溶酶体 半乳糖苷酶染色试剂盒

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细胞组织高质纯化溶酶体(lysosome)分离试剂盒产品说明

细胞组织高质纯化溶酶体(lysosome)分离试剂盒产品说明

细胞组织高质纯化溶酶体(lysosome)分离试剂盒产品说明细胞/组织高质纯化溶酶体(lysosome)分离试剂盒产品说明书(中文版)主要用途细胞/组织高质纯化溶酶体(lysosome)分离试剂是一种旨在从动物细胞或组织中分离出活性完整而高度纯化的溶酶体细胞器的权威而经典的技术方法。

该技术经过精心研制、成功实验证明的。

适合于动物软组织(肝或脑组织)和培养细胞的溶酶体的制备。

产品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能稳定,分离产量和纯度俱佳。

技术背景溶酶体(lysosome)是一种普遍存在于真核细胞中的细胞器,含有酸性水解酶,例如酯酶、淀粉酶、蛋白酶、核酶等,分解各种细胞残渣和废弃物质,包括过多的或破损的其它细胞器、食物颗粒、吞噬的细菌和病毒等。

其大小为0.5至1.5微米,球圆形,溶酶体内pH为5.0左右。

溶酶体功能异常会引起溶酶体贮积症(1ysosomal storage disorders;LSDs),例如家族性白痴病(Tay-sachs disease)和庞贝氏症(Pompe’s disease)。

溶酶体细胞器的分离是现代细胞生物学研究的最常用的手段之一。

从任何组织或细胞分离溶酶体的技术方法基本上采用:第一,通过机械或化学方法破裂细胞;第二,通过低速差速离心去除残渣碎屑和巨大细胞器;第三,通过高速差速离心获得溶酶体;甚至,第四,可以通过等密度离心获得纯度更高的溶酶体。

产品内容清理液(Reagent A)毫升裂解液(Reagent B)毫升净化液(Reagent C)毫升强化液(Reagent D)毫升分离液(Reagent E)毫升高纯液A(Reagent F)毫升高纯液B(Reagent G)毫升高纯液C(Reagent H)毫升高纯液D(Reagent I)毫升高纯液E(Reagent J)毫升保存液(Reagent K)毫升产品说明书1份保存方式保存净化液(Reagent C)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里,有效保证6月用户自备HANK平衡盐缓冲溶液(HL12028)或PBS缓冲溶液(HL12033):用于清理细胞胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(HL12024):用于细胞脱离完全细胞培养液(HL12052):用于细胞处理所需的培养基15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器50毫升锥形离心管:用于样品操作的容器1.5毫升离心管:用于样品操作的容器6毫升超速离心管:用于超高速离心的容器4℃台式离心机:用于沉淀细胞4℃超速离心机:用于分离细胞器成分DOUNCE匀浆器:用于裂解组织细胞实验步骤一、动物软组织溶酶体分离(组织匀浆法)实验开始前,将-20℃冰箱里的净化液(Reagent C)取出冻融,然后移取xx毫升净化液(Reagent C)和xx毫升的裂解液(Reagent B)到15毫升锥形离心管里,混匀后,标记为裂解工作液,放进冰槽里备用。

衰老相关β-半乳糖苷酶染色

衰老相关β-半乳糖苷酶染色

衰老相关β-半乳糖苷酶染色细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒产品编号产品名称规格BL133A细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒100 T产品简介:细胞衰老时,SA-β-Gal (senescence-associated β-galactosidase)活性水平会上调,此时本试剂盒可以对衰老的细胞或组织进行染色检测。

正常细胞经过有限次数的分裂后停止分裂,出现不可逆的生长停滞,此时细胞仍然是存活的,但是细胞形态和生理代谢活性发生明显变化,通常表现为细胞体积变大,与衰老相关的β-半乳糖苷酶为活化状态。

β-半乳糖苷酶是细胞溶酶体内的水解酶,通常在pH 4.0时表现活性,但在衰老细胞内该酶在pH 6.0条件下表现活性。

本试剂盒即是基于此现象及原理,以X-Gal为底物,衰老细胞特异性β-半乳糖苷酶催化该底物生成蓝色产物,表现为细胞胞质有蓝色沉积物,在光学显微镜下即可很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。

本试剂盒可以用于培养细胞的衰老检测,也可以用于组织切片的衰老检测。

本试剂盒仅染色衰老细胞,对衰老前的细胞(presenescent cells)、静止期细胞(quiescent cells)、永生细胞(immortal cells)或肿瘤细胞等不会染色。

产品组成:组分名称规格BL133A-1β-半乳糖苷酶染色固定液100 mLBL133A-2β-半乳糖苷酶染色液A100 mLBL133A-3β-半乳糖苷酶染色液B 1.2 mLBL133A-4DMF(二甲基甲酰胺) 5 mlBL133A-5X-Gal(粉末)100 mg使用方法:见说明书注意事项:1、X-Gal粉末配制成溶液后,分装成小份-20℃保存,3个月内有效,X-Gal溶液需室温完全解冻混匀后再使用。

2、β-半乳糖苷酶染色液A和B需提前恢复至室温后再使用,配制好的染色工作液需充分混匀无沉淀方可使用。

3、衰老细胞β-半乳糖苷酶染色反应依赖于特定的pH条件,不能在CO2培养箱中进行孵育显色,否则会影响染色工作液的pH,导致染色失败。

双荧光素酶报告基因检测试剂盒

双荧光素酶报告基因检测试剂盒

双荧光素酶报告基因检测试剂盒双荧光素酶报告基因检测试剂盒是一种用于检测报告基因表达水平的试剂盒。

报告基因是在转染实验中用来评估转染效率和细胞活性的基因,常见的报告基因包括荧光素酶、β-半乳糖苷酶等。

双荧光素酶报告基因检测试剂盒通过测定转染细胞中荧光素酶的活性,从而反映报告基因的表达水平,是科研实验室中常用的实验技术之一。

双荧光素酶报告基因检测试剂盒的原理是利用荧光素酶底物来测定细胞中荧光素酶的活性。

荧光素酶底物在荧光素酶的作用下发生化学反应,产生发光信号,通过测定发光信号的强度来间接反映报告基因的表达水平。

双荧光素酶报告基因检测试剂盒具有灵敏度高、操作简便、结果稳定可靠等特点,广泛应用于基因表达调控、信号转导、药物筛选等领域。

使用双荧光素酶报告基因检测试剂盒进行实验时,首先需要将转染后的细胞加入培养基中,然后加入荧光素酶底物,经过适当的反应时间后,用微量板阅读器或活体成像系统测定发光信号的强度。

根据发光信号的强度可以判断报告基因的表达水平,进而评估转染效果和细胞活性。

双荧光素酶报告基因检测试剂盒的应用范围非常广泛,不仅可以用于体外细胞实验,还可以应用于体内动物实验。

在基因敲除、基因过表达、siRNA干扰等实验中,双荧光素酶报告基因检测试剂盒都可以发挥重要作用。

此外,双荧光素酶报告基因检测试剂盒还可以用于药物筛选实验,评估药物对细胞活性的影响,为药物研发提供重要参考。

总的来说,双荧光素酶报告基因检测试剂盒是一种在分子生物学实验中应用广泛的试剂盒,具有灵敏度高、操作简便、结果稳定可靠等特点,为科研人员提供了重要的实验工具。

在今后的科研工作中,双荧光素酶报告基因检测试剂盒将继续发挥重要作用,为基因表达调控、信号转导、药物筛选等领域的研究提供有力支持。

果蝇肠道半乳糖苷酶染色方法

果蝇肠道半乳糖苷酶染色方法

果蝇肠道半乳糖苷酶染色方法引言:果蝇(Drosophila melanogaster)是一种常用的模式生物,在遗传学和发育生物学研究中被广泛应用。

果蝇肠道半乳糖苷酶是一种重要的酶类,它在果蝇消化系统中起着关键的作用。

本文将介绍一种常用的果蝇肠道半乳糖苷酶染色方法。

材料和方法:1. 果蝇标本:选择适龄的果蝇标本,如3-5天龄的果蝇。

2. PBS缓冲液:配制含磷酸盐缓冲液(pH 7.4)。

3. 4% 乳糖溶液:将乳糖粉溶解在PBS缓冲液中,制备4%的乳糖溶液。

4. X-β-Gal溶液:将X-β-Gal溶解在4%乳糖溶液中,得到最终浓度为1mg/ml的染色溶液。

5. 冷冻切片:将果蝇标本置于-20°C冷冻箱中,使其冷冻固化,然后用切片机制备3-5μm厚的肠道横截面切片。

6. 染色:将切片浸泡在X-β-Gal溶液中,室温孵育2-4小时,直至观察到染色产物形成。

结果:经过X-β-Gal染色后,果蝇肠道中的半乳糖苷酶活性可被可视化为蓝色染色产物。

通过显微镜观察,可以清晰地看到果蝇肠道中的半乳糖苷酶活性分布情况。

讨论:果蝇肠道半乳糖苷酶染色方法是一种常用的检测果蝇肠道中半乳糖苷酶活性的方法。

该方法通过利用X-β-Gal底物,使果蝇肠道中的半乳糖苷酶产生蓝色染色产物,从而可视化酶活性。

这种染色方法的优点是简单易行,不需要复杂的设备和试剂,且染色产物直观明显,易于观察和分析。

该方法的原理是利用X-β-Gal底物在半乳糖苷酶的催化下产生蓝色染色产物。

半乳糖苷酶是一种水解酶,能够将乳糖水解成葡萄糖和半乳糖。

X-β-Gal是一种类似于乳糖的化合物,当存在半乳糖苷酶时,X-β-Gal会被酶催化水解成葡萄糖和一种含有氯化物基团的化合物,这种化合物与溴化物反应生成蓝色染色产物。

因此,通过观察染色产物的形成情况,可以确定果蝇肠道中半乳糖苷酶的活性。

该染色方法在果蝇研究中具有广泛应用。

果蝇肠道是一个重要的组织器官,与果蝇的消化和吸收密切相关。

β-半乳糖苷酶染色(组织染色)

β-半乳糖苷酶染色(组织染色)

β-半乳糖苷酶染色(组织)检测原理:一般认为绝大多数正常细胞仅有有限的分裂能力,在不能分裂后就进入衰老(senescence)状态。

此时细胞仍然是存活的,但细胞的基因和蛋白的表达谱发生了很大改变。

衰老的细胞不能在一些常规的刺激下再诱导细胞分裂,并且衰老细胞的细胞周期分布也比较特殊,不同于一些损伤诱导的细胞休眠,也不同于细胞生长接触抑制的情况。

衰老细胞通常体积变大,并表达在pH6.0时有高酶活性的β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)。

细胞衰老也被认为是生物体抑制肿瘤的一种方式,同时也是生物体老化(aging)的一种潜在原因。

由此以X-Gal为底物,在衰老特异性的β-半乳糖苷酶催化下会生成深蓝色产物。

从而在光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞。

操作步骤:(1)将石蜡组织切片置于65°C恒温箱,烤片1h左右。

(2)脱蜡:二甲苯I 10min→二甲苯II 10min →梯度酒精(由高到低)各5min。

(3)1×PBS 洗涤3次,每次 5min。

注:对于冷冻切片直接按照以下步骤进行。

(4)加入适当体积的β-半乳糖苷酶染色固定液,以充分盖住组织为宜,室温固定不少于 15min。

(5)1×PBS 洗涤3次,每次 5min。

(6)加入适当量的染色工作液。

(7)37℃孵育过夜,最好把整个切片浸泡在染色工作液中。

注:37℃孵育不能在二氧化碳培养箱中进行。

(8)1×PBS 洗涤3次,每次 5min。

(9)脱水:梯度酒精(由低到高)各5min → 二甲苯I 10min→ 二甲苯 II 10min。

(10)加上封片液封片后4℃可以保存较长时间。

(11)普通光学显微镜下观察。

光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞。

注:所用试剂按照β-半乳糖苷酶染色试剂盒说明配制。

β-半乳糖苷酶染色试剂盒市面上有很多种,但检测方法几近相同,具体还是要参照相应的试剂说明书来操作。

ZSCI整理6种常见细胞实验原理与方法描述

ZSCI整理6种常见细胞实验原理与方法描述

2018科域培训课程实战技能6:6种常见细胞实验原理与方法描述主讲人:茜细胞功能05细胞迁移和侵袭01细胞增殖04细胞衰老02细胞凋亡03细胞自噬06血管形成目录16种常见细胞实验原理2方法描述案例分析3归纳与总结PART 01 知其然而知其所以然6种常见细胞实验原理1. 细胞增殖的定义细胞以分裂的方式进行增殖。

单细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的个体。

多细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的细胞,用来补充体内衰老或死亡的细胞。

一、细胞增殖2. 细胞增殖的检测方法1)对活细胞的代谢活性的检测(基于MTT 、CCK-8等)2)DNA 合成的检测(基于BrdU 的免疫法或EdU 的点击化学法),可通过体内成像、微孔板或流式细胞术检测等多种技术进行细胞示踪。

1. 细胞代谢活性检测MTT(噻唑蓝):通过添加四咪唑盐到细胞中可进行线粒体内酶代谢活性的测定。

活细胞能将四咪唑盐(如MTT、XTT、WST-1)还原成蓝紫色的甲瓒或甲瓒盐(Formazan),可通过分光光度计或酶标仪进行检测。

Cell Counting Kit–8 (CCK-8)中的WST-8被细胞内脱氢酶生物还原后生成的橙色甲臜染料能够溶解在组织培养基中,生成的甲臜量与活细胞数量成正比。

基于CCK-8(WST-8)的试剂盒能高度准确地检测细胞增殖,比MTT法及XTT法的灵敏度高5倍,能检测更低的细胞数目。

该试剂盒可适用于96孔板培养的贴壁或悬浮细胞。

细胞增殖的检测方法2. DNA的合成的检测DNA 的新组装合成是细胞生长的必要条件,故经常被用来进行细胞增殖、细胞活力及凋亡的检测。

BrdU 及EdU ,都是胸腺嘧啶的非放射性类似物,能掺入增殖细胞的DNA 中,可通过对BrdU 及EdU 的检测,从而对DNA 的合成量进行测定。

EdU (5-Ethynyl-2’- deoxyuridine )是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T )渗入正在复制的DNA 分子中,通过基于EdU 与Apollo®荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA 复制活性,适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA 修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究,尤其适合进行siRNA 、miRNA 、小分子化合物及其他药物的筛选实验。

β-半乳糖苷酶染色试剂盒使用说明

β-半乳糖苷酶染色试剂盒使用说明

β-半乳糖苷酶染色试剂盒使用说明产品简介:β-半乳糖苷酶染色试剂盒(β-Galactosidase Staining Kit)是一种基于衰老时SA-β-Gal(senescence-associatedβ-galactosidase)活性水平上调而对衰老细胞或组织进行染色检测的试剂盒。

在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织的衰老情况。

绝大多数正常细胞被认为仅有有限的分裂能力,在不能分裂后就进入衰老状态。

此时细胞仍然是存活的,但细胞的基因和蛋白的表达谱发生了很大改变。

衰老细胞不能在一些常规的刺激下再诱导细胞分裂,并且衰老细胞的细胞周期分布也比较特殊,不同于一些损伤诱导的细胞休眠,也不同于细胞生长接触抑制的情况。

衰老细胞通常体积变会大,表达pH 6.0时有高酶活性的β-半乳糖苷酶。

细胞衰老也被认为是生物体抑制肿瘤的一种方式,同时也是生物体老化(aging)的一种潜在原因。

本试剂盒可以用于培养细胞的衰老检测,也可以用于组织切片的衰老检测。

β-半乳糖苷酶染色试剂盒以X-Gal为底物,在衰老特异性的β-半乳糖苷酶催化下会生成深蓝色产物,光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。

本试剂盒仅染色衰老细胞,对衰老前的细胞(presenescent cells)、静止期细胞(quiescent cells)、永生细胞(immortal cells)或肿瘤细胞等不会染色。

对于组织切片或组织块,可以检测的样品数量视样品的大小而定,对于普通的切片也至少足够检测100个样品,使用6孔板测定,足够测定100个样品。

产品组成:试剂(C):β-半乳糖苷酶染色液A1ml4℃避光试剂(D):β-半乳糖苷酶染色液B1ml4℃避光试剂(E):β-半乳糖苷酶染色液C100ml4℃避光使用说明书1份自备材料:1、PBS或HBSS2、细胞培养器皿3、显微镜操作步骤(仅供参考):(一)贴壁细胞染色:1、对于6孔板中培养的细胞,吸除细胞培养液,用PBS或HBSS洗涤1次,加入1ml β-半乳糖苷酶染色固定液,室温固定15min。

β-半乳糖苷酶(β-GAL)活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4225

β-半乳糖苷酶(β-GAL)活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4225

β-半乳糖苷酶(β-GAL)活性检测试剂盒说明书微量法UPLC-MS-4225100T/48S试剂名称规格保存条件提取液液体100mL×1瓶2-8℃保存试剂一粉剂×2支-20℃保存试剂二液体4mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体15mL×1瓶2-8℃保存标准品液体1mL×1支2-8℃保存溶液的配制:1、试剂一:临用取1支加入1.25mL蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂-20℃分装保存4周,避免反复冻融(1瓶粉剂溶解后可做100T,为了延长使用时间,此产品多给1瓶粉剂)。

2、标准品:5μmol/mL的对硝基苯酚溶液。

β-GAL(EC3.2.1.23)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,能够催化β-半乳糖苷化合物中β-半乳糖苷键水解,此外还具有转半乳糖苷的作用。

β-GAL不仅可为植物的快速生长释放储存的能量,还能在正常的多糖代谢、细胞壁组分代谢以及衰老时细胞壁降解过程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖残基的水解,释放自由的半乳糖。

β-GAL分解对-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算β-GAL活性。

p-Nitrophenylβ-D-Galactopyranosideβ-GAL p-Nitrophenol(400nm)注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、超声破碎仪、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1、细菌或培养细胞的处理:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率200W,超声3秒,间隔10秒,重复30次),15000g,4℃,离心10min,取上清,置冰上待测。

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表1. 染色工作液的配制方法。
β-半乳糖苷酶染色液A
10 μl
β-半乳糖苷酶染色液B
10 μl
β-半乳糖苷酶染色液C
930 μl
X-Gal溶液
50 μl
说明:对于聚丙烯容器和聚苯乙烯容器的简单的判定方法是:聚丙烯容器可以高温高压灭菌;而聚苯乙烯容器不适合
高温高压灭菌,一旦高温高压处理就会严重变形。 d. 37℃孵育过夜,可以用parafilm或保鲜膜封住6孔板防止蒸发。 e. 普通光学显微镜下观察。如不能及时观察,可以去除染色工作液,加入2毫升PBS,4℃可以保存数天;或者加上封片
15分钟。对于其它类型的培养板,固定液及后续溶液的用量参照此比例进行操作。
b. 吸除细胞固定液,用PBS或HBSS洗涤细胞3次,每次3分钟。
c. 吸除PBS或HBSS,每孔加入1毫升染色工作液。使用聚丙烯(polypropylene)容器,不能使用聚苯乙烯(polystyrene)容器
配制染色工作液。染色工作液的配制方法参考表1。
包装清单:
产品编号 C0605-1 C0605-2 C0605-3 C0605-4 C0605-5

产品名称 β-半乳糖苷酶染色固定液
X-Gal溶液 β-半乳糖苷酶染色液A β-半乳糖苷酶染色液B β-半乳糖苷酶染色液C
说明书
包装 100ml
5ml 1ml 1ml 100ml 1份
保存条件:
-20℃保存,一年有效。其中X-Gal溶液需避光保存。
使用本产品的文献:
1. Yang Z, Zhang Y, Yang Y, Sun L, Han D, Li H, Wang C. Pharmacological and toxicological target organelles and safe use of single-walled carbon nanotubes as drug carriers in treating Alzheimer disease. Nanomedicine. 2010;6(3):427-41. Epub 2010 Jan 4.
本试剂盒仅染色溶酶体酸性β-半乳糖苷酶,不会染色衰老特异性的β-半乳糖苷酶,也不会染色外源转染表达的用于报告基 因的β-半乳糖苷酶(大肠杆菌的β-半乳糖苷酶)。
如果使用6孔板检测,足够测定100个样品;使用24孔板测定,足够测定400个样品;使用96孔板测定,足够测定1000个样 品。对于组织切片或组织块,可以检测的样品数量视样品的大小而定。对于普通的切片也至少足够检测100个样品。
绝大多数正常细胞都可以检测到较高水平的溶酶体β-半乳糖苷酶活性水平。可以用作细胞衰老β-半乳糖苷酶染色时的参考 染色。细胞衰老特异的β-半乳糖苷酶仅在衰老时表达,而溶酶体β-半乳糖苷酶几乎在任何情况下都表达。
碧云天生产的溶酶体β-半乳糖苷酶染色试剂盒,以X-Gal为底物,在溶酶体酸性β-半乳糖苷酶的催化下会生成深蓝色产 物。从而在光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。
聚苯乙烯(polystyrene)容器中进行,例如普通的6孔板就可以用作染色的容器。 需自备PBS或HBSS(Hanks Balanced Salt Solution)。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 对于贴壁细胞:
a. 对于6孔板中培养的细胞,吸除细胞培养液,用PBS或HBSS洗涤1次,加入1毫升β-半乳糖苷酶染色固定液,室温固定
注意事项:
β-半乳糖苷酶染色固定液有一定的腐蚀性和毒性,操作时请注意防护。 β-半乳糖苷酶染色液B在刚刚溶解后会观察到有沉淀,属正常现象,充分混匀或Vortex后,沉淀会全部溶解。作为常规,
试剂使用前必须确保沉淀全部溶解,并且混匀。 配制染色工作液时需使用聚丙烯(polypropylene)容器或玻璃容器,不宜使用聚苯乙烯(polystyrene)容器。但染色时可以在
工作液,然后加入1毫升PBS,4℃可以保存数天。如果离心,取细胞用于涂片,加上封片液封片后,4℃可以保存较长 时间。 3. 对于组织切片: a. 对于石蜡切片先按照常规方法进行脱蜡和水化处理。对于冷冻切片直接按照以下步骤进行。 b. 加入适当体积的β-半乳糖苷酶染色固定液,以充分盖住组织为宜,室温固定不少于15分钟。 c. 用PBS浸泡洗涤组织3次,每次不少于5分钟。 d. 吸除PBS,加入适当量的染色工作液。染色工作液的配制方法参考表1。 e. 37℃孵育过夜,可以用parafilm或保鲜膜封住防止蒸发。最好把整个切片浸泡在染色工作液中。 f. 普通光学显微镜下观察。如不能及时观察,加上封片液封片后4℃可以保存较长时间。
溶酶体β-半乳糖苷酶染色试剂盒
产品编号 C0605
产品名称 溶酶体β乳糖苷酶染色试剂盒
包装 >100次
产品简介:
溶酶体β-半乳糖苷酶染色试剂盒(Lysosomal β-Galactosidase Staining Kit)是一种对溶酶体中酸性β-半乳糖苷酶进行染色检测 的试剂盒,常用作细胞衰老检测时的对照。在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织中溶酶体酸性β-半乳糖苷酶 的活力水平情况。本试剂盒可以用于培养细胞的检测,也可以用于组织切片的检测。
液封片后,4℃可以保存较长时间。 2. 对于悬浮细胞:
a. 离心收集细胞至1.5ml离心管内,用PBS或HBSS洗涤1次,加入1毫升β-半乳糖苷酶染色固定液,室温固定15分钟。固 定时可以在摇床上缓慢摇动,以避免细胞结成团块。
b. 离心,吸除细胞固定液,用PBS或HBSS洗涤细胞3次,每次3分钟。 c. 离心,吸除PBS或HBSS,每管加入0.5-1毫升染色工作液。染色工作液的配制方法参考表1。 d. 37℃孵育过夜。 e. 取部分染色后的细胞,滴加到载玻片上或6孔板内,普通光学显微镜下观察。如不能及时观察,可以离心,去除染色
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