实验三 伪狂犬病的诊断
猪伪狂犬病的临床诊断鉴别要点
损伤 的 皮 肤 、黏 膜 等途 径 感 染 造 成 水 肿 ，多 数 可 见 肺 水 肿 或 小 叶 性 肺 水 平 传 播 ，又 可 由 感 染 的 母 猪 经 胎 炎 ，脑膜 表 面 充血 或 出血 ，脑水 肿 ，
育 肥 猪 多 呈 隐 性 感 染 ，仔 猪 特 别 是 盘 传递 给胎 儿造成 垂直 传播 。
新 生 仔 猪 及 哺 乳 仔 猪 常 突 然 发 病 ，体 温 上 升达 ４ ℃ ～ ４ ℃ ，食 欲 １ ２ 废 绝 ，昏睡 ，倦 怠 无 力 ，全 身发 抖 ，
４ 个 国家都有 本病 发生 的报道。 ０多 我 国 自 １４ ９７年 首次 报 道 以 来 ， 已有
２ ０多 个 省 、市 流 行过 Ｐ Ｒ，特 别 是 Ｐ
伪狂 犬病 （Ｒ）是 由伪狂犬病 等 繁 殖 障 碍 现 象 发 生 。病 猪 、隐 性 胀 、 另一 侧 萎 缩 ，致 使 种 用性 能 降 Ｐ
毒 （Ｒ Ｐ Ｖ）又 名 猪 疱 疹 病 毒 Ｉ 引 型 起 的 多 种 家 畜 的 急 性 传 染 病 。除 猪
以 外 的其 它 动 物 感 染 发 病 后 ，通 常
诊断 鉴别要 点报 告如 下 。
一
嗽 ，呼 吸 困 难 等 ，也 有 部 分 猪 出 现 的 感 染 抗 体 出现 较 晚 而 检测 不 到 阳
、
流 行 特 点
神 经 症 状 、 拉 稀 和 呕 吐 等 。发 病 率 和死 亡率 明显 低于新 生仔 猪 。
性 ，或 因 不 能 识 别疫 苗 抗 体 ，而 不 能 作 出明确诊 断 ，除 鉴别 Ｅ ＩＡ 外 ， ＬＳ
木 乃 伊 胎 和 病 弱仔 猪 ，其 中 以 产 死
作 为 检 测 抗 体 的 常规 血 清学 诊 断 方 法 越 来 越 不 实 用 。临 床 上 应 用 较 多 的 实 用 方 法 是病 毒 分 离 鉴 定 、 兔体
猪伪狂犬病的诊断
Ｅ ＩＡ 分 别监测其 抗 体 ，对 发生 繁殖 障碍病 的 ＬＳ
了解 是否 有上述 病原 混合 感染 无菌采 取新 鲜死 胎和病 死 群 体进 行定 性诊 断 ，
猪的 中脑 、脑桥 和延脑 以及 扁桃 体 １ ｇ ’ 磨 ，加 是 非常 必要 的。 ０ ，研
灭菌 生理 盐水 作 ｌ ｌ 释 ，加青 霉 素 ，链霉 素 ： Ｏ稀
五、预 防
３ ．对从 外 地购 入 的 牛隔离 饲养 ， 同时给 其皮 下注 射虫克 星注射 液进行 预 防性 治疗 。 ４ ．畜舍 进 行定 期清 扫 ，所 养种 牛每 天 刷 拭体 ５ 严禁 饲 养人 员及外 来人 员在 牛舍 大小便 。 ．
六、体会
天 ，患部痂皮 脱落 ，第七 天患部 有新 毛长 出 ，第十 毛，保持 畜舍清 洁干 燥
龄 而异 育 肥 猪多呈 隐性感 染 。仔 猪 感染 Ｐ Ｖ 则 水样 运动，多在 ２ ３天 内死亡 ，死 亡率达 １０ Ｒ － ０％。
表现 明显 的ｌ 症状 ，日龄越 小 ，死 亡率越 高 。母 至 ３月 ２ 临床 １日共发 生 ３ 窝 ， １ 初产和 经产 母猪 均有发 猪感 染 Ｐ Ｖ 表 现不孕 、返情 率 增高 妊 娠母 猪感 生 ， 生繁 殖障碍 的母 猪一 般不表 现 明显 的ｌ 症 Ｒ 发 临床 染 Ｐ Ｖ 则 发 生流产 、产 死 胎 、木乃伊胎 和 弱仔 以 状 。 Ｒ 及新 生仔猪 发病 死 亡 ［￣。 １． ４ ｚ１ １９ ９８年 ｌ 一 ２ ０ ２月 ０ ０年 ９月，我们 应用 乳胶
１ 发病情况与临床表现 ． 脏有 时可见 粟粒 状大小 或更 细 小的黄 白色坏 死灶 。 某猪场饲 养基 础母猪 ２ ０ ， 出栏 肥猪 ４０ ７头 年 ００ ３ 实验 室 诊 断 ． 多 头， 是一 个 自繁 自养 的集 约化猪场 。疫 情发 生前 ３１细 菌分离 无 菌采 取新生病 仔猪 、弱仔猪 ．
伪狂犬病ppt课件
。
02
新型疫苗
随着基因工程和免疫学技术的发展，新型疫苗如基因缺失疫苗、亚单位
疫苗和核酸疫苗等正在研发中，有望提供更高效、安全的免疫保护。
03
疫苗研发方向
针对病毒变异株、不同宿主和新型佐剂等方面的研究，将为疫苗研发提
供新的思路和方向。
01
伪狂犬病对养猪业 的影响
伪狂犬病对猪的生产性能的影响
生长缓慢
加强免疫效果监测， 及时补种和加强免疫 ，确保猪群免疫水平 达标。
确保疫苗质量可靠， 采用正确的接种方法 和剂量。
加强生物安全措施
建立健全的生物安全制度，强化 猪场内外环境的消毒和清洁。
实施严格的隔离措施，防止患病 动物和疑似病例进入猪场。
规范人员、车辆、物品的流动和 消毒，减少病原体的传播风险。
探讨伪狂犬病毒与免疫细胞之间的相 互作用，了解病毒如何影响免疫细胞 的活性和功能，为免疫治疗提供新的 思路。
开发新型的伪狂犬病疫苗和防治药物
基于对伪狂犬病毒致病机制和免疫逃避机制的深入了解，开发新型的疫苗和防治 药物，以提高防治效果和降低病毒的传播风险。
开展临床试验和大规模应用研究，评估新型疫苗和防治药物的疗效和安全性，为 伪狂犬病的防控提供有力支持。
伪狂犬病病毒感染后治愈率较低，目 前尚无特效治疗药物，主要以预防为 主。
01
伪狂犬病的病原学
伪狂犬病毒的生物学特性
形态与结构
宿主范围
伪狂犬病毒是一种有囊膜的病毒，表 面有多个糖蛋白刺突，形态呈现圆形 或椭圆形。
伪狂犬病毒可感染多种动物，包括猪 、牛、羊、犬等，引发不同的病症。
基因组
伪狂犬病毒的基因组为线性双链DNA ，长度约为150kb，包含多个开放阅 读框，用于编码病毒复制和感染所需 的蛋白。
犬伪狂犬病的临床与实验室诊断
2017年第07期经济动物犬伪狂犬病也称犬奥耶斯基氏病。
本病是由疱疹病毒科疱疹病毒属的伪狂犬病毒引起的一种急性、热性传染病,除感染犬外也感染其他哺乳动物,如猪、牛、羊等。
临床上主要表现脑脊髓炎和皮肤奇痒。
1流行病学在自然条件下,本病除感染犬外,也能感染牛、羊、猪及鼠类。
鼠类是主要的贮存宿主。
病犬、病畜及带毒动物是传染源。
其中主要是猪和鼠,鼠类动物多呈不显性感染而带毒。
犬和猪吃了病死鼠以后而感染发病。
病猪通过鼻汁、眼分泌物、乳汁、阴道分泌物及尿排出病毒。
因此猪常常是犬的传染源。
病毒通过多种途径感染犬而使其发病。
病毒侵入黏膜或皮下后,由神经途径达到神经中枢,病毒在神经节细胞和神经胶质细胞中繁殖,从而引起神经症状。
2临床症状本病的潜伏期1~8d,长的21d。
犬常因吃了带毒的鼠或死于本病的猪的肉及内脏而感染。
初期精神不振、废食,卷缩而坐。
而后出现兴奋、跳跃等神经症状,疯狂咬痒部。
以后出现麻痹、吞咽困难、流涎、反应迟顿、呼吸困难,病后1~2d死亡。
经外伤感染的犬,最初舐咬皮肤伤处,搔抓和嘶咬伤处,使创面扩大、加深、周围组织肿胀,继发感染溃烂而死亡。
3病理学诊断剖检病死犬,可见皮肤上有损伤,流出血液和组织液,所有脏器充血、出血。
有明显神经症状的病例。
中枢神经系统呈弥漫性、非化脓性脑膜炎和神经节炎。
有明显的血管套及弥漫性局部胶质细胞反应,并有广泛的神经节细胞及胶质细胞坏死。
一般检查时,无脑炎的病例占15%~20%。
4病原学诊断取可疑病犬脑组织1份,加9份肉汤培养基或生理盐水制成悬液,并在1m L中加青霉素、链霉素500~1000I U,放于4℃冰箱12~24h,经1500转/m in离心后取上清液,备用。
养。
取离心的上清液接种于地鼠的肾细胞(维持液量20:1),置于37℃温箱中进行培养,一般在接种后24h细胞出现聚融和萎缩,见到坏死病变。
也可取培养物用电子显微镜观察病毒形态加以确诊。
(2)动物接种。
取病犬脑组织加生理盐水研碎后制成悬液,给小鼠脑内或鼻内接种会出现发痒症状,可持续12h。
猪伪狂犬病的诊断及防治措施
段时 间 ，进 行 血清 检测 ，并 做好 免疫 工作 。
提 高饲 养 管理 水 平 ，严 格搞 好 环 境 卫 生 和消 毒
工作 ，杜绝 病 菌传 人 猪 场 ，同时 加 强灭 鼠工作 。 因为
老 鼠是重要 的传染 源
外 来 病毒 人侵 。
做好 抗 体水 平 监
： ，
对抗 体 水 平低 的猪 只
某 猪 场 饲 养 母 猪 ２０多头 ，２００９～２０１０年 分 别 从 外 地 购 进种 公 、母 猪 ３批 ，２０１０年 ７月发 现 多 窝 哺乳 仔 猪 出现 震 颤 ，不 能 吮 乳 ，继 而 卧 地 不 起 ，四肢 作 游 泳 状 ，２～３天 内死 亡 ，１５日龄 内 的 仔 猪 全 部 发 病 ，随 后全 部死 亡 ，死 亡率 达 １００％。 １５日龄 以上 的仔 猪也 发病 ，死 亡 率 为 ６０％左 右 ，有 ４头母 猪 流 产 ，占分 娩 数 的 ２２％ ，死 胎 、木乃 伊 胎 、弱仔 明 显增 长 多 ，当 时 曾 用 多种抗 生 素治 疗 均无 效果 ，经 济损 失严 重 。
兽 医 临 床
猪 伪 狂 犬 病 的 诊 断 及 防 治 措 施
张 娟 玉 （江 苏省 滨海 县 陈涛 乡多种 经 营服务 中心 ２２４５６２）
猪 伪 狂犬 病 是 严 重 危 害养 猪 业 健 康 发 展 的 主要 疫 病之 一 。随着 养猪 业 的快 速发展 和 流通 频 繁 ，本病 已成为 生猪 常 见 的传染 病 。近年 来 ，我 乡先后 有 ３个 猪 场感 染 猪 伪 狂犬 病 ，现 将 有关 该病 的 流行 发 病 及 防 治情 况论 述 如下 。 １发 病情况
怀孕 母 猪 流产 、木 乃伊 胎 、死 胎 、产弱 仔 。母 猪 流 产前 后 ，大 多无 明显 的 临 床症 状 ，有 的仅 有 一 过 性 发 热 ，且 无 论是 头 胎母 猪 还是 经 产母 猪都 可 能发 病 。 ３病 理变化
猪伪狂犬病的诊断和治疗
１猪 伪狂 犬病 的临床 症状
出血 。脾脏不 肿 大 ， 呈 玫瑰 红色 ； 部分病 例脾 脏 的
背 面 可见 鲜 红色 或深 红 色 ． 大 小 如 米粒 的露珠 样 出血 点 ：肾脏 表 面有 大 小 不 等 的针 尖状 出血 点 。 胃部病 变主要 是 胃底充 血 、 出血 、 斑 点 状或条 状 穿
为普遍 ， 损 失也最 严重 。在 猪场 ． 伪狂 犬病 毒 主要
表 现不 育 、 睾丸 肿胀 。 萎缩 ， 丧失 种 用 能力 。成 年
猪仅 表现增 重减 慢等 轻微 温和症 状 。
２剖 检及 病理 分析
２ ． １常 见 的 病 理
通 过 已感 染 猪排 毒 而 传 给 健 康 猪 ， 另外 ， 被 伪 狂 犬 病 毒 污 染 的 工作 人 员 和 器具 在 传 播 中 起 着 重
２ ． ２不 同 日龄 猪 的 病 理 过 程
现 在 刚生 下 的仔 猪第 １天 还很 好 ， 从 第 ２天 开始
发病 ， ３ ～ ５天 内是死 亡高 峰期 ， 有 的 整窝死 亡 。死 亡 初生 仔 猪 的 １ ３龄 已观察 到 １ ９ 日龄 。发 病 仔猪
表 现 出高热 、 食欲 废绝 、 明显 的神 经症 状 、 昏睡 、 呜 叫、 流涎 、 呕吐 、 拉稀 、 抑郁 震 颤 ， 继 而 出现 运 动 失
调、 间歇 性 抽 搐 、 昏迷 以 至衰 竭 死 亡 ， 一旦发病 ，
ｌ 一 ２天 内死 亡 。１ ５日龄 以 内仔 猪 死 亡 率 可 高 达 １ ０ ０ ％。剖 检 主要是 肾脏 布 满针 尖样 出血点 ， 有 时
伪狂犬病的诊断与防治
年进 行 鲁 氏菌 病 、结核病 检疫 ，检 ｝ ｎ 的病 牛应予 以隔
离饲养或淘汰处理 。 ２ ． ３ 其他方 面 母 牛在 分娩 时所排 出的胎水 中禽 有类似 垂体 后叶素 的物质 ， 并且 在 胎 水 巾 的 含量 随 着 妊娠 期 的推进 而 增
择 合适 的公牛 品种 ，防』 匕 胎 儿过 大而 母牛个 体较 小而 引 起 的难产 。（ ４ ）分娩前 １ ５ ｄ 开始每 隔５ ｄ 肌 肉注射ＶＡ Ｄ 注射
要 手 段 之 一 ，接 种 疫 苗 ＿ ｕ 丁 以 阻 止 猪 临 床 发 病 、 降 低 强 毒
排 景 ，缩短 强毒排 出时问 。统计 分析 白２ ０ ０ ０ 年 以米我 国发现非 免疫猪 群 的野毒 感染 抗体５ Ｉ 均水 ｌ ｚ 相对较 高 ， 接近３ ０ ％，而免疫猪群 则为 １ ７ ． ５ ２ ％；非免疫猪场平均 ｌ ｊ ｝ １ 性
率达７ ４ ． ３ ４ ％， 显著 高于 免 疫 猪 场 。表 明 ，只 有 加 强管
理、坚持 免疫 刁 能较好的预防控￣ ］ Ｉ Ｐ Ｒ的发 。
ｌ 我国猪伪狂犬病感染的特点
１ ． １ 流行范 围广 自１ ９ ４ ７ 年我 国首 次报道 以米 ， 已有２ ０ 多个 省、市 、 自治 区相继 报道过 本病 。虽然 各地 的发 病 情况 有所不 同，但Ｐ Ｒ 在 全国各 地猪群 巾仍广 泛存在 ，表
法。国 内、外均 已建立 了多种榆测执 体的办法 ，应用最
守操 作规程 ，避 免造成人 为 污染 ，导致 阴道 炎 、子 宫疾 病 的 发 生 。（ ３ ）配 种 时 防ｌ ｝ ： 初 配 年龄 过 小 ，一 般情 况
下 ，２ 周 岁配 种 比较 合 适 。 另 外 ，要 根 据 母 牛 个 体 情 况 选
牛伪狂犬病的诊断与防疫措施
基金项目：新疆维吾尔自治区少数民族科技骨干特殊培养计划（ＸＪ２０２２０８１）；肉牛养殖项目（Ｈ００１）牛伪狂犬病的诊断与防疫措施吾买尔江·牙合甫１，阿丽米热·买买提１，艾海提．买买提２１．新疆农业大学动物医学学院新疆草食动物新药研究与创制重点实验室，新疆乌鲁木齐８３００５２２．哈密市伊州区陶家宫镇人民政府农业（畜牧业）发展服务中心，新疆哈密８３９０００摘 要 伪狂犬病是由伪狂犬病毒（ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓｖｉｒｕｓ，ＰＲＶ）引起的家畜及野生动物的急性传染病，患病牛具有发热、奇痒、脑脊髓炎等典型临床症状。
该病致死率高，传染性强，可对养殖业造成巨大损失。
对伪狂犬病的病原学、临床症状、诊断和预防要点等进行综述，以期为兽医工作人员及养殖户提供参考。
关键词 牛；伪狂犬病；诊断；预防ｄｏｉ：１０．１９５６７／ｊ．ｃｎｋｉ．１００８－０４１４．２０２３．０５．０１９ 引言伪狂犬病病毒（ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓｖｉｒｕｓ，ＰＲＶ）又叫“奥耶斯基氏病”（ａｕｊｅｓｋｙ’ｓｄｉｓｅａｓｅ，ＡＤ），是由猪疱疹病毒Ⅰ型引起的伪狂犬病病毒。
该病发现于１８１３年，多数家畜动物出现瘙痒、狂躁后死亡现象，１９１２年该病被设立为独立的一个疾病。
猪一直被认为是唯一的自然宿主和宿主，并且ＰＲＶ病猪或ＰＲＶ携带猪是ＰＲＶ的主要传染源，它能引起家畜、野生动物的急性致死性传染病［１］。
国内外陆续报道有羊、狼、貂、狐狸感染ＰＲＶ的事件发生，牛养殖场中牛伪狂犬病也时常发生，称“疯痒病”（Ｍａｄｉｔｃｈ），主要表现为狂躁、咽喉麻痹、呼吸困难以及发热、局部痒，脑脊髓炎症状为主要临床特征，感染后病死率高、病程短，致死率高达９０％～１００％。
病原学伪狂犬病病毒属疱疹病甲亚科，核衣壳直径为１０５～１１０ｎｍ，病毒粒子呈球形，线状双股ＤＮＡ病毒，直径在１１０～１５０ｎｍ。
病毒有囊膜，囊表面有呈放射状排列的纤突，长８～１０ｎｍ。
病毒可在猪肾、兔肾、牛睾丸、鸡胚成纤维等多细胞中生长繁殖，并形成核内嗜酸性包涵体。
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实验三伪狂犬病的诊断
一．实验目的：
⒈熟悉伪狂犬病的临诊特点。
⒉熟悉伪狂犬病的诊断方法。
二．实验原理：
利用分离的伪狂犬病毒注射实验兔，病毒在动物机体繁殖一段时间后，会影响实验动物的神经系统，实验兔会出现强烈的痒觉，根据这些症状来判断是否含有伪狂犬病毒。
三．内容及方法
1. 伪狂犬病的临床特点
本病发生于牛、绵羊，犬、猫、鼠及猪。
野生动物亦可发生。
牛、绵羊、犬及猫感染本病后症状很特殊而明显。
主要表现为某部皮肤的强烈痒觉。
常使劲地于墙柱上摩擦，直到皮肤撕碎，仍不断摩擦，病畜像疯狂一样，用力制止亦无效果。
体温可达40℃以上。
常发病后48小时内死亡。
成猪一般为隐性感染，怀孕母猪可发生流产、死胎、木乃伊胎儿。
仔猪，尤于新生仔猪病情极严重，常可发生大批死亡。
主要侵害神经系统，表现为神经症状。
2. 实验室诊断
2.1 病料的采集与处理
分离病毒的材料于发热期最好采取中脑、桥脑及延脑，或采取病总部之水肿液、侵入部神经干及脊髓。
病料用培养液制成1:10组织悬浮液。
2.2 兔体接种试验上述悬液经2000r/min离心1Omin，取上清液1~2ml经腹侧皮下或肌肉接种家兔，通常在36-48h后注射部位出现剧痒，病兔啃咬注射部位皮肤，皮肤脱毛、破皮和出血，继之四肢麻痹，体温下降，卧地不起，最后角弓反张，抽搐死亡。
但这种症状只维持几小时，一般常于夜间死亡，可见死兔口内有接种部位咬下的被毛。
亦可脑内接种小鼠，症状可维持12小时，但其敏感性不如兔。
亦可用细胞培养来分离病毒。
许多种哺乳动物细胞均能繁殖本病毒，但最常用的是猪肾传代细胞。
2.3 兔、猪及牛肾原代细胞培养。
病料接种细胞后最早经18小时出现病变(病毒量大)，一般经48小时，病毒量很低时要到96小时。
其典型的病变是出现巨细
胞圆形。
部分病变细胞胞浆内颗粒增多，细胞肿大变圆形，而不相互融合，渐渐萎缩坏死。
当细胞全面出现病变后渐自瓶壁脱落。
自出现病变到整个细胞层破坏约经24–48小时。
3．特异性免疫荧光诊断：对可疑病畜或接种动物的中枢神经系统如中脑、桥脑、延脑或脊髓可作冰冻切片或压片，用免疫荧光直接法检查，阳性病例可见神经节细胞胞浆及核内均有荧光。
感染的组织细胞亦可用此法来确定感染的病毒。
4．病毒中和试验；用一株标准伪狂犬病细胞适应毒，以每0.1ml病毒溶液中含有100TCID50的稀释病毒与连续作2倍稀释的被检血清0.1ml混合，57 培养1.5小时，再接种于细胞培养物上。
每个血清稀释度至少要接种4个细胞培养物，每个培养物接种0.2ml。
恢复猪的血清常有1:8到1:64的中和能力。
复习题与作业
1．伪狂犬病的临诊表现，猪与其他动物有什么不同?
2．伪狂犬病的诊断方法那种最简便而可靠?。