IgA蛋白酶相关想法05-08
尿调蛋白酶联免疫吸附试验检测方法的建立及其在IgA肾病中的应用
京
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学
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报
（ 医
学
版
） ・０ ３ ７・
Ｊ Ｕ Ｎ ＦＰ Ｋ Ｎ Ｎ Ｖ Ｒ ＩＹ Ｈ Ａ Ｔ ＣＥ Ｃ Ｓ Ｖ １４ Ｎ ． Ａ ｒ ０ ２ Ｏ Ｒ ＡＬＯ Ｅ Ｉ Ｇ Ｕ Ｉ Ｅ ＳＴ （ Ｅ Ｌ Ｈ Ｓ ＩＮ Ｅ ） ｏ．４ ｏ ２ ｐ．２ １
・
技 术 方 法
・
ｍａ ｕｒ ｎ ｒ ｏ ｏ ｕ ｉ ｎ ｐｐ ｉ ａ ｉ ｎ ｏ ｈｅ ｍ ｅ ｈ ｄ ｉ ｔｅ ｓ ｗｉｈ ｇ ｎ ｐｈ ｏ － ｎ ｉ ａ ｙ ｕｒ ｍ ｄ ｌｎ ａ ｄ ａ ｌｃ ｔｏ ｆｔ ｔ ｏ ｎ ｐａ ｉ ｎｔ ｔ Ｉ Ａ ｅ ｒ ｐ
ａ ｈｙ ｔ
Ｄｉｅ ｓ ，Ｍｉ ｉｔ ｆＨｅ ｔ ｆＣ ｉ ａ ｓａ ｅ ｎ ｓｒ ｏ ａ ｈ ｏ ｈ ｎ ；Ｋｅ ａ ｈ ｏ ｉ ｄ ｅ ｓ ａ ｅ Ｐ ｅ ｅ ｔ ｎ ａ ｄ Ｔ ｅ ｔ ｎ ，Ｍｉｉｔ ｄ ｃ － ｙ ｌ ｙ Ｌ ｂ ｏ Ｃ ｒ ｎ ｃ Ｋｉ ｎ ｙ Ｄｉｅ ｓ ｒ ｖ ｎ ｉ ｎ ｒ ａｍｅ ｔ ｆ ｏ ｎ ｓｒ ｏ Ｅ ｕ ａ ｙ ｆ
尿调蛋 白酶联免疫吸附试验检测方法的建立及其在 ＩＡ肾病中的应用 ｇ
刘 颖 ，陈育青 ， 晶 晶 韩 佳 周 ， ，梁 或 李 雪迎 ， ，张
点实 验室 ， 北京 １０ ３ ２ 北京大学第一 医院医学统计 室 ， ００ ４；． 北京
宏
（ ． 京大学第 一医院肾 内科 ， １北 北京大学肾脏疾病研究所 ， 卫生部 肾脏 疾病重 点实验 室 ， 性 肾脏 病防治 教育部 重 慢
Ａ Ｓ Ｒ Ｃ Ｏｂｅｔ ｅ ｏ ｅｔ ｌ ｈ ａ ｍ ｔｏ ｆｅｚｍｅｌ ｋｄ ｉ ｍｕ ｏｏｂ ｎ ｓａ （ ＬＳ ＢＴＡ Ｔ ｊｃ ｖ ：Ｔ ｓ ｂｉ ｅ ｄ ｏ ｎｙ —ｎ ｅ ｍ ｎ ｓｒｅｔａｓｙ Ｅ ＩＡ）ｔ ｉ ａ ｓ ｈ ｉ ｏ
各种细菌产生的IgA蛋白酶的结构、性质及作用
脑膜炎球 菌、 流感嗜血杆 菌 ， 解脲脲 原体 的 ＩＡ蛋 白酶属丝 氨 ｇ
酸蛋 白酶 ， 型 Ｉ 蛋 白酶 由 近 １ ０ 残 基 组 成 ， 括 活 性 区 这 Ａ ｅ ０个 ０ 包
域序列 ＶＬ ￣ ＧＳ Ｌ 这个 序列也 出现 在丝 氨酸 型蛋 白酶家 Ｇ Ｓ Ｐ Ｆ，
１ １ ｌ 蛋 白酶 的分 泌 ＩＡ蛋 白酶 基 因在细菌 成指 数 族 中的胰 岛素和糜 蛋 白酶中 ， ｔ ． ｅ ａ ｇ ｅ ｂ ａ区由 Ｎ一末端 的异 质性序列 ０个 ａ 增长的阶段持续表达 ， 最初 的基 因产物 是一 个蛋 白酶前 体 ， 酶 及 Ｃ末 端的蛋白转位所需要的近 ３ ０ 氨基 酸残基组 成 ， 螺
提 出 ＩＡ蛋 白酶可能 具有 治疗 ＩＡ 肾病 的潜 在应 用价值 。可 及外 膜制品可导致 部分特定蛋 白质的降解 ， ｇ ｇ 由此 推测 ＩＡ蛋 白 ｇ 见 ｌ 蛋 白酶的研究具有 重要 意义。 ａ ｅ 酶可能在细胞蛋 白成熟 的过程中也起到作用 ， 而也说 明了这 从
Ｉ 蛋 白酶 最早 是 在 １７ Ａ ｅ ９ ３年 由 Ｐａ ｔ 现 的 ， 后 ， ｌ 发 ｕ 之 在 个 ａ 白有携 带 ＩＡ蛋 白酶进 人细胞 内并 分解 细胞 内底 物 的 蛋 ｇ １ ７ 发 现 ３ 主 要 的 导 致 细 菌 性 脑 膜 炎 的细 菌 （ ９ ９年 种 流血 嗜 血 杆 可能性。此外 ， 蛋 白还具有 Ｄ Ａ结合 的能力 ， ａ Ｎ 在理 论上可影
蛋 白酶 的敏 感 性 ， 因此 在 最 常 见 的 肾 小 球 肾 炎 ＩＡＮ 中 ，ｇ 的 ｇ ＩＡ
ａ 蛋白的融合 蛋 白及 提纯 的 ａ 白能够进 入人 的上 皮细 胞 内， 蛋
糖基化异常可能为导致 ｌＡ升 高的原因之一 。近来 ， ｇ 还有 文献 并进入 细胞核 。孵 育产 Ⅱ型 Ｉ 蛋 白酶 的淋球 菌属 的细胞 质 Ａ ｅ
疏血通注射液对IgA肾病纤维蛋白原、Ⅳ型胶原及C反应蛋白的影响
中图分 类号 ： ６２ Ｒ ９
文献 标识码 ： Ｂ
文章编 号 ：０６ ０７ （０２ ０— ０ ２０ １０— ９９ ２ １ ）８ ００ — ２
Ｉ ｇ Ａ肾病 是我 国最 常见 的肾 小球 疾 病之 一 ， 原 发性 肾小球 者 ， 予代 文 ８ ｍ ｄ仍 血 压增 高者 加 用络 活 喜或 安 内真 ， 在 改 ０ ｇｑ ； 目标 肾炎 引起 终末 期 肾病 中约 占 １— ０ １２ ～０ ５ ３％【 ０ ４ ％的 Ｉ ‘ １ ， ｇ 肾病在 ５ 血 压控 制在 １ ０ １５６ — ５ ｍ ｇ 间 。 Ａ — １ ～ ３ ／５ ８ ｍ Ｈ 之 治 疗组 ： 对 照组 相 同 ， 加 用疏 血通 注 射 液 ６ ｌ牡 丹江 友 与 并 ｍ（ １ 年 内可 发展 为慢性 肾功 能衰 竭目 而 肾脏 纤维 化是 几乎 所有 肾 ５ 。
福州职业 技术 学院 医务室 （５ １８ ３ ００ ） 福建 省人 民医 院肾内科 （５０４ ３０ ０ ） ２ １ 年 ２月 ８Ｅ收 稿 ０２ ｔ
２１ ０２年 ４月
３
注 １治疗前 后 自身 比较 ， ＜ ． ，Ｐ ０ １ ： ． ００ ＜ ． 。 Ｐ ５． ０ 注 ２治 疗 组 较 对 照 组 的血 Ｃｌ １ 尿 Ｃ ｌ Ｉ 血 Ｃ Ｐ ＦＢ ： ｏ Ｖ、 一 ｏ Ｖ、 — Ｒ 、Ｉ 下降 更为 明显 ， ＜ ． ， Ｐ ０ １ Ｐ００ ＜ ． 。 ５ ０ ２ 治疗 前后 自身 比较 ，两组 尿蛋 白、尿 隐血 均有 明显下 降 （ ＜ ． ３ Ｐ ０ ５ Ｐ ０ １； ． 或 ＜ ． ）但治疗组尿蛋 白、 Ｏ ０ 尿隐血下降较对照组更明显 ， 两组 间 比较有 显著 差异 （ ＜ ． 或 Ｐ ００ ）见 表 ３ Ｐ Ｏ０ ５ ＜ ．１， 。
厄贝沙坦、联合洛汀新治疗IgA肾病蛋白尿的疗效观察
摘 要 ： 目的 ： 讨 急性 脑 梗 死 与 颈 动 脉 粥 样硬 化盎 块 及 基 质 金属 蛋 白酶 ９ Ｍ Ｐ ） 平 的 临 床 相 关性 。 方 法 ： １ ８例 急 性 脑 梗 死 探 （ Ｍ ９水 对 ０
患 者 采 用 美 国 Ｇ ｌａ ｕｄＶｖ 彩 色 多普 勒 超 声 行 颈 动脉 超 声 检 测 ， 检 测 血 清 Ｍ Ｐ 平 。结 果 ： 例 组 ５ ＥＵｔｓ ｎ ｉｄ７型 ｒｏ ｉ 并 Ｍ ９水 病 ８例 中软 斑 块 ４ ２ 例 ， 照组 ５ 对 ０例 中软 斑 块 １ 例 ， １ 两组 斑 块 发 生 率 比 较 有 统计 学 意义 （ ００ ） 病 例 组 ＭＭ ９水 平较 对 照 组 明 显升 高 ， 统 计 学 意 Ｐ＜ ． ； ５ Ｐ 有 义 （ ００ ） 结 论 ： 动 脉 粥 样 硬 化 斑 块 与脑 梗 死 发 病 有 相 关性 ， 块 的 易损 性 与 脑梗 死 关 系密切 。 Ｐ＜ ． 。 ５ 颈 斑 关 键 词 ： 梗 死 ； 动 脉 粥 样硬 化 ；颈 动 脉超 声检 查 ； 质 金 属 蛋 白酶 脑 颈 基 中 图分 类 号 ： ７３３ Ｒ ４ ．３ 文 献标 识 码 ： Ａ 文章 编 号 ：０６ ９９２ １ ）７— Ｏ４— ２ １０ —０７ （０ ２０ ０Ｏ ０ 外周动脉可作为反映全身动脉粥样硬化病变 的一个窗 口， 缺血 性脑 卒 中与颈 动脉 粥样 硬化斑 块 的易损性 有密切 关系。 本 文 通 过 对 脑 梗 死 患 者 的 颈 动 脉 超 声 检 查 及 血 清 ＭＭ ９水 平 Ｐ 的检测 ， 旨在探 讨 脑 梗死 与颈 动 脉 粥 样 硬 化 斑 块 之 间 的关 系 。 １ 材 料 与 方 法 １ １ 一 般 资料 ： 组 资 料 脑 梗 死 ５ ． 本 ８例 ， 中男 ３ 其 ０例 ， ２ 例 ； 女 ８ 年龄 ４ ８ ｏ一 ４岁 ， 均 ６ ． ， ２０ 平 ２３岁 系 ０９年 ９月 一 ０ １ ２ 在 我 ２１ 年 月 院确 诊 的动 脉 硬 化 性 脑 梗 死 患 者 。对 照 组 为 本 院 年 龄 相 当 既 往 无 任 何 疾 患 的 健康 志愿 者 ５ Ｏ名 ， 中男 ２ 其 ６例 ， ２ 女 ４例 ， 龄 年 ３ ９—８ ， 均 ６ ． 。脑 梗 死 诊 断 符合 全 国第 ４届脑 血管 病 Ｏ岁 平 ０４岁 会 议 制 定 的诊 断 标 准 ， 经 头 颅 Ｃ 并 Ｔ和 Ｍ Ｉ 描证 实 ， 源 性 脑 Ｒ扫 心 梗死 、 、 、 功能衰竭 、 瘤患者除外 。 肝 肾 肺 肿 １２ 检 测 方 法 ： 用 Ｇ ｌａｏｎ ｉｄ ． 采 ＥＵｔ ｓｕｄＶｖ 彩 色 多 普 勒超 声 显 ｒ ｉ７型 像 仪 检 查 。 患 者 取平 卧位 ， 部 偏 向 检 查 对 侧 ４ 头 ５度 ， 分 暴 露 充 颈 部 间 动 脉 ， 取 先 右 后 左 的检 查 顺 序 ， 别 取 横 切 面 和 长 轴 采 分 切面 ， 由近 及 远 ， 次 显 示 颈 总 动 脉 （ｏ ｍ ｎｃｒｉ ａｅ ，Ｃ ） 依 ｃｍ ｏ ａ ｔ ｒ ｒ Ｃ Ａ ｏｄ ｔｙ 近 心 端 、 段 和 远 心 端 及 椎 动 脉 （ｅ ｅｒ ｒ ｒ， Ａ）至 颈 动 脉 中 ｖａ ｂ ａｅｙＶ ， ｌ ａ ｔ 分 叉 处 分 别 扫 查 颈 内动 脉 （ ｔｎｌ ａ ｔａｔｙＩＡ） ｉｅ ａ ｃｒ ｉ ｒ ｒ， ｎ ｒ ｏｄ ｅ Ｃ 和颈 外 动 脉 （ｘ ｒａ ｃｒ ｉ ａ ｔａｔｙＥ Ａ ， 内 动 脉 一 直 追 踪 至 人 颈 动 ｅｔ ｎｌ ａｏｄ ｒ ｉ ｒｒ， Ｃ ） 颈 ｅ ｔ ｃ ｏｄ ｅ 脉 管 之 前 ， 察 血 管 腔 内 径 、 壁 厚 度 、 块 情 况 。每 一 指 标 测 观 管 斑 量 ３ 心 动 周 期 ， 平 均 值 。 测 量 指 标 为 － ：１ Ｃ Ａ 内径 ： 个 取 １ （）Ｃ ］ 于 Ｃ Ａ分 叉 前 １０ １５ｒ 处 测 量 ；２ 距 分 叉 膨 大 部 以 远 １Ｏ Ｃ １— １ｅ ａ （） １一 １５ｍ处 分 别 测 量 ＩＡ、Ｃ 内径 ； ３ 颈 动 脉 内膜 一 中层 厚 度 ： １ｃ Ｃ ＥＡ （） 正 常 的颈 动 脉 管 壁 呈 典 型 的“ 线 征 ” 即 两 条 平 行 的强 回 声 带 双 ， 被 一 低 回 声 或 元 回 声 带 分 离 ， 线 间 距 离 即 为 ＩＴ 正 常 ＜ 两 Ｍ 。 １０ ｍ， １０ ｍ＜Ｉ Ｔ＜１５ ｍ 为增 厚 ；４ 管 腔 内膜 一 中 层 局 １ｒ 如 １ｒ ａ ａ Ｍ １ｒ ａ （） 部 隆起 增 厚 ， 管 腔 内突 出 。 ＩＴ＞１５ｔ ｉ 为粥 样 硬 化 斑 块 向 Ｍ １ ｎ， ｏ 视 形成 ， 根据 斑块 回 声 强 度 和 组 织 病 理 学 研 究 分 为［ ： 较 均 匀 ① 】 的低 回声 脂 质 型 软 斑 块 ； 等 回声 的 纤 维 型 斑 块 ； 强 回声 或 ② ③ 伴 声 影 的 钙 化 型 硬斑 块 ； 回声 强 弱 不 均 的 溃 疡 型混 合 斑 块 。 ④ １３ Ｍ ９的 检测 方 法 ： 梗 死 组 患 者 在 发 病 后 空 腹 采 集 静 脉 ． ＭＰ 脑 血 ３ ｌ离 心 后 取 血 清 。对 照 组 在 体 检 第 ｌ ｍ， 天早 晨 空 腹 采 集 静 脉 血 ３ ｌ 清 置 于 一８ ℃低 温 冰 箱 中 保 存 备 用 。采 用 美 国 Ａ Ｌ ｍ 。血 ０ Ｄ
IgA肾病CTSS的变化及临床意义
瘙痒的治疗ꎬ耳穴干预前对照组和治疗组组胺含量无明显差异(１.７０３ʃ１.６６３ｖｓ１.３３３ʃ１.１７８ꎬＰ>０.０５)ꎬ经过１２周耳穴干预治疗后ꎬ治疗组较对照组组胺含量明显下降ꎬ差异有统计学意义(０.９２４５ʃ０.９４４５ｖｓ１.６８５ʃ１.７４８ꎬＰ<０.０５)ꎬ由此可见耳穴贴压改善维持性血液透析患者皮肤瘙痒与降低组胺含量有关ꎬ而其他客观指标如Ｐ物质㊁蛋白酶激活受体－２㊁类胰蛋白酶含量ꎬ治疗组与对照组之间的数据比较ꎬ差异均无统计学意义(Ｐ>０.０５)ꎬ这可能与耳穴贴压干预疗程比较短有关系ꎬ有必要进行长期大样本量的临床研究ꎮ参㊀考㊀文㊀献１.ＷｕＨＹꎬＰｅｎｇＹＳꎬＣｈｅｎＨＹꎬｅｔａｌ.Ａｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｕｒｅｍｉｃｐｒｕｒｉ￣ｔｕｓｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｒｅｃｅｉｖｉｎｇｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｄｉａｌｙｓｉｓａｎｄｈｅｍｏｄｉａｌｙｓｉｓ.Ｍｅｄｉｃｉｎｅ(Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ)ꎬ２０１６ꎬ９５(９):１－６.２.胡小红ꎬ陈揭剑ꎬ梅长林ꎬ等.尿毒症瘙痒症发病机制与治疗新进展.中华肾脏病杂志.２０１３ꎬ２９(１１):８６６－８６９.３.ＭｉｓｔｉｋＳꎬＵｔａｓＳꎬＦｅｒａｈｂａｓＡꎬｅｔａｌ.Ａｎｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙｓｔｕｄｙｏｆｐａ￣ｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｕｒｅｍｉｃｐｒｕｒｉｔｕｓ.ＪＥＡＤＶꎬ２００６ꎬ２０:６７２－６７８.４.ＮａｚａｎＫｉｌｉｃＡｋｃａꎬＳｕｌｔａｎＴａｓｃｉꎬＮｉｍｅｔＫａｒａｔａｓ.Ｅｆｆｅｃｔｏｆａｃｕｐｒｅｓ￣ｓｕｒｅｏｎｐａｔｉｅｎｔｓｉｎＴｕｒｋｅｙｒｅｃｅｉｖｉｎｇｈｅｍｏｄｉａｌｙｓｉｓｔｒｅａｔｍｅｎｔｆｏｒｕｒｅｍｉｃｐｒｕｒｉｔｕｓ.ＡｌｔｅｒｎａｔｉｖｅＴｈｅｒａｐｉｅｓｉｎＨｅａｌｔｈａｎｄＭｅｄｉｃｉｎｅꎬ２０１３ꎬ１９(５):１２－１８.５.赵景宏ꎬ王沂芹ꎬ王代红.尿毒症瘙痒症的发病机制与治疗进展.中华肾病研究电子杂志ꎬ２０１４ꎬ３(３):１４３－１４６.６.桂保松ꎬ马姗ꎬ姚智慧.慢性肾脏病皮肤瘙痒的发病机制㊁特点及治疗.中国医学文摘皮肤病学ꎬ２０１５ꎬ３２(６):５９８－６０１.７.ＡｏｋｉＲꎬＫａｗａｍｕｒａＴꎬＧｏｓｈｉｍａＦꎬｅｔａｌ.ＭａｓｔｃｅｌｌｓｐｌａｙａｋｅｙｒｏｌｅｉｎｈｏｓｔｄｅｆｅｎｓｅａｇａｉｎｓｔｈｅｒｐｅｓｓｉｍｐｌｅｘｖｉｒｕｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎｔｈｒｏｕｇｈＴＮＦ－ａａｎｄＩＬ－６ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ.ＪＩｎｖｅｓｔＤｅｒｍａｔｏｌꎬ２０１３ꎬ１３３:２１７０－２１７９.(收稿:２０１９－１０－２７㊀修回:２０１９－１２－２５)ＩｇＡ肾病ＣＴＳＳ的变化及临床意义①㊀中国医科大学附属盛京医院小儿肾脏风湿免疫科㊀(沈阳㊀１１０００４)赵晶莹①㊀郑㊀悦①㊀吴玉斌①ә㊀㊀ 摘㊀要 ㊀目的:探讨ＩｇＡ肾病(ＩｇＡＮ)患儿组织蛋白酶Ｓ(ＣＴＳＳ)的变化情况及临床意义ꎮ方法:选取２０１７年０２月~２０１９年０５月收治于中国医科大学附属盛京医院小儿肾内科的２５例ＩｇＡＮ患儿ꎬ收集ＩｇＡＮ患儿的肾组织活检样本ꎬ对比同期因外伤或肿瘤原因行单侧部分肾切除患儿的肾脏组织标本ꎬ采用免疫组化手段检测ＣＴＳＳ在肾组织中的表达水平ꎻ收集ＩｇＡＮ患儿血清标本ꎬ对比健康体检儿童的血清标本ꎬ采用酶联免疫吸附试验(ＥＬＩＳＡ法)检测ＣＴＳＳ在血液中表达水平ꎮ结果:ＩｇＡＮ患儿肾小球系膜区以及小管上皮细胞高表达ＣＴＳＳꎬＩｇＡＮ患儿外周血清中ＣＴＳＳ表达较对照组明显升高[ＩｇＡＮ组(７６４.４ʃ２０.５３)ｐｇ/ｍｌꎬ对照组(５６５.１ʃ１４.７６)ｐｇ/ｍｌꎬＰ<０.０５]ꎻ且血清ＣＴＳＳ水平与患儿２４ｈ尿蛋白定量㊁尿微量白蛋白㊁尿红细胞数均具有正相关性(Ｐ<０.０５)ꎮ结论:ＩｇＡＮ患儿ＣＴＳＳ水平升高ꎬ其变化与肾脏受累的程度相关ꎮ提示ＣＴＳＳ可能与儿童ＩｇＡＮ的发生发展有关ꎮ 关键词 ㊀ＩｇＡ肾病㊀组织蛋白酶Ｓ㊀儿童㊀㊀增生性肾小球疾病是我国原发性肾小球肾炎最常见的病理类型ꎬ可以发生在不同类型的肾脏疾病ꎮＩｇＡＮ以肾脏免疫病理显示ＩｇＡ为主的免疫复合物沉积在肾小球系膜区为特征ꎮ主要临床表现为血尿ꎬ可伴有不同程度的蛋白尿㊁高血压和肾脏功能受损ꎬ是临床上导致终末期肾脏病最常见的原发性肾小球疾病ꎬ部分发展为肾小球硬化ꎬ甚至将不可逆的进展为终末期肾病ꎬ发病机制至今仍不十分清楚ꎬ因此对于ＩｇＡＮ影响因子的研究ꎬ以及探讨如何阻止ＩｇＡＮ的发生㊁发展无论对于肾内科的临床工作意义重大ꎬ更对解决社会经济问题具有极其重要的意义ꎬ受到国内外学者越来越多的关注ꎮ组织蛋白酶Ｓ(ＣａｔｈｅｐｓｉｎＳꎬＣＴＳＳ)是组织蛋白酶家族中的重要一员ꎬ１９８６年由Ｋｉｒｓｃｈｋｅ首次从牛脾提取出来ꎬ并证实其为一种半胱氨酸蛋白水解酶ꎬ为单链蛋白ꎬ含有２２５个氨基酸ꎬ分子量为２４ＫＤａ大小ꎬ在细胞中主要存在于细胞溶酶体内ꎬ溶酶体的酸性环境会增加其活性ꎬ由外界因素引起的细胞溶酶体破裂后ꎬ被激活并且释放到细胞外环境ꎬ通过与机体其他生理或病理反应发挥效力ꎬ对细胞造成损伤ꎮＣＴＳＳ拥有较强生物学作用ꎬ是极为关键的蛋白酶之一ꎬ参与抗原递呈㊁细胞因子的分泌㊁血管生成并能介导降解胞外基质[１]ꎬ可降解不需要的细胞内蛋白或内吞蛋白[２]ꎬ使细胞更易迁移㊁增殖和调亡ꎬ且与其他因子共同作用ꎬ调节人体各个系统的病理生理过程ꎮＣＴＳＳ在肾脏表达丰富ꎬ慢肾衰㊁狼疮肾㊁糖尿病肾病均有ＣＴＳＳ的高表达ꎬ多项研究表明ＣＴＳＳ可以通过ＰＩ３Ｋ/Ａｋｔ或ＭＡＰＫ通路抑制细胞凋亡ꎬ进而促进细胞的增殖[３ꎬ４]ꎬ而ＩｇＡＮ是最为典型的以系膜细胞增殖为主要病理表现的肾脏疾病ꎬＣＴＳＳ在ＩｇＡＮ中的表达情况以及作用机制国内外极少报道ꎬ因此我们推测ＣＴＳＳ可能在ＩｇＡＮ的疾病过程中起作用ꎬ影响疾病的发生发展和预后ꎮ本研究拟利用ＩｇＡＮ患者肾活检组织和血清标本ꎬ以免疫组化㊁ＥＬＩＳＡ等实验方法ꎬ探讨ＣＴＳＳ在ＩｇＡＮ中的变化情况及 ４１５ ㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀中国中西医结合肾病杂志２０２０年６月第２１卷第６期㊀ＣＪＩＴＷＮꎬＪｕｎｅ２０２０ꎬＶｏｌ.２１ꎬＮｏ.６临床意义ꎬ为ＩｇＡＮ病情评估及预后判定提供新思路ꎮ材料与方法１㊀实验对象㊀选取２０１７年０２月~２０１９年０５月收治于中国医科大学附属盛京医院小儿肾内科的２５例ＩｇＡＮ患儿ꎬ其中８例行肾组织活检ꎬ病理结果ＩｇＡＮⅢ级５例ꎬＩｇＡＮⅡ级３例ꎬ２５例患儿中男１５例ꎬ女１０例ꎬ年龄８岁~１５岁ꎬ平均(１２.５６ʃ３.７１)岁ꎬ病程在４周内ꎮ组织学检测的对照组为同期因外伤或肿瘤原因行单侧部分肾切除的８例患儿肾组织标本ꎻ血清学检测的对照组为我院健康体检儿童的血清标本ꎮ对照组性别及年龄与实验组基本保持一致ꎮ诊断标准:肾组织病理检查符合ＩｇＡＮ诊断ꎮ排除标准: (１)其他继发性ＩｇＡＮ患儿(狼疮性肾炎㊁紫癜性肾炎㊁病毒性肝炎相关肾炎等)ꎻ(２)急性肾衰竭患儿ꎻ(３)免疫功能异常者ꎻ(４)近１月曾使用过细胞毒药物㊁糖皮质激素等药物者ꎮ本研究经医院伦理委员会批准ꎮ２㊀实验方法２.１㊀免疫组化方法㊀２.５μｍ的肾脏石蜡切片经二甲苯和梯度酒精进行脱蜡ꎬ将切片浸入抗原修复液(０.２ｇ柠檬酸＋１.５ｇ柠檬酸三钠＋５００ｍｌ蒸馏水)中ꎬ微波炉加热至沸腾７ｍｉｎꎬ３％Ｈ２Ｏ２去离子水室温孵育１０ｍｉｎꎬ以灭活内源性过氧化氢酶活性ꎬ滴加正常山羊非免疫血清室温封闭ꎬ滴加一抗(ＮＢＰ１－３１４３４购自ｎｏｖｕｓ公司)ꎬ４ħ孵育过夜ꎮ第２天ꎬ滴加生物素标记的二抗试问孵育２０ｍｉｎꎬ并滴加辣根过氧化物酶标记链酶卵白素工作液ꎬ滴加新配制的ＤＡＢ显色剂ꎬ待出现阳性反应时流水终止ꎬ苏木素复染２ｍｉｎꎬ水洗返蓝ꎬ梯度酒精脱水㊁二甲苯透明ꎬ中性树脂封片ꎬ随后在显微镜下观察ꎮ阴性对照组用ＰＢＳ代替一抗ꎬ其他步骤相同ꎮ２.２㊀血清ＣＴＳＳＥＬＩＳＡ检测法㊀从－８０ħ冰箱取出储存的血清冷冻标本ꎬ先平衡至室温ꎬ随后按照说明书步骤进行标准品及样品的稀释与加样ꎬ用封板膜封板ꎬ３７ħ室温孵育３０ｍｉｎꎻ洗板ꎬ每孔加入酶标试剂ꎬ室温孵育及洗板ꎮ显色并终止ꎬ测定时以空白孔调零ꎬ４５０ｎｍ波长依序测量各孔的吸光度(ＯＤ值)ꎬＥＬＩＳＡ试剂盒[ＨｕｍａｎＣａｔｈｅｐｓｉｎＳＥＬＩＳＡＫｉｔ(ＣＴＳＳ)ａｂ１５５４２７]购自ａｂｃａｍ公司ꎮ３㊀统计学方法㊀使用ＳＰＳＳ２１.０统计学软件进行数据统计分析ꎬ计量资料均以( ｘʃｓ)表示ꎬ两两比较采用Ｔ检验法ꎻ相关分析采用Ｐｅａｒｓｏｎ分析血清ＣＴＳＳ水平与患儿２４ｈ尿蛋白定量㊁尿微量白蛋白㊁尿红细胞数的相关性ꎬＰ<０.０５为差异有统计学意义ꎮ结㊀㊀果１㊀免疫组化方法检测ＩｇＡＮ肾活检切片㊀ＣＴＳＳ表达量较对照组有明显升高ꎮ可见ＩｇＡＮ患儿肾小球系膜区以及小管上皮细胞棕色颗粒增多ꎬ提示ＩｇＡＮ时ＣＴＳＳ的表达增高ꎮ见图１ꎮ２㊀ＥＬＩＳＡ方法检测血清ＣＴＳＳ水平㊀如表１ꎬ图２所示ꎬＩｇＡＮ患者血清ＣＴＳＳ水平明显高于对照组[ＩｇＡＮ组(７５１.０ʃ２０.５３)ｐｇ/ｍｌꎬ对照组(５６０.７ʃ１４.７６)ｐｇ/ｍｌ]ꎬ差异有统计学意义(Ｐ<０.０５)ꎮ３㊀ＩｇＡＮ患者血清ＣＴＳＳ水平与临床指标的相关性㊀Ｐｅａｒｓｏｎ相关分析结果显示:ＩｇＡＮ患儿血清ＣＴＳＳ水平与２４ｈ尿蛋白定量㊁尿微量白蛋白㊁尿红细胞数呈正相关(ｒ＝０.５４６㊁０.４２３㊁０.７７１ꎬ均Ｐ<０.０５)ꎻ与血清肌酐㊁尿素的相关性无统计学差异ꎮ见表２ꎮ表１㊀ＩｇＡＮ组与正常对照组血清ＣＴＳＳ水平比较㊀( ｘʃｓ)组别ｎＣＴＳＳ(ｐｇ/ｍｌ)ＩｇＡＮ组２５７５１.０ʃ２０.５３对照组２５５６０.７ʃ１４.７６图2IgAN组与正常对照组血清CTSS水平1 000800600400200CTSS（p g/ml）IgAN组对照组注：与对照组比较，*P＜0.05表２㊀ＩｇＡＮ患者血清ＣＴＳＳ水平与临床指标的相关性临床指标ＣＴＳＳｒ值Ｐ值Ｓｃｒ０.０８７０.６５６ＢＵＮ０.０２８０.９６７２４ｈ尿蛋白定量０.５４６<０.０５尿微量白蛋白０.４２３<０.０５尿红细胞数(/ＨＰ)０.７７１<０.０５讨㊀㊀论组织蛋白酶由Ｒ.Ｗｉｌｌｓｔāａｔｔｅｒ于１９２９发现并命名ꎬ并由后人不断发现补充至今ꎮ组织蛋白酶是溶酶体蛋白酶家族成员ꎬ与木瓜蛋白酶家族有很高的同源性ꎮ在人体已发现１５种组织蛋白酶[５]ꎬ根据酶体结构㊁催化方式和底物蛋白质的种类ꎬ组织蛋白酶可分为丝氨酸㊁天门冬氨酸和半胱氨酸组织蛋白酶三类ꎮ组织蛋白酶ＢꎬＣꎬＦꎬＨꎬＫꎬＬꎬＯꎬＳꎬＶꎬＸꎬＷ为半胱氨酸组织蛋白酶ꎬ是组织蛋白酶中种类最多的类型ꎬ在体内各组织细胞内广泛分布ꎬ并在细胞内外发挥各种作用ꎮ组织蛋白酶Ａ和Ｇ为丝氨酸组织蛋白酶ꎬ组织蛋白酶Ｄ和Ｅ代表天门冬氨酸组织蛋白酶[６]ꎮＣＴＳＳ作为组织蛋白酶家族中的一员ꎬ参与多种疾病的病理生理过程ꎬ并可以和较多炎症因子相互作用ꎬ参与体内免疫和自身炎症反应ꎮ研究表明ꎬＣＴＳＳ在损伤修复㊁免疫炎症以及肿瘤等的发生㊁发展过程中发挥着重要作用ꎮＣＴＳＳ是１９８６年由Ｋｉｒｓｃｈｋｅ初次从牛脾提取出来ꎬ并证实其为一类半胱氨酸蛋白水解酶ꎬ在心血管疾病中ꎬ有研究者认为ＣａｔｈｅｐｓｉｎＳ可作为心血管疾病的标志物[７]ꎮ当血管平滑肌细胞受ＩＬ－１β和ＩＦＮ－γ刺激时ꎬ会分泌ＣａｔｈｅｐｓｉｎＳ并降解不溶性弹性蛋白ꎬ进而破坏动脉粥样斑块在血管中的稳态ꎮＪａｎｇａ等[８]研究结果提示抑制ＣａｔｈｅｐｓｉｎＳ可减少因吸烟引发的ＣＯＰＤꎬ对于ＣＴＳＳ在肾脏的表达和功能ꎬ国内外已有部分研究ꎬ国外学者在狼疮小鼠模型中的研究发现ꎬ经过ＣＴＳＳ抑制剂(ＲＯ５４６１１１１)治疗后ꎬ血浆ＩＬ－１０和ＴＮＦ水平降低ꎬ且应用抑制剂组小鼠狼疮肾炎的进展得到控制[９]ꎮⅡ型糖尿病患者ＣＴＳＳ显著高于正常对照组ꎬ且敲除ＣＴＳＳ后的小鼠减低了糖尿病肾病的发病风５１５中国中西医结合肾病杂志２０２０年６月第２１卷第６期㊀ＣＪＩＴＷＮꎬＪｕｎｅ２０２０ꎬＶｏｌ.２１ꎬＮｏ.６㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀险[１０]ꎬＣＴＳＳ激活内皮细胞受体并促进微血管糖尿病并发症的发生[１１]ꎬ揭示了该基因对于糖尿病肾病的致病作用ꎬＣＫＤ小鼠模型血浆ＣＴＳＳ随肾小球率过滤的降低而增加ꎬ这说明血浆ＣＴＳＳ随着ＣＫＤ的进展增加[１２ꎬ１３]ꎮＣａｒｌｓｓｏｎ等[１４]对２０７例血液透析患者的纵向队列研究显示ꎬ终末期肾病(ＥＳＲＤ)中高表达的ＣＴＳＳ与血管生成和炎症相关通路存在正相关关系ꎮＳｅｎａ等[１５]应用ＣａｔｈｅｐｓｉｎＳ的抑制剂治疗心血管炎症疾病中发现ꎬＣａｔｈｅｐｓｉｎＳ的抑制剂可以减轻ＣＫＤ患者心血管炎症ꎮ以上研究结果均说明ＣＴＳＳ与肾脏疾病发生发展密切相关ꎬ在狼疮肾炎㊁糖尿病肾病㊁ＣＫＤ等肾脏疾病中ＣＴＳＳ有加重病情ꎬ减低预后的作用ꎮ最新基因芯片结果显示ＣＴＳＳ是ＩｇＡＮ与正常对照组的差异基因[１６]ꎮ国外组学分析提示ＣＴＳＳ是ＩｇＡＮ中潜在的可能有意义的基因[１７]ꎬ但并未进行临床实验验证ꎮ本研究采用免疫组化手段检测到ＩｇＡＮ患儿肾脏病理组织标本中ＣＴＳＳ在肾小球系膜区和小管上皮细胞中表达ꎬ且较正常对照组表达量明显增高ꎬ我们进一步分析了ＩｇＡＮ患儿血液标本ꎬ发现ＩｇＡＮ患儿外周血清中ＣＴＳＳ蛋白表达较对照组亦明显升高[ＩｇＡＮ组(７６４.４ʃ２０.５３)ｐｇ/ｍｌꎬ对照组(５６５.１ʃ１４.７６)ｐｇ/ｍｌꎬＰ<０.０５]ꎬ那么ＣＴＳＳ无论在肾脏组织中抑或是血液中均呈现高表达ꎬ这些研究结果与国外芯片和组学分析结果一致ꎬ充分提示了其可能参与了ＩｇＡＮ的疾病发病ꎬ且在疾病的进展过程中起到一定作用ꎬ那么究竟ＣＴＳＳ是如何参与疾病的发生发展ꎬ又有何种临床意义呢?我们进一步分析了血清ＣＴＳＳ水平与ＩｇＡＮ患儿肾脏损伤临床相关指标:２４ｈ尿蛋白定量㊁尿微量白蛋白㊁尿红细胞计数㊁肌酐和尿素之间的关系ꎬ结果提示ＣＴＳＳ与２４ｈ尿蛋白定量㊁尿微量白蛋白㊁尿红细胞数均具有正相关性(Ｐ<０.０５)ꎬ与患儿的肌酐和尿素水平无显著相关性ꎬ这更进一步揭示出血清ＣＴＳＳ的水平高低与ＩｇＡＮ疾病的临床特征相关ꎬＣＴＳＳ越高ꎬ肾脏受累的程度越重ꎮＣＴＳＳ在ＩｇＡＮ中的这个变化趋势和临床意义也与其在其他肾脏疾病中的表达和作用相似ꎮ本文２５例ＩｇＡＮ患儿中ꎬ仅８例做了肾活检ꎮ病理结果显示ＩｇＡＮⅢ级５例ꎬＩｇＡＮⅡ级３例ꎬ由于例数太少无法进行统计学分析ꎬ未能根据不同病理类型比较血清ＣＴＳＳ水平ꎮ总之ꎬＩｇＡＮ患儿肾脏组织以及外周血清中ＣＴＳＳ蛋白表达较对照组升高ꎬ且与患儿蛋白尿和尿红细胞数相关ꎬ因此ＣＴＳＳ有可能成为评估ＩｇＡＮ肾脏损伤程度的指标ꎬ但其在疾病的发生发展中究竟如何起作用及其具体作用机制有待进一步研究ꎮ(本文图１见插页１－３)参㊀考㊀文㊀献１.ＦｏｎｏｖｉｃＭꎬＴｕｒｋＢ.Ｃｙｓｔｅｉｎｅｃａｔｈｅｐｓｉｎｓａｎｄｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ.ＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓＡｃｔａꎬ２０１４ꎬ１８４０:２５６０－２５７０.２.Ｈａｍｍ－ＡｌｖａｒｅｚＳＦꎬＪａｎｇａＳＲꎬＥｄｍａｎＭＣꎬｅｔａｌ.ＴｅａｒｃａｔｈｅｐｓｉｎＳａｓａｃａｎｄｉｄａｔｅｂｉｏｍａｒｋｅｒｆｏｒＳｊöｇｒｅｎ ｓｓｙｎｄｒｏｍｅ.ＡｒｔｈｒｉｔｉｓＲｈｅｕｍａｔｏｌꎬ２０１４ꎬ６６(７):１８７２－１８８１.３.ＨｓｉｅｈＭＪꎬＬｉｎＣＷꎬＣｈｅｎＭＫꎬｅｔａｌ.ＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｃａｔｈｅｐｓｉｎＳｃｏｎｆｅｒｓｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｔｏｍｅｔｈｙｌｐｒｏｔｏｄｉｏｓｃｉｎｉｎｏｒａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓｖｉａａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆｐ３８ＭＡＰＫ/ＪＮＫｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｓ.ＳｃｉＲｅｐꎬ２０１７ꎬ２２(７):４５０３９.４.ＺｈａｎｇＬꎬＷａｎｇＨＤꎬＸｕＪＧꎬｅｔａｌ.ＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｃａｔｈｅｐｓｉｎＳｉｎ￣ｄｕｃｅｓａｕｔｏｐｈａｇｙａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｈｕｍａｎｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａｃｅｌｌｌｉｎｅｓｔｈｒｏｕｇｈＲＯＳ－ｍｅｄｉａｔｅｄＰＩ３Ｋ－ＡＫＴ－ｍＴＯＲ－ｐ７０Ｓ６ＫａｎｄＪＮＫｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｓ.ＴｏｘｉｃｏｌｏｇｙＬｅｔｔｅｒｓꎬ２０１４ꎬ２２８(３):２４８－２５９.５.Ｓｏｌ－ＣｈｕｒｃｈＫꎬＰｉｃｅｒｎｏＧＮꎬＳｔａｂｌｅｙＤＬꎬｅｔａｌ.Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎｏｆｐｌａ￣ｃｅｎｔａｌｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｃａｔｈｅｐｓｉｎｓ.ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓＲｅｓＣｏｍｍｕｎꎬ２００２ꎬ２９３(１):２３－２９.６.ＣｏｃｃｈｉａｒｏＰꎬＤｅＰａｓｑｕａｌｅＶꎬＤｅｌｌａＭｏｒｔｅＲꎬｅｔａｌ.Ｔｈｅｍｕｌｔｉｆａｃｅｔ￣ｅｄｒｏｌｅｏｆｔｈｅｌｙｓｏｓｏｍａｌｐｒｏｔｅａｓｅｃａｔｈｅｐｓｉｎｓｉｎｋｉｄｎｅｙｄｉｓｅａｓｅ.ＦｒｏｎｔＣｅｌｌＤｅｖＢｉｏｌꎬ２０１７ꎬ１９(５):１１４.７.ＷｕｏｐｉｏＪꎬＨｉｌｄｅｎＪꎬＢｒｉｎｇＣꎬｅｔａｌ.ＣａｔｈｅｐｓｉｎＢａｎｄＳａｓｍａｒｋｅｒｓｆｏｒｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒｒｉｓｋａｎｄａｌｌ－ｃａｕｓｅｍｏｒｔａｌｉｔｙｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｓｔａｂｌｅｃｏｒｏｎａｒｙｈｅａｒｔｄｉｓｅａｓｅｄｕｒｉｎｇ１０ｙｅａｒｓ:ａＣＬＡＲＩＣＯＲｔｒｉａｌｓｕｂ－ｓｔｕｄｙ.Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓꎬ２０１８ꎬ２７８:９７－１０２.８.ＪａｎｇａＳＲꎬＨａｍｍ－ＡｌｖａｒｅｚＳＦ.ＰＰ２Ａ:ＡｎｏｖｅｌｔａｒｇｅｔｔｏｐｒｅｖｅｎｔｃａｔｈｅｐｓｉｎＳ－ｍｅｄｉａｔｅｄｄａｍａｇｅｉｎｓｍｏｋｉｎｇ－ｉｎｄｕｃｅｄＣＯＰＤ.ＡｍＪＲｅｓｐｉｒＣｒｉｔＣａｒｅＭｅｄꎬ２０１９ꎬ２０:１１４７－１１５１.９.ＲｕｐａｎａｇｕｄｉＫＶꎬＫｕｌｋａｒｎｉＯＰꎬＬｉｃｈｔｎｅｋｅｒｔＪꎬｅｔａｌ.ＣａｔｈｅｐｓｉｎＳｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓｓｙｓｔｅｍｉｃｌｕｐｕｓｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓａｎｄｌｕｐｕｓｎｅ￣ｐｈｒｉｔｉｓｂｅｃａｕｓｅｃａｔｈｅｐｓｉｎＳｉｓｅｓｓｅｎｔｉａｌｆｏｒＭＨＣｃｌａｓｓⅡ－ｍｅｄｉ￣ａｔｅｄＣＤ４ＴｃｅｌｌａｎｄＢｃｅｌｌｐｒｉｍｉｎｇ.ＡｎｎＲｈｅｕｍＤｉｓꎬ２０１５ꎬ７４(２):４５２－４６３.１０.ＨｓｉｎｇＬＣꎬＫｉｒｋＥＡꎬＭｃｍｉｌｌｅｎＴＳꎬｅｔａｌ.ＲｏｌｅｓｆｏｒｃａｔｈｅｐｓｉｎｓＳꎬＬａｎｄＢｉｎｉｎｓｕｌｉｔｉｓａｎｄｄｉａｂｅｔｅｓｉｎｔｈｅＮＯＤｍｏｕｓｅ.ＪＡｕｔｏｉｍ￣ｍｕｎꎬ２０１０ꎬ３４(２):９６－１０４.１１.ＫｕｍａｒＶｒＳꎬＤａｒｉｓｉｐｕｄｉＭＮꎬＳｔｅｉｇｅｒＳꎬｅｔａｌ.ＣａｔｈｅｐｓｉｎＳｃｌｅａｖ￣ａｇｅｏｆｐｒｏｔｅａｓｅ－ａｃｔｉｖａｔｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒ－２ｏｎｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓｐｒｏ￣ｍｏｔｅｓｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒｄｉａｂｅｔｅｓｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ.ＪＡｍＳｏｃＮｅｐｈｒｏｌꎬ２０１６ꎬ２７(６):１２２７－１２３２.１２.ＳｔｅｕｂｌＤꎬＫｕｍａｒＳＶꎬＴａｔｏＭꎬｅｔａｌ.Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇｃａｔｈｅｐｓｉｎ－ＳｌｅｖｅｌｓｃｏｒｒｅｌａｔｅｗｉｔｈＧＦＲｄｅｃｌｉｎｅａｎｄｓＴＮＦＲ１ａｎｄｓＴＮＦＲ２ｌｅｖｅｌｓｉｎｍｉｃｅａｎｄｈｕｍａｎｓ.ＳｃｉＲｅｐꎬ２０１７ꎬ２７(７):４３５－４３８.１３.ＳｍｉｔｈＥＲꎬＴｏｍｌｉｎｓｏｎＬＡꎬＦｏｒｄＭＬꎬｅｔａｌ.Ｅｌａｓｔｉｎｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅａｏｒｔｉｃｓｔｉｆｆｅｎｉｎｇａｎｄａｌｌｃａｕｓｅｍｏｒ￣ｔａｌｉｔｙｉｎｐｒｅｄｉａｌｙｓｉｓｃｈｒｏｎｉｃｋｉｄｎｅｙｄｉｓｅａｓｅ.Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎꎬ２０１２ꎬ５９(５):９７３－９７８.１４.ＣａｒｌｓｓｏｎＡＣꎬＣａｒｒｅｒｏＪＪꎬＳｔｅｎｖｉｎｋｅｌＰꎬｅｔａｌ.Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎꎬｃａｔｈｅｐ￣ｓｉｎＳａｎｄｃａｔｈｅｐｓｉｎＬａｎｄｔｈｅｉｒａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｗｉｔｈｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｍａｒｋｅｒｓａｎｄｍｏｒｔａｌｉｔｙｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｕｎｄｅｒｇｏｉｎｇｈｅｍｏｄｉａｌｙｓｉｓ.ＢｌｏｏｄＰｕｒｉｆꎬ２０１５ꎬ３９(４):２５９－２６５.１５.ＳｅｎａＢＦꎬＦｉｇｕｅｉｒｅｄｏＪＬꎬＡｉｋａｗａＥ.ＣａｔｈｅｐｓｉｎＳａｓａｎｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎａｎｄｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎｉｎｃｈｒｏｎｉｃｋｉｄ￣ｎｅｙｄｉｓｅａｓｅ.ＦｒｏｎｔＣａｒｄｉｏｖａｓｃＭｅｄꎬ２０１８ꎬ５(４):８８.１６.ＣｕｉＹꎬＬｉｕＳꎬＣｕｉＷꎬｅｔａｌ.ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｐｏｔｅｎｔｉａｌｂｉｏｍａｒｋｅｒｓａｎｄｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｔａｒｇｅｔｓｆｏｒｈｕｍａｎＩｇＡｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙａｎｄｈｙｐｅｒ￣ｔｅｎｓｉｖｅｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙｂｙｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓａｎａｌｙｓｉｓ.ＭｏｌＭｅｄＲｅｐꎬ２０１７ꎬ１６(３):３０８７－３０９４.１７.ＭａｇｄａｌｅｎａＫꎬＫａｔｒｙｎａＣꎬＳｚｙｍｏｎＦꎬｅｔａｌ.ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｎｏｖｅｌｍｏｌｅｃｕｌａｒｓｉｇｎａｔｕｒｅｓｏｆＩｇＡｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙｔｈｒｏｕｇｈａｎｉｎｔｅｇｒａｔｉｖｅ－ｏｍｉｃｓａｎａｌｙｓｉｓ.ＳｃｉＲｅｐꎬ２０１７ꎬ２２(１):９０９１.(收稿:２０１９－０９－１７㊀修回:２０１９－１２－１７)６１５ ㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀中国中西医结合肾病杂志２０２０年６月第２１卷第６期㊀ＣＪＩＴＷＮꎬＪｕｎｅ２０２０ꎬＶｏｌ.２１ꎬＮｏ.６。
IgA肾病基因研究进展
２ ＩＡ 肾病 与基 因 多态性关 系 ｇ
当前的研究表 明 ， ＩＡ发病 相关 的基 因包 括甘 露糖 结 与 ｇ
合蛋 白（ ａ ｎｓ ｉｄｎ ｒｔｉ， Ｐ 基因 、 ｍ ｎ ｏｅｂｎ ｉｇｐｏｅ ＭＢ ） ｎ 子宫 球蛋 白（ ｔ － ｕｅ ｒ ｏｌ ｉ， Ｇ） 因、 类 白细胞 抗 原 （ ｕ ａ ｅｃｃｔ ｎｉ ｎ ｇ ｂｎ Ｕ 基 ｏ 人 ｈ ｍ ｎｌ ｏｙ ａｔ ｅ ， ｕ ｅ ｇ
科 学 进 展 ，０５，１ １ ：７— ９ ２０ １（ ）３ ３ ．
［３ ２ ］王 ［４ ２ ］王
军， 王玉 新 ， 永峰 ， 颌 下腺 同种 异体 移植模 型 的建立 郭 等． 军， 王玉新 ， 卢 利， 等．兔 颌下 腺同种 异体移 植术组 织学
［６ ２ ］李增健 ， 郑晓 辉 ， 王玉新 ， 成人 下颌 下腺微 血 管分 布和测 量 等．
因等 。
１ ＩＡ 肾病 病理 与 ＩＡ沉积 ｇ ｇ
ＩＡ肾病的病理类 型 呈现 多样性 ， 镜下 ， ｇ 光 可见本病 主要
维普资讯
广 面医学 ２０ 年 ９月第 ３ 卷 第９期 ０８ Ｏ
［２ 刘纯义， 丽珍 ． ２］ 刘 下颌下腺动静脉腺支 的显微 解剖 ［ ］ 中国医科 Ｊ．
大 学学 报 ，９ ７ ２ （ ） ２７— ２ ． １９ ，６ ３ ：２ ２ ９
１ ６３ ３ ［５ ２ ］李增健 ， 晓辉 ， 郑 王玉新 ， 成人 下颌下腺微血管构 筑［ ］ 解剖 等． Ｊ．
（ 收稿 日期 ：０ ８— ６—１ 修 回日期 ：０ ８— ７—１ ２０ ０ ２ ２０ ０ ４）
Ｉ ｇ Ａ肾 病 基 因 研 究 进 展▲
苏上 贵 韦 玉兰 黎
２广西 中医学 院生物化学教研室 ， 南宁市
IgA肾病靶向治疗药物的作用机制及临床应用进展
IgA肾病靶向治疗药物的作用机制及临床应用进展刘春花，杨定平武汉大学人民医院肾内科，武汉430060摘要：随着对IgA肾病自身免疫发病机制的不断认识，在传统支持治疗及免疫抑制治疗的基础上，针对发病机制的靶向治疗药物不断出现，包括黏膜免疫、补体活化、T细胞依赖或非T细胞依赖B细胞活化机制等。
IgA肾病与黏膜免疫的异常激活和慢性炎症状态关系密切，尤其是扁桃体和肠黏膜免疫系统，其可通过黏膜表面微生物群改变、异常免疫应答、基因易感性等途径介导IgA肾病的发生。
而作为IgA肾病发病驱动因素的半乳糖缺乏IgA1则是由黏膜B细胞产生的，该过程是由黏膜感染通过T细胞依赖性或非T细胞依赖机制诱导的。
此外，在IgA肾病患者肾活检标本中发现C3、C4d、甘露糖结合凝集素和C5b-9沉积在系膜区，而C1q的普遍缺失也证实了补体替代途径和凝集素途径参与IgA肾病。
目前相关研究已经针对这些发病机制中重要的信号通路及关键分子进行深入探索，从而为IgA肾病的靶向治疗提供新视角。
关键词：靶向治疗药物；肠黏膜免疫；B细胞；Toll样受体；补体系统；IgA肾病doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2023.14.025中图分类号：R692 文献标志码：A 文章编号：1002-266X（2023）14-0101-05IgA肾病是以肾小球系膜区IgA沉积为病理特征的肾小球疾病，是目前世界范围内最常见的原发性肾小球疾病，也是导致慢性肾衰竭的主要原因之一。
20%～40%的IgA肾病患者在确诊后10～20年内会进展为终末期肾病，需要肾脏替代治疗，给家庭和社会带来沉重的负担。
IgA肾病预后不佳，因此需要有效精准的治疗来延缓疾病进展；但其发病机制目前尚不明确，因此缺乏对因性治疗方案，现阶段主要以降低尿蛋白、控制血压及延缓疾病进展为主，治疗效果有限。
随着对IgA肾病自身免疫发病机制的不断认识，在传统支持治疗及免疫抑制治疗的基础上，针对发病机制的靶向治疗药物不断出现，包括黏膜免疫、补体活化、T细胞依赖或非T细胞依赖B 细胞活化机制等方面，为IgA肾病的治疗开辟了新途径。
免疫球蛋白A
人类J链是相对分子质量约15×103的多肽，与其他物种的J链高度同源。人J链基因有4个外显子，外显子1 编码前导肽，外显子2～4编码含有137个氨基酸残基的成熟肽，J链基因不是Ig基因簇的一部分，它定位于15号染 色体。人类J链有8个半胱氨酸残基，Cys15和Cys69通过二硫键与IgA的α链相连，其他6个半胱氨酸残基形成链内 二硫键（Cys13∶Cys101，Cys72∶Cys92，Cys109∶Cys134）。
的生理功能
血清IgA
分泌型IgA
血清IgA
在血液中，IgA与称为FcαRI（或CD89）的Fc受体相互作用，Fc受体在免疫效应细胞上表达，从而引发炎症 反应。通过含有IgA的免疫复合物连接FcαRI引起抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC），嗜酸性粒细胞和嗜 碱性粒细胞的脱粒，单核细胞，巨噬细胞和中性粒细胞的吞噬作用，以及多形核白细胞引发的呼吸爆发活动。
免疫球蛋白A
血清中的物质
01 简介
03 分泌型
目录
02 的类别区分 04 的生理功能
目录
05 的作用
07 的临床应用
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Actinobacillus pleuropnermoniase 中IgA蛋白酶活性的
研究
IgA 蛋白酶最初报道是在流感嗜血杆菌当中，因此猜想在HPS和APP中可能拥有与其功能想类似的IgA蛋白酶，查阅文献，Michael A.Mullins.et[1]初步证
明了副猪嗜血杆菌中具有IgA
种酶具有IgA蛋白酶的活性，后来，申果[2]通过对
功能的预测发现，
下面是通过WB的方法对EspP1和EspP2对IgA蛋白酶的功能进行的研究
因此，猜想APP中也具有类似功能的物质存在，查阅文献发现，
Garcia-Cuellar,C.et.al[3]提到APP能够分泌出在体外降解猪血红素和IgA的蛋白酶。
但是文章通过克隆表达得出了一个24KDa,后来证实是锌金属蛋白酶的蛋白（zinc metalloprotease），文中提到这个蛋白却只能够切割偶氮骨胶原（azocoll）,明胶（gelatin）和肌动蛋白（actin）并没有提到能够对IgA蛋白进行切割。
IgA按其免疫功能又分为血清型及分泌型两种。
血清型IgA存在于血清中，其含量占总IgA的85%左右。
分泌型IgA存在于分泌液中，如唾液、泪液、初乳、鼻和支气管分泌液、胃肠液、尿液、汗液等。
分泌型IgA是机体粘膜局部抗感染免疫的主要抗体，考虑到App定植的主要部位是在成熟猪肺的细支气管末端，因此考虑，研究App中的IgA蛋白酶对于App抵抗宿主的免疫防御有着一定的作用。
1. Mullins, M.A., et al., Haemophilus parasuis exhibits IgA protease activity but lacks
homologs of the IgA protease genes of Haemophilus influenzae. Vet Microbiol, 2011.
153(3-4): p. 407-12.
2. 申果, 副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素和假定丝氨酸蛋白酶EspPs的致病作用研究.
2013, 华中农业大学.
3. Garcia-Cuellar, C., et al., A 24-kDa cloned zinc metalloprotease from Actinobacillus
pleuropneumoniae is common to all serotypes and cleaves actin in vitro. Can J Vet Res, 2000. 64(2): p. 88-95.。