体内药物分析（1）
体内药物分析（1）
2.治疗药物监测：以药动学药效学为理论为基础，应用现代分析技术，测定体液中的药物浓度，研究药物浓度和与疗效和毒性之间的关系，为临床给药方案个体化提供科学依据。
8.质控样品QC：是指在空白生物介质中加入已知量待测物标准物质制成的样品，用于监测生物分析方法的重复性和评价每一分析批中未知样品分析结果的完整性和正确性。10.分析批：包括待测样品、适当数目的标准样品和QC样品的完整系列。
12.定量下限：是指符合准确度和精密度要求的生物样品中药物的最低定量浓度，其反映了方法的灵敏度。13:高效液相色谱法：是在经典液相色谱的基础上，以高压泵输送流动相，采用高效微粒型固定相及高灵敏度检测器，发展而成的现代分离分析技术。
14.等度洗脱：在同一分析周期内流动相组成比例保持恒定，适合于组分数目较少，性质差别不大的样品。15.梯度洗脱：是在一个分析周期内程序控制改变流动相的组成比例，适合于分析组分数目多，性质差别较大的复杂试样。
16.提取回收率：系指从生物样本基质中回收得到分析物质的响应值与标准物质的响应值之比，也称萃取回收率或绝对回收率。
18.非临床药代动力学：通过对动物体内、外和人体外研究方法，揭示药物在体内的动态变化规律，获得药物的基本药代动力学参数，阐明药物的吸收，分布，代谢和排泄的过程和特点。
19.临床药代动力学：阐明药物在人体内的吸收，分布，代谢和排泄的动态变化规律。
20.生物等效性：是指一种药物的不同制剂在相同的实验条件下，给以相同的剂量，其活性成分吸收速率和程度的差异无统计学意义。
21.群体药代动力学：通过定量考察群体患者中血药浓度和效应的决定因素，研究给予标准剂量药物时个体间血药浓度、药物效应的变异性。22.治疗窗：把最低有效浓度作为治疗浓度的下限，最小中毒浓度作为治疗的上限，这个范围称为治疗窗。23.室内质控：是指在实验
室内部针对某一监测药物，采用同一质控样品反复进行测定，对其误差作长期连续的评价和监督，以达到使分析结果在实验室内部保持最小偏差。
25.代谢组学：是关于定量描述生物生物内源性代谢物的整体及其对内因和外因变化应答规律的一门新科学，对限定条件下特定生物样品中所有代谢组分的定性和定量分析。26.代谢物靶标分析：对某个或某几个特定组分的分析
27代谢轮廓分析对某一代谢途径的所有中间产物或多条代谢途径的标志性组分的定量分析。
28.代谢指纹分析：不分离鉴定具体单一组份，不识别所有代谢物，而是对样品进行快速分类。
29.药物转运体：分布在生物体的许多器官上，参与药物吸收分布排泄过程的转运体。
1.简述体内药物分析的特点？干扰杂志多、被侧物浓度低、供试样品量少、待测物的异变性、要求较快提供结果、要有一定的仪器设备、工作量大。
2.为什么可以根据血浆中药物总浓度拟定给药方案？一般情况下，药物在有效血药浓度范围内的血浆蛋白结合率是比较恒定的，所以总浓度水平基本上可以反映游离药物浓度，，不会影响血药浓度和药理效应的相关性。
3.药物在体内通过生物转化可能产生哪些药理后果？药物往往会失去药理或毒理活性，但有些药物经代谢后活性反而增加，也有一些药物经代谢后有与原药不同的活性。
4.体内药物分析常用的分析方法有哪些？各有何特点？a色谱及其联用技术：高专属性、高灵敏度、可排除组份间的相互干扰、将组份逐个进行定性定量b.免疫分析法：较强的特异性、高的灵敏度、操作简便、快速c.光谱分析：操作简便快速、仪器经济、普及d.放射性核素标记法：灵敏简便定位准确e.生物学方法：结果较直观、但操作繁琐、精密度、特异性较差。
5.常用的生物样本有哪些？如何采集、制备、储存？血液、尿液、
唾液、毛发、胆汁、粪便、各种器官、组织等。采集制备见课本P21储存：冷冻贮存、加稳定剂、加防腐剂或改变生物样品PH值6生物样品测定前为什么要除去蛋白质？除去蛋白质的常用方法？
a.使结合性药物释放出来，便于测定药物总浓度。
b.为得到较"干净”的提取液，减少乳化的发生，使提取分离能够顺利的进行
c.消除对测定的干扰蛋白质沉淀法：生成不溶性盐沉淀、盐析和脱水组织的酶消化法
7.影响液固提取和液液提取效率的因素分别有哪些？液固提取：流速、样品装载量、固体住使用要求、样品上
柱前的处理液液提取：水相PH值、
提取溶剂、离子强度
9.衍生化方法在体内药物分析中有哪
些应用？一些药物或代谢物因极性
大，挥发性低、对热不稳定、或不具
紫外、荧光性能，会检测灵敏度低，
没有合适监测方法时，需要进行衍生
化处理。手性药物的拆分常采用手性
试剂衍生化法，是手性药物的两个对
映体转变成两个非对应体后采用常
规色谱法进行分析。
10.试述住切换HPLC原理和方法优
点？原理：固相萃取、被测物洗脱、
被测物分离分析、
11.评价体内药物分析方法的效能指
标包括哪些项目？如何求算？项目：
特异性、标准曲线和线性范围、定量
下限、精密度和准确度、样品的稳定
性、提取回收率提取回收率的计算：
R=A（被测物的色谱峰面积）/A（被
测物标准溶液的色谱峰面积）乘100%
12.试述体内药物分析方法建立的一
般步骤？
分析测试条件的选择、预处理方法的考察（空白样品试验、空白溶剂试验、模拟生物样品的试验）、实际生物样品的测定
13.说明回收率（包括提取回收率、
方法回收率）的定义、要求与测定方法？提取回收率：系指从生物样本基质中回收得到分析物质的响应值与
标准物质产生的响应值的百分比。14.如何考察体内药物分析方法的专
属性？在生物样品分析中，专属性的考察至少取6个不同个体空白样品，采用拟定的方法进行测定，所得结果与接近于定量限浓度的模拟样品和
用药后实际生物样品所得结果进行
比较，以证明内源性物质、相应的代谢物、降解产物及其他共服药物不干扰样品的测定。如果有几个分析物，应保证每一个分析物都不被干扰。15.说明定量下限的定义、测定方法
与要求？如何提高灵敏度？定义：系指符合准确度和精密度要求的生物
样品中药物的最低定量浓度，其反映了方法的灵敏度。提高灵敏度的方法：提高仪器本身的检测灵敏度、提高进样体积、提高样品的浓缩程度或
降低样品稀释度、改进与处理方法和色谱条件，消除干扰，降低空白值、选择合适的检测器
16.稳定性评价有何意义？应考察哪
些内容？意义：确定生物样品稳定的存放条件和时间，保证检测结果的准确性和重复性。考察内容：短期室温稳定性、长期贮存稳定性、冻融稳定性、储备液的稳定性、待测溶液的稳定性、样品处理过程中的稳定性17.HPLC中常用的检测器有哪些？
分别适用于哪些药物？紫外（适用于有紫外吸收的药物）、荧光（适用于能产生荧光或能生成荧光衍生物的
药物）、电化学（适用于具有氧化还原性药物）、蒸发光散射（适用于物资外吸收的药物）、化学发光监测器、质谱
20.UHPLC与HPLC相比，有哪些
优缺点？优点：高分辨率、高速度、高灵敏度
21.采用LC-MS/MS定量测定血浆
样品中药物浓度时，如何降低基质效应？
a.样品前处理：改进前处理方法、纯化样品、尽可能减少最终提取液中的基质成分
b.同位素内标
c.色谱分离
d.质谱分析
22.常用的HPLC手性衍生化试剂有
哪些？说明手性异硫氰酸酯衍生化
试剂的作用原理？荧胺、邻苯二醛、丹黄酰氯、异氰酸、阝—萘酯
23.手性流动相添加剂的种类有哪些？试述—环糊精流动相添加剂法分离手性药物的原理？
环糊精及其衍生物、配位基手性添加剂、手性离子对添加剂、蛋白质、大分子抗生素原理：环糊精分子空腔内部的疏水性可以与对映体分子的疏水性部分发生包合作用，而空腔边缘的羟基则可以与对映体分子中的极性基团发生氢键等相互作用，从而构成“三点相互作用”实现手性分离。
25.简述毛细管电泳法分离手性药物对映体的主要模式及其分离原理？模式：毛细管区带电泳法、毛细管胶束电动色谱分离原理：利用对映体与手性选择剂间的相互作用，通过引入新的手性中心，使对映体的迁移速度产生差异而实现分离。
26.简述GC手性固定相种类？氢键型手性固定相、包合型手性固定相、配位型手性固定相
27在进行TDM时，血药浓度的测定对象通常分为哪几类？药物总浓度、游离药物浓度、活性代谢物浓度、对映体浓度
1.在进行体内药物分析时，为什么要进行生物样品预处理？
a.使药物或代谢物游离，便于测定总
浓度b.使被测物纯化、浓集，提高检测灵敏度c.消除干扰，提高方法专属性d.防止对分析仪器的污染
2.在考察分析方法的特异性时，应着重考察哪些内容？
a.内源性物质的干扰
b.代谢产物的干
扰c.伍用药物的干扰
体内药物分析
学科介绍 基本概念 体内药物浓度，尤其是血浆（或血清）药物浓度直接与药效相关，并受多种因素影响。例如，不同给药途径（如口服、吸人、静脉注射、肌肉注射、透皮等）可直接影响药物的吸收、分布、代谢和排泄，从而影响体内药物的浓度以及经时行为，并最终影响疗效。患者的生理因素（性别、年龄等），病理状态（疾病的类型和程度），基因类型，吸收、代谢及分泌排泄功能，都影响药物在体内的经时行为。许多药物需经肝脏代谢或经肾脏排泄，所以对于肝或肾病患者，由于他们的肝脏生物转化及代谢功能降低、或肾脏的分泌排泄功能降低，往往会造成药物在体内蓄积，进而发生药物毒性反应。 随着现代医学的不断进步，人们对医疗质量也提出了更高的要求。治疗药物监测（Therapeutic Drug Monitoring，TDM）就是以灵敏可靠的方法，检测病人在给药后的血液或其他体液中的药物浓度，并应用药物代谢动力学理论，指导最适个体化用药方案的制定和调整，以避免用药剂量过大及可能产生的毒性反应，保证药物治疗的有效性和安全性。 学科特点 体内药物分析的特点是样品成分复杂，被测组分含量低。 学科关联 体内药物分析学科发展的最大推动力来自于生物医学及新药药物动力学研究领域巨大的要求和分析技术上的飞跃性进步。与药代动力学、临床药理学和生物药剂学等学科互相关联、密不可分。 分析方法 光谱分析法 包括比色法(colorimetry)、紫外分光光度法（UV ）和荧光分析法（Fluor ）。光谱法虽然仪器简单、测定快速，但选择性和灵敏度都较低，本法不具备分离功能，受结构相近的其他药物、代谢产物和内源性杂质的干扰，因此用光谱法分析体液样品时，除少数样品外，一般都需经过组分分离、纯化等预处理过程。光谱法的灵敏度低，不适用于测定药物浓度低的生物样品。 色谱分析法
体内药物分析
缀合物：缀合物类型：①葡萄糖醛酸苷：含-OH、-COOH、-NH2、–SH等功能团的成分可与葡萄糖醛酸形成葡萄糖醛酸苷缀合物②硫酸酯：芳胺、酚类及醇类成分可与硫酸形成硫酸酯缀合物 血浆蛋白结合率：反映了药物与血浆蛋白的亲和程度。一般指在治疗量时药物结合的百分率，作为药代动力学的重要参数之一，影响了药物在体内的分布、代谢、排泄，与药物的药理作用强度密切相关。 一相代谢：氧化、还原、水解反应。在药物结构中引入羟基、羧基、氨基等官能团，为二相代谢做准备 二相代谢：结合反应。具有羟基、羧基、氨基等官能团的药物与糖、硫酸盐、氨基酸等结合，极性增大，利于排 肝内代谢反应类型：以氧化为主，其次为还原、水解结合肠内菌的生物转化：利用肠内菌微生物中特定酶将中药成分(或天然化合物)进行生物转化，属单酶或双酶的高密度转化。具有高度选择性(尤其是立体选择性)和反应条件温和的特点。以水解反应为主，其次为氧化还原反应。 ·蛋白质的去除：沉淀法（有机溶剂沉淀法、盐析法、酸性试剂沉淀法、加热沉淀法）；酶消化法；超滤法、透析法、微孔滤膜过滤法。 ·影响液相提取的因素：提取溶剂；水相PH值（根据待测成分PKa；为保证提取率的重现性，常使用缓冲溶液）；离子强度（越大提取率越高） ·影响固相提取的因素：合适的洗涤剂和洗脱剂；流速（不宜过快）；上样量（样品突破性实验可判断上样量是否超载）·固相提取的操作步骤：固相柱选择、处理→样品上样→分离纯化→洗脱待测成分→浓缩处理或直接进样分析 ·检测限和定量限LOD&LOQ的确定和要求：LOQ【能从背景信号中区分出药物时所需样品中药物的最低浓度】可于空白生物基质加入定量的药物标准品混匀，配制成药浓在标准曲线末端并逐渐降低的一组药品，然后对每种浓度测定3~5次，以测定结果的精密度达到≤20％和准确度达到≤+20％时的样品中药物的最低浓度。LOD【保证具有一定可靠性前提下，分析方法能测定出样品中药物最低浓度】-测定时记录各浓度样品每次测定得到的药物信号强度S与噪音/背景信号强度N，然后取均值S、N，以能达到S/N=3时样品药浓为LOD。 ·提取回收率的操作与要求：往空白生物基质或含药物的样品中加入的药物标准品已知量A，实际上是准确加入已知浓度的药物标准品溶液一定体积，使两种考核样品内含总药浓应包括高、中、低三种（浓度接近最高、平均、最低药浓）。每个浓度应测定多次（3~5），并且几次测定值M 的相对标准差应符合“内标法中内标物回收率与待测物不相差10％”的要求，然后取均值M ·透析法影响因素：透析膜对药物的吸附；donnan效应；缓冲液体积变化。 1.分析常用生物样品的种类和特点 a.血样①常用于药代动力学、生物利用度、血药浓度检测②包括全血、血浆和血清，其中血浆和血清常用③全血加抗凝剂，离心后分取上清液得到血浆④全血在纤维蛋白原等作用下引起血块凝结析出，离心后取上清液得到血清⑤常用抗凝剂有肝素、钙结合剂EDTA、枸缘酸钠、草酸钾、氟化钠等。常用肝素⑥制备血清时血块凝结，易造成成分吸附损失⑦抗凝剂的选择可影响测定结果 b.尿液①常用于成分代谢研究②尿液样品量大，待测成分浓度高、变化较大、与血液的成分浓度相关性不强⑤短时间内不可能多次取样，不易采集完全 c.唾液①可用于药代动力学和药物浓度监测②唾液中成分浓度通常与血浆浓度相关。一般低于血浆浓度且变化较大，但二者存在恒定的比例关系③采集不受地点、时间限制，易获得④许多用于血浆测定的方法稍加改进即可用于唾液测定⑥组成受各种因素影响较大，且个体差异较大 d.脏器①用于研究成分在各器官、组织的分布、积蓄或代谢情况②脏器组织可与成分形成强烈结合③在分离分析前，需预先制成1:5或1:10的匀浆，以提高溶剂抽提率，降低组织空白值，避免乳化 2.体内分析常用生物样品的采集和贮存方法； ①采集：必须有代表性，应力求取样条件标准化，包括摄取标准膳食，控制饮水量等。 ②保存：①血浆、血清：尽快从全血中分离，一般不超过24小时，冷冻贮存②尿液：采样后立即加入防腐剂(甲苯、氯仿)室温保存或冷冻贮存③脏器组织：-20℃冷冻 3.生物样品的常用保存方法： A.冷冻贮存①短时间内分析的样品，4℃冷藏②放置数日或更长时间的样品-20℃③冷冻样品测定时，须临用前解冻，并在解冻后一次性测定完毕，不宜反复冷冻解冻，否则会导致成分含量下降； B.加稳定剂①加入酶活性阻断剂：氟化钠(常用，可抑制血清酯酶，并抗凝防腐)四氢尿苷、三氯酸钠②加抗氧剂VC； C.加防腐剂：尿液中加甲苯(每100ml 尿液加1ml充分振荡混匀或加在尿液表面形成薄层)、氯仿(加少许摇匀使其饱和，瓶底留少量氯仿)等； D.调pH值：加无机酸或碳酸钠改变尿液酸碱度，可抑制细菌生长 5.体内分析方法设计思路和建立步骤、评价指标和方法。研究思路：①样品：中药水煎剂②实验动物：犬猪③给药途径：口服④含药血清：不同时间点含药血清（时效曲线）血清药理学研究（药效机理）⑤相关分析：体内直接物质接触，原型成分，代谢产物 药物分析方法评价指标：准确度、精密度、检测限和定量限、专属性、药物稳定性、标准曲线、重复性、耐用性、样品测定(QC样品) 1.准确度：A.回收率⑴提取(萃取/绝对)回收率测定方法①对比法②标准曲线法；⑵相对回收率：回收试验法、加样回收试验法。 2.精密度：(测定结果与平均值的偏离程度)将分析后剩余样品混合成含药浓高中低三种，测定时对每种重复测定3-5次，并且每次应从取样开始至测定完成后得到的结果。将得到的测定值分别算出高中低三种药浓样品测定结果标准差和相对标准差RSD。 3.灵敏度：【LOD+LOQ】；光谱分析和免疫分析可测定4-5份空白生物样品的信号强度（光吸收度，荧光强度或放射性强度）以均值作为N，色谱分析可用空白样品按样品分析方法制备的溶液进样，记录空白色谱图。取相当于药物峰宽W20倍的一段基线，且范围应相当于药物峰最后一段，实际测定时刻增加记录仪灵敏度，放大此段基线，然后以偏离基线平均噪音水平最大峰高的一半作噪音值，且应重复几次，用得到的均值N计算信/噪比S/N 4.专属性 5.线性与范围：标准浓度应包括一定梯度的5-8个浓度(等比关系，非线性者如免疫分析可适当增加)，每个浓度只需测定一次(免疫分析可测定两次并取平均)。一般浓度上限为样品最高浓度的120%，下限为样品最低浓度的80%但高于LOQ。在舍弃点时，应从两段舍，保证r合格(r＞0.99，制剂分析HPLC：r＞0.999) ·专属性specificity的操作与要求：1.生物基质的影响【要
体内药物分析方法(精选)
体内药物分析方法(精选) 体内药物分析方法(精选) 随着现代医学的发展，药物在疾病治疗中起到了至关重要的作用。对于新药物的研发、药物代谢的了解以及用药的个体化，需要使用合适的体内药物分析方法。本文将介绍几种常用的体内药物分析方法。 一、液相色谱-质谱联用法（LC-MS） 液相色谱-质谱联用法（LC-MS）是一种将液相色谱（LC）和质谱技术（MS）结合起来的分析方法。它通过将待测样品进行分离，利用质谱技术对分离后的成分进行快速、准确的鉴定和定量。LC-MS在药物代谢动力学研究、药物相互作用分析、药物残留检测、药物中间体的筛选等方面具有广泛的应用。 二、气相色谱-质谱联用法（GC-MS） 气相色谱-质谱联用法（GC-MS）是一种将气相色谱（GC）和质谱技术（MS）结合起来的分析方法。它通过将待测样品在高温条件下蒸发，然后在气相色谱柱上进行分离，最终通过质谱技术对分离后的物质进行鉴定和定量。GC-MS在药物代谢研究、毒物学研究、药物滥用检测以及环境污染物分析等方面具有重要的应用价值。 三、原子吸收光谱法（AAS） 原子吸收光谱法（AAS）是一种通过测量原子在特定波长的光束中吸收光的强度来定量分析样品中金属元素的方法。AAS广泛用于测定
药物中的微量金属元素。例如，铁、锰、铜、锌等微量金属元素在生物体内被广泛应用。AAS具有灵敏度高、准确性好等优点，成为体内药物分析中的重要技术手段。 四、高效液相色谱法（HPLC） 高效液相色谱法（HPLC）是一种将液相色谱技术与高压技术结合起来的分析方法。它通过将待测样品在高压下通过色谱柱进行分离，然后通过检测器对分离后的组分进行定性和定量。HPLC广泛应用于药物代谢、药物溶出度的测定、药物杂质的分析等方面。 五、电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS） 电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）是一种将电感耦合等离子体技术与质谱技术结合起来的分析方法。它利用高温等离子体对待测样品中的元素进行电离和激发，然后通过质谱技术进行分析。ICP-MS在测定药物中的金属杂质、药物在体内的代谢等方面具有广泛的应用。 通过以上几种常用的体内药物分析方法，医学研究人员可以更加全面地了解药物在体内的代谢过程、药物的副作用、个体差异等方面的信息。这不仅有助于新药的研发，也有助于制定更加安全有效的用药策略。 总结起来，液相色谱-质谱联用法、气相色谱-质谱联用法、原子吸收光谱法、高效液相色谱法以及电感耦合等离子体质谱法等体内药物分析方法已经成为现代医学研究中不可或缺的工具。在未来，随着科
体内药物分析(1)
2.治疗药物监测：以药动学药效学为理论为基础，应用现代分析技术，测定体液中的药物浓度，研究药物浓度和与疗效和毒性之间的关系，为临床给药方案个体化提供科学依据。 8.质控样品QC：是指在空白生物介质中加入已知量待测物标准物质制成的样品，用于监测生物分析方法的重复性和评价每一分析批中未知样品分析结果的完整性和正确性。10.分析批：包括待测样品、适当数目的标准样品和QC样品的完整系列。 12.定量下限：是指符合准确度和精密度要求的生物样品中药物的最低定量浓度，其反映了方法的灵敏度。13:高效液相色谱法：是在经典液相色谱的基础上，以高压泵输送流动相，采用高效微粒型固定相及高灵敏度检测器，发展而成的现代分离分析技术。 14.等度洗脱：在同一分析周期内流动相组成比例保持恒定，适合于组分数目较少，性质差别不大的样品。15.梯度洗脱：是在一个分析周期内程序控制改变流动相的组成比例，适合于分析组分数目多，性质差别较大的复杂试样。 16.提取回收率：系指从生物样本基质中回收得到分析物质的响应值与标准物质的响应值之比，也称萃取回收率或绝对回收率。 18.非临床药代动力学：通过对动物体内、外和人体外研究方法，揭示药物在体内的动态变化规律，获得药物的基本药代动力学参数，阐明药物的吸收，分布，代谢和排泄的过程和特点。 19.临床药代动力学：阐明药物在人体内的吸收，分布，代谢和排泄的动态变化规律。 20.生物等效性：是指一种药物的不同制剂在相同的实验条件下，给以相同的剂量，其活性成分吸收速率和程度的差异无统计学意义。 21.群体药代动力学：通过定量考察群体患者中血药浓度和效应的决定因素，研究给予标准剂量药物时个体间血药浓度、药物效应的变异性。22.治疗窗：把最低有效浓度作为治疗浓度的下限，最小中毒浓度作为治疗的上限，这个范围称为治疗窗。23.室内质控：是指在实验室内部针对某一监测药物，采用同一质控样品反复进行测定，对其误差作长期连续的评价和监督，以达到使分析结果在实验室内部保持最小偏差。 25.代谢组学：是关于定量描述生物生物内源性代谢物的整体及其对内因和外因变化应答规律的一门新科学，对限定条件下特定生物样品中所有代谢组分的定性和定量分析。26.代谢物靶标分析：对某个或某几个特定组分的分析 27代谢轮廓分析对某一代谢途径的所有中间产物或多条代谢途径的标志性组分的定量分析。 28.代谢指纹分析：不分离鉴定具体单一组份，不识别所有代谢物，而是对样品进行快速分类。 29.药物转运体：分布在生物体的许多器官上，参与药物吸收分布排泄过程的转运体。 1.简述体内药物分析的特点？干扰杂志多、被侧物浓度低、供试样品量少、待测物的异变性、要求较快提供结果、要有一定的仪器设备、工作量大。 2.为什么可以根据血浆中药物总浓度拟定给药方案？一般情况下，药物在有效血药浓度范围内的血浆蛋白结合率是比较恒定的，所以总浓度水平基本上可以反映游离药物浓度，，不会影响血药浓度和药理效应的相关性。 3.药物在体内通过生物转化可能产生哪些药理后果？药物往往会失去药理或毒理活性，但有些药物经代谢后活性反而增加，也有一些药物经代谢后有与原药不同的活性。 4.体内药物分析常用的分析方法有哪些？各有何特点？a色谱及其联用技术：高专属性、高灵敏度、可排除组份间的相互干扰、将组份逐个进行定性定量b.免疫分析法：较强的特异性、高的灵敏度、操作简便、快速c.光谱分析：操作简便快速、仪器经济、普及d.放射性核素标记法：灵敏简便定位准确e.生物学方法：结果较直观、但操作繁琐、精密度、特异性较差。 5.常用的生物样本有哪些？如何采集、制备、储存？血液、尿液、唾液、毛发、胆汁、粪便、各种器官、组织等。采集制备见课本P21储存：冷冻贮存、加稳定剂、加防腐剂或改变生物样品PH值 6生物样品测定前为什么要除去蛋白质？除去蛋白质的常用方法？ a.使结合性药物释放出来，便于测定药物总浓度。 b.为得到较"干净”的提取液，减少乳化的发生，使提取分离能够顺利的进行 c.消除对测定的干扰蛋白质沉淀法：生成不溶性盐沉淀、盐析和脱水组织的酶消化法 7.影响液固提取和液液提取效率的因素分别有哪些？液固提取：流速、样品装载量、固体住使用要求、样品上 柱前的处理液液提取：水相PH值、 提取溶剂、离子强度 9.衍生化方法在体内药物分析中有哪 些应用？一些药物或代谢物因极性 大，挥发性低、对热不稳定、或不具 紫外、荧光性能，会检测灵敏度低， 没有合适监测方法时，需要进行衍生 化处理。手性药物的拆分常采用手性 试剂衍生化法，是手性药物的两个对 映体转变成两个非对应体后采用常 规色谱法进行分析。 10.试述住切换HPLC原理和方法优 点？原理：固相萃取、被测物洗脱、 被测物分离分析、 11.评价体内药物分析方法的效能指 标包括哪些项目？如何求算？项目： 特异性、标准曲线和线性范围、定量 下限、精密度和准确度、样品的稳定 性、提取回收率提取回收率的计算： R=A（被测物的色谱峰面积）/A（被 测物标准溶液的色谱峰面积）乘 100% 12.试述体内药物分析方法建立的一 般步骤？ 分析测试条件的选择、预处理方法的 考察（空白样品试验、空白溶剂试验、 模拟生物样品的试验）、实际生物样 品的测定 13.说明回收率（包括提取回收率、 方法回收率）的定义、要求与测定方 法？提取回收率：系指从生物样本基 质中回收得到分析物质的响应值与 标准物质产生的响应值的百分比。 14.如何考察体内药物分析方法的专 属性？在生物样品分析中，专属性的 考察至少取6个不同个体空白样品， 采用拟定的方法进行测定，所得结果 与接近于定量限浓度的模拟样品和 用药后实际生物样品所得结果进行 比较，以证明内源性物质、相应的代 谢物、降解产物及其他共服药物不干 扰样品的测定。如果有几个分析物， 应保证每一个分析物都不被干扰。 15.说明定量下限的定义、测定方法 与要求？如何提高灵敏度？定义：系 指符合准确度和精密度要求的生物 样品中药物的最低定量浓度，其反映 了方法的灵敏度。提高灵敏度的方 法：提高仪器本身的检测灵敏度、提 高进样体积、提高样品的浓缩程度或 降低样品稀释度、改进与处理方法和 色谱条件，消除干扰，降低空白值、 选择合适的检测器 16.稳定性评价有何意义？应考察哪 些内容？意义：确定生物样品稳定的 存放条件和时间，保证检测结果的准 确性和重复性。考察内容：短期室温 稳定性、长期贮存稳定性、冻融稳定 性、储备液的稳定性、待测溶液的稳 定性、样品处理过程中的稳定性 17.HPLC中常用的检测器有哪些？ 分别适用于哪些药物？紫外（适用于 有紫外吸收的药物）、荧光（适用于 能产生荧光或能生成荧光衍生物的 药物）、电化学（适用于具有氧化还 原性药物）、蒸发光散射（适用于物 资外吸收的药物）、化学发光监测器、 质谱 20.UHPLC与HPLC相比，有哪些 优缺点？优点：高分辨率、高速度、 高灵敏度 21.采用LC-MS/MS定量测定血浆 样品中药物浓度时，如何降低基质效 应？ a.样品前处理：改进前处理方法、纯 化样品、尽可能减少最终提取液中的 基质成分b.同位素内标c.色谱分离 d.质谱分析 22.常用的HPLC手性衍生化试剂有 哪些？说明手性异硫氰酸酯衍生化 试剂的作用原理？荧胺、邻苯二醛、 丹黄酰氯、异氰酸、阝—萘酯 23.手性流动相添加剂的种类有哪 些？试述—环糊精流动相添加剂法 分离手性药物的原理？ 环糊精及其衍生物、配位基手性添加 剂、手性离子对添加剂、蛋白质、大 分子抗生素原理：环糊精分子空腔内 部的疏水性可以与对映体分子的疏 水性部分发生包合作用，而空腔边缘 的羟基则可以与对映体分子中的极 性基团发生氢键等相互作用，从而构 成“三点相互作用”实现手性分离。 25.简述毛细管电泳法分离手性药物 对映体的主要模式及其分离原理？ 模式：毛细管区带电泳法、毛细管胶 束电动色谱分离原理：利用对映体与 手性选择剂间的相互作用，通过引入 新的手性中心，使对映体的迁移速度 产生差异而实现分离。 26.简述GC手性固定相种类？氢键 型手性固定相、包合型手性固定相、 配位型手性固定相 27在进行TDM时，血药浓度的测定 对象通常分为哪几类？药物总浓度、 游离药物浓度、活性代谢物浓度、对 映体浓度 1.在进行体内药物分析时，为什么要 进行生物样品预处理？ a.使药物或代谢物游离，便于测定总 浓度b.使被测物纯化、浓集，提高检 测灵敏度c.消除干扰，提高方法专属 性d.防止对分析仪器的污染 2.在考察分析方法的特异性时，应着 重考察哪些内容？ a.内源性物质的干扰 b.代谢产物的干 扰c.伍用药物的干扰
体内药物分析
治疗药物监测（TDM）是通过测定血液或其他体液中的药物浓度，在临床药代动力学原理的指导下，使临床给药方案个体化，以提高疗效、避免或减少毒副反应 应用:1）药物有效血药浓度范围狭窄——代表药物地高辛、奎尼丁等2）药物剂量小、毒性大——代表性药物有利多卡因、地高辛等3）药物体内过程个体差异大，具有非线性药代动力学特性——代表性药物有苯妥英钠、茶碱、水杨酸等4）处于某些病理状况（如胃肠道、肝脏、肾脏疾病），应用上述药物治疗时5）合并用药有相互作用而影响疗效或有中毒危险时6）某些药物的毒副作用表现与某些疾病本身的症状相似，不能明确辩别时——代表性药物如地高辛、速尿等7）长期用药的患者，依从性差；或产生耐药性；或诱导和抑制肝药酶的活性；以及原因不明的药效变化时8）常规剂量下出现严重毒性反应时；诊断和处理药物过量中毒；为药物引起的医疗事故提供法律依据时 药物非临床药代动力学研究受试动物 1首选动物：尽可能与药效学和毒理学研究一致。 2尽量在清醒状态下实验，动力学研究最好从同一动物多次采样。 3创新药应选用两种或两种以上的动物，其中一种为啮齿类动物；另一种为非啮齿类动物。其他类型的药物，可选用一种动物（建议首选非啮齿类动物，如犬或猴等）。 4口服用药不宜选用兔等食草类动物。 5受试动物数：以药时曲线的每个时间点有不少于5个数据为限计算所需动物数。最好从同一动物多次取样，尽量避免用多只动物合并样本。多只动物合并样本应相应增加动物数，以减少个体差异对试验结果的影响。建议受试动物采用雌雄各半，如发现药动学存在明显的性别差异，应增加动物数以便了解药物在雌雄动物体内的药动学的差异情况。对于单一性别用药，可选择与临床用药一致的性别。 药代动力学研究采样点的确定 1采样点的确定：采样点的确定对药代动力学研究结果有重大影响，若采样点过少或选择不当，得到的血药浓度-时间曲线可能与药物在体内的真实情况产生较大差异，由此计算的药代动力学参数也就失去了意义。 2给药前采血作为空白样品。给药后的一个完整的血药浓度-时间曲线，应包括药物的吸收相、平衡相和消除相，采样点的设计应兼顾到这三个时相。一般在吸收分布相至少需要2个采样点，平衡相至少需要3个采样点，消除相至少需要6个点。整个采样时间至少应持续到3~5个半衰期，或持续到血药浓度为Cmax的1/10~1/20。AUC0-t/AUC0-∞通常应当大于80%。为保证最佳采样点，建议在正式试验前，选择2~3只动物进行预试验，然后根据预试验的结果，审核并修正原设计的采样点。 测定血药浓度为何常选择血浆和血清，而少用全血？ 1.血清与血浆的化学成分与组织液相近，并且内含药物直接与组织液接触并达到平衡，血浆和血清中药物浓度与药物作用部位浓度紧密相关，与药物的临床作用有较好的对应关系。 2.全血含有血细胞，血细胞中的药物暂时作为“贮库”，失去药理作用，且药物在血细胞内与血浆中的浓度比易受各种因素的影响而变化，因此全血不能作为作用部位药物浓度的可靠指标。 3.血细胞膜及红细胞中的血红蛋白会妨碍药物浓度的测定 生物样品预处理的目的 1使药物从缀合物及结合物中释放出来，以测定药物总浓度。 2生物样品介质复杂，干扰多，预处理可纯化、富集被测组分。 3适应和符合测定方法所要求的灵敏度。 4防止分析仪器的污染、劣化，提高测定灵敏度、准确度、精密度和选择性。 去除蛋白的必要性： 1使结合型药物释放以便测定总浓度。 2预防提取过程中蛋白质发泡，减少乳化形成，使提取比较顺利。 3避免与加入的试剂反应，干扰分析。 4防止污染仪器，恶化测定条件。 去除蛋白质的方法 1加入与水相混溶的有机溶剂 原理：破坏分子内、分子间氢键。
体内药物分析（1）
体内药物分析（1） 2.治疗药物监测：以药动学药效学为理论为基础，应用现代分析技术，测定体液中的药物浓度，研究药物浓度和与疗效和毒性之间的关系，为临床给药方案个体化提供科学依据。 8.质控样品QC：是指在空白生物介质中加入已知量待测物标准物质制成的样品，用于监测生物分析方法的重复性和评价每一分析批中未知样品分析结果的完整性和正确性。10.分析批：包括待测样品、适当数目的标准样品和QC样品的完整系列。 12.定量下限：是指符合准确度和精密度要求的生物样品中药物的最低定量浓度，其反映了方法的灵敏度。13:高效液相色谱法：是在经典液相色谱的基础上，以高压泵输送流动相，采用高效微粒型固定相及高灵敏度检测器，发展而成的现代分离分析技术。 14.等度洗脱：在同一分析周期内流动相组成比例保持恒定，适合于组分数目较少，性质差别不大的样品。15.梯度洗脱：是在一个分析周期内程序控制改变流动相的组成比例，适合于分析组分数目多，性质差别较大的复杂试样。 16.提取回收率：系指从生物样本基质中回收得到分析物质的响应值与标准物质的响应值之比，也称萃取回收率或绝对回收率。 18.非临床药代动力学：通过对动物体内、外和人体外研究方法，揭示药物在体内的动态变化规律，获得药物的基本药代动力学参数，阐明药物的吸收，分布，代谢和排泄的过程和特点。 19.临床药代动力学：阐明药物在人体内的吸收，分布，代谢和排泄的动态变化规律。 20.生物等效性：是指一种药物的不同制剂在相同的实验条件下，给以相同的剂量，其活性成分吸收速率和程度的差异无统计学意义。 21.群体药代动力学：通过定量考察群体患者中血药浓度和效应的决定因素，研究给予标准剂量药物时个体间血药浓度、药物效应的变异性。22.治疗窗：把最低有效浓度作为治疗浓度的下限，最小中毒浓度作为治疗的上限，这个范围称为治疗窗。23.室内质控：是指在实验
体内药物分析实验
体内药物分析实验 体内药物分析实验是一项非常重要的技术，它可以帮助研究人员了解药物在动物或人体内的代谢动力学和药物毒性，这对于药物的研发和使用都有非常重要的意义。在本文中，我们将对体内药物分析实验进行详细的介绍，包括实验的原理、方法和应用等方面。 一、实验原理 体内药物分析实验的原理是通过对药物在动物或人体内的代谢动力学和药物毒性进行分析，了解药物在体内的作用机制和性质。通常，实验分析的对象是药物在动物或人体中的含量、代谢产物及毒性反应等，这些分析结果可以帮助研究人员判断药物是否安全和有效，从而指导其研发和使用。 二、实验方法 体内药物分析实验是一个复杂的过程，需要涉及各种实验方法，下面我们将对这些方法进行介绍： 1. 动物模型的制备 在体内药物分析实验中，研究人员首先需要选择一个适当的动物模型，并对其进行制备。动物模型可以是小鼠、大鼠、猪、狗甚至人类等，不同的模型在药物代谢和毒性方面具有不同的特点，因此需要选择合适的模型来进行研究。同时，为了
保证实验结果的可靠性，研究人员还需要对动物进行控制，包括饲养、喂食、运动、病理等方面的控制。 2. 药物给药 药物给药是体内药物分析实验的关键步骤，研究人员需要确定合适的剂量和给药方式。给药方式通常有静脉注射、腹腔注射、口服、皮下注射等。药物的剂量需要根据动物体重和药物的药动学特性来确定。 3. 体内药物分析 在药物给药后，研究人员需要采集动物的生物样本，如血液、尿液、粪便等，对其中的药物代谢产物等指标进行分析。分析方法可以是生化分析、药物浓度测定、毒性指标检测等。 4. 数据处理和统计分析 实验结束后，研究人员需要对采集的数据进行处理和统计分析，包括平均值、标准差、方差等的计算和统计推断。 三、实验应用 体内药物分析实验的应用非常广泛，主要包括以下方面： 1. 药物代谢动力学研究 通过体内药物分析实验，研究人员可以了解药物在动物或人体内的代谢过程和代谢产物，从而对其药物动力学特性进行研究和评价。 2. 药物相互作用研究
体内药物分析对分分析方法的特殊要求(精选)
体内药物分析对分分析方法的特殊要求(精选)体内药物分析对分析方法的特殊要求 在药物研发和治疗过程中，体内药物分析是一个关键的环节。它对 于了解药物在体内的代谢、药效、安全性等方面具有重要作用。而为 了准确地对体内药物进行分析，分析方法需要满足一些特殊的要求。 一、高灵敏度 体内药物分析需要用非常低的浓度范围来检测药物的存在。一些药 物在体内的浓度非常低，可能在纳摩尔或皮摩尔级别。因此，分析方 法需要具备足够的灵敏度，能够准确地检测到这些低浓度的药物。 为了提高灵敏度，常用的方法包括使用高灵敏度的仪器设备，如质 谱仪；选择适当的样品前处理方法，如固相萃取或液液萃取；以及优 化分析方法的条件，如选择适当的色谱柱和柱温等。 二、高选择性 在体内，药物会与其他物质发生相互作用，如蛋白质、细胞组分等。因此，分析方法需要具备足够的选择性，能够准确地测定目标药物， 排除其他干扰物质的影响。 为了提高选择性，可以使用选择性较好的分析技术，如高效液相色 谱（HPLC）和气相色谱（GC）等；选择适当的检测器，如质谱检测 器等；以及优化分析方法的条件，如调整流速、温度等。 三、动态范围广
体内药物的浓度变化范围较大，从非常低的浓度到非常高的浓度。 因此，分析方法需要具备宽广的动态范围，能够准确地测定不同浓度 范围内的药物。 为了扩大动态范围，可以采用标准曲线外推法或内标法进行测定； 选择合适的浓度范围进行样品稀释或浓缩；以及优化分析方法的条件，如调整进样量、流速等。 四、快速高效 体内药物分析往往需要在一定的时间内完成，以便及时获取药物的 信息。因此，分析方法需要具备快速高效的特点，能够在短时间内完 成分析。 为了提高分析速度，可以选择快速分析技术，如超高效液相色谱（UHPLC）和快速质谱等；优化分析方法的条件，如减少柱温、流速等；以及优化样品前处理方法，如简化样品提取和净化过程等。 五、稳定性和重现性 体内药物分析通常需要进行多次测定，以获取可靠的结果。因此， 分析方法需要具备良好的稳定性和重现性，能够准确地重复分析。 为了提高稳定性和重现性，可以使用稳定的色谱柱和检测器；进行 严格的方法验证和验证；以及控制实验条件的一致性，如温度、湿度等。 六、样品量少
体内药物分析方法
体内药物分析方法 药物在体内的分析是药物研究和开发的重要环节之一，它可以帮助 我们了解药物在体内的代谢过程、药物的药效和副作用等关键信息。 随着科学技术的不断发展，体内药物分析方法也得到了极大的改进和 创新。本文将介绍一些常用的体内药物分析方法及其原理和应用。 一、药物浓度测定法 药物的浓度测定是体内药物分析的基础任务之一。常见的药物浓度 测定方法包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）和质谱 法（MS）等。 HPLC是一种常用的分离和定量分析方法，通过在固定填料中进行 分离和定量来测定药物的浓度。它具有高效、灵敏、选择性好的特点，可以同时测定多种药物。对于体内药物分析，HPLC常常与质谱联用，以提高分析的选择性和灵敏度。 GC同样是一种常用的药物分析方法，它主要适用于描记性质较稳 定的挥发性药物。通过药物在气相或液态载气中的分离，配合检测器 对药物进行浓度测定。 质谱法是一种通过药物分子的质量和药物与其他粒子之间的相互作 用进行测定的方法。质谱法可以提供药物的结构信息，对于体内药物 代谢、分布、排泄等过程的研究具有重要意义。 二、药物代谢途径研究方法
药物代谢途径的研究对于了解药物的作用机制和副作用具有重要意义。常见的药物代谢途径研究方法包括酶促反应研究和体外药物代谢研究。 酶促反应研究是通过检测特定的酶在体内对药物的催化作用来研究药物的代谢途径。常见的酶促反应研究方法包括体外酶底物法、体外酶抑制法和体外酶诱导法等。通过这些方法，我们可以了解药物在体内是否发生代谢反应以及主要由哪些酶催化代谢。 体外药物代谢研究主要是通过体外细胞模型或克隆的酶系统，模拟体内药物代谢途径，以评估药物代谢的过程。体外药物代谢研究可以提供体外代谢信息来指导药物的设计和临床试验。 三、药物药效研究方法 药物的药效是药物疗效的关键指标，药效研究对于合理使用药物、改进药物疗效具有重要意义。常见的药物药效研究方法包括体外药效模型和动物模型。 体外药效模型通过搭建体外生物模型来研究药物的药效。常见的体外药效模型包括体外细胞模型和人体器官模型等。体外药效模型具有操作简便、数据获取快速的优势，可以用于药物筛选和药物安全性评估。 动物模型是研究药物药效最常见的方法之一，通过在动物体内观察药物的药效来评估药物的疗效。动物模型具有较高的可靠性和实验可行性，是药物研发过程中必不可少的一环。
体内药物分析的名词解释
体内药物分析的名词解释 体内药物分析，又称药物代谢动力学研究，指的是通过对药物在人体内代谢过 程的深入分析，以了解药物相互作用、代谢途径、药物动力学参数等相关信息的一种研究方法。在药物研发和药物治疗个体化方面起到重要作用。本文将为大家解释体内药物分析涉及的一些名词。 首先，我们要了解药物代谢动力学这个概念。药物代谢动力学是指药物在体内 的代谢速率与药物浓度之间的关系。主要包括吸收、分布、代谢和排泄这四个过程。药物的代谢主要发生在肝脏，也可以在肾脏、肺脏和其他组织中进行。药物的代谢是通过一系列酶催化的化学反应完成的，其中最重要的酶是细胞色素P450。 细胞色素P450是药物代谢中的重要酶家族。它在肝脏以及其他组织中广泛存在，能够催化许多药物的代谢反应。细胞色素P450通过氧化还原反应对药物进行 代谢，将其转化为更易于排泄的代谢产物。这些代谢产物可以是活性代谢物，也可以是无活性的代谢产物。药物的代谢速率可以受到许多因素的影响，如个体差异、环境因素和其他药物的相互作用等。 药物代谢酶是药物代谢过程中的另一个重要概念。除了细胞色素P450，还有 一些其他的药物代谢酶，如酯酶、醛脱氢酶和乙酰化酶等。药物代谢酶在药物分子结构中特异性地催化特定的代谢反应。由于不同个体的遗传差异，药物代谢酶的活性也会有所不同，这导致了个体对药物代谢的差异。临床上，通过测定药物代谢酶的活性，可以预测药物的代谢速率和个体对药物的反应。 清除率是一个重要的药物代谢动力学参数，它表示药物在单位时间内从体内清 除的量。清除率可以通过药物在体内浓度与给药剂量之间的关系计算得出。药物的清除率受到其他因素的影响，如肝血流量、肝脏血流量、肝脏功能等。肾脏也是药物排泄的重要器官，药物在体内的代谢速率和肾脏功能密切相关。
体内药物分析教案
体内药物分析教案 标题：体内药物分析教案 目标学生群体：高中生 学科领域：化学 学习目标： 1. 了解体内药物分析的基本概念； 2. 掌握体内药物分析的常用方法和技术； 3. 理解体内药物分析在药物研发和临床使用中的重要性； 4. 能够设计和实施基本的体内药物分析实验。 课时安排： 本教案拟安排为2课时（每课时45分钟）。 教学内容： 第一课时： 1. 引入（5分钟）： - 利用案例或实际问题引发学生对体内药物分析的兴趣； - 提问：为什么在药物研发和临床使用中需要进行体内药物分析？ 2. 概念讲解（15分钟）：
- 解释体内药物分析的定义和基本概念； - 介绍常见的体内药物分析方法，如高效液相色谱（HPLC）、气相色谱（GC）等。 3. 方法与技术（20分钟）： - 分别介绍HPLC和GC的原理和基本步骤； - 对比HPLC和GC的优缺点； - 引导学生分析何种情况下选择哪种方法。 4. 药物研发与临床应用（10分钟）： - 讲解体内药物分析在药物研发和临床应用中的重要性； - 通过举例，说明体内药物分析如何帮助评估药物的安全性和有效性。 第二课时： 1. 实验设计（15分钟）： - 学生分组，设计并讨论一个体内药物分析实验方案； - 引导学生明确实验的目的、药物样品的选择、实验步骤等。 2. 实验操作与数据分析（20分钟）： - 学生按照实验方案进行实验操作； - 引导学生记录实验数据，并进行数据分析和结果解释。
3. 实验结果讨论与总结（10分钟）： - 学生小组展示实验结果，并进行结果讨论； - 教师引导学生总结实验过程中可能遇到的问题和解决方法，提供指导和反馈。 教学资源： - PowerPoint演示文稿 - 实验用药物样品 - 实验器材和试剂 - 实验操作指导手册 评估方式： - 学生组织展示实验结果并回答相关问题； - 实验报告的完成情况（包括实验目的、步骤、数据记录等）； - 参与课堂讨论的积极性和质量。 教学辅助建议： 1. 提前准备充足的实验器材和试剂，确保实验顺利进行。 2. 鼓励学生进行小组合作，促进学生的交流和互动。 3. 在实验过程中，学生可能遇到实验数据处理和结果解释方面的问题，教师应提供及时的指导和帮助。
体内药物与毒物分析
体内药物与毒物分析 体内药物和毒物分析是一种关键性的检测方法，它可以揭示该个体体内药物和毒物的负荷，并应用于药代动力学和药物安全性评价等方面。在本篇文章中，我们将探讨体内药物和毒物分析的基本原理、常见方法以及其相关应用。 一、体内药物分析 体内药物分析主要应用于以下方面：（1）药代动力学，即药 物在体内的过程；（2）药物安全性评价，即药物在体内的剂 量与毒性；（3）药物疗效评价，即药物在体内的作用机制及 有效性。 体内药物分析的主要方法包括：（1）毛细管电泳；（2）气相色谱质谱联用（GC-MS）；（3）高效液相色谱-质谱联用 （LC-MS）；（4）放射性同位素标记法。 在体内药物分析中，常用的指标包括Cmax、AUC、T1/2、CL、Vd等。其含义分别为：最高血药浓度、药物曲线下面积、半 衰期、清除率和分布容积。 二、体内毒物分析 体内毒物分析主要应用于以下方面：（1）毒物监测，即对个 体体内毒物负荷的监测；（2）毒物剂量评估，即毒物在体内 的剂量与毒性；（3）毒物治疗，即通过毒物分析进行毒物治 疗的规划和实施。
体内毒物分析的主要方法包括：（1）毛细管电泳；（2）气相色谱质谱联用（GC-MS）；（3）高效液相色谱-质谱联用 （LC-MS）；（4）放射性同位素标记法。 在体内毒物分析中，常用的指标包括LD50、ED50、TD50、NOAEL等。其含义分别为：半数致死剂量、半数有效剂量、 半数中毒剂量和无不良毒性的最高剂量。 三、体内药物与毒物分析的应用 体内药物和毒物分析在临床和药物开发中有广泛的应用。在临床中，它可用于评估药物的安全性、疗效和药代动力学。在药物开发中，它可用于药物的代谢和毒性评估、体内药物分布和药物动力学分析等。 最近，体内药物和毒物分析还被用于新型药物的研发中。例如，基因编辑药物的安全性评估和代谢动力学分析已成为该领域的热点。此外，基于群体药代动力学研究和药物安全性评价等方面的新兴分析方法也日益被广泛应用。 总之，体内药物和毒物分析是一种关键性的检测方法，它可以揭示个体体内药物和毒物的负荷，并应用于药代动力学和药物安全性评价等方面。随着更为精细的检测方法和新药物的不断研发，这一领域的研究和应用将继续发展壮大。四、常见的体内药物分析方法 1. 毛细管电泳
体内药物分析
体内药物分析 体内药物分析: 药物分析的的重要分支，是研究生物体中药物及其代谢物和内源性物质的质与量变化规律的分析方法学。 体内药物分析的特点 ◆生物样品基质复杂 ◆被测物浓度低 ◆分析方法要求高 ◆实验室仪器设备要求高 ◆测定目标与数据处理复杂 体内药物分析方法的要求 ◆高灵敏度检测方法的应用 ◆建立高选择性、高专属性的分离方法 ◆建立的分析方法满足于分析目的相适应的精密度和准确度要求 成分复杂、干扰众多——要求方法选择性高 采样量小，浓度很低——要求方法灵敏度高 原料药：容量分析为主 制剂：仪器分析为主 体内药物：高灵敏度；高选择性的方法 第二章 生物样品指含待测物质的生物基质 最常见的生物基质为血液，最常用的生物样品是血浆或血清 血样采集的时间、方式： 血样的应用： 血样包括全血、血浆、血清 全血不能作为作用部位药物浓度的可靠指标，通常指测定血浆或血清中的药物的浓度。 当血浆中含有的抗凝剂对药物浓度有干扰时，使用血清样品 血样制备的差异： 尿液： 尿液中必须加入防腐剂，非损伤性采样方法
唾液： 组织： 头发： 微量元素的测定 生物样品的贮存： ◆血浆和血清：采血后及时分离（2h），短期4℃，长期-20℃ ◆冷冻是最常用的生物保存方法 ◆生物样品总的原则：临时解冻，解冻的样品一次测完，不能反复冷冻→解冻→冷冻 分析样品制备的目的： ◆使药物从缀合物或结合物中释放，测定总浓度 ◆使样品纯化与药物组分富集 ◆满足测定方法对分析样品的要求 ◆保护仪器性能及改善分析条件 有机破坏法 主要应用于头发样品中金属元素的测定 去除蛋白质法 去除蛋白质目的： 溶剂解法： ◆常用溶剂——甲醇、丙醇 ◆原理—— ◆操作—— 盐析法：中性盐（置换蛋白结合的水，使蛋白脱水而沉淀） 强酸沉淀法：10％三氯醋酸、6％高氯酸 超滤法：不需加热，不需添加化学试剂、操作条件温和，没有相态变化，破坏性小，能耗少，工艺流程短。 酶水解法：避免酸碱、高温降解，改善回收率，无乳化，减少净化操作 纯化与浓集应用范围： 液－液提取法（LLE） 大多数药物都是脂溶性，内源性物质基本上都是水溶性，当用有机溶剂萃取时，药物被萃取出来而内源性物质被除去，因此采用有机溶剂萃取法能够达到纯化目的
体内药物分析法、药物的杂质检查、常用药物的分析(一)
体内药物分析法、药物的杂质检查、常用药物的分析(一) 一、最佳选择题 1. 临床治疗药物监测常用的标本是 A.唾液 B.组织 C.血浆 D.汗液 E.脏器 答案：C [解答] 临床治疗药物监测常用的标本是血浆。当药物在体内达到稳定状态时，血浆中药物的浓度能够反映药物在靶器官的状况，因而，血浆药物浓度可作为体内药物浓度的可靠指标。故答案为C。 2. 在血浆样品制备中，常用的抗凝剂是 A.葡萄糖 B.氯化钠 C.肝素 D.三氯醋酸 E.氢氧化钠 答案：C [解答] 本题考查血浆制备的相关内容。血浆制备中常用的抗凝剂有：肝素、草酸盐、枸橼酸盐、EDTA、氟化钠。故答案为C。 3. 在临床治疗药物监测中血浆样品常用的处理方法有 A.沉淀蛋白 B.干燥 C.固相萃取 D.炽灼残渣
E.液-液萃取 答案：ACE 4. 药物纯度合格是指 A.对患者无害 B.符合分析纯的规定 C.绝对不存在杂质 D.含量符合药典的规定 E.不超过该药物杂质限量的规定 答案：E [解答] 本题考查药物纯度的定义。药物纯度是药物净化的程度，是反映药物质量的一个重要的指标。药物纯度合格指对于各杂质的量的控制在限度范围以内。故答案为E。 5. 药物中有害杂质限量很低，有的不允许检出如 A.氯化物 B.碘化物 C.氰化物 D.重金属 E.硫酸盐 答案：C [解答] 本题考查药物的杂质检查。药物杂质按其性质可以分为信号杂质和有害杂质。信号杂质一般无害，有害杂质如重金属、砷盐、氰化物等，对人体有毒性，在质量标准中应该严格控制，以保证用药安全。氰化物为剧毒物质，不应检出。故答案为C。 6. 下列关于药物中杂质的说法，正确的是 A.药物中绝对不允许存在毒性杂质 B.药物中不允许存在普通杂质 C.药物中的杂质均要求测定含量
体内药物分析
1.体内药物分析的意义特点和应用。 意义【一】：为新药研究提供依据 1）能定量说明药浓与药物作用机理及药物效应的关系，这为药理学及生物药剂学的相关研究提供了实验基础，进而为药学的处方筛选，工艺设计和保证制剂质量提供了可靠依据2）能阐明药物结构、剂型、工艺等因素与药浓与毒副作用 3）为前体药物设计提供信息 4）进行临床药物监测，制订合理的给药方案和剂量提供科学依据。 对象：原型药物，代谢物及内源成分 【二】多年来在临床药物治疗中，常存在着药物的药理作用的强度因患者个体差异而出现治疗效果的不同，同一种疾病同样的给药方案而出现的现象大相径庭，有的有效，也有的患者无效，甚至有患者中毒。引起这种化学上等价而生物学上不等价的问题，经研究发现是由于个体差异，患者体内的药物浓度高低差别很大而效果显著不同。为了达到药物在临床上使用安全、有效，不仅要保证药物在体外的质量，也需研究和了解药物进入生物体内的信息和表现，即需要获得对药物及其制剂在体内吸收、分布、代谢和排泄过程的作用机制和药物效应等参数，掌握药物在体液和组织中的有效浓度，科学地评价药物在体内过程中的内在质量，根据血药浓度设计给药方案，以便更好地解决使用过程的个体差异，使临床用药更加安全、合理和有效。很明显，临床药理学及临床医学的深入研究和发展离不开体内药物分析的现代分离、分析的定量技术，离不开体液或组织中药物分布数量的定量测定。 特点： 1）样品中药物浓度低，并且波动范围大，可供测定的样品量一般较少且不易重新获得 2）药物的化学结构与存在状态有变化 3）样品内存在的干扰成分多，测定前一般需经过预处理,体液和组织中的内源性物质不仅能与药物及其代谢物结合，也干扰分析，因此，样品需经过分离纯化后才能进行分析。4）在保证具有一定准确度的前提下，要求分析方法简便、快速，尤其是血药浓度监测结果应尽快送临床供用药监护或中毒解救 5）要有基本的仪器设备，如样品冷贮、萃取、浓集等必需设备，以及需配备灵敏度较高的分析仪器等 6。工作量大，测得数据的处理和结果的阐明有时比较困难。