2020届苏教版细胞工程单元测试

细胞工程单元测试

一、单选题

1．下列关于生物工程的叙述，正确的是

A. 在花药离体培养形成愈伤组织的的过程中，有可能发生基因的突变和基因重组

B. 目的基因导入植物细胞的常用方法是显微注射法

C. 植物的单倍体育种和杂交育种都必须利用植物组织培养技术

D. 蛋白质工程也需要构建含控制预期蛋白质合成的基因表达载体

【答案】D

【解析】试题分析：基因重组只发生在减数分裂过程中，愈伤组织的形成过程只有有丝分裂，A错误；目的基因导入植物细胞的常用方法是农杆菌转化法，B错误；植物的单倍体育种必须利用植物组织培养技术，杂交育种不需要利用植物组织培养技术，C错误；蛋白质工程包含基因工程技术，也需要构建含控制预期蛋白质合成的基因表达载体，D 正确。

考点：本题考查生物工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。

2．1958年，美国科学家斯图尔德应用植物组织培养技术，将二倍体胡萝卜韧皮部的一些细胞进行离体培养，最终发育成完整的新植株幼苗（如下图）。关于这一科学事实，下列叙述中错误的是（）

A. 该实验证明了植物细胞具有全能性

B. 培养基中要添加葡萄糖作为碳源

C. 此过程中细胞只能进行有丝分裂

D. 利用该技术获得的后代能保持亲本性状

【答案】B

【解析】将离体的植物细胞培养成完整植株的过程证明了植物细胞具有全能性，A正确；培养基中要添加蔗糖作为碳源，若用葡萄糖会导致植物细胞失水而生长不良好，同时葡萄糖可作为微生物直接利用的碳源，而蔗糖可以抑制微生物的生长，减少微生物污染，B错误；胡萝卜韧皮部的细胞培养过程中，这些体细胞只能进行有丝分裂，C正确；植

物组织培养过程的生殖属于无性生殖，产生的后代能保持亲本的性状，D正确。

3．下列关于生物工程中酶的作用的叙述，错误的是（）

A. 纤维素酶可用于植物体细胞杂交

B. 胰蛋白酶可用于动物细胞培养

C. 限制酶只用于提取目的基因

D. DNA连接酶只用于DNA拼接重组

【答案】C

【解析】纤维素酶可除去细胞壁，用于植物体细胞杂交中原生质体的制备，A项正确；胰蛋白酶可分解细胞间的蛋白质，以制备单细胞悬液用于动物细胞培养，B项正确；构建基因表达载体时需用同种限制酶切割目的基因和质粒，C项错误；基因工程中DNA 连接酶用于将黏性末端或平末端连接起来，实现DNA拼接重组，D项正确。

【点睛】制备单细胞悬液时不能使用胃蛋白酶：胃蛋白酶发挥作用时需要适宜的酸性环境，pH约为2，此酸性环境对大多细胞有害，因此动物细胞培养时不能使用胃蛋白酶，应使用胰蛋白酶。

4．下列有关植物组织培养的叙述，正确的是

A. 愈伤组织是一团有特定结构和功能的细胞

B. 二倍体植株的花粉经脱分化和再分化后得到稳定遗传的植株

C. 用人工薄膜将植物组织培养得到的胚状体、顶芽、腋芽等分别包装可制成人工种子

D. 植物耐盐突变体可通过添加适量的NaCl的培养基诱导培养而获得

【答案】C

【解析】愈伤组织的特点是高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的薄壁细胞，A错误；二倍体植株的花粉经脱分化和再分化后得到单倍体，再用秋水仙素处理才能获得能稳定遗传的植株，B错误；将离体植物细胞或组织培养成具有生根发芽能力的胚状体结构、顶芽、腋芽等包裹上人造种皮可获得人工种子，C正确；通过在培养基添加适量的NaCl来培养而获得的植株具有耐盐性，其中的NaCl不是诱导植株产生耐盐突变，而是从一般植株中筛选具有耐盐特性的植株，D错误。

5．下列对生物技术的理解，合理的是

A. 基因工程的核心是将目的基因导入受体细胞

B. 单克隆抗体是骨髓瘤细胞分泌的

C. 用胚胎分割技术可获得性别不同的双胞胎

D. 蛋白质工程可制造出自然界原本不存在的蛋白质

【答案】D

【解析】基因工程的核心是基因表达载体的构建，故A错误；单克隆抗体是骨髓瘤细胞和效应B细胞融合形成的杂交瘤细胞分泌的，故B错误；来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一，则获得同卵双胞胎性别相同，故C错误；蛋白质工程是以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，故D 正确。

【考点定位】蛋白质工程；基因工程的原理及技术；单克隆抗体的制备过程；胚胎分割移植

6．下列关于动物细胞培养所需要的条件叙述正确的是

A. 为了创造无菌、无毒的环境，通常添加一定量的血清

B. 动物细胞培养所需营养物质和植物组织培养相同

C. 动物细胞培养的适宜温度一般与动物的体温相近

D. 动物细胞培养的适宜pH为酸性条件

【答案】C

【解析】为了创造无菌、无毒的环境，需要对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还要在细胞培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染，A项错误；动物细胞培养所需营养物质和植物组织培养不同，例如植物组织培养的培养基中含有蔗糖，而动物细胞培养液中含有葡萄糖和动物血清等，B项错误；动物细胞培养的适宜温度一般应与动物的体温相近，C项正确；动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，D项错误。【点睛】

本题考查动物细胞培养的相关知识，解题的关键是识记动物细胞培养的条件，并与植物组织培养进行比较，形成知识网络。

7．我国科学家培养克隆鱼时，将鱼的体细胞核植入雌鱼去核的卵细胞中，下图中能正确表示该技术过程的是

A. A

B. B

C. C

D. D

【答案】C

【解析】动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，并最终发育为动物个体。A图中是直接将精子与卵细

胞融合，不是核移植过程，A错误；B表示体细胞融合的过程，不是核移植过程，B错误；C图表示将体细胞的细胞核移植进入去核卵细胞中，属于核移植过程，C正确；D 图表示将卵细胞细胞核移植到去核体细胞中，与核移植概念不符，D错误。

8．下列各项不能

．．说明细胞全能性的实验是（）

A. 胡萝卜韧皮部细胞培育出植株

B. 转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株

C. 番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株

D. 紫色糯性玉米种子培育出植株

【答案】D

【解析】萝卜韧皮部细胞培育出植株是植物组织培养，体现了细胞的全能性，A错误；通过基因工程的方法获取含抗虫基因的重组细胞，经过植物组织培养获得抗虫棉，体现了细胞的全能性，B错误；番茄体细胞与马铃薯体细胞融合后培育出植株技术是植物体细胞杂交，原理是细胞膜的流动性和细胞的全能性，C错误；紫色糯性玉米种子培育出植株是个体的正常发育，不能体现细胞的全能性，D正确。

【点睛】解答本题关键能识记全能性的概念，细胞的全能性以细胞为起点，以产生个体为终点，D选项的起点不是细胞，其它选项的起点都是细胞，起点不是细胞，而发育成个体，不能体现细胞的全能性。

9．将植物的一些根尖细胞进行离体培养，最终发育成一株完整的新植株，关于这一科学事实，下列哪一项叙述是错误的（）

A. 细胞数目的增多是通过有丝分裂

B. 证明了植物细胞具有全能性

C. 培育成的新植株性状基本是一样的

D. 这种生殖方式属于有性生殖

【答案】D

【解析】植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株，其原理是植物细胞具有全能性。

该过程中细胞数目的增多是通过有丝分裂，A正确；该过程能证明了植物细胞具有全能性，B正确；由于不发生性状分离，所以培养成的新植株性状基本是一样的，C正确；这种生殖方式属于无性生殖，D错误。

10．关于生物工程和技术的说法正确的是（）

A. 从某生物cDNA文库中获取的目的基因，不含基因中的启动子

B. PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应

C. 抗虫基因成功地插入到植物细胞染色体上即说明能正常表达

D. 植物组织培养的过程中需要用到纤维素酶和果胶酶

【答案】A

【解析】启动子不能转录，而cDNA是逆转录形成的，因此从某生物cDNA文库中获取的目的基因，不含基因中的启动子，A正确；PCR反应中温度的周期性改变是为了变性、复性、延伸，B错误；抗虫基因成功地插入到植物细胞染色体上即说明目的基因已经导入受体细胞，但不能说明目的基因正常表达，C错误；植物体细胞杂交过程中需要用到纤维素酶和果胶酶，而植物组织培养过程中不需用这两种酶，D错误。

11．植物体细胞融合完成的标志是（）

A．细胞核发生融合 B．形成新的原生质体

C．细胞质发生融合 D．产生新的细胞壁

【答案】D

【解析】

试题分析：植物体细胞融合完成的标志是杂种细胞再生出新的细胞壁，A、B、C三项均错误，D项正确。

考点：本题考查植物体细胞杂交技术的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。

12．下列能体现细胞全能性的是

A. 扦插枝条发育成完整植株

B. 一粒种子发育成幼苗

C. 体外诱导干细胞分化为皮肤组织

D. 花药离体培养获得单倍体幼苗

【答案】D

【解析】细胞全能性是指细胞具有发育为完整新个体的潜能，扦插枝条、一粒种子均不是由一个细胞构成；体外诱导干细胞分化为皮肤组织，没有发育为完整新个体；花药离体培养获得单倍体幼苗体现了花粉细胞的全能性。

【点睛】细胞全能性的判断：

（1）一看起点：是不是由一个细胞发育而来；

（2）二看结果：是不是发育为完整的新个体。

13．下列有关作物育种的叙述，正确的是

A. 运用γ射线等因素使基因发生定向突变而获得理想的品种

B. 运用花药离体培养的方法能快速获得稳定遗传的优良品种

C. 对植物茎尖进行植物组织培养能获得具抗病毒能力的品种

D. 将外源基因导入作物细胞质基因组中可降低对近缘植物的影响

【答案】D

【解析】运用γ射线等因素使基因发生的突变是不定向的，需经过筛选和培育才能获得理想的品种，A项错误；运用花药离体培养的方法获得的单倍体高度不育，还需对获得的单倍体幼苗进行人工诱导使其染色体加倍才能快速获得稳定遗传的优良品种，B项错误；植物茎尖的病毒极少，甚至无病毒，对植物茎尖进行植物组织培养能获得脱毒植物，但不能获得具有抗病毒能力的品种，C项错误；将外源基因导入作物细胞质基因组中，可避免外源基因随花粉扩散，从而降低对近缘植物的影响，D项正确。

14．马铃薯利用它的块茎进行无性繁殖，种植的世代多了以后往往会感染病毒而减产，为此农户都希望得到无病毒的幼苗进行种植。获得无病毒幼苗的最佳办法是（）

A. 选择优良品种进行杂交

B. 进行远缘植物体细胞杂交

C. 利有芽尖进行组织培养

D. 人工诱导基因突变

【答案】C

【解析】试题分析：1、植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体．植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。2、培育无病毒植株苗，应选择不含病毒部分培养，而植物体新生部位不含病毒，如根尖和茎尖。解答：解：进行植物微型繁殖时常采用茎尖或根尖作为外植体，原因是茎尖或根尖病毒极少，因此切取一定大小的茎尖或根尖进行组织培养，再生的植株就可能不带病毒。

考点：植物组织培养

【名师点睛】意在考查学生的识记和理解能力，平时要注意知识点的积累．植物组织培养需要离体培养、无菌条件，植物激素（生长素和细胞分裂素）、一定的营养条件、维持适宜的温度和一定的光照条件等．

15．下列有关植物细胞工程应用的分析，不正确的是

A. 愈伤组织细胞分裂旺盛，经诱变处理，有利于获得突变个体

B. 利用茎尖进行组织培养，可以获得脱毒苗

C. 植物体细胞杂交技术培育出的杂种植物一定是高度不育的

D. 利用细胞培养工业化生产人参皂甙，提高产量

【答案】C

【解析】试题分析：愈伤组织细胞是经过脱分化形成，具有旺盛的分裂能力，容易发生基因突变，所以经诱变处理，有利于获得突变个体，故A正确；植物的茎尖含有的病毒极少，甚至无病毒，利用茎尖进行组织培养，可以获得脱毒苗，故B正确；植物体细胞杂交技术最大的优点是克服远缘杂交不亲和障碍，所得后代可育，故C错误；人参皂甙是细胞代谢产物，利用植物组织培养技术使人参的离体器官、组织或细胞经脱分化形成愈伤组织，再筛选出代谢产物高的愈伤组织细胞进行细胞培养，可实现工业化生产人参皂甙，提高产量，故D正确。

考点：本题考查植物细胞工程的实际应用的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。

16．下列关于植物细胞工程的叙述，错误

．．的是（）

A. 电刺激可以诱导植物原生质体的融合或动物细胞的融合

B. 用花粉离体培养获得的抗病植株，其细胞仍具有全能性

C. 诱导离体胡萝卜韧皮部细胞形成幼苗的过程中没有出现基因重组

D. 通过体细胞杂交技术培育杂种植株的过程不涉及染色体数目变异

【答案】D

【解析】电刺激可以诱导植物原生质体和动物细胞融合，PEG也可以，A争取。用化粉离体培养获得的抗病植株，是一个高度分化的细胞发育成了植株，体现了细胞的全能性，B争取。诱导离体胡萝卜韧皮部细胞形成幼苗的过程是有丝分裂，基因重组发生在减数分裂过程中，C争取。通过体细胞杂交技术培育杂种植株的过程染色体数目变成了原来两种植物的染色体之和，D错误。

点睛：促进原生质体融合和动物细胞融合的方法都有物理法、化学法，但灭活的病毒只能用于动物细胞融合。

17．下列实例与所利用的技术或原理不相符的是( )

A. 转基因抗虫棉的培育需要利用植物组织培养技术

B. 植物组织培养过程依据的原理是植物细胞具有全能性

C. 植物原生质体融合和动物细胞融合利用了细胞膜的选择透过性

D. 愈伤组织的形成和杂交瘤细胞的培养都与细胞分裂有关

【答案】C

【解析】转基因抗虫棉的培育过程：①在棉花的植株上提取叶肉细胞②在苏云金杆菌上提取相应基因③将提取基因导入植物叶肉细胞的DNA（利用基因重组技术）④通过培

养既培养出愈伤组织，进行再分化⑤最后通过组织培养技术，得到含抗虫基因的棉花植株，A正确；植物组织培养过程依据的原理是植物细胞具有全能性，B正确；原生质体融合和动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，属于细胞膜的结构特点，C错误；植物愈伤组织的形成是经过脱分化产生，与细胞有丝分裂有关，杂交瘤细胞的培养是细胞本身增多的过程，也与细胞有丝分裂有关，D正确。

18．下列实验中相关操作的叙述正确的是

A. 观察口腔上皮细胞临时装片时，需滴加蒸馏水以维持细胞正常形态

B. 制备植物根尖有丝分裂装片的步骤为：解离→染色→清水漂洗→制片

C. 植物组织培养实验中需使用无菌水对消毒后的外植体进行多次漂洗

D. 用胰蛋白酶处理后的动物细胞需在生理盐水中进行传代培养

【答案】C

【解析】观察口腔上皮细胞临时装片时，需滴加生理盐水以维持细胞正常形态，A项错误；制备植物根尖有丝分裂装片的步骤为：解离→清水漂洗→染色→制片，B项错误；植物组织培养实验中需使用无菌水对消毒后的外植体进行多次漂洗，C项正确；用胰蛋白酶处理后的动物细胞需在特制的动物细胞培养液中进行传代培养，D项错误。

【点睛】

本题考查了课本上的几个常考的重要实验的相关知识，解题的关键是要理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。

19．试管牛、利用植物组织培养技术培养非洲紫罗兰苗和克隆羊多莉均属于现代生物科技的成果，三者共性为

A．都用到细胞工程技术

B．都是在体外环境中完成的

C．都属于无性生殖范畴

D．都体现了体细胞的全能性

【答案】A

【解析】

试题分析：试管牛、非洲紫罗兰苗的组培和克隆羊多莉培育过程都用到细胞工程技术。A正确。植物组培是在体外环境完成的，试管牛和克隆羊还要移植到动物体内发育，B 错误。植物组培和克隆羊属于无性生殖，试管牛为有性生殖，C错误。植物组培体现了植物体细胞的全能性，克隆羊体现了动物细胞核的全能性，D错误。

考点：本题考查细胞工程和胚胎工程的相关知识，意在考查考生理论联系实际，综合运

用所学知识解决社会生活中相关生物学问题的能力。

20．图示为人体抗胃癌单克隆抗体的制备过程。下列有关叙述错误的是（）

A. 甲是能与人体抗胃癌抗体特异性结合的抗原

B. 细胞融合获得乙的原理和植物原生质体融合的原理基本相同

C. 用特定选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长

D. 丙需进行克隆化培养和抗体检测，多次筛选后可获得能分泌所需抗体的丁

【答案】C

【解析】试题分析：分析图示可知：甲是能与人体抗胃癌抗体特异性结合的抗原，A项正确；细胞融合获得乙的原理和植物原生质体融合的原理都是细胞膜的流动性，B项正确；用特定选择培养基对乙筛选，只有融合的杂交瘤细胞能生长，融合的具有同种核的细胞与未融合的细胞均不能生长，C项错误；丙为杂交瘤细胞，需进行克隆化培养和抗体检测，从中筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞丁，D项正确。

考点：本题考查生产单克隆抗体相关知识，意在考查学生能从课外材料中获取相关的生物学信息，并能运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题的能力。

二、非选择题

21．【生物——现代生物科技专题】基因工程靶向细胞疗法是细胞治疗和基因工程相结合的前沿生物疗法。治疗过程中先提取患者的免疫细胞，将特定靶向基因导入后，再对其进行扩增并诱导成效应细胞，最后回输至患者体内，以实现对被病毒感染细胞的特异性和主动性杀灭。回答下列问题：

（1）靶向基因需利用质粒、噬菌体衍生物或________作为载体才能导入免疫细胞，迄今为止，最为有效的导入方法是______________。

（2）成功导入靶向基因后可利用________技术对免疫细胞进行扩增，该过程中首先要对培养液和用具进行_________处理。扩增细胞通常应在10代以内，以保持细胞正常的____________。

（3）用该方法治疗病毒引起的疾病时，靶向基因表达产物的作用是____________________。

（4）回输的免疫细胞通过___________(填“体液免疫”或“细胞免疫”)清除感染的细胞。因回输的免疫细胞来自患者自身，可避免发生_____________________。

【答案】(动物）病毒显微注射法动物细胞培养无菌二倍体核型引导效应细胞识别被病毒感染的细胞细胞免疫免疫排斥反应

【解析】试题分析：本题考查了基因工程、动物细胞培养以及人体免疫调节的有关知识，要求能够识记动物细胞培养的条件，掌握基因工程的操作步骤以及目的基因获取的方法，识记细胞免疫的过程和特点，再结合所学知识准确答题。

（1）运载体种类有质粒、噬菌体衍生物或动植物病毒，因此靶向基因导入患者的免疫细胞，可用质粒、噬菌体衍生物或动物病毒，将目的基因导入动物细胞最为有效的导入方法是显微注射法。

（2）可以采用动物细胞培养技术对免疫细胞进行扩增，动物细胞培养的技术需要的条件有无菌无毒，因此首先要对培养液和用具进行无菌处理，在10代以内的细胞遗传物质没有改变，能够保持细胞正常的二倍体核型。

（3）靶向基因表达产物为效应细胞，该效应细胞能识别被病毒感染的细胞，使得病毒感染的细胞裂解死亡，释放出该病毒被抗体消灭。

（4）回输的免疫细胞为效应细胞，能作用于被病毒感染的细胞，发挥细胞免疫作用，最终清除感染病毒的细胞，回输的免疫细胞来自患者自身，自身的免疫功能不会攻击来自患者自身的细胞，因此不会发生免疫排斥反应，免疫细胞能保留在患者体内。22．资料1:1958年，美国科学家将胡萝卜韧皮部的细胞放在培养基中培养，得到了完整植株，并能开花结果。

资料2：葡萄糖异构酶在工业上应用广泛，为提高其热稳定性，朱国萍等人在确定第138位甘氨酸为目标氨基酸后，用有效方法以脯氨酸替代甘氨酸，结果其最适反应温度提高了10—12℃，使蛋白质空间结构更具刚性。

资料3：“试管婴儿”自诞生就引起了世界科学界的轰动，甚至被称为人类生殖技术的一大创举。也为治疗不孕不育症开辟了新途径。

（1）资料1中所运用的技术手段是________技术。由离体的细胞获得完整植株，需经过________过程，其理论基础是________________。

（2）资料2中提到的生物技术属于__________工程的范畴。该工程是通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质技术。在该实例中，引起葡萄糖异构酶空间结构改变的根本原因是_______________发生了改变。

（3）资料3中的“试管婴儿”，它实际上结合了体外受精、________和_________等多种技术手段。

【答案】植物组织培养脱分化和再分化植物细胞的全能性蛋白质基因早期胚胎培养胚胎移植

【解析】试题分析：试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

（1）资料1中将胡萝卜韧皮部的细胞培养成完整植株需要采用植物组织培养技术，该技术包括脱分化和再分化两个步骤。植物组织培养理论基础是植物细胞具有全能性。（2）资料2属于蛋白质工程的范畴，该工程是通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质的技术，在该实例中，引起葡萄糖异构酶空间结构改变的根本原因是基因发生了改变。

（3）体内受精场所和最初的早期胚胎发育场所都是输卵管，“试管婴儿”可以理解成由实验室的试管模拟人体输卵管功能，因此“试管婴儿”的培育主要采用了体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植等技术。

23．科学家用植物细胞杂交方法，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出了“番茄-马铃薯”杂种植株，如图1所示，其中①～⑤表示过程，英文字母表示细胞、组织或植株。育种工作者还利用番茄进行了如下三组实验如图2。据图回答下列问题：

（1）实现过程②之前需用________________法除去细胞壁。与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为__________________。

（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。

（3）若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞含n条染色体，则“番茄-马铃薯”细胞内含________条染色体；若杂种细胞培育成为“番茄-马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于________倍体植株。

（4）如果形成c的a、b原生质体都来自番茄细胞，那么更简单的得到番茄植株f的处理方法是。

（5）若杂种植株在有丝分裂在过程中，仅保留番茄的染色体而马铃薯的染色体会不断

丢失，采用特异性引物对番茄和马铃薯基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。图3是用该引物对双亲及4棵再生植株1～4进行PCR 扩增的结果。据图判断，再生植株1～4中一定是杂种植株的有（多选）。

（6）图2 Ⅰ过程培育植物体A主要应用了技术。

（7）用红果多室（Yymm）番茄植株的花粉进行Ⅱ、Ⅲ有关实验，则Ⅱ过程中，培育植物体B的方法（Ⅱ）称为__________________。植物体C的基因型有_________________。（细胞A为两两融合细胞，写出具体的基因型。）

（8）三种育种得到的植物体A、B、C中一定为纯合体的是。

【答案】（1）酶解高尔基体

（2）叶绿体

（3）m+n 单

（4）用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗

（5）1、2、4

（6）植物组织培养技术

（7）单倍体育种YYmm或Yymm或yymm

（8）植物体B

【解析】（1）实现过程②之前需用酶解法除去细胞壁；过程③为再生新的细胞壁，高尔基体与细胞壁的形成有关。

（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的叶绿体，可作为初步筛选杂种细胞的标志。

（3）植物体细胞杂交获得的杂种植株染色体数目是两种植物染色体数目之和，即m+n；配子发育成的植株一定是单倍体。

（4）若a、b原生质体都来自番茄细胞，得到的杂种植株实际上相当于番茄的染色体数目加倍的植株，因此另一种得到这样植株的方法是用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗。（5）根据图谱，番茄含有碱基对为300 和600 的DNA 片段，马铃薯还有碱基对为1000、1300 和1500 的片段，再生植株3，只含有长度为300 和600 的片段，与番茄一致，1、2、4 既含有马铃薯DNA 片段，又含有番茄DNA 片段，为杂种植株。

（6）图2 Ⅰ培育植物体采用了植物组织培养技术。

（7）II过程属于单倍体育种。由于红果多室（Yymm）番茄植株可产生Ym和ym两种花粉，则Ⅲ过程中植物体C的基因型YYmm或Yymm或yymm。

（8）三种育种得到的植物体A、B、C中一定为纯合体的是只有植物体B，因为植物体B是由单倍体经秋水仙素处理后，染色体数目加倍，基因也加倍。

24．转基因克隆猪已经在我国培育成功。研究组首先从猪胎儿皮肤中分离出纤维细胞，进行体外培育。通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞，经筛选后将基因纤维细胞进行体细胞克隆。接着，将重组胚胎移入代孕母猪体内，最终获得转基因克隆猪。请回答：

（1）在对纤维细胞进行培养时，需要在细胞培养液中添加一定量的，以防止培养过程的污染，此外，应定期更换，防止对细胞自身造成危害。

（2）筛选转基因细胞时，需要利用基因表达载体中的作用。

（3）在进行体细胞克隆前，先要从屠宰场收集猪卵巢，采集，并在体外培养成熟。然后将转基因纤维细胞注入到中，再经过一系列过程获得含有目的基因重组胚胎。

（4）为了，可以对处于阶段的胚胎进行均等分割。将重组胚胎移入到受体子宫中，由于受体子宫不会对外来胚胎发生，并能与之建立正常的生理和组织上的联系，因次，重组胚胎能在受体子宫中继续发育成转基因克隆猪。【答案】（1）抗生素培养液细胞代谢产物积累（2）标记基因（3）卵母细胞去核卵母细胞（4）提高重组胚胎的利用率桑椹胚或囊胚免疫排斥反应

【解析】

试题分析：（1）动物细胞培养时，为防止培养过程的污染，培养液中需要添加一定量的抗生素，还应定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。

（2）基因工程中构建基因表达载体时，其中要有标记基因，以利于筛选转基因细胞。（3）体细胞克隆是将体细胞核移植入去核的卵母细胞中，卵母细胞可从屠宰场收集猪的卵巢，并在体外培养成熟。将转基因纤维细胞注入到去核卵母细胞中，再经过一系列过程获得含有目的基因重组胚胎。

（4）为了提高重组胚胎的利用率，可以对处于桑椹胚或囊胚阶段的胚胎进行均等分割。将重组胚胎移入到受体子宫中之所以成功，原因之一是由于受体子宫不会对外来胚胎发生免疫排斥反应，并能与之建立正常的生理和组织上的联系，因次，重组胚胎能在受体

子宫中继续发育成转基因克隆猪。

考点：本题考查克隆、细胞工程、胚胎工程的知识。意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能用文字、图表以及数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容。能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力。

25．科研人员从云杉卷叶蛾越冬幼虫中分离出一种超强的抗冻活性基因sbwAFP，并导入番茄植株中，使番茄植株获得抗冻性，下图表示重组质粒的构建和筛选过程。请回答下列问题：（Amp F为氨苄青霉素抗性基因，Tet F为四环素抗性基因）

（1）对获得的sbwAFP基因通常用__________技术以扩增数量。分析图示，构建重组质粒时，应选择限制酶__________和______________切割目的基因和质粒。

（2）将重组质粒导入大肠杆菌前，应用_________处理大肠杆菌,以制备感受态细胞，为了筛选将重组质粒，可将大肠杆菌分别在含有四环素和氨苄青霉素的培养基中培养，成功导入重组质粒的大肠杆菌在两种培养基的生长状况为__________________________________。

（3）将成功导入了目的基因的番茄细胞培育成完整植株幼苗所采用的技术是_____________，从细胞的角度分析，所依据的生物学原理是_____________________。（4）如何从个体水平检测目的基因是否成功表达？__________________________。【答案】PCR(多聚酶链式反应）Bgl IICla I Ca2+在含氨苄青霉素的培养基上能正常生长,在含四环素的培养基上不能正常生长植物组织培养植物细胞的全能性将番茄植株置于冷冻的环境下，观察其是否能正常生长发育

【解析】

（1）扩增目的基因可以用PCR(多聚酶链式反应）技术。根据图示，选择限制酶BglII和ClaI可以在不破坏目的基因的前提下，将目的基因从供体DNA中切出，并使目的基因能插入四环素抗性基因中。

（2）制备感受态细胞，应用Ca2+处理大肠杆菌。重组质粒中，四环素抗性基因被破坏，青霉素抗性基因被保留，成功导入重组质粒的大肠杆菌在含有四环素的培养基上不能生长，在含有氨苄青霉素的培养基可以生长。

（3）成功导入了目的基因的番茄细胞可以通过组织培养技术培育成完整植株幼苗，所依据的生物学原理是植物细胞的全能性。

（4）从个体水平检测目的基因是否成功表达，可以将番茄植株置于冷冻的环境下，观察其是否能正常生长发育。