。研究人员通过对组织切

片的观察可以了解疾病的发生、演变以及作用机制,为疾病的治疗和

预防提供科学依据。

3. 药物研发

药物研发也需要组织切片技术。研究人员通过对切片组织细胞的观察,可以了解药物在细胞内的作用机理,以便于开发更具针对性的药物。

四、总结

组织切片技术是病理学中的重要基础操作,通过对组织切片的观察,可以了解疾病的发生、发展机制和药物作用等方面的信息,为疾病的

预防和治疗提供科学依据。虽然组织切片技术已经存在并得到广泛应用,但是对技术的不断改进和创新仍然是我们需要继续努力的方向。

病理学实验技术重点

1.什么是病理学技术? 病理学技术(组织标本切片和染色技术)是组织学、病理学等学科用于观察和研究组织与细胞的正常形态及病理变化的常用方法。2.组织制片的目的。 生物学标本在生活状态下多为无色透明,而且组织一旦离开机体后很快就会死亡,其结构就会失去正常状态,必须对组织采取固定、切片和染色措施! 3.何谓组织制片技术? 组织经过固定、切片和染色后,光波通过被检组织成分时,波长和振幅发生改变,在显微镜下能清晰的观察其组织结构,称之为光镜标本的基本制作方法或称为组织制片技术。 4.组织制片种类及其各类方法的分类。 (一)组织非切片制作方法:组织分离标本组织活体标本组织涂片标本磨片标本整体封存(压片)标本组织铺片标本组织印片标本等 (二)组织切片法:1.石蜡切片法 2.火棉胶切片法 3.冰冻切片法4.超薄切片法(电镜技术) 5.树脂切片 6.碳蜡切片 5.组织制片的主要程序。 取材、固定----脱水-----透明、浸渍-----包埋、切片----贴片、染色---浸洗----脱水----透明----封固 6.实验动物处死常用方法及优缺点。 1)挥发性麻醉剂(吸入麻醉)

包括:乙醚、氯仿等。 优点:乙醚吸入麻醉适用于各种动物,安全度亦大,动物麻醉深度容易掌握。 缺点:是对局部刺激作用大,可引起上呼吸道粘膜液体分泌增多、肺部充血,再通过神经反射可影响呼吸、血压和心跳活动,并且容易引起窒息,故在乙醚吸入麻醚时必需有人照看,以防麻醉过深而致动物死亡。 2)非挥发性麻醉剂(注射麻醉) 这类麻醉剂种类较多,包括10%苯巴比妥钠、4%戊巴比妥、5%硫喷妥钠等巴比妥类的衍生物,20%氨基甲酸乙脂(乌拉坦)和1%水合氯醛、氯胺酮等,可通过肌肉注射、静脉注射、腹腔注射。 优点:这些麻醉剂使用方便,一次给药可维持较长的麻醉时间,麻醉过程较平衡,动物无明显挣扎现象。 3)断髓(脱臼)法 动物处死过程中动作要迅速,尽量避免其长时间处于痛苦或濒于死亡状态,以免机体内组织或细胞结构发生改变引起人工假象。 4)空气栓塞法 适用于较大的动物,如兔、猴、犬等。 迅速方便,但可使内脏器官或多或少的呈现瘀血,如心内膜下瘀血、肝血窦扩张

病理学中的组织切片技术

病理学中的组织切片技术 病理学是医学领域中非常重要的一个学科,研究人体各个器官和组织的疾病变化及其发生、发展机制。而组织切片技术是病理学中的基础操作,是为了观察和诊断疾病而必要的步骤之一。本文将详细介绍组织切片技术的相关知识和方法。 一、组织切片技术的概述 组织切片技术是指将人体组织切割成薄片并染色,以便于病理学家观察。这项技术已经存在了很长时间,并且随着技术的发展和改进,已经成为了诊断和治疗疾病的重要手段之一。组织切片技术可以被广泛应用于疾病的研究、诊断和治疗中。 二、组织切片技术的步骤 组织切片技术的主要步骤包括取样、固定、脱水、包埋、切片和染色。下面将对这些步骤进行详细的介绍: 1. 取样 组织切片的第一步是取样,即从人体组织中取出一小块,以便于后续的操作。取样的方法根据不同的情况会有所不同,比如在手术中取样,就需要根据病变的部位和特点来选择取样点,而在活检中取样,就需要根据患者的症状和体征来确定取样点。 2. 固定

取样后,需要用一种方法把组织中的细胞和结构固定住,以便于后 续处理。目前常用的固定剂是福尔马林,它可以迅速把组织中的蛋白 质交联,使其不易变性,从而保持组织形态的完整。 3. 脱水 在固定后,需要将组织逐渐从水中转移到酒精、乙醇等脱水剂中, 以便于把组织中的水去除,使其硬化。这是组织切片的关键步骤之一,如果脱水不彻底,切出的组织切片会变形或破损。 4. 包埋 将脱水的组织置于熔蜡中,使其被包覆在蜡中。这么做可以保持组 织的形态,并使其更易于切割。 5. 切片 蜡包埋后,组织需要被切成薄片。切片可以使用手工或自动切片机 完成,手工切片需要技巧和经验,而自动切片机可以更好地保证切片 的厚度和质量。 6. 染色 切片完成后,需要对组织进行染色,以便于病理学家对其进行观察。目前常用的染色剂有血液学染色剂、组织学染色剂以及免疫组化染色 剂等。 三、组织切片技术的应用 组织切片技术在病理学中有广泛的应用,其中包括:

组织切片技术

组织切片技术 姓名:许莎班级:生技121学号:12772018 组织切片技术是研究生物组织或细胞形态和结构的重要技术,对于促进细胞生物学和遗传学等研究的发展起着重要作用。最早的制片技术是徒手切片技术,以后发展了利用石蜡进行包埋和切片的制片技术,即石蜡切片技术,该技术由于成本低,操作简单,目前仍在应用,该技术被越来越多的研究工作者应用于发育学、植物细胞学、胚胎学、解剖学等研究领域。 1组织切片技术原理 1.1原理 组织切片技术是研究组织形态学最常用的一项基本技术,在制作胚胎或组织切片时,由于细胞或组织是柔软的或局部的软硬不均,这样制作厚薄均匀的切片很困难。为了能清晰地观察到组织结构及细胞形态,必须先经过一系列步骤将组织内渗入某些支持物质,使组织变硬然后利用切片机将组织切成薄片。根据所用支持剂的种类不同,主要分为石蜡切片、冰冻切片、振动切片、火棉胶切片、塑料切片、碳蜡切片等。 1.2分类 1.2.1石蜡切片 该技术是最重要、最常用的组织切片技术之一,起始于18世纪。此法是用石蜡作为包埋剂,将材料经过固定、脱水、透明后包埋在石蜡中,然后连同石蜡用切片机一同进行切片。石蜡切片的主要优点是不仅可以把材料制成薄的切片,而且还能制成连续切片,这是其他制片技术难以做到的。它的缺点是操作步骤比较复杂,而且材料在脱水、透明过程中会收缩、变硬、变脆,以致不易切片[1]。 1.2.2冰冻切片 冰冻切片是利用干冰或液氮等速冻剂使组织迅速冷冻硬化,将组织在冷冻状态下直接用切片机切片的一项技术。它实际上是以水为包埋剂,将组织进行冰冻至坚硬后切片的。由于此法不需要经过各级乙醇的脱水、二甲苯的透明和浸蜡等步骤,因而较适合子脂肪、神经组织和一些组织化学的制片,并作为快速切片的方法应用在临床诊断冰冻切片是酶组织化学和免疫组织化学染色中最常用的一种切片方法。此种切片的优点是能较好的保存组织的RNA 稳定性、较完好地保存细胞膜表面和细胞内多种酶活性以及抗原的免疫活性,缺点是需要较高的设备要求;切片较厚,导致组织结构显示欠佳;通常不能进行连续切片。其主要操作技术和方法与石蜡切片过程和类似。 1.2.3振动切片 是用振动切片机把新鲜的组织切成厚20-100pm的切片。此类切片的优缺点类似于冰冻切片。通常在切片后进行免疫染色然后再进行电镜切片,以此来弥补结构显示不清的不足。振动切片机主要用于新鲜或经过固定的动、植物标本的制片,切片时组织标本不需冰冻或包埋。因此.样品片既避免了冰晶破坏,又能保持其活性和细胞良好形态为免疫细胞化学研究以及脊髓和脑薄片的神经生物学研究提供了良好条件。振动式切片机可以对不同的材料进行切片,在应用范围上补充了使用传统切片机的不足,是当代电镜、解剖、组胚、生理、医院化工等实验系统最理想的快速制样切片仪器。 1.2.4火棉胶切片 是以火棉胶为包埋剂浸入包埋组织。优点是可以切较硬的组织,缺点是操作比较麻烦费

病理学研究中的组织学技术

病理学研究中的组织学技术病理学是医学中非常重要的一个学科,它是通过对组织、细胞等进行观察和分析来了解人体疾病的发生、发展和变化规律的学科。而组织学技术则是在病理学研究中必不可少的一个工具,因为只有通过一系列的组织学技术,才能获得准确的组织样本并进行鉴定。 一、组织切片技术 组织切片技术是指将组织标本制成一定厚度的切片,使其在显微镜下呈现出清晰、明确的形态,以便进行组织学检验和形态学分析。 组织切片技术分为冷冻切片和石蜡切片两种方法。其主要区别是前者不需要预先处理组织标本,容易造成组织变性,而后者则需要将组织标本处理成特殊的固态物质以使其能够被切片。 制作组织切片需要借助于显微镜切片机。首先将组织标本放置在内含有碳酸钙的冷冻剂中。冷冻剂能够使组织标本迅速冷冻,

使其保持形态不变。然后将冷冻后的组织标本固定在显微镜切片 机上,通过旋转一定的角度切割出一定厚度的组织切片。 二、组织固定技术 组织固定技术是指将组织标本处置于特定的化学溶液中,以使 其形态和细胞结构不发生改变,从而保护组织标本的完整性,为 后续的组织学分析提供准确的数据。 目前常用的组织固定技术主要有福尔马林固定和Bouin's固定。福尔马林固定是最常用的一种固定方法,它的作用是使组织标本 中的细胞结构中的亲水性分子固定在其中,从而保持其原样。福 尔马林固定需要将组织标本置于10%~15%的福尔马林溶液中,通 常需要处理数小时或过夜才能完成。而Bouin's固定则是对特定组 织标本适用的一种固定方法,用途较少。 三、组织染色技术

组织染色技术是指通过将组织标本置于某些化学药物中,使其组织结构染上特定的颜色,以便于显微镜下的观察和分析。目前常用的染色方法有血液学染色方法和组织化学染色方法。 血液学染色方法通常用于骨髓细胞和其他血液成分的检测。组织化学染色方法则比较分散,根据不同的配合物和铁盐,组织化学染色的种类和质量也有所不同。 四、组织包埋技术 组织包埋技术是将处理后的组织标本置于特定的材料中进行包裹,以便于组织切片和显微镜下的观察和分析。 目前常用的组织包埋技术有石蜡包埋和切削蜡包埋两种。其中石蜡包埋是最常用的方法,其具体步骤是:将已经固定的组织标本置于各种浓度的石蜡凝胶中浸泡,进行多次使用下降浓度的有机溶剂去除多余的福尔马林。之后在温度应该是60度左右的石蜡凝胶中加入适量的脱水剂,直至石蜡凝胶变硬,组织标本变成无色透明的集合物,这时就可以进行组织切片了。

组织病理切片制作流程(完整版)

组织病理切片的制作流程 1.取材 组织取材的方法是制作切片的一个重要程序,根据教学、科研及外检的具体要求取自人体(外科手术切除标本、活检标本、尸检标本)或动物,并确定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识,还要掌握实际操作技术,每个组织器官的取材都有一定的部位和方法,不能任意切取组织作为制片材料,不然,无法达到教学、科研和临床诊断的目的,具体要求如下: (1)材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。 (2)组织块的大小:所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部,但根据制片材料和目的不同,组织块的较理想体积也不同,如制作病理外检、科研切片,其组织块可以薄取0.1~0.2cm即可,这样可以缩短固定脱水透明的时间,若制作教学切片厚取0.3 ~0.5cm,这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。 (3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧,以免因挤压而使组织、细胞变形。 (4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材,病理标本取材按照各病变部位、性质的不同,根据要求规范化取材。 (5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构,决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键,如长管状器官以横切为好。 (6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用水冲洗干净后再放入固定液中。 (7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后,或多或少会产生收缩现象,有时甚至完全变形。为此可将组织展平,以尽可能维持原形。

病理组织切片技术是病理实验室最基本的方法

病理组织切片技术是病理实验室最基本的方法病理组织切片技术是病理实验室最基本的方法,是病理学的一项极有使用价值 的专业技能。它包括组织固定、脱水、透明、包埋、切片、漂片、烤片、脱蜡、染色、脱水、透明和封固等程序。HE 染色是既基本又十分重要的工作,HE 染色的好 坏直接影响病理医生的正确诊断,而HE 染色质量好坏与HE 制片的每一步骤关系 都十分密切。只要某一步骤出了问题都直接影响下一步工作,时常会出现个别片子 色调不正、颜色对比不协调、染色不匀、模糊不清等现象,使切片的质量和诊断的 准确性受到影响。本文作者在实验过程中就制作优良动物病理切片的体会阐述如下: 一、取材要及时、规范 (一)要取最新鲜的材料。由于各器官组织坏死变化很快,所以取材要求迅速。 取材时要用锋利的刀片或剪刀,勿用镊子对组织加以压迫,以免组织破裂和变形。 (二)选取组织块的大小、厚薄亦应力求适度。过大、过厚的组织,固定液不宜 渗透,亦可造成固定不佳,过小、过薄的组织又可能在固定或脱水的过程中发生扭 曲变形情况[1]。 (三)应有代表性,能够反映出组织的基本结构,如肝要有肝小叶;肾要有皮质 和髓质;肺要有支气管等。另外,要采取病变部位和健康部位交叉处的组织,这样 才可以通过健康部位的对照,清楚地看到各种病理变化。 二、固定要充分 (一)一般固定液,都以新配为好,配好后应贮存在阴凉处,不宜放在日光下, 以免引起化学变化,失去固定作用。笔者常用的固定液是10,福尔马林溶液。 (二)应及时固定,这样可保持细胞与生活时的形态相似,防止组织自溶而产生 死后变化。将取下的材料立即放在固定液中固定24小时以上,固定液必须充足, 一般为材料块的20~30倍,有些水分多的材料,中间应更换1~2次新液。目的是防

血液科病理组织切片与染色技术

血液科病理组织切片与染色技术血液科病理组织切片与染色技术是现代医学领域中非常重要的研究 和诊断手段。通过对血液科病理组织进行切片和染色,可以帮助医生 准确诊断疾病,了解病理变化,制定科学的治疗方案。在本文中,我 们将详细介绍血液科病理组织切片与染色技术的原理、方法和应用。 一、病理组织切片技术的原理与方法 1. 原理 病理组织切片技术是将组织标本切割成非常薄的切片,使其可以在 显微镜下观察。病理组织切片是病理诊断的重要步骤之一,通过对组 织细胞的形态、结构和功能进行观察和分析,可以发现异常变化并鉴 定疾病。 2. 方法 a. 标本处理:将取得的血液科病理组织进行固定、包埋和切片的预 处理。首先,将组织标本固定在适当的固定液中,以保持其形态和结构。然后,将固定的组织标本进行包埋,使其可以被切割成所需的薄片。最后,用切片机将包埋的组织标本切割成薄片。 b. 切片染色:将切下的组织标本放在载玻片上,并进行染色处理。 染色是为了增强组织细胞的对比度,使其更易于观察和分析。染色方 法有很多种,常用的包括血液科染色、组织染色以及免疫组化染色等。

c. 封片处理:将染色后的组织切片放在载玻片上,并加入封片剂进 行封片处理。封片处理是为了保护切片和染色剂,使其可以长期保存,并方便后续的观察和分析。 二、染色技术的原理与方法 1. 原理 染色技术是为了使细胞或组织中的某些结构、成分或代谢产物显现 出特殊颜色,以便于观察、分析和诊断。不同的染色方法可以突出或 改变细胞或组织中特定成分的性质和形态,从而帮助医生进行病理分 析和诊断。 2. 方法 a. 血液科染色:血液科染色是将血液样本涂在玻片上,然后通过染 色剂的作用,使不同的细胞成分显现出不同的颜色。 b. 组织染色:组织染色是将切片样本经过一系列染色处理,使不同 的组织结构和成分显现出不同的颜色。常见的组织染色方法有苏木精- 伊红染色和光学显微镜下依据染色结果进行分析。 c. 免疫组化染色:免疫组化染色是一种用于检测特定蛋白质和抗原 的方法,通过使用特异性抗体与目标物质结合,然后用染色剂标记抗体,将目标物质显现出来。免疫组化染色在血液科病理诊断中应用广泛。 三、血液科病理组织切片与染色技术的应用

脂肪组织病理学切片

脂肪组织病理学切片 引言: 脂肪组织病理学切片是一种常用的方法,用于研究脂肪组织的结构和功能异常。通过观察和分析脂肪组织切片,可以了解脂肪组织的病理变化,对于诊断和治疗脂肪组织相关疾病具有重要意义。本文将从不同的角度介绍脂肪组织病理学切片的相关内容。 一、正常脂肪组织切片特点 正常脂肪组织切片的主要特点是:脂肪细胞丰富、细胞排列紧密且规则,胞质内含有大量的脂滴,细胞核位于细胞周边。在HE染色下,脂肪细胞呈现淡红色或淡黄色,胞质内的脂滴呈现浅蓝色。在免疫组织化学染色中,脂肪细胞可表达脂肪相关标记物,如脂联素和脂肪酸结合蛋白。 二、脂肪组织病理变化 1. 脂肪变性: 脂肪变性是指脂肪细胞内的脂滴发生异常,导致细胞功能和结构的改变。在脂肪组织切片中,脂肪变性的表现为脂滴的聚集和增大,胞质内的空泡增多。常见的脂肪变性疾病有肝脏脂肪变性和肾脏脂肪变性。 2. 脂肪炎症: 脂肪炎症是指脂肪组织发生炎症反应,导致组织结构和功能异常。

在脂肪组织切片中,脂肪炎症的表现为脂肪细胞周围有大量的炎性细胞浸润,如淋巴细胞、中性粒细胞等。常见的脂肪炎症疾病有脂肪坏死、脂肪炎和脂肪肉芽肿等。 3. 脂肪肿瘤: 脂肪肿瘤是指脂肪组织中出现的肿瘤性病变。在脂肪组织切片中,脂肪肿瘤的表现为脂肪细胞发生肿瘤样增生,细胞核增大、多形性增加,胞质内的脂滴减少。常见的脂肪肿瘤有脂肪肉瘤、脂肪瘤和脂肪肉瘤等。 4. 脂肪萎缩: 脂肪萎缩是指脂肪组织的体积和数量减少,导致组织结构的改变。在脂肪组织切片中,脂肪萎缩的表现为脂肪细胞减少,细胞排列稀疏,胞质内的脂滴减少。脂肪萎缩常见于长期营养不良、疾病消耗和内分泌紊乱等情况。 三、脂肪组织切片的临床应用 1. 诊断脂肪组织相关疾病: 脂肪组织切片在诊断脂肪组织相关疾病方面具有重要作用。通过观察和分析脂肪组织切片,可以确定脂肪组织的病理变化,如脂肪变性、脂肪炎症和脂肪肿瘤等。同时,还可以通过免疫组织化学染色等方法,进一步确定脂肪组织的类型和病理特征,为临床诊断提供依据。

组织切片技术

组织切片技术 在现代科技发展的背景下,组织切片技术作为一项先进的生物医学研究方法,在细胞学、组织学以及疾病研究等方面发挥着重要作用。本文将介绍组织切片技术的原理、应用以及未来的发展前景。 一、原理 组织切片技术是一种将组织样本切成极薄的切片,以便进行显微镜观察和进一步分析的方法。它主要包括取样、固定、包埋、切片和染色等步骤。 首先,需要从组织样本中取得足够的细胞或组织。然后,将样本进行固定,以保持其结构和形态的稳定性。接下来,将固定的样本进行包埋处理,即将组织样本置于固定液中进行浸渍,再置于石蜡或树脂中固化。之后,利用显微刀、显微镜或电子显微镜等工具将组织样本切成极薄的切片。最后,对切片进行染色,以便观察和分析细胞和组织的结构、功能及病理变化。 二、应用 组织切片技术在生物医学研究中有着广泛的应用。主要包括以下几个方面: 1. 组织学研究:组织切片技术被广泛应用于组织学研究领域,可以观察和研究各种组织和器官的结构、形态、功能以及病理变化,从而促进对生物体结构和功能的深入了解。

2. 病理诊断:组织切片技术在病理学中扮演着重要的角色。医生可以通过观察组织切片来诊断疾病,并对患者进行治疗和预后评估。 3. 药物研发:组织切片技术可以用于药物研发中的毒性评估和药物吸收、分布、代谢和排泄等研究。通过观察组织切片的变化,研究人员可以评估药物对组织和细胞的损伤程度,从而指导药物研发和临床应用。 4. 种植技术:组织切片技术在植物研究中也有广泛应用。通过观察植物组织切片,可以研究植物的器官结构、细胞构成以及代谢活性等方面的信息,有助于植物遗传改良和种植技术的改进。 三、未来发展 随着科学技术的不断发展,组织切片技术也将迎来更广阔的应用前景。以下几个方面值得关注: 1. 自动化和高通量技术:随着自动化和高通量技术的发展,组织切片的速度和效率将大大提高,为更快速地获取更多的组织信息提供了可能。 2. 多重标记技术:利用多重标记技术,可以对组织切片进行多种染色,从而同时观察多个细胞和结构的分布和互动,揭示更深层次的生物过程。 3. 虚拟切片技术:虚拟切片技术通过数字化图像和三维重建技术,可以实现对组织切片的虚拟观察和分析,减少对原始样本的破坏性操作,提高数据的保存和共享效率。

病理标本切片技术

病理标本切片技术 病理学作为现代医学的重要组成部分,着重于通过病理学检查以确 定疾病诊断及治疗方案。而病理标本切片技术作为病理学检查中的关 键步骤之一,对疾病的诊断及治疗起着不可替代的作用。 一、病理标本切片技术概述 病理标本切片技术是将组织样本切割成非常薄的部分,以便进行显 微镜检查的过程。这一过程通常被称为“制片”,其一般包括如下步骤: 1.组织预处理:该步骤包括固定、清洗、脱水、透明化等几个关键 步骤,目的是使组织样本保持原有形态并易于切割。 2.切片:该步骤使用病理切片机将组织样本切割成具有一定厚度的 切片,通常在3~10μm之间。 3.染色:该步骤是为了使组织样本结构更易于识别,通常使用的染 色剂有常规的血液学染色剂、免疫组织化学染色剂等。 二、病理标本切片技术的重要性 正确的病理标本切片技术可以帮助病理学家准确判断疾病病变的类型、性质及病变程度等。其重要性主要表现在以下三个方面: 1.诊断:病理标本切片技术可以提供病理学家直接观察、评估组织 标本,从而给出准确的疾病诊断。例如,肿瘤和白血病等疾病需要进 行病理学检查并使用病理标本切片技术来确诊。

2.治疗:病理标本切片技术还可以对病人进行治疗方案的定制。例如,通过病理标本切片技术可以判断某种瘤细胞是否对某种药物敏感,从而在治疗中选用更加有效的药物。 3.预后:病理标本切片技术还可以帮助病人对病程进行预测和评估。例如,在肿瘤的治疗过程中,通过病理标本切片技术可以评估肿瘤对 治疗的响应并进行预测,从而评估病人的预后。 三、病理标本切片技术中存在的挑战与未来发展方向 病理标本切片技术虽然在现代医学中发挥了不可替代的作用,但其 在实践中仍然存在一些挑战: 1.样本收集限制:某些类型的病理标本很难取得,例如甲状腺和胰 腺的病理标本。 2.自动化技术发展不足:虽然近年来出现了许多自动化切片仪器, 但其切片精度和效率仍然需要进一步提高。 未来病理标本切片技术的发展方向主要包括: 1.数字化技术:该技术可以将制片过程中得到的显微镜图像数字化,实现对图像的分析和存储。 2.自动化技术:该技术可以实现在制片过程中的全自动化,包括自 动脱水、自动切片、自动染色、自动扫描等。 3.微流控技术:该技术可以将极小的样本量在微流控芯片中进行制 片和分析,具有省时省力、减少样本消耗的优势。

病理组织制片技术基本流程

病理组织制片技术基本流程 病理组织制片技术是病理学中的一项重要技术,它通过将病理标本切片、染色和覆盖玻片,使得细胞和组织的形态结构能够被显微镜观察和分析。这项技术在医学诊断、研究和教学中起到了关键作用。下面将介绍病理组织制片技术的基本流程。 1. 标本采集与固定 病理组织制片的第一步是标本采集与固定。医生根据患者的病情,选择合适的组织或细胞标本进行采集。常见的标本包括切除标本、活检标本等。采集后,标本需要立即进行固定,以保持组织的形态结构和化学成分的稳定。最常用的固定剂是10%的中性缓冲福尔马林溶液。 2. 组织处理与包埋 固定后的标本需要进行组织处理与包埋。首先,将固定的标本进行去除固定剂的处理,然后用乙醇逐渐脱水,最后用苯麻油进行透明处理。透明处理后,标本需要被包埋在石蜡中,以便后续的切片操作。 3. 切片与染色 石蜡包埋的标本需要进行切片与染色。首先,使用组织切片机将石蜡块切割成薄片,通常厚度为4-6微米。切片后,将切片浸泡在水中,使其展开。然后,将切片依次浸泡在染色剂中,进行组织染色。

不同的染色剂可以突显不同的细胞和组织结构,例如血液常规染色、免疫组化染色等。 4. 脱脂与覆盖玻片 染色后的切片需要进行脱脂与覆盖玻片。首先,将染色后的切片依次浸泡在醇中,去除多余的染色剂。然后,使用透明剂将切片与玻片粘结在一起,使其固定。最后,将覆盖玻片放在切片上,使用压力将其压平,使切片与玻片紧密结合。 5. 干燥与封装 覆盖玻片后的切片需要进行干燥与封装。将覆盖玻片的切片放置在干燥箱中,通过温度和时间控制,将其彻底干燥。干燥后,将切片放置在干燥剂中,以防止切片吸湿。最后,将切片放入切片盒中,进行封装,以便长期保存和使用。 病理组织制片技术的基本流程包括标本采集与固定、组织处理与包埋、切片与染色、脱脂与覆盖玻片以及干燥与封装。这一流程确保了病理标本的形态结构得以保留,并使其能够被显微镜观察和分析。病理组织制片技术的应用广泛,对于疾病的诊断和治疗具有重要意义,同时也为病理学研究和教学提供了有力支撑。通过不断改进和创新,病理组织制片技术将继续在医学领域发挥重要作用。

病理切片技术的系统与发展

病理切片技术的系统与发展 摘要:近些年来,随着我国经济的发展与国际地位的逐渐提高,我国对各行各 业都进行了一定的改进与发展、医疗是一个国家重点发展和建设的行业之一。我 国医疗在新世纪、新科技的推动下逐渐的取得了一定的突破性的进展。本文将会 介绍在医学行业中,病理切片技术的系统及其发展。希望大家有所了解。 关键词:病理切片技术;医疗发展;技术改革 前言 病理切片技术是医疗行业中经常使用到的一项新的技术,它在医疗诊断、病例研究方面 起着至关重要的作用。随着我国科技的不断发展与改革开放步伐的逐渐推进。我国对病理切 片技术的发展也逐渐的加大了重视的程度。本文将会介绍这方面的内容, 1.病理切片技术相关内容介绍 什么是病理切片技术?大家或许多这方面的内容并不是很了解。其实所谓的病理切片技 术是指:病理学的一个重要分支,是病理学研究中的方法学,是病理诊断的基础。常规病理 是病理技术最重要的部分,任何病理诊断离不开它。因此,病理切片技术在医疗行业中有着 不可替代的作用,也正是由于这一原因,才使得病理切片技术需要得到更好更快的发展。 2.病理切片技术的常规系统分析 2.1取材 病理切片技术是有一个完成的系统的,它主要是由六方面的内容组成。接下来就分别的 给大家介绍一下组成病理切片技术系统的六个层面。首先给大家介绍的就是病理切片技术的 取材工作。它是病理切片技术的第一道工序,也是最重要的一道工序。取材的好坏,直接影 响切片的质量[1]。医生在取材时,首先要有一把锋利的取材刀,在切割组织时要避免取材刀 来回拖拉,切取的组织块厚薄要均匀,一般厚度以三毫米为适,较容易发脆的组织如甲状腺、肝脏、血块、淋巴结、大块癌组织等可适当厚一点,淋巴结应修掉两侧球冠,并尽量剔除周 围的脂肪组织。在取材中还应十分注意组织内是否有缝线或骨组织,如碰到不可避免的钙化 组织,应与技术人员阐明情况,相关的技术人员依据情况的综合定性来判断是否应该继续进 行取材。 2.2固定 固定在病理切片技术中也是一个非常重要的步骤,它是取材的下一步骤的工序。所谓的 固定就是将取材获得的样品进行一定的固定。固定的目的是为了防止组织细胞自溶与腐败, 防止了细胞内的酶对蛋白质的分解作用,使细胞内的各和成分如蛋白质、脂肪、碳水化合物 或酶类转变为不溶性物质,以保持原有的结构与生活时相仿。固定工作并不是像大家想象的 那么简单,也是需要掌握一定的技术的。固定的关键主要与固定的及时性、固定液的选择、 固定液的浓度、固定的温度和时间有关。只有充分的掌握上述的限制性的要求,才能够更好 的开展固定工作。 2.3脱水 脱水是紧跟着固定后的又一道程序。所谓脱水就是利用脱水剂将组织内的水分置换出来,以利于有机溶剂的渗入,这一过程称为脱水。脱水是否彻底,直接关系到组织是否能充分透明。在脱水的过程中通常需要借助透明剂。目前最好的透明剂是二甲苯。很多人认为二甲苯 极容易使组织发脆,这个观点很片面,在常温下,如果不是时间过长二甲苯并不会引起组织 发脆,但是当二甲苯温度超过三十五摄氏度以后,极易引起组织发脆。因此当室温高于此温 度范围时,组织容易脱水,可适当缩短脱水时间;而室温低于该温度范围时,应适当延长脱 水时间。当然温度只是影响脱水的一个因素,切片组织的原含水量、脱水环境等等都会影响 到脱水工作的开展。 2.4包埋 病理切片技术的第四道工序就是包埋。所谓的包埋是指:用包埋剂来支持组织的过程。 最常用的是石蜡包埋法,包埋的关键主要有两方面:一是平整,二是方位。因此,这就要求 在包埋时,相关的技术人员应采用镊子轻压组织块拱起部份,使之平贴于底部,并保证在一

组织病理学技术

组织病理学技术 一.实验综述 组织病理学切片技术是融解剖学、组织胚胎学与技术、病理学与技术和临床于一体的综合性课程。是一门新兴的学科。在当今不断发展、变革的社会中,在学科相互融合,知识相互渗透,技术不断发展、概念不断更新的时代,在时代要求综合素质人才辈出的今天,组织病理学切片技术的兴起尤为必要和重要。主要任务是:使学生获得和掌握学会观察人体重要器官的解剖学特征、组织学结构、病理学变化并联系相关功能,从而在形态上观察、机能上分析、综合上判断和科学上研究疾病。同时联系病变器官的代谢和机能的改变,探讨疾病的病因、发病机制以与病理变化与临床表现的内在联系和相互的关系。为由基础走向临床打下坚实的基础。 二.实验目的 1.掌握病理组织切片的基本制作过程步骤 2.掌握病变器官的代谢和机能的改变 3.明白病理组织切片制作过程中的注意事项 4.了解病理切片的制作程序与仪器的操作和注意事项 二.实验材料 1.实验材料:手术盘、镊子、手术刀、石蜡、小鼠病理组织、纱布、烧杯、脱水机、塑料包埋盒、水浴锅、切片机、染色机、载玻片、盖玻片、铅笔、标签 2.实验试剂:福尔马林、酒精〔50%、55%、70%、75%、80%、85%、95%、无水浓度〕、二甲苯、苏木素、盐酸酒精、伊红染液、树胶 四.实验步骤 〔一〕取材 从尸体解剖材料或临床手术切除的待检材料上选取供作切片标本的病理组织切块,称为取材。 1.取材要全面具有代表性,能显示病变的发展过程。为此要选取病变显著的区 域和可疑灶,在统一组织块中最好包括病灶与其周围的健康组织,并应包含该器官的主要结构部分。较大而重要的病变可从病灶中心到外周的不同部位取材,以反映病变各阶段的形态学变化。 2.取材时要尽量保持组织的自然状态与完整性,避免认为变化。为此,切取组 织块的剪刀要锋利,切取时勿使组织受挤压、拉扯胡揉搓。 3.组织块的大小要适当,通常其长、宽、厚以1.5×1×0.4cm为宜,必要时可 增大到2×1.5×0.5cm,以便于固定液迅速浸透。尸体剖检时采取病理组织块可切得稍大些,待固定几小时后在家以修整,切到适当的大小。 4.对于特殊病灶要做适当标记。 5.注意避免类似的组织块混淆。 6.制片的组织块,越新鲜越好。 7.接受送检标本时,须依据送检单详细检查送检物。 〔二〕固定和固定液 将组织浸在固定液内,使细胞组织内的物质成为不溶性,让固有形态和结构得以保存叫作固定。固定是为了保持组织、细胞与生活时的形态相似。 1. 本次试验的固定液为:10%福尔马林液〔实验室常用固定液〕 福尔马林 100ml 自来水 900ml

组织制片技术原理与流程及切片机的使用

组织制片技术原理与流程及切片机的使用 组织制片的特点 组织制片是组织学、胚胎学、病理学、生物学等学科观察和研究组织、细胞的正常形态和病理变化的常用方法。其基本原理是用固定剂固定组织、细胞以及各种亚细胞器,保持组织的微细结构,制成薄片,并用不同的染色方法增加各部分的色差,在显微镜下观察组织、细胞的形态结构,或利用化学或物理方法显示组织、细胞内的某些化学成分,并可进行形态和化学成分的定量分析。随着细胞和分子生物学技术的发展,组织制片也为原位显示细胞内基因表达提供了基础。 一石蜡包埋切片制作 石蜡不溶于水而溶于二甲苯等有机溶剂,故固定好的组织须先用乙醇、丙酮、正丁醇等脱水剂脱去组织中的水,后用二甲苯等透明剂置换出乙醇,此过程即脱水、透明。再用石蜡渗入组织块,冷凝后变硬,即浸蜡、包埋,就可在切片机上切片了。 1.固定 细胞、组织离体后要迅速用相应的固定剂固定,使蛋白质沉淀、变性、凝固,保持组织原有的形态结构和抗原性。一般用多聚甲醛、FAA、丙酮或Carnoy于4℃并向固定过夜。 2.脱水与透明 固定后的组织须由低浓度到高浓度的乙醇逐级脱水,一般为50%、70%、85%、95%、和100%(3次) 3.渗蜡与包埋 渗蜡是石蜡置换组织块中透明剂的过程,一般用熔点为52-60℃的石蜡。透明后的组织块先于1/1体积的二甲苯与石蜡中37℃渗透过夜,后温度调至58℃换入纯石蜡继续渗透,一般每间隔3h换一次纯石蜡,直到无二甲苯 气味即可进行包埋。 4.切片与展片 先用刀片修去组织块周围多余的石蜡,一般保留2mm左右的石蜡,修整成梯形的组织块,以便于展片时蜡带的分离。先加热刀片,后把修好的组织块快速粘到方形的小木块上,冷凝后即可进行切片。 一般组织切片的厚度为6-12um,切片速度以40-50次/min为宜,用毛笔托起蜡带,分割后依次放到洁净的载玻片上,蜡带的光滑面朝下放,后滴上适量的蒸馏水放至展片台上于37-40℃烤片过夜。 5. 染色、脱水、透明与封片 染色一般是双重染色或单染,番红与固绿是常用双重染色法,而苏木精是最优良的核染色剂。具体流程如下所示: 番红-固绿双重染色法:纯二甲苯(20min)→纯二甲苯(20min)→1/2酒精+1/2二甲苯(2-3min)→100%酒精(2-3min)→95%酒精(2-3min)→85%酒精(2-3min)→75%酒精(2-3min)→50酒精(2-3min)→番红染液(30-1h)→50%酒精(30s)→75%酒精(30s)→85%酒精(30s)→95%酒精(30s)→固绿染液(7s)→95%酒精(30s)→100%酒精(30s)

病理组织切片制作技术

病理组织切片制作技术 病理组织切片制作技术 病理组织切片常用的制作方法有三种。即石蜡切片法,冰冻切片法和火棉胶切片法。以石蜡切片法为代表,切片的基本制作过程是:组织取材→固定→冲洗→脱水→透明→浸蜡→组织包埋→组织切片→展片附贴→切片脱蜡→染色→脱水→染片透明→封固。 以上基本过程是互相联系的,任何一环节出现问题,都将使整个切片制作归于失败。因此应细致、耐心、认真负责,并事先做好计划安排。 一、取材 采取病料,要刀剪锐利,剪切时不可挤压,扯拉病料,以防人为损伤。切取的工具要清洁。采取病料越新鲜越好,一般不超过死后24小时。应选择病变部与可疑病变部切取,切取时要由表及里,有浅入深并包括周围正常组织一部分。特殊病料应根据器官的结构特点切取。管状,囊状和皮肤组织应注意垂直切取(横切)。带有薄膜的组织,要防止切时薄膜分离和脱落。 切取组织块大小,以1.5×1.5×0.3厘米为宜,最厚不宜超过0.5厘米。组织块病变一面应平整光滑,另一面可不平整,以便包埋时辨认。切取后,放入事先准备好的装有固定液的磨口玻璃广口瓶中,并做好标记。 二、固定 固定的目的是迅速将组织细胞杀死,使细胞中的蛋白质,糖,脂肪等凝固,从而保持与活组织相似的结构状态。材料取下后,应迅速固定。固定液数量应为病理组织块的5到20倍。由于一般把组织块浸入固定液后数小时,固定液渗入组织液的深度只达2到3厘米。因此,可以放置冰箱内固定,使组织内酶失去作用,细菌也能停止滋生。 最常用的固定液是10%的福尔马林溶液:使用时,用40%的甲醛饱和水溶液10毫升,加水90毫升配成。 三、冲洗

固定后的组织块,应将固定液洗去。一般均用流水(自来水)冲洗12到24小时左右。及时冲洗尚有停止固定的作用,防止固定过度,有利于制片染色。 冲洗时如不方便用流水冲洗,也可用较大容器盛装水浸洗,每隔相当时间换水一次。整个浸洗时间比流水冲洗应稍长一些。酒精固定的组织材料不需冲洗。 四、脱水 经过固定的组织,冲洗后要进行脱水。脱水的目的在于将组织内的水分用酒精或其他溶剂置换出来,为石蜡等其他包埋剂浸入组织创造条件。 常用的脱水剂为酒精。由于酒精可以任何比例与水结合,对组织穿透力强,又能使组织硬化,因而不能将组织从水中直接移入浓度高的酒精中,应从低浓度逐渐到高浓度。脱水必须充分,否则给浸蜡造成困难。 除用酒精作脱水剂外,还可以用正丁醇(N—Butyla alcohol)。正丁醇微溶于水,能与各种浓度酒精混合,也能直接溶解石蜡。故组织经正丁醇脱水后,不须经二甲苯透明。用正丁醇作脱水剂,组织块收缩减低,也不会过硬,故比酒精优越。 五、透明 透明的目的是将组织内的酒精用矿物油或植物油置换出来,并溶解石蜡,帮助石蜡浸透组织。由于经过透明剂处理的组织块用肉眼观察呈透明状,故称这一过程为透明。 常用的透明剂为二甲苯(Xylol),因其穿透力较强,因而组织在二甲苯中停留时间不宜过长,一般透明时间在30分钟左右即可。 六、浸蜡 浸蜡是指组织经过透明作用以后,放入溶化的石蜡中浸渗,使石蜡浸入组织块中,冷却后,才能进行切片。 通常选择熔点在52~56℃之间的石蜡,并视切片时环境的气温而选择。室温高则选用熔点稍高的石蜡,反之,则选用熔点较低的石蜡,这样可防止切片时石蜡太软或易碎裂。

组织病理切片的制作流程

组织病理切片的制作流程 第一篇:组织病理切片的制作流程 组织病理切片的制作流程 1.取材 组织取材的方法是制作切片的一个重要程序,根据教学、科研及外检的具体要求取自人体(外科手术切除标本、活检标本、尸检标本)或动物,并确定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识,还要掌握实际操作技术,每个组织器官的取材都有一定的部位和方法,不能任意切取组织作为制片材料,不然,无法达到教学、科研和临床诊断的目的,具体要求如下: (1)材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。 (2)组织块的大小:所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部,但根据制片材料和目的不同,组织块的较理想体积也不同,如制作病理外检、科研切片,其组织块可以薄取0.1~0.2cm即可,这样可以缩短固定脱水透明的时间,若制作教学切片厚取0.3 ~0.5cm,这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。 (3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧,以免因挤压而使组织、细胞变形。 (4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材,病理标本取材按照各病变部位、性质的不同,根据要求规范化取材。 (5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构,决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键,如长管状器官以横切为好。 (6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用水冲洗干净后再放入固定液中。 (7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后,或多或少会产生收缩现象,有时甚至完全变形。为此可将组织展平,以尽可能维持原形。

组织病理切片的制作流程(精品)

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 组织病理切片的制作流程(精品) 组织病理切片的制作流程 1.取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序,根据教学、科研及外检的具体要求取自人体(外科手术切除标本、活检标本、尸检标本)或动物,并确定取材的部位和方法。 取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识,还要掌握实际操作技术,每个组织器官的取材都有一定的部位和方法,不能任意切取组织作为制片材料,不然,无法达到教学、科研和临床诊断的目的,具体要求如下: (1) 材料新鲜: 取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。 (2) 组织块的大小: 所取组织块较理想的体积为 2. 0cm2. 0cm0. 3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部,但根据制片材料和目的不同,组织块的较理想体积也不同,如制作病理外检、科研切片,其组织块可以薄取 0. 1~0. 2cm 即可,这样可以缩短固定脱水透明的时间,若制作教学切片厚取 0. 3 ~0. 5cm,这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。 (3) 勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动。 1 / 17

夹取组织时切勿过紧,以免因挤压而使组织、细胞变形。 (4) 规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材,病理标本取材按照各病变部位、性质的不同,根据要求规范化取材。 (5) 选好组织块的切面: 根据各器官的组织结构,决定其切面的走向。 纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键,如长管状器官以横切为好。 (6) 保持材料的清洁: 组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用水冲洗干净后再放入固定液中。 (7) 保持组织的原有形态: 新鲜组织固定后,或多或少会产生收缩现象,有时甚至完全变形。 为此可将组织展平,以尽可能维持原形。 2.固定 (1) 小块组织固定法: 这是最常用的方法,从人体或动物体取下的小块组织,须立即置入液态固定剂中进行固定,通常,标本与固定液的比例为 1: 4~20,但组织块不宜过大过厚,否则固定液不能迅速渗透。 故取组织块的大小一般为 2. 0cm2. 0cm0. 3cm。 (2) 注射、灌注固定法: 某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入内部,或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。 这时宜采用注射固定或灌注固定法。 将固定液注入血管,经血管分支到达整个组织和全身,从而得

相关主题
相关文档
最新文档