[医学]第六章 化学毒物的一般毒性作用-亚慢性和慢性毒性
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第六章 一般毒性3.6
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(六) 观察时间和周期
测定外源化学物的 LD50(LC50) ，一般要 求计算实验动物接触化学物之后两周 （14天）内的总死亡数 对于一些速死性化学物求其 LD50(LC50) 也可仅计算24小时的死亡率
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四、急性毒性分级和评价
急性毒性试验主要目的之一是对化学物的急 性毒性进行分级，评价化学物的急性毒性强 弱，用于比较其急性毒性大小。 WHO于2003年公布《全球化学品统一分类和 标签制度》（ GHS ）， 2005 年修订， 2008 年 GHS将全面实施。 GHS 对急性毒性分级以 LD50/LC50 值为依据 划分。
在观察期间应注意观察其体重变化。
这有助于了解受试化学物所致的中毒 效应是短暂的或较长期的效应
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4.病理检查和其它指标观察
应当重视病理组织学检查
凡中毒死亡动物应及时解剖做病理学检查，
检查器官有无充血、出血、水肿或其它改变， 并对有变化的脏器作病理组织学检查
对存活动物于观察期结束后应做病理学检查
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3.性别
急性毒性试验所用的动物应当是雌、雄
各半
如果在研究中发现待测化学物对雌、雄
动物的毒性大小有明显差异时，应分别 求出雌性与雄性动物各自的LD50值
如果试验是为致畸试验作剂量准备，也
可仅做雌性动物的LD50试验
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4．实验动物分组和数量
在利用不同的方法测定化学物LD50时，
实验设计中对动物数的要求不同
狗
5～15 2～5 5～15 3～10
40
0.1～0.2 0.2～0.5 0.2～0.5 0.2～0.5 0.1～0.5 1～2 0.5～1 1～5 0.5～2
第六章 化学毒物的一般毒性作用
可反映急性阈剂量距离LD50的宽窄，
即表示引起实验动物的死亡剂量与最低毒
作用剂量之间剂量范围的宽窄。其越大，
表示化学物引起急性死亡的危险性越小。
(三) 其它上、下限指标 LD84/LD16(或LC84/LC16)： 灵敏性好、重复性强而且容易求。 剂量反应曲线斜率 ( 即剂量 - 死亡曲线的概率单位直线的斜 率)。图
2．是化学物毒理学安全性评价和危险度评 定的基础； 3．对防治化学毒物中毒、制订标准以及管 理毒理学等有重要意义。
第一节 急性毒性作用及其评价
一．基本概念 急性毒性(acute toxicity) 是指机体 ( 人或实验动物 ) 一次接触或 24小时内多次接触化学物后在短期(最长到 14天)内所发生的毒性效应，包括一般行为、 外观改变、大体形态变化以及死亡效应。
对人可能致死的剂量 g/kg <0.05 0.05~ 0.5~ 5~ >15 总量 （g/60kg） 0.1 3 30 250 >1000
剧毒 高毒 中等毒 低毒 实际无毒
表 6-3 化学物质急性毒性(LD50)剂量分级 ___________________________________________________________________ 级 别 大鼠口服 LD50 相当于人的致死剂量 (mg/kg) __________________________ mg/kg g/人 ___________________________________________________________________ 极 毒 < 1 稍尝 0.05 剧 毒 1 ～ 50 500 ～ 4000 0.5 中 等 毒 51 ～ 500 4000 ～ 30000 5 低 毒 501 ～ 5000 30000 ～ 250000 50 实际无毒 5001 ～ 15000 250000 ～ 500000 500 无 毒 > 15000 > 500000 2500 ____________________________________________________________________ 引自 GB15193.3-94 食品安全性毒理学评价程序和方法
即表示引起实验动物的死亡剂量与最低毒
作用剂量之间剂量范围的宽窄。其越大，
表示化学物引起急性死亡的危险性越小。
(三) 其它上、下限指标 LD84/LD16(或LC84/LC16)： 灵敏性好、重复性强而且容易求。 剂量反应曲线斜率 ( 即剂量 - 死亡曲线的概率单位直线的斜 率)。图
2．是化学物毒理学安全性评价和危险度评 定的基础； 3．对防治化学毒物中毒、制订标准以及管 理毒理学等有重要意义。
第一节 急性毒性作用及其评价
一．基本概念 急性毒性(acute toxicity) 是指机体 ( 人或实验动物 ) 一次接触或 24小时内多次接触化学物后在短期(最长到 14天)内所发生的毒性效应，包括一般行为、 外观改变、大体形态变化以及死亡效应。
对人可能致死的剂量 g/kg <0.05 0.05~ 0.5~ 5~ >15 总量 （g/60kg） 0.1 3 30 250 >1000
剧毒 高毒 中等毒 低毒 实际无毒
表 6-3 化学物质急性毒性(LD50)剂量分级 ___________________________________________________________________ 级 别 大鼠口服 LD50 相当于人的致死剂量 (mg/kg) __________________________ mg/kg g/人 ___________________________________________________________________ 极 毒 < 1 稍尝 0.05 剧 毒 1 ～ 50 500 ～ 4000 0.5 中 等 毒 51 ～ 500 4000 ～ 30000 5 低 毒 501 ～ 5000 30000 ～ 250000 50 实际无毒 5001 ～ 15000 250000 ～ 500000 500 无 毒 > 15000 > 500000 2500 ____________________________________________________________________ 引自 GB15193.3-94 食品安全性毒理学评价程序和方法
毒理学 第六章-一般毒性作用(人卫)
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6. 生理与健康状况
健康、未产未孕 给药前检疫观察 大、小鼠、兔、豚鼠1周，犬、猴2~3周 ①适应新环境，减少环境和生理条件变化可 能对试验结果的影响 ②筛检健康状况不符合试验要求的动物
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（二） 染毒方式
最常用的染毒途径为经口、经呼吸道、经皮及注射途径。 ❖ 工业化学物：经皮肤和呼吸道 ❖ 农用化学物：经口、经皮肤和呼吸道 ❖ 药品：经口和注射 ❖ 食品：经口 ❖ 环境污染物：经口、皮肤和呼吸道
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3.急性毒性分级法 （acute toxic class method）
选用剂量(25、200、2 000 mg/kg)之一，单性别3只动物进 行试验，确定动物的生死后再进行下一步试验。 有3种可能的结局：
a. 不需进一步试验即可分级， b.下一阶段以相同剂量再做另一性别试验， c.下一阶段以较高或较低的剂量水平进行。 根据在某一染毒剂量下，死亡发生的数量来判定大致的 LD50值范围，直接进行危害评估和毒性分级。
有关急性毒性试验设计及方法
曲线拟合：概率 单位法，即Bliss 法
插值法：寇氏法
中，不正确的是
A．采用寇氏法和 Bliss 法一般 设5～8组 B．寇氏法和 Bliss 法一般以
一般设5～8个剂量 组；霍恩法固定设4 个剂量组。
i=(LD100 –LD0 )/(n-1)公式计算 组距 C．使用霍恩氏法固定设4个剂 量组
种属和品系
性别、年龄、体重
微生物学等级 饲养环境
动物数目 实验前处理
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实验动物
种属和品系 首选大鼠 还需选择一种非 啮齿动物：狗
性别、年龄、体重
雌雄各半 刚成年、健康、未曾 交配和受孕的动物
大鼠180～240g 小鼠18～25g 家兔2～2.5kg
第六章 化学毒物的一般毒性作用
外，一般急性毒性试验对动物性别要求为雌雄各
毒
半。如果在预试验时发现化学毒物(如农药)对雌、
性
雄动物毒效应的敏感性有明显差异，则应单独分
作
别求出雌性与雄性动物各自的LD50。如果试验是 为致畸试验作准备，也可仅作雌性动物的LD50测
用
试。
4/25/2020
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二、急性毒性试验
急 性 毒 性 作 用
4.动物数量与随机分组：
性 大小的比较；受试物的性质和用途；各种受试
物毒性评价程序的要求等。
作 最常用的染毒途径为经口、经呼吸道、经皮及
用 注射途径。
4/25/2020
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二、急性毒性试验
急 经口(胃肠道)接触
性 毒
经呼吸道接触 经皮肤接触 注射途径接触
性
作
用
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二、急性毒性试验
经口(胃肠道)接触 :
4/25/2020
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二、急性毒性试验
（四）染毒剂量与分组:
急 1．查阅文献
性 ①了解化学毒物的结构式、分子量、常温常压下的状 态、熔点、沸点、密度、闪点、挥发度、蒸气压、水
毒
溶性和脂溶性等理化特性，生产批号及纯度，杂质成 分与含量等。
性 ②确定使用哪一种计算方法求LD50，然后再设计剂量 分组。LD50的计算方法常用寇氏法、概率单位法、霍 思法等。
1~2周的检疫期
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二、急性毒性试验
急
性 （二）试验动物的饲养环境
毒
恒定的温度：22±3℃
性
湿度：30~70%
作
照明：昼夜各半
用
饲料合格、饮水合格、垫料合格
4/25/2020
毒理学基础 第六章 化学物的一般毒性作用
〔四〕慢性实验设计要点
1.实验动物 2.染毒途径与期限
3.剂量分组: 高剂量组：1/5-1/2 LOAEL〔亚慢〕 中剂量组：1/50-1/10LOAEL 低剂量组：1/100 LOAEL或：1/1000-1/10LD50 阴性对照：
4.观察指标 同亚慢，但精，为亚慢显现靶的指标。
〔五〕结果评价
染毒使半数动物出现相同效应〔或死亡〕的剂量[ED50(1)]
的比值，K 即= 蓄ED5积0(n)系数。
ED50(l)
LD50(n
K
=
)
LD50(l
)
1)固定剂量法 2)剂量递增法
〔2〕生物半减期法
用毒物动力学原理描述化学毒物在机体内的蓄积作用 化学物的蓄积极限：
a.半减期的测定 b.计算蓄积极限
第六章 化学物的一般毒性作用
急性毒性 一般毒性亚慢性毒性
慢性毒性
急性毒性试验 亚慢性毒性试验 慢性毒性试验
第一节 急性毒性作用
一、急性毒性的概念
➢ 急性毒性(acute toxicity) ：是指机体〔实验动物或人〕 一次或24小时内屡次接触外源化学物后在短期内所引 起的毒性效应。
➢ 包括一般行为、外观改变、大体形态变化以及死亡效应 ➢ 说明： ➢ 1.接触的次数：一次/屡次 ➢ 2.毒效应出现时间： ➢ 3.中毒效应的强度：
〔二〕染毒途径
1.经消化道染毒 2.经呼吸道染毒 3.经皮肤染毒 4.经注射染毒
〔三〕剂量选择及分组
1.剂量范围确实定： 动物死亡率0％－100％ 〔或10％-90%〕的致死剂量范围
2.分组及剂量确实定： 窛氏法：6－8组为宜，各组剂量呈等比级数 霍恩氏法：4组，各组剂量呈等比级数
〔四〕毒作用观察
[理学]第六章化学毒物的一般毒性作用
![[理学]第六章化学毒物的一般毒性作用](https://img.taocdn.com/s3/m/f8f3dd12f111f18583d05a75.png)
动物进行试验，而且须是未曾交配和受孕的动物。例 如：大鼠180～240g、小鼠18～25g、家兔2～2.5kg、 豚鼠200～250g、狗10～15kg。同一批试验动物体重 变异范围不应超过该批动物平均体重的20％。
1/30/2019
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三、急性毒性试验设计
3.试验动物的性别：
急性毒性试验的主要内容是求LD50，除特殊要求
最好用两种种属的动物
啮齿类:小鼠、大鼠、豚鼠或家兔 非啮齿类：狗或猴。 急性皮肤毒性试验可选用成年大鼠、豚鼠或家兔，
优先考虑白色家兔。而急性吸入毒性试验和经口急
性毒性试验则优先考虑大鼠。
1/30/2019
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三、急性毒性试验设计
⒉试验动物的年龄和体重：
急性试验动物不宜过老或过幼，通常要求选择刚成年
6.实验动物的预检：
选择健康动物
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1~2周的检疫期
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三、急性毒性试验设计
（二）试验动物的饲养环境
恒定的温度：22±3℃
湿度：30~70% 照度：昼夜各半
饲料合格、饮水合格、垫料合格
1/30/2019
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三、急性毒性试验设计
（三）染毒途径的选择:
染毒途径（exposure routes）的选择需考虑： 模拟人在生活和生产环境中实际接触受试物的 途径和方式；有利于不同化学物之间急性毒性 大小的比较；受试物的性质和用途；各种受试 物毒性评价程序的要求等。 最常用的染毒途径为经口、经呼吸道、经皮及 注射途径。
及其它毒性参数(急性毒作用带Zac: acute effect zone) Zac=LD50 / Limac 2 .初步评价毒物对机体的毒效应特征、靶器 官、剂量反应关系和对人体产生损害的危险 性 3 .为亚慢性、慢性毒性试验及其他毒理学试 验的剂量设计和观察指标选择提供参考依据。 4.为急性中毒的治疗和中毒机制的研究提供 线索
第六章化学毒物的一般毒性作用
急性毒性（acute toxicity）
机体（实验动物或人）一次或24h 内多次接触外源化学物后在短期内所产 生的毒性效应，包括一般行为和外观改 变、大体形态变化以及死亡效应。
实验动物接触化学物的方式或途径不同， “一次”的含义也有所不同 经口和注射接触，“一次”是指在瞬间将 受试化学物输入实验动物体内 经呼吸道吸入与经皮肤接触，“一次” 是 指在一个特定的期间内实验动物持续地 接触受试化学物的过程
为其他毒理试验提供接触剂量和选择观察 指标的依据
为毒理学机制研究提供线索
三、急性毒性试验方法的要点 总体原则
实验动物
染毒途径
染毒剂量
观察周期
观察指标的选择、计算方法和评价
（一）实验动物的选择和要求 主要原则
急性毒性反应与人近似 易于饲养、操作方便
繁殖力较强，数量较大
试验周期
化 学 毒 物 的 LD50 （ LC50 ） 的测定一般要求计算实验动物 接触受试物后 14 天内的总死亡
数。
（五） 毒性作用观察
全面观察动物的各种反应和 变化，仔细分析实验动物在染毒 后出现的中毒表现、剂量效应、 时间分布。观察记录的内容：
（五） 毒性作用观察
中毒体征及发生过程 死亡情况和时间分布 体重
间限制。
动式吸入染毒装置的组成
染毒柜 机械通风系统 配气系统
动式吸入染毒设备
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动式吸入染毒方式分类
动式吸入接触（动式染毒） 面罩接触（面罩吸入染毒）
动式吸入染毒优缺点
优点：受试物浓度和氧分压较稳定 缺点：设备要求高，消耗受试物量
很大，操作比较复杂，费时费工
价格较低，易于获得
实验动物的物种和品系
机体（实验动物或人）一次或24h 内多次接触外源化学物后在短期内所产 生的毒性效应，包括一般行为和外观改 变、大体形态变化以及死亡效应。
实验动物接触化学物的方式或途径不同， “一次”的含义也有所不同 经口和注射接触，“一次”是指在瞬间将 受试化学物输入实验动物体内 经呼吸道吸入与经皮肤接触，“一次” 是 指在一个特定的期间内实验动物持续地 接触受试化学物的过程
为其他毒理试验提供接触剂量和选择观察 指标的依据
为毒理学机制研究提供线索
三、急性毒性试验方法的要点 总体原则
实验动物
染毒途径
染毒剂量
观察周期
观察指标的选择、计算方法和评价
（一）实验动物的选择和要求 主要原则
急性毒性反应与人近似 易于饲养、操作方便
繁殖力较强，数量较大
试验周期
化 学 毒 物 的 LD50 （ LC50 ） 的测定一般要求计算实验动物 接触受试物后 14 天内的总死亡
数。
（五） 毒性作用观察
全面观察动物的各种反应和 变化，仔细分析实验动物在染毒 后出现的中毒表现、剂量效应、 时间分布。观察记录的内容：
（五） 毒性作用观察
中毒体征及发生过程 死亡情况和时间分布 体重
间限制。
动式吸入染毒装置的组成
染毒柜 机械通风系统 配气系统
动式吸入染毒设备
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动式吸入染毒方式分类
动式吸入接触（动式染毒） 面罩接触（面罩吸入染毒）
动式吸入染毒优缺点
优点：受试物浓度和氧分压较稳定 缺点：设备要求高，消耗受试物量
很大，操作比较复杂，费时费工
价格较低，易于获得
实验动物的物种和品系
第6章_外源化学物的一般毒性作用
第6章 化学毒物的一般毒性作用
一般毒性作用（general toxicity,基础毒性,basic toxicity）：指外来化学物在一定的剂量、一定接触时间和 接触方式下对机体产生的综合毒效应。 一般毒性作用根据接触时间的长短可分为急性毒性、亚慢性 毒性和慢性毒性。相应的试验称急性毒性试验、亚慢性毒性 试验和慢性毒性试验。 1 急性毒性作用 2 局部刺激试验 （local irritation test） 3 蓄积毒性作用及其评价 4 亚慢性和慢性毒性作用
4
2019/3/10
1.3 急性毒性试验设计
1.3.1
1.3.2 1.3.3 1.3.4 1.3.5 1.3.6 1.3.7
2019/3/10
试验动物的选择 动物分组及样本例数 动物喂养环境 剂量选择 染毒途径 试验周期 观察指标
5
1.3.1 试验动物的选择
原则是所选动物应使试验的结果能反映或预
2019/3/10 29
1.4.2 急性毒性分级法
它是以死亡为终点的分阶段试验法，每阶段 3只动 物，根据死亡动物数，平均2-4阶段即可判定急性 毒性。使用动物数量少。 首选大鼠进行试验，在25、200、2000mg/kg中选择 一个剂量开始试验，并据其结果判断：不需进一步 试验进行分级；下阶段以相同剂量的另一种性别试 验；下阶段以较高或较低的剂量水平进行试验。 动物观察14天，在染毒当天观察体征和死亡至少 2 次，之后每天观察1次。 染毒前和每周测体重，所有动物进行大体解剖，必 要时进行组织病理学检查（病检）。
触该化合物的方式为出发点。主要有： 1.3.5.1 经口接触 1.3.5.2 经呼吸道接触 1.3.5.3 经皮肤接触
一般毒性作用（general toxicity,基础毒性,basic toxicity）：指外来化学物在一定的剂量、一定接触时间和 接触方式下对机体产生的综合毒效应。 一般毒性作用根据接触时间的长短可分为急性毒性、亚慢性 毒性和慢性毒性。相应的试验称急性毒性试验、亚慢性毒性 试验和慢性毒性试验。 1 急性毒性作用 2 局部刺激试验 （local irritation test） 3 蓄积毒性作用及其评价 4 亚慢性和慢性毒性作用
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1.3 急性毒性试验设计
1.3.1
1.3.2 1.3.3 1.3.4 1.3.5 1.3.6 1.3.7
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试验动物的选择 动物分组及样本例数 动物喂养环境 剂量选择 染毒途径 试验周期 观察指标
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1.3.1 试验动物的选择
原则是所选动物应使试验的结果能反映或预
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1.4.2 急性毒性分级法
它是以死亡为终点的分阶段试验法，每阶段 3只动 物，根据死亡动物数，平均2-4阶段即可判定急性 毒性。使用动物数量少。 首选大鼠进行试验，在25、200、2000mg/kg中选择 一个剂量开始试验，并据其结果判断：不需进一步 试验进行分级；下阶段以相同剂量的另一种性别试 验；下阶段以较高或较低的剂量水平进行试验。 动物观察14天，在染毒当天观察体征和死亡至少 2 次，之后每天观察1次。 染毒前和每周测体重，所有动物进行大体解剖，必 要时进行组织病理学检查（病检）。
触该化合物的方式为出发点。主要有： 1.3.5.1 经口接触 1.3.5.2 经呼吸道接触 1.3.5.3 经皮肤接触
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二、蓄积作用的研究方法
目的：通过蓄积试验求出蓄积系数K，了解化学 物蓄积毒性的强弱，并作为慢性毒性试验及其 它有关毒性试验的剂量选择提供参考。 蓄积系数法 生物半衰期法
（一）蓄积系数法
蓄积系数(accumulation coefficient)：指多次染毒使半数 动物出现某种效应的总量与一次染毒的半数效量之比值。 一般采用大鼠或小鼠，以死亡作为效应指标。 K=ED50(n)/ED50(1) 或 K=LD50(n)/LD50(1) ED50(n):以慢性方式多次接触受试物时产生预期效应的 累积剂量之和。 ED50(1):一次接触该物质产生相同效应的一次剂量。
＊1. 实验动物的选择 ＊2. 剂量设计与分组 ＊3. 染毒途径与时限 ＊4. 观察指标
五、长期毒性试验的注意事项
重视实验项目管理：选择经验丰富的专业人员对项目的设计和实施 进行管理，保证仪器设备状态良好，工作人员专业培训。
实验室环境的要求：注意动物饲养和试验环境的规范化，符合 GLP 。
蓄积系数的评价
蓄积系数（Ｋ） 蓄积作用分级
<1
高度蓄积
1-
明显蓄积
3-
中等蓄积
5-
轻度蓄积
1. 固定剂量法
方法：
（1）急性毒性实验
LD50(1)
（2）1/20-1/5LD50 每日染毒
LD50(n)
（ 50%动物死亡时累计染毒的总量）
（3）计算K值：K=LD50(n)/LD50(1)
若累计染毒量已达到5个LD50，动物仍未死亡或死 亡未达到半数，可终止实验，其Ｋ值按 ＞５作为结果。
蓄积库（depot）：化学物蓄积的组织器官部位。常见 的蓄积库包括： 血浆蛋白 脂肪组织 肝脏、肾脏 骨骼
化学物蓄积作用分类
物质蓄积：化学物在体内逐渐积累增多，用分析方法可 以检测出物质的原型或代谢产物。
损伤蓄积：又称功能蓄积，化学物长期接触后，机体内 虽然不能测出其原型或代谢产物，却出现了慢性毒性作 用的表现。
t1/2=0.693/Ke （２）蓄积极限值的求得：
蓄积极限值＝1.44(常数)×每日给予量(吸收量)×半衰期 t1/2
第五节 短期、亚慢性和慢性毒性作用
一、基本概念
短期重复剂量毒性：实验动物或人连续接触外源化学物 14-30天所产生的中毒效应。
亚慢性毒性（subchronic toxicity）：实验动物或人连续 较长期接触外源化学物所产生的中毒效应。接触时间相 当于生命周期的1/10，通常为1-6个月。
２. 递增剂量法
方法： （1）测定LD50(1) （2）第1-4天，先给予0.1LD50(1)，以后每4天 递增剂量1.5倍
LD5Байду номын сангаас(n) （3）计算Ｋ值。
28天时死亡动物仍未达到半数，可停止实验，此时的 总量达到12.8LD50(1)，即Ｋ＞12.8，可认为基本无蓄积。
３. 剂量固定的20天蓄积法
六、长期毒性试验的结果评价
剂量相关趋势：最好的试验结果是最高剂量组中毒效应明显，中剂量 组有轻度表现，低剂量组无任何异常毒效应。
差异大小和性别差异：差异越大，更有关联；同时观察两种性别。
相关指标变化：处理组某项指标变化，伴随着相应的指标改变，这种 效应可能与处理有关。
反应重现性：重复性包括在研究中不同时间点、同一物种动物在其他 的独立研究中，或在另一个物种发生相同的异常。
检测条件的控制：必须具有标准操作规程， 仪器设备的稳定性，辅助条件的可靠性； 指标的测定要准确，方法先进、精密、可靠。
合理的实验设计：得到明确的剂量-反应关系，获得理想的LOAEL 和NOAEL。
重视试验前和对照组的检测： 实验前对动物预测观察指标进行正常值的测定，去除个体差异 较大的实验动物； 设立合理的对照组，观察指标应是对照组与实验组同时观察。
历史性对照的作用：①可以识别异常的阴性对照；②可以更好的理解
低发生率的发现；判断是否在正常生物变异范围内；③如果指标变化
慢性毒性（chronic toxicity）：实验动物或人长期（甚 至终生）反复接触外源化学物所产生的毒性效应。长期 一般是指实验动物的一生或一生中的大部分时间，至少 6个月以上，通常是24个月。
二、实验目的
观察长期接触受试物的毒性效应谱、毒作用特点和毒 作用靶器官，了解其毒性机制。
观察长期接触受试物毒性作用的可逆性。 研究重复接触受试物毒性作用的剂量-反应（效应）关
（二）生物半衰期法
从上图可以看出，一种化学物质若以t1/2相等的时间间距染毒，其在体内经 过6个t1/2的接触期就可以基本上达到蓄积的极限，此时理论蓄积量达到极 限的98.4%，此后即使继续接触该物质，机体的蓄积量基本上也不会增加。
（１）t1/2的测定：当机体接触受试物后，测定不同时间体内 血浆中该物质的浓度。以时间ｔ作横坐标，血浓度Ｃ作纵坐 标，绘图，得一直线，从图中求消除速率常数Ｋe。
系，获取毒性作用参数，如NOAEL和LOAEL，为制 定人类接触的安全限值提供依据。 确定不同动物对受试物的毒效应的差异，为将研究结 果外推到人提供依据。
三、亚慢性毒性试验方法的要点
＊1. 实验动物的选择 ＊2. 剂量设计与分组 ＊3. 染毒途径与时限 ＊4. 观察指标
四、慢性毒性试验方法的要点
第六章 化学毒物的一般毒性作用-亚慢 性和慢性毒性
第四节 蓄积毒性作用及其评价
一、基本概念
外源化学物连续的反复的进入机体，而且进入机体的 吸收速度或总量超过了其代谢转化排出的速度或总量 时，化学物质就可能在体内逐渐的增加并贮留，这种 现象就称为化学物质的蓄积作用（accumulation）。
方法：分为1/2、1/5、1/10、1/20 LD50四个剂量组和对照 组，每组10只动物，每天染毒一次，共染毒20天，观察 每组动物死亡数量。
结果判定： ① 蓄积不明显：各剂量组均无死亡； ② 弱蓄积性：仅1/2 LD50组有死亡，其它剂量组无死亡； ③ 中等蓄积性：1/20 LD50组无死亡，其它各组间死亡数 有剂量反应关系； ④ 强蓄积性：1/20 LD50组有死亡，且有剂量反应关系。