蛋白酶的生产和应用_下_
酶学-蛋白酶
蛋白酶
成员：杨超越 李星宇 舒皓钰 王睿飞 徐也甜 李锐涛
蛋白酶
蛋白酶是水解蛋白质肽链的一类酶的总称。到本
世纪初，已经报导的微生物蛋白酶估计超过900
种，生物体的生理活动和疾病的发生，如食物之
消化吸收、血液之凝固、溶血作用、炎症、血压
调节、细胞分化自溶、机体衰老、癌症转移、生
蛋白酶的应用
蛋白酶在烘焙中的应用
蛋白酶的作用机理
蛋白酶能作用于蛋白质和多肽形成多肽 和氨基酸。完好的面粉中蛋白酶活力很 低，制作面包时添加蛋白酶会使面团中 多肽和氨基酸含量增加，氨基酸是形成 香味物质的中间产物，多肽则是潜在的 滋味增强剂、氧化剂、甜味剂或苦味剂。 蛋白酶种类不同，产生的羰基化合物也 不同，若蛋白酶中不含产生异味的脂酶， 适量添加有利于改替面包的香气。
2009年 以色列 用了4500磅的原料 在特拉维夫做了世界最大的鹰嘴豆泥 昭示自己正宗
黎巴嫩人表示不服， 2010年300大厨做了两倍的量 许多人围着大盘载歌载舞
2015年以色列本来打算做一个15吨的 后来因为安全问题而作罢。。。。。。。。
赋予我们食物想象的豆类 粉身碎骨后带来了更多的惊喜
老祖先赠予人类的实惠食物 滋养了中东地区来来去去的民族 文明的兴盛和交流让其传遍地中海各个领域 融入了中东各国人民的血液 在交错分裂的历史和政治图景中 又成为了各自民族想象和身份认同的一部分
内源蛋白酶对肉类食品滋味的影响
滋味是肉制品的重要感官特性之一，公认的基本味 觉有酸、甜、苦、咸和鲜。肉类食品的滋味物质主要有 游离氨基酸、肽、核苷酸和无机盐。 蛋白质的降解是氨基酸和肽形成的重要途径之一， 不同的肽与氨基酸具有不同的呈味特性，从而使肉呈现 不同的滋味。
蛋白酶生产和应用的进展
蛋白酶生产和应用的进展蛋白酶是生物世界中一类重要的酶，具有广泛的应用价值。
它们能够分解蛋白质，使其转化为更容易被机体吸收的氨基酸或小分子肽。
在食品、医药、环保等领域，蛋白酶都发挥着重要的作用。
本文将围绕蛋白酶的生产和应用进行深入探讨，展望其未来的发展趋势。
蛋白酶的生产蛋白酶的生产方法主要有三种：微生物发酵、化学合成和生物合成。
微生物发酵微生物发酵是生产蛋白酶的最常用方法。
通过选用合适的微生物菌种，在适宜的生长条件下进行培养，以获得大量的微生物菌体及分泌的蛋白酶。
该方法的优点是菌体生长快、产量高，而且生产成本相对较低。
但微生物发酵过程中，发酵条件及培养基的组成对蛋白酶的产量和性质有很大影响，需要严格控制。
化学合成化学合成是通过化学反应直接合成蛋白酶的方法。
该方法具有操作简便、成本低等优点。
但是，化学合成方法需要使用有机溶剂，有时还需加入重金属催化剂，可能导致环境污染和健康问题。
生物合成生物合成是利用细胞内基因表达系统合成蛋白酶的方法。
通过基因工程技术将目的基因导入受体细胞，在适宜的生长条件下进行培养，实现蛋白酶的高效表达。
生物合成的优点在于无污染、高效、定向，但需要具备基因工程技术的专业知识和技能，生产成本相对较高。
蛋白酶的应用食品领域在食品领域，蛋白酶主要用于肉类、奶制品、面制品等食品的加工过程中。
通过使用蛋白酶，能够提高食品的营养价值、改善口感、风味和质地等方面。
蛋白酶还被用于生产新型的功能性食品，如高纤维蛋白食品、低过敏性食品等。
医药领域在医药领域，蛋白酶主要用于药物生产和医学研究。
例如，胰蛋白酶被用于消化蛋白质，提高药物的吸收效果；胶原蛋白酶可用于治疗骨折、关节炎等疾病；弹性蛋白酶可用于治疗血管疾病等。
蛋白酶在疫苗生产和临床诊断方面也有广泛应用。
环保领域在环保领域，蛋白酶主要用于废水处理和污染环境的修复。
蛋白酶能够分解废水中的有机物，将其转化为更易被微生物降解的小分子物质，从而实现废水的净化。
蛋白酶类的生产
一、 酸性蛋白酶
• 一、酸性蛋白酶的性质 • 二、酸性蛋白酶的生产
一、酸性蛋白酶的性质
• （一）酸性蛋白酶是一种羧基蛋白酶。 • （二） pI3-5；分子量30000-40000；最适pH 3-4；稳定 pH2-6； 。 • （三）50℃以上不稳定。 • （四）抑制剂为重氮酮化合物。 • （五）微生物酸性蛋白酶与胃蛋白酶有所不同。 • （六）水解不同蛋白质能力不同。 • （七）霉菌产生的胞外酸性蛋白酶中，常夹有酸性羧肽 酶。
（一）按蛋白酶水解蛋白质的 方式分类
• 1、内肽酶 • 2、端肽酶 • 3、酯蛋白酶
（二）按酶的来源分类
• 1、动物蛋白酶 • 2、植物蛋白酶 • 3、微生物蛋白酶
（三）按蛋白酶作用的最适pH 值分类
• 1、酸性蛋白酶 • 2、中性蛋白酶 • 3、碱性蛋白酶
（四）按蛋白酶的活性中心分 类
1、丝氨酸蛋白酶 • 2、巯基蛋白酶 • 3、羧基蛋白酶 • 4、金属蛋白酶
动物内脏植物茎叶果实微生物细胞第一节蛋白酶的分类三微生物蛋白酶生产的影响因素一蛋白酶的分类四按蛋白酶的活性中心分类一按蛋白酶水解蛋白质的方式分类3酯蛋白酶二按酶的来源分类3微生物蛋白酶三按蛋白酶作用的最适ph值分类3碱性蛋白酶四按蛋白酶的活性中心分4金属蛋白酶一酸性蛋白酶二酸性蛋白酶的生产一酸性蛋白酶的性质二pi35
• • • •
（二）分子量：20000-34000；pI 8-9。 （三）对二异丙基氟磷酸敏感。 （四）比较能耐热。 （五）由芽孢杆菌产生的作用性质相同的碱性蛋 白酶可分为两种。
二、碱性蛋白酶的生产
• （一）微生物（菌种） 地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜碱性芽孢杆菌、 灰色链霉菌、费氏链霉菌等 • （二） 举例 • 1、短小芽孢杆菌289碱性蛋白酶的生产 • 2、地衣芽孢杆菌2709碱性蛋白酶的生产 • 3、嗜碱性芽孢杆菌生产碱性蛋白酶
蛋白酶的应用
蛋白酶的应用引言蛋白酶是一类特殊的酶，用于加速生物体内的蛋白质降解反应。
它具有广泛的应用领域，包括生物技术、药物研发、工业生产等。
本文将详细探讨蛋白酶的特性以及其在各个领域的应用。
蛋白酶的特性蛋白酶是一类能够催化蛋白质水解反应的酶，它能够将蛋白质分子中的肽键断裂，并将其降解为较小的肽段或氨基酸。
蛋白酶的特性主要包括以下几个方面：特异性蛋白酶具有对特定的肽键和氨基酸序列具有高度特异性的特点。
不同蛋白酶会选择性地加速特定的肽键水解反应，从而实现对蛋白质的降解。
这种特异性使得蛋白酶在生物体内能够精确地调控蛋白质的降解和代谢过程。
催化效率蛋白酶具有非常高的催化效率，能够在生物体内快速分解蛋白质。
许多蛋白酶的催化速率常常达到每秒数千次的级别，极大地加速了蛋白质降解的过程。
反应条件蛋白酶的催化活性受到环境条件的影响。
通常，蛋白酶的催化活性在中性或弱酸性条件下最佳。
此外，温度和离子浓度也会对蛋白酶的催化效率产生影响。
蛋白酶在生物技术中的应用蛋白酶在生物技术领域具有广泛的应用，以下是一些常见的应用方式：蛋白质纯化蛋白酶可以用于蛋白质纯化的过程中，通过特异性降解无关的杂质蛋白质，从而提高目标蛋白质的纯度和产量。
蛋白质结构研究蛋白酶在蛋白质结构研究中起到了重要作用。
它可以用于蛋白质的消化，将蛋白质降解为较小的片段，从而便于进一步的结构分析和测序。
蛋白质工程蛋白酶可以用于蛋白质的定向进化和改造。
通过蛋白酶催化反应，可以针对目标蛋白质的特定位点进行肽键剪切，从而实现蛋白质序列的定点突变和改良。
蛋白酶在药物研发中的应用蛋白酶在药物研发领域也有重要的应用价值，以下是一些常见的应用方式：药物设计蛋白酶可以用于药物的设计和研发。
通过对目标蛋白质的结构和功能进行深入了解，可以设计出能够与蛋白酶结合并调控其活性的药物分子。
靶向治疗某些疾病与蛋白质的异常表达或突变有关。
利用蛋白酶的特异性降解作用，可以针对性地破坏异常蛋白质，实现对疾病的治疗。
蛋白酶在饲料中的应用
促进禽畜生长
蛋白酶的应用可以降低饲料中蛋 白质的含量，减少禽畜胃肠道的 负担，促进其生长。
提高禽畜免疫力
蛋白酶的应用可以改善禽畜的营 养状况，增强其免疫力，降低疾 病的发生率。
在宠物饲料中的应用
促进宠物健康生长
降低宠物粪便臭味
蛋白酶能够将宠物饲料中的蛋白质分 解成小分子肽和氨基酸，提高宠物对 饲料的消化吸收率，促进其健康生长。
随着人们对动物健康和动物产 品品质的关注增加，对个性化 营养的需求也在增加。蛋白酶 可以作为实现这一目标的有效 工具。
在可持续发展的背景下，使用 蛋白酶可以减少对有限蛋白质 来源的依赖，从而降低环境负 担。
Part
05
结论
蛋白酶在饲料中的重要性
提高饲料利用率
01
蛋白酶能够将饲料中的蛋白质分解成更易被动物吸收的小肽和
成本与可获得性
虽然许多蛋白酶已经商业化生产，但它们的成本和可获得 性可能限制了其在饲料中的应用。
与饲料的兼容性
蛋白酶需要与饲料中的其他成分兼容，以确保最佳的消化 效果。然而，某些蛋白酶可能与饲料中的某些成分发生反 应，影响其效果。
安全性问题
对于新的蛋白酶来源，需要进行充分的安全性评估，以确 保它们不会对动物或人类健康产生负面影响。
前景
新型蛋白酶的开发
与其他酶的协同作用
个性化营养的需求
可持续性的考虑
随着生物技术的进步，开发新 型、更稳定的蛋白酶已成为可 能。这些新型蛋白酶可以提高 在饲料加工和储存过程中的稳 定性。
研究发现，某些蛋白酶与其他 酶（如植酸酶、木聚糖酶等） 协同作用，可以更有效地提高 饲料的消化率。这为未来饲料 添加剂的开发提供了新的思路 。
蛋白酶能够提供畜禽生长所需的氨基 酸和肽类物质，促进畜禽的生长发育。
木瓜蛋白酶的开发与应用
木瓜蛋白酶的开发与应用一、本文概述木瓜蛋白酶，一种源于木瓜果实中的天然酶类，凭借其独特的催化性能和广泛的应用价值，近年来在生物科技领域引起了广泛关注。
本文旨在全面探讨木瓜蛋白酶的开发与应用，通过深入了解其生物特性、提取工艺、纯化技术等方面，以期推动木瓜蛋白酶在食品、医药、化妆品等多个领域的广泛应用。
文章将从木瓜蛋白酶的基本性质出发，详细阐述其开发过程中的关键技术和应用现状，并展望未来的发展趋势和潜在挑战。
通过本文的阐述，希望能够为相关领域的研究人员和企业提供有益的参考和启示，推动木瓜蛋白酶产业的持续发展和创新。
二、木瓜蛋白酶的开发木瓜蛋白酶，一种源自木瓜乳液的巯基蛋白酶，自被发现以来，其在多个领域的应用价值逐渐被人们所认识。
其独特的催化特性，如高效性、特异性和温和的反应条件，使得木瓜蛋白酶在食品、医药、化妆品、皮革和纺织等多个行业中都有广泛的应用。
木瓜蛋白酶的提取过程主要包括乳液的收集、离心分离、沉淀和纯化等步骤。
在提取过程中，需要注意保持酶的活性，避免在高温或酸性环境中失活。
随着技术的发展，研究者们也在不断探索更高效的提取和纯化方法，如利用超滤、离子交换层析和凝胶电泳等技术，以提高木瓜蛋白酶的纯度和活性。
对木瓜蛋白酶的酶学性质进行深入研究，是开发其应用的基础。
这包括对其最适pH值、最适温度、热稳定性、抑制剂敏感性等方面的研究。
通过深入研究，可以更准确地掌握木瓜蛋白酶的催化特性，为其在各个领域的应用提供理论依据。
随着生物技术的飞速发展，遗传工程技术在木瓜蛋白酶的开发中也发挥了重要作用。
通过基因克隆、基因表达和蛋白质工程等技术，可以实现对木瓜蛋白酶的定向改造和优化，如提高其热稳定性、拓宽其底物特异性等。
这为木瓜蛋白酶在更广泛领域的应用提供了可能。
基于木瓜蛋白酶的特性和应用需求，可以开发出一系列新产品。
例如，在食品工业中，可以利用木瓜蛋白酶制作低过敏性的食品；在医药领域，可以开发木瓜蛋白酶作为药物载体或治疗某些疾病的特效药；在化妆品行业，木瓜蛋白酶可以作为天然酶制剂用于皮肤护理等。
6.2 蛋白酶
Haihui Zhang Email：z_haihui@
影响凝乳酶活性的因素
（1）PH：在酸性环境中凝乳酶活力最强，原奶酸度的任何微小变化 均能显著影响凝乳酶的活力。凝乳酶活力大部分来源于其中的胰蛋白 酶，小部分来源于牛胃蛋白酶（不过猪凝乳酶中的有效成分是猪胃蛋 白酶）。胰蛋白酶的最适PH为5.4，而胃蛋白酶的最适PH低于胰蛋 白酶。 （2）温度：凝乳酶的最适温度是42摄氏度。（到55-60摄氏度，酶 本身受到破坏）因为乳温明显影响凝结速度。乳温30摄氏度时原奶 凝结时间是42摄氏度的2-3倍。不过实际干酪生产中乳温通常保持在 30-33摄氏度，一是考虑到乳酸菌的最适温度（比如链球菌属的最适 温度在30摄氏度左右，最高不能超过40摄氏度）；二是较高乳温下 凝块硬化速度太快，以至随后的切割比较困难。 （3）Ca 2+浓度：只有原奶中存在自由钙离子时，被凝乳酶转化的酪 蛋白才能凝结。因此钙离子浓度将会影响凝乳时间、凝块硬度和乳清 排出。
2、明胶的生产 、
原料 动物的皮或骨 生产方法 酸法或碱法，也可用蛋白酶水解法生产。 酸法或碱法，也可用蛋白酶水解法生产。 酶法生产明胶的工艺流程如下： 酶法生产明胶的工艺流程如下：
原料 炭处理 切割、 切割、捣碎 过滤 干燥 水洗 加酶水解 除酶 提取 活性
明胶产品
Haihui Zhang Email：z_haihui@
Haihui Zhang Email：z_haihui@
1、氨基酸的生产 、
• 基本工艺流程 蛋白质 酸混合液 • 前处理 一般采用热处理的方法，也可采取生化分离技术将 蛋白质先提取出来，再进行酶解。 原料处理 分离纯化 加蛋白酶 氨基酸产品 水解 氨基
Haihui Zhang Email：z_haihui@
蛋白酶及其在食品工业中应用(论文)
蛋白酶及其在食品工业中应用09化本3班2009364308 梁容摘要：随着科学技术的发展，食品加工的精度越来越高，食品加工的方法越来愈多，人们对食品的要求也越来越高。
蛋白酶作为具有高效性、转移性而且有非常安全的生物催化剂，在食品加工和生产中备受关注。
本文介绍了蛋白酶的种类及其在食品工业中的应用，以其在制糖工业、蛋白制品加工、果蔬加工、焙烤食品、酿酒工业中以及生产油脂中的应用为代表。
关键词：蛋白酶、制糖、鱼、啤酒一、蛋白酶1.蛋白酶是一类由活细胞产生的具有生物催化功能的分子量适中的蛋白质,具有极高的催化效率、高度的特异性及控制的灵敏性。
大多数酶是水溶性的。
由于酶催化反应具有底物专一性、催化高效性、反应条件温和等优点,符合绿色化学的要求，从而被大家高度重视，已在许多领域得到广泛的应用[1]。
蛋白酶广泛的存在于动物、植物以及微生物体内。
蛋白酶主要来源于高等植物的种子和果实, 动物的内脏和腺体, 以及某些微生物如酵母、霉菌和杆菌等。
目前已商品化的酶制剂中, 植物来源的蛋白酶有木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和生姜蛋白酶等。
动物来源的蛋白酶有从家畜胰脏和胃中提取的胰蛋白酶和胃蛋白酶等。
微生物来源的蛋白酶是商品化酶的主体。
2.种类木瓜蛋白酶，是一种蛋白水解酶，可将抗体分子水解为3个片段。
是番木瓜中含有的一种低特异性蛋白水解酶，活性中心含半胱氨酸，属巯基蛋白酶，是一种在酸性、中性、碱性环境下均能分解蛋白质的蛋白酶。
它的外观为白色至浅黄色的粉末，微有吸湿性。
胃蛋白酶（英文名称：Pepsin），是一种消化性蛋白酶，由胃部中的胃粘膜主细胞所分泌，功能是将食物中的蛋白质分解为小的肽片段。
胃蛋白酶原由胃底主细胞分泌，在pH1.5～5.0条件下，被活化成胃蛋白酶，将蛋白质分解为胨，而且一部分被分解为酪氨酸、苯丙氨酸等氨基酸。
可分解蛋白质中苯丙氨酸或酪氨酸与其他氨基酸形成的肽键，产物为蛋白胨及少量的多肽和氨基酸，该酶的最适pH为2左右。
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张云波等 (2000)
以黄海杆菌 YS9412 - 130的突变株 YS9412 - 130
- SW - 140原生质体作复合诱变处理获得的
碱性低温蛋白酶 , 20℃测定酶活 3 912 u /mL
杨文博等 (1994)
NTG处理原生质得到产酶 13 977 u /mL
·2·
胡学智 蛋白酶的生产和应用 (下 )
10 000 u /mL。
无损 。
表 1 我国碱性蛋白酶的研究情况
菌种
研究者
说明
地衣芽孢杆菌 2709 地衣芽孢杆菌 2709 短小芽孢杆菌 289 短小芽孢杆菌 209 短小芽孢杆菌 209 地衣芽孢杆菌 2709 - A5 地衣芽孢杆菌 2709 - C12 - 13 地衣芽孢杆菌 553F13 短小芽孢杆菌突变株 SM IP 地衣芽孢杆菌 53 - 38 - 6 (1997) 工程菌 BP071 工程菌 A16
收稿日期 : 2006 - 07 - 07 作者简介 :胡学智 (1929 - ) ,男 ,上海市人 ,教授级高级工程师 。研究方向 :生物技术与发酵工程 。
·1·
《江苏调味副食品 》2007年 第 24卷 第 4期 (总第 106期 )
与制革厂合作 , 从土样中筛选出微白色放线菌 4. 2 碱性蛋白酶
盐 , DEAE - Sepharose Fast Flow 离子交 换层 析 , Sephacryls - 200分子筛和 HPLC等方法提纯到电 泳纯 ,测得其分子量为 47 ×103 ,酶蛋白氨基酸组 成为中极性氨基酸占 17. 29% ,极性碱性氨基酸 占 4. 5% ,极性中性氨基酸占 58. 5% ,其它为非极 性氨基酸 , N 端氨基酸序列为 SKGSAVTTPQ ,序列 同源性比对表明该酶与其它曲霉酸性蛋白酶具有 极高的同源性 [ 9 ] 。上述酶学特性资料为该酶在 饲料上的应用及进一步研究提供了重要数据 。 4. 4 低温蛋白酶和耐高温蛋白酶
1 104 u /mL提高到 22 080 u /mL
无锡轻工业大学 ,唐雪明等 (2002)
产酶 24 480 u /mL
河北大学 ,潘延云等 (2002)
由地衣芽孢杆菌 2709与含碱性蛋白酶基因克隆
载体 PDW2 的工程菌枯草杆菌 BD105进行细
胞融合得到 ,产酶 30 000 u /mL
于丝绸脱胶的蛋白酶生产菌弗氏链霉菌 。 1993 世 。为了开展酸性蛋白酶的生产和应用的研究 ,
年上海市工业微生物研究所还对 1株酱油曲霉进 1960年 ,原上海市轻工业研究所对收集的 40 余
行诱变将酶活提高了 10 倍 。枯草杆菌 1938、栖 株曲霉 ,用麸皮固体培养作成麸曲后 ,分别用酪蛋
土曲霉 3942及放线菌 166 是国内生产中性蛋白 白和明胶为底物 ,在酸性和中性条件下测定蛋白
～12 000 u /mL , 3942由 3 000 u /mL提高到 4 000 经 pH 值为 3的酸液 60℃处理 30 m in后 ,再在 pH
～5 000 u /mL ,固体培养达 15 000 u / g以上 , 166 值为 7 下测定 ,酶活尽失 ,而在酸性条件下测定 ,
的产酶能力由 4 000 u /mL提高到现在的 8 000～ 则活性几乎无损失 ,而黑曲霉经酸处理后则酶活
酶的主要菌种 ,它们的发酵产酶水平在近 30多年 酶活性 ,结果发现 ,所有黄绿色曲霉无论在酸性或
的不断改进下 ,有了较大的提高 。1938的酶活由 中性条件下 ,均可测出蛋白酶的活性 ,而黑曲霉则
当初的 2 000～3 000 u /mL 提高到现在的 10 000 只在酸性条件下才有强烈的活性 。将黄绿色曲霉
166,其蛋白酶用于猪羊皮脱毛 ,具有脱毛较净 ,毛
碱性蛋白酶是国内研究得较为广泛和深入的
孔清晰 ,不损粒面等优点 。该酶首先在上海酒精 一种酶制剂 ,具体研究情况见表 1[ 1 - 6 ] 。
厂投产 ,湖北省微生物研究所等也筛选出中性蛋
1995年以来 ,随着生物技术的发展 ,在利用
白酶生产芽孢杆菌 172,经免疫等交叉凝聚反应 基因工程和蛋白质工程定向改造生产菌种的产酶
The production and applica tion of protea se
HU Xue - zhi
(B ioengineering Research Center, Chinese Academy of Sciences, Shanghai, 200000)
Abstract: In order to have a better understanding of p rotease, some general studies about different p roteases are intro2 duced. They are neutral p rotease, alkaline p rotease, acid p rotease, cryo - p rotease and p rotease with high - temperature to le rance. Key W ords: p rotease; study; general introduction
1969年 ,原上海市工业微生物研究所应新疆 建设兵团要求研制酸性蛋白酶以供毛皮软化之 用 。通过利用 120多株黑曲霉和柠檬酸生产突变 株 ,用 5种培养基进行摇瓶培养筛选 ,并用麸皮添 加铵盐为氮源进行固体培养 ,结果在固体培养下 , 有 30%的黑曲霉酸性蛋白酶活力可达 7 000～14 000 u / g,在液体深层培养时 ,黑曲霉 3350、3867、 宇佐曲霉 B1和玉桂色曲霉 No. 81等均是酸性蛋 白酶生产潜力较大的菌种 。在对黑曲霉 3350 培 养条件进行详细研究后 , 1971年在上海酒精厂投 产 ,发酵液中的酶可用盐析法提取 ,也可用单宁聚 乙二醇提取 ,结合乙醇沉淀法可得到酶活性达 700 000 u / g、收率达 65%以上的制品 ,产品试用 于毛皮 、制革 、啤酒澄清及羊毛染色和医药等方 面 ,均取得了良好的成效 。 1975 年 ,新疆沙漠土 壤研究所与科学院微生物研究所合作 ,对宇佐曲 霉 B1进行人工诱变 ,得突变株 537,由于产酶活 性较高 ,培养基也较简单 , 3350的液体培养被 537 所取代 。1992年 ,浙江省农科院微生物研究所钱 玉英等以黑曲霉 Van Tieghem Cpu 4为母株 ,采用 Co60γ线辐 照处 理 , 得 突变 株 6042, 酶 活 提 高 4 倍 ,固体培养下产酶达 18 000 u / g,干燥麸曲用为 猪饲料添加剂 ,饲养各生长阶段的猪 ,获得良好效 果 。固体培养酸性蛋白酶中除蛋白酶外还含有半 纤维素酶 、纤维素酶 、淀粉酶 、果胶酶和植酸酶等 与消化有关的酶 ,其含量因菌株及培养方式而异 , 因其成本低廉故可取代一部分进口饲料酶 。
我国目前在开发低温碱性蛋白酶资源方面 , 已取得了一定的进展 。张云波和王跃军等以黄海 杆菌 YS 9412 - 130 为出发菌种 , 经 NTG、EM S、 UV与微波处理 ,得到变异株 130 - SW 1 - 140,碱 性蛋白酶活性提高 16倍 , 20℃测定摇瓶试验酶活 为 2 320 u /mL。进一步将 SW 1 - 140 制备原生 质体后再作为复合诱变处理 ,对大量突变株进行 筛选和淡水驯化 ,最终获得高产株 SW 2 - 104,产 酶达到 3 910 u /mL ,按照设计的中试技术 ,每吨发 酵液可得活力 20 ×104 u / g的粗酶 20 Kg[ 10 - 12 ] 。 通过一系列纯化 ,已制备出纯度大于 99%的试剂 酶 ,经化学修饰法 ,结合酶的紫外吸收光谱变化研 究结果表明 , 9412 - 130 低温碱性蛋白酶的性质 与丝氨酸蛋白酶有着很大的相似性 [ 13 ] 。
黄海杆菌突变株 SW 2 - 104 短小芽孢杆菌 C172 - 415
上海合成洗涤剂厂 (1965)
从进口洗衣粉中分离得到
复旦大学新型发酵厂 (1971)
发酵罐 40 h产酶 5 000 - 6 000 u /mL
沈阳林土所 (1974)
土壤分离 , 10 m3 发酵罐 20 h产酶 6 000 u /mL
胡学智 蛋白酶的生产和应用 (下 ) 文章编号 : 1006 - 8481 ( 2007) 04 - 0001 - 04
蛋白酶的生产和应用 (下)
胡学智
(中国科学院上海生物工程研究中心 ,上海 200000)
摘 要 :为充分了解蛋白酶 ,介绍了我国在中性蛋白酶 、碱性蛋白酶 、酸性蛋白酶 、低温蛋白酶和耐高温蛋白酶 研究概况 。 关键词 :蛋白酶 ;研究 ;概况 中图分类号 : TS201. 2 + 5 文献标识码 : B
用 。何秉旺等用紫外线处理栖土曲霉 3374 得突 变株 3942,使蛋白酶活力提高 28%。李禄先等又 筛选出用于丝绸脱胶的芽孢杆菌蛋白酶生产株 S 114。1964年 ,中科院微生物所 、江苏省食品发酵 研究所合作 ,就北微所筛选的枯草杆菌 1938蛋白 酶的生产条件进行详细研究 。 1965 年完成中试 后于新建的无锡酶制剂厂投产 。 1965 年上海市 工业微生物研究所对栖土曲霉 3942 蛋白酶的液 体和固体培养工艺条件进行了研究 ,发现当采用 固体培养时 ,添加 3% ～5%纯碱 ,碱性 、中性蛋白 酶活性可增加 30% ,采用液体培养时添加洗净剂 LS 0. 1% ,可使通风量下降 50%以上 ,酶活性增加 60%。1967 年 与 温 州 味 精 厂 合 作 完 成 中 试 。 为筛选制革用新菌种 ,轻工业部食品发酵研究所
河南省皮革研究所
土壤分离 , 10 m3 发酵罐 25 h产酶 5 000 u /mL
天津酶制剂厂 (1975)
上海市工业微生物研究所 (1991)
原生质诱变 市工业微生物研究所 ,天津酶制剂 人工诱变 ,产酶 21 000 u /mL