分子生物学实验：安全与仪器使用
分子生物学实验室仪器使用说明书
分子生物学实验室仪器使用说明书一、引言分子生物学实验室仪器的使用是进行基因研究和分析的重要环节，正确的仪器操作和维护对于保证实验结果的准确性具有至关重要的作用。
本说明书旨在提供对分子生物学实验室仪器的正确使用方法和维护技巧的指导，以确保实验室工作的顺利进行。
二、常用仪器1. 基因扩增仪基因扩增仪是分子生物学实验室常用的仪器之一，其中最常见的是PCR仪。
以下是PCR仪的使用步骤：- 将待扩增的DNA模板、引物和试剂添加至PCR管或96孔板中；- 根据所需的扩增程序，在PCR仪面板上设置合适的温度和时间参数；- 启动PCR仪，开始扩增；- 扩增结束后，及时取出试管或孔板，并进行下一步实验操作。
2. 凝胶电泳仪凝胶电泳仪主要用于观察DNA、RNA或蛋白质的迁移情况以及分子大小的测定。
以下是凝胶电泳仪的使用步骤：- 准备所需的琼脂糖凝胶，并注入到电泳槽中；- 将待检测的样品混合液加入到电泳槽中的样品孔中；- 在电泳槽两侧连接正负极电源，并设置合适的电压和时间参数；- 启动电源，进行电泳；- 电泳结束后，取出凝胶，进行染色或进一步分析。
3. 离心机离心机用于分离混合物中的固体颗粒和液体，是分子生物学实验室必备的仪器之一。
以下是离心机的使用步骤：- 将待离心的样品均匀加入离心管中，并保持离心管的平衡；- 将离心管放入离心机转盘的相应位置，并注意转盘的平衡；- 根据离心速度和时间要求，设置合适的参数；- 启动离心机，开始离心过程；- 离心结束后，小心取出离心管，注意避免离心管的倾斜或颠倒。
三、常见问题及处理方法1. 仪器出现异常- 若仪器出现异常操作或显示异常，应首先检查是否按照正确的使用步骤进行操作；- 仔细阅读仪器说明书，查看是否存在使用特殊注意事项；- 若仍无法解决问题，及时联系仪器维修人员进行检修。
2. 仪器维护- 每次使用仪器后，应进行基本的清洁和消毒，保持仪器干净整洁；- 定期检查仪器是否正常，如电源是否接触良好，仪器表面是否有明显损坏等；- 根据仪器的要求，及时更换耗材和维护配件。
现代分子生物学常用实验仪器
实验一分子生物学实验室常用仪器及使用事实证明，在科学飞速发展的今天，无论从事哪个领域的研究，要想突破，除了有良好的理论基础外，更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。
一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外，还具有一些特殊用途的仪器，这些仪器一般较精密，价格昂贵。
下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。
一、冷冻离心机低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。
基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术，因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。
在国内，有多个厂家生产冷冻离心机，本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型（上海安亭），落地式。
配有角式转头：6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。
极限转速20000rpm。
1. 安装与调试离心机应放置在水平坚固的地面上，应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中，周围空气应呈中性，且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体，环境温度应在0～30℃之间，相对湿度小于80%。
试转前应先打开盖门，用手盘动转轴，轻巧灵活，无异常现象方可上所用的转头。
转子准确到位后打开电源开关，然后用手按住门开关，再按运转键，转动后立即停止，并观察转轴的转向，若逆时针旋转即为正确，机器可投入使用。
2. 操作程序（1）插上电源，待机指示灯亮；打开电源开关，调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定，温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。
（2）设定机器的工作参数，如工作温度，运转时间，工作转速等。
（3）将预先平衡好的样品放置于转头样品架上，关闭机盖。
按控制面板的运转键，离心机开始运转。
在预先设定的加速时间内，其运速升至预先设定的值。
（5）在预先设定的运转时间内（不包括减速时间），离心机开始减速，其转速在预先设定的减速时间内降至零。
分子生物学实验室内部质量控制制度
分子生物学实验室内部质量控制制度分子生物学实验室是一个进行生物分子研究与实验的场所，准确和可靠的实验结果对于研究的进展至关重要。
为了保证实验室内部的质量控制，制定和实施一套科学的质量管理制度是必要的。
以下是一个分子生物学实验室内部质量控制制度的框架，以确保实验结果的准确性和可重复性。
一、实验室设备和仪器的维护保养：1.实验室设备和仪器的选择应基于性能和质量，并由负责人和技术团队共同决策。
2.实验室设备和仪器的定期维护和校准应提前安排，确保其始终处于运行良好的状态。
3.实验室设备和仪器的使用前，需要进行验证和验证的记录，确保其准确性和可靠性。
二、试剂和材料的管理：1.负责人和技术团队在选择试剂和材料时应遵循严格的供应商选择标准，并确保试剂和材料的原始质量。
2.试剂和材料的储存应根据其特点和要求进行，并定期检查过期日期和质量。
三、实验室操作规程：1.实验室应制定并执行实验室操作规程，包括实验前的准备、实验的步骤和操作、实验后的数据整理和记录等。
2.严格遵守实验室操作规程，确保实验的可控性和规范性。
3.实验操作应遵循操作规程，并且实验记录应详细、准确地记录实验过程和结果。
四、实验数据管理：1.实验数据应详细记录，并由技术人员进行校对和复核。
2.实验数据的存储和管理应遵循数据保密和可追溯性的原则，确保实验数据的完整性和准确性。
五、实验结果的分析和解释：1.实验结果的统计分析和解释应由专业技术人员进行，确保结果的准确性和可靠性。
2.实验结果的正常范围和偏差应根据实验室内部验证和外部比对确定。
3.实验结果的报告应根据内部标准和要求完成，并由负责人进行审查和核实。
六、实验室的持续改进和质量审计：1.实验室应建立质量管理小组，并定期召开会议进行质量管理的评估和改进。
2.实验室应进行定期的内部质量审计，并根据审计结果制定相应的纠正措施和改进计划。
以上是一个分子生物学实验室内部质量控制制度的框架，旨在保证实验结果的准确性和可重复性。
分子生物学检测实验室技术要求与质量控制
案例分析：乙型 肝炎病毒核酸检
测
遗传性疾病：由基因突变或染色体异常引起的疾病
诊断方法：分子生物学检测技术，如基因测序、基因芯片等
应用案例：遗传性疾病的诊断，如唐氏综合征、地中海贫血等
质量控制：确保检测结果的准确性和可靠性，如样本采集、处理、检测等环节的质量控 制
个体化医疗：根据患者的基因、环境和生活方式等因素制定个性化的治疗方案 精准医学：通过分子生物学检测技术，精确诊断疾病，制定个性化的治疗方案 案例分析：分子生物学检测技术在癌症、遗传病等疾病诊断中的应用 技术要求：分子生物学检测实验室的技术要求，包括设备、试剂、人员等
PART SIX
实验室生物安全是实 验室工作的重要组成 部分，需要严格遵守 相关法律法规和标准。
实验室生物安全包括 生物安全柜、生物安 全实验室、生物安全 防护设备等设施设备 的使用和管理。
实验室生物安全还包 括实验室人员的培训 和考核，确保实验室 人员具备必要的生物 安全知识和技能。
实验室生物安全还需 要建立完善的生物安 全管理制度和应急预 案，确保实验室生物 安全的有效实施。
应用：研究基 因表达调控、 疾病诊断、药 物研发等领域
质量控制：包括 样本采集、RNA 提取、构建、 测序和数据分析 等环节的质量控
制
蛋白质组学：研究蛋白质在细 胞、组织或生物体中的表达、 修饰、相互作用和功能
蛋白质组学检测技术：包括质 谱分析、蛋白质芯片、蛋白质 相互作用分析等
质谱分析：通过测量蛋白质的 质量和电荷，确定蛋白质的种 类和数量
实验动物福利：确保实验动物的健 康和福利，遵循3R原则（替代、减 少、优化）
实验动物使用：实验动物必须经过 适当的训练和适应，确保实验结果 的准确性
分子生物学实验室常用仪器设备简介
实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介一、实验目的熟悉分子生物学实验室常用仪器并熟练使用二、实验原理1、恒温气浴摇床：用于对温度和振荡频率有较高要求的细菌培养，发酵，杂交，生化反应及酶和组织研究等。
2、超净工作台：用于分子生物学无菌操作。
3、低温台式高速离心机：用于分离纯化DNA和蛋白质等，如基因片段的分离，蛋白酶的沉淀和回收等。
4、微量移液管：是连续可调的，计量和转移液体的专用仪器，其装有直接读数容量计。
有多种规格：①0.5-10μL②10-100μL③20-200μL④100-1000μL。
5、电泳仪：用于确定大分子物质的分子量以及鉴定物种亲缘关系的仪器。
6、PCR仪：用于目的基因的扩增，是一对寡糖核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两侧，从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列DNA片段。
主要用于基础研究和应用研究等领域。
7、灭菌锅：用于细菌和细胞培养及核酸等有关实验使用的试剂，器皿及实验用具的严格灭菌。
三、实验仪器恒温气浴摇床、超净工作台、低温台式高速离心机、微量移液管、灭菌锅、PCR仪、电泳仪。
四、实验步骤（一）、恒温气浴要穿的使用：1、样品瓶牢固放入弹簧夹中2、接通电源开关，仪器进入准备状态3、参数设定，（设定温度、时间、转速等参数）4、按启动键仪器开始工作，按暂停键可暂停托盘的旋转；5、按电源键，显示屏显示消失，关闭电源总开关（二）、超净工作台的使用1、使用工作台时，先经过清洁液浸泡的纱布擦拭台面，然后用消毒剂擦拭消毒。
2、接通电源，提前30分钟打开紫外灯照射消毒，处理净化工作区内工作台表面积累的微生物，15分钟后，关闭紫外灯，开启送风机。
3、工作台面上，不要存放不必要的物品，以保持工作区内的洁净气流不受干扰。
4、操作结束后，清理工作台面，收集各废弃物，关闭风机及照明开关，用清洁剂及消毒剂擦拭消毒。
5、最后开启工作台紫外灯，照射消毒30分钟后，关闭紫外灯，切断电源。
（三）、低温台式高速离心机的使用1、把离心机放置于平面桌或平面台上，目测使之平衡，用手轻摇一下离心机，检查离心机是否放置平衡。
核酸提取仪通量安全操作及保养规程
核酸提取仪通量安全操作及保养规程前言核酸提取仪是分子生物学实验室中常用的仪器之一，它能够从生物样本中提取出高质量的核酸。
核酸提取仪的通量越大，提取效率也越高，但同时也增加了仪器使用的风险。
因此，在使用核酸提取仪时，必须遵循严格的安全操作和保养规程，为实验室的工作和环境安全保驾护航。
安全操作规程1. 穿戴个人防护装备在使用核酸提取仪前，检查并穿戴好相应的个人防护装备，包括实验室外套、口罩、手套、护目镜等。
这些装备可以有效地减少操作时因误操作导致的伤害。
2. 防止样品污染样品污染可能会导致实验结果不准确，因此在样品的处理过程中，需要遵循相应的规范。
在加样操作过程中，避免将样品接触到台面、墙壁等不干净的表面上，同时避免用其他物品接触样品；在核酸提取过程中，注意避免不必要的接触，如手工操作等。
3. 正确使用化学试剂在使用化学试剂前，需了解其性质及危险性，按照标签上的说明正确使用试剂，避免因误操作导致危险发生。
在操作过程中，要注意防止化学物质的飞溅，避免吸入有害气体。
4. 操作结束后的清洁操作结束后要及时清洁工作站，并按照规定处理好样品及废弃物等，避免污染其他样品或实验室环境。
5. 正常操作流程正常操作流程如下：1.打开仪器，进行系统预热；2.充分准备样品及试剂，避免在操作过程中造成不必要的中断；3.将样品加入提取板中，注意不要超出曼陀罗图形的板槽；4.加入试剂，按照步骤操作；5.与提取仪工作站连接，打开盖子；6.开始提取过程，按照实验操作手册操作；7.提取完毕后，注意关闭所有操作手制，断电及清洁工作站；8.清点试剂，避免浪费及引起环境污染。
保养规程1. 定期校验、维护核酸提取仪核酸提取仪需要定期维护，以确保其正常工作、提取效率，避免发生危险。
建议实验室安排专人定期对核酸提取仪进行检测和保养，包括精确校验仪器提取效率、检查气泵状态、清洁滤纸等，减少因设备故障导致的误差。
2. 仔细保养工作站和相关部件工作站是核酸提取仪的重要组成部分，定期对工作站进行清理和维护，以防其他污染影响实验结果。
分子生物学实验教案
机 5m 后关灯，关灯后 10 分钟打开照明灯，即可使用。 11. 电泳系统：
期保存在超低温环境下，就需要一个液氮罐（-196℃）具有经济、省力和较好地保 持细胞生物学特性的优点。 3．培养箱：37℃恒温箱用于细菌的固体培养和细胞培养。
CO2培养箱适用于培养各种细胞，可恒定地提供一定量的CO2（通常 5%），用来维 持培养液的酸度（pH值）。 37℃恒温空气摇床可进行液体细菌的培养。 4. 水浴锅：用于保温。 25-100℃水浴摇床可用于分子杂交试验，各种生物化学酶反应等试验的保温。 25-100℃水浴箱用于常规试验。 5. 烘箱：主用于烘干实验器皿，有些需要温度高些，有些需要温度低些。用于 RNA 方面 的实验用具，需要在 250℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在 42-45℃的烤箱中进行 烘干。 （二）水的净化装置：随着分子生物学的飞速发展，许多实验对水纯度的要求越来越高。 1. 蒸馏水皿：单蒸水常难以满足实验要求。双蒸水、三蒸水配液，许多实验要去离子水。
3
1. 真空加热干燥箱：核酸在硝酸纤维素膜和尼龙膜上固定，用于杂交实验。 2. 电泳凝胶干燥箱：电泳后的凝胶进行脱水干燥的仪器，一般可将凝胶干燥到一些玻
璃纸上，干燥后的凝胶易于保存。 3. 液氮冷冻干燥：适用于活性蛋白质样品的干燥与结晶。 4. 真空泵：许多实验都需要抽真空。如：乙醇沉淀后核酸样品的干燥，电泳凝胶的干
主用于核酸样品琼脂糖凝胶和 PCR 电泳结果的紫外观察和照像。 8. PCR 仪：PTC-200 基因扩增仪
分子生物学实验仪器设备分析
• １． 空气垫移液器 • 该类移液器适用于固定或可调体积液体的加样。 空气垫的作用是将
吸于一次性吸头内的液体样本与加样器内的活塞分隔开来， 空气垫 通过加样器活塞的弹簧样运动而移动， 进而带动吸头中的液体， 死 体积和一次性吸头中高度的增加决定了加样中空气垫的膨胀程度。
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第一节 微量移液器
• 四、 微量移液器的使用方法
• １． 容量设定 • 容量设定可通过容量调节轮的旋转来完成。 正确的容量设定有两个
步骤： 一是粗调， 即通过排放按钮将容量值迅速调整至接近需要的 预想值； 二是细调， 当容量值接近需要的预想值以后， 应将移液器 横置， 水平放至在观察者的眼前， 通过调节轮慢慢地将容量值调至 预想值， 从而避免视觉误差所造成的影响。 • 在容量设定时， 还有一个需要特别注意之处， 即从大值调整到小值 时， 调整到预想值即可； 但从小值调整到大值时， 需要超 １ ／ ３ 圈后再返回。 这是因为计数器里面有一定的空隙， 需要弥补。
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第七章 房地产权属登记法律制度
• 第一节 房地产权属登记概述 • 第二节 土地登记 • 第三节 房屋登记 • 第四节 房屋权属登记信息查询与档案管理
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第一节 房地产权属登记概述
• 一、房地产权属登记的含义
• 房地产权属登记又称为房地产登记，是指经申请人申请，由房地产登 记机构将申请人的房地产权利和其他应当记载的事项在房地产登记簿 上予以记载的行为，是将房地产权利现状、权利变动情况以及其他相 关事项记载在房地产登记簿上予以公示的行为，是一种不动产物权的 公示方式。其主要分为土地登记和房屋登记两种。
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分子生物学实验安全
紫外线辐射的危害和防护
在实验室里常用的紫外光源包括 手提式紫外灯和紫外透射仪、凝胶成像系统 。 只能通过吸收有害波长的滤片或安全玻璃片才能观察。在紫外光下操作时要戴合适的预防性手 套。应佩戴具有紫外线防护功能的护目镜和/或防护面罩，并遮蔽暴露的皮肤。
建议：使用荧光染料，切胶在Dark reader上操作。
分子生物学实验安全
化学试剂的安全使用
DTT 二硫苏糖醇
很强的还原剂，散发难闻的气味。可因吸入、咽下或皮肤吸收而危 害健康。当使用固体或高浓度储存液时，戴手套和护目镜，在通风橱中 操作。 PMSF 苯甲基磺酰氟 一种高强度毒性的胆碱酯酶抑制剂。它对呼吸道黏膜、眼睛和皮肤有非常 大的破坏性。可因吸入、咽下或皮肤吸收而致命。戴合适的手套和安全眼镜， 始终在化学通风橱里使用。在接触到的情况下，要立即用大量的水冲洗眼睛或 皮肤，已污染的工作服作为有害废物处理。 Triton X-100 引起严重的眼睛刺激和灼伤。可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害。戴合适 的手套和护目镜。
分子生物学实验安全
化学试剂的安全使用
过硫酸铵 (NH4)2S2O8 对黏膜和上呼吸道组织、眼睛和皮肤有极大危害性。吸入可致命 。操作时戴合适的手套、安全眼镜和防护服。始终在通风橱里操作， 操作完后彻底洗手。 叠氮钠（NaN3） 毒性非常大。它阻断细胞色素电子运送系统。含有叠氮钠的溶液要 标记清楚。可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。戴合适的手套和安 全护目镜，操作时要格外小心。 吉姆萨（Giemsa） 染料咽下可致命或引起眼睛失明，通过吸入和皮肤吸收是有毒的。 其可能的危险是不可逆的效应。戴合适的手套和安全护目镜。在化学通 风橱里操作，不要吸入其粉末。
Dark Reader 荧光透射仪 (Transilluminators) 的特点 : 1.Dark Reader 使用新的无毒 DNA 染料 : SYBR Green, SYBR Gold等, 避免了Ethidium Bromide (EB) 染料对人体的伤害。 2.Dark Reader使用 可见光 （400-500 nm）,没有UV（紫外线），将其对人体的伤害降低 至零。同时，大大降低了 对DNA样本的损伤，克隆DNA的效率将成百倍的提高。 3.灵敏度高，远远高于UV检测仪。 4.适 用染料范围广；荧光素 （fluorescein）, AttoPhos, GelStar, Vistra Green, SYPRO Orange, red-shifted GFP variants等都可使用。对于Rhodamines, Ethidium Bromide(EB)等激发光大于500 nm的染料亦 可适用；可以广泛用于DNA、RNA 以及蛋白质的检测。 5.Dark Reader同时提供琥珀色镜片的观 察眼镜（AG16），供切割凝胶时使用。 紫外照射消毒后由于空气中臭氧富集，不宜立即开始工作，应在停止紫外照射30 min后开始 工作，有条件的实验室，可安装无臭氧紫外灯。 超净工作台中进行紫外照射消毒后，也应用强风进行吹扫后再进行工作，以免臭氧危害身 体健康。
通风橱进行。如皮肤接触Trizol，请立即用大量去垢剂和水冲洗，
废液埋入地下。
分子生物学实验安全
化学试剂的安全使用
RNA酶的强抑制剂，一种潜在的致癌物质。 操作时戴口罩，在通风橱中进行。沾到手上 立即冲洗，废液通过废液道排泄。 CHCl3（Chloroform，氯仿） 常用于DNA和RNA提取，对皮肤、眼睛、黏膜和呼吸道有强烈的刺 激作用和腐蚀性，易损害肝和肾。操作时戴手套在通风橱里进行，废 液收集后埋入地下。 Acrylamide（丙烯酰胺） DNA测序、SSR及蛋白质分离等技术中作电泳支持物，具神经毒性，聚 合后毒性消失。操作时戴手套在通风橱内进行，聚合后的聚丙烯酰胺凝胶 没有毒性，可随普通垃圾一起扔掉，千万不要倒入下水道.。
3)平放带有残余液体吸头的移液器(应将移液器挂在移液器架上)。吸嘴内有未排出液体时将移
液器平放于桌面，或进行走动，吸嘴内液体会回流入套筒内，大量程移液器回流的液体会 腐蚀活塞组件。正确方法：在进行实验前，应将实验用品放在触手可及的地方，避免在进 行实验时走动，养成即吸即排，即排即卸的习惯，使用后的移液器放回至移液器架。 4)用大量程的移液器移取小体积样品(应该选择合适量程范围的移液器)。 5)直接按到第二档吸液(应该按照上述标准方法操作，反向移液法外)。 6)使用丙酮或强腐蚀性的液体清洗移液器。吸取强挥发性液体后应及时拆开移液器用医用酒精
DEPC (Diethylprocarbonate) (二乙基焦碳酸酯)
分子生物学实验安全常识
化学试剂的安全使用
DMSO（二甲亚砜）
是一种既溶于水又溶于有机溶剂的非质子极性溶剂，常用作细胞 的冻存液和配制AS。皮肤沾上之后用大量的水洗及1%~5%稀氨水洗涤。 十二烷基硫酸钠(SDS) 有毒，易损害眼睛。质粒提取时作裂解液破坏细胞膜和 Southern 杂交时的洗膜液中的去垢剂。戴合适的手套和安全护目镜，不要吸 入其粉末。 四甲基二乙胺 TEMED 强神经毒性，防止误吸，操作时快速，存放时密封。
实验：分子生物学实验安全及 实验常用仪器设备
Байду номын сангаас
一、分子生物学实验安全注意事项
1．易燃易爆、有毒的化学试剂 有毒的化学试剂：较小剂量疾病/死亡 通过皮肤、呼吸道：1）丙烯酰胺、2）过硫酸铵、3）甲醛、4）氯仿、5） 十二烷基磺酸钠SDS、6）四甲基二乙胺（TEMED）、7）乙酸/冰醋酸、 异戊醇、异丁醇、正丁醇 致癌物或诱变剂：溴化乙锭、甲酰胺，焦碳酸二乙酯（DEPC） 易燃易爆化学试剂：苦味酸、酒精 腐蚀性 化学试剂：酸和碱、溴、苯酚 强氧化性 化学试剂：过氧化物、含有强氧化能力的含氧酸及其盐，如硝酸 铵、高氯酸及其盐、重铬酸及其盐 不相容 化学试剂：叠氮化物-铜 2.放射性试剂 3.生物学管制试剂、生物 4．设备方面的危险：紫外线
进行清洗，避免活塞组件受到腐蚀。
7）吸液体或排液速度过快，吸液速度过快会影响准确度，特殊液体会产生气泡。对于大量程 移液器，过快的吸液速度会造成液体倒吸腐蚀活塞组件。正确方法：平稳缓慢的进行移液 工作。
2．冷冻离心机的使用方法
以epdoff 5430冷冻离心机为例实物讲解 Centrifuge 5810R 型高速冷冻离心机的使用 天美CT15RT离心机的使用
• 取196ul ddH2O于1.5mL离心管中（请反复练习）。
• 3）2-20ul移液器的使用 • 取1ul6×上样缓冲液于4只0.2mlPCR管中； • 将上述1.5mL离心管中的196ul ddH2O平均加样到0.2mLPCR管中。 • 4）将上述4只PCR管在旋涡混合器上混合
• 5）在小型离心机或者冷冻离心机上离心（低速，5-10s），使得溶液
3．PCR 仪的使用方法
• 以PE9700型PCR仪 为例实物讲解
• 以C1000型PCR仪 为例实物讲解
4．纯水仪的使用方法/双蒸水仪的使用方法
以MiLLi-Q 型纯水仪为例实物讲解
其他仪器设备在实际操作中学习
五、学生练习
1. 微量移液器、旋涡混合器和冷冻离心机的使用
• 1）200-500ul移液器的使用 • 2）20-200ul移液器的使用
二、做好分子学实验应注意的有关问题
1．克服畏惧心理 2、克服轻视心理 3．克服用微量试剂不习惯 4．防止粗心大意 5．防止缺乏整体实验的概念 6．侥幸心理 7、试剂问题 ：严格按各种试剂的特定要求来操作 8、背景知识问题
三、分子生物学实验室常用仪器设备
1．灭菌设备 2．离心机 3．冷冻设备 4．光学测量 5．天平 7．凝胶电泳装置 8．恒温箱 9．温控摇床 10．磁力搅拌器（最好带加 热功能） • 11．微波炉 • 12．PH 计（酸度计） • • • • • • • • • • 13．0.1 μL - 5000 μL 范围的 微量移液器 • 14．PCR 仪（热循环仪） • 15．组织光照培养箱 • 16．紫外观测仪 • 17．旋涡混合器（Vortex） • 18．水浴装置 • 19．纯水仪/双蒸水仪 • 20．玻璃器皿及塑料制品 • 21．相应的分子生物学试剂 及试剂盒
均处于PCR管底部
2.PCR仪的编程
• • • • • • • • 程序：预变性94℃5min； 94变性1min 55℃退火1min（通常50-62℃） 72℃延伸1min 通常30-35循环，练习时：组别+30和循环 72℃延伸1min30s 12℃保温10-60min，或forever 请分组在PCR仪上练习编程，记录下你的程序名称 作为平时练习作业之一
设定移液器容量的正确方法是什么？
• 4.名词解释：退火、变性、预变性、延伸、反相移液法 • 5.说明PCR编程过程（以你编程的仪器型号进行说明），并记录你 的编程。 • 6.绘图或文字叙述PCR反应过程。
四、一些常用精密仪器的使用方法
1．微量移液器的使用方法
1-1微量移液器的使用 学生自学 1-2大龙移液器_使用_装配管嘴 1-3大龙移液器_使用_正向移液法_ 1-4大龙移液器 反向移液法：黏稠液体的移取 1-5大龙移液器性能测试和重新校准
微量移液器使用常见的错误操作
1)吸液时，移液器本身倾斜，导致移液不准确(应该垂直吸液，慢吸慢放)。 2)装配吸头时，用力过猛，导致吸头难以脱卸(无需用力过猛，选择与移液器匹配的吸头)。
3. 电泳上样练习
• 材料：电泳琼脂糖 • 取6×上样缓冲液2ul+1ulddH2O于一次性手套/封口膜上混
合，使用2-20ul移液器在琼脂糖胶上点样。（每人1-3次
以上，熟练为止）
六、思考题（作业）
• 1.分子生物学实验中要注意的安全事项有哪些？ • 2.叙述微量移液器的正确使用方法（重点掌握）。做2题则3题不 做。 • 3. 为了提高移液准确性，粘稠或易挥发液体移取如如何正确操作？
防护先行！