DNA的粗提取与鉴定好实验流程图
DNA的粗提取和鉴定PPT课件
损失，最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞
液
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讨论：提取鸡血中的DNA时，为什么除去血液 中的上清液？
答：血液分为两部分，一部分是血浆，一部分 是血细胞，离心后除去的上清液是血浆
5、方法步骤
①提取鸡血细胞的细胞核物质
将制备好的鸡血细胞液5 mL～10mL，注入到
50 mL烧杯中。向烧杯中加入蒸馏水20 mL，
3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯 胺可以作为鉴定DNA的试剂
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实验用具：铁架台；铁环；镊子；三角
架；酒精灯；石棉网；载玻片；玻璃棒； 滤纸；滴管；量筒（100ml，一个）；烧 杯；（100ml，一个，50ml、500ml各 二个）；试管（20ml，二个）；漏斗；试 管夹；纱布。
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（四） DNA的析出与鉴定
1、DNA的析出
DNA的析出用的是与滤液体积相等的冷却的酒 精溶液（体积分数为95％），静置2-3min，溶 液中会出现白色丝状物，这就是粗提取DNA。 用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用 滤纸吸取上面的水
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三、实验案例 （一）案例一：以鸡血为实验材料进行DNA的 粗提取 1、鸡血细胞做实验材料的原因
①鸡血细胞核的DNA含量丰富，材料易得
②用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和 离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长
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4、课前准备鸡血细胞液
①过程
取质量浓度为0．1g/ml的柠檬酸纳溶液（抗凝
③析出含DNA的粘稠物
专题DNA的粗提取与鉴定ppt
利用DNA粗提取技术，可对犯罪现场遗留的生物检材进行提取和分析，为刑事侦查提供重 要线索。
亲子鉴定
通过DNA粗提取和基因比对，能够准确地判定亲属关系，为家庭纠纷、遗产继承等问题的 解决提供科学依据。
dna粗提取在生物医学研究中的应用前景
01
疾病诊断与预测
通过DNA粗提取技术，可对疾病相关基因进行快速、准确的检测和分
解决方法
控制好温度、酸度以及机械搅拌程度，使用低温乙醇沉淀法等更稳定的提取方法 ，减少DNA降解的发生。
dna出现污染的原因与解决方法
原因
DNA出现污染可能是由于外界物质进入提取液中，如容器不 干净、试剂未纯化等。
解决方法
使用干净的容器和纯度高的试剂，对提取液进行过滤除杂， 减少污染物质对DNA提取的影响。
专题dna的粗提取与鉴定ppt
xx年xx月xx日
目 录
• 引言 • dna粗提取的基本步骤 • dna粗提取的实验操作流程 • dna粗提取过程中的问题与对策 • dna粗提取的优化方案 • dna粗提取的应用前景和发展方向
01
引言
什么是dna粗提取
从细胞或生物体内提取出DNA分子的过程。 不需要知道DNA的具体序列和结构。
dna提取效率低的原因与解决方法
原因
DNA提取效率低可能是由于多种因素导致，如细胞裂解不完全、蛋白去除不 彻底、方法操作不当等。
解决方法
采用更有效的细胞裂解方法、优化洗涤步骤、使用蛋白酶K处理细胞等措施， 提高DNA提取效率。
dna出现降解的原因与解决方法
原因
DNA出现降解可能是由于提取过程中高温、高酸度、过度机械搅拌等不利条件导 致。
析，为疾病的早期诊断和预测提供帮助。
高二生物dna的粗提取与鉴定
9、DNA的鉴定
用二苯胺（沸水浴）鉴定，DNA遇二苯 胺会变蓝色。
问：2和4过程中都有加入蒸馏水，两次加入的 作用一样吗？为什么？
问：DNA的直径约为2nm，实验中出现的丝状 物的粗细是否就表示一个DNA分子直径的大小？
练习：
1、用蛋白质中含有35S的噬菌体去侵染细菌（细菌 内为32S），则在子代噬菌体的蛋白质的S应为 （）
DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯 胺可以作为鉴定DNA的试剂。
材料：
鸡血细胞液（5-10ml），体积分数为95%的酒精 溶液（冷却），蒸馏水，质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸 钠溶液，物质的量浓度分别为2mol/l和0.015mol/l的氯 化钠溶液，二苯胺试剂
方法步骤：
1、制备鸡血细胞液
4、析出含DNA的黏稠物
沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水，同时轻轻搅拌，这时 会有丝状物出现，随着蒸馏水的加入逐渐增多，一 直到氯化钠浓度约为0.14mol/l时，不再继续增加。
头瓶，随着Ｚ．纽基斯克画师的扭动，肥肠状的仙翅枕头瓶像弯刀一样念动咒语：“七臂哄哩喂，锁孔哄哩喂，七臂锁孔哄哩喂……『黑雾浪仙细雨经文』！党棍！党棍！党 棍！”只见Ｚ．纽基斯克画师的身影射出一片浅黑色幽光，这时西南方向突然出现了五片厉声尖叫的亮红色光蛙，似银光一样直奔浓黑色粼光而来。，朝着月光妹妹清秀流畅
取质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸钠溶液（抗凝剂） 100ml，置于烧杯中，将新鲜鸡血180ml注入，同时 用玻璃棒搅拌，以免凝血，然后倒入离心管中用 1000r/min的离心机离心2min，此时，血细胞沉淀于 离心管的底部，除去上清液，就可以得到鸡血细胞液。
问：提取鸡血中的DNA时，为什么要除 去血液中的上清液？
、宛如泉光溪水般的肩膀乱跳过来。紧；微生物资源中心 https:/// 微生物资源中心；跟着Ｚ．纽基斯克画师也翻耍着咒符像油饼般的怪影一样向月光 妹妹乱跳过来月光妹妹突然精美透明的冰红色水晶靴突然飞出魔棕险境色的椰泥虎动味……光洁秀美、闪着珍珠般光泽的指甲跃出浓哼水晶声和呜喂声……不停旋转闪光的晶 黄色弯月眉心石变幻莫测射出飘梦水晶般的漫舞……接着演了一套，摇羊油条翻一千零八十度外加蛙啸纸条旋七周半的招数，接着又耍了一套，云体羊窜冲天翻七百二十度外 加狂转两千周的艺术招式。紧接着玲珑活泼的美鼻子闪眼间转化颤动起来……似乎总是带着一丝迷人笑意的小嘴唇跃出墨黑色的缕缕丑云……清丽动人、会说话的的秀眉跃出 水青色的点点神热！最后转起秀美挺拔、轻盈矫健的玉腿一旋，威猛地从里面跳出一道银光，她抓住银光悠然地一摆，一件凉飕飕、青虚虚的咒符⊙月影河湖曲＠便显露出来 ，只见这个这件宝器儿，一边紧缩，一边发出“呜呜”的怪声！！猛然间月光妹妹高速地秀了一个滚地振颤颤廊柱的怪异把戏，，只见她犹如云粉色冰莲花般的蓝边渐变裙中 ，猛然抖出五串甩舞着⊙玉光如梦腿＠的深潭玻璃喉雀状的麻袋，随着月光妹妹的抖动，深潭玻璃喉雀状的麻袋像灯柱一样在双腿上华丽地组织出飘飘光罩……紧接着月光妹 妹又使自己青春跃动、渐渐隆起的胸脯萦绕出暗白色的葫芦味，只见她善于跳跃的小脚丫中，轻飘地喷出五片转舞着⊙玉光如梦腿＠的槟榔状的仙翅枕头耙，随着月光妹妹的 旋动，槟榔状的仙翅枕头耙像骷髅一样念动咒语：“雪峰咋 喱，仙子咋 喱，雪峰仙子咋 喱……⊙月影河湖曲＠！姑奶奶！姑奶奶！姑奶奶！”只见月光妹妹的身 影射出一片橙白色银辉，这时偏西方向酷酷地出现了二片厉声尖叫的亮黄色光兽，似佛光一样直奔深橙色余辉而去……，朝着Ｚ．纽基斯克画师细长的极似香肠造型的肩膀乱 跳过去。紧跟着月光妹妹也翻耍着咒符像油饼般的怪影一样向Ｚ．纽基斯克画师乱跳过去随着两条怪异光影的瞬间碰撞，半空顿时出现一道淡黄色的闪光，地面变成了紫宝石 色、景物变成了火橙色、天空变成了深蓝色、四周发出了粗鲁的巨响。月光妹妹清秀流畅、宛如泉光溪水般的肩膀受到震颤，但精神感觉很爽！再看Ｚ．纽基
DNA的粗提取与鉴定好实验流程图
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
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2mol/L
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
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鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
5、过滤→取纱布上的滤物 纱布过滤
6、再次溶解DNA
取滤物
2mol/LNaCl溶液
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鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
选择适宜材料
破碎细胞
DNA的纯化
DNA的溶解和析出
与二苯胺混合，沸水浴，呈现蓝色反应
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1. 下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是
A．氯化钠的浓度越低，对DNA的溶解度越大
B．人血也可代替鸡血进行实验
C．柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂
D．DNA不能溶于酒精
2. 在破碎鸡血细胞时，要先加入20ml的蒸馏水，其作用是
7、加冷酒精使DNA析出（纯化） 冷酒精
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DNA的鉴定
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总结：
实验原理
DNA
的
粗
提
取
DNA粗提取
与
鉴
定
鉴定DNA
DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同 DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同 DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂耐受性不同 DNA与二苯胺呈现蓝色反应
A. DNA溶解于水
B． 血细胞破裂，DNA释放
C．稀释血液，防止凝固
D． 有利于搅拌
3. 若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗
涤剂和食盐，加入食盐的目的是
实验高中生物DNA的粗提取与鉴定
②鸡血细胞极易吸水胀破
1.准备鸡血细胞液 ①过程： 取柠檬酸纳溶液（抗凝剂）100ml，注入新鲜的鸡血 （约180ml），同时用玻璃棒搅拌，使血液与柠檬酸纳溶液充分 混合，以免凝血。 ②柠檬酸钠作用:防止血液凝固
讨论：提取鸡血中的DNA时，为什么除去血液中的上清液？ 获取血液中的血细胞，以及除去血浆中的蛋白质杂质
（3）析出含DNA的粘稠物
（4）滤取含DNA的粘稠物
（5）将DNA的粘稠物再溶解 （6）过滤含有DNA的氯化钠溶液
（7）提取含杂质较少的DNA （8）DNA的鉴定
一.DNA的提取原理 1.DNA的溶解性 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同
当氯化钠的物质的量浓度为 2 mol／L时，DNA的溶解度最大， 浓度为 0．14 mol／L时，DNA的溶解度最低。利用这一原理， 可以使DNA在盐溶液中溶解或析出
③两次析出 第一次：用0.14 mol／L 的NaCI溶液含杂质多 第二次：用冷却的95％的酒精
2.方法步骤 ①提取鸡血细胞的细胞核物质
将制备好的鸡血细胞液5 mL～10mL，注入到50 mL烧杯中。 向烧杯中加入蒸馏水20 mL，同时用玻璃棒充分搅拌5 min，使 血细胞加速破裂。然后，用放有纱布的漏斗将血细胞液过滤至 500mL，取其滤液。 讨论： （1）为什么要加入蒸馏水？加入蒸馏水后细胞会有什么变化？ 让细胞内浓度大于周围溶液的浓度，细胞会吸水以至涨破
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液
1.动物细胞
动物细胞的破碎较易，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水(渗透 作用吸水涨破），同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可 2.植物细胞
①植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解细胞膜.
DNA粗提取和鉴定实验
DNA的粗提取与鉴定实验一、实验原理①DNA主要存在于细胞核②DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的.当NaCl的物质的量浓度为 mol／L时,DNA的溶解度最低.利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出.③DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质可以溶于酒精溶液.利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA.⑷DNA遇二苯胺沸水浴会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂.二、实验材料和用具鸡血细胞液5~10ml；体积分数为95%的冷酒精溶液实验前置于冰箱内冷却24h；蒸馏水；质量浓度为0．１g/ml的柠檬酸纳溶液；质量的浓度分别为2mol/L和0．015mol/L的氯化纳溶液新教材不要求0、015的浓度了,都是用的2mol/L；二苯胺试剂；铁架台；镊子；水浴锅；玻璃棒；滤纸；滴管；量筒100ml,一个；烧杯；1000ml,一个,50ml、100 ml 、500ml 各二个；试管20ml,二个；漏斗；试管夹；纱布.三、课前准备鸡血细胞液取质量浓度为0．1g/ml的柠檬酸纳溶液抗凝剂100ml,置于500ml烧杯中.注入新鲜的鸡血约180ml,同时用玻璃棒搅拌,使血液与柠檬酸纳溶液充分混合,以免凝血.将烧杯中的血液置于冰箱内,精置一天,使血细胞自行沉淀.也可以将血液倒入离心管内,用1000r/min转每分的离心机离心2min,血细胞沉淀于离心管底部.实验时.用吸管除去离心管上部的澄清液,就可以得到鸡血细胞液.四、方法步骤①提取鸡血细胞的细胞核物质将制备好的鸡血细胞液5 mL～10mL,注入到50 mL烧杯中.向烧杯中加入蒸馏水20 mL,同时用玻璃棒充分搅拌5 min,使血细胞加速破裂.然后,用放有1-2层纱布的漏斗将血细胞液过滤至1000mL.取其滤液.②溶解细胞核内的DNA将氯化钠的物质的量浓度为 2 mol/L的溶液40mL加入到滤液中,并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min,使其混合均匀,这时DNA在溶液中呈溶解状态 .③析出含DNA的粘稠物沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水,同时用玻璃棒不停地轻轻搅拌,这时烧杯中有丝状物出现,注意观察丝状物呈什么颜色.继续加入蒸馏水,溶液中出现的粘稠物会越来越多.当粘稠物不再增加时停止加入蒸馏水这时溶液中氯化钠的物质的量浓度相当于 mol／L经验值：需加约570mL蒸馏水,且分多次加入.将溶液中的DNA与其他杂质分离,这一步骤是实验成败的关键.实验中应该缓慢贴壁加入蒸馏水,并轻轻地沿一个方向不停地均匀搅拌,以利于DNA分子的附着和缠绕.④滤取含DNA的粘稠物用放有多层纱布的漏斗,过滤步骤3中的溶液至 500mL的烧杯中,含 DNA的粘稠物被留在纱布上,滤液丢弃.⑤将DNA的粘稠物再溶解取 1个 50 mL烧杯,向烧杯内注入氯化钠的物质的量浓度为 2 mol／L的溶液 20mL.用钝头镊子将纱布上的粘稠物夹至氯化钠溶液中,用玻璃棒不停地搅拌,约3分钟,使粘稠物尽可能多地溶解于溶液中.⑥过滤含有DNA的氯化钠溶液取1个100 mL烧杯,用放有两层纱布的漏斗过滤步骤5中的溶液.取其滤液,DNA溶于滤液中.⑦提取含杂质较少的DNA在上述滤过的溶液中,加入等体积的、冷却的、体积分数为 95％的酒精溶液使用冷却的酒精,对DNA的凝集效果较佳,并用玻璃棒搅拌,溶液中会出现含杂质较少的白色丝状物.用玻璃棒将丝状物卷起,并用滤纸吸取上面的水分.这种丝状物的主要成分就是DNA.⑧ DNA的鉴定取两支20 mL的试管,各加入氯化钠的物质的量浓度为0．015 mol／L的溶液5 mL,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解.然后,向两支试管中各加入4mlL的二苯胺试剂.混合均匀后,将试管置于沸水中加热 5 min,待试管冷却后,观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化.五、讨论①两次使用蒸馏水第一次：细胞吸水胀破第一步第二次：使 DNA黏稠物析出第三步②三次过滤第一次： DNA存在于滤液里第一步第二次： DNA被留在纱布上第四步第三次： DNA存在于滤液里第六步过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关,第二次要用其滤出的黏稠物有关,所以要使用多层纱布,第一次和第三次均要用其滤液,使用的纱布为1－2层③两次析出第一次：用 mol／L 的NaCI溶液含杂质多第三步第二次：用冷却的95％的酒精第七步④六次搅拌：第一、二、三、五、七、八步其中除第八步外,其余均要朝一个方向搅拌,在第三、五步搅动还要轻缓,玻璃棒不要直插烧杯底部,这样才能保证得到完整的DNA为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质答：用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质.因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质在NaCl溶液浓度低于 mol/L时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低；在 mol/L 时,DNA溶解度最小；当NaCl溶液浓度继续增加时,DNA的溶解度又逐渐增大.。
DNA的粗提取与鉴定PCR蛋白质的提取与分离PPT课件
轻缓搅拌。
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⑶.析出含DNA的粘稠物：
在上述溶液中缓缓加入蒸馏水，并沿一个方向轻 轻搅拌，出现丝状物；当丝状物不在增加时，停止加 水（此时NaCl溶液的浓度相当于0.14mol/L）。
⑷.滤取含粘稠物：
用多层纱布过滤，含DNA的粘稠物留在纱布上。
⑸. DNA粘稠物的再溶解： 20mL2mol/L的NaCl溶液 步骤⑷含DNA的粘稠物
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(一) PCR原理
• 体内DNA复制:
• 模板DNA
• 原料: dNTP
• 酶: 解旋酶、DNA pol. …
5.DNA的沉淀和浓缩。
对于除去了蛋白质的DNA的氯化钠溶液，必须再进 一步沉淀和浓缩，常用酒精沉淀法。即往含有Na＋的 DNA溶液，加入体积分数为95%的冷却酒精，混匀后可以 使DNA沉淀、浓缩，形成含杂质较少的DNA丝状物，悬浮 于溶液中。若丝状物较少，可将混合液再放入冰箱中冷 却几分钟即可。浓缩后的DNA丝状物可以用玻棒（玻棒 有吸附DNA的作用）缓缓旋转的方法卷起。
答：前者是溶解DNA，后者是使DNA析出
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3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成( ) A.砖红色 B.橘黄色 C.紫色 D.蓝色
答：D
4.提取鸡血中的DNA时，为什么要除去血液 中的上清液?
答：DNA的提取，关键是对杂质的去除，由于 上清液是血液中的血浆部分，不含DNA，所以 要除去上清液(含有蛋白质)。
蒸馏水
5.滤取含DNA 的黏稠物
6.将 DNA 的黏稠物再溶解 2 mol／L 的 NaCl 溶液 20 mL
7.过滤含DNA 的 NaCl 溶液
8.提取含有杂质较少的DNA 冷却的 95％的酒精50 mL
DNA的粗提取与鉴定_实验报告
⑺.提取含有杂质较少的DNA： 步骤⑹所得的滤液＋体积分数为95%的冷却酒精 50mL，用玻棒沿一个方向轻缓搅拌，溶液中（析出） 出现乳白色丝状物，用玻棒将丝状物卷起，并用滤纸 吸取上面的水分。
3.DNA的鉴定：
加入二苯胺试剂4mL，用玻棒搅拌使DNA溶解， 沸水浴5min，观察溶液是否出现蓝色。
一、实验原理 1.血细胞在蒸馏水中会渗透吸水过度而导致细胞膜和细 胞核膜的破裂。利用此特性可得到含有DNA的溶液。 2.DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的浓度 的变化而改变的。DNA在物质的量浓度为0.14 mol／L 的氯化钠溶液中的溶解度最低，利用这一原理，可以使 溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。 3.DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质则可以溶 于酒精。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少 的DNA。 4.DNA遇二苯胺（沸水浴）会变成蓝色，因此，二苯胺 可以作为鉴定DNA的试剂。
6.将 DNA 的黏稠物再溶解
7.过滤含DNA 的 NaCl 溶液 8.提取含有杂质较少的 DNA
2 mol／L 的 NaCl 溶液 20 mL
⑥
⑦
冷却的95％的酒精50 mL A:(1)向试管中加入 2mol (2)加入 DNA ／L 的 NaCl 溶液 5mL
⑧
9.DNA 的鉴定
(3)4 mL二苯胺试剂 B:(1)向试管中加入 (2)4 mL 二苯胺试剂 2mol ／L 的 NaCl 溶液 5mL
⑨
①加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固
②加速血细胞破裂 ③溶解DNA ④使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得DNA 最大限度地释出 ⑤使含DNA的黏稠物被留在纱布上
⑥使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中
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两种材料的DNA粗提取与鉴定过程
①释放组织细胞中的DNA， ②粗提取DNA， ③将粗提取的DNA进一步纯化， ④鉴定提取物是DNA
以鸡血为材料 以花菜为材料
鸡血细胞
１. 0.1g/ml的柠檬酸钠溶液,按1:2的比例与新鲜鸡血混 合搅拌均匀。 ２.将血液置于冰箱中24小时,弃上部澄清液 ３.取烧杯中的血细胞液约5~10ml加入到100ml烧杯中 ，向烧杯中加入20ml蒸馏水，用玻棒沿一个方向快速 搅拌5分钟，加速血细胞在低渗溶液中的破裂 ４.将2mol/L的氯化钠溶液50ml缓缓倒入烧杯中，用玻 棒沿一个方向搅拌，使DNA溶解于氯化钠溶液中，滤 除杂质，获得粘稠状的鸡血细胞DNA提取液 ５.将鸡血细胞DNA提取液置于较大的烧杯中，沿烧杯 内壁缓缓倒入蒸馏水，并不断搅拌，直到粘稠状DNA 不再析出为止。用玻棒搅拌，使析出的DNA缠绕于玻 棒末端。 ６.将析出的DNA再溶解于2mol/L的氯化钠溶液中。 ７.在DNA的氯化钠溶液中倒入95%的酒精50 ml（冷 却过的酒精效果较好），使DNA再次析出，用玻棒搅 拌，使DNA再次缠绕于玻棒末端。 ８.DNA的鉴定：取两支试管，各加入2ml0.015氯化钠 溶液，将DNA溶解于其中一支试管中，另一支做为对 照组。然后，在两支试管内加等量的二苯胺试剂，水 浴加热10min左右，冷却，观察实验现象。
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
2mol/L
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
5、过滤→取纱布上的滤物 纱布过滤
6、再次溶解DNA
取滤物
2mol/LNaCl溶液源自鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
7、加冷酒精使DNA析出（纯化） 冷酒精
DNA的鉴定
5、洗涤剂等去污剂可以溶解细胞的细胞壁，破坏细 胞膜，同时也能使蛋白质变性；
6、在60—75度条件下加温处理，蛋白质变性，而 DNA结构不会受到破坏，提取纯度较高的DNA 7、二苯胺的沸水浴能使DNA染成蓝色
根据以上原理可设计提取和纯化DNA的方案：
方案一：30mL含DNA的滤液＋2mol/L NaCl→同方向搅拌，DNA溶解→加入蒸 馏水→DNA析出→过滤得到过滤物→放到 2mol/LNaCl溶液中溶解→DNA-NaCl溶 解液 方案二：30mL滤液＋嫩肉粉（木瓜蛋白 酶）→静置10～15分钟→DNA滤液 方案三：30mL滤液→60～75℃恒温保温 10~15分钟→过滤获得DNA滤液
涤剂和食盐，加入食盐的目的是
A. 利于DNA的溶解
B. 分离DNA和蛋白质
C. 溶解细胞膜
D. 溶解蛋白质
4. 在DNA粗提取实验中，向在溶解DNA的NaCl溶液中，不断加
入蒸馏水的目的是
A．有利于溶解DNA
B．有利于溶解杂质
C．减少DNA的溶解度
D．减少杂质的溶解度
DNA
总结：
实验原理
的
粗
提 取
DNA粗提取
与
鉴
定
鉴定DNA
DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同 DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同 DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂耐受性不同 DNA与二苯胺呈现蓝色反应
选择适宜材料
破碎细胞
DNA的纯化
DNA的溶解和析出
与二苯胺混合，沸水浴，呈现蓝色反应
1. 下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是
A．氯化钠的浓度越低，对DNA的溶解度越大
B．人血也可代替鸡血进行实验
C．柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂
D．DNA不能溶于酒精
2. 在破碎鸡血细胞时，要先加入20ml的蒸馏水，其作用是
A. DNA溶解于水
B． 血细胞破裂，DNA释放
C．稀释血液，防止凝固
D． 有利于搅拌
3. 若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗
知识目标
1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA 进行粗提取，了解DNA的物理化学性质。 2、理解DNA粗提取与鉴定的原理。 能力目标 掌握DNA粗提取及鉴定方法，能利用 DNA的性质进行实验设计和操作。 态度观念目标 通过对DNA的粗提取的实验过程的设计 及操作，锻炼科学的思维方法，培养实 事求是的科学态度。
植物组织
１.取新鲜植物组织（菜花） 放置于冰箱中冷却1~2天 ２.取30克植物组织,切碎, 置于研体中,倒入适量洗洁 精,加入适量的NaCl,充分 研磨10分钟 ３.过滤研磨液，取上清夜 置于冰箱中冷却几分钟 ４.取1倍体积的上清液， 加入2倍体积的95%的冷酒 精当中，用玻棒轻轻搅拌 ，沉淀3~5分钟后可见白色 絮状DNA缠绕于玻棒末端 。 ５.DNA的提纯同鸡血细胞 为实验材料的实验操作步 骤6、7，具体数据有一定 的差异。 ６.鉴定
1、鸡血细胞做实验材料，一是因为鸡血细胞核DNA 含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀破。
2、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同， 3、嫩肉粉的主要成分是木瓜蛋白酶，其作用是分解 蛋白质，使提取出的DNA纯度较高 4、预冷的乙醇溶液具有以下优点：一是抑制核酸水 解酶活性，防止DNA降解，二是降低分子运动，易 于形成沉淀析出，三是低温有利于增加DNA分子柔 韧性，减少断裂；