胃蛋白酶(Pepsin)试剂盒使用说明
胃蛋白酶稳定性研究
胃蛋白酶（pepsin ）是脊椎动物胃液中最主要的蛋白酶。
一、性质
1、药用胃蛋白酶为粗酶制剂，外观为淡黄色粉末，有肉类特殊气味及微酸味，易溶于水，吸湿性强，水溶液呈酸性。
难溶于乙醇、氯仿、乙醚等有机溶剂中。
2、胃蛋白酶结晶呈针状或板状，经电泳可分出四个组分。
其组成元素除N、C、H、O、S外还有P、Cl。
分子量为34500，等电点为1.0，最适PH1.8左右。
3、结晶胃蛋白酶溶于70%乙醇和PH4.0的20%乙醇中，但在PH1.8-2.0时则不溶解。
在冷的磺基水杨酸中不沉淀，加热后可产生沉淀。
4、干燥胃蛋白酶较稳定，100℃加热10mim无明显失活。
在水中，于70℃以上或PH6.2以上开始失活，PH8.0以上则呈不可逆性失活。
在酸性溶液中较稳定，但在2mol/L以上的盐酸中也会慢慢失活。
5、胃蛋白酶对多数天然蛋白质底物都能水解，对肽键的专一性相当广，尤其容易水解芳香族氨基酸残基或具有大侧链的疏水性氨基酸残基形成的肽键，对羧基末端或氨基末端的肽键也容易水解。
胃蛋白酶对蛋白质的水解不彻底，其产物有胨、肽和氨基酸。
6、胃蛋白酶的最适温度为37～40℃。
生产上用作催化剂时常选用45℃，我国药典规定在37±0.1℃测定其活力。
二、质量标准 CP2005 活力：10000-15000u/g
按CP2010方法检测，每分钟能催化水解血红蛋白生成1μmol酪氨酸的酶量，为一个蛋白酶的活力单位。
胃蛋白酶原Ι II校准品产品技术要求zhongshengbeikong
胃蛋白酶原Ι/II校准品适用范围：本产品与本公司胃蛋白酶原I测定试剂盒和胃蛋白酶原II测定试剂盒配套使用，用于临床检验实验室胃蛋白酶原I、胃蛋白酶原II项目定量检测的系统校准。
1.1规格2mL×6（6个浓度）1.2主要组成成分本产品由以0.02mol/L，pH7.0的PBS缓冲液为基质，并添加了胃蛋白酶原I、胃蛋白酶原II。
校准品定值范围：胃蛋白酶原I：浓度①：0ng/mL；浓度②：10ng/mL～30ng/mL；浓度③：40ng/mL～100ng/mL；浓度④：110ng/mL～160ng/mL；浓度⑤：170ng/mL～220ng/mL；浓度⑥：230ng/mL～300ng/mL。
（每批定值，详见值单）胃蛋白酶原II：浓度①：0ng/mL；浓度②：2ng/mL～10ng/mL；浓度③：10ng/mL～25ng/mL；浓度④：25ng/mL～40ng/mL；浓度⑤：55ng/mL～75ng/mL；浓度⑥：80ng/mL～150ng/mL。
（每批定值，详见值单）2.1外观本校准品应为无色或浅黄色溶液，无混浊，无未溶解物。
2.2准确度中生试剂（中生校准品定标）和已上市同类试剂（已上市同类试剂校准品定标），分别测定40个在测定范围内不同浓度的样本，计算两组数据的相关系数（r）及测值的偏差，要求r≥0.975；PGΙ样本：在（30.0，250.0］ng/mL范围内，相对偏差应不超过±15%；在［2.5，30.0］ng/mL范围内，绝对偏差应不超过±4.5ng/mL。
PGII样本：在（15.0，100.0］ng/mL范围内，相对偏差应不超过±15%；在［2.0，15.0］ng/mL范围内，绝对偏差应不超过±2.25ng/mL。
2.3重复性重复测定各浓度校准品（除0浓度点）结果的变异系数（CV）应≤5%。
2.4稳定性2.4.1效期稳定性原包装校准品在2℃～8℃条件下贮存，有效期为12个月。
胃蛋白酶原试剂盒说明书
胃蛋白酶原试剂盒说明书一、产品简介胃蛋白酶原试剂盒是一种用于检测胃蛋白酶原水平的试剂盒。
胃蛋白酶原是一种消化酶，在胃中起到分解蛋白质的重要作用。
该试剂盒通过测量样品中胃蛋白酶原的含量，可以帮助医生评估胃黏膜功能和炎症程度，辅助诊断和监测相关疾病。
二、试剂盒组成本试剂盒包含以下组分： 1. 胃蛋白酶原检测试剂：用于检测样品中的胃蛋白酶原。
2. 样品稀释液：用于稀释样品，以确保浓度在检测范围之内。
3. 阳性对照液：含有已知浓度的胃蛋白酶原，用于验证试剂盒的准确性。
4. 阴性对照液：不含胃蛋白酶原，用于验证试剂盒的特异性。
三、使用方法1. 样品准备•收集患者的胃液样品，并将其转移至干净的离心管中。
•如样品浑浊或含有颗粒物，可先进行离心分离。
•如样品量不足，可使用样品稀释液进行适当稀释。
2. 试剂配置•打开胃蛋白酶原检测试剂瓶盖，取出所需量的试剂。
•按照试剂瓶上标示的比例，将试剂与样品混合均匀。
3. 反应孵育•将混合好的样品和试剂放置于恒温水浴中孵育一定时间。
•孵育时间和温度应根据试剂盒说明书中的要求进行设定。
4. 测量结果•在设定的反应时间后，取出孵育好的样品。
•使用本试剂盒所提供的分析仪器或读板器，按照仪器操作说明进行测量。
•记录测量结果，并根据说明书中提供的参考范围判断胃蛋白酶原水平是否正常。
四、注意事项1.本试剂盒仅供专业医务人员使用，请遵循相关操作规范。
2.所有试剂和样品均需避免直接接触皮肤和黏膜，如不慎接触，请立即用大量清水冲洗。
3.试剂盒的保存温度应符合说明书中的要求，避免高温或低温存放。
4.使用过程中，请勿混用不同批次的试剂盒，以免影响检测结果的准确性。
5.未使用完的试剂盒应密封保存，避免受到污染或湿气。
五、质量控制1.每次进行检测时，应同时使用阳性对照液和阴性对照液进行质量控制。
2.根据说明书中提供的质量控制范围，判断检测结果是否符合要求。
3.若阳性对照液和阴性对照液的检测结果超出质量控制范围，则表示本次检测结果可能不准确，需重新进行检测。
胃蛋白酶原Ⅰ 胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅠ PGⅡ)二合一测定试剂盒(荧光免疫层析法)产品技术要求海格德生物
胃蛋白酶原Ⅰ/胃蛋白酶原Ⅱ（PGⅠ/PGⅡ）二合一测定试剂盒（荧光免疫层析法）
1．性能指标
2.1 外观
2.1.1试剂盒外观应整洁，文字符号标识清晰，封装无破损，内容物齐全。
2.1.2检测卡的外观应符合下列要求：外观平整、色泽均匀、边缘无毛刺，不能有色斑或污渍。
2.2物理检测
试纸条宽度均为4.0±0.5mm。
2.3液体移行速度
应不小于10.0mm/min。
2.4 空白限
PGⅠ空白限应不高于2ng/mL；
PGⅡ空白限应不高于2ng/mL。
2.5准确度
在试剂盒线性区间内，检测两个不同浓度的工作校准品，测定值与标示值的相对偏差应不超过±15%。
2.6线性
PGⅠ:在线性范围（2~150）ng/mL内，试剂盒的线性相关系数r≥0.990，在（2~10）ng/mL区间内测定的线性绝对偏差不超过±1ng/mL，在（10~150）ng/mL区间内测定的线性相对偏差应不超过±15%。
PGⅡ:在线性范围（2~80）ng/mL内，试剂盒的线性相关系数r≥0.990，在（2~10）ng/mL区间内测定的线性绝对偏差不超过±1 ng/mL，在（10~80）ng/mL区间内测定的线性相对偏差应不超过±15%。
2.7 重复性
用同一批号试剂盒测定两个不同浓度的内部参考品，要求变异系数CV≤15%。
2.8批间差
使用3个不同批号的试剂盒测定高、低两个浓度的参考品，要求批间变异系数CV≤15%。
人胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA试剂盒使用步骤
人胃蛋白酶原A（PG—A）ELISA试剂盒使用步骤本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人胃蛋白酶原A（PGA）ELISA检测试剂盒检测原理试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被人胃蛋白酶原A（PGA）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。
用底物TMB显色，TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。
颜色的深浅和样品中的人胃蛋白酶原A（PGA）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保管方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避开任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞快速小心地分别。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保管：假如样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于20℃，避开反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品酶标仪（450nm）高精度加样器及枪头：0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保管在28℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶*溶解后再使用。
试验中不用的板条应立刻放回自封袋中，密封（低温干燥）保管。
预处理后的样本无需稀释，直接取10μL加样即可。
严格依照说明书中标明的时间、加液量及次序进行温育操作。
全部液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒构成名称 96孔配置 48孔配置备注微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条无标准品 0.3mL 0.3mL 无样本稀释液 6mL 3mL 无检测抗体HRP 10mL 5mL 无20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释底物A 6mL 3mL 无底物B 6mL 3mL 无停止液 6mL 3mL 无封板膜 2张 2张无说明书 1份 1份无自封袋 1个 1个无注：标准品浓度依次为：160、80、40、20、10、0ng/mL.试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
Perfemiker9001-75-6胃蛋白酶Pepsin，产品说明书
Perfemiker9001-75-6胃蛋白酶Pepsin，产品说明书英文名称：Pepsin A英文别名：pepsin;IMMOBILIZED PEPSIN;e.c.3.4.1;elixerlactateofpepsin;lactat edpepsin;lactatedpepsinelixir;pepsinfortior;PEPSIN 1:10000 NF PO WDER;Pepsin from Porcine Stomach;PEPSIN 1:10000 NF, BP, US P;Pepsin 1:10000, from Porcine Stomach Mucosa;Pepsin 1:10,000; pepsin。
;1：3000;BR,1：10000;Pepsase;Pepsin, for biocheMistry, powder;Pepsin, powder, for biochemistry;PotassiuM ethyl xanthoge nate;Pepsini pulvis;Pepsin A;Pepsin（porcine stomach mucose）CAS号：9001-75-6详细描述创赛优选商城提供的[Sigma-Aldrich]Pepsin为创赛科技出品的其它生化试剂,产品稳定,定制速度快,极大地方便了广大科研客户的使用需求。
产品包装为1KG，安全运输。
属性：生物来源：Porcine gastric mucosa形式：powderspecific activity：≥250 units/mg solid分子量：35 kDaapplication(s)：diagnostic assay manufacturing运输：wet ice储存温度：2-8°C应用：来自Sigma的该酶已用于模拟煮熟的鳕鱼的体外胃消化。
来自Sigm a的该酶已用于模拟可可块和补充膳食纤维的体外胃消化。
胃蛋白酶活力测定
胃蛋白酶拼音名：Weidanbaimei英文名：Pepsin书页号：2005年版二部－389本品系自猪、羊或牛的胃黏膜中提取制得的胃蛋白酶。
每1g中含蛋白酶活力不得少于3800 单位。
【性状】本品为白色至淡黄色的粉末；无霉败臭；有引湿性；水溶液显酸性反应。
【鉴别】取本品的水溶液，加鞣酸、没食子酸或多数重金属盐的溶液，即生成沉淀。
【检查】干燥失重取本品，在100 ℃干燥4 小时，减失重量不得过5.0 ％（附录ⅧL）。
【效价测定】对照品溶液的制备精密称取酪氨酸对照品适量，加盐酸溶液〔取1mol/L 盐酸溶液65ml，加水至1000ml 〕制成每1ml 中含0.5mg 的溶液。
供试品溶液的制备取本品适量，精密称定，用上述盐酸溶液制成每1ml 中约含0.2 ～0.4单位的溶液。
测定法取试管6 支，其中3 支各精密加入对照品溶液1ml ，另3 支各精密加入供试品溶液1ml ，置37℃±0.5℃水浴中，保温5 分钟，精密加入预热至37℃±0.5℃的血红蛋白试液5ml ，摇匀，并准确计时，在37℃±0.5℃水浴中反应10分钟。
立即精密加入5%三氯醋酸溶液5ml ，摇匀，滤过，取续滤液备用。
另取试管2 支，各精密加入血红蛋白试液5ml ，置37℃±0.5℃水浴中保温10分钟，再精密加入5％三氯醋酸溶液5ml ，其中1支加供试品溶液1ml ，另1 支加上述盐酸溶液1ml ，摇匀，滤过，取续滤液，分别作为供试品和对照品的空白对照，照紫外-可见分光光度法（附录ⅣA），在275nm 的波长处测定吸光度，算出平均值ＡS和Ａ，按下式计算。
在上述条件下，每分钟能催化水解血红蛋白生成1μmol 酪氨酸的酶量，为一个蛋白酶活力单位。
【类别】助消化药。
【贮藏】密封，在干燥处保存。
【制剂】(1)胃蛋白酶片(2)胃蛋白酶颗粒(3)含糖胃蛋白酶。
BCL-2原位杂交检测试剂盒说明书
BCL-2ISH Detection KitBCL-2原位杂交检测试剂盒使用说明书产品编号：MK1050保存：置４℃。
工作量：100张切片。
有效期：一年。
BCL-2是主要的抗凋亡基因。
本试剂盒采用针对人、大鼠、小鼠的BCL-2特异性的寡核苷酸探针，经地高辛标记。
由于采用多相寡核苷酸探针和高敏感标记技术，并配合使用敏感性加强型的原位检测方法，具有敏感性特别高，背景清晰，结果准确可靠的优点。
可以检测出常规福尔马林固定，石蜡包埋标本的BCL-2mRNA序列。
针对大鼠、小鼠BCL-2靶基因的mRNA序列为：（1）5’——GATGA AGTAC ATCCA TTATA AGCTG TCACA——3’；（2）5’——GCGCT CAGCC CTGTG CCACC TGTGG TCCAC——3’；（3）5’——GGGAG ATGTC ACCCC TGGTG GACAA CATCG——3’；大鼠、小鼠和人的序列仅3bp/90bp不同。
兔和人序列基本相同。
适用种属：人、大鼠、兔、小鼠组织。
试剂盒中内容1.胃蛋白酶（×10;Pepsin）2ml；2.预杂交液2ml；3.B cl-2寡核苷酸探针杂交液2ml；4.封闭液5ml;5.生物素化鼠抗地高辛5ml;6.SABC-POD5ml；7.生物素化过氧化物酶5ml。
`用户自备试剂：原位杂交专用盖玻片（博士德有售）；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油缓冲液（3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC，原位杂交用PBS）一．培养细胞和冰冻切片准备工作：固定液：4%多聚甲醛/0.1M PBS（PH7.2-7.6）；1%多聚甲醛/0.1M PBS（PH7.2-7.6）3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸（C6H8O7·H2O）3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加氯化钠17.6g，柠檬酸三钠（C6H5O7Na3·2H2O，分子量294）8.8g。
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胃蛋白酶（Pepsin）试剂盒使用说明
分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC2320
规格：50/24S
产品内容：
试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃避光保存。
临用前加入25mL试剂二充分溶解。
试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前加入25mL蒸馏水充分溶解。
试剂五：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前加入30mL蒸馏水充分溶解。
试剂六：液体×1瓶，4℃保存。
标准品：液体×1支，0.5μmol/mL酪氨酸标准溶液浓度4℃保存。
产品说明：
胃蛋白酶由胃粘膜主细胞分泌，分解食物中蛋白质成小肽段。
一般用于神经性低酸症的鉴别，慢性胃炎、慢性胃扩张、慢性十二指肠炎等症状时也会引起胃蛋白酶分泌的减少。
胃蛋白酶可催化血红蛋白水解，水解产物与福林试剂反应后显蓝色；一定范围内，其颜色的深浅与胃蛋白酶活性呈正比。
自备仪器和用品：
研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
组织样品：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL试剂一）冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清，即粗酶液。
二、测定步骤：
1.分光光度计预热30min，调节波长到580nm，蒸馏水调零。
2.试剂三和试剂四置于37℃水浴预热30min。
3.标准管：取EP管，加入100μL标准品，200μL试剂二，600μL试剂五，100
μL试剂六，混匀后室温静置20min，于580nm测光吸收，记为A标准管。
4.空白管：取EP管，加入100μL蒸馏水，200μL试剂二，600μL试剂五，100
μL试剂六，混匀后室温静置20min，于580nm测光吸收，记为A空白管。
5.对照管：取EP管，加入500μL试剂三，置于37℃水浴保温10min；加入500
μL试剂四，盖紧后摇匀1min；加入100μL粗酶液，混匀后8000g4℃离心10分钟；
取上清液100μL，加入新EP管，再加入200μL试剂二，600μL试剂五，100μL试剂六，混匀后室温静置20min，于580nm测光吸收，记为A对照管。
6.测定管：取EP管，加入100μL粗酶液，500μL试剂三，置于37℃水浴保温
10min；加入500μL试剂四，盖紧后摇匀1min；8000g4℃离心10分钟；取上清液100μL，加入新EP管，再加入200μL试剂二，600μL试剂五，100μL试剂六，混匀后室温静置20min，于580nm测光吸收，记为A测定管。
注意：空白管和标准管只需要测定一次。
三、计算公式：
1)按照蛋白浓度计算
活性单位定义：37℃每毫克蛋白每分钟催化血红蛋白水解生成1nmol酪氨酸为1个酶活单位。
胃蛋白酶活性（nmol/min/mg prot）=C标准品×（A测定管－A对照管）÷（A标准管
－A空白管）×稀释倍数÷（Cpr×V1）÷T=5500×（A测定管－A对照管）÷（A标准管－A 空白管）÷Cpr
C标准品：标准品浓度，0.5μmol/mL酪氨酸；稀释倍数：（100+500+500）÷100=11；Cpr：粗酶液蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定；V1：加入反应体系中粗酶液体积（mL），100μL=0.1mL；T：催化反应时间（min），10min。
2)按照样本质量计算
活性单位定义：37℃每克组织每分钟催化血红蛋白水解生成1nmol酪氨酸为1个酶活单位。
胃蛋白酶活性（nmol/min/g）=C标准品×（A测定管－A对照管）÷（A标准管－A空白管）×稀释倍数÷（W×V1÷V2）÷T=5500×（A测定管－A对照管）÷（A标准管－A空白管）÷W
C标准品：标准品浓度，0.5μmol/mL酪氨酸；稀释倍数：（100+500+500）÷100=11；W：组织质量（g）；V1：加入反应体系中粗酶液体积（mL），100μL=0.1mL；V2：粗酶液总体积（mL），1mL；T：催化反应时间（min），10min。
注意事项：
试剂三、试剂四、试剂五临用前配制，配制好用不完的试剂4℃可保存一周。