淀粉测定方法

淀粉的测定方法(1)

测定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法(酶—直接法)

一、酶水解法

1。原理

样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用淀粉酶水解成双糖,再用盐酸将双糖水解成单糖,最后按还原糖测定,并折算成淀粉。

2。适用范围

GB5009。9-85,适用于所有含淀粉的食物。

3.仪器

(1) 回流冷凝器

(2)水浴锅

4。试剂

除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯.

(1) 乙醚

(2) 0.5 % 淀粉酶溶液:称取淀粉酶(Sigma公司, E。C3。2。1.1)0。5 g,加100 ml水溶解,加入数滴甲苯或三氯甲烷,防止长霉,贮于冰箱中。(注:配成溶液的淀粉酶破坏很快,最好邻用现配。)

(3)碘溶液:称取3.6 g碘化钾溶于20 ml水中,加入1。3 g碘,溶解后加水稀释至100 ml。

(4) 85 %乙醇。

(5)其余试剂同《蔗糖测定方法》

5.操作方法

5.1 样品处理

称取2~5 g样品,置于放有折叠滤纸的漏斗内,先用50 ml乙醚分5次洗除脂肪(注:如果脂肪含量少,此步骤可免),再用约100 ml 85 %乙醇洗去可溶性糖类(注:此步骤目的是去除可溶性糖),将残留物移入250 ml烧杯内,并用50 ml水洗滤纸及漏斗,洗液并入烧杯内,将烧杯置沸水浴上加热15 min,使淀粉糊化,放冷至60 ℃以下,加20 ml淀粉酶溶液,再5 5~60 ℃保温1 h,并时时搅拌(注:温度过高,淀粉酶的活性破坏)。然后取1滴此液加1滴碘溶液,应不现兰色,若显兰色,再加热糊化并加20 ml淀粉酶溶液,继续保温,直至加碘不显兰色为止。加热至沸,冷后移入250 ml容量瓶中,并加水至刻度,混匀,过滤。(注:此时淀粉已水解成双糖,过滤可去除残渣和纤维素)弃去初滤液,取50 ml滤液,置于250 ml锥形瓶中,加5 ml 6 mol/L盐酸,装上回流冷凝器,在沸水浴中回流1 h,冷后加2滴甲基红指示剂,用5mol/L氢氧化钠溶液中和至中性,溶液转入100 ml容量瓶中,洗涤锥形瓶,洗液并入100 ml容量瓶中,加水至刻度,混匀备用。(淀粉在沸水浴条件下糊化是淀粉水解的第一步反应,然后在淀粉酶的作用下,分解成短链淀粉、糊精、麦芽糖等低聚合的糖,所以在淀粉酶解后需用酸进一步水解得到葡萄糖。)

5.2 测定

按《还原糖的测定方法》操作。同时量取50 ml水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液,按同一方法做试剂空白试验。

6.计算

X1=

(A1—A2)

×0.9

×100 (1)

m1×

V1

×

V3

×1000

V2100

式中: X1——样品中淀粉的含量,%;

A1--测定用样品中还原糖的含量。Mg;

A2--试剂空白中还原糖的含量,mg;

0。9-—还原糖(以葡萄糖计)换算成淀粉的换算系数;

m1—-称取样品质量,g;

V1—-水解用样品溶液体积,ml;

V2—-样品定容总体积,ml;

V3——测定用样品处理液的体积,ml。

二、酸水解法

1.原理

样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用酸水解成具有还原性的单糖,然后按还原糖测定,折算成淀粉。

2.适用范围

本法适用于含淀粉的食物

3.仪器

(1)水浴锅。

(2)高速组织捣碎机:1200 rpm。

(3)皂化装置并附250 ml锥形瓶.

4。试剂

除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。

(1)乙醚。

(2) 85%乙醇溶液。

(3) 6mol/L盐酸溶液。

(4) 10mol/L氢氧化钠溶液。

(5) 2。5mol/L氢氧化钠溶液。

(6)甲基红指示液:0。2 %乙醇溶液.

(7)精密pH试纸。

(8) 20 %乙酸铅溶液,

(9) 10 % 硫酸钠溶液。

(10)其余试剂同还原糖的测定。

5.操作方法

5.1样品处理

5.1。1粮食、豆类、糕点、饼干等较干燥的样品:称取2。0~5。0 g磨碎过40目筛的样品,置于放有慢速滤纸的漏斗中,用30 ml乙醚分三次洗去样品中脂肪,弃去乙醚。再用150 ml 85 %乙醇溶液分数次洗涤残渣,除去可溶性糖类物质。并滤干乙醇溶液,以100 ml水洗涤漏斗中残渣并转移至250ml锥形瓶中,加入30 ml 6 mol/L盐酸,接好冷凝管,置沸水浴中回流2 h.回流完毕后,立即置流水中冷却。待样品水解冷却后,加入2滴甲基红指示剂,先以40 %氢氧化钠溶液调至黄色,再以6 mol/L盐酸校正至水解液刚变红色为宜。若水解液颜色较深,可用精密pH试纸测试,使样品水解液的pH约为7。然后加20 ml 20 %乙酸铅溶液,摇匀,放置10 min。再加20 ml 10 %硫酸钠溶液,以除去过量的铅。摇匀后将全部溶液及残渣转入500 ml容量瓶中,用水洗涤锥形瓶,洗液合并于容量瓶中,加水稀释至刻度。过滤,弃去初滤液20 ml,滤液供测定用.

5.1。2蔬菜、水果、各种粮豆含水熟食制品:按1:1加水在组织捣碎机种捣成匀浆(蔬菜、水果需先洗净、凉干,取可食部分)。称取5~10 g匀浆(液体样品可直接量取),于250 ml锥形瓶中,加30 ml乙醚振摇提取(除去样品中脂肪),用滤液过滤去除乙醚,再用30 ml乙醚淋洗两次,弃去乙醚。以下按5。1.1自”再用150 ml 85%乙醇溶液”起依法操作。

5.2 测定

按还原糖的测定步骤操作。

6.计算

X

2 =

(A

3

-A

4

)×0。

9

×100 (1)

m

2

×

50

×

V2×

1000

250100

式中: X2-—样品中淀粉的含量,%;

A3——测定用样品中还原糖的含量.mg;

A4--试剂空白中还原糖的含量,mg;

m2——称取样品质量,g;

V2-—测定用样品处理液的体积,ml.

500——样品液总体积,ml;

0。9——还原糖(以葡萄糖计)换算成淀粉的换算系数;

(注:酸水解能分解部分半纤维素,形成具有还原力的单糖,如木糖、阿拉伯糖等,可影响分析结果。为了比较正确地测定食物中淀粉含量,建议采用淀粉酶糖化淀粉,除去不可溶性的残渣后,再用酸水解使之成为葡萄糖,然后测定其含量,最后换算成淀粉.

三、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法(酶—直接法)

1。原理

样品先在37℃下经α-淀粉酶水解,使可消化淀粉转化成葡萄糖,用80%乙醇提取,未水解的抗性淀粉部分经沸水浴凝胶化后,在淀粉葡萄糖苷酶转化成葡萄糖,用葡萄糖氧化酶法分别测定葡萄糖含量,再换算成可消化淀粉和抗性淀粉含量。

2。适用范围

参考Englyst和Champ的方法.适用于所有含淀粉食物的测定。

3.仪器

(1)恒温水浴箱

(2)温箱

(3) 分光光度计

4.试剂

除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。

(1) 0。1mol/L乙酸缓冲液(pH 5.0):称取14。28 g 乙酸钠(CH3COONa·3H2O)溶于水中,加入2.7 ml 冰乙酸,并调节pH 5。0,用水定容至1 L。

(2)酶溶液:分别称取4gα-淀粉酶溶液(α-amylase,Sigma 公司)、1g淀粉葡萄糖苷酶溶液(amyloglucosidase,Sigm a 公司)和0.3g转换酶(invertase,Sigma 公司)溶液于研钵中,用 0.1mol/L 乙酸缓冲液研磨制成匀浆,并调节体积为100ml.3000rpm离心5min,取上清液.

(3)淀粉葡萄糖苷酶溶液: 称取2 g 淀粉葡萄糖苷酶(amyloglucosidase, Sigma 公司),加100 ml 0。1 mol/L 乙酸缓冲液研磨成匀浆.3000 rpm离心5 min,取上清液。

(4) 80%乙醇:800ml 乙醇加水至1L。

(5) 4mol/L氢氧化钾溶液:称取224g氢氧化钾,用水溶解并加至1L。

(6) 2 mol/L乙酸溶液:量取冰乙酸118ml,加水至1L,混匀.

(7)其它试剂同《葡萄糖测定方法》.

5.操作步骤

5.1样品处理:测定RS1时,直接称取样品0。2g~1g;测定RS2时,选用生的样品,先研磨打碎后再称取样品0。2g~1g,。测定RS3时,则先将样品加水煮沸至少15 min,使之凝胶化,然后取出放入4℃冰箱冷藏过夜,再混匀后称取样品0。2g~1 g (需折合水分)。加入10 ml 酶溶液,轻轻混匀.37℃温箱或水浴中酶解16 h。加入40 ml 无水乙醇,使乙醇含量终浓度为80%,充分摇匀.静置30 min,3000 rpm 离心15min,上清液转移至100ml 容量瓶中.用80%乙醇反复洗涤沉淀2 ~ 3次.合并上清液并用乙酸缓冲液定容,供测定可消化淀粉用.

5.2水解抗性淀粉:将经反复洗涤的沉淀置于100℃干燥,然后用15ml水将沉淀转移至锥形瓶中,沸水浴中加热30 min。冷却至室温。加入1倍体积的4 mol/L 氢氧化钾溶液,使氢氧化钾终浓度为2mol/L,室温下混合30 min。(注:在样品凝胶化后,2mol/L氢氧化钾的作用是进一步破坏淀粉结构,如果氢氧化钾的浓度过高或过低,不利于结构破坏,操作中需注意。)加入约30ml 2 mol/L 乙酸溶液,调节pH为5.0,再加入淀粉葡萄糖苷酶溶液5 ml,65℃~70℃水浴90 min.冷却后将水解液转移至100ml容量瓶中,用乙酸缓冲液定容至刻度.过滤。

5。3测定:吸取0。5ml 上清液(5。1)和抗性淀粉水解液(5.2),按照葡萄糖氧化酶法分别测定葡萄糖含量(从测定步骤开始)。同时做葡萄糖标准曲线。

6.计算

根据葡萄糖标准曲线得出上清液中和抗性淀粉水解液中葡萄糖浓度,再根据稀释定容体积和称样量分别计算出可消化淀粉和抗性淀粉含量。

X=(As—Ab)×V

×F

×0。1×

0.9

0。5×m

式中: X——样品中可消化淀粉/抗性淀粉含量,g/100g;

As——由标准回归方程求出的样品测定管中葡萄糖含量,mg;

Ab-—由标准回归方程求出的样品空白管中葡萄糖含量,mg;

V-—样品定容体积,ml;

F—-稀释倍数

0。5——测定时吸取样品提取液的体积,ml;

m—-样品质量,g;

0.1--将mg/g转换成g/100g的系数。

7.注意事项

7。1 Eglyst根据抗性淀粉的分类,对样品处理采用不同的处理方法.读者可根据实验需要选择相应的方法。

7.2 Eglyst测定抗性淀粉时,模拟胃肠道内环境,根据α—淀粉酶水解时间长短,将20min时已水解的淀粉称为快消化淀粉,20min~120 min 水解的淀粉称为慢消化淀粉,120min后仍没有水解的淀粉称为抗性淀粉。有的学者指出在体内实验中,肠道对淀粉的消化能力可能超过6h,认为120min的水解时间过于短暂,并建议水解时间应延长至16h。目前国际上检测方法尚没有完全统一,多采用的是Eglyst和Champ的方法,这里的方法是对二者的综合并略加改进.

7.3如果将样品先用80%乙醇去除可溶性糖后,再加水煮沸,使之凝胶化,然后用氢氧化钾破坏淀粉结构,进而采用淀粉葡萄糖苷酶水解,所测定的结果即为总葡萄糖(total glucose)含量。结果乘以0。9即为总淀粉含量。

淀粉的国标测定方法

淀粉的国标测定方法 测定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法(酶-直接法) 一、酶水解法 1. 原理 样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用淀粉酶水解成双糖,再用盐酸将双糖水解成单糖,最后按还 原糖测定,并折算成淀粉。 2. 适用范围 GB5009.9-85,适用于所有含淀粉的食物。 3. 仪器 (1)回流冷凝器 (2)水浴锅 4. 试剂 除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。 (1)乙醚 (3)碘溶液:称取3.6 g碘化钾溶于20 ml水中,加入1.3 g碘,溶解后加水稀释至100 ml。 (4)85 % 乙醇。 (5)其余试剂同《蔗糖测定方法》 5. 操作方法 5.1样品处理 称取2?5 g样品,置于放有折叠滤纸的漏斗内,先用50 ml乙醚分5次洗除脂肪(注:如果脂肪含量少, 此步骤可免),再用约100 ml85聽醇洗去可溶性糖类(注:此步骤目的是去除可溶性糖),将残留物移入250 ml 烧杯内,并用50ml水洗滤纸及漏斗,洗液并入烧杯内,将烧杯置沸水浴上加热15 min,使淀粉糊化,放冷至60 'C以下,力口20ml淀粉酶溶液,再55?60 'C保温1h,并时时搅拌(注:温度过高,淀粉酶的活性破坏)。然后取1滴此液加1滴碘溶液,应不现兰色,若显兰色,再加热糊化并加20ml淀粉酶溶液,继续保温,直至加碘不显兰色为止。加热至沸,冷后移入250ml容量瓶中,并加水至刻度,混匀, 过滤。(注:此时淀粉已水解成双糖,过滤可去除残渣和纤维素)弃去初滤液,取50 ml滤液,置于250ml 锥形瓶中,加5 ml 6 mol/L 盐酸,装上回流冷凝器,在沸水浴中回流1h,冷后加2滴甲基红指示剂,用 5mol/L氢氧化钠溶液中和至中性,溶液转入100 ml容量瓶中,洗涤锥形瓶,洗液并入100ml容量瓶中,加水至刻度,混匀备用。(淀粉在沸水浴条件下糊化是淀粉水解的第一步反应,然后在淀粉酶的作用下,分解成短链淀粉、糊精、麦芽糖等低聚合的糖,所以在淀粉酶解后需用酸进一步水解得到葡萄糖。) 5.2测定 按《还原糖的测定方法》操作。同时量取50 ml水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液,按同一方法做试 剂空白试验。 6. 计算 x 100

淀粉检测方法

淀粉检测方法 淀粉是一种常见的碳水化合物,广泛存在于植物中,包括谷类、豆类、薯类等。检测淀粉的方法有很多种,其中常见的有碘液法、酶法和红色亚甲基蓝法等。下面将分别介绍这几种方法的原理和操作步骤。 碘液法是一种常用的淀粉检测方法。其原理是淀粉与碘溶液反应生成蓝色复合物。操作步骤如下:首先取少量待测样品,加入适量的水悬浮均匀;然后加入几滴碘液,观察颜色变化。如果出现蓝色,即表示样品中含有淀粉。 酶法是利用淀粉酶水解淀粉生成葡萄糖,然后通过葡萄糖检测方法来间接检测淀粉的含量。操作步骤如下:首先取少量待测样品,加入适量的酶溶液,放置一段时间使样品充分水解;然后加入酶抑制剂停止反应;最后使用葡萄糖检测方法来测定样品中的葡萄糖含量,从而间接得到淀粉的含量。 红色亚甲基蓝法是一种定量检测淀粉的方法。其原理是淀粉与红色亚甲基蓝在酸性条件下反应生成蓝色复合物,根据复合物的颜色深浅来定量测定淀粉的含量。操作步骤如下:首先取少量待测样品,加入酸溶液使其酸化;然后加入红色亚甲基蓝溶液,混合均匀;最后使用分光光度计测定样品溶液的吸光度,并根据标准曲线来计算淀粉的含量。

除了以上介绍的几种方法,还有一些其他的淀粉检测方法。比如用硝酸和亚硝酸盐的混合液进行检测,淀粉会被氧化成胆固醇,然后再用三氟化硼浓溶液滴定,根据滴定的消耗量来确定淀粉的含量。还有利用红外光谱仪等仪器设备进行淀粉定性定量分析的方法。 总结起来,淀粉的检测方法有碘液法、酶法、红色亚甲基蓝法等,每种方法都有其适用的场合和特点。在实际应用中,根据需要选择合适的方法来进行淀粉的检测,可以有效地掌握样品中淀粉的含量,为相关研究和应用提供可靠的数据支持。

淀粉的国标测定方法完整版

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淀粉的国标测定方法 测定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法(酶-直接法)一、酶水解法1.原理样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用淀粉酶水解成双糖,再用盐酸将双糖水解成单糖,最后按还原糖测定,并折算成淀粉。2.适用范围GB5009.9-85,适用于所有含淀粉的食物。3.仪器(1)回流冷凝器(2)水浴锅4.试剂除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。(1)乙醚(3)碘溶液:称取3.6 g碘化钾溶于20 ml水中,加入1.3 g碘,溶解后加水稀释至100 ml。(4) 85 %乙醇。(5)其余试剂同《蔗糖测定方法》5.操作方法5.1 样品处理称取2~5 g样品,置于放有折叠滤纸的漏斗内,先用50 ml乙醚分5次洗除脂肪(注:如果脂肪含量少,此步骤可免),再用约100 ml85 %乙醇洗去可溶性糖类(注:此步骤目的是去除可溶性糖),将残留物移入250 ml烧杯内,并用50ml水洗滤纸及漏斗,洗液并入烧杯内,将烧杯置沸水浴上加热15 min,使淀粉糊化,放冷至60 ℃以下,加20ml淀粉酶溶液,再55~60 ℃保温1h,并时时搅拌(注:温度过高,淀粉酶的活性破坏)。然后取1滴此液加1滴碘溶液,应不现兰色,若显兰色,再加热糊化并加20ml 淀粉酶溶液,继续保温,直至加碘不显兰色为止。加热至沸,冷后移入250ml容量瓶中,并加水至刻度,混匀,过滤。(注:此时淀粉已水解成双糖,过滤可去除残渣和纤维素)弃去初滤液,取50 ml滤液,置于250ml锥形瓶中,加5 ml 6 mol/L盐酸,装上回流冷凝器,在沸水浴中回流1h,冷后加2滴甲基红指示剂,用5mol/L氢氧化钠溶液中和至中性,溶液转入100 ml容量瓶中,洗涤锥形瓶,洗液并入100ml容量瓶中,加水至刻度,混匀备用。(淀粉在沸水浴条件下糊化是淀粉水解的第一步反应,然后在淀粉酶的作用下,分解成短链淀粉、糊

淀粉的测定方法

淀粉的测定方法-----------蒽酮法 一.原理 用乙醇将烟叶中可溶性糖浸出并分离出去,而后烟叶中淀粉用适量Hcl,因淀粉在稀酸作用下被水解成葡萄糖,再按葡萄糖测定进行。根据葡萄糖的含量从而算出淀粉含量。 二.仪器设备 三角瓶50ml 容量瓶100ml 移液管10ml、1ml 漏斗圆底烧瓶1000ml 离心管和离心机水浴锅温度计烘箱滤纸天平分光光度计 三.试剂 盐酸乙醇氢氧化钠蒽酮 四、试剂的配制和标准曲线的绘制 1. 葡萄糖标准液的配制称取无水葡萄糖(AR级)0.1g溶于蒸馏水中,定容至100毫升,用前取此液10毫升,再用水稀释至100毫升。 2.. 标准曲线的绘制取6支干洁刻度试管,依次移入葡萄糖标准液(100μg/ml)0,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00ml后,再从1至6试管依次补加1.0,0.8,0.6,0.4,0.2,0ml 蒸馏水后,再分别加入蒽酮试剂5毫升,于沸水中加热10分钟,冷却后在620nm波长处比色,记录OD值,以吸光值为纵坐标,糖含量为横坐标,绘出标准曲线 3. 80%乙醇的配制取400毫升乙醇加水定容至500ml 4. 1当量的盐酸配制 43毫升浓盐酸加水定容至500ml 5. 10%氢氧化钠配制 10g氢氧化钠溶于100ml水中 6. 蒽酮试剂:1克蒽酮溶于72%的H2SO41000ml(98%的H2SO4+240的蒸馏水),棕色瓶冰箱保 存2-3周。 五实验步骤 1. 分离出水溶性糖 0.1g样置于离心管中加入8毫升80%乙醇 80℃水浴浸 提30分钟冷却后离心5分钟残渣再加入8ml80%乙醇。 重复三次 2. 水解 残渣用1当量的盐酸15ml洗入50ml三角瓶,摇匀后烘箱105度加热3.5小时,冷却后加10%氢氧化钠6ml中和,蒸馏水定容100ml,过滤 3. 测定 取滤液1ml(空白用1ml蒸馏水代替),加入蒽酮试剂5ml,摇匀,于沸水浴中加热10分钟,冷却后在620nm波长处比色 六结果的计算与表述 C=AN*0.9/W C—样品淀粉含量(μg/g) W—样品重量(g) A—标准曲线查得的糖量(μg) N—样品提取液占样品反应液的倍数

淀粉测定方法

淀粉的测定方法(1) 测定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉与抗性淀粉的测定方法(酶-直接法) 一、酶水解法 1、原理 样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用淀粉酶水解成双糖,再用盐酸将双糖水解成单糖,最后按还原糖测定,并折算成淀粉。 2、适用范围 GB5009、9-85,适用于所有含淀粉的食物。 3、仪器 (1) 回流冷凝器 (2) 水浴锅 4、试剂 除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。 (1) 乙醚 (2) 0、5 % 淀粉酶溶液:称取淀粉酶(Sigma公司, E、C3.2.1、1)0、5 g,加100 ml水溶解,加入数滴甲苯或三氯甲烷,防止长霉,贮于冰箱中。(注:配成溶液的淀粉酶破坏很快,最好邻用现配。) (3) 碘溶液:称取3、6 g碘化钾溶于20 ml水中,加入1、3 g碘,溶解后加水稀释至100 ml。 (4) 85 %乙醇。 (5) 其余试剂同《蔗糖测定方法》 5、操作方法 5、1 样品处理 称取2~5 g样品,置于放有折叠滤纸的漏斗内,先用50 ml乙醚分5次洗除脂肪(注:如果脂肪含量少,此步骤可免),再用约100 ml 85 %乙醇洗去可溶性糖类(注:此步骤目的就是去除可溶性糖),将残留物移入250 ml烧杯内,并用50 ml水洗滤纸及漏斗,洗液并入烧杯内,将烧杯置沸水浴上加热15 min,使淀粉糊化,放冷至60 ℃以下,加20 ml淀粉酶溶液,再55~60 ℃保温1 h,并时时搅拌(注:温度过高,淀粉酶的活性破坏)。然后取1滴此液加1滴碘溶液,应不现兰色,若显兰色,再加热糊化并加20 ml淀粉酶溶液,继续保温,直至加碘不显兰色为止。加热至沸,冷后移入250 ml容量瓶中,并加水至刻度,混匀,过滤。(注:此时淀粉已水解成双糖,过滤可去除残渣与纤维素)弃去初滤液,取50 ml滤液,置于250 ml锥形瓶中,加5 ml 6 mol/L盐酸,装上回流冷凝器,在沸水浴中回流1 h,冷后加2滴甲基红指示剂,用5mol/L氢氧化钠溶液中与至中性,溶液转入100 ml容量瓶中,洗涤锥形瓶,洗液并入100 ml容量瓶中,加水至刻度,混匀备用。(淀粉在沸水浴条件下糊化就是淀粉水解的第一步反应,然后在淀粉酶的作用下,分解成短链淀粉、糊精、麦芽糖等低聚合的糖,所以在淀粉酶解后需用酸进一步水解得到葡萄糖。) 5、2 测定 按《还原糖的测定方法》操作。同时量取50 ml水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液,按同一方法做试剂空白试验。 6、计算 X1= (A1-A2)×0、9 ×100 (1) m1× V1 × V3 ×1000 V2 100 式中: X1--样品中淀粉的含量,%; A1--测定用样品中还原糖的含量。Mg; A2--试剂空白中还原糖的含量,mg; 0、9--还原糖(以葡萄糖计)换算成淀粉的换算系数; m1--称取样品质量,g; V1--水解用样品溶液体积,ml; V2--样品定容总体积,ml; V3--测定用样品处理液的体积,ml。 二、酸水解法 1、原理 样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用酸水解成具有还原性的单糖,然后按还原糖测定,折算成淀粉。 2、适用范围 本法适用于含淀粉的食物 3、仪器

淀粉含量的测定

淀粉含量的测定 一、引言 淀粉是植物中最主要的储能物质,也是人类的主要食物之一。因此,测定淀粉含量对于食品工业、生物学和农业等领域都具有重要意义。本文将介绍淀粉含量的测定方法。 二、理论基础 淀粉是由葡萄糖分子组成的多糖,可以通过酶解成单糖。因此,测定淀粉含量的方法通常是通过酶解淀粉,然后测定产生的葡萄糖或者其他反应产物来计算样品中淀粉的含量。 三、常用方法 1. 碘液法 碘液法是一种简单易行且常用的方法。其原理是利用碘化钾与淀粉形成蓝色复合物,通过比色法来测定样品中淀粉的含量。 操作步骤: (1)取适量样品加入试管中; (2)加入适量碘液; (3)加入适量稀盐酸溶液; (4)加入适量水,并摇匀; (5)使用比色计在波长为620nm处读取吸光度值。

2. 酶解-比色法 酶解-比色法是一种准确度较高的方法。其原理是利用淀粉酶将淀粉分解成葡萄糖,然后使用葡萄糖氧化酶将葡萄糖转化为过氧化物,最终 通过比色法来测定样品中淀粉的含量。 操作步骤: (1)取适量样品加入试管中; (2)加入适量淀粉酶,并在恒温水浴中孵育一段时间; (3)加入适量葡萄糖氧化酶,并在恒温水浴中孵育一段时间; (4)加入适量琼脂糖和Na2CO3溶液,并摇匀; (5)使用比色计在波长为505nm处读取吸光度值。 四、注意事项 1. 样品的选取应该具有代表性,避免出现偏差; 2. 操作过程中要注意卫生和安全,避免污染和伤害; 3. 仪器的校准和标准曲线的制备也是保证结果准确性的重要环节。 五、总结 测定淀粉含量是一项常规实验,在食品工业、生物学和农业等领域都 有广泛的应用。本文介绍了碘液法和酶解-比色法两种常用的测定方法,同时也提醒了注意事项。在实际操作中,应根据具体情况选取合适的 方法,并保证操作规范和准确性。

淀粉的国标测定方法

淀粉的国标测定方法The final revision was on November 23, 2020

淀粉的国标测定方法 测定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法(酶-直接法) 一、酶水解法 1.原理 样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用淀粉酶水解成双糖,再用盐酸将双糖水解成单糖,最后按还原糖测定,并折算成淀粉。 2.适用范围 ,适用于所有含淀粉的食物。 3.仪器 (1)回流冷凝器 (2)水浴锅 4.试剂 除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。 (1)乙醚 (3)碘溶液:称取 g碘化钾溶于20 ml水中,加入 g碘,溶解后加水稀释至100 ml。 (4) 85 %乙醇。 (5)其余试剂同《蔗糖测定方法》 5.操作方法 样品处理 称取2~5 g样品,置于放有折叠滤纸的漏斗内,先用50 ml乙醚分5次洗除脂肪(注:如果脂肪含量少,此步骤可免),再用约100 ml85 %乙醇洗去可溶性糖类(注:此步骤目的是去除可溶性糖),将残留物移入250 ml烧杯内,并用50ml水洗滤纸及漏斗,洗液并入烧杯内,将烧杯置沸水浴上加热15 min,使淀粉糊化,放冷至60 ℃以下,加20ml淀粉酶溶液,再55~60 ℃保温1h,并时时搅拌(注:温度过高,淀粉酶的活性破坏)。然后取1滴此液加1滴碘溶液,应不现兰色,若显兰色,再加热糊化并加20ml淀粉酶溶液,继续保温,直至加碘不显兰色为止。加热至沸,冷后移入250ml容量瓶中,并加水至刻度,混匀,过滤。(注:此时淀粉已水解成双糖,过滤可去除残渣和纤维素)弃去初滤液,取50 ml 滤液,置于250ml锥形瓶中,加5 ml 6 mol/L盐酸,装上回流冷凝器,在沸水浴中回流1h,冷后加2滴甲基红指示剂,用5mol/L氢氧化钠溶液中和至中性,溶液转入100 ml容量瓶中,洗涤锥形瓶,洗液并入100ml容量瓶中,加水至刻度,混匀备用。(淀粉在沸水浴条件下糊化是淀粉水解的第一步反应,然后在淀粉酶的作用下,分解成短链淀粉、糊精、麦芽糖等低聚合的糖,所以在淀粉酶解后需用酸进一步水解得到葡萄糖。) 测定 按《还原糖的测定方法》操作。同时量取50 ml水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液,按同一方法做试剂空白试验。 6.计算? X1=(A1-A2)× ×100 (1) m1× V1 × V3 ×1000 V2100 式中: X1--样品中淀粉的含量,%;A1--测定用样品中还原糖的含量。Mg;A2--试剂空白中还原糖的含量,mg;

淀粉测定方法

淀粉的测定方法(1) 测定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法(酶-直接法) 一、酶水解法 1.原理 样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用淀粉酶水解成双糖,再用盐酸将双糖水解成单糖,最后按还原糖测定,并折算成淀粉。 2.适用范围 GB5009.9-85,适用于所有含淀粉的食物。 3.仪器 (1)回流冷凝器 (2)水浴锅 4.试剂 除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。 (1)乙醚 (2)0.5 % 淀粉酶溶液:称取淀粉酶(Sigma公司,g,加100 ml水溶解,加入数滴甲苯或三氯甲烷,防止长霉,贮于冰箱中。(注:配成溶液的淀粉酶破坏很快,最好邻用现配。) (3)碘溶液:称取3.6 g碘化钾溶于20 ml水中,加入1.3 g碘,溶解后加水稀释至100 ml。 (4)85 %乙醇。 (5)其余试剂同《蔗糖测定方法》 5.操作方法 5.1 样品处理 称取2~5 g样品,置于放有折叠滤纸的漏斗内,先用50 ml乙醚分5次洗除脂肪(注:如果脂肪含量少,此步骤可免),再用约100 ml 85 %乙醇洗去可溶性糖类(注:此步骤目的是去除可溶性糖),将残留物移入250 ml烧杯内,并用50 ml水洗滤纸及漏斗,洗液并入烧杯内,将烧杯置沸水浴上加热15 min,使淀粉糊化,放冷至60 ℃以下,加20 ml淀粉酶溶液,再55~60 ℃保温1 h,并时时搅拌(注:温度过高,淀粉酶的活性破坏)。然后取1滴此液加1滴碘溶液,应不现兰色,若显兰色,再加热糊化并加20 ml淀粉酶溶液,继续保温,直至加碘不显兰色为止。加热至沸,冷后移入250 ml容量瓶中,并加水至刻度,混匀,过滤。(注:此时淀粉已水解成双糖,过滤可去除残渣和纤维素)弃去初滤液,取50 ml滤液,置于250 ml锥形瓶中,加5 ml 6 mol/L盐酸,装上回流冷凝器,在沸水浴中回流1 h,冷后加2滴甲基红指示剂,用5mol/L氢氧化钠溶液中和至中性,溶液转入100 ml容量瓶中,洗涤锥形瓶,洗液并入100 ml容量瓶中,加水至刻度,混匀备用。(淀粉在沸水浴条件下糊化是淀粉水解的第一步反应,然后在淀粉酶的作用下,分解成短链淀粉、糊精、麦芽糖等低聚合的糖,所以在淀粉酶解后需用酸进一步水解得到葡萄糖。) 5.2 测定 按《还原糖的测定方法》操作。同时量取50 ml水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液,按同一方法做试剂空白试验。 6.计算 X1= (A1-A2)×0.9 ×100 (1) m1× V1 × V3 ×1000 V2 100 式中:X1--样品中淀粉的含量,%; A1--测定用样品中还原糖的含量。Mg; A2--试剂空白中还原糖的含量,mg; 0.9--还原糖(以葡萄糖计)换算成淀粉的换算系数; m1--称取样品质量,g; V1--水解用样品溶液体积,ml; V2--样品定容总体积,ml; V3--测定用样品处理液的体积,ml。 二、酸水解法 1.原理 样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用酸水解成具有还原性的单糖,然后按还原糖测定,折算成淀粉。 2.适用范围 本法适用于含淀粉的食物

淀粉的国标测定方法

淀粉的国标测定方法

淀粉的国标测定方法

测定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法(酶-直接法) 一、酶水解法 1.原理 样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用淀粉酶水解成双糖,再用盐酸将双糖水解成单糖,最后按还原糖测定,并折算成淀粉。 2.适用范围 GB5009.9-85,适用于所有含淀粉的食物。 3.仪器 (1)回流冷凝器 (2)水浴锅 4.试剂 除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。 (1)乙醚 (2) 0.5 % 淀粉酶溶液:称取淀粉酶(Sigma公司, E.C3.2.1.1)0.5 g,加100ml水溶解,加入数滴甲苯或三氯甲烷,防止长霉,贮于冰箱中。(注:配成溶液的淀粉酶破坏很快,最好邻用现配。)(3)碘溶液:称取3.6 g碘化钾溶于20 ml水中,加入1.3 g碘,溶解后加水稀释至100 ml。 (4) 85 %乙醇。 (5)其余试剂同《蔗糖测定方法》 5.操作方法 5.1 样品处理 称取2~5 g样品,置于放有折叠滤纸的漏斗内,先用50 ml乙醚分5次洗除脂肪(注:如果脂肪含量少,此步骤可免),再用约100 ml85 %乙醇洗去可溶性糖类(注:此步骤目的是去除可溶性糖),将残留物移入250 ml烧杯内,并用50ml水洗滤纸及漏斗,洗液并入烧杯内,将烧杯置沸水浴上加热15 min,使淀粉糊化,放冷至60 ℃以下,加20ml淀粉酶溶液,再55~60 ℃保温1h,并时时搅拌(注:温度过高,淀粉酶的活性破坏)。然后取1滴此液加1滴碘溶液,应不现兰色,若显兰色,再加热糊化并加20ml 淀粉酶溶液,继续保温,直至加碘不显兰色为止。加热至沸,冷后移入250ml容量瓶中,并加水至刻度,混匀,过滤。(注:此时淀粉已水解成双糖,过滤可去除残渣和纤维素)弃去初滤液,取50 ml滤液,置于250ml锥形瓶中,加5 ml 6 mol/L盐酸,装上回流冷凝器,在沸水浴中回流1h,冷后加2滴甲基红指示剂,用5mol/L氢氧化钠溶液中和至中性,溶液转入100 ml容量瓶中,洗涤锥形瓶,洗液并入100ml 容量瓶中,加水至刻度,混匀备用。(淀粉在沸水浴条件下糊化是淀粉水解的第一步反应,然后在淀粉酶的作用下,分解成短链淀粉、糊精、麦芽糖等低聚合的糖,所以在淀粉酶解后需用酸进一步水解得到葡萄糖。) 5.2 测定 按《还原糖的测定方法》操作。同时量取50 ml水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液,按同一方法做试剂空白试验。 6.计算 X1= (A1-A2) ×0.9 ×100 (1) m1× V1 × V3 ×1000 V2 100 (amyloglucosidase,Sigma 公司)和0.3g转换酶(invertase,Sigma公司)溶液于研钵中,用 0.1mol/L 乙酸缓冲液研磨制成匀浆,并调节体积为100ml。3000rpm离心5min,取上清液。

测定淀粉含量的方法

测定淀粉含量的方法 测定淀粉含量的方法 导语:淀粉是一种重要的碳水化合物,存在于许多食物中,包括谷物、蔬菜和水果中。测定淀粉含量可以帮助我们了解食物的营养价值以及 其在人体中的作用。在本文中,我将介绍几种常用的测定淀粉含量的 方法。 一、碘液法 碘液法是一种常用的测定淀粉含量的方法。它基于碘与淀粉之间的反 应产生蓝色或紫色复合物的原理。以下是使用碘液法测定淀粉含量的 步骤: 1. 准备样品:将需要测定淀粉含量的食物样品研磨成细粉。 2. 提取淀粉:将细粉加入适量的水中,搅拌均匀后加热至沸腾,煮沸 5分钟。 3. 过滤提取液:用纱布或滤纸过滤提取液,以去除非淀粉物质。

4. 添加碘液:将过滤后的提取液滴加入含有碘液(一般为碘化钾溶液)的烧杯中。 5. 观察颜色变化:如果淀粉含量较高,溶液会呈现出蓝色或紫色;如 果淀粉含量较低,则溶液呈现黄色或无色。 通过比较样品的颜色变化与对照样品的颜色,我们可以推断淀粉在样 品中的含量。 二、酶解法 酶解法是另一种测定淀粉含量的常用方法。它利用淀粉酶(如α-淀粉酶)催化淀粉分解为葡萄糖,然后通过检测葡萄糖浓度来间接测定淀 粉含量。以下是使用酶解法测定淀粉含量的步骤: 1. 准备样品:将食物样品研磨成细粉。 2. 提取淀粉:将细粉加入适量的酶解缓冲液中,搅拌均匀后加热至一 定温度,加入淀粉酶。 3. 反应一段时间:将混合物在适当的温度下反应一段时间,以确保淀 粉完全被酶解成葡萄糖。

4. 检测葡萄糖浓度:使用葡萄糖测定仪器或试剂盒,测定反应液中葡萄糖的浓度。 5. 计算淀粉含量:根据葡萄糖浓度,计算出样品中的淀粉含量。 酶解法相较于碘液法更加准确和精确,可以考虑使用这种方法进行淀粉含量的测定。 三、pH滴定法 pH滴定法是通过测定淀粉溶液的酸碱度来间接测定淀粉含量的方法。淀粉溶液的pH值与其含量呈正相关关系。以下是使用pH滴定法测定淀粉含量的步骤: 1. 准备样品:将食物样品研磨成细粉。 2. 提取淀粉:将细粉加入适量的水中,搅拌均匀后加热至沸腾,煮沸5分钟。 3. 过滤提取液:用纱布或滤纸过滤提取液,以去除非淀粉物质。 4. 调整pH值:将过滤后的提取液滴入酸碱指示剂(如酚酞),搅拌均匀。

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