高中生物必修二实验十一 DNA的粗提取与鉴定
高中生物重要实验：DNA的粗提取与鉴定
高中生物重要实验：DNA的粗提取与鉴定考点提示：(1)鸡血能用猪血代替吗?什么缘故?不能，因为哺乳动物的红细胞中没有细胞核，不能提取DNA。
(2)鸡血中为何要加柠檬酸钠?为何要弃去鸡血细胞的上清液?防止血液凝固;因为上清液是血浆，不含细胞和DNA。
(3)胀破细胞的方法?能用生理盐水吗?向血细胞中加入蒸馏水，使细胞大量吸水而胀破;不能用生理盐水，因为血细胞在蒸馏水中不能吸取水分。
(4)该实验中最好应用玻璃烧杯依旧塑料烧杯?什么缘故?最好用塑料烧杯，因为玻璃烧杯容易吸附DNA。
(5)前后三次过滤时，所用纱布的层数分别是多少?什么缘故?第一次用一层纱布，有利于核物质透过纱布进入滤液;第二次用多层纱布，能防止DNA丝状物透过纱布进入滤液;第三次用两层纱布，既有利于D NA透过纱布，又能防止其它杂质透过纱布。
(6)若实验中所得黏稠物太少，其缘故是什么?第一次加蒸馏水过少，细胞未充分胀破;第二次加蒸馏水过多或过少;第一次过滤用了多层纱布;第二次过滤用了一层纱布。
(7)两次加入蒸馏水的目的分别是什么?第一次是为了使血细胞吸水胀破;第二次是为了降低氯化钠的浓度，有利于DNA有析出。
(8)实验中搅拌溶液时，为何总要沿一个方向搅拌?防止DNA分子受到损害。
(9)两次析出DNA的方法分别是什么?原理分别是什么?第一次是加蒸馏水，降低氯化钠的浓度，促使DNA析出;第二次是加入冷酒精，因为DNA不溶于酒精溶液。
(10)三次溶解DNA的液体分别是什么?原理分别是什么?第一次、第二次差不多上用浓度为2mol/L的氯化钠溶液，第三次用的是0.015mol/L(或2mol/L)的氯化钠溶液。
其原理是DNA在氯化钠中的溶解度，是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。
当氯化钠的物质的量浓度为0.1 4mol/L时，DNA的溶解度最低。
2mol/L的氯化钠溶液和0。
015mol/L的氯化钠溶液对DNA的溶解度都比较高。
(11)鉴定DNA时为何要用两支试管?其现象分别是什么?其中不加DNA的试管起对比作用。
DNA的粗提取与鉴定
二、实验原理 2.DNA的分离和提纯
DNA溶于2mol /L的NaCl溶液,但 不溶于冷酒精，细胞中的其它杂 质溶于冷酒精。
二、实验原理 3.DNA的鉴定
DNA与二苯胺作用生成蓝色沉 淀用来鉴定 DNA（沸水浴）
实验步骤
一、取材：香蕉去皮、洗洁精、食盐溶液、95％酒精等
二、DNA的释放、溶解、获取
实验材料
研磨提取粗提取、提纯恒 温 水 浴 加 热实验现象一
实验现象二及比较
作业： 1.如果选用实验材料是鸡的血细 胞，请写出实验操作步骤； 2.你做的实验现象是怎样的？请 分析或推测原因，并拟定证明你 的推测的进一步实验方案。
1.往研钵香蕉加入10mlNaCl溶液和少量的洗洁进行研磨； 2.用漏斗一层纱布过滤，取滤液； 3.往滤液中加入等量的95%的酒精，静置2--3分钟； 4.用玻棒卷起白色絮状物，用吸水红吸去水分后放入试 管，加入4ml 2mol /L的NaCl溶液充分溶解。
三、DNA的鉴定：找实验老师加4ml二苯胺溶液，在 恒温水浴锅加热2--3分钟，观察现象并分析实验结果。
一、实验目标 1.用15分钟左右的时间尝试对
香蕉组织中的DNA进行粗提取； 2.学会用二苯胺对粗提取的DNA
进行鉴定； 3.能对实验结果进行分析评价。
二、实验原理 1.DNA的释放 洗涤剂等去污剂可以溶解香
蕉细胞的细胞壁，破坏细胞膜， 同时也能使蛋白质变性。 （教材P55)洗涤剂能够瓦解细胞 膜,但对DNA没有影响。
高二生物dna的粗提取与鉴定
沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水，同时轻轻搅拌，这时 会有丝状物出现，随着蒸馏水的加入逐渐增多，一 直到氯化钠浓度约为0.14mol/l时，不再继续增加。
着漂亮的白杏仁色玉米一样的地图天石瘪肚眨眼间涌出浅黄色的尸笑瘟疫味……绝种的皮肤射出骷髅龟吼酸吵声和吐哇声……威风的的长裤忽隐忽现喷出鳄耍 动 般的绕动！紧接着淡白色海胆形态的脖子顷刻抖动膨胀起来……威风的手臂射出淡青色的片片奇光……奇特的手指窜出亮红色的飘飘余声。最后耍起奇特的亮红色新 月般的手指一嗥，轻飘地从里面流出一道怪影，她抓住怪影恶毒地一甩，一件怪兮兮、红晶晶的咒符『蓝光晨神烟斗仙诀』便显露出来，只见这个这件神器儿，一边 蜕变，一边发出“哧哧”的仙音。！猛然间女地痞孜崴娃霓姨婆高速地用自己变态的秀发组织出淡黄色奇妙摇晃的烟花，只见她威风的手臂中，突然弹出四十片摆舞 着『褐光鳄魔画笔壶』的仙翅枕头桶状的小旗，随着女地痞孜崴娃霓姨婆的颤动，仙翅枕头桶状的小旗像木偶一样在双腿上风光地窃取出飘飘光罩……紧接着女地痞 孜崴娃霓姨婆又发出八声妖银色的怪异怒叫，只见她时尚的深白色金钩一样的小 旗海光帽中，威 猛地滚出四十道冰茬状的裂谷宝石背熊，随着女地痞孜崴娃霓姨婆的 耍动，冰茬状的裂谷宝石背熊像砂锅一样念动咒语：“土爪咕唉嗟，灯笼咕唉嗟，土爪灯笼咕唉嗟……『蓝光晨神烟斗仙诀』！！！！”只见女地痞孜崴娃霓姨婆的 身影射出一片暗灰色流光，这时西北方向萧洒地出现了八道厉声尖叫的深灰色光鼠，似灵光一样直奔白象牙色妖影而来！，朝着月光妹妹清丽动人、会说话的的秀眉 乱跳过来。紧跟着女地痞孜崴娃霓姨婆也翻耍着咒符像水管般的怪影一样向月光妹妹乱跳过来秀了一个，直体贝颤前空翻三百六十度外加瞎转八十一周的粗犷招式！接着妙丽的玉白色腕花瞬间抖出僵奇双烟色的火舌玉哼味……活泼灵巧 、像小精灵一样可爱的舌头渗出玉闹玛瑙声和嘀嘀声……长长的如同暗黑色熏鹅一样的花生雪川披肩忽亮忽暗跃出天使光跳般的飘动。紧接着思维离奇的精灵头脑骤 然旋转紧缩起来……清秀流畅、宛如泉光溪水般的肩膀渗出紫玫瑰色的隐约冷雾……空灵玉白，妙如仙境飞花般的嫩掌射出亮黄色的缕缕仙味……最后甩起轻灵似风 的玉臂一笑，快速从里面弹出一道灵光，她抓住灵光猛爆地一摇，一件光闪闪、紫溜溜的咒符⊙月影河湖曲＠便显露出来，只见这个这件奇物儿，一边抖动，一边发 出“嘀嘀”的余声……！猛然间月光妹妹高速地用自己美丽的缀满一串闪光星星的桃红色云丝腰带调整出浅绿色欢快闪耀的药瓶，只见她玲珑活泼的美鼻子中，酷酷 地飞出二十团颤舞着⊙绿烟水晶笛＠的仙翅枕
高中生物实验：DNA的粗提取与鉴定
高中生物实验:DNA的粗提取与鉴定
DNA的粗提取与鉴定实验原理
粗提取原理：在NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时，DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而降低;在0.14mol/L时，DNA的溶解度最小;当NaCl溶液浓度继续增加时，DNA溶解度又增大。
扩展资料
纯化原理：DNA不溶于酒精，但细胞中的.某些蛋白质溶于酒精。
鉴定DNA原理：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
实验材料的选择及处理
(1)不选择猪血等哺乳动物的血液，因为哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。
(2)需要在鸡血中加入抗凝剂——柠檬酸钠溶液，防止血液凝固。
(3)需除去鸡血中的血浆，因为血浆中无DNA。
特别提醒：不同生物的组织中DNA含量不同在选取材料时，应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。
DNA的粗提取和鉴定
DNA的粗提取和鉴定设计人；申国华，张钰1、实验原理；遗传物质DNA为白色丝状物，在细胞中与蛋白质结合在一起，绝大部分存在于细胞核中，在浓度较高的氯化钠溶液（物质的量浓度为2mol/L）中，核蛋白容易解聚，游离出DNA。
而DNA在浓度较高的氯化钠溶液中的溶解度很高，钠离子与带负电荷的DNA结合成DNA钠盐，这时DNA在溶液中呈溶解状态。
DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质可以溶于酒精溶液，利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
本实验中鉴定DNA的方法为二苯胺法。
二苯胺法鉴定DNA的原理是：DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成ω-羟基-γ酮基戊醛，它再和二苯胺作用而显蓝色（溶液呈浅蓝色）。
2、目的要求；初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法，观察提取出来的DNA物质。
⒊ 材料用具洋葱，研钵，石英砂，漏斗，纱布，烧杯，玻璃棒，药匙，试管，体积分数为95%的酒精溶液，2mol/L的氯化钠溶液，二苯胺试剂4。
简化实验步骤：⑴称取30克已切碎的洋葱，放入研钵中，加入少量石英砂助研，倒入10mL 2mol/L 的氯化钠溶液，充分研磨。
洋葱含有挥发性刺激物，有效减少刺激，才能使实验顺利进行。
可先将洋葱放入冰箱冷冻一会儿，使其凉透但又不能结冰；或将洋葱切成几大块，放入清水泡一会儿，让其挥发性刺激物溶于水，可以减轻刺激。
然后将洋葱切碎备用。
研磨的目的主要是使洋葱细胞破裂，使DNA溶于2mol/L的氯化钠溶液，没必要将洋葱研成粥糊状，后者既浪费时间又影响实验效果。
研磨时，切忌使用搅拌器（榨汁机）。
使用搅拌器虽可以提高研磨效率，但搅拌器将洋葱切成极细小的颗粒，无法通过过滤将洋葱颗粒剔除。
只能将酒精直接倒入滤液中，许多洋葱小颗粒因为轻会漂浮起来，DNA藏在其中，无法分辨。
⑵研磨后，用漏斗和纱布将汁液过滤到小烧杯中，得到滤液。
⑶向滤液中加入95%的酒精溶液20mL，沿烧杯壁缓缓倒入，不要震动或搅拌。
此时，烧杯中的液体分为上、下两层，下层较浑浊，上层澄清，很快上层溶液中就会有白色纤维状粘稠物析出，用玻璃棒可将其轻轻卷起。
高中生物必背实验：DNA的粗提取与鉴定
2．析出含DNA黏稠物：
加入蒸馏水，用玻璃棒搅拌,过滤
3．将DNA的黏稠物再溶解：
（三）去除滤液中的杂质 方案一:
1．溶解细胞核内的DNA：
加入2mol/L的氯化钠溶液，搅拌，使DNA呈溶解状态,过滤
2．析出含DNA黏稠物：
加入蒸馏水，用玻璃棒搅拌,过滤
3．将DNA的黏稠物再溶解：
加入2mol/L的氯化钠溶液，搅拌，使DNA呈溶解状态
乙酰胆碱受体包括两种:M受体使心脏活动抑制 ；N2受体位于骨骼肌终板膜，导 致骨骼肌兴奋。
同一信号被不同受体识别可产生不同效应。
6、成熟红细胞对钾离子、葡萄糖吸收；小肠 细胞对钾离子、葡萄糖吸收；植物根成熟区 细胞不能吸收大分子有机物。
7、光反应与暗反应的关系？ 有氧呼吸的三步骤反应式？
DNA的粗提取与鉴定
凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但选用DNA 含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大
制备鸡血细胞液：(老师完成)
一、基础知识 （一）提取DNA的方法 4、DNA的鉴定
DNA与二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯 胺可以作为鉴定DNA的试剂
二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计 （一）实验材料的选取
二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液 2、植物细胞
植物细胞需要加入一定的洗涤剂和食盐 如：提取洋葱DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和 食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液 思考：加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？ 洗涤剂能溶解细胞膜，有利于DNA的释放； 食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解
一、基础知识 （一）提取DNA的方法
一、基础知识 （一）提取DNA的方法 1、DNA的溶解性
高中生物试验DNA的粗提取和鉴定试验中应注意的问题
高中生物实验DNA的粗提取和鉴定实验中应注意的问题⑴充分搅拌鸡血细胞液。
DNA存在于鸡血细胞的细胞核中。
将鸡血细胞液与蒸馏水混合后，必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使鸡血细胞加速破裂，并释放出DNA。
⑵沉淀DNA时必须用冷酒精。
实验前必须准备好大量的体积分数为95%的酒精，并在冰箱中至少存放24h。
⑶正确搅拌含有悬浮物的溶液。
实验步骤3、5、7都需要用玻璃棒搅拌。
在进行步骤3、5时，玻璃棒不要直接接触烧杯底部，而且搅拌要轻缓，以便获得较完整的DNA分子。
进行步骤7时，要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间，用手缓慢转动5min〜10min。
本实验中鉴定DNA的方法为二苯胺法。
如果在没有二苯胺的情况下也可以用以下几种方法。
典例解析下列关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验原理中，说法错误的是A.DNA在氯化钠溶液中的溶解度随溶液浓度的变化而改变 B.利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC.DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂D.DNA溶液中加入二苯胺试剂经沸水浴后会出现蓝色反应答案：C下列关于实验操作的说法中，有误的是()A.该实验中有两次加入蒸馏水，均是为了析出DNAB.该实验学生操作中多次用到搅拌，除最后一步未强调方向外，其余均要求单向搅拌C.该实验中有3次过滤，过滤时使用纱布层数与需用滤液或黏稠物有关D.实验三次加入NaCl溶液，无论浓度是2mol/L，还是0.015mol/L，均是为了溶解DNA解析：对照比较表可知，除A说法有误外，其余各项均正确。
两次加蒸馏水，第一次是为了使细胞吸水破裂释放出核物质（DNA），第二次是为了降低NaCl溶液的浓度从而析出DNA。
⑷DNA粘稠物的再溶解：；⑸提取杂质较少的DNA白色乳状丝状物：；⑹鉴定DNA是否存在可用试剂:。
解析：⑹鉴定DNA是否存在常用：二苯胺试剂沸水浴为蓝色反应;也可选用甲基绿试剂，其颜色反应为蓝绿色。
高二生物DNA的粗提取与鉴定
2、 DNA的鉴定
鉴定DNA时在试管中先加入物质的量的浓度为 2mol/L 的NaCl溶液5ml于两只试管中，其中一 只加入DNA丝状物，各加入二苯胺4ml 试剂。 混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min,待试 管冷却后，比较两只试管中溶液颜色的变化，看 看溶解有DNA的溶液是否有蓝色
四、课题成果评价
3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成( ) A.砖红色 B.橘黄色 C.紫色 D.蓝色 答：D 4.提取鸡血中的DNA时，为什么要除去血液 中的上清液? 答：DNA的提取，关键是对杂质的去除，由于 上清液是血液中的血浆部分，不含DNA，所以 要除去上清液(含有蛋白质)。
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2、植物细胞 ①植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解 细胞膜 讨论：加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？
答：洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜， 有利于DNA的释放；食盐的主要成分是NaCl， 有利于DNA的溶解
②实例：提取洋葱DNA时，在切碎的洋葱中加 入一定的洗涤剂和食盐，进行从分的搅拌和研 磨，过滤后收集研磨液
讨论：如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样 的影响？
答：研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全， 提取的DNA量变少，影响实验结果，导致看不到 丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等
（三）去除滤液中的杂质
为了纯化提取的DNA需要将滤液作进一步处理 讨论：此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞 成分？
答：可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂质
1.在DNA的粗提取实验过程中，两次向烧杯 中加入蒸馏水的作用是( )。 A.稀释血液、冲洗样品 B.使血细胞破裂、降低NaCl浓度使DNA析出 C.使血细胞破裂、增大DNA溶解量 D.使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA 答：B 2.实验中NaCl的物质的量浓度为2 mol／L和 0.14 mol／L对DNA有何影响? 答：前者是溶解DNA，后者是使DNA析出
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实验十一 DNA 的粗提取与鉴定教学目的 1． 初步掌握DNA 粗提取和鉴定的方法。
2． 观察提取出来的DNA 物质。
实验原理 1． DNA 在NaCl 溶液中的溶解度是随NaCl 的浓度变化而改变的。
DNA 在0．14mol/L 的NaCl 溶液中的溶解度最低，据此可使溶解于NaCl 溶液中的DNA 析出。
2． DNA 不溶于酒精溶液，但细胞中某些物质可以溶于酒精溶液，据此可提取杂质较少的DNA 。
3． DNA ＋二苯胺−−→−沸水浴蓝色（用于DNA 的鉴定） 实验步骤 1．材料制备 0.1G/ml 柠檬酸钠100ml 500ml 烧杯→玻璃棒搅拌→1000r/min 离心2min →吸去上清液→ 活鸡血180ml 即得鸡血细胞液（也可将上述烧杯置于冰箱中，静置一天使鸡血细胞自行沉淀） 2．方法步骤 取血细胞液5-10ml ＋20ml 蒸馏水，玻璃棒沿一个方向快速搅拌 （1）提取血细胞核物质 纱布过滤，滤液中含DNA 和其他核物质，如蛋白质 原理：血细胞的细胞膜、核膜吸水胀破，玻璃棒快速搅拌机械加速血细胞破裂 （2）溶解核内DNA ：滤液＋2mol/L NaCl 溶液40ml ，玻璃棒沿一个方向搅拌 （3）析出含DNA 的粘稠物：向上述溶液中缓缓加入蒸馏水，并轻轻地沿一个方向搅拌，出现丝状物，当丝状物不再增加时，停止加水（此时NaCl 溶液相当于稀释到0．14mol/L ） （4）滤取含DNA 的粘稠物：用多层纱布过滤，含DNA 的粘稠物留在纱布上 （5）（纱布上的）DNA 粘稠物再溶解： 20ml2mol/L NaCl 溶液 50ml 烧杯， 上述粘稠物 缓慢搅拌3 min （6）过滤含DNA 的2mol/L NaCl 溶液：用2层纱布过滤，滤液中含DNA （7）提取含杂质较少的DNA ：上述溶液＋95%酒精，缓慢搅拌，出现乳白色丝状物，用玻璃棒将丝装物卷起。
（8）DNA 鉴定：实验关键： 本实验成功的关键是获取较纯净的DNA ，因此应注意： 1．充分搅拌鸡血细胞液。
DNA 存在于鸡血细胞核中。
将鸡血细胞与蒸馏水混合以后，应用 玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使血细胞加速破裂，并释放出DNA 2．沉淀DNA 必须用冷酒精。
实验前必须准备好大量95%的酒精，并在冰箱中（5℃以下）至少存放24小时。
3．正确搅拌含有悬浮物的溶液。
在第（3）、（5）步骤，玻璃棒不要直插烧杯底部，且搅拌要轻缓，以便获得较完整的DNA分子。
在步骤（7），要将玻璃棒插入烧杯溶液中间，用手缓慢转动5-10min。
【同类题库】．在“DNA的粗提取与鉴定”的实验中分别使用2mol／L、0．14mol／L、2mol／L、0015mol ／L的氯化钠溶液，其作用分别是（A）A．溶解、析出、溶解、溶解 C．溶解、溶解、析出、溶解B．析出、溶解、析出、溶解 D．溶解、析出、溶解、析出．下列图示中能反映DNA溶解度与NaCI溶液浓度之间关系的是（C）．DNA在下列哪种浓度的NaCl溶液中溶解度最低（B）A．2．00mol/L B．0．14 mol/L C．0．015 mol/L D．0．10 mol/L ．在DNA的粗提取过程中，初步析出DNA和提取较纯净的DNA所用的药品的浓度和名称分别是（B）①0．1 g/ml的柠檬酸钠溶液②2．00mol/L的NaCl溶液③0．14 mol/L的NaCl溶液④体积分数为95%的酒精溶液⑤0．015 mol/L的NaCl溶液⑥0．04 mol/L 的NaCl溶液A．①③⑤B．③④C．②④D．②③④．与析出DNA粘稠物有关的叙述，不正确的是（C）A．操作时缓缓滴加蒸馏水，降低DNA的溶解度B．在操作A时，用玻璃棒轻缓搅拌，以保证DNA分子完整C．加蒸馏水可同时降低DNA和蛋白质的溶解度，两者均可析出D．当丝状粘稠物不再增加时，此时NaCl的浓度约为0.14mol/L.．（多选）下列有关“DNA粗提取”的操作中，正确的是（ABCD）A．在鸡血细胞液中加入蒸馏水B．在“析出DNA粘稠物”时，要缓缓加入蒸馏水，直至溶液中粘稠物不再增多C．在用酒精凝集DNA时，要使用冷酒精D．用玻璃棒搅拌时要沿一个方向．“DNA的粗提取与鉴定实验”中有三次过滤：（1）过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液。
（2）过滤含粘稠物的0.14mol/L NaCl .（3）过滤溶解有DNA的2mol/L NaCl.以上三次过滤分别为了获得（A）A．含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液B．含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、含DNA的滤液C．含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、纱布中DNAD．含较纯的DNA滤液、纱布上粘稠物、含DNA的滤液．为获取较纯净的DNA，采集来的血样可用蛋白酶处理，然后用有机溶剂除去蛋白质。
下列有关叙述，正确的是（D）A．除去血浆中的蛋白质 B．除去染色体上的蛋白质C．除去血细胞表面的蛋白质 D．除去血细胞中所有的蛋白质．在“DNA的粗提取与鉴定实验”中，和“使用蛋白酶从染色体中提取DNA”中的蛋白酶具有相似作用的物质是（D）A．NaCl溶液B．蒸馏水C．柠檬酸钠D．冷却的酒精．DNA不溶于下列何种溶液（D）A．NaCl溶液B．K Cl溶液C．Mg Cl溶液D．酒精溶液．下列不同浓度的NaCl溶液中，使DNA析出最彻底和溶解度最高的是（A）①0.14mol/L ②2mol/L ③0.25mol/L ④0.015 mol/LA．①和②B．②和①C．②和③D．②和④．下列操作中，对DNA的提取量影响较小的是（B）A．使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNA等核物质B．搅拌时，要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动C．在析出DNA粘稠物时，要缓缓加入蒸馏水，直至溶液中粘稠物不再增多D．在用酒精沉淀DNA时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱中冷却E．在DNA的溶解和再溶解时，要充分搅拌．在“DNA的粗提取与鉴定实验”中：（1）实验中两次使用蒸馏水，第一次目的是，第二次目的是。
（2）说明不同浓度的NaCl溶液的作用：2mol/L NaCl的作用；0.14mol/L NaCl的作用；0.015 mol/L NaCl的作用；（3）提纯DNA的原理是，所用试剂为。
搅拌要，目的。
（4）能否用哺乳动物血液代替？简述理由。
[（1）使血细胞吸水破裂，溶解细胞核内的DNA；降低NaCl溶液的浓度，降低DNA分子在NaCl溶液中的溶解度析出DNA分子（2）溶解含DNA的核物质；使含DNA的丝状粘稠物析出DNA分子；进行DNA鉴定（3）DNA不溶于酒精溶液，但细胞中某些盐类蛋白质可溶于酒精溶液；95%的冷却酒精；轻缓、同方向；保持DNA分子的完整性（4）不能，成熟的哺乳动物红细胞没有细胞核]．此实验中有几次用玻璃棒搅拌，每次搅拌的方向是一致的；但每次搅拌的强度不同，请就此予以说明。
（1）提取鸡血细胞核内物质时，应搅拌，目的是。
（2）向含核物质的2mol/L NaCl 溶液滴加蒸馏水析出DNA粘稠物时，应搅拌，目的是。
（3）DNA粘稠物再溶解于2mol/L NaCl 溶液时，应搅拌，目的是。
（4）用95%的冷却酒精提取含杂质较少的DNA时，应搅拌，目的是。
[（1）快速；加速血细胞破裂（2）轻缓；尽量保持DNA分子的完整性（3）轻缓；尽量保持DNA分子的完整性（4）轻缓；保持DNA分子的完整性]．以下是有关DNA的粗提取实验的阅读材料：a．核酸极不稳定，在较为剧烈的化学、物理因素和酶的作用下很容易降解。
在制备DNA 时要加入DNA酶（水解DNA的酶）的抑制剂柠檬酸钠，以除去Mg，防止DNA酶的激活。
b．核酸中的DNA和RNA在生物体内均以核蛋白（由核酸和蛋白质组成）的形式存在，DNA核蛋白在1 mol/L NaCl 溶液中溶解度很大，但在0.14mol/L NaCl 溶液中溶解度很低；而RNA核蛋白溶于0.14mol/L NaCl 溶液。
c．用苯酚处理，可使蛋白质变性，且留在苯酚层内；在DNA溶液中加入2．5倍体积，浓度为95%的酒精，可将DNA分离出来。
此时DNA十分粘稠，可用玻璃棒搅成团取出。
d．DNA在强酸性环境下，水解产生脱氧核糖等小分子物质，它与二苯胺酸性溶液反应，能生成蓝色化合物。
e．实验材料与器械：柠檬酸钠溶液、石英砂、0.14mol/L NaCl 溶液、1 mol/L NaCl 溶液、苯酚、95%的酒精、二苯胺试剂、浓硫酸、花椰菜、研钵、烧杯、漏斗、玻璃棒、量筒、石棉网、酒精灯、吸管、试管等。
以下是DNA粗提取实验的步骤，请根据以上阅读材料回答有关问题：（1）研磨：取10克花椰菜加适量的、和石英砂，研磨成匀浆。
（2）过滤。
（3）将滤液稀释6倍，其目的是：。
（4）离心处理，产生沉淀。
（5）取沉淀物，置于2毫升1 mol/L NaCl 溶液中，使DNA核蛋白再次溶解，再加2毫升苯酚充分震荡后静止，待其分层后弃其上层苯酚。
这一步的目的是除去。
（6）如何将剩余溶液中的DNA提取出来？。
（7）如何证明提取物质确实是DNA分子？。
其实验过程的要点是向放有DNA的试管中加入适量该试剂，混合均匀后，将试管置于中5min，待试管后，观察试管中的颜色变化。
这个实验也说明DNA耐温，前次温度有利于，后次温度则有利于DNA 。
[（1）柠檬酸钠溶液、1 mol/L NaCl 溶液（3）使DNA核蛋白溶解度降低而析出（5）（DNA 核蛋白中的）蛋白质（6）向下层溶液中加2．5倍体积，浓度为95%的酒精，此时用玻璃棒搅动，玻璃棒上成团的物质即是DNA（7）用适量浓硫酸处理提取物，再滴加二苯胺酸性溶液数滴，如有蓝色物质出现即可证明提取物为DNA。
沸水浴；冷却；高；加快染色反应的速度；析出。
]．“DNA的粗提取与鉴定”实验中，A、B、C、D、E五个小组除下表中所列处理方法不同(1)实验材料选择错误的组别是。
其原因是。
(2)实验步骤(不包括实验材料)均正确，但得不到DNA的组别是。
(3)沸水浴中试管颜色变蓝的组别是；蓝色较淡的是，其原因是。
(4)B组实验不成功的最主要原因是。
[(1)C、D 人的血浆中没有细胞结构，成熟的红细胞中没有细胞核，选用这些材料得不到DNA 或得到的DNA很少(2)C (3)A、E A 冷却的酒精对DNA的凝集效果较佳，该组使用的是25℃的酒精(4)菜花细胞在蒸馏水中不能被破坏，得不到DNA(应采用研磨的方法)] ．在“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，有同学按书本知识和自己的思路，试做了如下实验，请你判断实验结果。
(1)他把与柠檬酸钠混合的新鲜血液放在几层纱布上过滤，纱布上最主要的结构是。
(2)他在含有DNA、RNA及蛋白质等的混合物中加入大量的物质的量浓度为2．0mol/L的氯化钠溶液后，通过搅拌后，放在几层纱布上过滤，他得到的滤液中一定含有实验目的中需要提取的成分是。