2020最新高中生物 专题2 微生物的培养与应用 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数练习
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养细菌后，指示剂将( ) A．变蓝色B．变红色C．变黑色D．变棕色解析：细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，加入酚红指示剂将变红。
答案：B2．测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是( )A．细菌个体小，真菌个体大B．细菌易稀释，真菌不易稀释C．细菌在土壤中数量比真菌多D．随机的，没有原因解析：土壤中的微生物大约70%～90%是细菌，真菌的数量要比细菌少。
样品的稀释度越高，在平板上生成的菌落数目就越少。
在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在30～300，适于平板计数，所以细菌的稀释倍数要高于真菌的稀释倍数。
答案：C3．用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数。
原因是( )A．平板上的一个菌落就是一个细菌B．菌落中的细菌数是固定的C．此时的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌D．此方法统计的菌落数一定与活菌的实际数相同解析：用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌，但偶尔也能来自两个细菌，所以此方法统计的菌落数可能与活菌的实际数不相同。
答案：C4．土壤中的细菌能分解尿素，是因为它们能合成一种( )A．尿素酶B．脲酶C．蛋白酶D．肽酶解析：能够分解利用尿素的细菌，其细胞内含有脲酶，可以把尿素分解成氨，然后进一步利用。
答案：B5．(2016·四川卷)图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列。
(1)图中选择培养基应以____________为唯一氮源；鉴别培养基还需添加____________作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成____________色。
(2)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。
该过程采取的接种方法是______________，每克土壤样品中的细菌数量为________×108个；与血细胞计数板相比，此计数方法测得的细菌数目较________。
(3)现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活，突变后基因转录的mRNA在图乙箭头所示的位置增加了70个核苷酸，使图乙序列出现终止密码(终止密码有UAG、UGA和UAA)。
突变基因转录的mRNA中，终止密码为________，突变基因表达的蛋白含________个氨基酸。
解析：(1)关键信息：“筛选产脲酶细菌”“接种稀释倍数为105的土壤样品溶液”，使“图乙序列”出现终止密码。
(2)解题关键：区别选择培养基与鉴别培养基，掌握细菌计数的方法。
本题考查微生物的培养与分离方法及基因表达。
(1)脲酶能够催化尿素分解为氨，要从土壤中筛选出产脲酶的细菌，需用以尿素作为唯一氮源的选择培养基。
由于尿素被分解成了氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，使酚红指示剂变红色。
(2)将稀释倍数为105的土壤样品溶液接种在细菌培养基平板上，用于计数细菌菌落数的方法是稀释涂布平板法。
统计的菌落数应介于30～300之间，选择细菌菌落数为156、178和191的平板计数，每克土壤样品中细菌数量为(156＋178＋191)÷3÷0.1×105＝1.75×108。
由于两个或多个细菌连接在一起时，往往统计的是一个菌落，用此方法测得的细菌数目偏低。
(3)密码子由3个相邻的碱基组成，箭头前面的碱基一共构成91个密码子；插入的70个核苷酸和后面2个碱基一共构成24个密码子，后面是UGA，是终止密码，翻译结束后，表达的蛋白质含有115个氨基酸。
答案：(1)尿素酚红红(2)稀释涂布平板法 1.75 少(3)UGA 115[A级基础巩固]1．分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是( )①加尿素②不加尿素③加琼脂糖④不加琼脂糖⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐A．①③⑤⑦B．②④⑥⑧C．①③⑤⑧D．①④⑥⑦解析：分离土壤中分解尿素的细菌，培养基中要有尿素、琼脂糖、葡萄糖，尿素给分解尿素的细菌提供氮源，不加硝酸盐。
答案：C2．从土壤中分离能分解尿素的细菌，可以利用选择培养基，其成分中一定有( )①尿素②有机氮化物③无机盐④有机碳化物⑤水⑥无机碳化物A．①③④⑤B．②③④⑤C．①③⑤⑥D．②③⑤⑥解析：分离能分解尿素的细菌，故培养基中一定有尿素，一定没有有机氮化物；另外，水、无机盐和碳源、能源也是细菌生长所必不可少的。
有机碳在这里既是碳源又是能源，因为分解尿素的细菌是异养微生物，不能利用无机碳化物。
答案：A3．关于土壤取样的叙述错误的是( )A．土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤B．先铲去表层土3 cm左右，再取样C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D．应在火焰旁称取土壤答案：C4．下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是( )A．利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数B．接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落C．以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌D．用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少解析：用稀释涂布平板法可以分离微生物也可以对微生物进行计数；接种划线可以将菌体分散，最后得到单个菌体细胞，经过培养可以得到单个菌落；以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌；在泡菜的腌制过程中，开始亚硝酸盐含量增加，10天后含量开始下降。
答案：A5．在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只筛选出大约50个菌落。
A同学的结果产生原因可能有( )①由于土样不同②由于培养基被污染③由于操作失误④没有设置对照A．①②③B．②③④C．①③④D．①②④答案：A6．下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是( )A．采用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的活菌数B．当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落C．为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数D．在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果解析：当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。
一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，密度过大会使计数结果偏小，影响结果的准确性。
涂布三个平板，作为重复组，取其平均值作为统计结果能增强试验的说服力与准确性。
答案：CB级能力训练7．在农业生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数。
(1)如图是利用________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步________分散到培养基的表面。
(2) 分析下面培养基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、H2O。
若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述的________，并加入________，以补充________源。
(3) 若在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为233，那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2 mL)________。
解析：(1) 由题图可知，其采取的是平板划线法，该方法能把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
(2) 培养分解尿素的细菌，其氮源是尿素，所以培养基中要除去含氮物质，即除去NaNO3，并加入尿素和葡萄糖，以提供氮源和碳源。
(3) 根据题意可知，每毫升样品中的菌落数＝平板上菌落数的平均值÷体积×稀释倍数＝233÷0.2×106＝1.165×109。
答案：(1) 平板划线稀释(2) NaNO3尿素和葡萄糖氮、碳(3) 1.165×1098．有机化工原料氯苯不易降解，会污染环境，现欲从土壤中分离高效降解氯苯的微生物。
回答下列问题：(1) 为了获得能降解氯苯的微生物菌种，可在被氯苯污染的土壤中取样，并应选用以________为碳源的培养液进行选择培养。
除含有碳源外，培养液还应含有________、无机盐和蒸馏水等。
(2) 将获得的3种待选微生物甲、乙、丙分别接种在1 L含20 mg氯苯的相同培养液中培养(培养液中其他营养物质充裕、条件适宜)，观测从实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为33 h、15 h、46 h，则应选择微生物乙作为菌种进行后续培养，理由是_____________________________________________________。
(3) 若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可在显微镜下用________直接计数，也可选用________法统计活菌数目。
(4) 制备固体培养基，基本步骤是：计算→称量→溶化→分装→________→包扎→高压蒸汽灭菌→________。
(5) 接种时要对接种环进行灼烧，目的是________。
答案：(1) 氯苯氮源(2) 微生物乙分解氯苯的能力比甲、丙更强(3) 血细胞计数板稀释涂布平板(4) 加棉塞倒平板(5) 杀灭接种环上的微生物，避免感染杂菌9．广东省是我国甘蔗生产区之一。
甘蔗是一种高光效的C4植物，单位面积产量很高，种植面积日益扩大，目前已成为南方地区燃料酒精生产的重要原料。
利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗→榨汁(蔗糖)→酵母发酵→蒸馏→成品(燃料酒精)。
(1)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。
步骤2：制备选择培养基。
在基本培养基的基础上，注意________和________，加琼脂后灭菌，制成固体平板。
步骤3：将紫外线照射后的菌液稀释涂布平板。
步骤4：根据___________________________________________，筛选出突变菌。
(2)上述步骤2、3和4的依据分别是______________________________________________________________________________。
解析：(1)要筛选耐高糖和耐酸的菌种，培养基中必须加入高浓度蔗糖和调低pH，能在选择培养基上生长的即为所需菌种。
(2)步骤2是给其提供高糖或酸性的筛选环境；步骤3是为了获得单菌落；步骤4是根据能生长的菌株具有耐高糖和耐酸的特性筛选出突变菌。
高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教案2新人教版选修1
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学习目标：知识目标能力目标3.学会用稀释涂布平板法进行微生物数量测定的方法情感、态度与价值观目标1.体验科学知识的形成过程，加深对科学本质的理解2.体会在实验活动中合作学习的有效性，养成严谨的科学态度学习重点和难点：微生物的选择培养、分离、计数等技术的原理和方法教材分析与课时安排：“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”是人教版高中生物（选修1）专题2“微生物的培养与应用”的第二个课题，学生已学习了有关培养基和无菌技术的基本知识，在掌握使用平板划线法和稀释涂布法、分离和纯化微生物的实验操作的基础上，研究培养基对微生物的选择作用，并测定其数量。
其中既有关于特定菌株的选择策略等知识性内容，又有土壤溶液的稀释、菌落数量统计等操作性内容，难度较大、探究性较强，是培养学生设计实验、动手操作等科学探究能力，提高生物科学素养的好素材。
本课题教学实施中的关键在于两点：①教师要处理好知识性内容与操作性内容的关系，要让学生理解特定菌株的选择策略，并学习有关的实验方法和操作程序;②处理好课上与课后的关系。
本课题的实验操作时间不长，但是操作前要制备培养基、对培养基和其他操作用具进行灭菌，操作后的培养时间和对微生物进行观察则需要较长时间，因此需要教师精心设计教学程序，统筹安排教学时间。
根据这一教材特点，本课题教学可分2个课时进行，2个课时之间应留有2 d左右的间隔，以便进行微生物的培养与观察。
本教学设计主要针对第一课时。
教学准备：1. 土壤样品的采集以及土壤溶液的配制为保证实验取得预期效果，应选择经常施用尿素的农田，铲去表土后采集3～8 cm深度范围内的土壤;回实验室后，去除土壤中的植物枯枝败叶及其他杂物，用托盘天平称取样品10 g，加入到盛有90 g无菌水的锥形瓶中，震荡10 min，即制得101土壤溶液;制备完成后可置于冰箱冷藏室内备用（1～2 d）。
配制牛肉膏蛋白胨固体培养基（配方：牛肉膏5 g，蛋白胨10 g，氯化钠5 g，琼脂20 g，加热溶解后，加水定容至1 000 mL。
高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数素材3新人教版选修1
高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数素材3新人教版选修11、研究选择培养基对微生物的选择作用，熟悉常见选择培养基的种类。
2、学会用固体培养基对微生物进行计数，培养严谨求实的科学实验态度。
3、继续熟悉微生物培养的基本操作过程，能根据菌落特点简单地识别常见微生物。
学法指导学习本节课之前首先要收集有关尿素的知识，然后要回顾上节课学习的有关微生物培养和培养基的有关知识；学习选择培养基时要多考虑一些常见的选择培养基，如青霉素选择培养基、高浓度食盐选择培养基等，这样有助于充分理解选择培养基的作用机理；统计菌落数目时，一定要对样品充分稀释，并且要进行多组实验，然后去掉明显不合理的组别，对剩余实验组求平均值，这样能使结果更准确。
整个实验过程中一定要注意无菌操作，这是实验成败的关键，也是同学们最容易忽视的问题。
颜色指示法常用于菌种的鉴定，要熟悉常见菌种的鉴定方法，如常用伊红—美蓝培养基鉴别大肠杆菌。
重点掌握对土样的选取和选择培养基的配置。
诱学导入材料：尿素含氮量46％，是固态氮肥中含氮量最高的一种氮肥。
尿素施入土壤后，以分子态溶于土壤溶液中，并能被土壤胶体吸附，吸附的机理是尿素与粘土矿物或腐殖质以氢键相结合。
尿素在土壤中经土壤微生物分泌的脲酶的作用，水解成碳酸铵或碳酸氢铵。
碳酸铵很不稳定，所以施用尿素应深施盖土，防止氮素损失。
尿素是中性肥料，长期施用对土壤没有破坏作用。
尿素适用于各种土壤和各种作物，它可以作基肥和追肥。
因为尿素的含氮量高，在水解过程中施肥点附近NH+4浓度剧增，使土壤中pH在短期内升高1～2个单位，故会影响种子发芽或幼苗根系的生长，严重时使种子失去发芽能力。
问题：作为重要的氮肥，尿素在土壤中只有被分解才能被植物吸收，土壤中能分解尿素的微生物有哪些呢？怎样分离呢？导入：不能分解尿素的微生物不能在氮源为尿素的培养基上生长，据此可以分离能分解尿素的微生物。
高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数练习新人教版选修1(new)
课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1。
测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数法。
2．稀释涂布平板法常用来统计活菌的数目,但统计结果往往比活菌数目低。
3．为确保结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板上进行计数。
4．只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此可用尿素作唯一氮源的选择培养基分离该细筛选菌株的思路及计数1．筛选菌株的思路（1)自然界中目的菌株的筛选：①依据：根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。
②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的Taq DNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq 细菌中提取出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选：①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等）,同时抑制或阻止其他微生物的生长.②方法：利用选择培养基分离。
a．选择培养基：允许特定微生物生长，同时阻止或抑制其他种类微生物生长的培养基.b．实例：选择分解尿素的细菌的培养基，以尿素作为唯一氮源,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。
2．统计菌落数目(1)常用方法:稀释涂布平板法.①原理错误!②计数原则：一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。
③结果分析：统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。
原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
(2）其他方法：利用显微镜直接计数.1．阅读教材P22第一段旁栏中的相关内容，并思考回答下列问题。
(1）从物理性质上划分，此培养基属于哪类培养基？从功能上划分呢？提示：固体培养基，因为加入了凝固剂琼脂.从功能上看属于选择培养基。
（2）在培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质?提示:碳源主要是葡萄糖，氮源是尿素。
（3）该培养基对微生物是否具有选择作用?如果具有，是如何进行选择的?提示：该培养基对微生物有选择作用。
该培养基以尿素为唯一氮源，只允许能以尿素作为氮源的微生物生长。
2．阅读教材P22中部楷体字部分，思考：哪位同学的结果更接近真实值？他们的实验需要改进吗?如果需要，如何改进？提示:第一位同学只涂布了1个平板，没有设置重复组，因此结果不具有说服力。
2020_2021学年高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件1新
实验方案有两种。一种方案是可以由其他同学用与A同学 一样的土样进行实验，如果结果与A同学一致，则证明A无 误；如果结果不同，则证明A同学存在操作失误或培情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基 是否受到污染。通过这个事例可以看出，实验结果要有说 服力，对照的设置是必不可少的。
2 专题
2 课题
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 （一）
学习目标
知识目标 • 1.简述稀释涂布平板法分离微生物和进行微生物计数的实验原理 • 2.说出选择性培养基和鉴别性培养基的用途 • 3.归纳分离纯化微生物的原理和方法 能力目标 • 1.学会制备土壤样本稀释液 • 2.学会用稀释涂布法将菌样液接种到固体培养基平板 • 3.学会用稀释涂布平板法进行微生物数量测定的方法 情感、态度与价值观目标 • 1.体验科学知识的形成过程，加深对科学本质的理解 • 2.体会在实验活动中合作学习的有效性，养成严谨的科学态度
方案实例：
1.土壤取样从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去 表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备 好的信封中。
2.制备培养基准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养 基牛肉膏蛋白胨培养基可以作为对照，用来判断选 择培养基是否起到了选择作用。稀释倍数为103～ 107。每个稀释度下需要3个选择培养基，1个牛肉膏 蛋白胨培养基，因此共需要15个选择培养基，5个牛 肉膏蛋白胨培养基。此外，还需要准备8个灭菌的试 管和1个灭菌的移液管。
美国黄石国家公园的一个热泉
科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为热泉的 高温条件淘汰了绝大多数微生物，这样也适用于实验 室中微生物的筛选，原理是人为提供有利于目的菌株 生长的条件（包括营养、温度、PH等），同时抑制或 阻止其他微生物生长 ，即选择培养基。
2020高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件新人教版选修1
3．筛选分解尿素的细菌：在选择培养基的配方中，把尿 素作为培养基中 的唯一_氮__源_____，原则上只有能够利用__尿__素____的微生物才能够生长。
死菌、活菌都计算在内
操作较复杂，且有一定误差
每毫升原液含菌数＝(每格平 均菌体数×400)÷计数室容积 ×稀释倍数① 注：①400是常数。
每克样品中的菌株数＝ (C÷V)×M。其中，C表示某 一稀释度下平板上生长的平均 菌落数，V代表涂布平板时所 用的稀释液的体积(mL)，M代 表稀释倍数
知识贴士 (1)间接计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因有两个：①当 两个或多个细菌连在一起繁殖时，平板上观察到的只是一个菌落；②统计结果 只是活细菌产生的菌落数，而不包括死细菌数目。 (2)为使结果接近真实值，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数；要 设置重复组，取其平均值。
用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释 倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是( D )
A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230 B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238 C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163 D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233
〔变式训练1〕 右面是某一课题将用到 的培养基配方，请根据下表回答下面的问 题：
(1)在该培养基的配方中，为微生物提供 碳源的是_葡__萄__糖___，提供氮源的是_尿__素___。
(2)绝大多数微生物能利用__葡__萄__糖____， 但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解 __尿__素____。
高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数练习(含解析)新人教版选修1
高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数练习（含解析）新人教版选修1土壤中分解尿素的细菌的分离与计数[基础全练]1．土壤中的尿素分解菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成( )A．尿素酶B．脲酶C．蛋白酶D．肽酶解析：土壤中的尿素分解菌体内能够产生脲酶，脲酶能够使土壤中的尿素分解为氨。
答案：B2．用以尿素为唯一氮源加入酚红指示剂的培养基，培养细菌后，指示剂将( )A．变蓝色B．变红色C．变黑色D．变棕色解析：细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，会使培养基的碱性增强，pH升高，加入酚红指示剂将变红。
答案：B3．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是( )A．筛选出能分解尿素的细菌B．对分离的菌种做进一步鉴定C．作细菌的营养成分D．如指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素解析：筛选出能分解尿素的细菌用选择培养基即可，不需要加指示剂。
加入指示剂的培养基，目的是对分离的菌种做进一步的鉴定。
答案：B4．用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是( )A．未接种的选择培养基B．未接种的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基C．接种了的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基D．接种了的选择培养基解析：将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因此可用接种了的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。
本实验的变量是培养基种类，其他方面如接种、培养条件等应相同。
答案：C5．下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是( )A．采用稀释涂布平板法统计的菌落数目往往少于实际的活菌数B．当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落C．为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数D．显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法解析：采用稀释涂布平板法获得的菌落有些可能是由两个或多个细菌形成的，所以统计的菌落数目往往少于实际的活菌数，A正确；当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落，B正确；为了保证结果准确，一般选取菌落数在30～300的平板进行计数，C错误；除平板计数法外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法，D正确。
2019_2020学年高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的课件新人教版选修1
3．实验结果分析 教材所给实例中，A同学与其他同学的实验结果相 差很大的原因分析及进一步实验验证如下：
可能原因
所取土 样不同
实验验证
其他同学用与 A同学一样的 土样进行实验
结论
若结果与A同学的一致， 则说明A同学操作正确； 若结果与A同学的不一 致，则说明A同学操作失 误或培养基配制有问题
可能原因
考点二 统计菌落数目的方法及设置对照
1．统计菌落数目的方法 微生物生长量的测定有计数法、重量法、生物指标 法等方法，但是一般使用计数法，计数法可分为直接计 数法和间接计数法。二者的比较如表所示：
项目 原理
直接计数法
间接计数法
利用特定血细胞 计数板，在显微 镜下直接计数一 定容积的样品中 微生物的数量
当样品的稀释度足够高时， 培养基表面生长的一个菌 落，来源于样品稀释液中的 一个活菌。通过统计平板上 的菌落数，就能推测出样品 中大约含有多少活菌
项目 直接计数法 主要用具 显微镜、血细胞计数板 计数依据 菌体本身 优点 计数方便、操作简单
缺点 死菌、活菌都计算在内
每毫升原液含菌数＝ 计算公式 400×104×每小格平均
答案 C
解析 当两个或多个细菌连在一起时，平板上形成 的只是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际 数目少。一般选择菌落数在30～300的平板计数，密度 过大会使计数结果偏小，影响结果的准确性。涂布三个 平板作为重复组，取其平均值计数能增强实验结果的说 服力和准确性。
考点三 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
O4
PO4 ·7H2O 糖 素 脂
1.4 g 2.1 g 0.2 g
10.0 1.0 15. g g 0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至
高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数素材2新人教版选修1
高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数素材2新人教版选修1课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数庖丁巧解牛知识•巧学一、筛选菌株1、PCR技术是一种在体外将少量DNA大量复制的技术，PCR 技术的原理是：如果DNA片段两端的序列是已知的，那么采用PCR 就可以很容易地将此DNA片段从整个DNA分子中扩增出来。
进行PCR需要一段寡聚核苷酸链作为引物，它们各自与要扩增的靶DNA 片段末端互补，引物与模板DNA相结合并沿模板DNA延伸，以扩增靶DNA序列。
PCR技术需要使用耐高温的DNA聚合酶，这种酶要能够忍受93 ℃左右的高温。
深化升华 PCR的过程由三个基本反应组成：（热）变性、复性、延伸，这样构成一个循环的复制，新合成的DNA链又可以作为模板进行下一轮复制，重复3步操作。
DNA片段呈2的指数增长，在1～2小时内可完成25～30次的循环，扩增的DNA片段数可增至106～107倍。
2、选择培养基是指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
二、统计菌落数目1、直接计数法这种方法是指利用特定的细菌计数板或者血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积样品中微生物的数量。
计数板是一块特制的载玻片，上面有一个面积为1 mm2和高0、1 mm 的计数室，该计数室又均分成400个小格。
测量时将稀释的样品滴加在计数板上，盖上盖玻片，然后在显微镜下数出每个小格所含的细菌的平均数，再按下面的公式求出每毫升样品所含的细菌数。
每毫升原液所含的细菌数＝每小格平均细菌数4001 000稀释倍数要点提示此方法的缺点是分不清活菌和死菌。
2、间接计数法稀释涂布平板法，常用来统计样品中的活菌数，此法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个细菌繁殖而成的现象进行的，也就是说一个菌落就代表一个细菌。
计数时先将待测样品进行一系列的稀释，再取一定量的稀释菌液接种在固体培养基上，使其较均匀地分布，经过一段时间的培养后，统计菌落数目，即可求出原液中的细菌数。
高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数素材1新人教版选修1
专题2 微生物的培养与应用课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离
与计数
教材习题点拨
（一）旁栏思考题
1．想一想，如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？
答：统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平均值，然后按课本旁栏的公式进行计算。
2．为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？
答：这是因为土壤中各类微生物的数量（单位：株/kg）是不同的，例如在干旱土壤中的上层样本中：好氧及兼性厌氧细菌数约为2 185万，放线菌数约为477万，霉菌数约为23.1万。
因此，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。
（二）练习
2．提示：反刍动物的瘤胃中含有大量的微生物，其中也包括分解尿素的微生物。
由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌，接触空气后会死亡，因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备选择培养基外，还应参照厌氧菌的培养方法进行实验设计。
1。
《专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》教学设计
《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》教学设计方案（第一课时）一、教学目标：1. 掌握土壤中分解尿素的细菌的分离和计数方法；2. 了解细菌的分类和作用；3. 培养实验操作技能和科学探究精神。
二、教学重难点：1. 教学重点：掌握细菌分离和计数的实验方法；2. 教学难点：实验中可能出现的问题及解决方法，培养周密的科学态度。
三、教学准备：1. 实验用器械：无菌土壤、无菌水、稀释液、涂布器、显微镜、计数板等；2. 实验用试剂和培养基：尿素、琼脂培养基、抗生素等；3. 教师准备教学PPT，介绍细菌分类、作用以及尿素分解菌的介绍；4. 预先设计好实验表格，方便学生记录数据。
课时安排：共2课时，本设计为第一课时。
四、教学过程：1. 导入新课向学生介绍本节课的目标和意义，讲解尿素分解菌在农业、工业和医药等领域的应用，激发学生的兴趣和求知欲。
2. 实验原理讲解向学生介绍实验的背景、目标、方法、步骤和实验原理，包括选择培养基的制备、分离尿素的指示剂的配制、细菌的接种和培养等。
3. 实验操作示范教师进行实验操作示范，包括无菌操作、接种、培养等步骤，并强调实验中的注意事项，如无菌操作、菌落的识别等。
4. 学生分组实验将学生分成若干小组，每组分别进行实验操作，并记录实验结果。
教师巡视指导，纠正学生的错误操作，确保实验的顺利进行。
5. 结果分析与讨论学生根据实验结果进行讨论，分析哪些菌落可能是分解尿素的细菌，并尝试诠释分离到的细菌数量差别的原因。
教师对学生的讨论进行点评和指导，帮助学生更好地理解实验结果和实验原理。
6. 知识拓展介绍土壤中其他类型的细菌及其作用，如分解纤维素的细菌、分解脂肪的细菌等，以及它们在农业、工业和医药领域的应用。
同时，引导学生思考如何利用这些细菌来改善土壤质量、提高农作物的产量和品质。
7. 课后作业与反思要求学生回顾本节课的内容，完成相关作业，思考自己在实验操作和结果分析中存在的问题，并在今后的学习中加以改进。