优质课DNA的粗提取与鉴定
《DNA 的粗提取及鉴定》 讲义
《DNA 的粗提取及鉴定》讲义一、引言DNA 作为生命的遗传物质，承载着生物体的遗传信息。
对 DNA 的研究有助于我们深入了解生命的奥秘、疾病的发生机制以及进行法医学鉴定等。
DNA 的粗提取及鉴定是分子生物学中的基础实验技术，下面我们就来详细了解一下。
二、实验目的1、了解 DNA 粗提取的原理和方法。
2、学习 DNA 的鉴定方法。
三、实验原理1、 DNA 在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同在014mol/L 的氯化钠溶液中，DNA 的溶解度最低。
利用这一特点，可以使 DNA 从细胞中析出。
2、 DNA 不溶于酒精溶液但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，从而可以将 DNA 与蛋白质进一步分离。
3、 DNA 遇二苯胺会呈现蓝色这一特性可用于鉴定 DNA。
四、实验材料和用具1、材料新鲜的鸡血细胞液（也可以使用菜花、洋葱等材料）2、用具研钵、烧杯、玻璃棒、漏斗、纱布、试管、量筒、体积分数为 95%的酒精溶液、2mol/L 的氯化钠溶液、0015mol/L 的氯化钠溶液、二苯胺试剂等。
五、实验步骤1、制备鸡血细胞液将新鲜的鸡血加入抗凝剂，离心或静置沉淀，除去上清液，得到鸡血细胞液。
2、破碎细胞，释放 DNA取 20mL 鸡血细胞液倒入烧杯中，加蒸馏水到 100mL，搅拌均匀。
然后向鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使鸡血细胞破裂，释放出 DNA。
3、去除杂质（1）过滤用纱布过滤含 DNA 的溶液，取滤液。
（2）去除核蛋白向滤液中加入 2mol/L 的氯化钠溶液 40mL，搅拌 1min，使核蛋白充分溶解。
然后缓慢加入蒸馏水，同时轻轻搅拌，直至溶液中氯化钠浓度达到 014mol/L，此时 DNA 会析出，用多层纱布过滤，取纱布上的黏稠物。
4、 DNA 的进一步提纯将上述黏稠物放入 20mL 体积分数为 95%的酒精溶液中，搅拌，使DNA 沉淀。
然后用玻璃棒卷起沉淀，放入试管中。
5、 DNA 的鉴定（1）向两支试管中分别加入 2mol/L 的氯化钠溶液 5mL。
实验05DNA的粗提取与鉴定(原卷版)
专题05DNA 的粗提取与鉴定一、实验原理1．提取DNA的原理利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。
如：(1)DNA在酒精溶液中的溶解性：DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精。
(2)DNA在NaCl溶液中的溶解性：DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，它能溶于2 mol/L 的NaCl溶液。
2．鉴定DNA的原理在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。
二、方法步骤1．称取约30 g洋葱，切碎，然后放入研钵中，倒入10 mL研磨液，充分研磨。
2．去除滤液中的杂质方案一在漏斗中垫上纱布，将洋葱研磨液过滤到烧杯中，在4 ℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液方案二直接将研磨液倒入塑料离心管中，在1 500 r/min的转速下离心5 min，再取上清液3．DNA方案一在上清液中加入体积相等的、预冷的酒精溶液(体积分数为95%)，静置2～3 min，溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA；用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分方案二将溶液倒入塑料离心管中，在10 000 r/min的转速下离心5 min，弃上清液，将管底的沉淀物(粗提取的DNA)晾干4.DNA取两支20 mL的试管，各加入2 mol/L的NaCl溶液5 mL。
将丝状物或沉淀物溶于其中一支试管的NaCl溶液中，再向两支试管中各加入4 mL的二苯胺试剂。
混合均匀后，将试管置于沸水中加热5 min，待试管冷却后，比较两支试管中溶液颜色的变化。
三、操作提示1．以血液为实验材料时，每100 mL血液中需要加入3 g柠檬酸钠，防止血液凝固。
2．加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
四、关键点拨1．利用动物细胞提取DNA时，破碎细胞的方法：动物细胞无细胞壁，可直接使其吸水涨破。
2．不能选用哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料，原因是哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。
《DNA 的粗提取与鉴定》 说课稿
《DNA 的粗提取与鉴定》说课稿尊敬的各位评委、老师：大家好！今天我说课的题目是《DNA 的粗提取与鉴定》。
下面我将从教材分析、学情分析、教学目标、教学重难点、教法与学法、教学过程以及教学反思这几个方面来展开我的说课。
一、教材分析“DNA 的粗提取与鉴定”是高中生物学中的一个重要实验。
本实验通过一系列的操作步骤，让学生亲身体验从细胞中提取 DNA 并进行鉴定的过程，有助于加深学生对 DNA 结构和功能的理解，培养学生的实验操作能力和科学思维。
本节课在教材中的地位十分重要，它不仅是对细胞结构和遗传物质等知识的巩固和拓展，也为后续学习基因工程等内容奠定了基础。
二、学情分析学生在之前的学习中已经掌握了细胞的结构、DNA 的分子结构和功能等相关知识，具备了一定的理论基础。
但对于实验操作和实验原理的理解还不够深入，需要通过本次实验进一步提高实验技能和科学探究能力。
此外，高中生具备了较强的逻辑思维能力和动手能力，但在实验过程中可能会遇到一些操作上的困难和问题，需要教师给予及时的指导和帮助。
三、教学目标1、知识目标（1）理解 DNA 粗提取与鉴定的原理。
（2）说出 DNA 粗提取与鉴定的实验材料和方法。
2、能力目标（1）通过实验操作，培养学生的动手能力和实验技能。
（2）通过对实验结果的分析和讨论，提高学生的逻辑思维能力和分析问题、解决问题的能力。
3、情感目标（1）培养学生严谨的科学态度和实事求是的精神。
（2）激发学生对生物学的兴趣，培养学生的探索精神和创新意识。
四、教学重难点1、教学重点（1）DNA 粗提取与鉴定的原理。
（2）DNA 粗提取与鉴定的实验步骤和操作要点。
2、教学难点（1）去除杂质，提取较纯净的 DNA。
（2）DNA 的鉴定方法和结果分析。
五、教法与学法1、教法（1）讲授法：讲解实验原理、实验步骤和注意事项，使学生对实验有初步的了解。
（2）演示法：通过教师的演示操作，让学生更直观地掌握实验的操作方法和技巧。
实验九DNA的粗提取与鉴定
【实验九】DNA的粗提取与鉴定陈小珺（江西省赣州市第三中学341000）1 教学建议在本实验的教学中，教师应注意以下几点。
1.1 实验材料必须准备充足。
本实验所用的实验材料是鸡血细胞液,由活鸡的鲜血经沉淀后获得。
每组(2个学生)需用5 mL 鸡血细胞液,则每班(50人)至少需要130 mL,而鸡血细胞液与鸡血的体积比为1:3,这样每班至少需要390 mL 鸡血细胞液。
宰杀1只中等大小的活鸡,一般可得120 mL 左右的鲜血,因此,1个班实验需要买4只活鸡。
也可以到市场售活鸡处去索取鸡血,但所带烧杯中必须提前放入抗凝剂。
（每100ml鸡血加入3g柠檬酸钠）1.2 盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。
因为鸡血细胞破碎后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。
1.3 获取较纯净的DNA的关键步骤。
1.3.1 充分搅拌鸡血细胞液：将鸡血细胞液与蒸馏水混合以后,必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞加速破裂,并释放出DNA。
1.3.2沉淀DNA时必须用冷酒精：体积分数为95%的酒精在冰箱中至少存放24 h。
1.3.3正确搅拌含有悬浮物的溶液实验步骤3、5、7,都需要用玻璃棒搅拌。
教师应提醒学生注意,在进行步骤3、5时,玻璃棒不要直插烧杯底部,而且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA 分子。
进行步骤7时,要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间,用手缓慢转动5 min。
2 实验原理的补充介绍2.1 DNA的释放本实验用鸡血细胞做实验材料有两个原因。
一是因为鸡血细胞核的DNA 含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀破。
DNA位于鸡血细胞的细胞核中,正常情况下不会释放出来。
为了使DNA从细胞核中释放出来,实验中采用了向鸡血细胞液中加入蒸馏水并且搅拌的方法。
蒸馏水对于鸡血细胞来说,是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞破裂。
高二生物教案设计：DNA的粗提取与鉴定
高二生物教案：DNA的粗提取与鉴定【导语】高二一年,强人将浮出水面,鸟人将沉入海底。
高二重点解决三个问题:一,吃透课本;二，找寻适合自己的学习方法；三，总结自己考试技巧，形成习惯。
为了帮助你的学习更上一层楼，高二频道为你准备了《高二生物教案：DNA的粗提取与鉴定》希望可以帮到你！【篇一】目的要求1.了解实验原理。
2.学会DNA的粗提取和鉴定的方法，观察提取出来的DNA物质。
3.通过本实验培养实验操作能力和观察能力。
实验原理1.DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。
当NaCl的物质的量浓度为0.14mol／L时，DNA的溶解度最低。
利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。
利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA.3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
注意事项1.步骤3析出含DNA的黏稠物中，蒸馏水要沿烧杯内壁缓缓加入，不能一次快速倒入。
2.实验中有多个步骤都要用玻璃棒进行搅拌，但是在不同的步骤中玻璃棒的用法不同。
实验用具鸡血细胞液(5～10mL)；体积分数为95％的冷酒精，蒸馏水，质量浓度为0.1g／mL的柠檬酸钠溶液，物质的量浓度分别为2mol／L 和0.015mol／L的NaCl溶液，二苯胺试剂；烧杯(100mL，1个，50mL，500mL，各2个)，漏斗，试管(2020，2个)，玻璃棒，滴管，量筒(100mL，1个)，纱布，镊子，滤纸，铁架台，铁环，三角架，酒精灯，石棉网，载玻片，试管夹。
课前准备制备鸡血细胞液，方法是：将质量浓度为0.1g／mL的柠檬酸钠溶液100mL，置于500mL烧怀中，注入新鲜的鸡血(约180mL)，用玻璃棒搅拌，使其充分混合，以免凝血。
静置于冰箱内一天，使血细胞自行沉淀。
(也可以用离心机离心2min(转速1000转/分)。
dna的粗提取与鉴定
dna的粗提取与鉴定DNA的粗提取与鉴定一、粗提取粗提取的方法是通过物理和化学方法从一个或多个生物样品中提取DNA样品，通常是为了进行DNA分子生物学分析、基因组学以及其他科学研究。
1. 用拆解液拆解细胞使用拆解液拆解细胞是最常用的粗提取DNA技术。
主要使用的拆解液有Tris-EDTA（TE buffer）、Cetyltrimethyl ammonium bromide （CTAB）、Sarkosyl（SDS）和NaOH溶液等。
各种拆解液的比例和温度可以根据每个实验的要求进行调整。
2. 用磁珠或磁性分选器抽提也可以使用磁珠或磁性分选器来抽提DNA样品。
这种方法可以从多种生物样品中提取DNA，如血清、血浆、细胞粗提物以及血液细胞等。
磁珠抽提的原理是利用磁性珠子来吸附DNA样品，而磁性分选器则是利用磁场将DNA分离出来。
磁珠抽提的优点是简单快捷，缺点是提取的DNA质量不够高。
3. 改良的拆解方式一些改良的拆解方式可以用来考察某一特定细胞类型。
这些方法包括冷冻破碎、湿热破裂、极限温度破裂和化学破裂等。
这些技术可以有效地提高蛋白质和DNA的提取效率，但缺点是需要较高的技术要求，而且操作步骤较多，比较耗时。
二、DNA的鉴定DNA的鉴定是指用特定的方法和技术，明确某个DNA样品的鉴定。
常见的DNA鉴定技术有定性分析、定量分析和活性检测等。
1. 定性分析定性分析是指对DNA样品进行定性鉴定，识别出它们是哪种DNA，以确定其基本性质。
常用的定性分析方法有紫外光检测和酶切检测等。
紫外光检测是将DNA浓度调整至1μg/ml，然后放置在紫外光228纳米的紫外灯管（UV lamp）下，通过分析紫外光吸收光谱来鉴定DNA 样品。
酶切检测是将DNA样品与特定的酶进行反应，用来分析DNA的特征。
常用的酶有限制性内切酶（restriction enzymes），例如EcoRI、BamHI、PstI和HindIII等。
2. 定量分析定量分析是指对某一DNA样品的浓度和数量进行测量，以了解其容量。
DNA的粗提取与鉴定
DNA的粗提取与鉴定
方法步骤：
1.溶解鸡血细胞核内的DNA
取一个125mL烧杯，注入15mL蒸馏水，注入1mL制备好的鸡血细胞液，用玻璃棒沿顺（或逆）时针方向快速搅拌5min，血细胞吸入大量水分而被胀破（搅拌加速破开裂），释放出DNA。
向烧杯中注入20mL 2mol/L的NaCl溶液，用玻璃棒沿顺（或逆）时针方向搅拌1min，混合均匀，DNA溶解。
2.析出含DNA的粘稠物
取150mL蒸馏水，沿烧杯壁缓慢加入，同时，用玻璃棒沿顺（或逆）时针方向缓慢不停地搅拌，大量含DNA的粘稠物逐渐析出，并吸附在玻璃棒周围，此时，溶液中NaCl浓度为0.14mol/L.
3.洗涤粘稠物——提取含杂质较少的DNA
取一个100mL的烧杯，注入25mL 95%酒精（常温），持玻璃棒连同吸附的粘稠物转移到注入酒精的烧杯中，沿顺（或逆）时针方向搅拌1—2min，血色及大部分杂质被洗去，缠绕在玻璃棒上的丝状物，其主要成分是DNA（含杂质较少）。
4.DNA的鉴定
取两只试管，分别加入2mL 0.015mol/L NaCl溶液，1号试管中加入丝状物，用玻璃棒搅拌，混合均匀，两只试管中分别加入2mL二苯胺试剂，振荡，水浴3min，1号试管变深蓝色（说明DNA 的量多），冷却后蓝色略深，2号试管无颜色变化。
注意：操作步骤2中搅拌不能快，以免析出的粘稠物被搅碎，搅拌后难以进行后面的操作。
《DNA 的粗提取及鉴定》 教学设计
《DNA 的粗提取及鉴定》教学设计一、教学目标1、知识目标（1）理解 DNA 粗提取和鉴定的原理。
（2）了解 DNA 在细胞中的存在部位和提取的方法。
2、能力目标（1）通过实验操作，培养学生的动手能力和实验技能。
（2）学会分析实验现象，得出正确的实验结论。
3、情感目标（1）体验科学探究的过程，培养学生严谨的科学态度。
（2）激发学生对生物学的兴趣，培养学生的创新意识。
二、教学重难点1、教学重点（1）DNA 粗提取的原理和方法。
（2）DNA 鉴定的方法和实验操作。
2、教学难点（1）DNA 粗提取过程中去除杂质的方法。
（2）实验操作的规范性和准确性。
三、教学方法讲授法、实验法、讨论法四、教学准备1、实验材料和试剂鸡血细胞液、柠檬酸钠溶液、蒸馏水、2mol/L 的氯化钠溶液、体积分数为 95%的酒精溶液、二苯胺试剂、研钵、漏斗、纱布、玻璃棒、烧杯、试管、离心机等。
2、多媒体课件五、教学过程1、导入新课通过播放一段关于 DNA 鉴定在刑侦案件中的应用视频，引起学生的兴趣，从而引出本节课的主题——DNA 的粗提取及鉴定。
2、讲解 DNA 粗提取的原理（1）DNA 在氯化钠溶液中的溶解度是随着氯化钠浓度的变化而改变的。
当氯化钠的物质的量浓度为014mol/L 时，DNA 的溶解度最低。
利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的 DNA 析出。
（2）DNA 不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精溶液。
利用这一原理，可以进一步提纯 DNA。
3、实验步骤（1）制备鸡血细胞液在鸡血中加入柠檬酸钠溶液，防止血液凝固。
将血液倒入离心管中，离心后去除上清液，留下鸡血细胞液。
（2）提取细胞核物质向鸡血细胞液中加入蒸馏水，使细胞吸水涨破，释放出细胞核物质。
（3）溶解 DNA向溶液中加入 2mol/L 的氯化钠溶液，搅拌，使 DNA 溶解。
（4）析出 DNA缓慢加入蒸馏水，使氯化钠溶液的浓度降低至 014mol/L，这时DNA 会析出。
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DNA的析出 将溶液中的DNA与其他杂质分离，这一步骤 是实验成败的关键。 加蒸馏水降低NaCl溶液浓度，使DNA析出。
实验中应该缓慢贴壁加入蒸馏水，并轻轻地沿一 个方向不停地均匀搅拌，以利于DNA分子的附着和缠 绕。同时应注意控制加水量，使NaCl溶液的始终浓度 为0.1～0.2 mol/L。加水太多、溶液过稀，会使DNA 分子又重新溶解。
思考：加入蒸馏水的目的是什么？ 加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂)，从而释放出DNA
思考题：搅拌的目的（注意应沿一个方向快速搅拌，但也不能过快过猛， 防止打碎DNA ）
加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂)，从而释放出DNA 思考：这个步骤过滤获得什么？ 获得含核物质的滤液（获取含DNA的滤液）（注意：此时释放 出来的大量DNA和RNA往往与蛋白质结合在一起，应用3——4 层纱布进行过滤，除去一些颗粒较大的杂质） 思考：滤液中可能含有哪些细胞成分？ 可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂质（为了纯化提取的DNA需要 将滤液作进一步处理）
⑵ DNA不溶于酒精溶液 利用这一特点，
选择适当的盐浓度 就能使DNA充分溶解， 而使杂质沉淀； ⑶ DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 或者让其他成分溶解， DNA析出
在 NaCl 溶 液 浓 度 低 于 0.14 4、DNA的溶解性 当氯化钠的物质的量浓度为
2 mol/L 时 ， DNA 的 溶 解 度 随 mol ／ L 时， DNA 的溶解度最大， DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的 NaCl溶液中溶解度不 NaCl溶液浓度的增加而逐渐 浓度为 0．14 mol／L时，DNA 降 低 ； 在 0.14 mol/L 时 ， 的溶解度最低。利用这一原理， 同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使 DNA充分溶解， DNA 溶解度最小；当 NaCl 溶 可以使 DNA 在盐溶液中溶解或 液浓度继续增加时， DNA 的 析出 而使杂质沉淀，或者相反 溶解度又逐渐增大。
• 使DNA黏稠物充分溶解在2mol/LNaCl溶液中
• 第五次搅拌体积分数为95%的酒精
卷起DNA丝状物，获取含杂质较少的DNA
本实验两次用蒸馏水
第一次：加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂)，从
而释放出DNA
第二次：调节NaCl溶液物质的量为0．14mol/L，使 DNA黏稠物最大限度的析出
①根据DNA在NaCl溶液中的溶 ②如何通过控制 NaCl溶液的浓 解度曲线图，思考在什么浓 度使 DNA 在盐溶液中溶解或析 度下 ， DNA 的溶解度最小？ 出？ DNA在NaCl溶液中的溶解度是 如何变化的？
⑵ DNA不溶于酒精溶液
DNA不溶于酒精溶液， 但细胞中某些蛋白质则溶于酒精。 将DNA与蛋白质进一步分离。
溶解丝状物的溶液变为蓝色
三、操作提示
1 、以血液为实验材料时，每100ml血 液中需要加入 3g 柠檬酸钠，防止血液 凝固。 2、加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和， 否则容易产生大量的泡沫，不利于后 续步骤的操作。加入酒精和玻璃棒搅 拌时，动作要轻缓，以免加剧 DNA 分 子的断裂，导致 DNA 分子不能形成絮 状沉淀。 3、二苯胺试剂要现配现用，否则会影 响鉴定的效果。
2.用冷酒精浓缩和沉淀DNA时，所用的95%的酒精必须经过预冷后才 能使用
3.在用玻璃棒搅拌时，玻璃棒不能直接插烧杯底部，并且搅拌要轻 缓，以便获得较完整的DNA分子
4.由于玻璃表面带电荷，DNA中的磷酸基业带电荷而被吸附于玻璃 表面，故实验中用塑料杯和试管可减少损失
实验现象不明显的原因分析
1.材料中核物质没有充分释放出来，如研磨不充分或蒸馏水的量不够
获得DNA黏稠物。除去溶液中的杂质
为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？
1、用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除
去在高盐中不能溶解的杂质；
2、用低盐浓度使DNA析出，能除去溶
解在低盐溶液中的杂质。
因此，通过反复溶解与析出DNA，就能
够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。
讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？
2.加入酒精后摇动或搅拌时过猛，DNA被破坏
3.二苯胺配制时间过长，变成浅蓝色，影响鉴定效果 4.析出含DNA的黏稠物时，蒸馏水一次快速加入，影响实验结果
5.实验中有多次搅拌，但是其目的及操作方法是不同的，操作时不注 意区分，影响实验结果（注意：搅拌都沿一个方向进行）
加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂)，从而释放出DNA
• 第二次搅拌加2mol/LNaCl溶液的滤液
• 目的是使DNA充分溶解在2mol/LNaCl溶液中
• 第三次搅拌加蒸馏水至0.14mol/LNaCl溶液
• 稀释NaCl溶液,析出DNA黏稠物
• 第四次搅拌放入2mol/LNaCl溶液中纱布上的粘稠物
⑶ DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 ① 蛋白酶——水解蛋白质， 对DNA没有影响 ② 高 温——大多数蛋白质不能忍受60～80℃ 而DNA在80℃以上才会变性
③ 洗涤剂——瓦解细胞膜， 但对DNA没有影响
（二）DNA的鉴定 试剂： 二苯胺 条件： 沸水浴 现象： 沸水浴条件下， DNA与二苯胺反应呈现蓝色
（三）除去滤液中的杂质
1. DNA的溶解性
方案一、在滤液中加入NaCl，使NaCl溶液浓度为 2mol/L，过滤除去不溶的杂质，再加入蒸馏水，调节 NaCl溶液浓度为0.14mol/L，析出DNA，过滤除去溶 液中的杂质，再用2mol/L的NaCl溶液溶解DNA。
思考：加入2mol/L的NaCl溶液，搅拌1min，注意应沿一个方向， 目的是？ 目的是使DNA充分溶解 思考：过滤溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液，获得什么？ 含DNA的滤液 思考：这一步过滤的目的是？
讨论：为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？
答：蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗溶液，水分 可以大量进入血细胞内，使血细胞胀裂，再加上搅拌 的机械作用，就加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核 膜的破裂)，从而释放出DNA。
2、植物细胞 ① 植 物 细 胞 需 要 先 讨论：加入洗涤剂和食 用 一 定 的 洗 涤 剂 溶 盐的作用分别是什么？ 解细胞膜
但是，选用DNA含量相对较高的组织，成功的可 能性更大
材料：新鲜的鸡血（注意要加入柠檬酸钠，防止血液凝固）
思考题：能否选用牛、羊、猪红细胞血做实验材料？为什么？
不能。因为哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液
1、动物细胞
动物细胞的破碎较易，以鸡血为例，在鸡血细胞 液中加入一定量的蒸馏水 ，同时用玻璃棒搅拌， 过滤后收集滤液即可
注意：在析出DNA的黏稠物时，要缓缓加蒸馏水，直至 溶液中黏稠物不再增加
思考：加蒸馏水的目的是？ 调节NaCl溶液物质的量为接近0．14mol/L，使DNA黏 稠物最大限度的析出 思考：这一步搅拌的目的是？（轻轻地沿一个方向不停地均与搅拌） 稀释NaCl溶液,析出DNA黏稠物
思考：这一步过滤含DNA黏稠物的0．14mol/L的 NaCl溶液，获得什么？ 获得DNA黏稠物（ 纱布上的DNA黏稠物） 思考：过滤的目的？
②实例：提取洋葱 DNA 时，在切碎的洋 葱中加入一定的洗涤 剂和食盐，进行充分 的搅拌和研磨，过滤 后收集研磨液
答：洗涤剂是一些离子去 污剂，能溶解细胞膜，有 利于DNA的释放；食盐的 主要成分是NaCl，有利于 DNA的溶解
讨论：如果研磨不充分，会对 实验结果产生怎样的影响？
答：研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全， 提取的DNA量变少，影响实验结果，导致看不到丝 状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等
方案二：利用蛋白酶分解杂质蛋白，使提取的DNA 与蛋白质分开；
方案三：利用DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，
使蛋白质变性，与DNA分离
（四） DNA的析出与鉴定
1、DNA的析出 与滤液体积相等的冷却的酒精溶液(体积分数95％)， 静置2－3min，溶液中会出现白色丝状物
——粗提取DNA
用玻璃棒沿一个方向搅拌， 卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水
二、实验设计
（一）实验材料的选取 （二）破碎细胞，获取含DNA的滤液 （三）除去滤液中的杂质(纯化) （四） DNA的析出与鉴定
（一）实验材料的选取 从下列材料中选取2～3种
菜花、香蕉、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜； 鱼卵、猪肝、鸡血、哺乳动物的红细胞；
在液培养基中培养的大肠杆菌
凡是含有DNA的生物材料都可以考虑 原则：
一、基础知识
（一）提取DNA的方法
1.提取生物大分子的基本思路
选用一定的物理或化学方法，分离具有 不同物理或化学性质的生物大分子
2.提取DNA的基本思路（DNA的粗提取）
利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在 物理和化学性质方面的差异，提取DNA， 去除其他成分。
3.DNA等大分子的理化性质 ⑴ DNA的溶解性 DNA和蛋白质等其他成 分在不同浓度的NaCl溶 液中溶解度不同
本实验中有三次过滤 ,获得什么？ • ⑴过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液 • 获得含核物质的滤液 • ⑵过滤含粘稠物的0.14mol/LNaCl溶液 • 获取纱布上的DNA粘稠物 • ⑶过滤溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液 • 得到含DNA的滤液
实验中有五次用玻璃棒搅拌?分别有什么作用?
• 第一次搅拌加蒸馏水的鸡血细胞液
思考：搅拌的目的(玻璃棒朝一个方向缓慢、均匀地搅拌) 卷起DNA丝状物，获取含杂质较少的DNA
2. DNA的鉴定
⑴ 向两支试管中分别加入 2mol/L NaCl 溶液5ml
⑵ 其中一支试管中加入DNA丝状物，用玻璃棒搅拌，使 丝状物溶解
⑶ 向两支试管中各加入二苯胺试剂4ml ⑷ 混匀后，置于沸水浴中加热5min ⑸ 待试管冷却后，比较两只试管中溶液的颜色变化 观察现象：