碱性磷酸酶显色剂使用方法
碱性磷酸酶显色剂使用方法
5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl Phosphate (5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸盐), BCIP/NBT （四唑硝基蓝）是碱性磷酸酶底物, 产物为深蓝色, 在碱性磷酸酯酶的催化下，BCIP被水解, 水解产物与NBT发生反应，形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。
使用方法1. 在膜或组织切片，最后一次洗涤完毕后，加入适量BCIP/NBT染色工作液2. 室温避光孵育5-30分钟或更长时间(可长达24小时)，直至显色至预期深度.3. 用蒸馏水洗涤1-2次即可终止显色反应4. 膜标本可干燥后避光保存；组织切片或细胞样品，显色反应终止后，可以用中性红复染染色干细胞成骨诱导的常用染色方法有几种碱性磷酸酶（ALP）是成熟成骨细胞的标志性酶，同时成骨细胞形成的钙结节也是成骨细胞的标记物。
成骨细胞染色方法以ALP为目标物的检测方法：1 Gomori钙钴法【染色原理】ALP在pH值9.4的环境下，以镁离子作为激活剂，能够把β-甘油磷酸钠水解出磷酸，磷酸与高浓度的钙盐结合形成无色的磷酸钙，再与硝酸钴作用形成磷酸钴，经硫化胺处理形成黑色的硫化钴沉淀在酶活性处。
【孵育液配制】3%β-甘油磷酸钠5ml2%巴比妥钠5ml蒸馏水10ml2% CaCl2 10ml2% MgSO4 1ml【步骤】（1）将无菌的玻片放入培养皿中，传代时加入适量的细胞悬液，作细胞爬片，呆细胞长满玻片后取出。
（2）PBS冲洗后用冷丙醇固定10min，蒸馏水冲洗数次。
（3）入孵育液中，37℃孵育4-6h。
自来水冲洗数次。
（4）2%硝酸钴中浸3-5min，蒸馏水洗数次。
（5）1%的硫化铵中2min，自来水冲洗，自然干燥，封固。
【结果】胞质中阳性反应呈现灰黑色颗粒或块状沉淀。
2偶氮偶联法：【孵育液配制】萘酚AS-BI磷酸盐20mgDMSO 0.5ml0.2mol/L巴比妥醋酸缓冲液（PH 9.2）50ml六偶氮副品红0.5ml1mol/L NaOH调PH 9-10，混合后过滤使用。
碱性磷酸酶测定方法(磷酸苯二钠比色法)
磷酸酶磷酸酶能酶促有机磷化合物的水解。
试验表明，土壤微生物对于土壤含磷有机物的矿化起着主要的作用；某些高等植物的根系也有磷酸酶活性。
土壤的磷酸酶活性可以表征土壤的肥力状况（特别是磷的状况）。
基本原理：土壤磷酸酶活性的测定常用各种磷酸酯作为基质。
应用得最多的是酚酞磷酸酯、苯磷酸酯、甘油磷酸酯、ɑ-或ß-萘磷酸酯和p-硝基苯磷酸酯等的水溶性钠盐。
当它们被酶促水解时，能析出无机磷和基质的有机基团。
因此磷酸酶活性的测定时测定基质水解后的无机磷或酚的部分。
这里介绍的方法是测定基质水解时生成的酚量。
该法可用于测定各种磷酸酶的活性：碱性磷酸酶（用PH10的硼酸盐缓冲液），中性磷酸酶（用PH7.0的柠檬酸盐缓冲液），酸性磷酸酶（用PH5.0的乙酸盐缓冲液）试剂配制：1）甲苯2）0.5% 磷酸苯二钠3）硼酸盐缓冲液（PH9.6与PH10.0）：称取12.404g硼酸（H3BO3）溶于700ml 去离子水，用稀NaOH溶液调节至PH10.0，用去离子水稀释至1000ml4) 氯代二溴对苯醌亚胺试剂：取0.125g 2,6-二溴苯醌氯酰亚胺，用10ml 96%的乙醇溶解，贮于棕色瓶中，存放在冰箱里。
保存的黄色溶液未变褐色之前均可使用。
5）标准溶液：（a）母液：1g酚溶于蒸馏水中，并稀释至1000ml，溶液保存在暗色瓶中；（b）工作液：10ml溶液（a）稀释至1000ml（1ml含10ug酚）6）0.3%硫酸铝溶液标准曲线绘制：取0，1，3，5，7，9，11和13ml酚工作液（b），置于50ml容量瓶中，每瓶加入5ml缓冲液和4滴氯代二溴对苯醌亚胺试剂，显色后稀释至刻度，30min后比色测定。
以光密度为纵坐标，浓度为横坐标绘成标准曲线。
操作步骤：1）取5g风干土置于200ml三角瓶中，用2.5ml甲苯处理2）处理15min后，加入20ml 0.5%磷酸苯二钠3）将反应混合物置于37℃恒温箱中，培养24h后，在培养液中加100ml 0.3%硫酸铝溶液用致密滤纸过滤。
碱性磷酸酶染色液(改良Gomori钙钴法)
仅供科研版本号：180402 碱性磷酸酶染色液(改良Gomori钙钴法)【产品组成】【保存条件】4℃,避光,3个月【产品概述】碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶，广泛分布于哺乳动物组织内，其活性所需最适pH9.2~9.8。
此酶主要存在于物质交换活跃之处（细胞膜），如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮。
此酶还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜及吞饮小泡。
碱性磷酸酶染色液(改良Gomori钙钴法)采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性。
此法以天然存在的β-甘油磷酸钠为底物，经酶水解释放出磷酸，磷酸根与钙离子结合为磷酸钙沉淀，再依次被置换为磷酸钴和硫化钴，最终产物为黑色硫化钴沉淀。
【使用方法】(一)石蜡切片染色1、石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
2、切片入ALP孵育液中，37℃孵育2~12h。
3、流水洗2min，入蒸馏水。
4、入硝酸钴溶液中，37℃孵育5min。
5、流水洗5min后，入蒸馏水。
6、在上述过程中配制ALP硫化工作液，即取试剂(C)用蒸馏水稀释50倍,即为ALP硫化工作液，即配即用。
切片入硫化工作液，孵育2min。
7、流水洗10min，入蒸馏水。
8、(可选)核固红复染细胞核，蒸馏水洗。
9、石蜡切片常规脱水、透明，树胶封片。
(二)冰冻切片染色1、冰冻切片在丙酮-氯仿等量混合液内，4℃固定2~5min。
2、切片入ALP孵育液，37℃孵育5~15min。
3、流水洗2min，入蒸馏水。
4、入硝酸钴溶液，37℃孵育5min。
南京森贝伽生物科技有限公司网址：/第1页5、流水洗5min后，入蒸馏水。
6、在上述过程中配制ALP硫化工作液，即取试剂(C)用蒸馏水或者去离子水稀释50倍,即为ALP硫化工作液，即配即用。
切片入ALP硫化工作液，孵育1～2min。
组织及血液碱性磷酸酶活性检测试剂盒说明书__ 可见分光光度法UPLC-MS-4426
组织及血液碱性磷酸酶（AKP/ALP）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：UPLC-MS-4426规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体30mL×1瓶4℃保存试剂一液体10mL×1瓶4℃保存试剂二液体10mL×1瓶4℃保存试剂三液体30mL×1瓶4℃保存标准液液体1mL×1支4℃保存溶液的配制：1、标准液：10μmol/mL酚标准液，临用前蒸馏水稀释至2.5μmol/mL备用。
产品说明：AKP/ALP是一种含锌的糖蛋白酶，在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。
AKP/ALP广泛分布于人体各脏器中，以肝脏为主。
在碱性环境中，AKP/ALP催化磷酸苯二钠生成游离酚；酚与4-氨基安替比林和铁氰化钾反应红色亚醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通过测定510nm吸光度增加速率，来计算AKP活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）称取约0.1g组织，加提取液1mL充分研磨，4℃，10000rpm离心10min，取上清液待测。
血液可直接用于测定，或者适当稀释后用于测定。
二、操作步骤1、可见分光光度计预热30min以上，调节波长到510nm，蒸馏水调零。
2、操作表试剂名称（μL）测定管对照管空白管标准管蒸馏水--20-标准品---20上清液20---试剂一200200200200试剂二200200200200混匀后置于37℃水浴中保温15min试剂三600600600600上清液-20--混匀后于510nm测定吸光度，分别记为A测定管、A对照管、A空白管、A标准管。
碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)使用说明
碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)使用说明自备材料：1、载玻片、湿盒2、普通光学显微镜产品简介：碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶，广泛分布于哺乳动物组织内，其活性所需最适pH9.2~9.8。
此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜)，如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮，还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜。
碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)不是采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性，而是采用偶氮偶联法(又称同时偶联法)，其原理是在pH9.2～9.8的碱性条件下，细胞内碱性磷酸酶可使AB-BI磷酸盐水解，释放出磷酸不萘酚，后者不偶联重氮盐生成有色产物，定位于细胞质中。
该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、梯度入水后的石蜡切片等的碱性磷酸酶染色，碱性磷酸酶活性部位呈蓝色，位于胞桨，结果较金属盐沉淀法可靠。
操作步骤(仅供参考)：一、涂片或切片1、血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、石蜡切片入ALP固定液固定3min(梯度入水后的石蜡切片无需固定)，水洗。
2、滴加配制好的ALP孵育液，放入湿盒中，避光孵育15～20min，水洗。
3、入核固红染色液或甲基绿染色液复染3～5min。
4、水洗、镜检或甘油明胶封固后镜检。
二、贴壁培养细胞1、取6孔板或其他容器培养的细胞，弃液，PBS清洗干净。
2、加入ALP固定液固定3min或4%多聚甲醛固定10～15min，PBS清洗。
3、滴加配制好的ALP孵育液，放入湿盒中，避光孵育15～20min，PBS清洗。
4、入核固红染色液或甲基绿染色液复染3～5min。
5、PBS清洗、镜检。
注意事项：1、血液或骨髓细胞涂片或其他样本均应新鲜，薄厚适宜，及时固定，否则会影响酶的活性。
2、培养细胞染色操作过程中，清洗、染色等步骤都应轻微，以免损伤或丢失细胞。
碱性磷酸酶底物显色试剂盒
注意：根据膜的大小，AP Buffer、NBT、 BCIP 的量等比例混 合物中，于室温平缓摇动进行温育。
⒋ 细心观察反应过程，待蛋白膜上条带呈色 明显，而无明显背景时(一般约 5-15 分钟)， 把膜浸入水中漂洗停止反应。
注意：若信号太弱可 增加反应时间。
⒌ 拍摄膜照片或直接保存膜留作永久试验纪 录。
碱性磷酸酶底物显色试剂盒(BCIP/NBT)
目录号： 1925
目录编号 192501
包装单位 100ml
实验室使用，仅用于体外
产品介绍：
BCIP/NBT 是 碱 性 磷 酸 酶 （ Alkaline phosphatase ,AP）的显色底物，经免疫反应固定 的碱性磷酸酸酶可催化 BCIP/NBT 产生化学呈 色反应，在 蛋白转 印膜阳性 蛋白条 带处原 位形 成蓝紫色的化合物沉淀。
注意：若信号太弱可 增加反应时间。
⒌ 拍摄膜照片或直接保存膜留作永久试验纪 录。
产品组成、储存、稳定性：
试剂盒组成 AP reaction buffer NBT stock
BCIP stock
保存
室温或 者 4℃ －20℃ 避光 －20℃ 避光
192501 100 ml 1 ml 1 ml
常温运输，本产品收到后按照上面指示温度存放，6 个月内有效。
操作方法：
⒈ 按常规操作，将蛋白样品进行 SDS-PAGE 电泳，转膜（硝酸纤维素膜和 PVDF 膜均 可使用）。封闭 30~120 min，一抗孵育 1 小 时或过夜；漂洗 3~5 次，碱性磷酸酶标记 二抗孵育 30~120 min，漂洗 3~5 次。如上 述步骤采用磷酸缓冲液，需换用 Tris 缓冲 液漂洗 3~5 次以完全去除磷酸成分对于 AP 抑制作用。
碱性磷酸酶光镜显示法
碱性磷酸酶一、钙-钴法光镜显示方法（1）孵育液的配制：3％β-甘油磷酸钠 10ml （底物）2％巴比妥钠 10ml （缓冲液）2％氯化钙 20ml （捕获剂）5％硫酸镁 5ml （激活剂）双蒸水（D.W） 5ml孵育液最终pH值9.4，置于冰箱保存。
（2）操作步骤：①新鲜组织，作冰冻切片（可用10％福尔马林固定10min，或不固定）；②入孵育液，恒温37℃孵育 30～60min （磷酸钙沉淀形成）③流水冲洗 5min④置2％硝酸钴内 2min （磷酸钴形成）⑤蒸馏水冲洗；⑥置1％硫化铵溶液内 1min （硫化钴形成，脂溶性沉淀）⑦蒸馏水冲洗甘油明胶封固。
（3）结果与评价:碱性磷酸酶活性产物为棕黑色硫化钴沉淀。
（4）对照：从孵育液中去除底物或用左旋咪唑等抑制剂的方法，则酶活性反应为阴性。
二、偶氮-偶联法光镜显示方法（1）孵育液的配制：萘酚AS（或萘酚AS-MX） 10～25mg（底物）溶于N，N-二甲基甲酰胺液 0.5ml（促溶剂）0.2mol/L Tris盐酸缓冲液（pH9.2） 50ml（缓冲液）坚牢蓝B（或BB，RR，或坚牢红TR或坚牢蓝VRT） 50mg（捕获剂）（以上尽可能混合和过滤，必要时可用氢氧化钠调整pH9.0～9.2值）。
（2）操作步骤：①新鲜组织，作冰冻切片；②入孵育液，恒温37℃（或室温下）孵育5～60min （有色沉淀形成）③双蒸馏水冲洗 3～5min④4％甲醛，室温下固定 10～50min⑤蒸馏水冲洗 3～5min⑥甘油明胶封固。
（脂溶性沉淀）（3）结果与评价：采用不同的重氮盐，酶的活性显色也不同，用坚牢蓝B（或BB，RR）酶活性呈蓝色-紫色，用坚牢红TR (或坚牢紫B）酶活性呈红色。
BCIP NBT碱性磷酸酶显色试剂盒
仅供科研使用版本号：180718BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒【产品组成】【保存条件】4℃,避光,12个月。
【产品概述】BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒(BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit)是一种用于免疫组化显色、Western等膜显色和诱导多功能干细胞iPS鉴定等的试剂盒。
BCIP/NBT是碱性磷酸酯酶的常用底物，在碱性磷酸酯酶的催化下，BCIP会被水解产生强反应性的产物，该产物会和NBT发生反应，形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。
BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit可用于细胞或组织的碱性磷酸酯酶显色包括诱导多功能干细胞iPS的鉴定，也可用于Western等结合有碱性磷酸酯酶的膜的显色检测\细胞或组织内源性的碱性磷酸酯酶显色。
【使用方法】1、对于组织切片或细胞样品或膜，在与碱性磷酸酯酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后，用适当洗涤液洗涤3～5次，每次3～5min。
2、对于检测内源性碱性磷酸酯酶的组织或细胞样品，在适当固定后，也用适当洗涤液洗涤3～5次，每次3～5min。
3、按照如下比例依次加入各溶液，混匀后即配制成BCIP/NBT染色工作液：4、洗涤完毕后，去除洗涤液。
5、加入适量BCIP/NBT染色工作液，确保能充分覆盖样品。
5、室温避光孵育5～30min或更长时间(可长达24小时)，直至显色至预期深浅。
6、去除BCIP/NBT染色工作液，用蒸馏水洗涤1～2次即可终止显色反应。
7、对于组织切片或细胞样品，显色反应终止后，如有必要可以用中性红染色液(neutral red stainingsolution)染色，以便于观察。
对于膜，显色反应终止后，可以室温晾干避光保存。
【注意事项】1、BCIP对人体有刺激性，NBT对人体有害，请注意适当防护。
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5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl Phosphate (5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸盐), BCIP/NBT （四唑硝基蓝）是碱性磷酸酶底物, 产物为深蓝色, 在碱性磷酸酯酶的催化下，BCIP被水解, 水解产物与NBT发生反应，形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。
使用方法
1. 在膜或组织切片，最后一次洗涤完毕后，加入适量BCIP/NBT染色工作液
2. 室温避光孵育5-30分钟或更长时间(可长达24小时)，直至显色至预期深度.
3. 用蒸馏水洗涤1-2次即可终止显色反应
4. 膜标本可干燥后避光保存；组织切片或细胞样品，显色反应终止后，可以用中性红复染染色
干细胞成骨诱导的常用染色方法有几种
碱性磷酸酶（ALP）是成熟成骨细胞的标志性酶，同时成骨细胞形成的钙结节也是成骨细胞的标记物。
成骨细胞染色方法
以ALP为目标物的检测方法：
1 Gomori钙钴法
【染色原理】
ALP在pH值9.4的环境下，以镁离子作为激活剂，能够把β-甘油磷酸钠水解出磷酸，磷酸与高浓度的钙盐结合形成无色的磷酸钙，再与硝酸钴作用形成磷酸钴，经硫化胺处理形成黑色的硫化钴沉淀在酶活性处。
【孵育液配制】
3%β-甘油磷酸钠5ml
2%巴比妥钠5ml
蒸馏水10ml
2% CaCl2 10ml
2% MgSO4 1ml
【步骤】
（1）将无菌的玻片放入培养皿中，传代时加入适量的细胞悬液，作细胞爬片，呆细胞长满玻片后取出。
（2）PBS冲洗后用冷丙醇固定10min，蒸馏水冲洗数次。
（3）入孵育液中，37℃孵育4-6h。
自来水冲洗数次。
（4）2%硝酸钴中浸3-5min，蒸馏水洗数次。
（5）1%的硫化铵中2min，自来水冲洗，自然干燥，封固。
【结果】胞质中阳性反应呈现灰黑色颗粒或块状沉淀。
2偶氮偶联法：
【孵育液配制】
萘酚AS-BI磷酸盐20mg
DMSO 0.5ml
0.2mol/L巴比妥醋酸缓冲液（PH 9.2）50ml
六偶氮副品红0.5ml
1mol/L NaOH调PH 9-10，混合后过滤使用。
（六偶氮副品红：副品红400mg，浓盐酸2ml，双蒸水8ml混合过滤；临用前与等体积4%亚硝酸钠混合）
【步骤】
（1）干细胞爬片成功后，PBS冲洗后，置入4℃10%甲醛固定10min。
（2）蒸馏水冲洗。
（3）将过滤孵液直接滴加于玻片上，室温下作用45min。
（4）流水冲洗，晾干。
（5）甘油明胶封固。
【结果】成骨细胞胞质中可见红色ALP阳性颗粒。
3碱性磷酸酶染色试剂盒法：
【作用原理】干细胞内碱性磷酸酶在Ph9.4-9.6条件下水解磷酸萘酚AS-MX产生萘酚，后者被重氮盐捕获，生成不溶性有色沉淀。
【作用液配制】
取2号储备液10ml，加3号液200ul，再加4号粉剂10mg，振摇速溶，立即过滤到细胞爬片上。
【步骤】
（1）细胞爬片滴加数滴1号液，室温固定一分钟（不可以延长），流水漂洗2分，晾干。
（2）滴加作用液数滴，置湿盒内于37℃孵育2小时，流水冲洗2分钟。
（3）滴加5号液数滴，复染5分钟，流水冲洗2分钟，晾干。
【结果】阳性结果是胞浆内出现蓝色沉淀。
针对钙沉积物“钙结节”的染色方法：
4茜素红法
【作用原理】利用沉积的钙于茜素红发生显色反应，得到红色的染色效果。
【步骤】
（1）培养皿用PBS冲洗2次，95%乙醇固定10min，双蒸水冲洗3次。
（2）0.1%茜素红-Tris-Hcl（PH 8.3）37℃，30min。
（3）蒸馏水冲洗，干燥，封片。
【结果】染料品种的不同，矿化结节呈现不同的红色。
5 von Kossa法
【作用原理】
V on Kossa’s矿化结节染色法原理是将矿化基质中的磷酸盐(钙)、碳酸盐(钙)转变为磷酸银、碳酸银，然后用日光、紫外线或强还原剂使其还原为黑色的金属银。
本试验染色过程中未作细胞衬染。
【步骤】
（1）培养皿用PBS冲洗2次，4％多聚甲醛固定5分钟，双蒸水冲洗3次。
（2）培养皿中加入5％硝酸银溶液1ml，将培养板开盖在紫外灯下照射1小时。
（3）倒出残留的硝酸银溶液，蒸馏水冲洗3遍。
（4）培养皿中加入5％硫代硫酸钠溶液1ml，中和残留的硝酸银溶液，吸出残液。
（5）室温下晾干，封固
0.1%茜素红－Tris-Hcl(PH 8.3)溶液配方
具体配制方法：
1g Tris（1g左右Tris均可）加入三蒸水100ml中
用滴管往配制液中加HCl（分析醇），一滴滴地加，边加边测试PH
待PH为8.3左右即可（无精密PH测试仪，用PH试纸也是一样的，但是要能测到8点几的PH试纸）
配好后往里面加0.1g的茜素红
于是0.1%茜素红－Tris-Hcl(PH 8.3)溶液就配好了。
茜素红S
中文名称: 茜素红S英文名称:alizarin red S; sodium alizarin sulfonate
CAS: 130-22-3分子式: C14H7NaO7•H2O分子量: 360.28中文别名: 9,10-二氢-3,4-二羟基-9,10-二氧代-2-蒽磺酸单钠盐；茜素红；（3）茜素磺酸钠；茜素S ；酸性媒介茜素红；酸性媒介红S-80（Acid Mordnat Reds-80）；C. I.媒介红3（C. I. Mordant Red 3）。
性质：橙黄色的针状体。
溶于水，微溶于醇，不溶于氯仿和苯。
1%水溶液pH2.15。
由茜素经发烟硫酸磺化，然后转变为钠盐制得。
茜素红能和许多金属离子生成稳定的红色络色物，在分析中常用作金属指示剂；光度法测定金属离子的显色剂；在分析中常用作金属指示剂；光度法测定金属离子的显色剂；酸碱指示剂，第一变色范围PH值3.7(黄)～5.2(紫)，第二变色范围PH值10.1(紫)～12.0(浅黄)；用于极谱法测定金属离子。
用途: 络合滴定指示剂和酸碱指示剂。
配制：将托盘天平上称取0.1g茜素磺酸钠定溶于100ml蒸馏水中转移入滴瓶中，贴标签备用。
或用茜素红粉加PBS溶解后，要注意调节PH值到7.2！过滤就可以了。
0.1%的茜素红Tris-HCL(PH8.3), Tris的浓度做分子生物学一样的，用0．Imol／L的HCI或0 1％的NaOH 调节。